凯氏定氮滴定系统

如题半微量凯氏定氮国标法有两种指示剂,滴定终点各怎样辨别?我用的是甲基红和溴甲酚绿指示剂,怎么滴的终点颜色和国标上描述的不大一样啊???请大家指点,谢谢......[em53]

GBT22427.10-2008 淀粉及其衍生物氮含量测定》中指示剂是：由两份中性甲基红冷饱和溶液和一份浓度为0.25 g/L的亚甲基蓝溶液混合而成，贮存于棕色瓶中。（1）我想问的是中性甲基红冷饱和溶液的中性是什么意思？是不是说配完甲基红冷饱和溶液后加酸或碱调溶液PH为7.0？用试纸大概显中性行吗？会对定氮结果的影响大吗？（2）关于凯氏定氮最后的滴定变色测量含氮的原理，我有不懂得地方，国标说用硼酸（20g/L），这样的硼酸的PH是多少呢？我觉得只有是5.2才能确保后面的滴定准确，因为指示剂变色范围是5.2到5.6，5.2的是紫红色，5.6的时候是绿色，滴定到溶液显紫红色时就停止滴定，说明要让硫酸或盐酸把氨气抢走的氢离子还回来，要还的正好是PH5.2！不知道我这么理解对不对？那么就有一个问题是：硼酸（20g/L）的PH是5.2吗？网上有说 0.1mol/L的硼酸ph为5.1，那推理是硼酸（20g/L）的PH是小于5.1的，那么氨气抢走硼酸的氢离子后，再滴定到显紫红色（ph5.2），我觉得是不准的。

凯氏定氮法测回收率波动的六个原因解析测定食品中的“蛋白质”含量 ，大家经常会用的一种方法就是：[color=black]凯氏定氮法 [/color][color=black]方法原理：食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离, 用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸的消耗量计算氮含量,再乘以换算系数（常用的乳及乳制品的系数 6.38 、饲料的系数 6.25）,即为蛋白质的含量。[/color][color=black]方法有很多的优点：比如1、可用于所有食品的蛋白质分析中。 2、操作相对比较简单。 3、实验费用较低。 4、结果准确，是一种测定蛋白质的经典方法。 5、用微量凯氏定氮法可测定样品中微量的蛋白质。 [/color]但[size=21px][color=black]如何评价凯氏定氮法测定的准确性的问题尼？一般采用质控样和回收率两种方法对其进行评价，看到最后，一定会收获满满。[/color][/size][color=black]有朋友问到：采用硫酸铵做质控，结果有的偏高、或者偏低。是原因引起的？有以下几种可能，逐一排查：[/color]硫酸铵或者尿素 易吸潮，称量之前一定干燥。要检查干燥器中干燥剂 是否可用， 颜色是蓝色 还是白色。称量用到的天平，水平泡是否张中心，是否在计量期间核查时效内。接收液 硼酸溶液 配置是否正确？滴定管 是否计量过？滴定操作是否正确。手动滴定 还是 仪器自动滴 ，手动滴的话不同人员对 滴定终点的颜色 目测也会存在差异。[color=black]这些因素都可能引起结果的偏差，要留意一下。[/color]