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蛋白分离纯化系统

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蛋白分离纯化系统相关的方案

  • 牛初乳粉中IgG蛋白的分离纯化及检测方法
    免疫球蛋白G,即抗体,是免疫系统用来识别和中和病原菌和病毒等异物的Y型大蛋白,在生物学上十分重要。Protein G可以结合哺乳动物IgG,与其蛋白结构上的Fc片段进行特异性识别。因此可以选用月旭Welchrom? Protein G Tanrose 4FF(5mL,00081-12012)来分离纯化牛初乳粉中的IgG蛋白、Welchrom? BC-10重力柱(8.3mL,00051-32022)提高纯度,并采用月旭Xtimate? SEC-300(7.8*300mm,5um)进行色谱检测分析实验结果。
  • 蛋白纯化产品解决方案
    对于重组蛋白的分离纯化,一般都会在进行载体构建时,选择N端或C端加上一个标签,如GST,HIS6,FLAG和MBP等,带了这些标签的蛋白就可以通过亲和吸收的填料来到达初步纯化的目的,亲和纯化相对简单,带有标签的蛋白就会吸附到相应的填料上,而不带标签的蛋白会直接流出,简单的清洗杂蛋白后,只需要再把吸附在上面的蛋白洗脱下来即可,几乎不需要摸索分离纯化的条件。含有所需蛋白的分泌液或者裂解液一般体积都相对比较大,最好使用蛋白存化系统(Clear First 2000)的上样泵上样;进完样后,进行杂蛋白的清洗,再用特异的洗脱液将蛋白洗脱,通过自动接收器接收分离后样品即可,整个过程基本可以实现自动化操作。
  • 蛋白的分离纯化--选择分离材料
    以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中,如盐析,有机溶剂提取,层析和结晶等;二是将混合物置于单一物相中,通过物理力场的作用使各组分分配于来同区域而达到分离目的,如电泳,超速离心,超滤等。在所有这些方法的应用中必须注意保存生物大分子的完整性,防止酸、硷、高温,剧烈机械作用而导致所提物质生物活性的丧失。蛋白质的制备一般分为以下四个阶段:选择材料和预处理,细胞的破碎及细胞器的分离,提取和纯化,浓细、干燥和保存。
  • 蛋白质的纯化和鉴定
    蛋白质的产率和纯度是衡量纯化是否成功的重要指标。除有效的色谱分离外,配置良好、可靠的仪器也能影响纯化的成功。制备型反相(RP)液相色谱由于具有高分离能力,经常被用做多肽和小分子亲水蛋白纯化流程的最后一步。虽然大家都知道反相液相色谱所用的溶剂条件会使蛋白结构变性,但也能通过调节适当的条件再使其复性,特别是小分子蛋白。Agilent 1100系列纯化系统是设计良好、合适的反相色谱的系统。
  • 抗抑郁药物临床机制研究-膜蛋白免纯化互作检测
    使用MST技术检测跨膜蛋白TRKB与脑胆固醇和抗抑郁药物的结合。其中跨膜蛋白TRKB并未纯化,直接将过表达GFP-TRKB的HEK293T细胞裂解后取上清。以GFP-TRKB融合蛋白作为荧光信号源,进行MST检测。
  • 使用Biotage Isolera 中低压制备液相色谱进行抗蛋白酶降解多肽纯化
    基于蛋白水解酶的催化机制以及蛋白酶抑制剂的结构特点,作者提出了一个长效肽的设计思路。选择了LRHR拮抗剂为模拟化合物,为别再N端和5位,N端和6位进行了氨基酸的修饰和替换。耐士科技作为Biotage中国区总代理,以最优质的服务提供Biotage全系产品。Biotage Isolera 系列是世界上最智能的快速纯化系统,它拥有自己独创的智能参数设置,共有3个系统,多种配置可选。可以让化学家们轻松地完成对从mg级到150g以上样品 的更好的分离。创新的TLC-to-gradient专利技术可以根据薄层层析色谱的数据自动产生适合样品的溶剂洗脱梯度,并建议适合该样品量的色谱柱。通过双波长检测收集馏分,最多可以在单一梯度下同时使用四种溶剂进行洗脱,以达到最大限度提高纯度和收率的目的。通过梯度优化功能,可以实现加大上样量同 时减少溶剂使用量。
  • 应用 Agilent MassHunter Easy Access 软件对模式治疗性蛋白进行批次间纯化分析
    本应用简报介绍了如何像生物分析科学家在典型生物药理学环境下进行纯度分析那样,使用 Agilent Easy Access 软件来分析模式治疗性蛋白的批次间纯度。分析模式治疗性蛋白的批次间纯度时,将 Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统与 Agilent 6530 精确质量Q-TOF LC/MS 联用,并通过 Agilent Easy Access 软件进行数据分析。LC/MS 平台拥有卓越的色谱分离度和质量精度,结合强大的数据处理能力,可简便、快速地分析批次间的蛋白纯度。本应用简化了工作流程,使用者可以快速做出决策,以作进一步的下游处理。该软件可用于比较蛋白谱图,从而确保监管机构要求的批次一致性。此外,该软件还有助于了解工艺放大或生产过程中纯化后蛋白的杂质谱图。该数据可帮助开发生物仿制药的公司在产品上市前评估其产品与原始药物的相似度,重要性不言而喻。
  • Opentrons 磁珠蛋白纯化工作站
    Opentrons OT-2 磁珠蛋白质纯化工作站基于磁珠提取原理,可以自动化完成小规模蛋白质纯化和蛋白质组学样品处理。磁珠蛋白质纯化工作站可以支持多种工作流程。
  • 蛋白纯化应用案例二
    仪器:Clear-First蛋白3000。样品:BHb(牛血红蛋白)、BSA(牛血清白蛋白)、脂肪酶的混合样品,3种蛋白均为2mg/mL。其中BHb购自国药,BSA购自世泽生物,脂肪酶购自沃凯。上样量:1 mL。色谱柱: Hitrap™ DEAE FF,5mL。缓冲液:A管路为20 mM Tris-HCl(pH8.5),,B管路为20 mM Tris-HCl(pH8.5)其中含0.5 M NaCl。流速:1 mL/min。检测波长:280nm,385nm。
  • 蛋白纯化应用案例一
    仪器:蛋白3000样品:乳清蛋白粗品上样量:3 mL色谱柱:60 cm× 26 mm填料:Sephacryl S-200(GE)缓冲液:50 mM Tris-HCl(pH6.8),0.1 M NaCl流速:1 mL/min
  • 利用 HPLC 及 Q-TOF 质谱仪分析聚乙二醇及单、二聚乙二醇化的治疗性蛋白 (PDF)
    聚乙二醇化的多肽和蛋白质为生物治疗药物的详细结构表征带来重大挑战,这主要是由于聚乙二醇 (PEG) 具有异质性。本应用简报描述了一种联用 Agilent HPLC 及 Agilent 6520精确质量数 Q-TOF LC/MS 系统分析聚乙二醇及聚乙二醇化蛋白的方法。其使用了一种电荷剥离剂(三乙胺)作为柱后添加剂,这样有助于简化质谱图,因此可更好地阐释结果。结果表明聚乙二醇和聚乙二醇化蛋白质的质谱图质量均得到显著改善。
  • 通用方法在毕赤酵母中快速产生重组肌动蛋白亚型并纯化
    ?肌动蛋白是真核细胞骨架蛋白的重要组成部分,具有多种重要的细胞功能,包括细胞分裂、细胞极性、伤口愈合、肌肉收缩等。本篇文章介绍了一种改进的肌动蛋白表达和提纯方法,使用SPEX 冷冻研磨仪研磨法破碎酵母细胞,适用于所有配备分子生物学设备的实验室中,这将极大地促进肌动蛋白细胞骨架的升华和细胞生物学研究。
  • 苦瓜籽蛋白的提取和分离
    摘要:用比较简便的方法提取苦瓜籽蛋白,并通过硫酸盐沉淀、透析、柱层析等步骤对蛋白进行纯化。关键词:苦瓜籽 粉碎抽提 离心 盐析 透析
  • 使用 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱分析聚乙二醇化蛋白质
    通过聚乙二醇化能够改变治疗性蛋白质的物理化学和生物性质(如提高溶解度、降低免疫原性、延长半衰期以及防止蛋白酶破坏),从而显著提高其价值。体积排阻色谱法 (SEC) 是检测分子量大于聚乙二醇化蛋白质杂质的首选方法。由于聚乙二醇介导的与硅胶固定相的相互作用会导致回收率降低、峰形变差以及过度拖尾,因此聚乙二醇化蛋白质的 SEC 分析面临着很大挑战。本应用简报描述了一种用于检测聚乙二醇粒细胞集落刺激因子 (PEG GCSF) 的简单而灵敏的 SEC 方法。采用 AdvanceBio SEC, 130Å , 7.8 × 300 mm, 2.7 μ m 色谱柱在水相流动相下进行 PEG GCSF 的分离和定量分析。线性曲线在 12.5-2000 μ g/mL 的范围内具有优异的相关系数,表明该方法适用于定量分析。该方法具有出色的保留时间和峰面积精度,证明了该方法的适用性。此外,AdvanceBio SEC 还可对强制应激研究中得到的聚集体进行分离与定量分析。
  • 自动化液质联用工作流程:采用 AssayMAP 技术进行溶液内蛋白酶解、肽段纯化以及肽段的强阳离子交换分馏
    液质联用鉴定肽段的样品制备,通常由多步骤工作流程组成,包括溶液内蛋白酶解、肽段纯化,以及肽段分馏。该过程通常需要根据样品特性及分析目的( 即定量或表征)定制为具体的应用方法。样品制备工作流程的自动化可提高样品处理能力、降低差异性,并且无需熟练操作人员执行重复工作。然而,自动化平台通常并不用于最初的分析开发,这是因为分析开发者很少具有开发复杂自动化方案的经验。相反,分析通常是采用湿式工作台相关技术进行开发,然后在自动化专家的帮助下移植到自动化平台。采用 AssayMAP 肽段样品制备解决方案,无需掌握专门的技术也能实现自动化操作。开发者可通过一个简单的软件用户界面和灵活的实验方案对关键实验变量进行完全控制,从而能够专注于科学分析研究。如今,分析开发者、科学家或技术员无需具备自动化专业知识也能实现可扩展、精确的自动化操作。采用 AssayMAP 平台,整个工作流程可直接在相同的硬件上进行开发,如需实现高通量样品前处理,也易于对硬件进行扩展,从而可减少或避免已有实验方案实现自动化所需的额外时间和资源。本文将介绍发现(鸟枪法)蛋白组学研究的一种常规液质联用工作流程,包括溶液内酶解、反相肽段纯化,以及肽段的强阳离子交换分馏 (SCX),所有这些操作均由 AssayMap Bravo 液体处理器完成。采用 SCX 小柱通过增加 pH 或离子强度对大肠杆菌蛋白裂解液进行逐步洗脱,在六个 SCX 馏分中鉴定出 15000 多条特定肽段序列,其中 64-67% 的肽段可专属性地在其中一个馏分中得到鉴定。
  • 应用于糖类化合物的分离纯化
    糖类化合物是由碳、氢、氧三元素组成的有机物。从化学结构上看,糖类是多羟基醛酮以及它们的多聚体,在化学式的表现上类似于“碳”与“水”的聚合,故又称碳水化合物,根据其结构不同,可分为单糖、双糖和多糖。糖类化合物具有众多的用途,涵盖了食品、医药、能源、工业等多个领域。它们不仅在食品工业中用于调味和增加口感,还在医药领域用于药物生产和治疗疾病,同时也是能源和工业生产中的重要原料。糖类化合物的广泛应用为人类的生活带来了便利,也推动了相关产业的发展。近年来糖类化合物的研究有两个方向: ①化学家致力于糖类化合物的人工合成,这主要是为社会发展作长远打算,使人类食物将有可能逐步摆脱对农业的依赖。②研究糖类化合物与生命的关系,因为在生命体内糖与蛋白质、核酸常不可分离。糖类化合物分离纯化检测由于缺乏发色基团,导致其无紫外吸收或紫外吸收很弱,常规快速液相制备色谱系统通常只配备紫外 (UV) 检测器,不能检测缺乏发色基团的目标化合物。而蒸发光散射检测器(Evaporative Light-scattering Detector)是通用型检测器,可以检测挥发性低于流动相的化合物,特别是没有紫外吸收的有机物质。本案例主要探讨使用SepaBean machine快速液相制备色谱系统搭配ELSD检测器(蒸发光散射检测器)对糖类化合物进行制备纯化,为糖类化合物的制备纯化提供了一种可行的方案。
  • 杜马斯定氮仪测定人血白蛋白中蛋白含量
    人血白蛋白是由健康人血浆,经过低温乙醇蛋白质分离法或经批准的其他分离法分离纯化,并经60℃10小时加温灭活病毒后制成。其中蛋白质含量是其需要检定的指标之一。本实验参照《GB 5009.5 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》使用杜马斯定氮仪对人血白蛋白中的蛋白含量进行测定。
  • 人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)检测试剂盒
    人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)检测试剂盒人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)抗原、生物素化的人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • Opentrons 双流色谱蛋白质纯化工作站
    Opentrons 双流色谱 (DFC) 蛋白质纯化工作站,可以使用 BiotageⓇPhyTip Ⓡ 色谱柱对多达96个样品进行小规模蛋白质纯化。
  • 高效表达与蛋白制备
    抗原和抗体的高水平生产中,上游表达系统的合理选择和优化是核心技术。默克密理博Novagen的大肠杆菌/昆虫细胞/哺乳动物细胞表达工具各有特点,是特定蛋白表达的最佳选择。而蛋白抽提、纯化、浓缩/除盐/换液、复性、高通量操作等也可以通过选择MM的合适产品提高效率。
  • 人视黄醇结合蛋白(RBP)检测试剂盒
    人视黄醇结合蛋白(RBP)检测试剂盒人视黄醇结合蛋白(RBP)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人视黄醇结合蛋白(RBP)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人视黄醇结合蛋白(RBP)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人视黄醇结合蛋白(RBP)抗原、生物素化的人视黄醇结合蛋白(RBP)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人视黄醇结合蛋白(RBP)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 人硫氧化还原蛋白(Trx)检测试剂盒
    人硫氧化还原蛋白(Trx)检测试剂盒人硫氧化还原蛋白(Trx)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人硫氧化还原蛋白(Trx)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人硫氧化还原蛋白(Trx)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人硫氧化还原蛋白(Trx)抗原、生物素化的人硫氧化还原蛋白(Trx)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人硫氧化还原蛋白(Trx)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  • 大豆分离蛋白中氨基酸的检测
    大豆分离蛋白是植物蛋白中为数不多的可替代动物蛋白的种类之一,一般用低温脱溶大豆粕为原料生产,是一种全价蛋白类食品添加剂。大豆分离蛋白中蛋白质含量一般在90%以上,氨基酸种类约有20 种,并含有人体必需氨基酸,不含胆固醇,广泛的应用于食品加工行业。  为评价大豆分离蛋白的质量,本文介绍大豆分离蛋白中蛋白水解氨基酸的检测方法。
  • 人胆固醇酯转移蛋白(CETP)检测试剂盒
    人胆固醇酯转移蛋白(CETP)检测试剂盒人胆固醇酯转移蛋白(CETP)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人胆固醇酯转移蛋白(CETP)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人胆固醇酯转移蛋白(CETP)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人胆固醇酯转移蛋白(CETP)抗原、生物素化的人胆固醇酯转移蛋白(CETP)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胆固醇酯转移蛋白(CETP)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 凯氏定氮仪测定大豆分离蛋白中的蛋白质含量
    大豆分离蛋白是低温条件下将豆粕于碱性溶液中浸提、沉淀、洗涤、干燥后得到的蛋白质含量≥80%的蛋白粉,其结构性质可基本代替纯大豆蛋白。大豆蛋白含有20多种氨基酸,包括多种人体必备的氨基酸,是植物蛋白中少数可代替动物蛋白的品种之一。根据生产工艺的水平和目标不同,大豆分离蛋白的含量波动范围较大,从80%左右到≥90%。因此需准确测量其蛋白含量,以考察产品的质量、生产工艺的合格性等等。本方案依据《GB 5009.5 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》,使用凯氏定氮仪测定大豆分离蛋白中的蛋白质含量。
  • 使用SFC对铱(III)络合物进行手性分离纯化
    实验证明,这种手性分离方法可从ACQUITY UPC2系统成功放大至Prep SFC 150 Mgm系统。通过重迭进样完成了对铱(III)络合物对映体的纯化,得到对映体纯的馏分, 并且样品回收率良好。对铱(III)络合物对映体进行SFC纯化,有利于更好地控制受其影响的光物理 性质和相关应用。
  • 红豆杉提取物的分离纯化
    在本文中,三泰科技的研发人员利用快速液相制备色谱系统SepaBean machine配合SepaFlash C18反相分离柱对红豆杉植物提取物进行了分离纯化,获得了满足制备需求的目标产品,可用于后续的进一步科学研究中,为此类天然产物的快速制备纯化提供了经济高效的解决方案。
  • 微波消解大豆分离蛋白
    大豆分离蛋白是以低温脱溶大豆粕为原料生产的一种全价蛋白类食品添加剂。大豆分离蛋白中蛋白质含量在90%以上,氨基酸种类有近20种,并含有人体必需氨基酸,其营养丰富,不含胆固醇,是植物蛋白中为数不多的可替代动物蛋白的品种之一。大豆分离蛋白作为食品中优质的蛋白质添加物,对于其中的营养元素和重金属元素含量的检测尤为重要,我们采用微波消解作为前处理的方法,对大豆分离蛋白进行快速、完全消解,以便于后续对大豆分离蛋白中营养元素和重金属元素的测定。
  • 海能仪器:大豆分离蛋白中蛋白质含量的测定(凯氏定氮法)
    大豆分离蛋白是以低温脱溶大豆粕为原料生产的一种全价蛋白类食品添加剂。大豆分离蛋白中蛋白质含量在90%以上,氨基酸种类有近20种,并含有人体必需氨基酸。其营养丰富,不含胆固醇,是植物蛋白中为数不多的可替代动物蛋白的品种之一。而其蛋白质含量为其重要的理化指标之一。下面则为大家介绍一下短肽型肠内营养剂中粗蛋白含量测定的方法。
  • 分析仪器在引物探针的纯化制备分离
    分析级制备纯化 行业特点:大多数单次制备纯化量较少,可采用分析级纯化方案 半制备级纯化平台 适合大制备量核苷酸纯化,单次制备量可达200~2000 OD QC质检 HTCS核酸质谱检测系统(基于LTQ系列质谱) DEL-核酸质谱检测系统(基于LTQ质谱) 基因扩增 Realtime PCR----荧光定量PCR仪 核酸药物高端研究 Thermo LTQ-Orbitrap XL高分辨质谱系统
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