临床用冰冻切片机

[font=黑体]本人想向高人咨询关于冰冻切片机的相关信息：１．目前市场上公认的最好的冰冻切片机是哪个公司产的，哪一款，，价位大概是多少，以及一些相关技术相关指标２．以及与此仪器相关的高清晰病理图文报告系统的相关信息　　　　急需！！！！！！！！！！　　谢谢！[/font]

冷冻切片机 仪器价格： 12万元 购置日期：2001年 仪器所在地：中医肝病研究所实验室 联 系 人： 顾宏图 联系电话： 51322444 收费标准： 暂未定 开放时间： 8：00～17：00 仪器简介： 徕卡CM1850是应用于组织学和临床组织病理学的一种快速低温恒冷切片机，它是将切片机置于冷冻室以外的低温恒冷切片机。CM1850的特色之一是具有宽敞的冷冻室，快速冷冻室可同时存放多达10个样品，并和一个可持续冷却的吸热器相连，以保证样品托上的样品快速冷却。切片刀温度可冷却到-35℃，样本可以快速冷冻到-40℃。切片机有狭槽盖防护，避免残渣进入机器内部。增强绝热性能（真空面板）及温度控制系统，减低压缩机运作费用及提高耐用性，比传统绝热系统使用寿命长，可以保证冷冻箱温度，例如：在35℃室温保持-35℃。同时可以做到电脑诊断维护。高质量无焊接缝的不锈钢冷冻室表面光滑利于清洁和防止污染。切片机配备双速马达驱动粗进，控制键布置在左方靠手，符合人工学原理。具备自动及人工除霜功能。独特设计的玻璃反卷板可保证连续的切片。切片机具备方便的调节功能，可快速及精确对样本切片定位。切片机推进系统运作平稳、流畅，切片厚度为1～60μm，切片精度可达1μm，最大样品直径55mm。 应用范围 可提供各种冰冻切片服务。 目前应用于： 1. 为快速病理诊断提供冰冻切片。已成为癌症诊断的重要工具。 2. 细胞学：显示脂肪、脂类以及特种组织成份。 3. 免疫细胞化学、免疫组织化学和分子生物学技术等研究工作。 4. 神经生物学研究。 5. 常规组织胚胎学研究。 6. 皮肤病理学研究。 7. 动脉血管外科学研究。 同类仪器情况 ： 中药研究所: SPOCTRA MXA190 2002年 倪跃元 解剖实验室： LION 1998年 余安胜 张建华

一、石蜡切片 把修好的蜡块装在旋转切片机上，即可进行切片(section)。切片必须保持切片刀锐利，切片厚度通常为5～7um，也可根据染色需要切成不同厚度，一般不旋转式切片机超过10um。切好的蜡带，放人40℃左右的温水中将蜡片展平。良好的切片应无刀痕、裂痕，切片厚度均一平整。切片如有上述问题，在进行免疫组织化学染色时会出现假阳性现象。为能得到平整无皱褶的组织切片。可采用两次展片，即先将组织切片漂浮在30％的乙醇溶液中进行第一次展片，然后将切片捞起，再次放人45～50℃的水浴中进行第二次展片，乙醇的浓度和水温可视组织不同和石蜡熔点的高低自行调整。此过程是利用乙醇溶液与水之间的张力差展开切片的皱褶。为防止脱片，载玻片要涂黏片剂。对HE染色的切片，可在载玻片上涂抹薄层蛋白甘油，但蛋白甘油因含蛋白易导致非特异性免疫反应，故用于免疫组织化学染色的切片常用多聚赖氨酸、3—氨丙基—乙氧基甲硅烷等处理。二、冰冻切片 冰冻切片(fiozen section)是酶组织化学和免疫组织化学染色中最常用的一种切片方法，其最突出的优点是能够较[font='Songti SC Regu

全新一套赛默飞HM355S切片机，只是开封里面的东西没动过，现在闲置低价出售

1. 新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片( 也可- 80℃保存)，厚度为 5～6μm。2. 载玻片可不打底，裱片后，立即用电吹风吹干。3. 如不马上染色，可密封后- 20℃保存。4. 染色前用冷丙酮在 4℃固定 10-20 分钟。5. PBS 洗 2 次，每次 5 分钟，( 必要时应用 0.1%柠檬酸钠+0.1%triton打孔)6. 3% H2 O2灭活内源性过氧化物酶，20 分钟，避光；7. 用 PBS 洗 2 次，每次 5 分钟；8. 正常血清封闭：从染片缸中取出切片，擦净切片背面水分及切片正面组织周围的水分 （保持组织呈湿润状态,）滴加正常山羊或兔血清 （与第二抗 体 同源动物血清）处理，37℃，15 分钟。附：正常血清配制 ( 或按试剂盒规定的浓度配制)：按 1:20比例，用 PBS 配制，每张切片需要量按 50μ+5μl (10%抛洒量) 计算。9．滴加第一抗体：用滤纸吸去血清，不洗，直接滴加第一抗体，37℃ 2 小时（也可置于 4℃冰箱过夜） 。10．PBS：5 分钟，2 次（置于摇床） 。11．滴加生物素化的二抗，37℃，40 分钟。12．PBS：5 分钟，2 次（置于摇床） 。13．滴加三抗 （SAB 复合物） ，37℃，40 分钟。14．PBS：5 分钟，2 次（置于摇床） 。15．DAB 显色，镜下观察，适时终止（自来水冲终止） 。附：DAB 的配制① 储备液(DAB 25mg/ml)的配制：DAB 250mg + PBS 10ml，待完全溶解后分装成 1ml，100μl，50μl ，20μ l 等，-20℃，冻存。② 工作液：DAB 储备液 20μl + PBS 1000μl + 3% H2O2 5μl16．自来水（细水）充分冲洗。17．苏木素复染，室温，30 秒，自来水冲洗。18．自来水冲洗返蓝，15 分钟。19．梯度酒精脱水：80%，2 分钟 95%，2 分钟 100%，2 次，5 分钟。20．二甲苯透明：I ，II （二甲苯）各 5 分钟21．封片：加拿大树胶（或中性树胶）封片。

6 种固定液短时间固定对冰冻切片制片效果影响冰冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。由于其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。但在冰冻切片制过程中影响制片的质量因素较多，从而影响手术中的快速病理诊断。因此，快速制作一张高质量的冰冻切片对于确保病理诊断极其重要。其中固定是冰冻切片制作中关键步骤之一，对切片的制片质量有着重要的影响。本文通过6种不同固定液短时固定对冰冻切片制片染色的比较，探讨不同固定液对冰冻切片制片效果的影响。1资料与方法1.1材料选自病理科手术切除的新鲜组织标本40例，包括有乳腺、甲状腺、胃、子宫、卵巢等组织。1.2固定液6种固定液分别为：10%福尔马林；95%酒精；AF固定液；丙酮∶甲醇∶乙醚酒精（乙醚∶酒精1∶1）。1.3方法1.3.1取材及切片取材大小为1.5cm×1.5cm，厚2～3mm的新[/font

[align=center]轮转式切片机的应用体会[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]安平中心：粟荣霞[/align]切片是病理切片制作过程中关键的步骤。一般病理切片包括轮转式切片机是在病理切片制作过程中很关键的仪器石蜡切片和冷冻切片，而石蜡切片常用的仪器是平推拉切片机和轮转式切片机，而相比于平推式切片机，轮转式切片机切片容易成卷，切片厚度不均匀。因此，就这些问题进行讨论，总结出轮转式切片机应用的一些体会。在石蜡切片之前，首先要进行充分的准备工作：1.将包埋好的是蜡块进行冷冻。2.调节室温小于20℃。3.开启摊片机和烤片机，将温度分别调至40℃和60℃。4.准备载玻片、镊子、毛笔等。冷冻时可将蜡块置于冷台1小时以上或者置于冰箱（2~8℃），置于冰箱时，切片过程中可将其转移到碎冰中。如果温度不够低，切片效果不好时，可放置到-20℃冰箱，时间不宜过长，放置蜡块冻裂。其次，准备工作做好之后，先进行修片，待修片全部结束。进行切片，切片时应迅速，手避免接触石蜡组织包埋面，以防止蜡块温度过高，影响切片效果。此外，切片时，还会卷片，这时用小头毛笔轻轻按压住成卷的切片，进行切片，同时转动毛笔，展开所切新片，那么之后的切片就不会再卷。切完片要进行摊片，先用冷水进行摊片10 min~30 min，再用40℃温水摊片，时间不宜过长。切片的厚度，应根据不同的组织进行相应的调节。仪器的使用过程也是一个不断学习的过程，只有用心去总结，才能提高工作效率与质量。

切片机分为很多种类，包括药材类切片机，器材类切片机，食品类切片机，组织切片类切片机等。按其结构又可分为摇动式切片机、轮转式切片机、滑动式切片机、推动式（雪橇式）切片机等。组织切片机是一种对人体组织及动植物组织作病理切片分析的设备。组织切片机一般分为：轮转式切片机和冷冻切片机。轮转式切片机：是借转动手摇轮进行切片动作。蜡块台镶装于可在沟槽内上下运动的金属夹座中，借微动螺旋向前推进切断平整的切片。有的转轮式切片机的机头上装有三只旋钮和一个紧固旋钮能使其向各个方向偏转并紧固，便于调整蜡块的切面。切片刀的切制角度可以调整（切片刀倾斜）。由于这种切片机上使用的是一种重而大的切片刀，故除切制硬组织时一般不发生颤动。切片厚度借旋钮可以1-30微米之间调[font='Songti S

1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片，而有的一抗只能做冰冻切片，关键取决于所要检测的抗原稳定性，有的抗原不稳定，经过组 织固定，脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤，所检测的抗原易被破坏，这时只能用冰冻切片来做，检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片， 而那些稳定的抗原，能经受住石蜡切片的的考验，一般来讲也可以用冰冻切片来做，总得来讲，对于既可以用冰冻切片也可以用石蜡切片检测的抗原，用石蜡切片检 测的染色效果要比冰冻切片好一些。2、从研究目的来看。石蜡切片对组织细胞的定位很准确，而长期冻存组织的冰冻切片可能因冰晶的形成破坏组织细胞形态的结构，并造成抗原的弥散，从而定位不准确。3、从抗原的保真性来看。冰冻切片对抗原的保真很好，而石蜡切片在组织固定，脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等过程中可能会对抗原的性质造成影响。4、从操作步骤的繁琐程度看。染色过程冰冻切片简单，而石蜡切片要求脱蜡入水、抗原修复等过程，比较繁琐。5、总之，石蜡切片对标本的长期保存较合适，且组织细胞形态结构保持好；而冰冻切片适合对新鲜组织的制片，然后立即固定、染色效果较好，且免疫荧光中可以相对避免石蜡自发荧光的干扰

一台Reichert-Jung Ultru E超薄切片机,购于90年,最近几年出现一个问题:冬季当室温较低时,出现"点头"故障,样品臂下降到刀口位置时,无法继续下移,来回晃动,同时伴有"咔咔"声,后来将室温升到25度以上后,切片机有时能恢复正常.不知何故?目前看来该型号切片机属于什么档次?

最近公司有个项目需要了解一下病理切片机的结构、原理、品牌、价位等信息。请求了解的专家能不吝赐教。

问个小白的问题：买切片机的时候是必须按TEM的型号来买配套的么？？还是随便买什么型号的都可以在任何TEM上用啊？我觉得切片机和TEM关系不大吧~~~~~

请问一下一般用的超薄切片机有哪些型号，价格大约多少？谢谢！

朋友现在在筹建多晶硅化验室，想买实验室用的小型多晶硅切片机和抛光机，请大家帮忙推荐一下厂家和型号，谢谢！要是有联系方式更好

中药切片机使用方法　　　　1、调节:调节时先松开固紧铜柱螺母,其次转动螺母与铜柱上的厚薄方向调节,厚薄调妥后,必须把螺母与铜柱拧紧。如果刀盘与刀片平行,切勿开机。刀盘必须低于刀片,才可开机截切。调节最厚约3mm,薄则无级调变。　　　　2、更换刀片:用六角把手插入该机侧面孔位。转动可以调盘方向再换刀,换刀时松掉刀片的二只六角螺丝,插入刀片更换即可。中药切片机注意事项　　　　1、刀盆常擦油,以免粘垢,如出现药片留尾与细碎片时,这显示软化不妥或刀片不锐利,必须更换或磨刀。调得太薄,尚不好截切。　　　　2、切片如甜云、生地、元参、天麻等粘性药物,表面带水截切。本厂是专业制造多功能EF系列制丸机、AB系列中小型切片机及CD系列粉碎机。产品具有：噪音低、功效高、价廉物美、使用安全等特点。具有装饰柜台大方美观的作用，是适应药店、医院、药材加工场、化工、科研等单位使用。

有网友能帮忙推荐几个不错的薄片切片机的品牌吗？国产或进口都行。

请问各位 徕卡切片机RM2235和RM2245有什么区别，价钱查多少啊

超薄切片机 能切金属吗

单位想购买新的超薄切片机，徕卡UC7目前的报价太贵，RMC公司的POWERTOME X/XL超薄切片机报价相对来说便宜，但没用过，根据他的国内总代所说国内用户有40来家，不知有没有用RMC超薄切片机的朋友常逛本坛，谈谈对此机器的看法？（产品质量，性能稳定性，操作方便性，配件，维修等）

实验室要做皮革横截面微观感官，需要进行横截面的切片，求一便宜好用的组织切片机要求：1.切出来的试样够平整，放大50倍的情况下不能出现凹凸不平。 2.价格10000以内，好保养，好使用求各位大神推荐下！谢谢！

有没有了解超薄切片机的？我现在急需了解，多多帮忙啊，多谢了

摘要：扫描电镜工作者都面临着一个不能回避的事实，就是所有生命科学、以及许多材料科学的样品都含有液体成分。很多动植物组织含水量达到98%，这是扫描电镜工作者最难对付的样品问题。冰冻扫描电镜技术是克服样品含水问题的一个快速、可靠和有效的方法。这种技术还广泛地被用于观察一些“困难”样品，如那些对电子束敏感的具有不稳定性的样品。冰冻扫描电镜技术还有一个常被忽略的应用领域，即通过不同的时间间隔的样品溶解来研究动态过程（工业上或其他方面应用）。各种“高压”模式如VP、LV和ESEM的出现，已允许扫描电镜观察未经冷冻和干燥的样品。但是，冰冻扫描电镜仍然是防止样品丢失水分的最有效方法，它能应用于任何真空状态，包括装置于SEM的Peltier台上以及向样品室内冲以水气。冰冻扫描电镜还有一些其他优点，如具有冷冻断裂的能力以及可以通过控制样品升华刻蚀来选择性地去除表面水分（冰）等。常规扫描电镜样品制备的缺点： 皱缩和变形 可溶性物质被提取 可弥散性物质的移位 机械损伤，脆弱样品在常规操作时易损伤 制备过程慢（常在24小时以上） 有毒试剂冰冻扫描电镜技术的优点： 能保持可溶性物质 可弥漫物质很少移位 机械损伤小 基本上不用有毒试剂 是对样品进行动态实验的唯一方法（不同时间间隔冷冻-在实验室内或外面） 过程快，从新鲜材料到观察冷冻、断裂和喷涂样品可在5分钟内进行 高分辨能力（与低真空技术相比） 通过低温断裂获取额外信息（与常规和低真空SEM方法比较） 很适合液体、半液体、和电子束敏感样品 具有选择性刻蚀能力（通过升华显露内在信息） 具有重复使用样品能力（例如：对样品重复断裂和涂覆）冰冻扫描电镜的方法首先将样品固定在适当的样品支架上，具有各种不同类型的支架可选择以适合不同的样品。样品支架本身安放在巧妙设计的冷冻/真空转移杆上。将样品插入冷冻剂，通常是液氮，然后在真空下转移至冰冻扫描电镜Polaron PP2000或PP2000T样品制备室的冷台上，这一样品制备室直接安装在扫描电镜腔室的一个扩展口上。样品制备室可由机械泵和涡轮分子泵抽真空。样品制备室内有进行样品操作、断裂、刻蚀（升华）和涂覆的设备。最后，将位于样品制备室与扫描电镜室之间的阀门打开，将样品转移到扫描电镜的冷台上。冰冻扫描电镜技术的应用冰冻扫描电镜最常用与生命科学，包括植物学、动物学、真菌学、生物技术、生物医学和农业科学。最近，冰冻扫描电镜技术已成为药物学、化妆品和保健品工业的重要工具，主要用于应用基础研究以及对许多产品如乳制品、化妆品和药物递送系统的QA。冰冻扫描电镜技术一直是食品工业的标准检测方法，特别是多项产品如冰淇淋、果糖蜜饯和乳制品。详见附件，英文原作者：Mike wombwell 迈克.沃姆维尔[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=49265]冰冻扫描电镜技术[/url]

[b]冰冻干燥机[/b]　　1.必须专人操作，未经允许不得开机。　　2.样品必须事先冰冻，冰冻的样品要尽量薄，增大表面积。　　3.温度达到－30℃以下方可放入样品，开启真空泵。　　4.开泵后必须确认抽上了真空方可离开。　　5.样品抽干后要及时取出。　　6.冰层太厚，真空度＞300millitorr则应除霜。　　7.压缩机不准频繁启动。

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临床化学试剂 clinical chemical reagent 　　又称临床诊断试剂，指用于临床诊断检查用的一类化学试剂。它与电子工业用试剂并列为化学试剂工业中两大新型系列。这类试剂以人或动物的活体材料作为被检体，而利用其在生物体外所实施的生物学反应进行检验，以作为医生临床诊断病因、观察病情、判断病程、分析疗效的主要手段之一。根据检验项目，临床化学试剂分为9类。①一般检验试剂；②血液检验试剂 ③生化试剂；④免疫血清学检验试剂；⑤细菌学检验试剂；⑥病理组织学检验试剂；⑦机能试剂；⑧自动分析用检验试剂；⑨同位素标记试剂。根据具体用途，又可分为简易检测、常规分析、细菌培养及自动分析仪器用的配套试剂。随着临床医学和科研的发展，临床化学试剂中下列门类发展的速度较快： 　　酶试剂 　这是临床化学试剂的发展方向，适用于生化自动分析。其突出的优点是灵敏度高、特异性强，在成分异常复杂的液体标本中，可以避免或减少成分的相互干扰，从而提高测定结果的精确性和线性范围。而且测定时间短、对环境污染少、方法简便可靠。如血清或尿用淀粉酶的测定作为胰腺炎的早期诊断指标，就比用淀粉和碘产生蓝色反应的化学法要准确、简捷得多。又如测定血糖用的己糖激酶法和测定尿素氮用的脲酶法，比测定血糖用的邻甲苯胺和测定尿素氮用的二乙酰一肟的化学方法(旧方法)，不但专一性强、灵敏度高、线性范围宽，而且避免使用对人体有毒害作用的化学品，减少了环境污染。因之在生物化学－血液诊断领域中的胆甾醇测定和中性脂肪测定中,酶法已占70％～80％,在葡萄糖测定中酶法也达到了50％。据不完全统计，在国际市场上供应的酶试剂(不包括辅酶和基质)已有 186种。 　　试纸 　简易快速诊断用的定性和半定量临床诊断试纸。目前已有八联尿试纸，可同时测定pH、蛋白、葡萄糖、胆红素、酮体、亚硝酸盐、隐血和尿胆原；有测定血清用 9种化学成分的试纸，即胆红素、胆固醇、尿素氮、葡萄糖、尿酸、三酸甘油酯、血红蛋白、谷草转氨酶及乳酸脱氢酶。试纸法的优点是:①取材方便(尿、耳血、指血),用量少，适合于婴儿、老年人、病危而又需连续观察病情的病人 ②既适合于大医院使用,也适合于农村、工矿、边疆、部队等基层使用；③医务人员可以使用,病人也很易学会使用 ④可作常规、急诊使用，也适合于大规模健康普查、流行病学研究或个人保健使用。 　　最近，国际上又开发出一种准确定量测定血液中化学成分的新型临床检验胶片。这种多层分析胶片操作快而准,检验时只需将血样滴在胶片上,即能测得所需结果。 　　试剂盒 　测定某项目所供应的全部配套试剂，对用户极为方便。这类试剂盒多以三种形式提供：①冰冻干燥的试剂混合物。②分开的单独溶液和固体，使用前按比例混合。③已预先测好体积的备用试剂溶液。试剂盒都附有详细的说明书。 　　随着临床检验技术的发展，已出现多种临床诊断试剂盒，如放射免疫试剂盒、酶免疫试剂盒、生化检验试剂盒、毒物和药物检验试剂盒。 　　①放射免疫试剂盒　是利用放射性同位素技术与免疫化学技术相结合的体外测定超微量（一般 1ml血可测10-9 ～10-12 g）物质的一种新型药盒。它具有同位素技术的高灵敏度、精确性和抗体免疫反应的专一性，现已应用于很多医学领域，可测定蛋白质、多肽激素和非肽类激素、酶、血液中非激素蛋白质、病原体、抗体药物等。放射免疫试剂盒必须具备：标记抗原（高纯、高比度）；特异性抗体；抗原的标准；有效的分离剂。其操作基本步骤为加试剂、培育、分离、计数、整理数据。 　　②酶免疫试剂盒　是利用酶来标记抗原或抗体，不用放射性示踪，不用分离，没有辐射危害，酶标试剂制备容易、稳定，试剂盒保存期长。测定时用一般分光光度计即可，方法简便，用途较广，可用于流行病毒的抗体（乙型大脑炎等）、病毒(流感、麻疹病毒等)、病原性细胞检定，免疫病理学的检测（如用抗核酸抗体、甲胎蛋白、肿瘤抗原等试剂盒），寄生虫病的论断（吸血虫病、疟疾病等），内分泌疾病及血液病的诊断。80年代，酶免疫试剂盒有取代放射免疫试剂盒的趋势。 　　③生化检验试剂盒　将化学试剂经过配方处理而配制的一种很方便的试剂盒，可作一般临床生化检验使用。 　　④毒物和药物检验试剂盒　是用以检验人血中某一特定药物或毒物含量的配套试剂。

请问利用有机溶剂沉淀蛋白法处理血清，为什么有人用室温或是加热的乙腈，还有人使用冰冻乙腈到底哪个效果更好呢，提取有机盐成分。谢谢喽！http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif

各位大牛们，谁手头上有莱卡 EM UC7切片机的具体操作过程，能否给共享一下，小弟万分感谢了！

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我是搞石墨纤维表征的，有没有人知道可不可以用冷冻切片法切我们的纤维，我们纤维的直径为7个微米