缓冲液自动进液器

液相色谱自动进样器如何清洗？因为我的自动进样器用的磷酸盐缓冲液，比较容易析晶，刚接触到自动进样，想请问液相自动进样器如何清洗？

敬请指导：怎么使用磷酸缓冲液梯度？能够自动进行流加吗？磷酸缓冲液和醋酸缓冲液的缓冲能力怎么区分？哪一个效果更好？谢谢！

请问各位专家，在使用缓冲液的时候是否 可以随意更换呢？比如说，我先使用磷酸钾缓冲液，然后换用了柠檬酸磷酸缓冲液，可以吗？要是不可以的话，二者的本质区别是什么呢？不管对仪器还是对样品来说，会产生哪些方面的 影响呢？谢谢！本人是新手，请大家指教。

缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。PH缓冲系统对维持生物的正常pH值，正常生理环境起重要作用。多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动，而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系，它们时蛋白质、重碳酸盐缓冲体系。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。 在生化研究工作中，常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到我们工作的成效。如果提取酶实验体系的pH值变化或变化过大，会使酶活性下降甚至完全失活。所以我们要学会配制缓冲溶液。 由弱酸及其盐组合一起使具有缓冲作用。生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的反应。 硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。 柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。 磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。 三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑止的作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris一缓冲液，在4℃时是8.4，在37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下，缓冲能力很差。 缓冲液的pH值由哪些因素决定？ 设缓冲系统的弱酸的电离常数为K（平衡常数），平衡时弱酸的浓度为[酸]，弱酸盐的浓度为[盐]，则由弱酸的电离平衡式可得下式： 根据此式可得出下列几点结论： （1）缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数K及盐和酸的浓度有关。弱酸一定，但酸和盐的比例不同时，可以得到不同的pH值。当酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PK值相同。 （2）酸和盐浓度等比例也增减时，溶液的pH值不便。 （3）酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为最高，比例相差越大，缓冲效率越低，一般地说缓冲液有效缓冲范围为PK±1pH。 从上述可知，只要知道缓冲对的PK值，和要配制的缓冲液的pH值（及要求的缓冲液总浓度）时，可按公式计算出[盐]和[酸]的量。这样算涉及到对数的换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，经计算已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系列出了表格。讲义附录部分节录有磷酸缓冲液的配制表。只要我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可计算处所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。 经查表知pH5.8浓度为0.2MNa2HPO48.0毫升，而0.2MNa2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1MNa2HPO48.0毫升，而0.1MNa2HPO4需要92.0毫升。 所以500ml0.1M磷酸缓冲液需要Na2HPO4量为:需Na2HPO4量为 :计算好后，按计算结果称好药品，放于烧杯中，加少量蒸馏水溶解，转移入50ml容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，便得所需的缓冲液。 各种缓冲溶液的配制，均按下表按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确的浓度才能进行，如醋酸、NaOH等。

中国药典2010年版规定： 对弱缓冲或无缓冲作用溶液的 pH 值测定，先用苯二甲酸盐标准缓冲液校正仪器后测定供试液，并重取供试液再测，直至pH值的读数在1分钟内改变不超过±0.05 止；然后再用硼砂标准缓冲液校正仪器，再如上法测定；二次pH值的读数相差应不超过0.1，取二次读数的平均值为其pH值。 对此，我有几点疑惑，请大家帮忙解答：1 弱缓冲或无缓冲作用溶液指哪些？2.该类样品还需按常规方法先校正吗？3.“二次pH值的读数相差应不超过0.1 ，取二次读数的平均值为其pH值 ”，其平均值为哪两次的读数？ （1） 苯二甲酸盐标准缓冲液校正仪器后的一次读数与 硼砂标准缓冲液校正仪器 后的一次读数的平均值 （2） 硼砂标准缓冲液校正仪器 后的两次读数的平均值

我举个例子来说明一下：柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L） 这里的0.1mol每升指的是什么！？与柠檬酸—柠檬酸钠（0.05mol/L）有什么不同？！ 这个不同对缓冲液体系有什么影响么！？配制pH4.8的柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）的方法如下：0.1 mol/L柠檬酸 9.2mL 再加 0.1mol/L柠檬酸钠10.8mL那么配制pH4.8的柠檬酸—柠檬酸钠（0.05mol/L）缓冲液该如何进行？！

有时候为了改善色谱的保留以及峰形，需要添加一定浓度的缓冲液。文献上用的缓冲液浓度有高有低。对于同一种物质测定，分别添加10mmol/L和1mmol/L两种浓度的缓冲液，我实际做的效果差不多，在理论上有两个浓度会有差别吗？缓冲液浓度大小有没有一个设定的范围？

对于缓冲液的配置一直是迷迷糊糊Q1 现在如果我想配置醋酸缓冲液 pH 4 （12mM）和 pH 4 （50mM） ，请问这个怎么实现？还有此时 pH 4 （12mM）和 pH 4 （50mM）的离子强度分别是多少？Q2 关于磷酸-柠檬酸缓冲体系 大家用的是磷酸氢二钠的二水化合物还是十二水化合物？

请教大家两个问题，看到文献用0.1M 醋酸钠 (pH 7.2)的缓冲液。在网上查了一下，貌似醋酸钠缓冲液的缓冲区间是3.7-5.6，是用醋酸钠和醋酸混合而成的。按理说醋酸钠是强碱弱酸盐，如果少加一些醋酸，应该可以达到pH 7.2。但是问题是，这样在这个pH值下，就没有什么缓冲能力了？另外一个问题是，文献说用pH 为2.5的磷酸盐缓冲液，可是磷酸盐缓冲液的缓冲区间是5.7-8.0，那么我怎么能调到2.5呢？加盐酸吗？可是这样是不是也失去缓冲液的意义了？谢谢大家。祝十一快乐:)

本人做检测~从没用过缓冲液，还不知道缓冲液用途。 请大虾~不吝相告 缓冲液的作用及应用。 嘿嘿~ 最好 是 PDF 版的~ 我可以慢慢看。 谢谢

请问下大家，卖试剂的地方有么有卖缓冲液的 ？我可以买试剂再自己配吗，配得的缓冲液标准吗？

200mM的硼酸-硼酸盐缓冲液与50mM的硼砂-氢氧化钠缓冲液，那个离子强度高，电导小，电阻小？还有缓冲液的离子强度跟阴阳离子有关还是和其中一个关系更多？谢谢

化合物的划分HPLC分离的样品从其在分离体系内（或者说是流动相下）的状态来划分，可以分为中性样品和离子型样品。所谓中性样品就是在分离条件下不能解离的化合物，而离子型化合物则能够解离出离子。换句话说，离子型样品是指酸碱盐类的化合物，而中性化合物是除此之外的化合物。有盐流动相好在那里反相色谱（RPC）分离样品主要基于待分离化合物的极性实现分离的。在其他条件相类似的情况（分子量、空间结构）下极性强的物质保留值小。对于中性样品来说其极性取决于化合物本身，但是对于离子型化合物可以通过调整其是否解离或者解离程度来调整其极性，最终达到调整其保留值、分离度和拄效（一般保留值提前会带来拄效的提高）。在分离含有少数化合物待检样品的情况下，使用无盐流动相是一般是可行的（可以不考虑其是否全部或者部分未中性化合物）。因为分离的化合物少，可能分离度方面的要求相对不是很重要，而保留值的调整还可以采用调整流动相的洗脱能力、流速等条件得以实现。但是对于分离多组分的样品采用无盐流动相往往就会遇到麻烦。此时需要尝试采用有盐流动相，也就是要用到缓冲液。当然如果样品中的化合物全部都是中性化合物采用有盐流动相也是很难奏效的，可是这样的时候毕竟比较少。所以，在分离多组分待检样品时如果无盐缓冲液效果不好，要首先考虑有盐流动相。 缓冲液缓冲液是能够提供共轭酸碱对，在一定条件下稳定pH值的一种溶液。使用缓冲液就可以控制分离过程中的p H，进而控制化合物的解离程度，达到调整化合物极性的目的。缓冲液控制pH的能力就是缓冲液的缓冲容量。其大小由三方面因素决定，分别是：所要控制的pH、缓冲盐的pKa和缓冲盐的浓度。这里就涉及你要控制的pH和选用的缓冲盐的关系，好在这方面的数据一般的色谱书中都会有提及，查一查就可以解决问题。关于缓冲盐浓度认为采用30mM是比较好的，这是一个通常的参数，一般来讲进样量越少、分子量越大、酸碱官能团越少选用的盐浓度可以越小。缓冲盐浓度越小对仪器和色谱拄越好。 缓冲液的选择对于已知化合物来说这个比较容易。如果是一个碱性化合物，在无盐流动相下保留时间过长，那么可以采用控制流动相为低pH条件，使其达到完全解离，增加其极性，达到缩短分离时间的目的。如果分离的化合物pKa比较低（酸性化合物），在无盐流动相下保留时间比较长，可以采用控制流动相为高一些的pH条件，道理相同。对于保留时间过短的采用相反的调整方式即可，不赘述。对于分离多个组分而且未知化合物组成的样品就显得比较麻烦了。缺少相关分离样品的资料只能从实验入手了。也就是说尝试各种pH值的流动相（期间最好有机相的比例固定），一般来说从低pH试起是一个比较好的选择，因为我做过的化合物多是碱性化合物（这点仅当参考），再有常用ODS柱子适用pH范围相对第一些。另外，在调试分离最佳的pH条件的时候，可以采用一种盐——枸橼酸盐，其有点是在Ph2.1～6.4之间等体积混合相同浓度不同pH的缓冲液，混合后的pH值几乎是两者的平均值。声明这一点我没有试验过，从书上看来的。如果这样，在有双通道仪器上调整流动相的pH值将会非常方便。确定好了pH值，然后在换成常用的缓冲盐就OK了。上面说的是pH范围的选择。在确定了分离最适合的pH之后，就是确定用那种缓冲盐了。一般从两个方面考虑，一是溶解度，要求在所用的有机相比例下易溶解，否则容易造成系统内缓冲盐析出；二是要考虑截至波长的问题。磷酸盐是比较常用的，可以有两个缓冲范围2.0~3.0和6.2～8.2，截至波长小于200nm。注意：缓冲盐中的杂质可能严重影响其截至波长。碳酸盐也不错，但是在低pH会有CO2放出，可能导致缓冲效果降低。 缓冲液的制备流动相的pH就指的是流动相中缓冲液的pH值。不要把有机相混入缓冲液之后再调其pH。流动相或者缓冲液过滤的问题。有人倾向于先过滤缓冲液然后混合有机相使用。也有的是有机相与缓冲液混合之后统一过滤。虽然各有缺点，但我认为第二种做法更好些。因为毕竟这样做最仪器和柱子更为保险些，虽然有可能在抽了过程中有可能引起部分溶剂挥发，但我认为可以忽略之。缓冲液不易长时间放置，尤其是夏天，会生细菌。2天内使用比较合适。系统冲洗用缓冲液的系统用过后一定、务必要冲洗。用过渡流动相是一种好办法。过渡流动相就是分析用流动相中去掉无机盐。但是有机相比例较少的最好不要用过渡流动相冲洗。结束语采用有盐流动相是反相色谱普中常用的方法，尤其适合分离离子型化合物。只是也有其缺点就是仪器维护上稍微费事点。这种方法不能解决分离中的所有问题，有些复杂样品必须借助于梯度洗脱或者离子对色谱。欢迎大家交流！！

我做微流控芯片电泳的 有一段时间了 现在要优化下我的缓冲体系 MES/Tris 想要配置成 PH 4.0 -7。0之间的多个pH 有做过这种缓冲液的 请教下怎么配的 两者之间的比例分别多少 我能不能在这种缓冲液中加入 NaoH 或是HCL 还有在电泳的过程中出峰间隔时间太短 该怎么处理 改哪些条件 在NaoH \ HCL在电泳通道里会起什么作用

中国药典规定：对弱缓冲液（如水）的pH值测定,先用邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液校正仪器后测定供试液，并重取供试液再测,直至pH值的读数在1分钟内改变不超过±0.05为止；然后再用硼砂标准缓冲液校正仪器，再如上法测定；二次pH值的读数相差应不超过0.1,取二次读数的平均值为其pH值。 问题：1.“先用邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液校正仪器后”，需要再用磷酸盐标准缓冲液(pH6.8)调斜率吗？2.“然后再用硼砂标准缓冲液校正仪器”，需要再用磷酸盐标准缓冲液(pH6.8)调斜率吗？

缓冲液附表PH（4,7,10）缓冲剂使用说明Temp. ℃510152025303540454.014.014.004.004.004.014.014.024.034.04Temp. ℃510152025303540457.007.097.067.047.027.006.996.986.976.97Temp. ℃5101520253035404510.0110.2510.1810.1210.0610.019.979.939.899.86

请问硼砂缓冲液可以用乙酸调节吗？如果pH值在7-8之间的硼砂缓冲液用什么酸调节？谢谢

我想请教一下，BGE的PH要在缓冲液的PH范围之内吗？我的缓冲液是Tris，缓冲范围是7.2-9吧，但是我配好的BGE的PH是6左右，但是可以出峰，想问一下这样可以不？？

配制缓冲液盐加的多少对出峰或峰形有什么影响吗？一般应加多少为宜？

老师说缓冲液浓度一般是20-50mmol/L，只要符合要求，越低越好，浓度高了伤柱子。按照美国药典的方法，做缬更昔洛韦的缓冲液磷酸二氢铵浓度是100mmol/L，所以怎么判断缓冲液的浓度适合不适合，是偏低还是偏高？

请问下大家，卖试剂的地方有么有卖缓冲液的 ？我可以买试剂再自己配吗，配得的缓冲液标准吗？

缓冲液是CE作为流动相的重要组成部分，那如果选择缓冲液不当，会出现什么问题呢？1、缓冲液不当是否会影响电离效果，降低响应呢？2、缓冲液不当是否会影响峰形3、你都遇到过什么样的缓冲液不当问题，一起来分享下吧http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif

我再次谢谢大家，基本明白了，一种溶液当浓度固定时，在此还有个问题：氨—氯化铵缓冲液的配制是称取20g 氯化铵溶于500毫升除盐水中，加入150毫升浓氨水(密度0.9g /ml )以及5.0克乙二胺四乙酸酸镁二钠盐用除盐水稀释至1000mL混匀，下午去买了乙二胺四乙酸二钠盐，没除盐水用桶装纯净水代替，按上面所说配制完成后，为何用上上面所配氨—氯化胺缓冲液滴定自来水，都测不到硬度，铬黑T指示剂是好的，大家能帮忙分析溶液配制出错在什么地方？

[color=#444444]ABS[/color][color=#444444]缓冲液是什么缓冲液，具体是怎么配置的呢[/color]

刚才看见一篇文献，提到pH5.5的Mcllvaine缓冲液，这个缓冲液是什么，有大侠知道吗

0.575g磷酸二氢铵（分子量：115.03）和0.7g磷酸二氢钾（分子量：174.18） 溶解在1升水中，请问怎样算缓冲液的pH？怎样算缓冲液的浓度？

转自色谱网缓冲液可以提供离子平衡的反离子，并使流动相保持一定的离子强度和ph值，减少拖尾。但是使用缓冲液要注意几点1：避免使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用。2：缓冲液最好要现配现用，往往缓冲液是良好的菌类培养液，隔天或放置长时间实验时会有很多怪现象发生。3：实验后不可用有机溶剂直接过度，有机溶剂会处使盐类析出，造成液路或色谱柱堵塞，可用95：5的水甲醇冲洗。4：使用缓冲液要及时掌握ph范围，做到胸中有数。5：清洗液路和柱子时，有温控可加热到30摄氏度易于冲洗。6：长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出，若有白色盐类析出，可考虑一定周期用10%硝酸冲洗一下液路（拆下柱子，走30ml,再用5倍水冲洗）可以避免液路的堵塞。7：选择缓冲液要用可靠的试剂，避免不纯的盐类造成不必要的麻烦。

大家好，有台岛津6A，打开电源后，氘灯点不着，要过很长一段时间可能点着，怎么回事，等能量没问题，灯点不着一般有哪些原因？还有甲醇和水的流动相中同时加入三乙胺和乙酸，算不算缓冲液，需要用水过渡一下吗？

现查得磷酸盐缓冲液的范围是：4.92-8.18，希望配置PH=3、4的磷酸盐缓冲液，哪位朋友配置过相关溶液，或知道相关计算方法，请帮忙解答一下，谢谢！

本人最近在用ce做蜕皮激素的实验，请问关于缓冲液的配置是用原厂安捷伦的buffer好，还是用乙晴和tris溶解的好，关于hp的缓冲液配置软件，各位有什么见解。谢谢。邮箱是national1217@126.com,有兴趣的朋友可以联系一下哦