蛋白质含量测定仪

食品中蛋白质含量测定仪是用于快速、准确地测量食品中蛋白质含量的专业仪器。这种仪器基于各种化学或物理方法，如凯氏定氮法、双缩脲法、考马斯亮蓝法(Bradford法)或紫外分光光度法等，来测定食品中蛋白质的含量。　　以下是关于食品中蛋白质含量测定仪的一些详细信息：　　工作原理　　凯氏定氮法：这是一种经典的蛋白质测定方法。样品中的蛋白质在催化剂的作用下与硫酸共热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即可计算出样品的蛋白质含量。　　双缩脲法：在碱性溶液中，双缩脲(尿素加热至180℃左右生成的二聚体)与铜离子形成紫色络合物，该络合物的颜色深浅与蛋白质含量成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。　　考马斯亮蓝法(Bradford法)：考马斯亮蓝G-250染料在酸性溶液中与蛋白质结合后，在595nm处有最大光吸收，其光吸收值与蛋白质含量成正比。因此，可用于蛋白质的定量测定。　　紫外分光光度法：蛋白质中常含有酪氨酸、色氨酸等苯环结构，在280nm的紫外波段有较强的吸收峰，其吸光度与蛋白质含量成正比。这种方法操作简单、快速，但灵敏度较低，只适合测定蛋白质含量较高的样品。　　应用领域　　食品质量检测：蛋白质是食品中的重要营养成分，其含量是评价食品质量的重要指标之一。食品中蛋白质含量测定仪可用于检测各类食品(如肉类、奶类、蛋类、豆类、谷物等)中的蛋白质含量，为食品质量检测提供数据支持。　　食品科学研究：在食品科学研究中，蛋白质含量测定仪可用于分析不同食品原料、加工工艺对蛋白质含量的影响，以及蛋白质在食品加工过程中的变化等。　　注意事项　　在使用蛋白质含量测定仪进行测试之前，需要仔细阅读产品说明书，了解仪器的使用方法、操作步骤及注意事项。　　确保样品准备过程符合标准要求，避免样品污染或损坏导致检测结果不准确。　　定期对仪器进行维护和校准，确保检测结果的准确性和可靠性。　　在使用过程中注意安全防护措施，避免对人体造成伤害或对环境造成污染。　　总之，食品中蛋白质含量测定仪是食品检测领域的重要工具之一，能够快速、准确地测定食品中的蛋白质含量，为食品质量控制和科学研究提供有力支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405151126410832_3840_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

食品中蛋白质含量测定仪的优点主要体现在以下几个方面：　　检测速度快：能够在短时间内完成大量样品的检测，大大提高了检测效率，使食品生产厂家能够快速获取检测结果，及时调整生产策略。　　操作简单：仪器操作简单易用，用户只需按照说明书进行操作即可完成检测，无需复杂的操作步骤和专业技能，降低了操作难度。　　准确度高：采用先进的检测技术，如光谱技术、化学分析方法等，能够确保测量结果的准确性和可靠性，为食品生产厂家提供准确的数据支持。　　应用广泛：适用于各类食品中蛋白质含量的检测，如乳制品、肉制品、豆制品等，满足了不同食品生产厂家的检测需求。　　安全性高：使用食品中蛋白质含量测定仪可以避免直接接触样品，降低了交叉感染的风险，保障了检测人员的安全。　　智能化程度高：一些先进的食品中蛋白质含量测定仪还采用了安卓智能操作系统，具有网线连接、Wi-Fi联网上传、GPRS无线远传等功能，可以快速上传数据，实现远程监控和管理。　　稳定性强：仪器具有稳定的工作性能和较长的使用寿命，保证了长期使用的可靠性。　　综上所述，食品中蛋白质含量测定仪具有检测速度快、操作简单、准确度高、应用广泛、安全性高、智能化程度高和稳定性强等优点，为食品生产和质量控制提供了有力的支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405151149314403_9648_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

蛋白质测定仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理，通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器但是实际中怎么操作呢？

食品中蛋白质测定仪是一种用于快速准确地测量食品中蛋白质含量的设备。以下是关于食品中蛋白质测定仪的一些详细信息：　　一、工作原理　　食品中蛋白质测定仪的工作原理通常基于蛋白质与某些化学试剂反应产生颜色变化，通过测定颜色的强度来计算蛋白质的含量。常用的化学试剂有比色法、尿素法、低丙酮酸法等。其中，比色法是一种常用的蛋白质测定方法，其原理是利用蛋白质与双糖试剂反应生成紫色化合物，通过比色法测定紫色化合物的吸光度来计算蛋白质的含量。　　二、应用领域　　1. 食品生产、加工、流通等环节：蛋白质测定仪可以用于检测食品的质量，确保食品符合国家食品安全标准。　　2. 食品安全监管：蛋白质测定仪可以用于检测食品中的农药残留、重金属含量等食品安全指标，为食品安全监管提供准确的数据支持。　　3. 科学研究：蛋白质是生命活动的基本物质，对生命科学的研究具有重要意义。蛋白质测定仪可以用于研究食品中的蛋白质结构、功能以及与其他物质的相互作用等，为生命科学研究提供重要的数据支持。　　4. 教学实验：在高校和科研机构中，蛋白质测定仪可以用于教学实验和研究工作。　　三、使用方法　　使用蛋白质测定仪进行蛋白质含量的测定通常包括以下步骤：　　1. 样品准备：取一定量的食品样品，按照仪器说明书的要求进行前处理，如稀释、过滤等。　　2. 试剂添加：向样品中加入适量的化学试剂，使其与蛋白质发生反应。　　3. 反应与测定：等待一定时间，使反应充分进行，然后使用蛋白质测定仪测定反应液的颜色强度。　　4. 结果计算：根据仪器测定的颜色强度，结合标准曲线或公式，计算出样品中的蛋白质含量。　　需要注意的是，不同的蛋白质测定仪可能具有不同的操作方法和要求，因此在使用前需要仔细阅读仪器说明书，并按照说明书的要求进行操作。　　四、注意事项　　1. 仪器应放置在干燥、通风、无尘的环境中，避免阳光直射和强烈震动。　　2. 在使用前应对仪器进行预热和校准，确保仪器的准确性和稳定性。　　3. 在操作过程中应注意安全，避免试剂溅出或吸入有害气体。　　4. 定期对仪器进行维护和保养，如清洗、更换试剂等，以保证仪器的正常运行和延长使用寿命。

食品中蛋白质测定仪的优点主要取决于其技术类型、精度、使用便捷性等因素。以下是针对食品中蛋白质测定仪的一般性优点分析：　　优点：　　快速性：蛋白质测定仪能在短时间内完成大量样品的检测，大大提高了检测效率，适用于食品生产线上快速、连续的蛋白质含量测定。　　准确性：采用先进的检测技术，如光谱技术、化学分析方法等，能够确保测量结果的准确性和可靠性。　　操作简单：仪器操作简单易用，用户只需按照说明书进行操作即可完成检测，降低了操作难度和人工成本。　　应用广泛：适用于各类食品中蛋白质含量的检测，如乳制品、肉制品、豆制品等，具有广泛的应用前景。　　自动化程度高：部分蛋白质测定仪具有自动化功能，能够自动完成样品的处理、检测和数据分析，提高了工作效率和准确性。

尊敬的专家先生： “近红外成份测定仪”这类仪器能否测定牧草（例如紫花苜蓿）中的蛋白质、脂肪等成份的含量？谢谢！

请教各位大家谁有FOSS2300蛋白测定仪 自校准方法？检定校准机器测定蛋白质含量的准确性怎么样，用什么方法做？

蛋白质含量的测定[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=54096]蛋白质含量的测定[/url]

大家好，请问近红外是否可以测定蛋白质亚基含量，就是想建立ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定的蛋白质亚基的快速检测方法，请各位指点，谢谢！

蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法，即考马斯亮蓝法（Bradford法）。其中Bradford法和Lowry法灵敏度最高，比紫外吸收法灵敏10～20倍，比Biuret法灵敏100倍以上。定氮法虽然比较复杂，但较准确，往往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白质。 值得注意的是，这后四种方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质，因为一种蛋白质溶液用这四种方法测定，有可能得出四种不同的结果。每种测定法都不是完美无缺的，都有其优缺点。在选择方法时应考虑：①实验对测定所要求的灵敏度和精确度；②蛋白质的性质；③溶液中存在的干扰物质；④测定所要花费的时间。考马斯亮蓝法（Bradford法），由于其突出的优点，正得到越来越广泛的应用。

[size=4]蛋白质含量测定的方法[/size][color=#DC143C]一、微量凯氏（Kjeldahl）定氮法[/color] 含氮有机物与浓硫酸共热,即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸铵。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下： H2NCH2COOH+ 3H2SO4 2CO2 + 3SO2 +4H2O +NH3 (1) 2NH3 + H2SO4 (NH4)2SO4 (2) (NH4)2SO4 + 2NaOH 2H2O +Na2SO4 + 2NH3 (3) 为了加速消化，可以加入CuSO4作催化剂，K2SO4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。 计算所得结果为样品总氮量，如欲求得样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6.25即得。[color=#DC143C][size=4]论文：14楼 杜马斯燃烧法与凯氏法测定饲料含氮量的比较研究15楼 用凯氏法和杜马斯法测定植物样品中的全氮16楼 乳及乳制品中蛋白质测定应注意的事项探讨17楼 杜马斯燃烧定氮法在农产品品质检测中的应用18楼 凯氏定氮法测定牛奶中蛋白质的不确定度分析19楼 消化时间对总氮测定结果的影响20楼 奶粉中蛋白质样品消化方法的改进21楼 凯氏定氮法测定食品中蛋白质的不确定度分析22楼 催化剂与浓硫酸组成比例对凯氏定氮消化时间的影响23楼 饲料酵母蛋白含量测定结果的分析24楼 微波消解—凯氏定氮法测定食品中蛋白质的方法研究25楼 Loery法和Bradford法测定玻璃酸钠中蛋白质含量的比较26楼 应用 Primacs SN总氮 蛋白质分析仪测定食品中的蛋白质[/size][/color]

用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量，发现蛋白质与染色液混合后吸光度值很不稳定，在1h内时间越长，吸光度越来越低，与文献上的越来越高并趋于稳定有所差异，不知道是不是这个原因，做加标回收率很低，求大神指教到底是什么原因会导致这样的情况。

用 5009.5-2010 第二法 分光光度法 测定奶粉中蛋白质含量消化3天还没完成，怎么办？

关于蛋白质含量测定国标GB5009.6-2016中第三法燃烧法的应用1.求该法规定的食品检测的参考文献。2.标准中的蛋白质分析仪是杜马斯定氮仪吗？（来自小白的问号??）3.该法燃烧法与杜马斯燃烧法是不一样的吗？（看到一些文献是另一个标准的杜马斯燃烧法与国标凯氏定氮法的比较）

目前在做的一个项目中要涉及到测定植物油中蛋白质含量，采用HPLC。可是我现在暂时只能得到粗油。本来蛋白质的LC测定都是需要先分离纯化的，请问有没有不需要纯化步骤的前处理方法？样品只是植物种子的粗油。如果没有，那我应该如何进行分离纯化那？由于时间的原因，可能没有办法将分离纯化作为一个单独的课题来研究。真是伤脑筋啊～。。。请各位大侠不吝赐教～万分感谢。。。

蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。1.280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收，且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大，因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时，将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中，用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照，在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280。蛋白质浓度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1cm光径的标准石英比色皿，盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时，A280约为1.0左右。由此可立即计算出蛋白质的大致浓度。许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值(A1%1cm)有文献数据可查，根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度。下式列出了蛋白质浓度与(A1%1cm)值(即蛋白质溶液浓度为1%，光径为1cm时的光吸收值)的关系。文献值A1%1cm,λ称为百分吸收系数或比吸收系数。蛋白质浓度= (A280´10 )/ A1%1cm,280nm (mg/ml)(Q 1%浓度»10mg/ml)

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量加标回收率在80％左右，怎么做都升不上去，请大神指教有可能的原因，样品是β环糊精，蛋白质含量在0.2％左右

乳品中蛋白质的测定一般是采用GB/T5413.1-1997和GB/T5009.5-2003的方法进行测定的。这两种方法类似，都是基于凯氏定氮法。凯氏定氮法由Kjeltec于1833年首先提出，目前广泛应用于乳品和饲料中蛋白质的测定。 1 原理 样品经消化后，蛋白质中的氮转化为氨并与硫酸结合生成硫酸铵，然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后用盐酸标准溶液滴定，根据盐酸标准溶液的消耗量，计算出氮的量，乘以换算系数，即为蛋白质含量。 三聚氰胺在消化过程中，转化为硫酸铵，然后在滴定过程中消耗标准盐酸，但是在最后带入计算的时候换算成了蛋白质的含量。 2 测量方法 准确称取一定量的样品(称准至0。001g)移入消化管中，添加催化剂3.9g(其中K2SO4 3.9g，CuSO4.5H2O 0.4g)，加入12ml浓硫酸盖上涤气盖放置过夜。次日上凯氏消化炉，设定温度200℃，时间1h，慢消化完毕升高温度至420℃，时间2h，至液体变为蓝绿色透明，继续保持微沸30min。消化完毕，冷却15～20min，上仪器测定测定。 分析程序为凯氏1，程序设定如下:接受液液为30ml，蒸馏水为80ml，碱液为50ml。测定:将已消化好的样品消化管直接放入自动定氮仪上按仪器的要求进行蒸馏测定，同时做空白实验。整个测定过程，蒸馏、滴定、数字处理及结果打印全部自动进行。 3 结果计算 蛋白质含量(%)=[C×(V1-V0)×0.0140×F]/m×100式中:C—盐酸标准溶液的浓度，mol/L [color=#DC143C][size=4]V1—滴定样品吸收液时消耗盐酸标准溶液的体积，mL [/size][/color]V0—滴定空白吸收液时消耗盐酸标准溶液的体积，mL F—蛋白质系数,饲料中F=6.25 M氮—氮的摩尔质量，0.0140kg/mol m—样品质量，g。 关键就在这里，三聚氰胺也消耗了标准盐酸，所以就会在计算过程中转换成蛋白质的含量。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=108622]5009[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=108623]5413[/url][color=#DC143C][size=4]（九点虎分析系列仅代表个人观点，如有雷同，实属巧合）[/size][/color]

一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。二、蛋白质含量测定方法 1. 凯氏定氮法2. 双缩脲法3. Folin-酚试剂法4. 紫外吸收法5. 考马斯亮蓝法三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作 （一）试剂： 1. 考马斯亮蓝试剂：考马斯亮蓝G—250 100 mg溶于50 ml 95%乙醇，加入100 ml 85% H3 PO4 ，雍蒸馏水稀释至1000 ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3 PO4 。2. 标准蛋白质溶液：纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15 mol/LNaCl配制成100 ug/ml蛋白溶液。（二）器材： 1. 722S型分光光度计使用及原理。2. 移液管使用。（三）标准曲线制作： 1. 试管编号0123456100ug/ml标准蛋白（ml）0.00.10.20.30.40.50.60.15mol/L NaCl （ml）10.90.80.70.60.50.4考马斯亮蓝试剂 （ml）5555555摇匀，1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色A595nm2. 以A595nm 为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标（六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在坐标轴上绘制标准曲线。（1）利用标准曲线查出回归方程。（2）用公式计算回归方程。（3）或用origin作图 ，测出回归线性方程。即A595nm =a×X( )+6；一般相关系数应过0.999以上，至少2个9以上。（4）绘图时近两使点在一条直线上，在直线上的点应该在直线两侧。（四）蛋白质含量的测定： 样品即所测蛋白质含量样品（含量应处理在所测范围内），依照操作步骤1操作，测出样品的A595nm ，然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。一般被测样品的A595nm 值在0.1—0.05之间，所以上述样品如果A595nm 值太大，可以稀释后再测A595nm值，然后再计算。（五）注意事项： 1. 玻璃仪器要洗涤干净。2. 取量要准确。3. 玻璃仪器要干燥，避免温度变化。4. 对照：用被测物质以外的物质作空白对照。蛋白质含量测定实验难度系数 0共 0 人点评打分实验材料结晶牛血清清蛋白 g—球蛋白试剂（盒）Na2CO3酒石酸钾钠蒸馏水硫酸铜钨酸钠钼酸钠磷酸硫酸锂液体溴NaOH酚酞仪器耗材可见光分光光度计旋涡混合器秒表[url=http://www.biomart.cn/equipm

各位大虾，有谁用过高效液相色谱法测定蛋白质含量的吗？

有个问题一直想不通，请各位帮帮我啊！就是在连续几天测定胁迫下SOD酶的比活力后，发现比活性一直平稳，但后来急剧上升之后下降。但是下降时测得的蛋白质含量与上升时差不多。 为什么酶的比活性下降了（或者说），但是蛋白质含量还是如此高？SOD比活性上升了，是因为酶量增加了还是酶结构的变化？还是说，SOD比活性降低，只是酶的活性部分被抑制，其酶的蛋白质性质未发生改变？ 向各位高手求救！[em0715]

[size=4][center]Bradford法[/center][/size][B]具体操作步骤:（一）实验原理 [/B]双缩脲法（Biuret法）和Folin—酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。 1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法（Bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。 考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（lmax），由465nm变为595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。经研究认为，染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合。 在595nm下测定的吸光度值A595，与蛋白质浓度成正比。