液相色谱定性实验

大家好!!希望大家能谈谈液相色谱能不能用来定性的问题? 个人觉得是不能单靠液相色谱用来定性的.但是看到不少人用添加法来定性.

我以前做过的液相色谱出峰结果，现在要给里面一些中间产物定性。这些中间产物十分难以合成，无法加样品比对定性。现在想到外面拿样品做定性分析，希望定性结果和我的液相色谱出峰情况对应上。请问：（1）该用何种方法定性？[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]、红外等。（2）外面定性操作条件肯定和我以前的操作条件不一样，请问如何能将定性结果正确地与我之前的液相色谱图结果对应上？

请问高效液相色谱可以定性吗？有什么方法可以定性？

液相色谱如何进行定性和定量分析？

[color=#444444]液相色谱什么情况下，可以根据保留值定性？就是如果进入色谱的混合物比较复杂，不能知道里面有哪些组分的时候，能不能找个标准对照品，进到色谱里，得到一个保留时间，根据这个保留时间对应混合物的色谱图，从而根据保留时间相同就确定是这种物质。[/color]

一 概 述实验室液相色谱仪(以下简称仪器)是由输液系统、进样器、色谱柱、检测器和数据记录处理装置等几部分组成的分析仪器。图1是典型的液相色谱仪组成方框图。它利用样品中各组份在色谱柱中固定相和流动相间分配系数或吸附系数的差异，将各组份分离后进行检测，并根据各组份的保留时间和响应值进行定性、定量分析。

本人不是操作液相的，但是最近要用到液相，所以就学习了下液相。用液相来定性样品中起作用的组分，就是加入一种物质与组分反应，通过比较加入前后谱图的变化来定性，这样色谱条件的选择与优化原则是怎样的？

[color=#444444]高效液相色谱定性分析，保留时间在多少偏差范围内可以确定是同一种物质？[/color]

[color=#444444]Kovats 指数可以用于液相色谱定性分析吗？请给出具体原因，谢谢[/color]

液相色谱质谱联用的话质谱也是能够直接定性么？还是需要做什么准备工作？[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]的话质谱分析也是有数据库么？

[align=center]高效液相色谱组分定性分析方法简述[/align]1、保留时间对照法（1）外标对照法 即在相同的色谱条件下，分别进样品溶液与高纯度的单一组分对照品溶液，这里推荐先进样品溶液，确定系统适应性没有问题了再进对照品溶液，对比两组分的保留时间，一般保留时间相对差异在5%以内，同时绝对误差在0.1min以内的认定为同一个物质，但仍遵守“同一组分保留时间肯定一样，但保留时间一样不一定是同一组分，保留时间不一样的肯定不是同一组分”的原则。（2）标准加入法 即在相同的色谱条件下，将高纯度的对照品加入样品溶液中再上机检测，与相同浓度未加对照品的样品溶液比较，峰高或峰面积应呈等比例增加的，可认定为是同一物质。此法比较适用于组分比较复杂，邻近有干扰组分峰时。上述方法尽量使用柱效高或长柱，峰高尽量小一些，甚至可以小到定量限浓度，一些在高响应下是单个峰的，在低响应时可能是两个峰，所以一定要注意峰形，只要峰形与对照品不一致，就要怀疑不是同一个物质。再严谨一点，还可以改变流动相组成、色谱柱、柱温等，样品中的组分峰应与对照品的组分峰有相同的变化。2、利用检测器选择性进行鉴别（1）DAD检测器波长扫描法 对于配有DAD检测器的还可以对比三维扫描图谱和峰纯度计算进行辅助定性。如果没有配DAD检测器，但有具波长扫描功能的可变波长检测器的，可以使用停泵扫描功能，查看扫描图谱进行鉴别。（2）质谱检测器鉴别法 该方法适用于联用有质谱分析仪的高效液相色谱仪，通过比较碎片峰进行比较鉴别。3、破坏法 将物质进行化学破坏，可以是酸、碱降解，也可以是衍生后再进行检测，看组分峰的变化。当然，此方法不适用于组分复杂的样品。

国内液相[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]不少，不知那位大能人客观分析指点下国内液相色谱仪如何？好让咱们对国内液相市场有客观的了解和认识，也方便液相色谱仪定型选购

液相色谱-质谱同时对242种化合物的定性筛查方法 作者倪春芳，耀 刘，叶海英，张润生，张玉荣，...本发明公开了一种可同时对242种化合物(药物或毒物)进行定性筛查的方法。采用液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式以两对母离子-子离子对和保留时间对目标物进行定性。242种药毒物包括阿片类、苯丙胺类、可卡因...这篇文献我搜不到 现在想向诸位求助

本人想设计一个用于学生的实验，是关于液相色谱的，也就是把几种常见的化合物混在一起，然后用其中一个化合物的溶液作为标准溶液，接着进行定性和定量。 今天我选择丙酮，苯甲醛和苯作为几种常见的化合物来做，可它们的保留时间都是一样，不差分毫，不知道是啥原因，流动相是甲醇和水，比例是70：30，波长选择245nm，柱子是反相的柱子。我怀疑是不是柱子已失效。 哪位高手能给予解答。最好看能否推荐几种常见的可用于实验的化合物，谢谢。

本人想设计一个用于学生的实验，是关于液相色谱的，也就是把几种常见的化合物混在一起，然后用其中一个化合物的溶液作为标准溶液，接着进行定性和定量。 今天我选择丙酮，苯甲醛和苯作为几种常见的化合物来做，可它们的保留时间都是一样，不差分毫，不知道是啥原因，流动相是甲醇和水，比例是70：30，波长选择245nm，柱子是反相的柱子。 哪位高手能给予解答。最好看能否推荐几种常见的可用于实验的化合物，谢谢。

液相色谱怎么定性定量?如图29.9的峰是样品，30.0的峰是标准品物质DEHP, 这样是怎么判定这个29.9的这个峰就是DEHP? http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702181414_01_3017235_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702181414_02_3017235_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702181415_01_3017235_3.jpg

用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液相色谱质谱联用仪[/color][/url]如何定性未知化合物，并得到分子量

[align=center][b]高效液相色谱在橡胶检测中的应用[/b][/align]高效液相色谱是一种高效能的分离手段,在橡胶原材料检测以及硫化橡胶中配合剂检测等方面应用广泛.高效液相色谱是一种常温分离分析方法,对于高温条件下易发生反应的硫化促进剂,防焦剂等的分析具有其独特的优势。一、 橡胶原材料的检测高效液相色谱可以对橡胶防老剂，促进剂进行定性定量的检测。现行的相关标准和方法中涉及诸多高效液相色谱定量检测方法，如防老剂RD有效含量的测定 (包含二聚体、三聚体以及四聚体的相对含量)，防老剂4020纯度的测定，防老剂4010NA纯度的测定，促进剂NS纯度的测定，促进剂CZ纯度的测定等。其中促进剂在高温条件下极易发生分解，因此对其进行检测一般采用可进行常温分析的高效液相色谱法。二、 硫化橡胶中配合剂的检测高效液相色谱法可以通过对硫化橡胶抽提液的分析，定性检测其中的配合剂。本实验室建立了多种相关的检测方法，如防老剂的定性检测，促进剂CZ和促进剂NS的定性检测，防焦剂的定性检测等。现行的橡胶防老剂、促进剂的定量检测方法，一般是采用面积归一的数据处理方法。这种方法在分析时具有明显的局限性，本实验室曾采用外标法处理实验数据，方法的精密度好，准确度高。

液相色谱在定性过程中，可以用特征光谱图对不确定的峰查看匹配程度，来确定是不是目标物质。做了一段时间液相，没有弄明白液相的光谱图应该怎么看，比如紫外检测器，在某一波长下，出现特定的吸收曲线，不知道这个曲线怎样特征地表示了这个物质。另外，光谱图在很多时候看匹配程度，还是无法定性，是不是前处理的过程对光谱图产生影响，是的标样的光谱图和样品光谱图处在差异。光谱定性也不准。希望前辈们能对液相色谱仪的光谱图给些指导，谢过

跟大家分享一下液相色谱讲义，里面包括（1）液相色谱基础知识（2）液相色谱的方法开发-分离机理及色谱柱（3）分离方法，离子抑制及离子对方法介绍（4）梯度方法的开发及梯度分离时的注意事项（5）液相色谱的实用技术，色谱柱的保养、样品前处理（6）液相色谱的定性、定量分析（7）色谱泵和进样器的原理及操作（8）检测器的原理及操作

液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。 一、液相色谱柱的安装： 1、液相色谱柱的结构： a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3／16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7／16英寸外螺纹与1／4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。3／16英寸的内螺纹与1／16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接，中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积，在安装色谱柱时，用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底，然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2．5mm长或其他固定尺寸)。 在两端柱接头内，柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网)，用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。 b、柱填料： 液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。 正相柱：多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3—10 µm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。 反相柱：主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。 常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等，其颗粒粒径在3—10 µm之间。 2[/font

[align=left]高效液相色谱是一种高效能的分离手段,在橡胶原材料检测以及硫化橡胶中配合剂检测等方面应用广泛.高效液相色谱是一种常温分离分析方法,对于高温条件下易发生反应的硫化促进剂,防焦剂等的分析具有其独特的优势。[/align][align=left]一、 橡胶原材料的检测[/align][align=left]高效液相色谱可以对橡胶防老剂，促进剂进行定性定量的检测。现行的相关标准和方法中涉及诸多高效液相色谱定量检测方法，如防老剂RD有效含量的测定 (包含二聚体、三聚体以及四聚体的相对含量)，防老剂4020纯度的测定，防老剂4010NA纯度的测定，促进剂NS纯度的测定，促进剂CZ纯度的测定等。其中促进剂在高温条件下极易发生分解，因此对其进行检测一般采用可进行常温分析的高效液相色谱法。[/align][align=left]二、 硫化橡胶中配合剂的检测[/align][align=left]高效液相色谱法可以通过对硫化橡胶抽提液的分析，定性检测其中的配合剂。本实验室建立了多种相关的检测方法，如防老剂的定性检测，促进剂CZ和促进剂NS的定性检测，防焦剂的定性检测等。[/align][align=left]现行的橡胶防老剂、促进剂的定量检测方法，一般是采用面积归一的数据处理方法。这种方法在分析时具有明显的局限性，本实验室曾采用外标法处理实验数据，方法的精密度好，准确度高。[/align][align=left] [/align][align=left] [/align][align=left] [/align]

关于液相色谱的定性定量的一点小知识与大家分享一下，希望有用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=157180]Waters LC培训教材_定性及定量技术[/url]

请问各位大神，做高效液相色谱实验中需要配制溶液，溶液的配制过程中有哪些操作的关键步骤？

[b][font=宋体]问题描述：对于定量鉴别，分离度要求[/font]1.5[font=宋体]以上，那么对于定性鉴别，液相的分离度要求是多少呢？[/font][font=宋体]解答：[/font][/b][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）液相色谱法进行分析时，通常依据色谱峰的保留时间进行定性，色谱峰的峰面积或峰高进行定量。具体做法是：通过与对照品的保留时间进行比较，找到各色谱峰所对应的组份；保留时间相同，可能时同样的组份；保留时间不同，肯定不是同样的组份。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）定量时要求待测物质与杂质组份达到基线分离，分离度大于或等于[/font]1.5[font=宋体]，否则会影响定量的准确性。[/font][font=宋体]（[/font]3[font=宋体]）采用保留时间进行定性分析时，待测物质需尽可能的与杂质组份进行分离，否则保留时间重合，容易出现“假阳性”的现象，目前尚未见到有技术规范对分离度提出具体要求。待测物质与杂质组份不要求完全达到基线分离，只要保留时间有差别还可以通过标准加入法等方式辅助定性。[/font][font=宋体]（[/font]4[font=宋体]）除了通过保留时间进行定性之外，还可以通过光谱图、质谱图或其他方式进行定性。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进：[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]

我实验室上周末进行了认可复评审的现场评审，前几天发了“四元低压梯度，是否不能在线混合走流动相？”一帖，近两日在整理现场评审的资料时，想起了技术评审老师给我细致讲解的关于液相期间核查的东西，发帖上来分享、讨论。 LC期间核查内容：1，检出限和信噪比。 2，针对不同色谱柱的分离效能（特别注意是日常用到的色谱柱都需要核查下）。新柱启用和后续期间核查，应用相同浓度的标液上机，记录新柱和期间核查时前后半峰宽变化情况（提前确定变化限度，那应多少？）。 3，重复性，进标样6针看偏差。 4，稳定性，连续10针。 5，线性范围。 我查了下液相版面关于期间核查的帖子也不少，如下液相色谱仪期间核查中的主要考查方法?；液相色谱如何进行期间核查？；关于液相色谱的期间核查！；液相色谱期间核查。 还有老师建议参照液相检定规程开展，大家以为如何？

我们用二极管阵列和荧光检测器，做兽药残留检测。发现用二极管阵列用保留时间确认的很多峰，虽然时间比较接近，但从光谱图看却是假峰，用荧光检测器检出的时间相近的峰却不能再进一步确认。总觉得用液相色谱不像[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法的保留时间确认定性更有把握。保留时间偏差也容易大，不稳定。不知道大家对液相定性有什么看法，又是如何剔除假峰的。

[font=&][size=15px][color=#2f3034]背压指的是液体在流动过程中所遇到的阻力或压力。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统中，当流动相通过色谱柱时，由于填料颗粒、柱内径、柱长以及流动相的粘度等因素，会产生一定的阻力，这种阻力就是背压。背压的大小对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统的性能和稳定性有着重要影响。如果背压过高，可能会导致色谱柱的破损、流动相的泄漏、泵的损坏等问题，从而影响实验结果的准确性和可靠性。因此，在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]实验中，需要严格控制背压的大小，以确保实验的顺利进行。为了降低背压，可以采取一些措施，如选择合适的色谱柱、优化流动相的组成和粘度、调整流速等。同时，也需要定期对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统进行维护和保养，以确保其处于良好的工作状态。[/color][/size][/font]