紫外光差分吸收法

紫外光谱吸收带的分类总觉得这一块被忽略了,所以赶紧弄上来,唤起大家的回忆.原来感觉四谱分析（红外、紫外、质谱和核磁）在有机分析中一直占据着主导地位，但现在感觉紫外光谱一直被人们所忽视，一直没想明白怎么回事。前一段时间参加仪器展览的时候，听一老师讲多极质谱，原来可以代替四谱分析来解决问题。突然明白怎么回事，也感觉自己已经赶不上时代了，知识的更新速度远比俺学习的速度快的多。感慨之余，和大家一起来学习分享紫外光谱吸收带的一些问题。紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。俺以前结构化学没有学好，现在很后悔啊！！！1、远紫外（真空紫外）吸收带这一块用的比较少，应该是非常少，一般紫外分光光度计的波长都是从200纳米开始的，因为远紫外（真空紫外）吸收带被空气强烈吸收，顾名思义，也叫真空紫外。主要是烷烃化合物的吸收带，如C-C、C-H基团中，为δ→δ*跃迁，最大吸收波长小于200纳米，范围在10-200纳米。2、尾端吸收带饱和卤代烃、胺类或含杂原子的单键化合物的吸收带，由于这类化合物含有一个或几个孤对电子，因此产生n→δ*跃迁，其范围从远紫外区末端到近紫外区，在200纳米附近。所以，一般在紫外区扫描或全波长扫描的时候，建议从210纳米开始，因为很多物质都存在末端吸收，多扫了没有多大意义，从节省时间和氘灯的角度考虑，建议从210纳米开始扫描。3、R带这个吸收属于弱吸收带，但是溶剂效应比较明显，所以俺在此友情提醒，在选择溶剂的时候一定要注意哦。R带是共轭分子的含杂原子基团的吸收带，如C=O，N=O，N=N等基团，有n→π*跃迁产生，为弱吸收带，摩尔吸光系数K一般小于100L.mol-1.cm-1；随着溶剂极性的增加，R带会发生蓝移，附近如有强吸收带，R带有时会红移，有时可能观察不到。4、K带这个用的比较多，也是有机物定性定量的基础，其最大吸收往往是由K带决定的，一般来说，如果某物质存在共轭双键，从理论上来将都可以用紫外去定性定量的，所以俺建议大家，要特别注意K带呀。共轭体系的π→π*跃迁所产生的吸收带，如共轭烯烃，烯酮等。K带的吸收强度很高，一般K大于10000L.mol-1.cm-1。5、B带理论支持：芳香和杂环化合物π→π*的特征吸收带。苯的B吸收带在230-270纳米之间，并出现包含有多重峰或精细结构的宽吸收带（这也是为什么有馒头峰的原因）。但取代芳香烃的B带精细结构会消失，极性溶剂也会使精细结构消失。6、E带含有苯环的物质一般在B带有和E带吸收，但是俺做过试验，感觉B带的吸收远远K带强烈，就以山梨酸和苯甲酸为例，相同浓度的山梨酸的吸收特别强烈，最大吸收很明显，可是苯甲酸的却象馒头峰，最大吸收特不明显，只有通过求导才能找出最大吸收来，比较郁闷。这也可以从吸光系数看出来，B带的吸光系数为250-300 L.mol-1.cm-1，感觉不是很灵敏。E带吸收系数大，但由于E和B的作用，往往峰形不太好，不利于分析。也属于芳香结构的特征吸收，由处于环状共轭的三个乙烯键的苯型体系中的π→π*跃迁所产生。E带又分为E1和E2带。E带属于强吸收带，K大于10000 L.mol-1.cm-1

紫外光谱吸收带的分类总觉得这一块被忽略了,所以赶紧弄上来,唤起大家的回忆.原来感觉四谱分析（红外、紫外、质谱和核磁）在有机分析中一直占据着主导地位，但现在感觉紫外光谱一直被人们所忽视，一直没想明白怎么回事。 前一段时间参加仪器展览的时候，听一老师讲多极质谱，原来可以代替四谱分析来解决问题。突然明白怎么回事，也感觉自己已经赶不上时代了，知识的更新速度远比俺学习的速度快的多。感慨之余，和大家一起来学习分享紫外光谱吸收带的一些问题。紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。俺以前结构化学没有学好，现在很后悔啊！！！1、远紫外（真空紫外）吸收带 这一块用的比较少，应该是非常少，一般紫外分光光度计的波长都是从200纳米开始的，因为远紫外（真空紫外）吸收带被空气强烈吸收，顾名思义，也叫真空紫外。主要是烷烃化合物的吸收带，如C-C、C-H基团中，为δ→δ*跃迁，最大吸收波长小于200纳米，范围在10-200纳米。2、尾端吸收带 饱和卤代烃、胺类或含杂原子的单键化合物的吸收带，由于这类化合物含有一个或几个孤对电子，因此产生n→δ*跃迁，其范围从远紫外区末端到近紫外区，在200纳米附近。 所以，一般在紫外区扫描或全波长扫描的时候，建议从210纳米开始，因为很多物质都存在末端吸收，多扫了没有多大意义，从节省时间和氘灯的角度考虑，建议从210纳米开始扫描。3、R带 这个吸收属于弱吸收带，但是溶剂效应比较明显，所以俺在此友情提醒，在选择溶剂的时候一定要注意哦。 R带是共轭分子的含杂原子基团的吸收带，如C=O，N=O，N=N等基团，有n→π*跃迁产生，为弱吸收带，摩尔吸光系数K一般小于100L.mol-1.cm-1；随着溶剂极性的增加，R带会发生蓝移，附近如有强吸收带，R带有时会红移，有时可能观察不到。4、K带 这个用的比较多，也是有机物定性定量的基础，其最大吸收往往是由K带决定的，一般来说，如果某物质存在共轭双键，从理论上来将都可以用紫外去定性定量的，所以俺建议大家，要特别注意K带呀。共轭体系的π→π*跃迁所产生的吸收带，如共轭烯烃，烯酮等。K带的吸收强度很高，一般K大于10000L.mol-1.cm-1。5、B带 理论支持：芳香和杂环化合物π→π*的特征吸收带。苯的B吸收带在230-270纳米之间，并出现包含有多重峰或精细结构的宽吸收带（这也是为什么有馒头峰的原因）。但取代芳香烃的B带精细结构会消失，极性溶剂也会使精细结构消失。6、E带 含有苯环的物质一般在B带有和E带吸收，但是俺做过试验，感觉B带的吸收远远K带强烈，就以山梨酸和苯甲酸为例，相同浓度的山梨酸的吸收特别强烈，最大吸收很明显，可是苯甲酸的却象馒头峰，最大吸收特不明显，只有通过求导才能找出最大吸收来，比较郁闷。这也可以从吸光系数看出来，B带的吸光系数为250-300 L.mol-1.cm-1，感觉不是很灵敏。E带吸收系数大，但由于E和B的作用，往往峰形不太好，不利于分析。 也属于芳香结构的特征吸收，由处于环状共轭的三个乙烯键的苯型体系中的π→π*跃迁所产生。E带又分为E1和E2带。E带属于强吸收带，K大于10000 L.mol-1.cm-1 [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=71804]吸收带理论[/url]

总觉得这一块被忽略了,所以赶紧弄上来,唤起大家的回忆.原来感觉四谱分析（红外、紫外、质谱和核磁）在有机分析中一直占据着主导地位，但现在感觉紫外光谱一直被人们所忽视，一直没想明白怎么回事。前一段时间参加仪器展览的时候，听一老师讲多极质谱，原来可以代替四谱分析来解决问题。突然明白怎么回事，也感觉自己已经赶不上时代了，知识的更新速度远比俺学习的速度快的多。感慨之余，和大家一起来学习分享紫外光谱吸收带的一些问题。紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。俺以前结构化学没有学好，现在很后悔啊！！！1、远紫外（真空紫外）吸收带这一块用的比较少，应该是非常少，一般紫外分光光度计的波长都是从200纳米开始的，因为远紫外（真空紫外）吸收带被空气强烈吸收，顾名思义，也叫真空紫外。主要是烷烃化合物的吸收带，如C-C、C-H基团中，为δ→δ*跃迁，最大吸收波长小于200纳米，范围在10-200纳米。2、尾端吸收带饱和卤代烃、胺类或含杂原子的单键化合物的吸收带，由于这类化合物含有一个或几个孤对电子，因此产生n→δ*跃迁，其范围从远紫外区末端到近紫外区，在200纳米附近。所以，一般在紫外区扫描或全波长扫描的时候，建议从210纳米开始，因为很多物质都存在末端吸收，多扫了没有多大意义，从节省时间和氘灯的角度考虑，建议从210纳米开始扫描。3、R带这个吸收属于弱吸收带，但是溶剂效应比较明显，所以俺在此友情提醒，在选择溶剂的时候一定要注意哦。R带是共轭分子的含杂原子基团的吸收带，如C=O，N=O，N=N等基团，有n→π*跃迁产生，为弱吸收带，摩尔吸光系数K一般小于100L.mol-1.cm-1；随着溶剂极性的增加，R带会发生蓝移，附近如有强吸收带，R带有时会红移，有时可能观察不到。4、K带这个用的比较多，也是有机物定性定量的基础，其最大吸收往往是由K带决定的，一般来说，如果某物质存在共轭双键，从理论上来将都可以用紫外去定性定量的，所以俺建议大家，要特别注意K带呀。共轭体系的π→π*跃迁所产生的吸收带，如共轭烯烃，烯酮等。K带的吸收强度很高，一般K大于10000L.mol-1.cm-1。5、B带理论支持：芳香和杂环化合物π→π*的特征吸收带。苯的B吸收带在230-270纳米之间，并出现包含有多重峰或精细结构的宽吸收带（这也是为什么有馒头峰的原因）。但取代芳香烃的B带精细结构会消失，极性溶剂也会使精细结构消失。6、E带含有苯环的物质一般在B带有和E带吸收，但是俺做过试验，感觉B带的吸收远远K带强烈，就以山梨酸和苯甲酸为例，相同浓度的山梨酸的吸收特别强烈，最大吸收很明显，可是苯甲酸的却象馒头峰，最大吸收特不明显，只有通过求导才能找出最大吸收来，比较郁闷。这也可以从吸光系数看出来，B带的吸光系数为250-300 L.mol-1.cm-1，感觉不是很灵敏。E带吸收系数大，但由于E和B的作用，往往峰形不太好，不利于分析。也属于芳香结构的特征吸收，由处于环状共轭的三个乙烯键的苯型体系中的π→π*跃迁所产生。E带又分为E1和E2带。E带属于强吸收带，K大于10000 L.mol-1.cm-1分光一般定量方法分光一般定量方法俺总结的一般定量方法有以下几个（不完整的请大家补充啊，当然有错误有意见大家也可以提出啊，哈哈），绝对法，标准对照法，吸收系数法，标准曲线法，解联立方程法等。1 绝对法以朗伯-比尔定律A=εbc为基础，且某一物质在一定波长下ε是一个常数，比色皿发光程也是已知的。因此，可用紫外-分光光度计在最大吸收波长处，测定样品溶液的吸光度A值，然后 由公式c=A/εb求得该样品溶液的含量或浓度2 标准对照法在相同条件下，在选定的波长处，分别测定标准溶液（浓度为C标）和样品溶液的吸光度值A标和A样然后按下面公式求得样品溶液的浓度或含量C样=（A样/A标）*C标3比吸收系数法不是很常用，就不说说，下面说说大家最常用的方法-标准曲线法4标准曲线法4.1 首先用基准物质配置一定浓度的标准储备溶液，然后再由储备溶液配置一系列标准溶液。俺个人经验：配置的过程中最好买国家标准物质，如果条件所限，那也没有办法；其次的最好能一次到位，别稀释次数太多，稀释次数多带来的误差和不确定度比较大；就是稀释也别超过1：20的稀释比例。4.2 在一定波长，最好是最大吸收波长下，测定每个标准溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，标准溶液对于的浓度为横坐标，绘制标准曲线。俺个人经验：如果有未知最大吸收波长的组分，最好先做个光谱扫描；如果没有条件，可以查相关资料；如果没办法，那请联系俺，如有标准品，可以帮大家做一个。（哈哈，别让我们领导看见，以为我看私活呢，嘿嘿）还有，如果仪器不能绘制标准曲线，自己用EXCEL做也可以，如果仪器做了，自己又用EXCEL做了一个，会发现斜率和截距可能不太一样，因为两种方法涉及的算法不太一样。例如UVPROBE就采用双精度浮点数，给各位说句实话，其实我也不知道双精度浮点数具体什么意思，露怯了！！！4.3最后样品溶液按照标准曲线绘制程序测定的吸光度值，在标准曲线上查出样品溶液对应的含量或浓度。

[color=#444444]在做实验的时候发现本人用分光光度计，测的几种物质最大紫外吸收波长都在200nm，用紫外光谱扫描也都是在200nm出峰，而这几种物质都有不同的吸收波长，请问这是什么问题？[/color]

大家都知道玻璃的比色皿是不能用在紫外波长处的，玻璃对紫外会有吸收，但究竟是玻璃中的什么元素，或者物质吸收了紫外光呢

请教：如题，有机物的紫外光谱在最大特征吸收位置，吸收强度随时间逐渐衰减，可能原因是什么？

紫外光谱怎么判断最大吸收波长？

实验 水样中苯酚含量的紫外光谱定量法一、原理紫外光谱法是用紫外分光光度法测定试样中某一组分的含量，与一般比色分析相同。将待测液的纯品，配成一系列标准溶液，事先绘制紫外吸收曲线，找出λmax , 然后在这波长下测试一系列不同浓度的标准溶液吸光度。以吸光度作纵坐标，浓度作横坐标，绘出工作曲线。将待测未知样品的吸光度对照工作曲线，找出含量。测定水中酚的含量，是水质分析常用方法之一。苯酚加入氢氧化钠溶液后，羟基上的氢全部电离，氧原子与苯环的共轭作用加强，引起吸收峰的红移，吸收强度加大，可提高测定灵敏度。苯酚在碱性介质中能形成苯酚阴离子，其吸收带将从210nm和270nm红移到235nm和287nm，苯酚分子中OH基团含有两对孤对电子，与苯环上π电子形成n→π共轭，当形成酚盐阴离子时，氧原子上孤对电子增加到三对，使n→π共轭作用进一步加强，从而导致吸收带红移，同时吸收强度也有所加强。 [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/07/200607091018_21175_1604910_3.gif[/img]

紫外光谱仪可不可以把单色器放到吸收池后面？全波段紫外光全部照射到样品吸收之后，再分光，检测吸光度和强度？

[color=#444444]关于紫外光谱分析仪器的问题。紫外光谱分析仪器在发出紫外光后，被吸收池吸收，那么检测仪器是检测透过吸收池的紫外光对吧。我想问的是，吸收池中的物质吸收紫外光后发生跃迁，但这种跃迁会马上辐射出能量返回原来状态对吧，那这种辐射会不会对透射光的检测造成影响？如果会它的影响与透射光相比是否有较大影响？感谢大家的帮助。[/color]

[color=#444444]苯酚的紫外光谱，在216和265左右各有一个吸收峰，对吗[/color]

我不太清楚二价锰和三价锰的紫外吸收，可以求到二价锰和三价锰的紫外光谱图吗？

用高效液相色谱-紫外检测器检测某物质。紫外光谱是因为分子电子能级发生跃迁产生的，我的理解是：电子吸收能量，从基态到激发态，吸收了光谱，但激发态不稳定，应该又回到基态，又会发射光谱，这两个过程应该都是很短的，ns至ms级的，而且应该是不断循环的过程（即只要有紫外光照射，改分子就一直处于基态到激发态，再从激发态到基态，如此循环），也就是说该物质及吸收了紫外光，又发射了紫外光，那检测器搜集到的的发射的紫外光能量基本可以认为是不变的？这种理解对吗？

紫外光谱扫描可以确定多糖的吸收波长吗？

有可以查有机分子紫外吸收光谱的手册吗??

利用紫外光谱可以推导有机化合物的分子骨架中是否含有共轭结构体系，如C=C-C=C、C=C-C=O、苯环等。利用紫外光谱鉴定有机化合物远不如利用红外光谱有效，因为很多化合物在紫外没有吸收或只有微弱的吸收，并且紫外光谱一般比较简单，特征性不强。在一些具有大的共轭体系或发色基团的化合物中，紫外光谱可以作为其他鉴定方法的补充。鉴定化合物主要根据光谱图上的一些特征吸收，特别是最大吸收波长[B]λ[/B]max即摩尔吸光系数ε值来进行鉴定。 如果一直化合物在紫外区是透明的，说明化合物分子中不存在共轭体系，不含有醛基、酮基或溴、碘。可能为脂肪族碳氢化合物、胺、腈、醇等不含双键或环状共轭体系的化合物。 如果在210~250nm有强吸收，表示有K吸收带，可能含有两个双键的共轭体系，如共轭二烯或α，β-不饱和酮等。 如果在260~300nm有强吸收（ε=200~1000），则表示有B带吸收，体系中可能有苯环存在。如果苯环上有共轭的生色基团存在时，则ε1000。 如果在250~300nm有弱吸收带（R吸收带），可能含有简单的非共轭并含有n电子的生色团，如羰基等。 如果化合物呈现许多吸收带，甚至延伸至可见光区，可能含有长链共轭体系或多环芳香性生色团。若化合物具有颜色，则分子中含有的共轭生色团或助色团至少有四个（偶氮化合物除外）。 化合物的紫外光谱实际上反映的是分子中发色基团和助色基团的特性，而 不是整个分子的特性，所以，单独从紫外吸收光谱不能完全确定化合物的分子结构，必须与红外光谱、NMR、MS及其他方法相结合，才能得出可靠的结论。但是紫外光谱在推测化合物结构时，也能提供一些重要的信息如发色官能团，结构中的共轭关系，共轭体系中取代基的位置、种类和数目等。

生色团：在紫外光谱分析中，在紫外光区内能产生紫外吸 收的基团。红移：在紫外光谱分析中，由于共轭等效应的影响而使吸 收带的λmax变大的现象。λmax :在紫外光谱中，吸收带比较宽，用λmax表示吸 收带的位置。助色团:在紫外光谱中，本身不吸收紫外光，当其和生色 团相连时，通过P-π共轭效应，影响生色团吸收 带的λmax和摩尔吸光系数。增色:在紫外光谱中，吸收带摩尔吸光系数变大的现象。

我最近对一种物质进行检测，发现用紫外光谱仪和液相色谱的紫外检测器扫描出来的最大吸收波长不一致，相差2～3nm，这样的话哪个数据更准确些呢？而且峰形也有点不同，紫外检测器扫描的是单峰，而紫外光谱仪扫描出来的是有重叠的双峰。

[color=#444444]做中药制剂含量测定的时候，用10%-90%甲醇梯度洗脱，DAD紫外光谱扫描。到90%甲醇的时候，在厚朴酚和和厚朴酚后面出来两个峰，其中一个峰紫外光谱显示在242nm有一个大峰，288nm有一个小峰，另一个在260nm有一个较大的峰，300nm一个小峰。大家觉得会是什么物质呢？有哪些网址能够查物质的紫外光谱吗？谢谢大家。[/color]

本人现在研究紫外吸收法COD分析仪，现在需要一个半反半透镜（或分光平片）把一束200nm~700nm的光分成两份，需要用两个接收器接收，但是却久久找不到包括紫外光范围的半透镜。请问哪位高人指点一下？谢谢啊~~~~~~~~[em0912]

蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。1.280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收，且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大，因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时，将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中，用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照，在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280。蛋白质浓度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1cm光径的标准石英比色皿，盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时，A280约为1.0左右。由此可立即计算出蛋白质的大致浓度。许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值(A1%1cm)有文献数据可查，根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度。下式列出了蛋白质浓度与(A1%1cm)值(即蛋白质溶液浓度为1%，光径为1cm时的光吸收值)的关系。文献值A1%1cm,λ称为百分吸收系数或比吸收系数。蛋白质浓度= (A280´10 )/ A1%1cm,280nm (mg/ml)(Q 1%浓度»10mg/ml)

[color=#444444]请问大家做荧光光谱和紫外吸收光谱重叠时，是单独用BSA的荧光光谱和药物小分子的紫外吸收光谱重叠，还是按1：1把二者混合在一起相互作用后的荧光光谱和紫外吸收光谱重叠，谢谢！[/color]

用紫外光度计时，吸收池大小影响测定吗？大家好！我在用紫外分光光度计测样品是，国标上会注明用1CM（或3CM,5CM)的吸收池测定,而我们买的仪器只是1CM的，这会不会影响测定呢？

[list][*]实验室购买了一台二手的紫外光谱（岛津UV2600），刚刚接触，资料缺失，有很多地方不懂，请各位前辈指教[/list][list=1][*]本实验室以测试薄膜样品为主，厚度为50-100 um；UV2600的吸收度上限为8 Abs，而我们的样品采用直接透射的方法测试，吸收度常常达到10左右，不能出峰，变成水平的强烈噪音信号；请问如何把样品的吸收度降下来？使用积分球有帮助吗？[*]积分球的硫酸钡白板，直接购买硫酸钡，然后用红外的压片机压好，就可以用了吗？、[*]类似这种二手仪器，可以通过机身编号，得到厂家的售后服务吗？（维护和培训）[/list]

[size=4]在做紫外光谱扫描时，有没有发现最大吸收发生偏离的情况？有时候向长波长，有时候向短波长我个人意见如果便宜在1-2纳米的话，属于正常（我也没查过相关资料，不知道有没有相关说明）如果偏离超过这个范围，那说明是有问题了是仪器问题呢？还是操作问题呢？还是溶液溶剂等问题？碰到这种情况，如何分析呢？[/size]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]观察的是构成物质的元素（或曰原子）中的电子在原子轨道中的跃迁；而紫外可见光吸收观察的是构成物质的分子中的电子在分子轨道中的跃迁。两者有所同，有所不同。定量分析的原则同，而测量所需的光能量不同：[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]为X光，能量大，可激发电子从低的原子轨道向高的原子轨道跃迁；而紫外可见吸收为紫外光及可见光，能量小，只能激发电子从分子轨道向最低（或次低）的空的分子轨道跃迁。

UV紫外吸收法测protein蛋白质含量 蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的（NH4）2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。

[color=#444444]请问一下，芳香族化合物紫外光谱的精细结构吸收带是怎么来的？为何有那个精细结构带？并且为何精细结构带的吸收波长比E带的要长？谢谢[/color]