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冷冻超薄切片系统

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冷冻超薄切片系统相关的论坛

  • 关于冷冻切片机

    冷冻切片机 仪器价格: 12万元 购置日期:2001年 仪器所在地:中医肝病研究所实验室 联 系 人: 顾宏图 联系电话: 51322444 收费标准: 暂未定 开放时间: 8:00~17:00 仪器简介: 徕卡CM1850是应用于组织学和临床组织病理学的一种快速低温恒冷切片机,它是将切片机置于冷冻室以外的低温恒冷切片机。CM1850的特色之一是具有宽敞的冷冻室,快速冷冻室可同时存放多达10个样品,并和一个可持续冷却的吸热器相连,以保证样品托上的样品快速冷却。切片刀温度可冷却到-35℃,样本可以快速冷冻到-40℃。切片机有狭槽盖防护,避免残渣进入机器内部。增强绝热性能(真空面板)及温度控制系统,减低压缩机运作费用及提高耐用性,比传统绝热系统使用寿命长,可以保证冷冻箱温度,例如:在35℃室温保持-35℃。同时可以做到电脑诊断维护。高质量无焊接缝的不锈钢冷冻室表面光滑利于清洁和防止污染。切片机配备双速马达驱动粗进,控制键布置在左方靠手,符合人工学原理。具备自动及人工除霜功能。独特设计的玻璃反卷板可保证连续的切片。切片机具备方便的调节功能,可快速及精确对样本切片定位。切片机推进系统运作平稳、流畅,切片厚度为1~60μm,切片精度可达1μm,最大样品直径55mm。 应用范围 可提供各种冰冻切片服务。 目前应用于: 1. 为快速病理诊断提供冰冻切片。已成为癌症诊断的重要工具。 2. 细胞学:显示脂肪、脂类以及特种组织成份。 3. 免疫细胞化学、免疫组织化学和分子生物学技术等研究工作。 4. 神经生物学研究。 5. 常规组织胚胎学研究。 6. 皮肤病理学研究。 7. 动脉血管外科学研究。 同类仪器情况 : 中药研究所: SPOCTRA MXA190 2002年 倪跃元 解剖实验室: LION 1998年 余安胜 张建华

  • 怎样做好塑料超薄切片???

    [em53] 试样是增韧过后的HDPE 都切快一个月了,还是大不到预期效果 实验室超薄切片机有个不足之处就是没有冷冻台 介绍点经验,怎样切好在没有冷冻台的情况下?

  • 【讨论】各位大虾,急求可以做冷冻切片的电镜组

    各位大虾,急求可以做冷冻切片的电镜组已经找过上海医学院和第二军医大学,前者要1000块一个样品,也不能马上做,后者不肯做我们的材料样品想问问在上海还有什么地方可以做材料的冷冻切片,最低温度可以到多少,效果如何大家有没有什么推荐的

  • 【原创大赛】超微结构保存更好——高压冷冻与冷冻替代样品制备技术

    【原创大赛】超微结构保存更好——高压冷冻与冷冻替代样品制备技术

    最近一直在摸索着用高压冷冻和冷冻替代样品制备技术,刚开始做的时候冰晶特别严重,如下图Hela细胞。冰晶已经把细胞超微结构破坏的不行了。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231539_611900_2423894_3.jpg经过很长时间的摸索,得到以下制样方法:1 取样1.1 培养细胞:取适量的细胞悬浮液,低速离心成细胞团,去上清,细胞团呈米糊状,用移液枪取适量细胞,填满Carrier,加入适量冷冻保护液1-Hexadecene,滤纸吸取多余水分,使冷冻保护液液面略高于Carrier(Carrier用丙酮清洗,然后在空气中晾干,用1-Hexadecene浸泡备用)。1.2 小鼠肝脏:从活体上取出的组织,先用锋利的刀片在低温下切成尽可能薄片状,从中挑选合适的部分切下来,然后装入Carrier,加入适量冷冻保护液1-Hexadecene,滤纸吸取多余水分,使冷冻保护液液面略高于Carrier。2高压冷冻高压冷冻仪在使用前,要先做一些准备工作:要先加入足够的液氮,并加入压力液甲基环己烷,然后用空载的carrier高压冷冻三次,保证高压冷冻仪在最佳工作状态。2.1 将上述装有样品的carrier快速安置到高压冷冻仪,准备高压冷冻。2.2 高压冷冻样品,迅速把样品冷冻下来,并做好记录。通过高压冷冻仪冷冻样品后产生的冷冻速度和压力变化曲线,可以选择冷冻效果较好的样品继续下面实验。2.3 转移样品,首先把现配的替代液1%锇酸(0.5g锇酸溶于50mL丙酮)分装到2mL冻存管中,迅速放入液氮冷冻备用,冷冻过程中保持冷冻管直立。与此同时,冷冻替代仪加满液氮,将自制的冻存管架放入样品腔,预冷至-100℃。用预冷的镊子,在液氮下将Carrier分别装入冻存管,冻存管盖不宜拧的过紧,然后迅速转移到冷冻替代仪样品腔室的冻存管架里。3 冷冻替代 步骤 温度 时间 1 -100℃ -90℃ 4h 2 -90℃ 72h 3 -90℃ -60℃ 8h 4 -60℃ 8h 5 -60℃ -30℃ 4h 6 -30℃ 8h 7 -30℃ -20℃ 2h 8 -20℃ 8h 9 -20℃ 4℃ 2h 10 4℃ 1h 温度达到4℃后,用4℃的丙酮浸洗样品3次,每次15分钟。此过程中,会有部分样品与Carrier分离,若还有没分离的可以用解剖针将样品从Carrier中剥离。4 渗透包埋分别用以下渗透液渗透。 步骤 渗透液 浓度 时间 1 Epon812/丙酮 1:1 1.5-2h 2 Epon812/丙酮 3:1 6-12h 3 Epon812 100% 1h 4 Epon812 100% 8h 5 Epon812 100% 1h然后将样品转移至包埋槽,60℃烘箱聚合48h。5 超薄切片把两种生物样品对应的每一个包埋块分别超薄切片,各捞两个铜网,并染色。6 电镜观察观察细胞内超微结构保存情况,对感兴趣区域拍照。终于有所改善,如下图的小鼠肝脏细胞,轮廓十分清楚,结构保存完好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611895_2423894_3.jpg局部放大后观察,能看见核孔,双层核膜,甚至是膜的磷脂双分子层结构(这是在常规化学固定制样中很难看到的),看到这些让人激动不已。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611894_2423894_3.jpg碰巧看见一个正在分裂的线粒体。线粒体脊很清楚,双层膜紧挨着,不像常规制样间隙那么大。另外,线粒体基质保存完好,所以线粒体整体较细胞基质反差大。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611893_2423894_3.jpg以下是常规化学固定制样的结果,可与上面高压冷冻及冷冻替代制样技术结果对比:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231644_611928_2423894_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609

  • 电镜超薄切片辅助定位系统的开发与应用

    超薄切片技术是电镜样品的重要制备方法之一,随着科学研究的发展,需对样品的特定部位进行精准超薄切片的领域越来越多,但现有的超薄切片机无法实时原位观测样品的侧切面,导致定位过程繁琐、效率低、精度差。超薄切

  • 超薄切片真难

    做高分子材料的超薄切片,切了一天楞是没切好一片.各位有没有好的经验?

  • 求教超薄切片机故障

    一台Reichert-Jung Ultru E超薄切片机,购于90年,最近几年出现一个问题:冬季当室温较低时,出现"点头"故障,样品臂下降到刀口位置时,无法继续下移,来回晃动,同时伴有"咔咔"声,后来将室温升到25度以上后,切片机有时能恢复正常.不知何故?目前看来该型号切片机属于什么档次?

  • 铝板-超薄切片

    各位好,我公司需要研究铝板上的缺陷,需要找到一家可以提供超薄切片的实验室,请帮忙提供信息,特别感激!

  • 国家蛋白质科学中心•上海(筹)招聘冷冻电镜管理人员

    国家蛋白质科学中心-上海(筹)招聘冷冻电镜管理人员 国家蛋白质科学研究上海设施是国家重大科技基础设施,是国家级蛋白质科学研究平台;在设施建设基础上,依托中国科学院上海生命科学研究院,委托生物化学与细胞生物学研究所(简称SIBCB)负责筹建成立并管理国家蛋白质科学中心(上海)(筹),负责设施的运行管理。具体介绍请参考如下面网页(http://www.sibcb-ncpss.org/index.action?lang=cn) 中心位于浦东新区张江高科技园区中区西部(上海市海科路333号) 。中心定位于:支撑国家蛋白质上海设施建设的建设,衔接该设施的运行;聚集培养生命科学与生物技术特别是蛋白质研究的人才,提升国家蛋白质研究能力;进而促进我国蛋白质基础研究的飞跃发展。中心将立足于国家生命科学与生物技术及相关研究领域雄厚的研究基础和创新实力,成为兼具蛋白质科学研究、技术及成果的转化、集成和应用平台的国家级的重要科学研究单元。 国家蛋白质科学研究上海设施/国家蛋白质科学中心·上海(筹)现因工作扩展的需要,面向社会公开招聘冷冻电镜管理人员。受聘者将有机会接受此技术的全面培训,有事业单位编制。一、招聘岗位名称及人数:冷冻电镜系统管理人员1-2名二、岗位职责:负责用户项目的合作及服务研究。可以独立应用TITAN Krios及TF20电镜,进行cryo-EM single particle及cryo-ET的数据收集、处理和结构分析,或可独立开展高压冷冻、超薄切片服务等。参与中心电镜(包括300 kV TITAN Krios,200 kV TF20及120kV T12)的日常管理,用户培训、技术支持等。三、任职条件:1.应聘者有3年或以上冷冻透射电镜使用经验,具有独立完成cryo-EM single particle及cryo-ET的数据收集、处理和结构分析的能力和经验;或者可以独立开展高压冷冻、超薄切片服务等;2. 具有生物物理学或相关专业的硕士或以上学位(博士学位优先考虑),有SCI第一作者论文;具有良好的中英文口头表达和写作能力;3.有工作热情,乐于学习新技术,有较强的动手能力;4.为人诚实、乐于助人,具有良好的沟通能力和团队协作精神;5. 身体健康,能长期稳定工作。四、招聘方式及程序1、应聘材料:(1)《http://www.sibcb.ac.cn/HXEditor/sysimage/file/doc.gif附件:应聘人员登记表.doc》(见附件);(2)应聘函,包括对应聘岗位的理解、认识及工作设想等;(3)个人简历(包括联系电话、电子邮箱);(4)2封推荐信;(5)有关材料:身份证复印件、学历及学位证书复印件、相关资格证书复印件、获奖证书复印件等;2、资格审查对应聘者进行资格审查,通过初审者,将另行通知面试时间和地点。3、请将上述材料的电子版或扫描件发至hr.ncpss@sibcb.ac.cn,hr@sibcb-ncpss.org.(请在应聘材料和邮件主题栏注明应聘岗位和姓名,按如下格式:“姓名—应聘部门—应聘岗位”),本岗位招满前有效。4、谢绝来电来访,应聘材料恕不退还,招聘单位将予以保密。5、上述岗位按照公开报名、资格审查、面试、决定聘任的程序和方法进行。

  • 【求助】求助关于粉末超薄切片的问题

    这次参加催化会议,有位老师提到了对分子筛类材料做TEM观察的时候把样品要先包埋后超薄切片,这样观察时候可以排除活性组分负载于分子筛外表面的情况。我有个问题想向各位版友咨询一下,一般包埋-切片的步骤是否麻烦,需要什么样的原料与设备。包埋时候是不是把我的无机粉末撒到环氧树脂里就成了?树脂固化后只是用切片就可以直接去观察了么?不需要其他减薄手段么?各位对于超薄切片机有没有什么厂家和型号推荐一下啊!多谢了!

  • 电镜超薄切片制样技术分享

    电镜产生的电子束穿透能力很弱,必须把样本切成厚度小于200nm以下的薄片才适用,这种薄片称为超薄切片。在透射电镜的样品制备方法中,超薄切片技术是最基本?最常用的制备技术,主要步骤包括包埋聚合?切片、捞片等步骤。

  • 石蜡切片与冷冻切片的区别

    1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组 织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片, 而那些稳定的抗原,能经受住石蜡切片的的考验,一般来讲也可以用冰冻切片来做,总得来讲,对于既可以用冰冻切片也可以用石蜡切片检测的抗原,用石蜡切片检 测的染色效果要比冰冻切片好一些。2、从研究目的来看。石蜡切片对组织细胞的定位很准确,而长期冻存组织的冰冻切片可能因冰晶的形成破坏组织细胞形态的结构,并造成抗原的弥散,从而定位不准确。3、从抗原的保真性来看。冰冻切片对抗原的保真很好,而石蜡切片在组织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等过程中可能会对抗原的性质造成影响。4、从操作步骤的繁琐程度看。染色过程冰冻切片简单,而石蜡切片要求脱蜡入水、抗原修复等过程,比较繁琐。5、总之,石蜡切片对标本的长期保存较合适,且组织细胞形态结构保持好;而冰冻切片适合对新鲜组织的制片,然后立即固定、染色效果较好,且免疫荧光中可以相对避免石蜡自发荧光的干扰

  • 植物超薄切片

    我作的植物样品的超薄切片,在电镜下破损的非常厉害,不知是什么原因,有没有谁有这方面的经验,盼赐教。

  • 关于美国RMC公司生产的超薄切片机

    单位想购买新的超薄切片机,徕卡UC7目前的报价太贵,RMC公司的POWERTOME X/XL超薄切片机报价相对来说便宜,但没用过,根据他的国内总代所说国内用户有40来家,不知有没有用RMC超薄切片机的朋友常逛本坛,谈谈对此机器的看法?(产品质量,性能稳定性,操作方便性,配件,维修等)

  • 国家蛋白质科学研究上海设施/国家蛋白质科学中心・上海(筹)公开招聘冷冻电镜管理人员

    国家蛋白质科学研究上海设施是国家重大科技基础设施,是国家级蛋白质科学研究平台;在设施建设基础上,依托中国科学院上海生命科学研究院,委托生物化学与细胞生物学研究所(简称SIBCB)负责筹建成立并管理国家蛋白质科学中心・上海(筹),负责设施的运行管理。具体介绍请参考如下面网页(http://www.sibcb-ncpss.org/index.action?lang=cn) 中心位于浦东新区张江高科技园区中区西部(上海市海科路333号)。 中心定位于:支撑国家蛋白质上海设施建设的建设,衔接该设施的运行;聚集培养生命科学与生物技术特别是蛋白质研究的人才,提升国家蛋白质研究能力;进而促进我国蛋白质基础研究的飞跃发展。中心将立足于国家生命科学与生物技术及相关研究领域雄厚的研究基础和创新实力,成为兼具蛋白质科学研究、技术及成果的转化、集成和应用平台的国家级的重要科学研究单元。 国家蛋白质科学研究上海设施/国家蛋白质科学中心・上海(筹)现因工作扩展的需要,面向社会公开招聘冷冻电镜管理人员。受聘者将有机会接受此技术的全面培训。一、招聘岗位名称及人数:冷冻电镜系统管理人员2名二、岗位1:岗位职责:负责电镜负染及冷冻样品制样,样品检测、用户服务。参与中心电镜(包括200 kV TF20及120kV T12)的日常管理,用户培训、技术支持等。任职条件:1. 具有生物、医学或物理等相关专业的本科或以上学位,有电镜操作或生物电镜样品制样经验者优先考虑;2.有工作热情,乐于学习新技术,有较强的动手能力;3.为人诚实、乐于助人,具有良好的沟通能力、服务精神和团队协作精神;4. 具有良好的中英文口头表达和写作能力;5. 身体健康,能长期稳定工作。岗位2:岗位职责:负责用户项目的合作及服务研究。可以独立应用TITAN Krios及TF20电镜,进行cryo-EM single particle及cryo-ET的数据收集、处理和结构分析,或可独立开展高压冷冻、超薄切片服务等。参与中心电镜(包括300 kV TITAN Krios,200 kV TF20及120kV T12)的日常管理,用户培训、技术支持等。 任职条件:1.应聘者有3年或以上冷冻透射电镜使用经验,具有独立完成cryo-EM single particle及cryo-ET的数据收集、处理和结构分析的能力和经验;或者可以独立开展高压冷冻、超薄切片服务等;2. 具有生物物理学或相关专业的硕士或以上学位,有SCI第一作者论文;具有良好的中英文口头表达和写作能力;3.有工作热情,乐于学习新技术,有较强的动手能力;4.为人诚实、乐于助人,具有良好的沟通能力和团队协作精神;5. 身体健康,能长期稳定工作。三、招聘方式及程序1、应聘材料:(1)《应聘人员登记表》(见附件);(2)应聘函,包括对应聘岗位的理解、认识及工作设想等;(3)个人简历(包括联系电话、电子邮箱);(4)2封推荐信;(5)有关材料:身份证复印件、学历及学位证书复印件、相关资格证书复印件、获奖证书复印件等;2、资格审查对应聘者进行资格审查,通过初审者,将另行通知面试时间和地点。3、请将上述材料的电子版或扫描件发至hr.ncpss@sibcb.ac.cn,hr@sibcb-ncpss.org.(请在应聘材料和邮件主题栏注明应聘岗位和姓名,按如下格式:“姓名—应聘部门—应聘岗位”),本岗位招满前有效。4、谢绝来电来访,应聘材料恕不退还,招聘单位将予以保密。5、上述岗位按照公开报名、资格审查、面试、决定聘任的程序和方法进行。

  • 咨询高分子样品的超薄切片问题?

    咨询高分子样品的超薄切片问题?高分子的样品,类似白色塑料,样品倒是很硬的,设定是70nm,可是切片出来的基本是金黄色,片有时也会出现颤痕,不知道什么原因?有谁知道,非常感谢!

  • 【求助】求助:超薄切片困难重重,请高手指点

    求教各位,我在做生物样品的超薄切片时,切面已经调整好,所有步骤均按标准进行,但切70纳米薄切片时,无法切出连续的切片,一直都是切两三刀空切后,突然切出来一片较厚的切片。根本无法挑出满意的薄切片。在各个方面都做了改善,所用玻璃刀也是新制的,但仍然无效?跪求解决办法?

  • 国家蛋白质科学研究上海设施/国家蛋白质科学中心・上海(筹)公开招聘冷冻电镜管理人员

    国家蛋白质科学研究上海设施是国家重大科技基础设施,是国家级蛋白质科学研究平台;在设施建设基础上,依托中国科学院上海生命科学研究院,委托生物化学与细胞生物学研究所(简称SIBCB)负责筹建成立并管理国家蛋白质科学中心・上海(筹),负责设施的运行管理。具体介绍请参考如下面网页(http://www.sibcb-ncpss.org/index.action?lang=cn) 中心位于浦东新区张江高科技园区中区西部(上海市海科路333号)。 中心定位于:支撑国家蛋白质上海设施建设的建设,衔接该设施的运行;聚集培养生命科学与生物技术特别是蛋白质研究的人才,提升国家蛋白质研究能力;进而促进我国蛋白质基础研究的飞跃发展。中心将立足于国家生命科学与生物技术及相关研究领域雄厚的研究基础和创新实力,成为兼具蛋白质科学研究、技术及成果的转化、集成和应用平台的国家级的重要科学研究单元。国家蛋白质科学研究上海设施/国家蛋白质科学中心・上海(筹)现因工作扩展的需要,面向社会公开招聘冷冻电镜管理人员。受聘者将有机会接受此技术的全面培训。一、招聘岗位名称及人数:冷冻电镜系统管理人员2名二、岗位1:岗位职责:负责电镜负染及冷冻样品制样,样品检测、用户服务。参与中心电镜(包括200 kV TF20及120kV T12)的日常管理,用户培训、技术支持等。任职条件:1. 具有生物、医学或物理等相关专业的本科或以上学位,有电镜操作或生物电镜样品制样经验者优先考虑;2.有工作热情,乐于学习新技术,有较强的动手能力;3.为人诚实、乐于助人,具有良好的沟通能力、服务精神和团队协作精神;4. 具有良好的中英文口头表达和写作能力;5. 身体健康,能长期稳定工作。岗位2:岗位职责:负责用户项目的合作及服务研究。可以独立应用TITAN Krios及TF20电镜,进行cryo-EM single particle及cryo-ET的数据收集、处理和结构分析,或可独立开展高压冷冻、超薄切片服务等。参与中心电镜(包括300 kV TITAN Krios,200 kV TF20及120kV T12)的日常管理,用户培训、技术支持等。 任职条件:1.应聘者有3年或以上冷冻透射电镜使用经验,具有独立完成cryo-EM single particle及cryo-ET的数据收集、处理和结构分析的能力和经验;或者可以独立开展高压冷冻、超薄切片服务等;2. 具有生物物理学或相关专业的硕士或以上学位,有SCI第一作者论文;具有良好的中英文口头表达和写作能力;3.有工作热情,乐于学习新技术,有较强的动手能力;4.为人诚实、乐于助人,具有良好的沟通能力和团队协作精神;5. 身体健康,能长期稳定工作。三、招聘方式及程序1、应聘材料:(1)《应聘人员登记表》(见附件);(2)应聘函,包括对应聘岗位的理解、认识及工作设想等;(3)个人简历(包括联系电话、电子邮箱);(4)2封推荐信;(5)有关材料:身份证复印件、学历及学位证书复印件、相关资格证书复印件、获奖证书复印件等;2、资格审查对应聘者进行资格审查,通过初审者,将另行通知面试时间和地点。3、请将上述材料的电子版或扫描件发至hr.ncpss@sibcb.ac.cn,hr@sibcb-ncpss.org.(请在应聘材料和邮件主题栏注明应聘岗位和姓名,按如下格式:“姓名—应聘部门—应聘岗位”),本岗位招满前有效。4、谢绝来电来访,应聘材料恕不退还,招聘单位将予以保密。5、上述岗位按照公开报名、资格审查、面试、决定聘任的程序和方法进行。

  • 【求助】超薄切片做TEM的问题

    请问大家,我是想看纳米线的截面,所以想做超薄切片,现在有两个问题麻烦大家:1)能否先将纳米线放到乙醇中分散,然后再滴到树脂中进行固化呀?2)做完切片后,能不能直接把滴到微栅上的树脂片拿去做透射?在200KV下,树脂会分解吗,绝缘性的树脂对透射电镜会有损伤吗?

  • 【讨论】关于超薄切片的包埋剂选择问题

    向大家请教几个问题,本人刚接触超薄切片,要把一种常温下是脆性固体的材料包埋做超薄切片,现在关于包埋剂的选择有些困难,因为做包埋块有几个问题:1)材料本身很脆,常温下是块状固体,直接切肯定会碎掉,必须要包埋,但是担心粉末状态下与树脂包埋剂混合会混合得不均匀;2)如果液相状态下混合,材料本身需要加热到290~300℃才会液化,这么高温的液体与包埋剂混合,不知道哪种包埋剂会承受;3)也在网上查了一些,像M-Bond 610胶,G1胶貌似都可以,但是关于这两种包埋剂的一些性能和具体适用介绍很少或是不太详细,我本人刚接触这些东西,实在是菜鸟,想请教一下这方面比较熟悉的朋友们,大家能不能给我指点一下,先谢谢了!

  • 【求助】求助关于聚苯乙烯切片和染色的问题

    [color=#DC143C]最近做了两次冷冻的超薄切片,而且染色时间都和原来一样,用的是四氧化锇1%的溶液,但是在TEM下铜网上可以看到个很多的小片,很薄很亮,按照以往的来说肯定是可以照的,可以放大倍数以后,整个超薄切片感觉是那种稍微有点断的褶皱的片子,而且就连基体相都感觉很黑,但是橡胶却不是很黑,个人感觉很奇怪。有没有达人指点一下啊,关于切片以及染色的细节问题,我是做塑料的增韧的,学的是高分子,谢谢了[/color]

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