二维液相色谱系统

最近，研究二维液相色谱系统，发现岛津和湖南德米特的二维液相色谱系统，几乎独家垄断，价格比两套lc20还高。

2012 年 4 月 19日，北京——安捷伦科技公司宣布推出 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案，可实现全二维方式以及中心切割方式的二维分离。该仪器对极为复杂的样品有出色的分离能力，例如生物药品、肽谱、植物提取物、食品基质、聚合物以及其他难以分离的混合物。其采用1290 Infinity二元泵及创新的二维液相色谱阀，配合专用的二维色谱软件，可在短短数分钟内完成二维液相色谱的配置和方法设置。通过组合两个正交的HPLC分离到一个单一的二维液相色谱分析中，色谱峰容量将成倍地增加，与常规的液相色谱相比，分离能力也随之大大增加。因此，对于需要最高分离能力的极其复杂样品而言，二维液相色谱无疑是理想的工具。1. 你了解过二维液相色谱吗？2. 你知道二维液相色谱和普通液相色谱的差异吗？3. 你心目中的二维液相色谱是怎么一回事？

最近比较闲，准备做一点研究工作。我们想做血浆中的一些组分分析，可能需要二维液相色谱，不知哪位大侠用过二维液相色谱？最重要的是，血浆样品是否可以直接进样？第一维用凝胶，第二维用反相是否可以？谢谢

二维液相色谱(2D—LC)是将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱串联起来构成的分离系统。样品经过第一维的色谱柱进入接口中，通过浓缩、捕集或切割后被切换进入第二维色谱柱及检测器中。二维液相色谱通常采用两种不同的分离机理分析样品，即利用样品的不同特性把复杂混合物(如肽)分成单一组分，这些特性包括分子尺寸、等电点、亲水性、电荷、特殊分子间作用(亲和)等，在一维分离系统中不能完全分离的组分，可能在二维系统中得到更好的分离，分离能力、分辨率得到极大的提高。完全正交的二维液相色谱，峰容量是两种一维分离模式单独运行时峰容量的乘积。假如两种分离系统都有100的峰容量，那么良好的二维系统理论上可产生10000的峰容量。二维液相色谱大多使用两支或多支色谱柱，并通过柱结合技术实现样品的柱间切换。柱切换通常可分为部分和整体切换两种模式。按切割组分是否直接进人二维中，二维分离又可分为离线和在线两种方式。早期的中心切割技术，大都先在容器中收集一维洗脱产物，再进样到第二维中。随着现代仪器的发展和适应自动化分离的需要，目前二维色谱大多采用在线方式，使一维洗脱产物(部分或全部)直接进入到第二维柱系统中进行分离分析。部分模式即采用中心切割技术，只使第一维分离的部分感兴趣的组分进入第二维中进一步分析。为了将样品有效地转移到下一维柱系统中，必须先在第一维分离模式中用标准物进行实验，根据得到的分离信息设计切换程序。部分模式不能得到样品所有组分的信息，此外，还有操作繁琐、样品易损失与污染及可能降低分辨率等缺点。整体模式即全多维液相色谱模式(comprehensive HPLC)。基于Giddings 的理论，一般认为全多维分离应满足3个条件：(1)样品的每一部分都受到不同模式的分离；(2)所有样品组分以相等的比例(100％或稍低一些，即并不要求100％分析物，只要分流的部分能代表所有样品组分信息即可)转移到二维及检测器中；(3)在一维中已得到的分辨率基本上维持不变。“基本”指通过测量全二维中第一维轴上的某个特殊峰所对应的第一维的分辩率与一维情况相比减少不超过10％。其中，第一条和第三条说明了传统的中心切割技术与全二维的区别。Schoenmakem等 认为在二维分离之前进行分流也可称为全二维分离，进一步拓宽了全二维分离的概念。

Waters高效液相色谱系统的使用和维护

由于液相色谱能在常温下对大分子量的有机组分进行分离，而且有多种分离模式，因而应用范围要比气相色谱广泛。若能实现LC/LC联用、那么就能对更复杂的有机样品进行分离分析。但正因为液相色谱有正反相和离子交换等许多分离模式，导致两种不同分离模式联用的困难，因而目前还没有完整的LC/LC二维色谱问世。一般是各自实验宝根据自己分离祥品的性能自行组装LC/LC二维色谱。常见的LC/LC联用是采用多通阀接口装置进行切换。LC/LC多通阀接口装置和GC/GC多通阀接口装置原理是一致的，也是通过多通阀门的切换将前一级液相色谱分离出的某种组分传递到后一级液相色谱中继续分离。由于液相色谱的流动相可以是酸碱性，也可以是水或有机溶剂，且在高压下进行，因此，LC/LCL联用的接u多通阀的耐蚀和密封要求比GC/GC联用接口要高得多。现在的LC/LC二维色谱的多通阀一般是六通阀，采用高级不锈钢为基材，并用填充石墨的聚四氟乙烯为密封材料。LC/LC六通阀接日需要耐高压，一般应达50MPa ,但不像GC/GC的多通阀需要耐高温，只需耐50-80℃中温即可。LC/LC联用主要功能是可以实现对有机样品中某些组分的多次循环分离，也可以净化样品和富集痕量组分。和气相色谱不同的是，液相色谱的往都较短，一般不超过30cm，而气相色谱的毛细管柱已超过30m，相差100倍。增加液相色谱的柱长可以提高分离效果，但长柱填充和制作困难大。若将相同短柱半联使用，或将短柱流出组分返回柱中再分离，操作和效果都不理想。这样，利用六通阀接口，将两台液相色谱仪联用可以解决这个间题。另外，对于反相分配液相色谱，水相组分中的微量有机物的富集也可以通过LC/LC联用自动实现，操作和成本均比目前固相萃取(solid phase extraction,SPE)技术要好得多。因此，现在分析环境和水中痕量农药残留一般用LC/LC联用技术。

岛津lc-20a型液相色谱系统的日常使用和维护

1月23日，安捷伦科技推出了该公司最新一代Agilent 1200系列液相色谱系统，该系列将是安捷伦科技著名的1100系列液相色谱的换代产品。作为一种常规的分析测试手段，全球有超过250，000家的用户在使用液相色谱产品，其市场规模约为二十亿美金，这也是安捷伦科技LSCA部收入的主要来源之一。 自从1995年1100系列液相色谱问世以来，安捷伦总计售出了大约60，000套液相色谱系统（如果按单个系统模块计算，则超过400，000），使得1100系列成为液相色谱市场最为成功的产品之一。最新推出的1200和现在的1100具有良好的兼容性，从而最大限度地保障了用户单位在资金和时间方面的投入不受损失。用户单位可以根据自己的需要，选择新的模块和现有的模块进行组合，也可以继续使用已有的分析方法而无需花费资金去开发新的方法以及重新培训操作人员。对于那些暂时使用非安捷伦操作软件的用户，安捷伦科技还可以专门为他们提供一种1100仿真模拟模式。 据安捷伦科技有关人士介绍，Agilent 1200是一款功能极其完善的液相色谱系统，其可选的仪器模块数量超过60个，可以灵活组合以满足液相色谱不同应用领域的需要，包括：快速分离液相（最新推出）、制备液相、标准液相、窄柱液相、毛细管液相、纳升级液相以及安捷伦科技开创性的芯片液相等。目前，芯片液相技术既可以用于小分子领域也可用于大分子领域，即可用于色谱分离，也可作为进样装置。而采用纳流喷雾离子化的HPLC-Chip/MS技术，其灵敏度较之常规的LC/MS提高了1000倍。

waters液相色谱系统适应性验证是做什么？

[color=#333333][font=宋体][back=white]二维[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]（[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]2D-LC[/back][/font][font=宋体][back=white]）通过组合两个[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱，使色谱峰容量成倍增加。在全二维[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]（[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]Comprehensive2D-LC[/back][/font][font=宋体][back=white]，或[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]LCxLC[/back][/font][font=宋体][back=white]）这种方法中，样品被注入第一根柱（第一维，通常流速低），而所有流出物通过切换阀被送入第二根柱（第二维，流速高），切换阀中包含两个样品环。第一个环包含了第一根柱的洗脱液，而第二个环的内容在第二根柱上分析。而对于中心切割[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]2D-LC[/back][/font][font=宋体][back=white]（[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]heart-cutting2D-LC[/back][/font][font=宋体][back=white]，或[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]LC-LC[/back][/font][font=宋体][back=white]）技术，第一根柱中仅有部分流出物被[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]“[/back][/font][font=宋体][back=white]切割[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]”[/back][/font][font=宋体][back=white]出来，送入第二根柱（流速慢）。尽管[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]LCxLC[/back][/font][font=宋体][back=white]和[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]LC-LC[/back][/font][font=宋体][back=white]是两种不同的方法，但它们都是传统[/back][/font][font='Times New Roman',serif][back=white]1D-LC[/back][/font][font=宋体][back=white]的明显改进，因为它们能带来更大的选择性，对复杂混合物进行分离和分析，而使用其他方法可能无法分离。[/back][/font][/color]

液相色谱系统检测流速准确率变成98.33%，这会对液相造成什么影响？

3月9日，美国热电集团推出一款全新的高效液相色谱系统——Finnigan Surveyor Plus。该仪器号称采用了当今最高性能的光二极管阵列（PDA）检测器，其紧凑式的设计使得仪器占地面积大为减小。 从应用范围来看，Finnigan Surveyor Plus高效液相色谱系统可被广泛使用在QA/QC实验室，科研机构，药物研发以及食品和饮料工业。 该产品采用了一体式柱温箱设计，同时，热电的LightPipe专利技术保证了仪器的高灵敏度，灵敏度是传统的光二极管阵列检测器的五倍。

高效液相色谱系统中气泡对检测的影响及其解决方法在我们进行液相色谱分析时，有时会遇到这样一个问题：系统的流路中存在气泡。 由于气泡的存在，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降；气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。 造成上述现象的主要原因有三条：一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡；二是系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净；三是在注入样品时不注意混入了空气。 为了避免这类问题的出现，液相色谱实际分析过程中必须重视对流动相进行脱气处理。 常用的脱气方法有以下几种： 1. 吹氦脱气法 使用在液体中比空气溶解度低的氦气，在0.1Mpa压力下，以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除溶解的气体。此法使用于所有的溶剂，脱气效果较好，但在国内因氦气价格较贵，本法使用较少； 2. 加热回流法 此法的脱气效果较好； 3. 抽真空脱气法 此时可使用微型真空泵，降压至0.05-0.07MPa即可除区溶解的气体。显然使用水泵连接抽滤瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成过滤机械杂质和脱气的双重任务。由于抽真空会引起混合溶剂组成的变化，故此法适用于单一溶剂体系脱气。对多元溶剂体系应预先脱气后再进行混合，以保证混合后的比例不变。 4. 超声波脱气法 它是目前实验室使用最广泛的脱气方法，将配制好的流动相连同容器一起放入超声波水漕中脱气10-20min即可。该方法操作简便，基本能满足日常分析的要求。 5. 在线真空脱气法 把真空脱气装置串联到储液系统中，并结合膜过滤器，实现了流动相在进入输液泵前的连续真空脱气。此法的脱气效果明显优于上述几种方法，并适用于多元溶剂体系。 其二，在液相色谱系统开始工作前，可以用注射器连接恒流泵的排空阀，抽入流动相，将流路中的空气驱赶干净。 其三，在注入样品前注意排出样品注射器中的空气。

高效液相色谱系统中气泡对检测的影响及其解决方法在我们进行液相色谱分析时，有时会遇到这样一个问题：系统的流路中存在气泡。 由于气泡的存在，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降；气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。 造成上述现象的主要原因有三条：一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡；二是系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净；三是在注入样品时不注意混入了空气。 为了避免这类问题的出现，液相色谱实际分析过程中必须重视对流动相进行脱气处理。 常用的脱气方法有以下几种： 1. 吹氦脱气法 使用在液体中比空气溶解度低的氦气，在0.1Mpa压力下，以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除溶解的气体。此法使用于所有的溶剂，脱气效果较好，但在国内因氦气价格较贵，本法使用较少； 2. 加热回流法 此法的脱气效果较好； 3. 抽真空脱气法 此时可使用微型真空泵，降压至0.05-0.07MPa即可除区溶解的气体。显然使用水泵连接抽滤瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成过滤机械杂质和脱气的双重任务。由于抽真空会引起混合溶剂组成的变化，故此法适用于单一溶剂体系脱气。对多元溶剂体系应预先脱气后再进行混合，以保证混合后的比例不变。 4. 超声波脱气法 它是目前实验室使用最广泛的脱气方法，将配制好的流动相连同容器一起放入超声波水漕中脱气10-20min即可。该方法操作简便，基本能满足日常分析的要求。 5. 在线真空脱气法 把真空脱气装置串联到储液系统中，并结合膜过滤器，实现了流动相在进入输液泵前的连续真空脱气。此法的脱气效果明显优于上述几种方法，并适用于多元溶剂体系。 其二，在液相色谱系统开始工作前，可以用注射器连接恒流泵的排空阀，抽入流动相，将流路中的空气驱赶干净。 其三，在注入样品前注意排出样品注射器中的空气。

液相色谱经历了几十年的快速发展，色谱系统从20世纪60年代后期出现新型柱填料、高压输液泵和高灵敏度检测器到现在高效液相色谱。可谓是发生了巨大变化。色谱系统更是从经典的高效液相色谱发展到了超高效液相色谱、快速液相色谱。我原来问Waters的工程师：液相色谱到超高效液相色谱后还会推出什么样的色谱系统？他说差不多已经到顶了。[color=#DC143C][B]我们的液相色谱系统还能走多远，出现超高效液相色谱系统后还能研究出更好的色谱系统吗？[/B][/color]

我搜索了哈，在论坛里面没有找到，如果斑竹发现是重复的，请把帖子删除，谢谢。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=42685]岛津LC-20A型液相色谱系统的日常使用和维护[/url]

近期在做全二维[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的调研，能搜索到的仪器厂家很少，有熟悉这一方面的吗？求指点，多谢多谢~~

在液相色谱仪使用过程中，我们经常遇到液相色谱仪用户正反相色谱系统互相现象，但由于使用操作不当，常常不注意间损坏了色谱柱，同时加重了液相色谱系统的污染，导致分析工作出现麻烦，现在将置换工作的基本流程列出，供用户参考：1. 首先用正己烷(硅胶柱)将色谱系统包括正相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现)；2. 卸掉硅胶柱，封好保存；3. 将进样阀与检测器短路，用异丙醇冲洗色谱系统10分钟(流速1ml/min).在这期间空拨进样阀三次；4. 换甲醇(或已睛)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) ，此期间空拨进样阀三次；5. 安上反相色谱柱， 流速调到1ml/min,用甲醇(或已睛)冲洗系统，直到系统平衡；6. 进三针标准品,检验面积 ﹑保留时间是否重复,若不重复,继续冲洗直到重复。

[b]谈谈液相色谱系统维护[/b]双节就在眼前了，看到如何给仪器过节的帖子，就整理了一些仪器维护的知识，仅供大家参考。1、过滤头的维护（1）不锈钢压制：压制孔径精度好，易清洁，不易损坏，价格高。用异丙醇（或5％稀硝酸），超声波清洗15min，再用双蒸水清洗。我这前不久刚用异丙醇超声清洗过，居然看到有白色的漂浮物，可怕，不断更换新的异丙醇与水，直至没有可见异物才安心。（2）有机材料压制：孔径精度好，不易清洁，不易损坏，价格适中。用异丙醇（或5％稀硝酸），超声波清洗15min，再用双蒸水清洗。（3）玻璃压制：烧结孔径精度较好，易清洁，易损坏，价格低。将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。用双蒸水冲洗残留之溶剂。将过滤器放在装有浓硝酸 （35％）的烧杯里浸一小时，用双蒸水彻底冲洗过滤器，再用异丙醇浸泡30分钟，取出，双蒸水彻底冲洗过滤器，将过滤头重新装好。注意：（1） 清洗用的溶剂与水必须过滤。（2） 不要用超声清洗玻璃滤头，否则滤头可能破碎，碎片可能吸入管道，割破真空脱气机的脱气管道,划伤宝石球等。2、单向阀的清洁 用异丙醇，超声波清洗15min，再用双蒸馏水清洗。注意：超声清洗时开口端向上放置,防止宝石球套件掉出。一次一个同事把出口单向超散架了，我根据说明书自己重新组装，组装时，注意把宝石球座的光滑面对着宝石球，还能用，哈哈！如不慎掉出，须仔细阅读说明书，或询问工程师后再安装，以防安装错误，引起单向阀损坏。3、柱塞杆的清洁 取50%甲醇（最好过滤后使用）10ml注入柱塞杆清洗管入口即可。此浓度的 甲醇可保证较长时间不会发霉，含盐类流动相也不会析出盐。想要更彻底清洗，那就拆开泵头，取出柱塞杆放放异丙醇中超声洗涤15min，用双蒸水充分洗涤后，装上即可，具体拆卸步骤，详见各仪器说明书，只要小心谨慎，基本没有问题。密封圈也是重点维护对象，也可放入异丙醇超声清洗或直接更换。4、在线过滤器 用异丙醇（或5％稀硝酸），超声波清洗15min，再用双蒸水清洗。我这有一台旧的岛津LC-10AT，压力一直居高不下，纯甲醇1.0ml/min，接色谱柱后达到6-7MPa，清洁系统后，还是偏高，最后才发现，原来在线过滤器的滤片已被压弯了，更换后，压力就为5MPa左右。5、手动进样器的清洁 先用10%甲醇“LOAD”、“INJECT”各冲洗5ml，再用甲醇置换。但经过验证，用10ml溶剂能完全冲洗干净进样器，可有防止因进样器引起的交叉污染。怀疑定量环有污染或堵塞时，也可卸下定量环，放入异丙醇或双蒸水的超声清洗。自动进样器可使用“PURGE”功能对进样针进行清洗。6、检测池的维护取随机配送的注射器吸取异丙醇，注入检测器。这个是说明书上说的方法，但使用中发现可操作性实在很差，推得我手脚抽筋才推了10ml，后来直接把色谱柱换成两通接头接上，把过滤后的异丙醇当流动相，以0.5ml/min冲洗30min。还能清洗整个流路，一举多得。不过要冲洗检测器前，应先清洗1-3步，并先冲洗检测器前管路10min，防止污染物进入检测器。如果还不能洗净检测池，那只能卸下透镜，放入异丙醇超声清洗。拆卸前请仔细阅读说明书。7、高效液相的系统清洗 磷酸清洗：12％磷酸水溶液可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”绝对更有效、且较少损害(特别是对日常使用低紫外波长的应用来说)。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用，但它是系统钝化前清洗的第一步，通常用于从系统中除去有机杂质和污垢，它比强有机溶剂更好也更快。清洗流程：摘下色谱柱，用两通或接头取代色谱柱，采用适当的安全防护措施。 具体步骤： （1）用甲醇彻底冲洗系统 （2）用水彻底冲洗系统（3）导入12％v／v磷酸水溶液，以1mL/min流速洗大约一个小时。在冲洗期间 活动所有的阀，包括：进样阀、旁路阀等。 （4）用水彻底冲洗所有管路和系统。（5）返回到甲醇洗，然后继续用实验所需的溶剂冲洗。8、色谱柱的维护 通常色谱柱清洗所用溶剂为色谱柱体积的10-20倍，以25cm*4.6为例，差不多1.0ml/min，60min。维护时，建议设2-3个梯度过程来冲洗色谱柱，如此能把不同k值的残留物彻底洗脱下来。如通道A：10%甲醇，通道B：甲醇 Time/min 通道B含量% 0 0 20 100 40 0 60 100 90 stop 由于放假时间基本不超过10天，也就不建议取下色谱柱，因为取下色谱柱后，难以完全封闭管路，使管路中的甲醇挥发而进入空气。上次听工程师说最好色谱柱保存在90%甲醇中，能有效防止贮存液的挥发。对色谱柱维护，这里不推荐再生，再生过程繁琐，耗时长，效果远不如加保护柱（可自行装填，效果还不错），本人觉得，再生过程就是对色谱柱的一次再伤害。9、把系统各个能被流动相浸润的管路都置换成甲醇（平时少用有机相的管路也可籍些机会好好冲洗一下），把过滤头也浸泡在甲醇中，并置于较高处，使管路保持一定的正压，防止管路中流动相干涸而进入空气。不推荐把色谱系统保存于纯乙腈中。10、 关闭仪器所有电源，盖上防尘罩。我觉得液相色谱仪应更注重平时的正确使用，那才是真正的对它的爱护。版友可根据自己的需要选择维护项目，做好这些，我想就可以让仪器和人都安心的过好这个双节了。借此机会，祝所有版油节日快乐！

液相色谱系统，开机的瞬间压力上升过高，求解决方案？

高效液相色谱系统中气泡对检测的影响及其解决方法在我们进行液相色谱分析时，有时会遇到这样一个问题：系统的流路中存在气泡。由于气泡的存在，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降；气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。造成上述现象的主要原因有三条：一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡；二是系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净；三是在注入样品时不注意混入了空气。为了避免这类问题的出现，液相色谱实际分析过程中必须重视对流动相进行脱气处理。常用的脱气方法有以下几种：1. 吹氦脱气法 使用在液体中比空气溶解度低的氦气，在0.1Mpa压力下，以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除溶解的气体。此法使用于所有的溶剂，脱气效果较好，但在国内因氦气价格较贵，本法使用较少；2. 加热回流法 此法的脱气效果较好；3. 抽真空脱气法 此时可使用微型真空泵，降压至0.05-0.07MPa即可除区溶解的气体。显然使用水泵连接抽滤瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成过滤机械杂质和脱气的双重任务。由于抽真空会引起混合溶剂组成的变化，故此法适用于单一溶剂体系脱气。对多元溶剂体系应预先脱气后再进行混合，以保证混合后的比例不变。4. 超声波脱气法 它是目前实验室使用最广泛的脱气方法，将配制好的流动相连同容器一起放入超声波水漕中脱气10-20min即可。该方法操作简便，基本能满足日常分析的要求。5. 在线真空脱气法 把真空脱气装置串联到储液系统中，并结合膜过滤器，实现了流动相在进入输液泵前的连续真空脱气。此法的脱气效果明显优于上述几种方法，并适用于多元溶剂体系。 其二，在液相色谱系统开始工作前，可以用注射器连接恒流泵的排空阀，抽入流动相，将流路中的空气驱赶干净。其三，在注入样品前注意排出样品注射器中的空气。

高效液相色谱系统中气泡对检测的影响及其解决方法在我们进行液相色谱分析时，有时会遇到这样一个问题：系统的流路中存在气泡。由于气泡的存在，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降；气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。造成上述现象的主要原因有三条：一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡；二是系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净；三是在注入样品时不注意混入了空气。为了避免这类问题的出现，液相色谱实际分析过程中必须重视对流动相进行脱气处理。常用的脱气方法有以下几种：1.吹氦脱气法 使用在液体中比空气溶解度低的氦气，在0.1Mpa压力下，以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除溶解的气体。此法使用于所有的溶剂，脱气效果较好，但在国内因氦气价格较贵，本法使用较少；2.加热回流法 此法的脱气效果较好；3.抽真空脱气法 此时可使用微型真空泵，降压至0.05-0.07MPa即可除区溶解的气体。显然使用水泵连接抽滤瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成过滤机械杂质和脱气的双重任务。由于抽真空会引起混合溶剂组成的变化，故此法适用于单一溶剂体系脱气。对多元溶剂体系应预先脱气后再进行混合，以保证混合后的比例不变。4.超声波脱气法 它是目前实验室使用最广泛的脱气方法，将配制好的流动相连同容器一起放入超声波水漕中脱气10-20min即可。该方法操作简便，基本能满足日常分析的要求。5.在线真空脱气法 把真空脱气装置串联到储液系统中，并结合膜过滤器，实现了流动相在进入输液泵前的连续真空脱气。此法的脱气效果明显优于上述几种方法，并适用于多元溶剂体系。其二，在液相色谱系统开始工作前，可以用注射器连接恒流泵的排空阀，抽入流动相，将流路中的空气驱赶干净。其三，在注入样品前注意排出样品注射器中的空气。

1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、UPS和通风柜等辅助设备。5. 程序

液相色谱系统中如果有气泡真是影响很大，最直接的就是压力不稳，影响到检测的正常进行一般情况在开机的时候都会做一下准备工作，将系统中的气泡排干净，一切准备就绪，气泡彻底排掉，压力也稳定了可是在检测过程中为什么又会出现气泡呢？这个气泡是怎么来的呢？到底是如何形成的呢？可能形成气泡的原因有很多吧？大家都来说一下具体的原因吧也好让我这样的新手能够提前做一些预防措施，谢谢大家！

[b]高效液相色谱系统适用性试验设计的变化趋势[/b][i]周晓源,李雪茹[/i]高效液相色谱法（HPLC 法）是药物分析中常用的一种定性、定量色谱分析方法。具有较强的专属性，相对较高的检测灵敏度和良好的量化功能。2005版《中国药典》使用 HPLC 法的品种中，色谱系统适用性试验设计有了较大的变化：指标更加细致、周到，检测更重实效，色谱系统适用性的试验用溶液的制备方法也呈现多样化，体现出一些变化趋势。 １． 色谱系统适用性试验的设计与实验目的更加匹配 系统适用性试验的严格细腻程度取决于实验目的。首先应考虑色谱系统被用于何种实验，根据实验目的来设计系统适用性试验。如果一个 HPLC 方法仅用于定性鉴别，就其色谱系统的适用性试验而言可以相对简单宽松，只要可以确保被测成分峰与其他色谱峰有一定的分离度，具有适宜的出峰时间即可达到实验目的。 如果用于定量分析（如含量测定），则除要保证被测成分峰具有适宜的出峰时间外，还需检验系统是否能够保证被测成分峰与其他色谱峰完全分离，分离度一般应在1.5以上，同时还应测试被测成分峰峰面积的重复性是否良好，对照品溶液连续进样5针的峰面积相对标准偏差应不大于２％，被测成分峰的峰型也应基本对称，以保证分离效果和测量精度。对于小峰（如占总面积10％以下的色谱峰）峰面积的定量，或用峰高法定量时，就应对拖尾因子或对称因子加以严格的规定，一般来说，拖尾因子应在 0.95～1.05之间，因为峰的对称性对测量结果影响较大。 如果检查某种药品的有关物质，且还需要分别检查单个杂质和杂质总量，那么系统适用性试验还应有一个重点，就是要有常见杂质难分离物质对分离度的测定指标。此外系统的检测灵敏度试验也就相对比较重要。如盐酸二甲双胍的有关物质检查项下要求： 盐酸二甲双胍与双氰胺的分离度应大于1.5，检测灵敏度要求调节双氰胺峰高为满量程的10％。 如 果色谱系统是一个梯度洗脱系统，有时一个难分离物质对分离度的测试也不能完全达到实验目的。如果在梯度变化的前后均有需要检测的杂质，分离度的测定指标一般应根据需要在梯度变化之前和之后都可加以制订。在梯度洗脱系统中某个成分峰的保留时间也经常用来做系统适用性检测的指标，给出吐峰时间范围，如头孢地尼，主成分头孢地尼峰的保留时间要求22分钟，Ｅ-异构体峰保留时间约为33分钟，理论板数按头孢地尼峰计算应不低于 7000。 在2000年版《中国药典》中，有些标准色谱系统适用性试验的要求就与其色谱系统的实验目的不完全匹配。如有些品种含量测定与有关物质共用一套色谱系统，且有关物质还需要分别检查单个杂质和杂质总量，但系统适用性试验指标仅有一个理论板数的要求，或对分离度的设计为“被测成分峰与相邻杂质峰间的分离度应符合规定”这样一个对系统性能缓冲空间很大的一个指标要求。在2005年版《中国药典》中，这种实属很虚的指标开始减少。如2000年版头孢曲松反式异构体（光降解产物）峰的保留时间应为头孢曲松峰保留时间的1.3倍，两峰之间的分离度应不小于3.0，理论板数按头孢曲松峰计算应不低于1500，2005年版修订为头孢曲松峰和头孢曲松反式异构体峰间的分离度应不小于6.0。２.系统适用性试验用溶液的制备更加注重方便性、实用性和可操作性系统适用性试验用溶液的配制方法，最简单的莫过于用主成分对照品与杂质对照品混合配制，但有些杂质对照品不能得到，如性质不稳定或与主成分理化性质太接近，分离提取技术要求太高，成本太大等，但这些杂质峰恰恰又是与主成分峰最难分离的色谱峰，且较常存在于 药 品中需要检查的，在2005年版《中国药典》中，这一问题得到了较好的解决。如喹诺酮类药物中较常出现光降解产物，而此光降解产物是引起这类药物不良反应的主要因素，所以需要在有关物质检查中做为重点检测的杂质之一。 因 此 ，在2005年 版 《 中 国 药 典 》中，这些药物系统适用性试验用溶液的制备就通 过把对照 品溶液进行 光 照 处理，得到能产生明显光降解产物色谱峰的溶液。 3.实验过程、操作步骤趋于严谨规范 色谱系统适用性试验设计、规定的完备、灵敏度检测试验的规范，溶剂的选择、溶解制备方式等各方面均体现出对实验目的的理解更加明确，对实验细节考虑更加严谨周到，标准的书写格式均更 加规范 、统 一 ，如2005年 版《中 国 药典》收载的 β-内酰胺类抗生素中检查高分子聚合物的品种将原来收载的8个品种的色谱条件与系统适用性试验均修订与新增 13个品种项下书写格式相同，系统适用性试验统一为理论板数以蓝色葡聚糖2000峰计算均不低于……。拖尾因子均应小于2.0，在两种流动相系统中蓝色葡聚糖 2000峰保留时间比值均应在0.93～1.07之间，对照品溶液主峰与供试品溶液中聚合物峰与相应色谱系统中蓝色葡聚糖 2000峰保留时间的比值均应在0.93～1.07之间。

你购买过液相色谱系统适应性专用对照品吗，还是直接以含量用对照品来做，如阿莫西林？

欢迎大家前来与卢燕产品专员一起就UHPLC+（优谱佳）液相色谱系统一起探讨~！活动时间：2010年10月08日——10月21日 00【线上讲座37期】 超快速液相的新篇章：UHPLC+（优谱佳）液相色谱系统 主讲人：卢燕活动时间：2010年10月08日---10月21日http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191652_628895_1604352_3.gif导言： “2010戴安中国年”全年活动暨戴安中国有限公司成立十周年之际，继全球最高端的ICS5000离子色谱发布之后，戴安又在高效液相色谱行业内推出划时代意义的产品——UHPLC+，以普通液相的价格将超高速液相的技术带入“寻常百姓家”。戴安公司以其独特的视角，将UHPLC技术提供给所有的液相色谱使用者及所有的分析实验室，并应用于所有的待分析物。众所周知UHPLC带来很多的优势：分析速度更快，分离度更好，还有运行成本更低。过去5年中UHPLC产品日益完善，但居高不下的价格让很多普通液相的使用者望而却步。 所幸的是，戴安公司新推出的UHPLC+彻底打破了这一局面。现在，仅以普通液相的价格就能获得超高效液相的功能。戴安公司已在超高效液相领域研究多年，并取得了一定进展，是目前屈指可数的可为所有HPLC使用者提供与超快速液相相兼容仪器的公司。戴安公司不仅为所有标准型和基础自动型液相系统增加了UHPLC兼容性，还扩展了UltiMate 3000RSLC系统的UHPLC性能，为您的实验提供最大限度的使得和帮助。无论今天明天或是将来，都给您更多的信心！http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191652_628895_1604352_3.gif特邀佳宾：emoc98311，03yx2，xky0230699，liwei7893，xue2009，21kgtan，allenbert，doxw0323，duanjiezz，easyboy，feixue810316，flyaway，godblesschina，hmzhou83，hujn，JOHNE0212，muziying114，pandora98，poren，tyys98，wangboxzzjs，wangzijin，wenshaowei-2008，wsy18，wuyinghao，wyqql2060，xyhdcm2002，yxm0411等参与人员：全体注册用户活动细则：1、请大家就UltiMate® 3000液相色谱系统遇到的相关技术问题进行提问，直接回复本帖子即可，自即日起提问截至日期2010年10月21日2、凡积极参与且有自己的观点或言论的都有积分奖励（1-50分不等），提问的也有奖励3、提问格式：为了规范大家的提问格式，请按下面的规则来提问 ：卢燕专员，您好！我有以下问题想请教，请问：……http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2009226105115_01_1604352_3.gif说明：　　本讲座内容仅用于个人学习，请勿用于商业用途，由此引发的法律纠纷本人概不负责。虽然讲座的内容主要是对知识与经验的讲解、整理和总结，但是也凝聚着笔者大量心血，版权归戴安中国和仪器信息网所有。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2009226105115_01_1604352_3.gif