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单颗粒投入冷冻仪

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  • 【原创大赛】单颗粒冷冻电镜技术的发展前景(译)

    近日,清华大学施一公研究组通过单颗粒冷冻电子显微技术(冷冻电镜)解析了酵母剪接体近原子分辨率的三维结构,并在此结构的基础上进行了详细分析,相关文章发表在《科学》周刊上。这一重要研究成果再次让冷冻电镜技术进入了大家的视野。  施一公表示,如果没有冷冻电镜,就完全不可能得到剪接体近原子水平的分辨率。而早在2007年清华大学采购冷冻电镜时,也没想到冷冻电镜会出现飞跃性的进展。  确实自从2013年以来,随着单电子计数探测相机的问世,以及图像处理算法的发展,冷冻电镜技术在结构生物学研究中的应用越来越多,其重要性也日益凸显,吸引了许多以前从事X射线晶体学研究的研究人员关注。那么冷冻电镜技术未来的发展前景如何呢?  2015年4月,单电子计数探测相机的研发人员之一华人学者程亦凡(Yifan Cheng) 在Cell杂志刊登了《Single-Particle Cryo-EM at Crystallographic Resolution》,其中有一个部分专门介绍了单颗粒冷冻电镜技术未来的发展。现将原文翻译如下,与版友们共享。~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~  毫无疑问,单颗粒冷冻电镜(single-particle cryo-EM)不再是‘‘blobology’’,而是一种可与X射线晶体学方法分辨率相媲美的新方法。然而,与X射线晶体学不同的是,单颗粒冷冻电镜总是产生一些信息(尽管并不都是原子分辨率级别的信息),甚至对分辨率并不是很高的图像进行重构,也能够获得如何改进样品制备的信息,以及宝贵的生物学见解。因此,在大分子研究方面,单颗粒冷冻电镜技术比X射线晶体学更具吸引力。  然而,单颗粒冷冻电镜技术还远非完美,而且技术发展仍然非常快。目前单颗粒冷冻电镜技术的分辨率水平,依然无法满足许多方面的应用要求。例如,如果分辨率能够突破3埃,这样就能清楚的看到离子的位置,同时不仅能观察到小分子,还能观察到小分子配体与目标蛋白是如何结合在一起的,这一点对于制药公司来说颇具吸引力,因为它能够为基于结构的药物设计和优化提供便利。  最近有一篇综述文章详细探讨了单颗粒冷冻电镜技术的局限性,尤其是在获取更高的分辨率方面,并介绍了可能的解决方法(Agard et al., 2014))。由于分辨率不足,建立新模型和精修所花费的时间常常远远超过了三维重构本身。尽管许多X射线晶体学工具可以被应用在冷冻电镜密度图模型的建立和精修,它也需要显著的改进(Amunts et al., 2014; Brown et al., 2015)。此外,X射线晶体学传统的验证准则,例如自由R-因子,对于建立冷冻电镜密度图的模型并不适用。因此,对于单颗粒冷冻电镜技术来说,建立、精修和验证有效的模型的工具和方法都需要进一步的发展。  除了提高技术本身,还有其他一些因素限制单颗粒冷冻电镜技术的广泛应用。首先,单颗粒冷冻电镜技术并不是一个“交钥匙”方法。即使有自动数据采集技术和流程化数据处理、图像采集和加工处理等,它依然是一个十分复杂的技术,对于一个新手来说,很难通过短时间的培训或使用说明书就能学会操作。其次,必要的基础设施需要价值不菲的投资,包括功能齐全的冷冻电镜设备,用于数据处理和存储的计算机资源等。另外,除了最初的投资,目前高端冷冻电镜设施运行所需要的投资也是巨大的。第三,目前几乎没有类似同步辐射光源向社会大众开放的、致力于高通量数据采集的冷冻电镜设施。 这些限制使得进入冷冻电镜领域的门槛太高,要想有所改变,将需要多方面的努力。  因此,使得冷冻电镜技术更加可靠耐用,并且相对容易掌握,降低设备和运行成本,提供现成的设备及专家,也是促使冷冻电镜技术能够像X射线晶体学技术广泛应用的重要步骤。尽管,单颗粒冷冻电镜技术的未来是光明的,但是需要科学界以及政府投资机构的大力支持,才能使得单颗粒冷冻电镜技术能够像X射线晶体学技术一样受欢迎。

  • 冷冻电镜单颗粒技术样品制备载网支持膜的选用

    冷冻电镜单颗粒技术样品制备载网支持膜的选用

    冷冻电镜技术是现今结构生物学里最常用的解析生物大分子三维结构的技术之一。虽然其样品制备过程比另一种同样非常常用的技术——X射线晶体学简便,但成功制备出一个适合进行高分辨数据收集的样品仍然是经验、运气、努力与创新相结合的结果。为了承载样品,使其能送入透射电镜进行观察,样品需要与带支持膜的载网接触并冷冻固定在一起。目前,可供选用的载网支持膜大体分两种:一种是有孔支持膜,包括常用的微栅碳支持膜、碳微阵列支持膜(如Quantifoil,GiG,Cflat等)、金属微阵列支持膜(如Quantifoil金膜,镍钛膜等)等,可直接购买使用。另一种是在有孔支持膜上再加一层连续超薄支持膜,添加的超薄支持膜常用的为超薄碳膜,近期又出现了氧化石墨烯膜等基于石墨烯的超薄膜类型。这种通常需要使用者对市售的有孔支持膜再加工,在其表面多加一层超薄支持膜。无论使用哪种膜,由于提供支撑的有孔膜较厚引入的噪音很高,数据收集都发生在孔内。[align=center][img=,690,728]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260954438579_6129_3224499_3.jpg!w690x728.jpg[/img][/align][align=center]图1.常用有孔支持膜类型[/align][align=center][img=,690,550]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260954588204_7034_3224499_3.jpg!w690x550.jpg[/img][/align][align=center]图2.有孔支持膜加连续超薄支持膜类型[/align]适合单颗粒技术数据收集的冷冻电镜样品需符合以下要求:①生物大分子群体主要为同种分子或者组分相同的复合体,且它们稳定在一种或有限的几种彼此能被计算机图像处理分类技术区分的构象;②样品颗粒彼此分离,同时分布密度又能满足在一次数据采集区域内获得足够的颗粒数量;③样品颗粒的空间取向随机分布。[align=center][img=,690,262]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260955256336_8129_3224499_3.jpg!w690x262.jpg[/img][/align][align=center]图3.理想化的样品颗粒在冰层中的分布示意图[/align]这些要求看似与载网支持膜的选用无太大关联,但实践经验告诉我们,有时同一个样品使用不同的载网支持膜进行样品制备,其数据收集质量有区别。导致这种差别的原因之一是支持膜表面性质的不同对进孔样品分布密度的影响。使用有孔碳支持膜常见的一个问题是样品大部分粘附在支持膜上,而在孔内的样品数量很少。根据经验,碳支持膜对部分样品的吸附性能相当强,溶液中的样品会优先吸附到碳膜上,以至于游离的样品颗粒浓度大大降低,而分布在支持膜孔内的样品来源于游离的样品颗粒群体。使用添加了连续超薄膜的载网则少有这个问题,毕竟孔内孔外都有碳膜,同时由于碳膜对样品的吸附在一定程度上具有样品富集效应,还可降低制样时所需样品浓度。此外,使用金属材质的有孔支持膜(如金膜,镍钛膜等)能缓解这种情况,因为金属支持膜表面性质与碳支持膜有区别,其对样品的吸附也可能有差异。[align=center][img=,690,263]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260955370487_1473_3224499_3.jpg!w690x263.jpg[/img][/align][align=center]图4.连续碳膜上的样品颗粒在冰层中的分布示意图[/align]导致这种差别的原因之二是冷冻样品制备时气液界面对样品的影响。由于电子能穿透的样品厚度很有限,样品被冻住前必须先进行减薄。目前最简单也最通用的减薄法是使用滤纸移除大部分液体而仅剩厚度在几十至上百纳米范围的水膜。根据现今通用的制样方式,从水膜的形成到它被快速冷冻成非晶态冰膜的时长在秒的量级。水膜的上下两层气液界面之间的距离如此短,水膜中样品被冷冻固定前的时间如此长,以至于样品颗粒有成千上万次机会与气液界面接触。每次接触样品颗粒都机率变性,或变成无定形的多肽链,或解体成更小的亚基组合。最终我们看到的样品颗粒或是被“已牺牲”的变性样品所保护而未能接触气液界面,或是幸运地多次接触气液界面而仍未变性。更多关于气液界面对样品影响的介绍,可参考孙飞(2018)以及Glaeser 和Han (2017)发表的综述。[align=center][img=,690,285]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260955485024_3909_3224499_3.jpg!w690x285.jpg[/img][/align][align=center]图5.现实的样品颗粒在冰层中的分布示意图[/align]使用有孔支持膜无可避免地会受到来自上下两层气液界面的影响,某些样品会因此而在冷冻后无法观察到完整颗粒。而使用连续超薄支持膜一面由气液界面转换为固液界面,另一面由于支持膜对样品的吸附而远离气液界面,有效地降低了气液界面对它的影响。既然添加连续超薄支持膜的载网有这么多好处,为什么很多样品仍然使用有孔支持膜呢?原因之一是长期使用的超薄碳支持膜对于小蛋白(特别是分子量小于500kDa)仍然太厚,引入的噪音太多,导致小蛋白数据取向搜索结果不够精确,影响重构分辨率提升。而石墨烯类超薄支持膜理论上为单分子层,比超薄碳膜更薄,在这方面可以帮上忙。但石墨烯类支持膜添加到载网上的方法仍在发展中,目前使用上仍不及有孔支持膜便利。[align=center][img=,690,541]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260956026943_9251_3224499_3.jpg!w690x541.jpg[/img][/align][align=center]图6.样品直径与碳膜厚度的选择(感谢友情出镜的大蛋黄颜值担当评审嘉宾)[/align]原因之二是添加超薄支持膜更大机率引起样品的取向优势,导致某些取向数据采集量远远不足,同样影响重构分辨率提升。[align=center][img=,690,396]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811260956143795_3302_3224499_3.jpg!w690x396.jpg[/img][/align][align=center]图7.样品颗粒取向优势示意(感谢友情出镜的大蛋黄实力客串样品颗粒)[/align]纯有孔支持膜与添加超薄支持膜两种方案可谓各有优缺。有孔支持膜的缺点很明显,在于受气液界面的两面夹击。如果有一种方法能缩短样品减薄到冷冻固定的时长至毫秒级别,那么样品颗粒将没有足够的时间多次接触气液界面,同时也减少与支持膜本身的接触,从而使用有孔支持膜的各种问题将可能迎刃而解。Bridget Carragher实验室研发了一种特殊的载网,命名为纳米线载网(nanowire grids)。这种载网具有自减薄功能,即载网孔内多余的液体会被固定在载网梁上的纳米线所吸走,留在载网孔内的液体厚度自然下降。当然纳米线吸附液体体积是有上限的,需要配合他们实验室研发的微量加样设备(Spotiton robot)加注皮升级别的样品量。虽然目前还未得到普及,但这种设置可以实现将减薄步骤的时长降低到百毫秒级别的水平。目前该文章未正式发表。推荐阅读文献:Fei Sun. Orienting the future of bio-macromolecular electronmicroscopy. Chin. Phys. B. 2018, 27(6): 063601Glaeser RM, Han BG. Opinion: hazards faced by macromolecules whenconfined to thin aqueous films. Biophys Rep. 2017, 3(1):1-7Noble AJ, Wei H, Dandey VP, Zhang Z, Potter CS, Carragher B.Reducing effects of particle adsorption to the air-water interface in cryoEM.doi: https://doi.org/10.1101/288340Palovcak E, Wang F, Zheng SQ, Yu Z, Li S, Bulkley D, Agard DA, ChengY. A simple and robust procedure for preparing graphene-oxide cryo-EM grids.doi: http://dx.doi.org/10.1101/290197Russo CJ, Passmore LA. Electron microscopy: Ultrastable goldsubstrates for electron cryomicroscopy. Science. 2014, 346(6215):1377-80.Sader K, Stopps M, Calder LJ, Rosenthal PB. Cryomicroscopy ofradiation sensitive specimens on unmodified graphene sheets: reduction ofelectron-optical effects of charging. J Struct Biol. 2013, 183(3):531-536来源:【生物成像中心】欢迎大家分享讨论使用过的载网支持膜[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif[/img]

  • 【求助】各位有没有了解冷冻蚀刻技术的?

    近期学院里有位老师看文献里用到了冷冻蚀刻技术,或者叫冷冻复型技术。原理是这样的,由于要分析的样品是原油里面的沥青成分,常温下是固体,但是都是些高沸点大分子的物质,在高温下有可能会融化,不能直接到TEM里面做,所以先把一点沥青放到冷冻蚀刻机的样品室内,然后液氮冻住,在以45度角往上面喷一层Pt或者C的颗粒,叫做投影,然后再垂直喷一层C膜。最后把样品取下来,把沥青用溶剂溶解掉,剩下的那层碳膜做TEM分析,可以得到沥青表面颗粒分布的复型图像。原理罗嗦了半天,估计各位有搞生命科学或者医学的朋友早就看明白了,这个方法好像需要专用的冷冻复型机器,不知道各位有没有用过的或者了解的,方便的话提供一下品牌、价位,或者哪位可以做合作分析的,提供个联系方式给我,谢谢了。我的邮箱:jeffrylee@126.com

  • 高通量组织研磨仪液氮冷冻研磨实验

    高通量组织研磨仪液氮冷冻研磨实验

    TJ2011高通量组织研磨仪对植物叶片的液氮冷冻研磨实验处理材料:植物叶片 (水稻、玉米、小麦、草、蔬菜叶等)1 装物料:将植物叶片截成所需的小段,用镊子夹住,放入1.5/2ml的离心管管底,对离心管进行编号。现以24空离心管适配器为例;2 装研磨珠:每个离心管内装上1个5mm碳化钨(或氧化锆)研磨珠,或3mm碳化钨(或氧化锆)研磨珠5个;3 冷冻保存:将铝合金夹具夹住24孔,固定好,放到专业液氮盒中,加液氮冷冻,3-5分钟,充分冷冻夹具及管内样品。4 溶剂加入:如有需要,在每个离心管中,小心加入裂解液或其他溶剂;4 主机运转:设定转速与时间例如1500转/分钟 3min,点击Start5 研磨过程:在典型研磨时间(2~3min)内,研磨结束。可同时得到2*24=48个通量的样品;6 取下夹具,进行下一步实验。注意事项:在上夹具时,要注意一是要带上厚一点的手套,防止被液氮冻伤;一是要迅速,且要保证螺栓拧紧,卡上保险扣。然后,启动研磨。TJ2011高通量组织研磨仪同时适用动物组织(骨骼、肌肉、内脏、毛发等)的研磨,高通量提取DNA/RNA。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202141110_349211_1812435_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202141110_349212_1812435_3.jpg

  • 【求助】求购冷冻研磨仪

    各位师兄:兄弟想问问,[color=#DC143C]国内[/color]哪里有比较好的冷冻研磨仪,要求能用液氮冷冻,处理量在20克左右,希望能推荐一下.

  • 紧急求助:谁知道国内哪家单位有“冷冻电子显微镜”???

    我主要是想观察一下纳米颗粒在高分子树脂体系里的分布状态,还有加入纳米颗粒前后分子间氢键变化的情况!谁知道国内哪家单位有“冷冻电子显微镜”???最好是能够对外单位开放的,先在这里谢过了!!!问题:冷冻电子显微镜与扫描电镜的区别在何处? 答:冷冻电镜是透射电镜,看物体内的具体结构;而扫描电镜是利用探针扫描,对大分子不能扫到分子内部,而是表面形貌,不可能是分子内部的结构。如果是研究原子水平,没有问题。但一旦涉及到大分子,就要出现问题了。

  • 巧克力不易长时间冷藏或冷冻,应该如何储存?

    随着居民生活水平的提高,巧克力越来越多的受到大家的喜爱,从而进入到千家万户的零食盘中。但是,据说,巧克力不易长时间的冷藏或者冷冻。那么,多久算是长时间呢?你们的巧克力一般都是怎样放置的呢?

  • 【求助】求助:求购冷冻研磨仪

    各位师兄:兄弟想问问,[color=#DC143C][font=黑体]国内[/font][/color]哪里有比较好的冷冻研磨仪,要求能用液氮冷冻,处理量在20克左右,希望能推荐一下.

  • 小型液氮冷冻设备的安全使用

    在实验室和工业生产中,小型液氮冷冻设备被广泛应用于低温实验和样品冷冻保藏。然而,液氮是一种极端低温的危险物质,不当使用可能导致严重的意外事故。因此,正确的操作和预防措施对于安全使用小型液氮冷冻设备至关重要。本文将介绍如何安全使用小型液氮冷冻设备,并提供预防意外事故的建议。  1. 液氮的基本性质及危害  液氮是一种无色、无味、无臭的极端低温液体,其沸点为-196摄氏度。由于极低的温度,液氮具有强大的冷冻能力,可以快速冷冻生物样品和其他物质。然而,液氮也具有高压膨胀和窒息的危险性,接触皮肤或吸入过量气体会造成严重灼伤和窒息。因此,正确使用和储存液氮至关重要。  2. 安全操作流程  在使用小型液氮冷冻设备时,需要采取一系列安全操作流程以确保人员和环境的安全。首先,穿戴防护装备,包括护目镜、手套和防护服。接着,将设备放置在通风良好的区域,远离易燃物质和高温源。在操作前,需要检查设备是否完好无损,确保阀门和接口紧固无漏。接下来,打开气体阀门,逐渐注入液氮至所需液位。在整个操作过程中,注意不要长时间暴露在液氮蒸气中,并避免直接接触液氮,以免造成皮肤灼伤或窒息。[url=http://www.mvecryo.com/]mve液氮罐[/url]  3. 避免意外事故的建议  为了预防意外事故的发生,除了正确操作设备外,还需要遵循以下建议。首先,定期对设备进行维护和检查,确保阀门和管路的密封性。其次,建立明确的液氮使用规范和操作流程,并对相关人员进行安全培训,提高他们对液氮危险性的认识。此外,设立专门的液氮存储区域,并采取防火防爆措施,避免发生意外泄漏事故。最后,建立应急预案,包括液氮泄漏的处理方法和急救措施,以最大程度减少意外事故带来的损失。[url=http://www.yedanguan365.com/]液氮罐[/url]

  • 大容量冷冻离心机特点及使用注意事项

    离心分离技术是根据颗粒在一个实用离心场合中的状态而发展起来的新技术。不同密度,大小或形状的颗粒在不同的离心场合中沉降,所以一个大体是球形非均一的混合物,可以用离心的方法加以分离,超大容量离心机是为了进一步研究生物化学,分离大量的物质,具有转子自动识别功能,且同步显示加速及降速曲线图像,实现较好的离心效果,具有超速、不平衡、门盖等多项保护功能,确保仪器安全可靠。符合现代人体工程学原理,适用于是分子生物、细胞培养分离、临床医学等。[align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/daronglianglixinji/2013-06-18/254.html][b][img=台式高速大容量冷冻离心机]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/28bdc821c5ab352f791d574871dd7396.jpg[/img][/b][/url][/align][align=center][b]TGL20MW台式高速大容量冷冻离心机[/b][/align]台式大容量[url=http://www.hexiyiqi.com/]冷冻离心机[/url]稳定而不笨重,能配大容量超轻转子,交流变频电机驱动、无碳粉污染、延长使用寿命;噪声低、振动小;配有多种转子,方便用户选用,转子自动识别,并进行限速控制,离心更安全。该机设有超速、超温、不平衡、门盖自锁等多种保护,确保人身机器安全。可设置升降速模式、提供转速、离心力设定模式,可一键相互转换转速-离心力数值,进口压缩机组,独特的散热系统,确保仪器制冷效果,配备大扭矩变频电机,更快的加减速,提高使用效率,性价比超高。为了保护制冷压缩机,仪器断与通电间隔时间必须大于3分钟,否则损伤压缩机。为保证冷冻效果,当环境温度高于30℃时,应对转子和离心腔预冷,转子还应降低转速15%运转。每次使用完毕务必清理擦拭内腔及转头,盖好离心盖。开启离心机盖一段时间,干燥内腔。离心机完毕后要擦干离心腔内水分,每星期对电机主轴的锥面上涂少许中性润滑油脂保护,防止转轴锈蚀。较长时间不用台式大容量冷冻离心机应将转子取出,擦干净放置在干燥的地方,防止锈蚀。转子不用时应从离心腔内取出,及时用中性洗涤液清洁擦干,防止化学腐蚀,存放在干燥通风处。不允许用非中性清洁剂擦洗转子,不允许用电热风吹干转子,转子中心孔内应涂少许润滑脂保护。每次使用前应注意检查转子有无腐蚀点和细微裂纹,禁止使用已腐蚀或有裂纹的转子,使用超过保质期的转子,以保障人身安全。[b][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/daronglianglixinji/]大容量冷冻离心机[/url][/b]使用时一定要确认设置的转子号正确无误。若转子号设置错误。会造成转子超速使用或达不到所需的离心效果。特别是超速使用可能发生转子炸裂的恶性事故,不可疏忽大意。超大容量离心机工作台应平衡固定,工作间应整齐清洁,干燥并且通风良好,环境温度以5~32℃为宜,超大容量离心机盖上不要放任何物件。[align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/daronglianglixinji/2013-06-18/257.html][img=LRM-12L超大容量冷冻离心机]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/taishidisulixinji/2012-10-18/2fa494a56437425bb9d84080a366d11b.jpg[/img][/url][/align][align=center][b]LRM-12L超大容量冷冻离心机[/b][/align][b]赫西[/b][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/daronglianglixinji/][b]大容量离心机[/b][/url][b]的特点:[/b]1.采用大力矩无刷变频电机,控制采用Microchip公司的dsPIC30F系列单片机控制,电机驱动采用FAIRCHILD公司的 FSBB30CH系列专用驱动模块,保证了电路的高可靠性。2.大容量冷冻离心机采用静音机电一体化电机门锁;设有超速、超温、不平衡等多种保护措施,特殊组合减震装置,使电机平稳运行或自动失衡停机;专业设计的减震机构和气流结构减少了机器运行时的振动,降低噪音的产生。3.TFT真彩4.3寸屏,触摸按键双控系统,智能化控制、简单方便地操作;同时显示设定参数和运行参数;转速、相对离心力、半径修正值和提示音均可按用户意图进行修改。4.10种加、减速率保证样品安全;可提供35种工作模式选择,可自由编程、调用。5.高速冷冻大容量落地式离心机通过优化柔性传动功能,缩短离心机启动和刹车时间,转子可在1分钟之内的刹停。6.快速控温功能,在最高转速时或离心前后,均可对敏感样品进行制冷;温度范围:-20℃~40℃,最高转速可保持温度<4℃;采用定速计时,定时范围1-99h59min。7.所有的转子和附件均可高压灭菌(121°C,20分钟),气密性转子和转子盖可在140°C高压灭菌2小时去除阮病毒;8.通过CE认证、ISO13485、ISO9001认证;符合IEC1010-2-020安全标准;

  • 高速离心机与高速冷冻离心机的区别

    高速离心机和高速冷冻离心机最大的区别是一个具有冷冻功能,一个不具备冷冻功能。高速离心机属常规实验室用离心机,广泛用于生物,化学,医药等科研教育和生产部门 ,它利用转子高速旋转产生的强大离心力,分离液体与固体颗粒或液体混合物中各组分,适用于微量样品快速分离合成。由于转速较高,产生离心力大,是对样品溶液中悬浮物质进行高纯度分离、浓缩、精制,提取各种样品进行研究的有效制备仪器。是医学、药物学、生物学、化学、农业科学、食品环保等科研生产部门使用的重要仪器设备,广泛用于各种药物、生物制品,如血液、细胞、蛋白质,酶、核酸、病毒、激素等等。[align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2012-10-19/98.html][b][img=台式高速常温离心机H/T16MM,550,550]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2019-05-14/6bfd6b3f06ca31aa81c99915b3eb562e.jpg[/img][/b][/url][/align][align=center][b]台式高速常温离心机H/T16MM[/b][/align][b][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/]高速离心机[/url]:[/b]高速离心机转速一般在10000~30000r/min之间,和高速冷冻离心机相比,除不具备冷冻的性能外,它采用的是无刷电机驱动,数字化显示,这类离心机广泛用于生物学、农业科学及临床医学研究,特别适用于样品量少,要求离心力大的实验工作。赫西高速离心机特点是,全电脑控制,无刷变频电机驱动, 流线型设计,全钢结构,不锈钢离心腔,采用TFT真彩4.3寸屏,触摸按键双控系统,智能化控制、简单方便地操作、触摸面板,同时显示设定参数和运行参数。转子经严格的过速安全实验,安全、体积小、重量轻、低噪音、振动小、运转平稳。[align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/58.html][b][img=台式高速冷冻离心机3H20RI,550,550]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2019-05-14/4b60dacaa256bcc4fe665e2eb3536c0a.jpg[/img][/b][/url][/align][align=center][b]台式高速冷冻离心机3H20RI[/b][/align][b][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/gaosulengdonglixinji/]高速冷冻离心机[/url]: [/b]高速冷冻离心机的转速一般在10000~30000r/min之间,并且带有致冷系统。除具有冷冻离心机的性能和结构外,高速冷冻离心机所用角式转头多采用用钛合金或铝合金制成。离心管为具盖聚乙烯硬塑料制品。高速冷冻离心机(也叫恒温离心机)多用于对温度有一样要求的恒温环境的实验,如收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。同时它还具有样品目测平衡,操作方便,相对离心力大,加速度快,以及转速、温度、时间显示精确稳定等特点。高速冷冻离心机由外壳、离心室、转头、冷冻装置和控制电路等部分组成。冷冻装置其作用是降低离心室温度。类型可分为台式高速冷冻离心机和立式高速冷冻离心机。赫西高速冷冻离心机采用进口无氟制冷压缩机组及环保制冷剂R404a,具有宽泛的温控范围:-20℃- 40℃ ,并可在离心机运行期间设置;具备预制冷功能,可迅速降温至设定温度;具备待机冷却功能,可在待机状态下维持设定温度;具有加热化霜功能。

  • 首次利用冷冻电镜技术解析生物大分子原子结构模型

    1月11日,美国国家科学院院刊(PNAS)在线发表了中科院生物物理研究所朱平研究组及其合作伙伴利用冷冻电镜技术解析的一个质型多角体病毒原子分辨率结构模型的研究论文。这是我国首次利用冷冻电镜技术解析的生物大分子原子结构模型,也是目前已报道的国内最高分辨率的冷冻电镜三维重构结果。同时,这是世界上首次利用冷冻电镜的CCD图像(电荷耦合器件图像传感器)获得的生物大分子复合体的全原子模型。据生物物理所有关专家介绍,本工作完全基于生物物理所生物成像技术实验室去年4月建成并试运行的TitanKrios电镜及其附属设备完成,用单颗粒图像处理技术获得了呼肠孤病毒科的质型多角体病毒近原子分辨率的三维结构(3.9埃),并独立构建了全原子模型。呼肠孤病毒科病毒是一类重要的双链核糖核酸(RNA)病毒,其感染宿主包括植物、无脊椎动物、脊椎动物和人类,其中的质型多角体病毒是其两个亚科之一。该研究解析了呼肠孤病毒科质型多角体病毒的近原子分辨率三维结构并构建了完整原子模型,确认了该病毒新生信使RNA的流出通道,对研究双链RNA病毒的RNA加帽机制,新生信使RNA的释放过程,以及呼肠孤病毒的蛋白衣壳的稳定性和进化具有重要意义。

  • 冷冻光电关联:让原位微观生命过程可视化

    冷冻光电关联:让原位微观生命过程可视化

    结构生物学是用物理学方法在原子水平阐明生物大分子的三维结构,进而诠释生物大分子的生物学功能及其分子机制的科学。近几年,冷冻电镜在生物物理,特别是结构生物学领域掀起了一轮新的革命。冷冻电镜技术包括单颗粒技术和原位冷冻电镜技术,2017年单颗粒技术已获得诺贝尔奖,放眼未来,冷冻电镜更多的是要应用于获取细胞和组织样品的原位信息,尤其是利用冷冻电镜电子断层扫描成像技术(Cryo-ET)获得三维图像,将细胞内的生命过程可视化,在原位对生物大分子的结构进行解析,并进一步分析其与所处周围环境之间的相互作用关系,进而阐明其发挥功能的分子机制。蛋白质聚集是许多神经退行性疾病的典型症状,包括帕金森病(Parkinson’sdisease)、亨廷顿病(Huntington’sdisease)、以及肌萎缩侧索硬化症(amyotrophiclateral sclerosis)等,至今为止还没有针对这类疾病的有效治疗方案,因此了解这类疾病的致病机理尤为重要。在细胞内表达这些疾病相关的蛋白会导致细胞毒性以及形成大的胞内包涵体,然而这些包涵体的具体致病机理还不清楚,而且这些包涵体的组成以及其精细的细胞原位结构信息也无人知晓。为了回答这一科学问题,德国马克斯普朗克生物化学研究所Baumeister教授组的研究人员利用先进的冷冻电镜光电关联技术(Cryo-CLEM)、冷冻聚焦离子束切割技术(Cryo-FIB)、以及冷冻电子断层扫描三维重构技术(Cryo-ET),在小鼠原代神经细胞原位解析了亨廷顿基因1号外显子中衍生的多聚谷氨酰胺(polyQ)所形成的包涵体及其微环境的原位精细结构,相关结果发表在2017年9月的Cell杂志。他们发现polyQ包涵体是由淀粉样肽的纤维构成,与细胞的内膜系统特别是内质网相互作用,使内质网膜发生形变并扰乱其组成,还改变了包涵体周围的内质网膜的动态性。该研究结果暗示淀粉样肽的纤维和内质网的异常相互作用导致了蛋白质聚集物所产生的细胞毒性。[align=center][img=,690,424]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271518599236_8463_3224499_3.jpg!w690x424.jpg[/img][/align]2018年3月,该研究组在PNAS杂志发表在酵母系统内的polyQ原位分子的结构解析,他们发现在酵母细胞内polyQ蛋白聚集体形成了无定形的包涵体以及少量的纤维丝,并使线粒体和脂滴的形态发生变形。对比这两种不同的机体系统下的差异,我们可以看到同样的polyQ蛋白聚集体在不同的环境中采用了不同的构像并利用特定的机制来靶向不同的细胞结构,从而产生细胞毒性。[align=center][img=,690,770]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271519325828_4209_3224499_3.jpg!w690x770.jpg[/img][/align]另外,2018年2月的Cell杂志报道了该研究组在大鼠神经细胞原位解析了一种重复短肽(poly-GA)蛋白聚集体及其微环境的结构,不同于polyQ形成的纤维状结构,poly-GA聚集体是由平面扭曲的长短不一的丝带状结构组成。poly-GA聚集体大量募集了26S蛋白酶体复合物,而其他生物大分子如核糖体或分子伴侣却被排除在聚集体外部。与poly-GA的直接相互作用使蛋白酶体处于失活状态,虽然在整体水平上细胞内的蛋白酶体表达量没有变化,但有功能的蛋白酶体的数量大幅减少,揭示了蛋白质聚集物所产生细胞毒性的另一原因。[align=center][img=,690,378]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271519469883_8555_3224499_3.jpg!w690x378.jpg[/img][/align]Baumeister教授组是Cryo-CLEM、Cryo-FIB以及Cryo-ET等关键技术方法发展的开拓者和领航者。Cryo-CLEM-FIB-ET即是在整个细胞内定位荧光标记的特定目标分子,观察其动态变化并在感兴趣的时刻进行快速冷冻,然后转移到冷冻扫描电镜利用冷冻聚焦离子束进行光电关联匹配,精确定位目标分子位置并进行聚焦离子束切割产生一层100-200nm厚的切片,最后利用冷冻电子断层扫描成像从原子分辨率上解析其未被破坏的天然原位结构信息。目前冷冻光电关联的一大瓶颈是光镜的分辨率较低,虽然超分辨光电关联技术在飞速发展,但是其缺点如高强度激光照射可能使样品升温,成像速度慢等还需要一一克服。超分辨光电关联令人振奋的一大潜在应用是来精确指导冷冻聚焦离子束切割,使得大的细胞样品中的任何感兴趣目标分子都能被精确定位切割,进而进行高分辨率数据收集。另外,随着技术进一步发展,用高电子密度标签来标记目标分子并在电镜下直接成像也将会成为可能。结构生物学的终极目标是了解细胞生命过程中每一个分子的结构、功能以及它们之间的相互作用,Cryo-CLEM-FIB-ET则是在结构生物学与细胞生物学之间架起的一座桥梁,让细胞内的微观生命动态过程可视化![b]参考文献[/b]1. Bauerlein,F. J. B., et al. 2017. In Situ Architecture and Cellular Interactions of PolyQInclusions. Cell 171(1): 179-187.2. Guo, Q., etal. 2018. In Situ Structure of Neuronal C9orf72 Poly-GA Aggregates RevealsProteasome Recruitment. Cell 172(4): 696-705.3. Gruber, A.,et al. 2018. Molecular and structural architecture of polyQ aggregates inyeast. Proc Natl Acad Sci U S A. .4. Wolff, G.,et al. 2016. Towards correlative super-resolution fluorescence and electroncryo-microscopy. Biol Cell 108(9): 245-258.Oikonomou, C. M. 2017. Cellular ElectronCryotomography: Toward Structural Biology In Situ. Annu Rev Biochem 20(86):873-896.来源:【生物成像中心】

  • 如何保障离心式低温工业冷冻机正常运行

    如何保障离心式低温工业冷冻机正常运行

    由于压缩机的种类不同,无锡冠亚低温工业冷冻机也是分为不同种类的,比如活塞式低温工业冷冻机、离心式低温工业冷冻机、风冷式低温工业冷冻机、水冷式低温工业冷冻机等,其中离心式低温工业冷冻机使用是比较多的,那么,怎么保障离心式低温工业冷冻机的平稳运行呢?[align=center][img=,450,450]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808031559191238_4887_3445897_3.jpg!w450x450.jpg[/img][/align]  离心式低温工业冷冻机在运行时需要注意操作盘上电流表的读数,建议不要超出规定值,为了保障离心式低温工业冷冻机的运行,压缩机吸气口温度应比蒸发温度高1-2℃,高不超过15℃,压缩机排气温度不超过60-70℃ ,否则会引起冷却水的变质,造成冷却水系统的损坏。  离心式低温工业冷冻机冷凝器除了平常的保养外,运行时冷凝温度比冷却水出水温度高2-3℃ ,冷却水进口温度不高于32℃ ,并使制冷剂有2 ℃左右的过冷度。蒸发温度比冷冻水出水温度低2-3℃ ,离心式低温工业冷冻机在满足用户要求的情况下,冷冻水出水温度应取高值。  离心式低温工业冷冻机在油压方面,压缩机的油压应该比吸气压力高0.15-0.2MPa,润滑油温度在45℃以上,油泵温度在60-70℃之间,若高出83℃ 机组会自动停机,冷凝器水侧阻力为0.06-0.07MPa,蒸发器水侧阻力为0.05-0.06MPa。正常运行的离心式低温工业冷冻机机组运行平稳,无异常声响和振动,电压电流与机组铭电压电流相符,过高或过低都会影响低温工业冷冻机的安全运行。  离心式低温工业冷冻机压缩机有有点也有缺点,优点就是叶轮转速高,输气量大,单机容量大,易损件少,工作可靠,结构紧凑,运转平稳,振动小,噪声低,制冷剂中不混有润滑油,蒸发器和冷凝器的传热性能好。  但是,离心式低温工业冷冻机单级压缩机在低负荷时会出现“喘振”现象,在满负荷运转平稳,同时对材料强度,加工精度和制造质量要求严格。当离心式低温工业冷冻机运行工况偏离设计工况时效率下降较快,制冷量随蒸发温度降低而减少幅度比活塞式快。还有,离心负压系统,外气易侵入,有产生化学变化腐蚀管路的危险。  离心式低温工业冷冻机在温度较低的环境中运行的话,应适当减少投入运行的冷却风机台数,以便提高冷却水的回水温度。

  • 【分享】真空冷冻干燥机的工作原理

    真空冷冻干燥机的工作原理真空冷冻干燥机开机后将物料投入物料箱内进行冷冻.物料的冷冻过程.一方面是真空系统进行抽真空把一部分水份带走;另一方面是物料受冻时把某些分子中所含水份排到物料的表面冻结.达到冷冻要求后,由加热系统对物料加热干燥,通过抽真空把物料中所含的水份带到冷冻捕集箱结冻,达到物料冷冻干燥要求.

  • 【原创大赛】超微结构保存更好——高压冷冻与冷冻替代样品制备技术

    【原创大赛】超微结构保存更好——高压冷冻与冷冻替代样品制备技术

    最近一直在摸索着用高压冷冻和冷冻替代样品制备技术,刚开始做的时候冰晶特别严重,如下图Hela细胞。冰晶已经把细胞超微结构破坏的不行了。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231539_611900_2423894_3.jpg经过很长时间的摸索,得到以下制样方法:1 取样1.1 培养细胞:取适量的细胞悬浮液,低速离心成细胞团,去上清,细胞团呈米糊状,用移液枪取适量细胞,填满Carrier,加入适量冷冻保护液1-Hexadecene,滤纸吸取多余水分,使冷冻保护液液面略高于Carrier(Carrier用丙酮清洗,然后在空气中晾干,用1-Hexadecene浸泡备用)。1.2 小鼠肝脏:从活体上取出的组织,先用锋利的刀片在低温下切成尽可能薄片状,从中挑选合适的部分切下来,然后装入Carrier,加入适量冷冻保护液1-Hexadecene,滤纸吸取多余水分,使冷冻保护液液面略高于Carrier。2高压冷冻高压冷冻仪在使用前,要先做一些准备工作:要先加入足够的液氮,并加入压力液甲基环己烷,然后用空载的carrier高压冷冻三次,保证高压冷冻仪在最佳工作状态。2.1 将上述装有样品的carrier快速安置到高压冷冻仪,准备高压冷冻。2.2 高压冷冻样品,迅速把样品冷冻下来,并做好记录。通过高压冷冻仪冷冻样品后产生的冷冻速度和压力变化曲线,可以选择冷冻效果较好的样品继续下面实验。2.3 转移样品,首先把现配的替代液1%锇酸(0.5g锇酸溶于50mL丙酮)分装到2mL冻存管中,迅速放入液氮冷冻备用,冷冻过程中保持冷冻管直立。与此同时,冷冻替代仪加满液氮,将自制的冻存管架放入样品腔,预冷至-100℃。用预冷的镊子,在液氮下将Carrier分别装入冻存管,冻存管盖不宜拧的过紧,然后迅速转移到冷冻替代仪样品腔室的冻存管架里。3 冷冻替代 步骤 温度 时间 1 -100℃ -90℃ 4h 2 -90℃ 72h 3 -90℃ -60℃ 8h 4 -60℃ 8h 5 -60℃ -30℃ 4h 6 -30℃ 8h 7 -30℃ -20℃ 2h 8 -20℃ 8h 9 -20℃ 4℃ 2h 10 4℃ 1h 温度达到4℃后,用4℃的丙酮浸洗样品3次,每次15分钟。此过程中,会有部分样品与Carrier分离,若还有没分离的可以用解剖针将样品从Carrier中剥离。4 渗透包埋分别用以下渗透液渗透。 步骤 渗透液 浓度 时间 1 Epon812/丙酮 1:1 1.5-2h 2 Epon812/丙酮 3:1 6-12h 3 Epon812 100% 1h 4 Epon812 100% 8h 5 Epon812 100% 1h然后将样品转移至包埋槽,60℃烘箱聚合48h。5 超薄切片把两种生物样品对应的每一个包埋块分别超薄切片,各捞两个铜网,并染色。6 电镜观察观察细胞内超微结构保存情况,对感兴趣区域拍照。终于有所改善,如下图的小鼠肝脏细胞,轮廓十分清楚,结构保存完好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611895_2423894_3.jpg局部放大后观察,能看见核孔,双层核膜,甚至是膜的磷脂双分子层结构(这是在常规化学固定制样中很难看到的),看到这些让人激动不已。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611894_2423894_3.jpg碰巧看见一个正在分裂的线粒体。线粒体脊很清楚,双层膜紧挨着,不像常规制样间隙那么大。另外,线粒体基质保存完好,所以线粒体整体较细胞基质反差大。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611893_2423894_3.jpg以下是常规化学固定制样的结果,可与上面高压冷冻及冷冻替代制样技术结果对比:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231644_611928_2423894_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609

  • 冷冻蚀刻技术相关

    各位老师,你们好!我想了解一下做冷冻蚀刻的相关的东西。文献中基本介绍的方法,具体用的仪器和过程都没有涉及。哪位老师做这方面的研究,还请赐教!

  • 关于冷冻切片机

    冷冻切片机 仪器价格: 12万元 购置日期:2001年 仪器所在地:中医肝病研究所实验室 联 系 人: 顾宏图 联系电话: 51322444 收费标准: 暂未定 开放时间: 8:00~17:00 仪器简介: 徕卡CM1850是应用于组织学和临床组织病理学的一种快速低温恒冷切片机,它是将切片机置于冷冻室以外的低温恒冷切片机。CM1850的特色之一是具有宽敞的冷冻室,快速冷冻室可同时存放多达10个样品,并和一个可持续冷却的吸热器相连,以保证样品托上的样品快速冷却。切片刀温度可冷却到-35℃,样本可以快速冷冻到-40℃。切片机有狭槽盖防护,避免残渣进入机器内部。增强绝热性能(真空面板)及温度控制系统,减低压缩机运作费用及提高耐用性,比传统绝热系统使用寿命长,可以保证冷冻箱温度,例如:在35℃室温保持-35℃。同时可以做到电脑诊断维护。高质量无焊接缝的不锈钢冷冻室表面光滑利于清洁和防止污染。切片机配备双速马达驱动粗进,控制键布置在左方靠手,符合人工学原理。具备自动及人工除霜功能。独特设计的玻璃反卷板可保证连续的切片。切片机具备方便的调节功能,可快速及精确对样本切片定位。切片机推进系统运作平稳、流畅,切片厚度为1~60μm,切片精度可达1μm,最大样品直径55mm。 应用范围 可提供各种冰冻切片服务。 目前应用于: 1. 为快速病理诊断提供冰冻切片。已成为癌症诊断的重要工具。 2. 细胞学:显示脂肪、脂类以及特种组织成份。 3. 免疫细胞化学、免疫组织化学和分子生物学技术等研究工作。 4. 神经生物学研究。 5. 常规组织胚胎学研究。 6. 皮肤病理学研究。 7. 动脉血管外科学研究。 同类仪器情况 : 中药研究所: SPOCTRA MXA190 2002年 倪跃元 解剖实验室: LION 1998年 余安胜 张建华

  • 南科大冷冻电镜中心正式揭牌,将成为中国规模最大的冷冻电镜设施中心

    2018年11月19日,南方科技大学冷冻电镜中心揭牌仪式在南科大生物楼举行。2017年诺贝尔化学奖获得者、冷冻电镜技术开创者之一Richard Hendersen,深圳市发改委副主任蔡羽,南方科技大学校长陈十一,中国科学院院士隋森芳等出席仪式。[align=center][img=1.png]https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/b83644de-356d-4e5f-9341-72a1a5e4725a.jpg[/img][/align][align=center]揭牌仪式现场[/align]南科大冷冻电镜中心是深圳市政府出资、我校牵头建设的重大基础科学设施平台,旨在支撑深圳市、粤港澳大湾区及中国南方在生物医药、精准医学、新能源新材料方面的科学研究及产业升级。南科大冷冻电镜实验室拟安装300千伏冷冻电镜6台,200千伏冷冻电镜2台,120千伏电镜2台,共计10台冷冻透射电子显微镜及其它71台/套相关辅助仪器和样品制备设备,全部建成后,将是我国配套最齐全、最先进的冷冻电镜实验室。经过一年多的前期准备工作,目前项目一期的2台300kv冷冻电子显微镜已经完成安装调试,投入使用。冷冻电镜技术改变了许多生物领域的研究方式,使得诸多研究能够快速取得重大突破。冷冻电镜技术已成为结构生物学研究的利器,这项技术克服了生物分子结构解析中的许多难点,被诺贝尔奖官方称为“使得生物化学进入一个新时代”。[align=center][img=2.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/7a1b61e0-a88d-4542-9e00-fb3cdc96a122.jpg[/img][/align][align=center]陈十一致辞[/align]陈十一在仪式上致辞,他代表南科大对与会嘉宾的到来表示欢迎,对深圳市委市政府对南方科技大学冷冻电镜中心的支持表示感谢,同时也对冷冻电镜中心负责人王培毅和工作人员前期的辛勤工作表示肯定。他表示,未来几年,冷冻电镜中心将致力于把基础知识和药物开发结合起来,在深圳的工业发展中扮演重要角色。南科大将以此为契机,秉承和发扬“敢闯敢试、求真务实、改革创新、追求卓越”的创校精神,为深圳市社会和经济的发展继续贡献力量。[align=center][img=3.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/17b55b90-20aa-4b77-85b2-0fddf9d79466.jpg[/img][/align][align=center]Richard Henderson致辞[/align]Richard Henderson在致辞中对南科大冷冻电镜中心的落成表示祝贺,并表示为这个优秀的冷冻电镜中心的建立感到由衷高兴。他指出,南科大冷冻电镜中心落成之后,将会成为全球最大的三个冷冻电镜中心之一,另外两个分别在美国和英国。目前,世界上大概有100个类似的研究机构,南科大冷冻电镜中心落成之后,其研究能力将会达到全球的前5%,对相关科研领域的研究产生更大的影响。[align=center][img=4.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/524b4e7f-e049-43a5-8cb4-e08283ee6ed4.jpg[/img][/align][align=center]蔡羽致辞[/align]蔡羽表示,南科大冷冻电镜中心是生命科学、新材料、新能源领域基础性、关键性的重大科研设施,填补了深圳市、广东省、中国南方地区在该领域的空白,为我市及地区相关领域内的科学研究及产业升级转型提供了支撑平台,希望冷冻电镜中心为深圳市、粤港澳大湾区的产业升级及进一步经济社会全面发展提供新的动力源泉。随后,冷冻电镜中心负责人王培毅、Richard Henderson、蔡羽、隋森芳共同为南方科技大学冷冻电镜中心揭牌。Thermofisher Scientific亚太区材料与科学事业部总经理Marc Peeters、Thermofisher Scientific公司代表Jonathan Jing、中国航天科工深圳航天工业技术研究院董事长崔玉平、中国国际金融集团董事总经理陈十游也在仪式上致辞。南方科技大学第二附属医院、深圳市第三人民医院院长刘磊,加州大学洛杉矶分校教授周正洪,加州大学旧金山分校教授程亦凡,牛津大学教授章佩君等参加了揭牌仪式。冷冻电镜发展国际研讨会也于同日在南科大图书馆111报告厅举行。

  • 清华大学Nature Methods发文:新型的冷冻电镜三维重构算法

    清华大学Nature Methods发文:新型的冷冻电镜三维重构算法

    蛋白质是生命体的最主要组成元素,作为一种生物大分子机器,蛋白质功能的实现高度依赖于其复杂的三维原子结构。了解蛋白质的结构及其与功能的关系对探索生命的基本原理,理解疾病的分子机制以及药物的研发具有重要的意义。[align=center][img=,500,284]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812131109255316_9391_3224499_3.jpg!w500x284.jpg[/img][/align][align=center]基于粒子滤波的三维重构算法示意图。[/align]冷冻电子显微镜,简称冷冻电镜,使用电子束作为光源,是一种能在原子分辨率水平上观察并测定蛋白质分子结构的有力工具。伴随着最近几年的技术突破,冷冻电镜三维重构技术成为测定蛋白质及其复合物结构的关键技术。冷冻电镜三维重构的基本方法是,首先利用冷冻电镜对冷冻于液氮温度的生物大分子颗粒进行成像,以获得数万到数百万张生物大分子照片,然后通过一定的算法来整合这些图像,计算出生物大分子的三维结构。这其中三维重构算法是核心内容,用于测定出每一张照片的诸多参数,例如空间取向,然后才能将二维的照片整合重构出三维的结构。因为照片的数量巨大,且图像信号极其微弱,如何精确计算测定每张照片的参数,以达到超过0.4甚至0.2纳米的分辨率,一直以来都是冷冻电镜技术研究的重点和难点。来自清华大学生命科学学院的研究人员发表了题为“A particle-filter framework for robust cryoEM 3D reconstruction”的文章,介绍了一种基于粒子滤波的鲁棒的冷冻电镜三维重构算法框架,这种方法通过将电子工程应用中的粒子滤波算法引入到冷冻电镜三维重构中,大幅提高了对系统参数的搜索能力和对系统误差的容忍度;通过进一步融合高性能计算的方法,最终实现了对生物大分子结构高效高精度的三维重构。这一发现公布在11月30日的Nature Methods杂志上,由清华大学生命科学学院李雪明研究组,电子工程系沈渊研究组和计算机系杨广文研究组合作完成。第一作者为胡名旭,余洪坤和顾凯。同期他们开发的THUNDER冷冻电镜三维重构软件系统集成了这些新算法和新特性,为未来冷冻电镜海量图像数据的实时分析,以及大规模的自动化应用提供了一个可靠的算法和软件基础;同时,也为解析接近原子分辨率的生物结构提供了一套鲁棒、快速的解决方案,显著降低了对用户经验的要求,益于冷冻电镜技术的广泛普及,助力在原子尺度上对生命活动进行观察。为了获得一个更有效的算法和计算系统以满足未来高分辨率和大规模应用的需求,李雪明研究组联合电子系沈渊和计算机系杨广文研究组,利用清华大学生物学科和信息学科交叉的优势,将电子工程领域的粒子滤波算法引入到冷冻电镜的图像重构参数搜索中去,发展出一套比现有算法更完善、更有效的贝叶斯统计推断算法。这套新算法对高维参数的搜索具有更好的鲁棒性,可以自适应地进行参数的自动调整,以及通过引入一套新的权重机制大幅提高了对系统误差的容忍度。这些优势的整合,使整个系统具有很好的鲁棒性,更适用于未来自动化的运行工作模式。同时,在算法的实现过程中,深度融合了大规模并行计算的思路和方法,从而使整个系统具有极高的运算效率,和近乎理想的并行计算性能。未来该系统将能够高效运行于小到一个工作站,大到“太湖之光”这样的超大规模计算系统,适应生命科学研究和药物设计的大量结构测定需求。这项工作是三个不同学科研究组交叉研究的阶段性成果,团队正在利用新型的统计推断和机器学习算法将这一工作扩展到对细胞或者细胞器结构的原子分辨率三维重构上去。未来的冷冻电镜技术将使人们不必再借助于复杂的生物化学手段来提取蛋白质,而是利用冷冻电镜直接在细胞中对包括蛋白质在内的生物大分子的原子结构和动态变化进行观察和分析,探索生命活动的本质原理,设计能够治愈疾病的药物,造福人类健康。

  • 水溶性颗粒剂的制备方法

    水溶性颗粒剂的制备方法一、水溶性颗粒剂的制备方法提取方法因中药含有效成分的不同及对颗粒剂溶解性的要求不同,应采用不同的溶剂和方法进行提取。多数药物用煎煮法提取,也有用渗漉法、浸渍法及回流法提取。含挥发油的药材还可用“双提法”。1.煎煮法系将药材加水煎煮取汁的方法。一般操作过程如下:取药材,适当地切碎或粉碎,置适宜煎煮容器中,加适量水使浸没药材,浸泡适宜时间后,加热至沸,浸出一定时间,分离煎出液,药渣依法煎出2-3次,收集各煎出液,离心分离或沉降滤过后,低温浓缩至规定浓度.稠膏的比重一般热测(80-90℃)为1.30-1.35。为了减少颗粒剂的服用量和引湿性.常采用水煮醇沉淀法,即将水煎煮液蒸发至一定浓度(一般比重为1:1左右),冷后加入1-2倍置的乙醇,充分混匀.放置过夜,使其沉淀,次日取其上清液(必要时滤过),沉淀物用少量50%-60%乙醇洗净,洗液与滤液合并,减压回收乙醇后,待浓缩至一定浓度时移置放冷处(或加一定量水.混匀)静置一定时间,使沉淀完全,率过,滤液低温蒸发至稠膏状。煎煮法适用于有效成分能溶于水,且对湿、热均较稳定的药材。煎煮法为目前颗粒剂生产中最常用方法,除醇溶性药物外,所有颗粒剂药物的提取和制稠膏均用此法。2.浸渍法系将药材用适当的溶剂在常温或温热条件下浸泡,使有效成分浸出的一种方法。其操作方法如下:将药材粉碎成粗末或切成饮片,置于有盖容器中,加入规定量的溶剂后密封,搅拌或振荡,浸渍3-5天或规定时间,使有效成分充分浸出,倾取上清液,滤过,压榨残液渲,合并滤液和压榨液,静止24小时,滤过即得。浸渍法适宜于带粘性、无组织结构、新鲜及易于膨胀的药材的浸取,尤其适用于有效成分遇热易挥发或易破坏的药材。但是具有操作用期长,浸出溶剂用量较大,且往往浸出效率差,不易完全程出等缺点。3.渗漉法系将经过适宜加工后的药材粉末装于渗漉器内,浸出溶剂从渗漉器上部添加,溶剂渗过药材层往下流动过程中浸出的方法。其一般操作方法如下:进行渗漉前,先将药材粉末放在有盖容器内,再加入药材量60%-70%的浸出溶剂均匀润湿后,密闭,放置15分钟至数小时,使药材充分膨胀以免在渗漉筒内膨胀。取适量脱脂棉,用浸出液湿润后,轻轻垫铺在渗漉筒的底部,然后将已润湿膨胀的药粉分次装人渗漉筒中,每次投入后均匀压平。松紧程度根据药材及浸出溶剂而定。装完后.用滤纸或纱布将上面覆盖,并加一些玻璃珠或石块之类的重物,以防加溶剂时药粉浮起;操作时.先打开渗漉筒浸出液出口之活塞,从上部缓缓加入溶剂至高出药粉数厘米,加盖放置浸渍24-48小时,使溶剂充分渗透扩散。渗漉时,溶剂渗入药材的细胞中溶解大量的可溶性物质之后,浓度增高,比重增大而向下移动,上层的浸出溶剂或较稀浸出溶煤置换其位置,造成良好的细胞壁内外浓度差。渗漉法浸出效果及提取程度均优于浸渍法。渗漉法对药材粒度及工艺条件的要求较高,一般渗漉液流出速度以1kg药材计算,慢速浸出以1—3ml/min为宜;快速浸出以3—5ml/min为宜。渗漉过程中,随时补充溶剂,使药材中有效成分充分浸出。浸出溶剂的用量一般为1:4—8(药材粉末:浸出溶剂)。4.其它(1)动态温浸工艺:将原药材破碎到规定粒度.使药材与溶媒有效接触面积扩大.在适当的温度范围内保持恒温;用机械搅拌促进流动,实现药材界面内外浓度差,有利于有效成分快速浸提,而低温温浸,药液不沸腾,避免了淀粉的过分裂解糊化.既方便了固液分离和离心除杂,又避免了水蒸气共沸蒸馏成分的损失。因此,动态温浸工艺与传统的静态沸腾提取工艺相比,具有提取效率高,保存有效成分多,缩短工时,降低耗能等优点。(2)超速离心除杂与超滤除杂技术:与传统的醇醉沉除杂工艺相比,超速离心与超滤(采用微孔滤膜,经加压滤过)除杂技术,避免了具有免疫调节作用的多糖和肽类成分的损失,天然成分保留较完全,既使中药汤剂的特色得到发挥,同时又缩小了剂量,制得的颗粒质量高.稳定性好”。(二)浓缩、干燥技术药材中指标成分提提取后,制成原颗粒之前应得到流动性粉末为宜,因此提取液必须浓缩与干燥,需要一定温度除去水,伴随有效成分的损失与破坏。如长瓣金莲花的水煎液常压浓缩1小时、16小时及26小时,总黄酮含量分别降低6.25%、20%及39%,时间越长有效成分破坏越多。又如采用常压浓缩或减压浓缩制备三黄泻心汤干浸膏,结果成品中番泻苷、黄芩苷的含量降低了23%-94%,改用逆渗透液缩和喷雾干燥技术,含量仍降低1%—6%,当归芍药汤的汤液作成软膏后.其仓术醇和β-桉醇含量分别只有原药材的0.04%和0.14%。通常浓缩最简易是采用真空度1.33kPa(即10mmHg),温度约40℃即可,若采用薄膜浓缩、离心薄膜浓缩则效率可提高,且可降低对有效成分的影响。浓缩液一般浓缩到20%—50%,进行干燥,喷雾干燥操作简便、速度快,产品细度均匀,干燥过程液滴干燥的实际温度仅35-50℃,在几秒或十几秒钟完成,被干燥物料不致发生过热现象,不耐热或对热不稳定的成分不致破坏,如大黄浓缩液以进风温度20℃、出风温度105℃进行干燥,其番泻苷A几乎不分解,但高于上述温度会分解。大多数中药成分浓缩液的进风温度在110-130℃,出风温度65-80℃,都能喷出流动性好的粉末。近年来,有人认为最佳干燥条件应从控制液温和浸膏粒度大小着手。液滴大小可用激光测定,其原理是激光的折射角能定量地随粒度大小而变化.该平均粒径随着雾化器转速的增加而减小,干浸膏粉末的粒度大小由光学显微镜或库氏测定仪改为精确度高的激光测定,干浸膏粉末粒度和汤液雾滴大小是相互关联的,如庶黄附子细辛汤的干浸膏粉末的粒度比其雾滴直径要小得多。浸膏剂的浓缩与干燥方法很多,最近常用于中药浸膏的浓缩或干燥的新技术有:薄膜浓缩、反渗透法和喷雾干燥、离心喷雾干燥、微波干燥及远红外干燥技术等。现举例说明喷雾干燥与冷冻干燥技术的在中药颗粒剂制备中的应用。1.喷雾干燥与干法制粒工艺该法是将药材浸出液经喷雾干燥制成于浸膏粉,加入辅料.先预压成粗片,然后粉碎成颗粒的一种新工艺。它实现了瞬间干燥,防止了有效成分损失,同时保证了颗粒和性状的均一性,使颗粒具有较稳定的崩解性和溶散性,从而克服了湿法造粒工艺的溶媒残留、变色、储存不稳定等缺点。上海中药制药一厂利用动态水提取和干法制粒工艺,成功地研制出粒度集中、不易粘连的六昧地黄丸(颗粒型)冲剂。2.冷冻浓缩与冷冻干燥技术冷冻浓缩技术是使药液于—5~—20℃低温冷冻,通过不断搅拌使结出冰块成为微粒,然后以离心机除去冰屑而得到浓缩的浸膏。此种超低温浓缩可达到有效成分的高保留率。如桂枝芍药汤中的有效成分桂皮醛,采用冷冻浓缩法可保留该成分为一般真空加热浓缩法的50倍之多。但反潮性强,成本高,未能用于大量生产。小太郎株式会社为了保证成品质量,在生药煎液高真空浓缩后采用冷冻干燥,先降温至—50℃.在高真空下干燥。冷冻浓缩和冷冻干燥技术,可以保证中药挥发性有效成分在生产中不被破坏或损失。

  • 【原创大赛】冷冻食品如何吃?

    [align=left]文/唐三三 (华测检测 食药农化事业部)[/align][align=left]近年来,方便的冷冻食品很受欢迎,特别是忙碌的上班族,更是离不开冷冻食品。市场上销售的冷冻食品的种类很多,有水产类、肉类、蔬菜类、果实及烹调食品等。此外,由于冷冻设备的普及,在家庭中也可用冷冻方法保存食品。随着人们食用冷冻食品的增多,[color=#3c3c3c]很多人出现了这样的困惑,冷冻食品如鸡、鸭、鱼、肉、速冻蔬菜等,解冻后一时吃不完,能不能放回冰箱重新冷冻呢?食品解冻后多长时间内必须吃完?如何正确地解冻食品?本文就这些问题来探讨一下。[/color][/align][align=left][color=#3c3c3c][/color][b]1 解冻食品再次冷冻的弊病[/b]虽然有些人知道解冻食品不能再次冷冻,但[color=#333333]却因为舍不得浪费选择再次冷冻。生活中[/color]经常发生的是人们从电冰箱里取出的冷冻食品或者从市场上购回的冷冻食品, 如冻鱼、冻肉、冻虾、冻禽等, 解冻后一时食用不完又重新放入电冰箱里再次冷冻贮藏。实际上这种做法存在着很多弊病。1.1 降低食品的新鲜程度和营养成分当冻鱼、冻肉等食品从低温的冷冻状态恢复到冰点以上的解冻状态, 其细胞膜遭受到较为严重的损伤, 细胞液大量流失。因此, 重新再冷冻的食品, 其新鲜程度就较原来状态有较大幅度的下降, 营养成分损失较多, 影响食品原有的鲜度和风味。维生素可作为评价冷冻食品营养价值的指标,冷冻食品在冻结中的维生素损失可出现在以下几种情况:在冻结前的热处理过程中水榕性维生素的损失;冻结温度不适当时会造成V c 的损失;长时间的冻结贮藏引起B 族维生素残存率降低。若冻结前的处理、冻结温度、保存方法适当,可以将冻结中维生素损失降低至最小。合适的食品保存法,不仅能安全地保存食品,还能保持食品的营养价值。通常,冷冻食品使用一般的解冻方法,在解冻时常有汁液流失,可溶性营养成分溶解于汁液中,水溶性维生素不可避免地遭到损失,这是冷冻食品在解冻中难以解决的问题。1.2 缩短食品的保存期限食物解冻之后再速冻会促进细菌的繁殖。食物处于冷冻状态的时候,细菌也处于休眠状态。一旦解冻的时候温度慢慢回升,细菌就疯狂繁殖,这时候即使再次速冻,也需要一段时间才能达到凝固状态,这个时间差之内,细菌的数量都不知道翻了多少倍了。由于经过冷冻和解冻的食品细胞膜遭受到损坏,导致汁液流失,温度回升后为细菌和霉菌的生长繁殖提供了良好的环境,食品容易腐败变质。因此, 每解冻一次再重新冷冻, 食品的保存期限就将缩短数天, 即无形中影响了食品应有的保质期。1.3影响人的健康解冻后的食品容易受到细菌和霉菌的污染。据有关医学部门的研究资料表明,食品的再次冻、解冻、特别是肉类反复多次的冷冻、解冻,还容易产生致癌物质。重新冷冻的次数越多,生产的致癌物质的浓度相应就越高,对人体健康的影响也越大。这方面应该引起人们足够的重视和关注。[/align][align=left][b]2 冷冻食品一经解冻要尽快食用[/b]冷冻食品一经解冻要尽快加工食用,不宜存放。如果在常温下存放时间太长,食物很容易变质,还可能引起食物中毒。2.1 冷冻蔬菜冷冻蔬菜存放时间太长,不仅会变色、损失营养、品质下降,也很容易腐烂变质。尤其是在热天,冷冻过的蔬菜,更不宜存放,否则绿叶蔬菜很快会变黄,维生素C也易被破坏。蔬菜放在20℃温度下,比放在6~8℃的温度下,维生素C的分解损失要多2倍。2.2 冷冻肉类一般肉类最容易产生反复速冻的问题。其实我们可以很直观地看到肉类解冻再速冻新鲜程度的降低和营养成分的流失。食品在第一次冷冻的时候,就被挥发了很多水分,解冻的时候又从外吸收一些水分,如果再次速冻,水分又产生循环。肉质在很大程度上已经产生了损伤,味道也会有所改变。其实我们稍微留意一下就会注意到,速冻次数越多的肉,颜色就更惨白,味道更怪异。冷冻的猪肉、鱼、鸡、鸭等肉类,在冷冻时由于水分结晶的作用,其组织细胞便受到破坏。一经解冻,被破坏的组织细胞中,会渗出大量的蛋白质,就成了细菌繁殖的养料。如果存放时间太长,食品里的细菌和酶的活力恢复后,不仅能很快繁殖分解蛋白质引起变质,还能产生有毒的组胺物质,引起食物中毒。有实验表明,将经冷冻1天的鱼,放在30℃温度下6小时,其腐败速度要比鲜鱼快1倍。2.3 冷冻鸡蛋将冷冻的鲜鸡蛋解冻后,放在0~15℃温度下达10天以上,不但卵膜变松、蛋清稀薄,而且还会粘壳、散黄,甚至霉变、发臭,不能食用。将解冻的蛋黄放在18℃温度下2小时,细菌数增加的速度比新鲜鸡蛋黄要快约2倍。[/align][align=left][b]3 正确的解冻方法[/b]1)不要在解冻肉类、鱼类和海鲜的时候,将其放入温水中解冻。一旦接触到温暖的环境,细菌滋生的速度将提高很多倍,所以在解冻的时候最好是让它在常温下自行解冻;2)当你用微波炉对肉类和鱼类进行解冻后,就不要再次冷藏了,否则肉质的口感将会完全丧失。比如鱼肉会变得非常易碎,就像是生面粉一样;3)当塑料包装的食品放在冷水里解冻后,如果解冻时间超过30分钟,最好不要再次冷藏。因为这可能会破坏食物的组织,导致营养流失。其中牛肉最为明显,经过二次解冻后,牛肉会明显出现肉质变老的情况,很难将其炖软;4)对于熟食来说,最好是在半小时内进行再次冷藏,否则冷藏的过程中就会有变质的风险。其实熟食最好不要冷藏,因为大部分的熟食在烹饪的时候仅仅只是加热而已,所以一旦感染细菌,通常是无法彻底消灭的。熟食还是当天吃当天买,吃多少买多少,这样比较安全。因此, 为了便于食品的冷冻和取存,提高食品的冷冻质量,平时生活中可采用补救措施,在冷冻之前,将食物分成一小份一小份的,且以小包装形式包装、冷冻,这样每次食用多少就可取出多少,不宜解冻之后重新再放入冰箱里冷冻贮藏。不过,还要提醒一下,即使是未解冻的冷冻食物,放太久也绝不是一件好事,因为它会影响食物的营养价值。有媒体报道过,一般冷冻的肉最好一个月左右食用完毕,冷冻时间太久的肉通常细菌都已经全面超标,甚至开始变质。[/align]

  • 微生物菌种的冷冻干燥和低温冷冻保藏技术规程

    1 范围本规程规定了冷冻干燥和低温冷冻保藏技术的定义、原理、技术要求、方法与步骤。本规程适用于普通病毒、细菌、放线菌、酵母菌、丝状真菌及担子菌等微生物菌种的保藏。对于病原微生物及其他需要特殊操作技术的微生物的参见相应的技术规程。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本规范的引用而成为本规范的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本规范,然而,鼓励根据本规范达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本规范。国务院令第424号《病原微生物实验室生物安全管理条例》 GB 19489 实验室生物安全通用要求科技部自然科技资源平台联合管理办公室文件自然科技资源共性描述规范(试行)3 术语和定义下列术语和定义适用于本规范。3.1冷冻干燥 freeze-drying 将微生物冷冻,在减压下利用升华作用除去水分,使细胞的生理活动趋于停止,从而长期维持存活状态。3.2液氮超低温保藏 preservation in liquid nitrogen 液氮超低温保藏技术是将菌种保藏在-196℃的液态氮,或在-150℃的氮气中的长期保藏方法,它的原理是利用微生物在-130℃以下新陈代谢趋于停止而有效地保藏微生物。3.3 -80℃低温冷冻保藏 preservation in -80℃将菌种保藏在[

  • 【分享】冷冻干机的发展方向

    目前国产冻干机与国际上生产的冻干机性能正逐步缩小,主要差距在能耗、质量和生产率上。因此,国产冷冻干燥设备的研究方向和发展趋势还得注重以下几点:1、 优化设计,降低成本,减少能耗 国外有些冻干机不采用不锈钢制造,而采用低碳钢涂覆食品用可烘干树脂,涂层厚度为0.12-0.20mm,在室温下就会发出红外线。搁板表面涂高性能远红外发射材料,增强其辐射能力;料盘表面处理,增强其吸热能力。料盘在两块辐射搁板之间有一最佳位置,而不是取中间位置,因此应优化设计。捕水器的结构、尺寸、结霜特性的优化更有实际意义,因为它的造价目前几乎相当于冻干箱的造价,且其运转功耗也较大。2、保证质量,提高性能 质量主要包括外观、元器件的寿命和可靠性等;另外,国产冻干设备大都是非标准化产品,而标准化是提高质量,降低成本,增强互换性的有力保证,因此,必须实现标准化。有的厂家生产的冻干机从安装好之后,一直不能投入正常生产;有的冻干机虽然能生产,但能耗太高,生产的产品越多,赔钱越多;还有的元器件不断出现故障,影响正常生产。因此,冻干机的质量必须保证,可靠性要提高。要提高冻干机的性能,除了保证加热速率、抽气速率、温度均匀性还应增强设备新的功能。例如增加冻干结束的判断功能,最简单的办法是称重法。3、开发连续式冷冻干燥设备当前国内生产的冻干设备基本上都是间歇式的,随着消费观念的进步,冻干产品的需求量加大,这就要求设备的生产率进一步提高,能耗进一步降低,开发连续式冻干设备成为必然发展趋势。4 、、开发适合食品冷冻加工的真空冷冻干燥装置 从生产工艺流程看,真空冷冻干燥设备所需的原料预处理、冻结装置、制冷系统、加热系统,一般的食品加工企业都有。增加真空冷冻干燥设备,只须增加干燥箱、冷阱、真空泵组及控制系统,对原有制冷设备及水、电、汽、动力资源进行稍加改造即可。目前国内食品冷冻加工厂都存在工艺设备齐全、生产任务不足、设备闲置的情况,增加真空冷冻干燥设备,对食品进一步深加工,可提高产品附加值,扩大企业的经营领域。充分利用原有设备,节省投资,提高企业的技术水平和产品技术含量,提高经济效益。5、 进一步提高卫生标准 从发展的眼光看,随着人民生活水平的提高,人们对冻干产品的卫生要求将进一步提高,再加上国际上冻干设备的走势,这就要求国内厂家对冻干设备的消毒杀菌、卫生管理等提出更严格的要求。近年来西方国家在食品生产企业开始推行HACCP系统,对食品加工设备的消毒杀菌、卫生管理等提出了更加严格的要求。以此为契机,日本许多厂家纷纷将原有镀锌钢板的真空干燥室改为不锈钢真空室,因为在向真空室通蒸汽进行灭菌的过程中,镀锌层会与60-80℃的湿热蒸汽发生反应生成微粉,污染食品。冻干设备的服役期一般为20—25年,考虑到HACCP系统迟早将进入中国,因此我国冻干机产业的厂家应未雨绸缪,尽早做好准备。

  • 冷冻机品牌的四通阀怎么更换?

    冷冻机品牌的四通阀在经过长时间使用之后就需要及时跟换了,那么具体怎么跟换呢?如果用户朋友不知道怎么更换的话,可以看看怎么更换的。冷冻机品牌在更换的时候,需要先取下连接压缩机排气管和吸气管的连接管道,由于冷冻机四通间上连接冷凝器和三通阀的管道距离较近,不容易从管口中取出, 因此应先取下连接压缩机排气管和吸气管的管道。接下来取下连接三通阀和冷凝器的连接管道,使用冷冻机品牌焊炬同时左右加热四通阀连接三通阀和冷凝器管道接口,当2个管口发红,焊料开始流动时,使用钳子夹住四通阀连接压缩机排气管的管道向上提,当2个管口达到一定温度且连接管道松开时, 即可取下四通阀。冷冻机品牌需要注意,焊接四通阀管口时温度过高, 容易将阀体内的塑料阀块损坏, 因此应使用毛巾包裹阀体降温, 而阀体的温度是通过根部的3根管道传递, 应首先包裹根部的3根管道。由于连接压缩机排气管的管道距离四通阀阀体较远,焊接时温度不会损坏内部的阀块,因此不用使用毛巾包裹管口。安装四通阀阀体的时候,可以使用焊枪加热连接四通间根部3根管道的管口,使表面剩余焊料充分熔化、流动直至掉下,使管口表面光滑,这样能顺利插入至四通阀管口。 因焊接时难点在于根部的3个管道,可将连接压缩机排气管的管道扳到一边,待焊接3个管口后再焊接连接压缩机排气管的管口。由于四通间中间管道难焊接, 应首先焊接中间管道, 再焊接两侧管道,接着焊接连接 压缩机排气管的管道,安装和焊接接连压缩机排气管管口之后,四个接口焊接完成啦安装完冷冻机品牌的四通阀之后,需要注意制冷系统的捡漏工作,捡漏结束再投入使用。

  • 【分享】冷冻真空干燥机使用说明

    基本原理 高真空状态下,利用升华原理使预先冻结的物料中的水份直接从冰态升华为水蒸汽而被除去,从而使物料干燥。 真空冷冻干燥广泛应用于多种产品,可确保物品中蛋白质、维生素等各种营养成份,特别是那些易挥发热敏性成份不损失,因而能最大限度地保持原有的营养成份。还能有效防止干燥过程中的氧化,可以避免营养成份的转化和状态变化。冻干制品呈海绵状、无干缩、复水性好、含水份极少,相应包装后可在常温下长时间保存和运输。 操作步骤 1、系统准备 检查系统是否清洁和干燥,真空泵与冷冻机是否连接,接通电源,检查排气口、冷冻管的密封性。 2、加样 样品需要预冷到至少-40℃,可以在深低温冰箱(-70℃)或者液氮(-196℃)中进行。打开密封管开关,搬开冷冻舱,将样品置于冷冻舱里的隔板上。关闭密封管开关。 3、冷冻 打开冷冻开关,等待20~30分钟,直到冷冻舱的温度低于-40℃。 4、抽真空 打开真空泵开关,等待10~15分钟,直到系统压力低于100 millitorr。 5、监控过程 确保系统参数(冷冻温度、真空压力)在正常范围内; 定期检查冷冻舱中的结冰情况,决定是否要除霜; 观察样品是否干燥完全,一般干燥过程需要24~72小时,视具体样品通过目测而定。 6、关闭系统 关闭总开关,接上排气管或打开密封管开关以解除真空状态。 关闭真空开关,关闭冷冻开关,取出样品。 7、系统维护 除霜:冷冻舱下面的压缩舱内如果有霜,则接上排水管,然后用少量热水(不能超过压缩舱容积的一半)促进冰霜的融化。不能通过敲击冰块来除霜。 除湿:压缩舱、冷冻舱、真空泵压缩机以及垫圈等表面的水雾均需擦干。 清洁:压缩舱、冷冻舱可以用温和的去污剂或苏打水来清洗,然后干燥并撤去排水管,并重新密封排水孔。 泵油:定期检查油位,排除油雾。

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