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纯化制备色谱系统

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  • 制备色谱纯化技术服务

    目前,新药研发市场竞争如火如荼,大小药物研发公司都在奋力一搏,但是真正能成功的如凤毛麟角。本公司提供制备色谱分离纯化包括SFC手性、非手性服务,反相制备,杂质制备服务及技术咨询服务可以真正加快你得到你的目标化合物的速度。欢迎大家跟帖

  • 分析色谱与制备色谱到底有啥关系

    分析色谱是制备色谱的基础。当我们在分析色谱上取得了良好的分离效果时,可以将其放大,应用到制备色谱上,由此,我们需要考虑调整上样量,流速,梯度:1.上样量的调整:他与分析色谱柱和制备色谱柱的柱长和柱内径有关:具体关系时;制备柱上样量/分析柱上样量=制备柱长/分析柱长*制备柱内径的平方/分析柱内径的平方;2.流速的调整:制备柱流速/分析柱流速=制备柱体积/分析柱体积=制备柱长/分析柱长*制备柱内径的平方/分析柱内径的平方;3.梯度的调整:制备柱梯度/分析柱梯度=制备柱体积/分析柱体积*制备柱流速/分析柱流速;制备色谱与分析色谱有啥关系?很多初接触色谱领域的朋友对制备色谱这个名词比较陌生。其实,在化学化工医药等广泛采用的层析法以及薄层色谱就是最为典型的制备色谱,换句话说,将分析色谱的进样量增大,同时得出大量的所需物质(馏分)的过程就可以称为制备色谱。分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。而制备色谱系统则是利用制备色谱的思想高效能得到纯化物质的多个分析测试设备联用的总称。制备色谱能当分析色谱用吗?目前,很多客户的要求都倾向于买一台液相能同时解决制备和分析的所有问题,那就相当OK。这样的客户大多是科研经费紧张,好不容易批下来点钱,不想都花在后期纯化和分析上,所以最好二合一。在我看来,分析液相和制备液相是通用的,只是精度的差别问题。比如,分析的液相一般流速在0.1~10mL/min,活塞的一个冲程大概是10μL,而普通的制备液相一般都是10~100mL的流速,因此活塞杆的尺寸也会变大,一个冲程差不多是100μL;流速的精度相对来说就差了很多。流速大了,管路也相应的粗了不少,以降低高流速带来的背景压力;但这样的仪器用于分析的话,柱后的扩散现象相当的厉害,即使在色谱柱上达到基线分离的两个峰,由于柱后扩散的作用,到达检测器的时候,差不多又会合到一起了;另外就是检测器的差异,主要是检测池的大小和狭缝的大小不同带来的灵敏度的不同。制备仪器一般灵敏度是分析的1/20,以保证大量进样后,不会超过量程太多而平头,分不清到底分没分开了。倒是有个折中的办法,就是买分析型的液相,然后接个半制备的色谱柱。半制备就是直径一厘米的柱子,流速5mL以内,因此这个分析液相能达到;进样量大约是分析柱的10~20倍,检测器可能会平头,没关系,换个波长,找个吸收较弱的波长当检测波长就OK了,不是大量制备的话,我想基本可以满足需要了。 小结:分析色谱,制备色谱与工业色谱的主要区别? 1.分析色谱:在乎分析结果,对化验结果的纯度,比例等要求准确,而对收率,浓度等产品参数不在乎,一次进料,而且每次进料少。2.工业色谱:比较在乎产品的浓度和收率,还有纯度,工业化生产是连续进料。3.制备色谱:介于两者之间,一般用于做单柱试验。【来源:实验与分析】

  • 什么是制备色谱,制备色谱的构成如何?

    1.什么是制备色谱?很多初接触色谱领域的朋友对制备色谱这个名词比较陌生。其实,在化学化工医药等广泛采用的层析法以及薄层色谱就是最为典型的制备色谱,换句话说,将分析色谱的进样量增大,同时得出大量的所需物质(馏分)的过程就可以称为制备色谱。分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。而制备色谱系统则是利用制备色谱的思想高效能得到纯化物质的多个分析测试设备联用的总称。2.制备色谱的构成传统的制备色谱一般由一台可以连续输送液体的恒流泵、紫外检测仪与色谱柱构成,其中最重要的部件是价格不一,款式多样的色谱柱,这也是影响最终制备效果的关键性环节。柱子有多种类型,不仅材质不一,填料也有很多学问,下面简要的说说关于柱子的一些情况:  各种规格的玻璃柱子在实验室里头很容易得到,而且价格低廉,但玻璃柱子致命的弱点是它能承受的压力很小,且非常容易破碎。当由于压力太小而导致流动相流速很慢的时候,高位液面或加高压空气(或者氮气)的采用是一个简单的解决办法。在底下加真空,也能在一定程度上解决这个问题。  不锈钢柱子具有良好的耐腐蚀、抗压力性能,但其价格相对很贵。如果,只有很小的分离任务且经费也允许,市面上直径为1cm的小型制备柱就是首选。 有机玻璃柱子也能抗压力耐腐蚀,相对不锈钢柱子而言,它是半透明的,可以看到液体的运行状态,对有色的物质其特点就更为突出。  硅胶、键合固定相(如C18)、离子交换树脂 、聚酰胺、 氧化铝、 凝胶等都可以作为色谱柱的填料。 有不少文献报道,对填料可以进行一下处理提高了分离效果,如,对硅胶进行的硝酸银(或缓冲液)处理。  1 制备色谱到底是什么?  (1)分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。  为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。  然而,当色谱柱上样品负载加大的时候,往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱,要解决容量与柱子效果之间的矛盾,对重现性也要考虑。从经济上来说。制备色谱要争取少用填料,少用溶剂,要尽可能多的得到产品。  (2)样品的前处理:  制备色谱柱子由于处理的样品多,比分析柱子更容易受污染,所以,必要的前处理就显得非常的必要。萃取、过滤、结晶、固相萃取等简单的分离方法,如果用得上,而且还不是很麻烦,就要尽可能多的采用以去掉杂质。  (3)制备色谱柱的材质及其特点  下面介绍一下,制备色谱柱常用的材质及其特点。  各种规格的玻璃柱子在实验室里头很容易得到,而且价格低廉,但玻璃柱子致命的弱点是它能承受的压力很小,且非常容易破碎。当由于压力太小而导致流动相流速很慢的时候,高位液面或加高压空气(或者氮气)的采用是一个简单的解决办法。在底下加真空,也能在一定程度上解决这个问题。  不锈钢柱子具有良好的耐腐蚀、抗压力性能,但其价格相对很贵。如果,只有很小的分离任务且经费也允许,市面上直径为1cm的小型制备柱就是首选。  有机玻璃柱子也能抗压力耐腐蚀,相对不锈钢柱子而言,它是半透明的,可以看到液体的运行状态,对有色的物质其特点就更为突出。  (4)固定相的选择  硅胶、键合固定相(如C18)、离子交换树脂、聚酰胺、 氧化铝、 凝胶等都可以作为色谱柱的填料。 有不少文献报道,对填料可以进行一下处理提高了分离效果,如,对硅胶进行的硝酸银(或缓冲液)处理。  (5)装柱方法的选择 根据固定相颗粒度和柱子的尺寸,采用不同的装柱方法,往往装填越好分离效果越好。装柱效果跟填料的颗粒度关系很大,颗粒度的减少会导致装柱的难度。一般来说,颗粒直径小于20-30um的固定相采用湿法装填。所谓“敲击-装填”技术适用于颗粒直径大于25um的固定相。湿法的目的是迫使相对稀松的 固定相悬浆以高速装入色谱柱子,从而减少空隙的形成。然而,当柱直径大于20mm,所加压力为30-40bar时,高压悬浆装填技术就变得十分复杂。为将小颗粒固定相装入更大得制备型色谱柱,可采用柱长压缩技术。这种方法,先将固定相悬浆(或偶尔是干填充物)装入柱中加压,利用物理方法将其压紧。压紧的方法有两种:径向压缩和轴向压缩。 湿法装柱需要一定的设备,在柱子填完后,应用有柱效的测量,对柱效低的柱子应该重填。  (6)流动相的选择  除了和分析色谱同样的考虑外,在选用流动相时,要考虑色谱分离后面加有旋转蒸发等二次分离操作。一般来说,不宜采用高毒性溶剂,对多元溶剂要尽可能的少用。  如果产品中含有大量溶剂,溶剂的纯度也要考虑在其中。  (7)加样的方法  可以采用以下方法之一进样。-用注射器进样-用旋转阀进样-通过六通阀进样-通过主泵进样-通过辅泵进样-固体上样  (8) 泵的选用  生产制备色谱泵的厂商很多。根据有无脉冲、能承受的最大压力、控制的精度、售后服务等来选择泵。  (9)检测器的选用  一般的分析池的最大允许流速仅为5 mL/min 或者10mL/min。而专门的制备池的最大允许流速可为150mL/min。有时,采用旁路分离管,将少量流体导入分析池进行检测,是一个不错的办法,但其浓度的误差会相对较大。  (10)组分保留时间的估计  用分析柱子在同等色谱条件下(同样的固定相和流动相)测定保留时间后,按照单一组分的线流速(不是体积流速)一定,通过计算可以知道组分的大致保留时间区域。  分析谱图的峰形状,对确定保留时间也有很大的参考价值。  (11)产品的收集  手工馏分收集费时费力,自动馏分收集器有很大的方便。许多实验室和工厂都采用了馏分收集器。  (12)超载、边缘切割、中心切割、放大技术与非线性效用  在制备色谱中,因为没有必要达到分析色谱那样的分离度,可以在一定范围内大大加大进样的浓度和体积。在做分离的时候,也有一些分析色谱的时候,不能用到的技巧。因为篇幅关系,不在这里叙述。  (13)柱转换技术  通过接头或者阀门,实现柱子的简单延长,或者比较方便地实现对其中一个(或几个)组分的精制。  (14)比较新的制备色谱技术  模拟移动床可以连续进样,并可以利用边缘切割效用,而且采用了柱切换技术,能更好的利用溶剂和填料,已经应用于工业化生产。其理论和技术也日益完善。  迎头色谱、超临界流体色谱、逆流色谱环形色谱、气相制备色谱等在科研和工业生产中也得到了应用3.制备色谱的全新方法  高速逆流色谱★( high-speed countercurrent chromatography , HSCCC )是 20 世纪 80 年代发展起来的一种连续高效的液—液分配色谱分离技术, 它不用任何固态的支撑物或载体。 它利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡,当其中一相作为固定相,另一相作为流动相,在连续洗脱的过程中能保留大量固定相。  由于不需要固体支撑体,物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现,因而避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性等,不仅使样品能够全部回收,回收的样品更能反映其本来的特性,特别适合于天然生物活性成分的分离。而且由于被分离物质与液态固定相之间能够充分接触,使得样品的制备量大大提高,是一种理想的制备分离手段。  它相对于传统的固—液柱色谱技术,具有适用范围广、操作灵活、高效、快速、制备量大、费用低等优点。目前 HSCCC 技术正在发展成为一种备受关注的新型分离纯化技术,已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域, 特别在天然产物行业中已被认为是一种有效的新型分离技 术;适合于中小分子类物质的分离纯化。  我国是继美国、日本之后最早开展逆流色谱应用的国家,俄罗斯、法国、英国、瑞士等国也都开展了此项研究。美国 FDA 及世界卫生组织( WHO )都引用此项技术作为抗生素成分的分离检定, 90 年代以来,高速逆流色谱被广泛地应用于天然药物成分的分离制备和分析检定中。

  • 说说制备色谱那些事

    说说制备色谱那些事

    制备色谱 制备色谱是指采用色谱技术纯化物质,分离、收集一种或多种高纯物质。而利用高效液相色谱分离纯化某混合物中一种或几种物质,并把分离所得的各组分逐个收集起来,得到高纯度的样品,称为高效液相制备色谱。制备型液相色谱的上样量较大,通常需要特定的装置和一定的操作条件。 一般来说,制备量和成本是制备色谱最为关心的两个问题。而作为制备核心的填料起着决定性的作用,不同厂家生产的填料具有明显的差异,而且价格不一。所以,在选择色谱柱或填料时,要根据自己的样品选择最合适的色谱柱或填料。 在制备色谱中,分离纯化物质的量取决于其用途,相应的,分离不同的纯物质的量,则需要使用规格不同的色谱柱。一般对应关系如下: 微克级至毫克级的样品,一般用于波谱测试,可使用内径≤ 10mm 的色谱柱即可。 毫克级样品可用于进一步的结构鉴定,化学反应及某些生物活性测试:可使用10 mm-20 mm 内径的色谱柱即可 克数量级的样品可用于进一步的生物活性测试,作为合成、半合成工作的原料以及标准品。可使用20-50mm 内径的色谱柱。 百克及以上,或工业化的生产,即使用制备色谱来生产产品,则需要50mm 以上内径的色谱柱。 制备色谱不同于分析色谱,它更注重于制备量和成本,而非分辨能力。从制备规模可对液相色谱进行简单的划分:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/03/201503261618_539795_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/03/201503261618_539796_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/03/201503261618_539794_1610895_3.jpg

  • 制备色谱之除杂

    在上一篇文章中,我谈到了用Kromasil的色谱柱进行杂质的检测,但是要除去其中的杂质,还是需要应用专业的制备色谱柱进行提纯,或者纯化!利用制备色谱柱可以将药物的纯度提高到99%以上。我在kromasil的微信公众号上看到了用制备柱纯化减肥药奥利司他的应用,感兴趣的朋友可以去看看!该应用用到的制备柱直径为8厘米,大家可以比划一下,加上柱管,应该是一根和小胳膊一样粗的柱子!kromasil可以提供专业的填料!

  • 制备纯化技术服务

    目前,新药研发市场竞争如火如荼,大小药物研发公司都在奋力一搏,但是真正能成功的如凤毛麟角。本公司提供制备色谱分离纯化包括SFC手性、非手性服务,反相制备,杂质制备服务及技术咨询服务可以真正加快你得到你的目标化合物的速度。

  • 纯化制备色谱一体机收集问题?

    大家好! 我这里有样品制备色谱一体机,使用过程中收集馏分不准确。提示:是加柱子后的。柱前测没有什么问题! 1.按时间收集 收集实际量比设定要少。eg:15ml/min就能收集到8毫升左右! 2.按柱体积收集 收集实际量比设定要多。eg:15ml/min就能收集到20到22毫升左右!柱体积有什么标准,或是经验请各位给于分享!!!谢谢 急

  • 【原创大赛】【原创】制备色谱技术

    【原创大赛】【原创】制备色谱技术

    各位用液相的都知道,制备的手段在现在的,真是各种各样,比如说前沿一点逆流色谱了、SFC了,或者是常听到的中低压制备、flash、闪谱、高压制备等等,真是数不胜数啊,那制备色谱究竟都是些什么东东呢?我们大家来讨论下吧,小妹在此抛砖引玉,希望大家补充:一、定义:广义的来说,制备色谱主要包含以下几个方面1、 薄层色谱——制备型薄层色谱(PTLC)、离心薄层色谱;2、 特殊柱色谱——干柱色谱、减压液相色谱;3、 制备型加压液相色谱——中低压制备色谱(MPLC)、高压制备色谱(HPLC)、超临界液体色谱(SFC);4、 制备气相色谱;5、 逆流色谱。狭义上讲,目前主要说的制备色谱为第三个点,即制备型加压液相色谱。下面我们主要介绍制备型加压液相色谱二、基本原理:在同一推动力作用下,不同组分在固定相中的滞留时间有长有短(由于各组分性质结构不同,与固定相作用的强弱有差异),从而按不同次序从固定相中流出,使不同组分得到分离。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112071310_336286_1806827_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112071311_336288_1806827_3.jpg加压制备色谱,是在分辨率、速度和上样量之间寻找一个平衡点,改变其中任意一个参数,都会牵动其他。例如增加载样量,则势必影响样品的分辨率,如果修改洗脱条件,增加分辨率,则速度又变慢。三、制备色谱与分析色谱的区别:制备型色谱与分析型色谱的区别主要是目的不同:分析型色谱的目的在于鉴定、鉴别;制备型色谱的主要目的是在混合物中分离得到纯化产物,是一个纯化过程。分析色谱• 数据的完整性• 强调高柱效 (1.7, 3, 5 um 填料)• 强调样品的前处理,净化程度等http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112071322_336289_1806827_3.jpg制备液相• 物质的纯度• 纯化产量,回收率等• 过程消耗,成本等http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112071323_336290_1806827_3.jpg四、分类——低压液相色谱(300psi)中低压液相制备色谱目前市面上有很多种叫法,闪谱、Flash色谱、中低压液相色谱、MPLC、过柱机等,其实都是一样,都是中低压制备色谱,只是叫法不同而已。五、组成http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112071339_336296_1806827_3.jpg——输液泵分一元、二元、四元三种,一元只能实现等度洗脱。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112071340_336297_1806827_3.jpg——分离柱(Flash柱、玻璃柱、高压制备柱)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112071345_336299_1806827_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112071347_336301_1806827_3.jpg——检测器紫外检测器(UV)/紫外-可见检测器(UV-VIS)紫外检测器又分固定波长、可变单波长、可变双波长、DAD三维显示等)示差检测器(RI)蒸发光检测器[/

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  • 制备型高效液相色谱系统的应用领域

    制备型高效液相色谱系统的应用领域制备型高效液相色谱系统主要应用在植化、合成、制药、生物及生化等领域的产品的提取及纯化工作中。在不同的工作领域中,组份的提取和纯化量的差异是很大的。在生物技术领域中,酶的分离是微克级;在植化和合成化学领域中,为了鉴别未知成份并进行结构测定,需要得到一至若干毫克的纯品;在药品和医药学测试中,需要克级的标准品和对照品;在当今的工业级提纯中,制药成份往往需要千克级的提取。制备型高效液相的应用领域可以归纳在下表中。 成份量:所在领域 微克: 生物技术领域的酶的分离、生物学和生化学测试 毫克: 结构描述和特征鉴定,包括:生产中的副产品、生物矩阵的新陈代谢产物、天然产物 克级: 对照品(分析标准)毒物学分析所需组份:高纯品中的主要成份、副产品的分离提取 千克级:工业规模生产,活性成份,药物 制备方法的发展和扩大规模的计算  在分析液相中色谱柱的典型进样量是微克级,甚至更低。样品量和固定相之比有的甚至小于1:100000。进样体积一般来说都大大小于色谱柱体积(小于1:100)。 在这种条件下,会达到很好的分离效果,峰形尖锐并且很对称。而在制备液相中,最大的区别就是超量进样。其结果,超量进样的方法和分析方法的放大将在下章内介绍。 吸附变化线  分析液相的目的是给一种组份定性、定量。重要的色谱参数有溶解度、峰宽和峰的对称性。如果进样量越来越多,峰高和峰面积会增加,但峰的对称性和容量因子保持不变。如下图。   在分析液相中,最佳的峰形应是一条高斯曲线。峰的标准背离 бV 描述了其对称性和与高斯曲线的相似性。容量因子是与一种不保留物质的保留时间t0相关的保留时间。  如果将超过一定量的样品注射进色谱柱,吸附变化线就会成非线性。这意味着峰形会变的不再对称,表现为严重的拖尾和容量因子的缩小。如下图。在制备液相中,这种效果称作浓缩超量进样。在一些情况中,根据进样量的增加,容量因子也相应变大,并造成很强的前峰。既然吸附变化线取决于组份的多少,那么液相色谱柱的载样能力就必须根据不同的制备液相实验来决定。 色谱柱载样和超量载样  大样品量的纯化有两种可行的方法:分析系统的放大或色谱柱超量载样。分析系统的放大意味着使用直径更大的制备柱、更高的流速和根据色谱柱的长度增加进样量并保持样品浓度不变。峰形仍会保持尖锐而对称。这种方法需要大型的色谱柱和大量的溶剂来分离较少的样品,因此这种方法是不经济的。 因此色谱柱超量载样,暨在相同的分析条件下超量进样通常是一种很好的选择。使用色谱柱超量载样的方法,在分析柱上甚至可以进行毫克级的分离。但更大 量的样品分离就需要整个系统的放大。色谱柱超量载样可以通过两钟方法进行— 浓缩法和体积超载法。 在浓缩法中,样品的浓度会提高,但进样体积保持不变。容量因子k’降低,同时峰形从高斯曲线变为矩形。如下图。浓缩法超量载样只有在样品组份在流动相中具有良好的溶解性的条件下才有可能采用。   如果样品组份的溶解性很差,浓缩法超量载样不能使用。同时更多的样品体积注射到色谱柱中,这种技术称作体积法超量载样。超过一定的进样体积,峰高不变,但峰变宽并且呈矩形。在制备液相中浓缩法超量载样比体积法超量载样更受欢迎,因为可被分离的样品量更高。既然组份的溶解性通常是一个限制因素,所以两钟超量载样技术通常被结合起来使用。两种技术的概览浓缩法超量载样   体积法超量载样 取决于组份在流动相中的溶解性   取决于进样体积 吸附变化线的制备部分   吸附变化线的分析部分 生产效率决定于选择性   生产效率决定于制备柱直径 受固定相粒度大小的影响不大   需要小颗粒填料 方法的放大 浓缩法超量载样和体积法超量载样都会导致组份溶解性的降低。既然组份的分离需要一定的溶解性,那么在放大分析方法的时候,优化溶解性、特别是选择性就是一项很重要的工作。   因为选择性和超量载样潜力是相互依靠的,选择性的提高会提高一次运行中所分离的样品量,因此从分析方法到制备方法的放大和方法的优化需要三个步骤。 1. 优化分析方法的选择性。2. 在分析柱上进行超量载样。3. 放大到制备柱 制备型高效液相色谱的目的  判断制备型高效液相色谱使用的结果有三个重要参数:产品的纯度、产量和生产效率。三个参数之间是相对独立的,因此很难同时使用这三个参数来优化制备型高效液相色谱方法。见图形6。 色谱图1显示在制备型高效液相色谱的使用中有很高的生产效率,但是两种组份的分离效果却是很差的。这种方法很可能得到两种组份的高纯品,但是产量和收率却是很低的。  在色谱图2中峰有很好的分离,因此这种方法可以得到两种组份的高纯品和高产量,但是生产效率却很低。  色谱图3中的情况是三个参数综合后得到的最优化的结果。峰在基线上被完全分开,这使得产品纯度、产量和生产效率都达到最高。  在实际应用中,每个参数的重要性都是不同的。如为了进行活性或药物测试,某种组份必须被完全单独提取,那么组份的纯度是最重要的参数,产量和生产效率是其次的。如果某种合成中间体必须被纯化,并且需要有足够的量为下一步合成作准备,那么纯度就不是最重要的了。而生产效率在这种情况下就是个首先需要解决的问题,因为其直接关系到完成整个合成工作的进程和速度。同时产量也是很重要的,因为高价值组份的损失需要控制在最少的范围内。

  • 【原创】快速制备纯化色谱手册

    [~75164~][~75165~][~75166~]新出的快速制备色谱仪,对化学合成产物,天然产物的提纯很有帮助,用它来作正相,反相分离都很方便,比高压制备快多了。

  • 请教半制备色谱和自动层析仪的选择?用于有机物纯化后核磁用

    主要是做反应中间产物的分离和鉴定。把反应体系中的有机物提出来,进行核磁、红外等分析,确定最后的物质结构。需要的量不多,我想也就是几十毫克,顶多100毫克级别的吧。查了下文献,发现可以用半制备色谱,也有用自动层析仪的。由于对这些仪器都没有什么概念,也不知道如何选择。自动层析仪好像也就2-3万左右,我们这有一台闲置的LC100分析性液相色谱,如果要改造成半制备性,可能也要往里投钱。所以想请有经验的能否指导一二。非常感谢!

  • 【原创大赛】到底我该如何选择快速制备色谱仪?

    常常会有人问,明明可以人工过柱,为什么我还要购置一台快速液相制备色谱仪?市场上这么多仪器,到底又该怎么选择?回答这个问题之前,我们先讲一下,什么是快速制备色谱呢?[img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20170714/f94ee734eaf24bae9ec60ed232470d2a.png[/img]快速制备色谱,也就是Flash制备色谱,一般最大承压在145-200psi。由于压力比高压要小很多,所以更多的说法会把快速制备色谱以及中压制备色谱合称为中低压制备色谱。[b]主要优点[/b]1)相对于常压色谱来说,分离效率来的更高;2)在蛋白质纯化上有天然传统优势;3)比高压制备色谱来的经济,仪器要求配置低,而且用户可以自己装柱;4)使用预装柱,可以提高效率;5)与TLC有一定的直接关系,利用TLC可以快速的建立分离方法。[b]一般来说,购置快速制备色谱仪的原因不外乎以下几个:[/b]1)提高效率,节省时间、人力2)比传统的过柱方式,更节省溶剂3)可以通过过柱机实现常规手工过柱不容易分离的样品很多人在购买仪器的时候,常常会忘记自己的原始需求,陷入一些选择的惯性,比如看指标、比质量或者价格等等,就像我本来只想要买一个可以用来打电话的手机,却开始纠结于手机的拍照效果好不好,比了一圈下来,反而更纠结了。那么,到底应该怎样来选择一台快速制备色谱仪呢?今天小编就给大家一些建议,避免一些选择的误区。[b]第一点, 是否高效便捷?[/b]制备色谱仪相比于传统的过柱方法来说,最大的优势就是高效快速,操作简单。如果用了仪器,反而操作步骤更多了,效率变低,那么这台仪器也没有购买的价值了。高效便捷主要体现在两个方面,一个是仪器整体的操作体验舒适度。另一方面就是分离纯化的效率。[img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20170714/5ff5ceef51e34065ab1b5dc8b736031b.png[/img]1)仪器的操作体验,很好理解,就是用起来舒不舒服,首先是看仪器的硬件设施,比如用iPad触控的体验肯定比用台式机好;其次,是软件的操作体验,从开始实验到后期实验管理的整个流程设计是否合理,包括软件操作是否顺畅、能否方便的查看实验进度、记录实验情况等等。2)而就分离纯化效率来说,一般来说,快速制备色谱的效率肯定比人工过柱要高出很多。从分离时间上来说,一般用机器过,一个样品半小时就好了,而人工过,可能要几个小时甚至1天;另外,从分离效果上来说,有些样品比如点TLC板的两个点靠的很近,人工分不开,用机器就能分开,这样也无形中提高了实验效率。如果可以做到这两点,那么这个仪器的分离纯化效率就是过关了。[b]第二点,拥有成本。[/b]很多时候,我们衡量购买一台仪器的成本,除了购买初始软硬件的投入外,更科学的衡量方式,是衡量这台仪器从购买到报废整个生命周期中的拥有成本。它除了初始软硬件投入外,还包括耗材、操作人员培训、操作时间、维修成本、故障停机时间等几个大的部分,而这个主要由三方面决定:1)操作的便捷程度,决定了培训时间及操作时间,简单来说,就是仪器是不是容易上手,而这又回到了最开始说的仪器操作体验;2)能否有效节省耗材,决定了消耗成本。衡量一台仪器是否可以节省耗材,主要看它能否节省溶剂以及延长柱子的使用寿命。与传统玻璃过柱相比,快速制备色谱的一大优势就是能够节省更多的溶剂,这也是衡量一台仪器的重要因素,因此在了解或者试用一台仪器的时候,这也必须要纳入考量;除此之外,目前一些仪器比如三泰科技的SepaBean™ machine,可以通过专属的RFID标识或者SepaFlash色谱柱上的专属二维码,记录柱子的每一次使用情况,从而达到科学有效的重复使用色谱柱,这样日积月累,节省的耗材成本也非常可观;3)售后服务水平,决定了仪器的维修成本和故障停机时间。如果仪器出现问题的时候,用户能够得到更加快速的响应,仪器能更快恢复正常,那么我们就说用户的使用成本越低,反之,成本就高。[img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20170714/098b09e00718445d9317ed13b735ef28.png[/img]这一方面,是取决于公司本身的售后体系是否高效完善,包括售后技术指导、售后反应速度、售后服务态度等等。举例来说:常常会出现这种情况,新旧工程师交替,新的工程师不会使用仪器,旧的又走了,那么对应厂商能否及时的跟踪培训就显得特别重要。另一方面,取决于一些零配件能否有充足的备货,出了问题是否能够快速更换,以及售后的费用等等。同样一个配件,一个只需要1个礼拜就到货并且解决问题,一个要等1个月,中间就存在很大的差距。从这个角度来说,国产机器就具有一定的优越性,更换周期短,成本也相对较低。[b]第三点、必要的功能性[/b]购买一台仪器,本身就是希望能够代替人工,或者能够实现人工做不到的事情,所以一些机器必要的功能性,也很重要。很多仪器虽然标榜自己为自动仪器,但是其实很多都是半自动的操作,这让很多仪器买回去之后使用起来并没有简化流程,慢慢大家还是回到了手工过柱的日子,仪器也变成了摆设。比如用机器是不是能够分离一些手工过柱很难分离的产物,比如有没有收集系统、检测系统等等,这都是要根据你的实际需要考虑进去的。目前大多数的公司都会提供试用服务,这也是了解一台仪器以及一个公司最直接的方法,一般试用都要提前预约,所以也要向各个公司了解清楚,配合自己的实验需求提前安排。购置一台快速制备色谱仪,对于很多实验室或者企业来说,也算是一笔不小的开支。在可控的成本里,挑选出最适合的仪器,是一门学问。小编在这里也是给大家一些小的建议,如果还有其他疑问,欢迎留言或者私信,小编一定知无不言言无不尽啦!

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  • 有关制备色谱问题

    我现在有一种样品,是一个混和物,目前是靠液相(UV)面积归一化来定量的,由于杂质含量很低,所以不好控制,我有成熟的液相分析方法,现在想找个制备色谱的来制一点纯品,以后用该纯品做外标来定量,不知哪位搞制备色谱的愿意制备?价格几何???

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  • 【转帖】制备色谱技术的简答

    1 制备色谱到底是什么?请介绍一下制备色谱?答;[liuwangcai] 有些搞分析色谱的朋友,对制备色谱这个名词比较陌生。其实,在化学化工医药等广泛采用的层析法以及薄层色谱就是最为典型的制备色谱。下面对制备色谱中的一些常用概念做一下介绍。 (1)分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。然而,当色谱柱上样品负载加大的时候,往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱,要解决容量与柱子效果之间的矛盾,对重现性也要考虑。从经济上来说。制备色谱要争取少用填料,少用溶剂,要尽可能多的得到产品。

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