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培养基专用恒温箱

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培养基专用恒温箱相关的资讯

  • JASIS 2018新品发布之东京理化:低温恒温箱
    p   strong仪器信息网讯/strong 2018年9月5日,日本最大规模的分析仪器展JASIS 2018在东京幕张国际展览中心盛大开幕,吸引来自全球各地的万余名观众参观出席。br//pp  作为日本知名的仪器品牌之一,东京理化在展会期间带来其小型低温恒温箱新品——LTI-2100。/pp style="text-align: center "img title="东京理化小型低温恒温箱.jpg" style="width: 400px height: 267px " alt="东京理化小型低温恒温箱.jpg" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/6aadae7c-5b2d-42b6-abf0-b1e7b00c977f.jpg" height="267" border="0" vspace="0" width="400"//pp style="text-align: center "strong东京理化小型低温恒温箱LTI-2100/strong/pp  小型低温恒温箱LTI-2100——最多可三台叠放置。/pp  为了避免实验室样品间相互污染,箱体频繁打开影响温度波动、样品拿错、找不到等情况发生,EYELA研发了方便个人专用的小型低温恒温箱LTI-2100型。/pp  主要特点有:1)适用微量管,西林瓶,离心管,培养皿等的少量培养和保存,由于采用小型化设计,建议单人使用与管理,这样温度更加稳定,避免多人共用频繁开箱情况的发生 2)温度调节范围4~60℃,应用范围广泛 3)温度调节精度± 0.3℃以内,温度分布精度、温度梯度1.5℃以下,微小温度波动,高精度温度管理 4)采用半导体制冷,运转无振动,无噪音,绿色环保 5)最大可重叠放置三台。各台可设置不同的温度,实现样品的独立管理。/ppbr//p
  • 同为培养箱,生化培养箱与恒温培养箱"各怀鬼胎",你品,细品!
    一说到培养箱,自然而然会浮现生化培养箱、恒温培养箱系列产品,它具有制冷和加热双向调温系统,温度可控的功能,是植物、微生物、遗传、病毒、医学、环保等科研,教研`教育部门不可缺少的实验室设备,广泛应用于低温恒温试验、培养试验、环境试验等等。??生化培养箱和恒温培养箱是常使用的两种,同是培养箱,有什么不同之处???一、产品特点不同??(一)生化培养箱的产品特点:??适用于环境保护、卫生防疫、药检、农畜、水产等科研、院校和生产部门。是水体分析和BOD测定,细菌、霉菌、微的培养、保存、植物栽培、育种试验的专用恒温设备。??1、带定时功能键的数显微电脑温度控制器,控温可靠;??2、采用镜面不锈钢内胆,半圆弧四角易清洁,箱内搁板间距可调;??3、采用玻璃观察窗,观察方便明了;??4、设有限温报警系统,超过限制温度即自动中断,保证实验安全运行,不发生意外; (二)恒温培养箱的产品特点:??恒温培养箱(电热恒温培养箱)适用于医疗卫生、医药工业、化学和农业科学等科研和工业生产部门做细菌培养、发酵及恒温试验用。??1、外壳采用冷轧钢板制作,表面使用静电喷塑工艺。??2、工作室采用不锈钢板或冷轧钢板加工成型,并经防锈防腐处理。??3、可选装指针式控温仪或微电脑智能控温仪,智能控温仪采用PID控制程序、大屏幕数码显示屏,轻触型操作按键,具有超温报警功能。??4、门中间设有双层钢化玻璃观察窗,便于直接观察培养物的变化。??5、磁性胶条密封,启闭方便、密封良好。二、控温精度不同:??1、生化培养箱主要用于生化反应的孵化,所以它们的门主要由玻璃组成,用于在特定温度孵化反应,操作者可在不破坏反应条件的前提下在外观察反应的变化;亦可用于细菌霉菌与控制菌的培养。??2、恒温恒湿培养箱主要用于培养细菌和控制菌,正如其名,其密封性好,温度和湿度都是可控恒定的,但不便于在外观察。 上海沪净医疗器械有限公司是华东地区净化设备行业中的公司之一,其凭借雄厚的实力,综合科技,完善的服务,敏锐的市场洞察力开发了一系列净化设备产品。我们拥有强大的销售团队、众多技术人才,良好的售后服务。可按ISO14644-1标准、GB50073-2001国家标准及国家GMP规范要求为微电子、生物医药、医院手术室、光纤光缆、食品饮料、精密仪器、半导体及新材料应用等行业的空气净化系统工程设计、施工、检测及技术服务。本公司可根据客户的现实要求和实际需要设计,定做安装洁净室系统及专用设备。 公司生产的净化工作台系列、风淋室系列、通风柜系列,生物安全柜系列一上市就受到了广大消费者和经销商的青睐和厚爱,沪净净化产品被广泛应用于医疗卫生、电子、制药、生物、食品、农林、畜牧兽医、检验检疫、航空航天、汽车制造、精密仪器、大专院校和各科研机构,在和东南亚市场享有的声誉。 经营理念:重诚信、重质量、重售后。企业精神:质量为先,信誉为重,管理为本,服务为诚。
  • 德国美墨尔特(Memmert)推出高精度毛毯恒温箱
    基于安全考虑,用于医院及康复诊疗中心的设备均需经过相对严格的评估和测试程序, 美墨尔特(Memmert)德国区销售经理Stephan Eberlein说:“在病人和医护人员的安全问题上,绝不能妥协。”,他还补充道“例如,医用毛毯、衬垫或床垫绝不能过热,以免发生烫伤事故,毕竟病患需要借助毛毯保温。” 针对毛毯恒温箱的温度设定,业界普遍认可专业机构ECRI Institute所推荐的数值:不超过54℃(130℉)。美墨尔特(Memmert)最新推出的毛毯恒温箱IFbw所能允许的最高工作温度为80℃,以防棉织品过热。同时配有三个高性能Pt100温度传感,时刻监控箱体内的温度,此外内置的机械控温限制器也会在极端情况下(温度超过85℃)主动切断加热元件的供电,并报警提示。箱体密封良好,内部空气循环混合充分,以期保证温度分布均匀;独特的开门识别功能,能够在开门后自动中止加热,风扇也暂停混匀,关门后恢复。 对医护人员及患者而言,保温措施不可缺少,因此,不管在医疗机构,还是康复诊疗中心,此类恒温箱均为必要的设备,是温度维持的一项重要手段与技术依托。亦可用于实验器材的烘干及恒温存储等应用。 IFbw主要有IF110bw、IF160bw、IF450bw和IF750bw,均为SingleDISPLAY液晶屏显示,触摸屏控制,可以方便调节设置参数,内置的校准功能,无需借助外接软件即可完成定期校准操作,易于维护。 关于Memmert全球领先的温控箱体领导品牌德国美墨尔特(Memmert)创始于1933年,近九十年来,美墨尔特一直致力于精确温控箱体的研发和生产,并引领箱体的发展方向与潮流。公司同时拥有悠久的半导体控温技术(Peltier)经验,为仅有的全系列半导体技术温控箱体制造商。 产品包括二氧化碳培养箱、恒温恒湿箱、光照培养箱、低温培养箱、环境测试箱、真空烘箱、通用烘箱、灭菌箱、生化培养箱、水浴油浴等。2010年9月11日,德国Memmert(美墨尔特)大中华区全资子公司——美墨尔特(上海)贸易有限公司在上海成立,现在北京及南京设有代表处。
  • 生物产业的又一盛会!2020首届上海营养源与生物培养基特色展即将举办
    p style="text-align: justify text-indent: 2em "近日,中国生物发酵产业协会在网上发布公告,由中国生物发酵产业协会主办,上海生物发酵展组委会、上海信世展览服务有公司承办,上海市生物医药行业协会、上海市医药工业研究院、中科院天津微生物研究所、江南大学、华东理工大学、浙江工业大学、齐鲁工业大学协办的“2020首届上海营养源与生物培养基特色展”将于2020年8月26-28日在上海新国际博览中心举办,展会覆盖食品工业、生物发酵、生物制药、医药、生物技术、生物工程、细胞工程、营养健康、大健康产业、营养食品等行业用户。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "同期将举办“2020第六届国际发酵培养基应用发展论坛”为营养源与生物培养基行业打造品牌展示、工艺优化、产品创新的行业盛会!/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "生物产业已成为我国四大支柱产业之一,近年来发展迅速,营养源与生物培养基作为主要原辅料市场前景广阔。在生物制药工艺、生物工程、营养健康、大健康产业、食品工业、医药产业中占据不可忽略的地位,营养源与生物培养基研发和生产可以降低成本,缩减货期,并且有重要的战略意义。发展行业的研发和创新方面存在着瓶颈。为了更好的开拓并规范营养源与生物培养基行业的发展,加强行业展示及交流,共同创造健康规范的发展空间。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong展品范围:/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "1、 营养源与生物培养基:酵母抽提物、发酵营养源、动植物源、酵母源、微生物营养产品、微生物培养基、菌株、发酵专用培养基、营养培养基、细胞培养基、干粉培养基、液体培养基、固体培养基、培养基原材料、半固体培养基、自然培养基、合成培养基、半合成培养基、加富培养基、鉴别培养基、细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基、厌氧培养产品等;/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "2、 配套设备:实验室耗材、杀菌及灭菌设备、实验室试剂、培养基储存设备、培养基灌装设备、培养箱、实验室摇床、分析仪器、检测仪器、测量(计量)仪器、生命科学仪器等。/p
  • 动物细胞培养基如何选择?这里有答案
    1、细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。1.1 平衡盐溶液(balanced salt solution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank' s与Hank' s的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank' s常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5% CO2的培养条件。表1-1 几种常用的BSS配方(g/L)名称PBS(无Ca2+、Mg2+)PBS(含Ca2+、Mg2+)Earle’sHank’sD-Hank’sKrebs-RingerNaCl8.008.006.808.008.007.00KCl0.200.200.400.400.400.34CaCl2--0.200.14-MgCl2• 6H2O-0.10---MgSO4• 7H2O--0.20.2-Na2HPO41.151.15-0.0480.0480.10Na2HPO4• 2H2O--0.14--0.207KH2PO40.200.20-0.060.06NaHCO3--2.200.350.35-葡萄糖--1.001.00-1.80酚红--0.010.010.01-目前用于细胞培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。此外,血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌毒素等都会影响细胞生长,甚至造成细胞死亡。目前,血清多作为一种添加成分与合成培养基混合使用,使用浓度一般为5~20 %,最常用是10 %。1.2 合成细胞培养基合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。最早开发的基础培养基(minimal essential medium, MEM),其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上,DMEM、IMDM、HAM F12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍,其特性及应用的范围见下表:哺乳动物细胞培养基:培养基名称特性及应用范围199细胞培养基添加适量的血清后,可广泛用于多种细胞培养,并用于病毒学、疫苗生产等MEM细胞培养基MEM(Minimal Essential Medium)培养基有含Earle' s平衡盐的类型,也有含Hanks' 平衡盐的类型;有高压灭菌型的,也有过滤除菌型的;还有含非必需氨基酸的类型。是最基本、适用范围最广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM(Dulbecco’s modified Minimal Essential Medium)是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好,常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM(Iscove’s modified DMEM )是由Iscove在DMEM基础上改良,增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交瘤细胞培养,以及无血清培养的基础细胞培养基。GMEM细胞培养基Glasgow’s MEM培养基是MEM的改进型,用于支持BHK-21细胞的生长。原配方以BME为基础, 加入10%磷酸胰蛋白(月示)肉汤,氨基酸和维生素浓度加倍。RPMI-1640细胞培养基专门针对淋巴细胞培养设计,含有BSS、21种氨基酸、维生素等,广泛适于多种正常细胞和肿瘤细胞的培养,也用做悬浮细胞培养。HamF12细胞培养基含微量元素,可在血清含量低时用,适用于克隆化培养。F12适用于CHO细胞,也是无血清细胞培养基中常用的基础细胞培养基。DMEM/F12细胞培养基将DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后营养成份丰富,血清使用量也减少,常作为开发无血清细胞培养基时的基础细胞培养基。McCoy' s5AMcCoy' s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)原代细胞的生长,除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。William' s Medium E适用于大鼠肝上皮细胞的长期细胞培养。神经元基础培养基可为神经元生长提供基础营养物质。昆虫细胞培养基:培养基名称特性及应用范围Grace' s昆虫培养基Grace昆虫培养基(Grace' s Insect Medium)最初设计为支持澳大利亚白星橙天蚕蛾 (Antherea eucalypti) 细胞 的生长,是对Wyatt培养基的改良,以更接近 Antherea 血淋巴。Grace用这种培养基建立了第一个连续细胞系。适当补充添加剂后,该基本培养基已用于培养各种昆虫细胞,包括多种鳞翅类以及一些双翅类昆虫。Grace昆虫细胞培养基主要作为 培养基基础,用于培养Sf9 和Sf21细胞系,也用于其它鳞翅类昆虫细胞系的生长和维持。Grace' s培养基(Grace’s Insect Cell Culture Medium) 是无血清培养基,使用时需要补充血清,从而为细胞提供必要的营养因子。添加5 -20%胎牛血清后,Grace昆虫细胞培养基可以用于培养多种昆虫细胞。IPL-41 昆虫培养基 IPL-41昆虫培养基(IPL-41 Insect Medium)旨在用于大规模扩增草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞系,也常用于通过杆状病毒表达系统(BEVS)进行蛋白表达。 IPL-41培养基是对原始IPL配方的改良,由美国农业部昆虫病理实验室Weiss等人开发,用于大规模扩增草地贪夜蛾衍生细胞系。Weiss向基础培养基中加入了胎牛血清和TPB培养基(Tryptose Phosphate Broth),成功地实现了IPL-21 AE (III)细胞系的大规模连续培养。该培养基主要用于培养和维护鳞翅类衍生细胞系和扩增这些细胞系的病毒。IPL-41培养基基础也以用于无血清夜蛾细胞的杆状病毒重组蛋白表达。Shield' s & Sang Insect向Sheilds-Sang M3昆虫培养基中添加10%胎牛血清后广泛用于培养各种果蝇细胞系。Sheilds-Sang M3昆虫培养基(Sheilds and Sang M3 Insect medium) 基于D22培养基。该培养基支持黑腹果蝇衍生细胞的生长。Sheilds和Sang将原配方中的氯化物除去,用谷氨酸盐提供钠和钾离子,并用游离氨基酸替代乳白蛋白水解物。Bis-Tris作为缓冲剂放置pH变动。Schneider' s 果蝇培养基 很多昆虫组织培养基的配方是模拟特定昆虫体液的主要物理化学性质。针对相同物种的不同培养基成分的相似度可能比针对不同物种的培养基之间更低。有多种培养基用于果蝇细胞和组织的体外培养。应用最多的是Schneider 培养基、D-22 培养基。果蝇细胞用于研究各种生物化学过程,包括遗传学、内分泌学、生理学和细胞生物学等方面,以及重组蛋白的表达。加入5-20% 胎牛血清后Schneider培养基能够支持黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)原代细胞和建立的细胞系的快速生长。该培养基用于培养和维护果蝇胚胎衍生的细胞系以及其它双翅目昆虫细胞培养物细胞培养基常用几种重要的添加成分及使用过程中应注意的问题酚红在细胞培养基中用作pH值的指示剂。一般情况下,可以通过酚红的指示作用判断培养基的pH值,但低血清或是无血清细胞培养基中酚红的含量与普通细胞培养基中的酚红含量不同,不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值,建议使用pH计进行测定。酚红通常对含血清的细胞培养基生产的生物制品质量并不会产生明显影响,也可通过纯化技术去除,但酚红在无血清细胞培养基中可能带来胞内钠/钾失衡,影响细胞生长。碳酸氢钠在细胞培养基中主要是作为缓冲系统,此外还具有调节渗透压的作用。通常产品使用说明中的碳酸氢钠推荐量是一个标准、安全量,是在科学的基础上根据实践经验所得。但是由于不同的细胞系(株)不同,同一株细胞适应环境也可能不同(细胞耐受性不同等),且存在的地域性水质差异等,在实际生产过程中也可稍作改动,但使用者需做相应的检测(理化及细胞生产试验等)。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH 7.2 ~7.4范围内具有较好的缓冲能力,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(0.34 g /L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。其安全浓度范围是10~25 mmol/L。丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是在没有葡萄糖的条件下,细胞也可以代谢丙酮酸钠。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,4 ℃下放置1周可分解50 %,使用中最好单独配制,置-20 ℃冰箱中保存,使用前加入细胞培养液中。赖氨酸(L-lysine):分子量大于70,000的多聚赖氨酸可以用于促进细胞贴壁生长,也可以用于组织学(Histology)分析时的粘片剂。Poly-L-lysine和Poly-D-lysine都可以用于促进细胞的贴壁生长。Poly-L-lysine可以被某些细胞所消化并吸收,摄入过多的Poly-L-lysine会产生一定的细胞毒性。如果遇到Poly-L-lysine有细胞毒性的情况,可以考虑选用Poly-D-lysine,因为右旋的聚赖氨酸是不会被生物吸收利用的,所以毒性更低。远慕生物致力于生物技术和生命科学等行业领域,专注于植物生物学技术研究,以满足全球不断增长的食品,能源、医药日益增长的需求和发展。目前远慕生物制造和提供的产品主要有动物细胞培养产品(包括细胞培养基、FBS、缓冲溶液、抗菌剂和其他试剂)和植物生物学产品(包括植物组织培养基、凝胶系列产品、植物生长调节剂、抗生素&抗菌剂、生化试剂以及植物组培容器和耗材)。
  • 不同细胞培养工艺生物反应器产率和培养基成本比较
    p  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "简介/span/strong/pp  用于重组蛋白和单克隆抗体(mAb)生产的细胞培养工艺有不同的方式。补料分批(Feb-Batch)工艺由于操作简单,且较易规模放大,被临床和商业化生产广泛采用,目前的技术发展已可在18天内获得20-30x10^6cells/mL的细胞密度,同时获得 10g/L的滴度水平。/pp  灌流工艺以往更多用于生产不稳定的产品,如血液凝集因子和酶类产品,但也有用于生产 mAb产品,如Remicade(英利昔单抗)。在灌流培养中,通过培养基置换,降低产物在反应器内的滞留时间,而灌流速率取决于特异性的产物和/或工艺需求。/pp  近几年,在上游工艺中,基于灌流的工艺强化获得了极大的发展,驱动力主要来自于对降低成本和占地的需求,以及提高设备灵活性。随着细胞系、培养基和细胞截留设备的发展,现在的灌流工艺已可获得较高的细胞密度和产量,使其成为一个非常有吸引力的选择,包括mAb的生产。例如,在mAb生产中,结合2vvd的培养基置换速率,通常可达到50-60x10^6cells/mL的稳态细胞密度,以及高达4g/L/day的生物反应器产率。此外,浓缩补料分批(CFB)也可以通过培养基置换,维持高细胞密度,而将产物截留在生物反应器内。/pp  灌流和CFB的差异在于所用的中空纤维膜的孔径。对于抗体,使用Per.C6细胞系,可在12-13天内,达到21.4g/L的终产物滴度(峰细胞密度 150x10^6cells/mL),而使用CHO细胞系时,可在16天内达到25.3g/L的滴度,峰细胞密度 180x10^6cells/mL。随着生物反应器产率的提高,可使用占地更小、成本更低的一次性设备,来替代大规模的不锈钢设备(10,000-25,000L),通过增加设备轮转或连续工艺,生产等量的产物。/pp  尽管灌流工艺可使用基于过滤的细胞截留设备,如TFF和ATF,在生物反应器内获得并维持高细胞密度,但通常会要求使用较高的培养基置换速率,以将高密度细胞的活性维持在可接受的水平。与不同工艺相关的培养基成本是评估其生产等量产物时经济性的关键因素。而即使单位培养基成本适当,较高的培养基置换速率也会显著影响生产产品成本(CoG),亦即,上游操作成本与培养基成本紧密相关。/pp  生产单位产品的总生产CoG和上/下游成本的比重会随产物滴度和设备尺寸的变化而变化。在分析CoG的所有输入值中,一旦工艺确定,培养基用量及其成本是固定的,不管设备、设施等是否发生改变。细胞培养工程师的一个主要目标是降低培养基成本,同时获得高产量。本文使用相同的基础(basal)和补料(feed)培养基,稍作优化,开发了具有高生物反应器产率的不同细胞培养工艺(补料分批、灌流和CFB),并比较了不同操作模式的生物反应器产率及其相关的培养基成本。/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "实验/span/strong/pp  实验使用生产单克隆抗体的重组CHO细胞系,不同工艺使用相同的3L生物反应器,培养基使用专利的基础(basal)和补液(feed)培养基,后者又分为两种补液-A和补液-B,均富含葡萄糖、氨基酸、维他命等。详细细胞系和种子扩增、生物反应器操作信息请参看原文。/pp  对于补料分批培养,反应器起始工作体积1.5L,接种密度为0.5或2x10^6cells/mL,后者通过3天的N-1灌流来达到目标密度。生物反应器补液以每日葡萄糖水平为基础进行。/pp  对于CFB工艺,使用50kD PS中空纤维过滤器的灌流设备,对于灌流,使用0.2μm PES中空纤维过滤器的灌流设备。接种密度1x10^6cells/mL,工作体积1.3L,一般第2天开始培养基置换,最大置换速率1vvd。灌流培养在第8天开始进行细胞废弃(cell bleeding),以维持所需细胞密度和活性。/pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/b370cbae-a09d-4aad-901e-9998bacb5c16.jpg" title="1_副本.jpg"//pp style="text-align: center "  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "不同细胞培养模式图解(xu et al, 2017)/span/strong/pp  细胞培养每日取样分析,详细分析内容和方法,请参考原文。/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "讨论/span/strong/pp  不同操作模式的细胞培养性能/pp  实验测试操作模式包括:补料分批、灌流和CFB,使用相同的3L生物反应器规格以及基础和补料培养基组合,以便比较细胞/生物反应器产率和培养基成本。/pp  补料分批模式 对于补料分批模式,接种密度为0.5或2x10^6cells/mL,后者通过N-1灌流,可使对数生长期降低2天,所以8天就可达到峰密度,而前者需要10天。两种条件达到的峰细胞密度范围均为20.2-26.2x10^6cells/mL。两种接种密度在第14天分别达到5.4± 0.1g/L和6.8± 0.2g/L的滴度。生物反应器单位体积产率(VPR)按最终生物反应器滴度除以培养周期计算。2x10^6cells/mL接种密度条件,相比0.5x10^6cells/mL,可获得更高的VPR(0.49± 0.01g/L/day vs. 0.39± 0.01g/L/day),主要是由于前者降低了起始生长阶段的时间,延长了生产期。/pp  灌流模式 在灌流培养中,使用了2种不同的培养基组成:1种只使用基础培养基,另一种为基础加补液-A。在培养过程中,通过合适的cell bleeding,维持较高的活性 85%。只使用基础培养基时,平均细胞密度为44± 4.1x10^6cells/mL,从第8天至32天的日产量为0.7± 0.04g/L/day。在基础+补液条件中,随细胞密度的增加,补液-A作为培养基置换的一部分,逐渐引入,而总培养基置换率保持为1vvd,平均细胞密度增加至73.9± 5.4x10^6cells/mL,日产量增加至2.29± 0.28g/L/day。细胞特异性产率从16.0± 1.2pg/cell/day增加至30.1± 2.3pg/cell/day,从而使反应器产量增加~230%。/pp  浓缩补料分批模式(CFB) 与灌流相似,评估了只使用基础培养基和使用基础+补液培养基的条件。与灌流工艺相比,CFB不需要进行cellbleeding,细胞质累积至更高的水平。当只使用基础培养基时,在第18天达到峰细胞密度72.0± 9.6x10^6cells/mL,上清液滴度为12.2± 0.6g/L。使用基础+6%补液-A+2%补液-B时,峰细胞密度为117.4x10^6cells/mL,第18天上清液滴度为21.4g/L,使用基础+8% 补液-A +8% Feed-B时,峰细胞密度为83.4x10^6cells/mL,第18天上清液滴度为36.7g/L。可见,增加补液-A和补液-B的量,可显著提高细胞特异性产率至45.1pg/cell/day。/pp  细胞特异性产率、生物反应器产率和产物质量/pp  当只使用基础培养基时,批次、灌流和CFB工艺可达到相似的qP,范围为14.7-17.1pg/cell/day。在此条件下,累积的细胞数量会直接影响产物滴度和单位体积产率。正如预期,批次培养的VPR显著较低,仅为0.08g/L/day,而灌流和CFB工艺由于可维持更高的细胞密度,可获得相当的VPR,0.68-0.70g/L/day。/pp  浓缩补液培养基通常用于补料分批工艺,以提高细胞生长和细胞特异性产率。在此研究中,补加补液培养基,可显著提高qP和VPR。对于补料分批培养,qP提高至29.4-32.0pg/cell/day,VPR达到0.39g/L/day(接种密度0.5x10^6cells/mL)或0.49g/L/day(接种密度2x10^6cells/mL)。N-1灌流获得的更高的接种密度可提高VPR,因为缩短了生长期的时间,延长了生产期,提高产量。但是,即使与只使用基础培养基的灌流和CFB相比,补料分批培养的VPR仍较低,因为细胞密度差别显著。/pp  相比补料分批工艺,只使用基础培养基以1vvd的速率进行培养基置换时,可轻松地将细胞密度提高2-3倍。而与只使用基础培养基的条件相比,在灌流培养中补充10%补液-A可使VPR提高~230%,qP提高~90%。相似的,在CFB工艺中,补充不同比例的补液-A和补液-B可将VPR提高至1.19-2.04g/L/day。/pp  最近有报道显示,长寿命的人浆细胞可在体外维持120pg/cell/day的IgG分泌率,对于基因工程哺乳动物细胞,最高生产速率估计为~100pg/cell/day。qP的提高将来自于细胞系和培养基的优化。所以,理论上,在灌流工艺中,如稳态细胞密度维持为100x10^6cells/mL时,每日产量可高达10g/L/day。/pp  实验同时评估了不同操作模式的产物质量特征,结果显示,CFB会形成更高水平的HMW和稍高的酸性异构体,主要是由于产物所暴露的细胞培养环境。在补料分批和浓缩补料分批中,产物滞留时间为整个培养周期。此外,在仅使用基础培养基的CFB工艺中,HMW最高,说明培养基组成可能在HMW形成中扮演了重要的角色。但是,产生的HMW仍低于5%,且大部分可在纯化步骤中去除。另一方面,即使是相同的高细胞密度环境和相似的培养基组成,灌流培养的酸性异构体和HMW更低,可能是由于产物在罐内更低的滞留时间。/pp  培养基成本分析/pp  由于细胞系或培养基组成的变化会显著影响产物滴度/产率,所以对不同操作模式的比较需使用相同的细胞系和培养基条件才有意义。本文使用从小规模生物反应器获得的细胞培养性能,来比较不同操作模式的培养基成本,并假定在规模放大时,不同工艺没有显著的产率下降。需要指出的是,实验中的灌流速率没有在对数生长期,以细胞特异性为基础,进行良好的优化。相反,在整个培养周期中,将灌流速率固定为1vvd。在不同的培养阶段,对细胞特异性灌流速率进行精细调节,应可进一步降低培养基用量和成本。/pp  当只使用基础培养基时,生产每克抗体的培养基成本在批量和灌流工艺中都很高。加入适量的补料培养基,可降低每克mAb的培养基成本,且即使补料培养基相对较贵,细胞密度和qP的增加相比培养基成本的增加更加显著。/pp  使用N-1灌流的补料分批的培养基成本比常规补料分批工艺低,N-1灌流需要3x基础培养基置换,但因接种密度的提高,继而获得的滴度的增加,抵消了培养基用量的增加。N-1灌流的补料分批和灌流的培养基成本相当,~$10/g mAb。这说明,虽然往常认为由于较高的灌流速率,灌流的培养基用量更高,继而培养基成本更高,但只需要生物反应器产率达到一定的阈值,从培养基成本上来看,还是相当有竞争力的。/pp  CFB工艺的培养基成本与其它操作模式的趋势不同。在只使用基础培养基的条件中,成本与批量和灌流工艺相当,但CFB培养基成本会随补料培养基的使用而增加,其相对较高的培养基成本( $17/g)可能是因为需要较长的细胞生长时间,在培养中,直到第10天,细胞密度达到峰水平,才开始出现显著的产物滴度增加。降低CFB培养基成本的一种方法是优化细胞寿命,延长批次时间,但更长的罐内滞留时间,可能会影响产物质量属性,或是进一步优化培养基,如替换昂贵的成分和优化其滴度。/pp  总生产COG/pp  除了培养基成本的不同,使用诸如灌流和CFB之类的工艺,结合一次性设备,在小规模上进行生物制品生产,可显著降低成本投入,从而获得更加灵活的生产策略,当产品需求增加时,可以快速地进行规模扩展(scale out),而不是规模放大(ScaleuP)。与传统不锈钢设备相关的固定成本,可以转变为“可变”的成本结构。基于此处的案例,灌流工艺的培养基成本实际上低于补料分批工艺。/pp  进行总成本分析时,如下游均以批量模式进行,且认为不同工艺的劳动力成本相当,则本文建模分析结果显示,N-1灌流的补料分批和灌流工艺的下游CoG/g相当,分别为$63/g和$59/g,而标准补料分批和CFB工艺的下游CoG/g稍高,分别为$71/g和$81/g。对于mAb和不稳定的产品,基于灌流的连续工艺都可以提供显著的经济优势。/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "总结/span/strong/pp  在本研究中,比较了不同操作模式下,生物反应器的产率,包括补料分批、灌流和CFB工艺。对于研究的细胞系,qP高度取决于所用的培养基,不管采用哪种操作模式,这使得累积细胞密度成为决定产物滴度和生物反应器产率的主要因素。结果显示,补料分批培养生物反应器产率最低(0.39-0.49g/L/day),而基于灌流的培养方式,由于可维持更高的细胞密度,产率相对较高,灌流为2.29g/L/day,CFB为1.19-2.04g/L/day。灌流的一个显著优势是可以达到并维持极高的细胞密度,用于产物形成。/pp  灌流工艺一个经常观察到的缺点是培养基用量较高,因为需要进行连续的培养基置换,以维持所需的高活细胞密度。这里的研究显示,高产率灌流培养的培养基成本实际上低于补料分批工艺。CFB工艺的培养基成本最高,虽然在18天内达到了36.7g/L的极高滴度,为降低CFB工艺的培养基成本,建议可以精调培养基置换率,以在起始的生长阶段获得更好的培养基利用,或通过培养基优化,提高细胞特异性产率。/pp  i小编出于交流目的编译此文,由于水平有限,不当之处,敬请谅解,详细内容,请参看原文。/i/ppi  原文:S.Xu, J.Gavin, R. Jiang, et al., Bioreactor Productivity and Media Cost Comparison for Different Intensified Cell Culture Processes. Biotechnol. Prog., 2017, Vol. 00, No.00./i/ppbr//p
  • 微生物培养基使用中常出现的问题及解答!
    微生物培养基使用中常出现的问题及解答!百欧博伟生物:工作中发现,有部分检验员对培养基的使用存在障碍,借此机会和大家分享讨论一下大家常见的对培养基存在的一些疑问。一、培养基煮沸溶解后再高压灭菌,还是直接高压灭菌存在疑惑。拿麦康凯琼脂举个例子,溶解后灭菌,平板上没有不溶的结晶紫,没有紫色的斑点;相对比未溶解灭菌的,平板上有结晶紫和紫色的斑点。所以正确的做法是先煮沸溶解后再高压灭菌。二、培养基PH值为什么不在标准范围内?其实出现这个情况的问题有很多种,大致我分为这么6大点:1、质量不好(生产厂家出厂时pH就不正确);2、灭菌问题(高压灭菌温度过高或灭菌时间过长,导致葡萄糖类焦化从而pH降低);3、保存时间(超过保质期或结块);4、水质出现问题(可以用去离子水、纯化水、蒸馏水不能用矿泉水、自来水);5、保存温度(保存温度过高);6、光线直射总结本人认为以上6点都可能导致培养基pH出现偏差,如果出现此类问题,建议逐一排查,直到问题解决。三、培养基高压灭菌时为什么会焦化?不少检验人员在实验时,发现经过灭菌的培养基有焦化现象,我认为引起此现象的主要原因有以下4点:1、可能你灭菌的时候温度超过了121℃(正常115-116℃20min即可);2、灭菌时间过长;3、培养基在容器中装的太多(不要超过容器容量的80%);4、灭完菌的培养基在高温环境中保存的时间过长,这些都会导致培养基发生焦化现象。四、培养基PH怎么测定?通常分两种情况:1、对于无需高压灭菌的培养基,先煮沸溶解后再冷却至25℃时,测定其pH值(固体培养基至少测2个点,取其平均值);2、对于需要高压灭菌的培养基,高压灭菌后,冷却至25℃测其pH(固体培养基至少测2个点,取其平均值)。五、含琼脂培养基在倒平板为什么有时候不凝固或凝固不好?针对以上情况,我做了分析:1、针对需要高压灭菌的培养基,倒平板时候要先摇匀(因为琼脂分子量比较大,在冷却过程中容易沉淀到底部,导致琼脂分散不均匀);2、针对无需高压灭菌的培养基,一次煮沸溶解后不能直接倒平板,应重复煮沸溶解3-5次(因为一次不能确保琼脂完全溶解)。六、为什么同一品牌的不同批号,粉末颜色有差别?分析可能有3个原因:1、此培养基成分含有染料或指示剂;2、不同批次粉末培养基含水量不同,一般要求≤6%,含水量越高,颜色越深;3、加工时球磨时间越长颜色越深。北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!
  • 默克无菌检测培养基的特点
    相信经过前两期小编的详细介绍:无菌成品检测培养基的生产工艺,验证情况等,大家已经对无菌检测培养基有了初步了解了。那么,小编会给大家总结下成品培养基的特点。照例,在新解说开始之前,我们先进行一个小测验。这么多天过去了,不知道大家还记得多少呢?问:无菌检测培养基的严格的生产流程包含哪些?选择高质量的干粉培养基做为原料,使用一次性无菌耗材转移至灌装线对瓶子进行纯化水清洗,并干燥使用一次性过滤器降低生物负载并截留颗粒使用一次性管路进行罐装灭菌程序灭菌目视检查澄清度问:无菌检测培养基的验证包括哪些验证?答:物理特性的验证微生物特性的验证包装性能的验证不记得的小伙伴们,戳生产工艺复习哦!现在正式进入无菌检测培养基的特点篇无框式螺旋帽优化消毒程序这种无框式设计在擦拭消毒的时候,有效规避死角,都可以消毒到可以避免消毒剂在表面的残留,从而引发假阴性大直径隔垫易于操作人员安全高效刺入大直径的隔垫,方便插入,有效避免了粒子脱落。尤其是冲洗液的隔垫,常规设计的需要多次插入,使用这个大直径隔垫就方便多了二维码追溯系统产品瓶子上的二维码,记录了产品货号,批号,有效期等信息,通过扫码枪扫描就可以读取,使用更方便。满足很多公司对日益严格的数据完整性需求。颜色-外包装盒及螺旋盖易于分辨 不同的产品颜色不同,这样使用的时候就不容易出错。绿色是TSB红色是FTM黑色是冲洗液从无菌检测培养基的工艺到验证,再到这篇文章,我们向大家简单介绍了产品的部分情况与优点,希望能够给大家带来一些有用的知识,提高工作效率。相见不嫌晚为了更好得供应中国用户,默克无菌检测培养基得产品线已经在南通的生命科学亚太区生产中心生产了! 在保证质量的同时,大大缩短了供货周期。以下是具体的产品货号,如果您有相关需求,可以扫描下方二维码简单登记,我们将尽快与您联系。感谢您对默克微生物检测的支持!
  • 泰林培养基自动分装系统震撼上市!
    中国首台智能互联培养基自动分装系统震撼上市,泰林HTY培养基自动分装系统是标准化大批量制备微生物检测平板的新一代智能化专业设备。该产品使用全新智能控制系统,操作更人性化,控制更精准。仪器启动后无需管理,自动进行培养基的精准分装及平皿堆叠,可大幅度减少操作人员工作量。除标准模式外,该仪器还可自定义操作细节,设置简单,定量精确,污染风险低,是微生物检测的最佳选择。 减少制备培养基成本HTY培养基分装系统内置了"琼脂铺展功能",它能保证培养基分配均匀,甚至恰好铺展一个琼脂面。它能使在平皿中琼脂的加量水平最小化,因此能减少培养基的成本。独特的云端控制功能,远程监控HTY培养基自动分装系统可通过互联网云服务平台,与电脑、手机等直接连接,实现云端控制,进行远程监控,对制备程序监测和记录。 产品特点:+ 超大彩色触摸屏,人性化UI界面设计,操作简单直观+ 内置多种分装程序,并支持自定义参数的设置和储存+ 高精度蠕动泵,微流控制,定量精准,分装快速+ 配备多种培养皿支架,适用多种规格培养皿需要+ 独特设计培养皿支架拆卸方式,更换清洁方便+ 预置自动化混合功能,培养基表面更平整,分布更均匀+ 超静音设计,运行平稳、可靠性高+ 内置紫外灯,分装区域独立消毒,污染风险低+ 全程电子记录,实时打印,记录管理更规范+ 表面光滑平整,无清洁死角,使用维护更方便+ 自主设定培养皿数量,智能计数,启动后无需管理+ 多重自动保护,异常现象实时报警,无需人员值守+ 云端控制,可和手机、电脑联网对接,远程监控产品参数: www.tailingood.com 0571-86589008
  • 细胞培养基的质量标准和检测方法
    细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境,是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。培养液或培养基的含义几乎相同,英文都是medium。当它是粉剂时,倾向性地称为培养基,而将粉剂配成液体后,多称为培养液。培养液中常常补加血清、抗生素等成分。培养基主要包括天然细胞培养基、合成细胞培养基和无血清细胞培养基等。细胞培养基的质量标准和检测方法澄清度水是细胞培养基的溶剂。细胞培养基中的营养成分只有完全溶解于水才能被细胞吸收摄取,细胞才能生长增殖,因此细胞培养基是否溶解以及培养液是否透明澄清直接影响培养基使用。该项目是通过对水溶解后的细胞培养基的澄清度检查,判断细胞培养基的澄清度。 按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅸ B进行。pH 值哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度,pH过高或者过低都会导致细胞死亡。pH值的测定也可以检查细胞培养基的批间差。清大天一标准规定取规定量供试品,用注射用水(水温20℃-30℃)溶解至1L,加入规定量碳酸氢钠到上述溶液中,用与细胞培养基溶液pH值相近的两点标准缓冲液校准后的酸度计进行测定。按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅵ H进行;加入规定量的碳酸氢钠到上述溶液中,按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅵ H进行干燥减量的质量分数细胞培养基具有吸湿性,在空气中放置水分会很快升高,干燥减量的质量分数表示产品中含湿量。细胞培养基是有菌制剂,其丰富的营养成分有利于微生物生长,控制细胞培养基中的水分可以防止微生物的繁殖,保持细胞培养基的养分。按中华人民共和国药典2005 年版二部附录Ⅷ L 干燥失重测定法进行。渗透压溶剂通过半透膜由低浓度向高浓度溶液扩散的现象称为渗透,阻止渗透所需施加的压力,称为渗透压。细胞必须生活在等渗环境中,动物细胞借助K+、Na+维持渗透平衡。大多数细胞对渗透压有一定的耐受性。但是培养液渗透压过高容易使细胞脱水wei缩,培养液渗透压过低容易使细胞膨胀破裂,因此要控制培养基的渗透压范围。按中华人民共和国药典2005 年版二部附录Ⅸ G 渗透压摩尔浓度测定法进行。细菌内毒素细菌内毒素是许多病原性细菌所产生的毒素。它的特殊性在于不是细菌或细菌的代谢产物,而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有生物活性的物质。培养基细菌内毒素过高,对生物制品疫苗(如狂犬、乙肝疫苗)、基因工程药品等注射用的药品都需要检查细菌内毒素。 因此本项目的检验符合生物制品质量控制要求。常规细胞培养基的细菌内毒素标准定为<10 EU/ml。称取本品规定量(见表4-12)的1/100,加入细菌内毒素检查用水10 mL溶解,吸取该溶液0.1 mL加细菌内毒素检查用水3.9 mL,混匀即得试样。按中华人民共和国药典2005 年版二部附录Ⅺ E 细菌内毒素检查法中的凝胶法进行。微生物限度细胞培养基不是无菌产品,其中的微生物在一定条件下会吸收细胞培养基中的营养物质滋生繁殖,导致细胞培养基变质失效。控制细胞培养基中细菌和霉菌,是延长细胞培养基有效期的方法之一。清大天一在参考《中华人民共和国药典》2005版二部附录第100页的口服给药制剂的微生物限度标准,并严于该标准,规定细胞培养基产品的细菌数每1g不得超过200个,霉菌数每1g不得超过50个。称取样品1 g,加入无菌纯化水10 mL溶解,混匀即得试样。按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅺ J 微生物限度检查法进行,检查项目为细菌数、霉菌数。检查法采用平皿法。细胞生长试验这是一个性能特性表述的要求。细胞培养基的功能就是培养哺乳类动物细胞,因此经过细胞培养效果的检验是产品质量优劣的直观表述,这也是很多生物制药用户要求的一项指标。目前国内尚无细胞培养和计数的法定方法,可参考《体外培养的原理与技术》中细胞计数fa论述的内容给出。按产品说明书配制培养液进行细胞培养,前四天用含10%小牛血清的培养液培养,观察细胞形态并计数,检查细胞培养基是否有促生长的能力。后三天用不含小牛血清的培养液维持培养,观察细胞形态并计数,检查细胞培养基中是否有不利细胞生长的毒素。本试验用细胞为VERO细胞。细胞培养液的储存,细胞培养液的储存条件一般为2-8℃、密闭、避光保存,但要注意如下几点:1) 过滤后的完全培养液,即添加了血清、谷氨酰胺、抗生素等的培养液要尽快使用,一般在2-3周内使用完。培养液中的L-谷氨酰胺是不稳定的,不同温度L-谷氨酰胺的降解。2) 灭菌后的未加L-谷氨酰胺等添加剂的培养基溶液,一般可在4℃保存6~9个月,也可冷冻保存,用时解冻3) 高压除菌后的培养基应置4℃保存,不能因为其可耐受高温而忽略储存温度。4) 添加某些生长因子、激素等添加物,可能会改变培养液的储存条件,比如温度、时间等方面的要求
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    上海远慕生物科技有限公司为了回馈广大科研工作者特此做出培养基促销优惠活动啦,培养基均现货促销!价格绝对出乎你的意外,望有需要的老师赶快联系我们吧! 培养基是远慕公司自主研发的项目之一,产品质量有保证!说明书都会随货发给您!我们我是符合国家标准的,我们也可以按照客户提供的要求给您配制,我们承诺产品有任何质量问题都是免费退换的! 远慕生物严格遵守“质量优先、客户优先、技术优先、服务优先”“四项优先”原则;产品已被广泛应用于化学、化工、生命科学的基础研究和开发应用、制药、疾病诊断与控制、人口与健康、生物技术等诸多领域,并销往全国各地,公司客户遍布国内各大学、研究所、卫生防疫、制药公司、生物公司等单位,得到广大客户的一致好评。我们的宗旨是“为客户提供最优质的产品和服务”。 远慕欢迎您!培养基促销其他产品:结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA) 250g/瓶 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA) 250g/瓶 胰蛋白胨大豆琼脂 90mm×10个/包 革兰氏染色液 10ml×4支/盒 氧化酶试纸 10片/瓶 氧化酶试剂 1g/瓶 阪崎肠杆菌显色培养基(DFI琼脂) 1000ml/瓶 鸟氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 赖氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 精氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 氨基酸脱羧酶试验对照 1ml×10支/盒 无菌液体石蜡 2ml×10支/盒 氰化钾(KCN)培养基 1ml×10支/盒 氰化钾(KCN)对照培养基 1ml×10支/盒 D-蔗糖发酵管 1ml×10支/盒 D-山梨醇发酵管 1ml×10支/盒 阿拉伯糖发酵管 1ml×10支/盒 卫矛醇半固体琼脂 1ml×10支/盒 棉子糖发酵管 1ml×10支/盒 产品名称 规格 采样袋/均质袋 100个/袋 SCDLP液体培养基基础 250g/瓶 SCDLP增菌肉汤 10ml×20支/箱 磷酸盐缓冲液(pH7.2) 250g/瓶 磷酸盐缓冲液(pH7.2) 225ml×20瓶/箱 磷酸盐缓冲液(pH7.2) 9ml×20支/箱 生理盐水 225ml×20瓶/箱 生理盐水 9ml×20支/箱 假单胞菌CFC选择性培养基基础 250g/瓶 假单胞菌CFC选择性培养基基础添加剂 1ml×10支/盒 假单胞菌琼脂基础培养基基础/CN琼脂基础 250g/瓶 萘啶酮酸 1.5mg×10支/盒 甘油 1ml×10支/盒 营养琼脂斜面(限供汽运) 10ml×20支/箱 营养琼脂(NA) 250g/瓶 氧化酶试纸 10片/瓶 氧化酶试剂 1g/瓶 革兰氏染色液 10ml×4支/盒 乙酰胺培养基 1ml×10支/盒 葡萄糖酸钾培养基 1ml×10支/盒 精氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 赖氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 氨基酸脱羧酶试验对照 1ml×10支/盒 液体石蜡 2ml×10支/盒 硝酸盐蛋白胨水培养基 250g/瓶 明胶培养基(营养明胶培养基) 250g/瓶 山梨醇麦康凯(SMAC)琼脂 250g/瓶 亚碲酸钾溶液 0.25mg×10支/盒 头孢克肟溶液 0.005mg×10支/盒 改良山梨醇麦康凯(CT-SMAC)琼脂 90mm×10个/包 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-MUG(LST-MUG) 1000ml/瓶 含新生霉素的缓冲胰蛋白胨大豆肉汤(BTSB+N)基础 250g/瓶 三糖铁(TSI)琼脂 250g/瓶 三糖铁(TSI)琼脂斜面 4ml×10支/盒 革兰氏染色液 10ml×4支/盒 氧化酶试纸 10片/瓶 半固体琼脂 250g/瓶 半固体琼脂管 1ml×10支/盒 营养琼脂(NA) 250g/瓶 营养琼脂(NA) 90mm×10个/包 蛋白胨水 1ml×10支/盒 Kovacs氏靛基质试剂 10ml×4支/盒 鸟氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 赖氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 氨基酸脱羧酶试验对照 1ml×10支/盒 无菌液体石蜡 2ml×10支/盒 山梨醇发酵管 1ml×10支/盒 棉子糖发酵管 1ml×10支/盒 纤维二糖发酵管 1ml×10支/盒 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培养基) 1ml×10支/盒 甲基红试剂 10ml×4支/盒 V-P试剂 10ml×4支/盒 西蒙氏柠檬酸盐琼脂斜面 4ml×10支/盒 大肠杆菌O157:H7套装生化鉴定管(10种)(SN0973) 12支/套×10套 无菌脱纤维绵羊血 100ml/瓶 肝浸液培养基 250g/瓶 胰蛋白胨琼脂培养基 250g/瓶 精氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 氨基酸脱羧酶试验对照 1ml×10支/盒 无菌液体石蜡 2ml×10支/盒 3%过氧化氢溶液 2ml×10支/盒 氧化酶试纸 10片/瓶 氧化酶试剂 1g/瓶 阿拉伯糖发酵管 1ml×10支/盒 葡萄糖发酵管 1ml×10支/盒 半乳糖发酵管 1ml×10支/盒 硝酸盐肉汤 250g/瓶 硝酸盐肉汤 5ml×10支盒 硝酸盐还原试剂 10ml×4支/盒
  • 培养基全自动分析仪 REBEL 上市
    美国先进仪器制造商 908Devices 公司于 2019 年 8 月上线的一款全新的自动化细胞培养液分析仪,仪器型号为 REBEL, 英文中有颠覆传统的寓意,旨在重新定义培养基的分析流程。REBEL分析仪基于独创的微芯片毛细管电泳串联质谱联用技术,在无需复杂前处理的情况下(稀释和过滤即可),结合配套的 REBEL 试剂盒,可以在 7 分钟内一次性分析包含所有氨基酸在内的 33 种组分,成为当前细胞培养基开发技术的变革者。 908Devices,化学和生物分子分析装备的先驱制造商,2019年8月宣布推出他们的新的生物过程分析仪REBEL。 这种首创的微型毛细管电泳-质谱联用(CE-MS)分析仪,让生物制药研究人员加速流程开发周期,可以实现在线、实时的细胞培养基成分分析,最大限度地利用生物反应器。 REBEL在8月12日至16日波士顿生物处理峰会上首次展示反叛组织。 生物治疗药是由活细胞产生的,并需要合适的培养基培育。 培养基作为动物细胞培养技术的重要元素之一,在提供必要的营养支持以外,也是决定整个动物细胞生理状态的外在条件。细胞的增长是动态的并需要定期的监测。培养基的分析通常均是由中心分析实验室或第三方分析服务提供商进行,但普遍的2-3周的等待时间,阻止了生物工艺开发研究人员的实时决策。 REBEL分析仪的出现将改变这一局面,将控制权掌握在生物过程开发的研究人员手中。 REBEL紧凑的尺寸、独立的构型可以直接安装在过程开发和细胞培养实验室中,并置于生物反应器附近。培养基样品可以在不到7分钟的时间内完成分析,完全省去了送样至中心分析实验室等待数据的时间。 REBEL 将仪器校准和数据处理分析过程完全自动化,在无需复杂前处理的情况下(稀释和过滤即可),结合配套的 REBEL 试剂盒,可以在 7 分钟内一次性分析包含所有氨基酸、生物胺、维生素在内的 33 种组分,成为当前细胞培养基开发的变革者。 REBEL同时基于cGLP/cGMP环境构建,集成了分析报告,自动化的性能认证(Performance Qualification, PQ)和支持 21 CFR Part 11-compliance的数据格式。 908Devices公司首席执行官兼联合创始人Kevin Knnop 博士谈到REBEL时说到:“我们一直致力于制造颠覆性的分析设备,帮助用户在做出重要决定时提供有力的支持。REBEL分析仪正是扮演着这样的角色,装配在制药公司的PD实验室,几乎所有从事培养细胞和使用细胞培养基的从业人员,无需过多专业仪器的操作技能和背景知识,即刻可以通过REBEL获取所需要的答案。 REBEL分析仪为所有早期生物治疗药候选项目的筛选提供了一个解决方案,并帮助它们更快地将有希望的治疗方法推向市场。” 目前REBEL 分析仪已经全面进入中国市场,如有兴趣了解更多REBEL分析仪的技术特点和应用,欢迎来电咨询。
  • 岛津应用:利用LC-MS/MS 考察不同培养基对 CHO 细胞株培养的影响
    细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境,为促进细胞生长增殖提供物质基础,是培养细胞生长和繁殖的生存环境。合成细胞培养基是用化学成分明确的试剂配制的培养基,是目前常用的一类培养基,其组分稳定,主要包括糖类、必需氨基酸、维生素、无机盐类等。培养基组分的变化,对细胞生长会产生一定影响,如细胞生长形态、分裂速度等。同时,适宜的培养基组成与优选的细胞培养工艺对于提高蛋白类药物的产率,保证细胞培养批次之间的一致性、稳定关键质量属性等因素至关重要。因此,寻求一类合适的培养基组成,对细胞培养具有重大意义。细胞生长状态的分析,除形态学观察外,还可对细胞培养上清液中细胞代谢物进行分析,通过考察细胞上清液中营养物和代谢物的变化,判断细胞在生长增殖过程中状态的优劣。鉴于此,我们开发了“细胞培养上清液方法包”,该技术可在 17 分钟内同时分析 95 种细胞培养上清液营养成份和代谢物的相对丰度变化。本文使用岛津超高效液相色谱仪 LC-30A 和三重四极杆质谱 LCMS-8060 联用,结合“细胞培养上清液方法包”建立了细胞培养上清液中营养物质和细胞代谢物的液相色谱-串联质谱的同时分析方法,为相关研究人员评估细胞生长状态、改进培养基组分提供参考。岛津三重四极杆质谱 LCMS-8060 了解详情,敬请点击《利用LC-MS/MS 考察不同培养基对 CHO 细胞株培养的影响》关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站,已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念,始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,为中国社会的进步贡献力量。
  • 泰林生物于CPhI展示培养基自动分装系统等主打产品
    泰林生物于上海CPhI展会上开启了“2016新品全球巡展第五站”发布活动,其展位现场展示了最新一代无菌隔离器、全新汽化过氧化氢发生器、培养基自动分装仪、新型智能集菌仪、新型微生物检验仪、新型TOC分析仪等相关技术和设备,以及无菌检测用集菌培养器、微生物检测过滤器、无菌滤膜、生物指示剂等一批检测、验证用耗材。泰林生物展台  泰林无菌隔离器HTY培养基自动分装系统  同时,在展会同期活动“前沿实验室仪器与解决方案展示秀”中,泰林生物还举办了“培养基自动分装系统与平皿质量控制”技术研讨会。技术研讨会现场
  • 好物助研 | 想要养好细胞,你需要@biocomma®细胞培养基!
    细胞培养在科研界的地位举足轻重,很多成果可谓是成也细胞培养,败也细胞培养。影响细胞培养的因素有很多。其中很重要的一步就是为细胞选择适合的生长环境,为其选择成分适合又营养丰富的细胞培养基。以下介绍两款常用的细胞培养基,可满足多种细胞贴壁及悬浮培养需求,超强品质,久经考验,值得信赖!好物助研/推荐两款常用培养基DMEM(高糖)培养基DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培养基,由MEM培养基改良而来,起初是为小鼠成纤维biocomma DMEM培养基是MEM培养基的改良版,包含高糖型和低糖型2种。DMEM高糖培养基可促进细胞贴壁,适用于生长快、高密度、粘附性低的细胞,如原代成纤维细胞、神经元、胶质细胞、平滑肌细胞、HUVEC,以及 HeLa、293、Cos-7 和 PC-12 等细胞系,是细胞培养中常用的培养基。RPMI 1640培养基biocomma RPMI 1640培养基是McCoy's 5A培养基的改良版,最初是为淋巴细胞培养专门设计的。现已广泛应用于各种哺乳动物细胞尤其是悬浮细胞的培养,如 HeLa 细胞、Jurkat 细胞、 MCF-7 细胞、PC12 细胞、PBMC 细胞、星形胶质细胞和肿瘤细胞等,是细胞培养中使用非常广泛的培养基。产品特点方便即用型,经过滤除菌,高效便捷专业专业生产工艺,ISO9001认证,GMP 标准,全程可溯源化优质出色的培养效果,质量有保证稳定优选的原材料,保证批间一致性为何选择biocomma/全产业链生产能力原材料筛选通过LC/MS、GC/MS做严格原料筛选,确保产品间批次间的稳定性与一致性。无菌生物工艺包材瓶子为无菌/无酶/无热原医药包材,由ASB和青木固一步法加工而成,无二次污染。四种无菌工艺采用环氧乙烷+湿热+超滤+辐照4道无菌工艺。自动化无菌灌装注射级用水,全程自动化无菌灌装。选择高品质的培养基,对于细胞培养而言,不仅可以确保您实验数据的稳定性和可重复性,更能节约宝贵的实验时间和精力。逗点生物biocomma细胞培养基,GMP标准生产车间,搭配超强的全产业链生产能力,完美把控出品,可为客户提供各类细胞培养的定制化产品及品牌一体化服务!如感兴趣,可通过400-860-5168转3309官方客服热线联系我们!
  • 微生物检测培养基质量控制问答
    微生物检测培养基质量控制问答1、培养基灭菌后成份会有所蒸发减少,如何处理这个问题?答:正常情况下蒸发量较少,可忽略不计。2、培养基融化后出现浑浊是有哪些方面的原因引起的?应如何避免?答:可能的情况有:1. 培养基配置用水不符合规定;2. 灭菌过程温度升温慢或降温慢;3. 培养基储存不当;4. 融化时沸腾时间较长等。3、准备好的培养基有效期如何验证?答:定期取出培养基验证其无菌性,促生长能力等方面。4、培养基配制好灭菌后,在高压容器中保温降至50℃左右,可不可行?答:建议最-好不要,避免过度受热。5、脱水培养基对湿度是否有要求?多少适宜?答:按要求室温干燥环境储存即可。6、培养基pH值测定温度在25℃,这个温度应怎么控制?答:可水浴控制培养基温度。7、配制培养基过程中,按说明书称定量,加规定的纯化水,煮沸溶解,为了避免煮沸过程总减少水分,是否要在配制过程适当增加水?答:可适量增加,自己掌握。8、商品培养基一定要当天配当天用吗?可否在一周内用完?答:不是即配即用的培养基的话,储存的当,可以使用。9、称量培养基时,注意不要吸入粉末,这粉末是指何物?答:就是你所称量的干粉培养基 ,因为培养基的粉末对呼吸道有刺激作用,而且培养基中的某些成分,如亚硒-酸盐、叠氮-化钠、乙酰胺等,长期吸入并在体内累积到一定量会对人体健康有危害。所以培养基配制称量需做好个人防护,且最-好选择少粉尘环保型颗粒培养基。10、煮培养基,用不锈钢锅在电磁炉上煮可行?硫乙醇培养基是否要煮沸?如何煮沸?用不锈钢锅在电磁炉上煮沸可行吗?可不可以水浴煮沸呢?答:硫乙醇应煮沸,量大时,我实验室用不锈钢锅在电磁炉上煮沸。不建议水浴煮沸,因为水浴煮沸琼脂粉很难溶,导致琼脂分装不均匀,前段分装的琼脂含量少,后段分装的琼脂含量高,导致有的管或瓶中的FT凝固。11、如培养基在高压灭菌器中温度需自然下降20度才开盖吗?答:高温灭菌器有安全阀,温度下降到安全阀可打开时将培养基取出室温冷却,各型号灭菌器安全开盖温度不尽相同。12、平板涂布和平板划线培养基表面水分过多,菌落蔓延如何解决?答:对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥:揭开平皿盖,将平板倒扣于烘箱或培养箱中(温度设为25℃~50℃);或放在有对流的无菌净化台中,直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。
  • 默克培养基促销,库存有限,售完即止!
    货号 品名 清仓价格 应用 1.02239.0500 Peptone from casein 236 酪蛋白胨,基础原料 1.07212.0500 Peptone from soya bean 236 大豆蛋白胨,基础原料 1.10493.0500 Brain heart broth 273 脑心浸液,苛养菌培养 1.07228.5000 Peptone water 1050 通用增菌液 1.00466.0500 DRBC 琼脂 945 玫瑰红钠培养基添加绿霉素,酵母霉菌计数 1.05978.0500 OGYZ AGAR 336 奶制品中的酵母霉菌 1.05448.0500 WORT AGAR 546 真菌,酵母菌 1.10866.0500 WL nutrient agar 525 啤酒当中的酵母、细菌 1.01347.0500 EMB agar 578 伊红美兰琼脂,肠道菌、大肠杆菌 1.01406.5000 VRB-AGAR 3675 肠道菌,大肠杆菌 1.04030.0500 VRB Agar 525 肠道菌,大肠杆菌 1.04044.0500 ENDO agar 483 肠道菌,大肠杆菌 1.07237.0500 Brilliant green agar 315 肠道菌 1.05470.0500 SIM medium 945 肠道菌 1.07500.0002 RAMBACH-AGAR 578 肠道菌,大肠杆菌显色培养 1.10765.0500 EC broth for microbiology 420 肠道菌,大肠杆菌 1.14582.0500 m-EC-broth with Novobioci 1050 新生霉素添加剂,肠道菌 1.10426.0500 COLIFORM Agar 1575 水质肠道菌 1.05222.0500 Kanamycin esculin 525 肠球菌 1.10859.0500 Tryptone water 420 生化鉴定试验,吲哚反应 1.05405.0500 VOGEL JOHNSON agar 840 金黄色葡萄球菌 1.07004.0500 Oxford listeria 945 奶制品单增李斯特菌 1.10398.0500 FRASER Listeria Selective 315 李斯特菌 1.10399.0001 FRASER Listeria Selective 420 李斯特菌 1.10549.0500 LISTERIA ENRICHMENT BROTH 383 李斯特增菌液 1.10661.0500 MRS-broth lactobacillus 378 乳酸菌检查 1.10988.0500 Pseudomonas agar 1155 水质假单胞菌 1.10989.0500 Pseudomonas agar 1155 水质假单胞菌 1.00888.0001 Fluorocukt TSC Agar 483 梭菌显色培养基 1.11972.0500 TSC agar 473 梭菌,厌氧菌 1.10259.0500 DCA AGAR 630 梭菌,厌氧菌 1.13825.0500 Brain heart agar 735 苛养菌生长 1.00445.0500 Universal Beer Agar 630 啤酒腐败菌 1.07667.0500 SS agar 840 沙门氏,志贺氏菌
  • [加大投资]FUJIFILM Irvine Scientific在欧新建细胞培养基生产基地
    富士胶片(FUJIFILM)旗下成员、全球领先的细胞培养基产品和服务供应商FUJIFILMIrvineScientific今日宣布计划在荷兰蒂尔堡(Tilburg)开始建设公司全球第三个细胞培养基生产工厂,以满足持续增加的市场需求,并实现FUJIFILMIrvineScientific"加快在生物药及细胞基因治疗市场投资和发展"的承诺。FUJIFILMIrvineScientific正在新建设的细胞培养基工厂作为公司目前美国和日本细胞培养基工厂的拓展和补充,将成为富士胶片(FUJIFILM)集团欧洲制造中心的一部分,该工厂主要生产cGMP级别的无动物源的干粉细胞培养基、液体培养基和生物工艺下游处理试剂(如缓冲液)等高质量的细胞培养基产品,从而为FUJIFILMIrvineScientific新增加每年32万kg干粉培养基、47万L液体培养基的生产能力。新工厂的建设工作已经开始,预计将在2021年下半年投入使用。"全球生物制药市场高速增长,细胞疗法等正在快速进入临床试验和商业化阶段。公司目前的干粉培养基产量已经大于100万公斤/年,但我们必须提前布局,加大投资,以应对全球客户持续增长的对细胞培养基的需求,并满足欧洲生物制药和细胞治疗客户对本地化培养基生产和支持的期望",FUJIFILMIrvineScientific首席执行官山口先生在一份新闻声明中说到,"建设第三个世界级一流的cGMP细胞培养基生产工厂对FUJIFILMIrvineScientific意义重大,这将使我们得以更好更全面地服务欧洲客户,为本地生物药和细胞治疗企业提供更加快速、可靠的产品供应。"FUJIFILMIrvineScientific是全球领先的专注于细胞培养产品创新研发和生产的高科技公司,在工业细胞培养(CHO/HEK293细胞无血清培养基)、辅助生殖、细胞治疗(干细胞/T细胞/NK细胞无血清培养基和无血清、无DMSO冻存液)和细胞遗传学等领域,持续为全世界的科研、工业客户及临床医生提供高质量、可靠的产品和灵活、定制化的优异服务。公司始终遵从国际ISO和FDA的严格监管,并在美国加州和日本东京同时拥有国际一流的cGMP干粉培养基生产设施。FUJIFILMIrvineScientific公司长期以来坚持咨询式服务的理念,凭借在全球细胞培养产品开发、服务领域及法规监管、注册合规方面的超过45年的经验和专长,得到了全世界客户的认可,并成为在培养基开发和服务领域全球战略性的领导者。相关阅读IrvineScientific推出最新一代CHO细胞浓缩补料以支持高效生物制药工业生产《工业无血清培养基开发策略和新一代解决方案》无动物源、化学成分明确的T细胞培养基的开发无血清悬浮培养HEK293提高病毒载体产量的研究[数据]无DMSO、化学成分明确的无血清细胞冻存液的开发
  • 岛津细胞上清液质谱分析平台,助力国产培养基研发与质控
    细胞培养基是生物制药的重要原料,影响生物药的产量和质量,更是规模化生产成本控制的重要环节。 长期以来,国内无血清培养基主要依赖进口,易受国际形势和贸易政策的影响,尤其是2020年以来新冠疫情爆发,国内各单位和企业都在加速推进疫苗和生物药生产的进度,因此对培养基的需求也日益增大,为了保证培养基安全和持续供应,国产培养基迅速发展。 但要与占主导地位的进口培养基竞争,需要优越的产品性能和良好的批次间质量稳定性作为保证。因此,对细胞培养基中糖类、氨基酸、维生素、核苷酸、脂类、代谢物等有机组分,以及钠、镁、钾、钙等无机元素组分进行监测和质控至关重要。 但是目前常用的细胞培养基和培养上清液的检测技术存在以下问题:▷ 检测指标少,仅分析葡萄糖、谷氨酰胺和乳酸等少数化合物;▷ 无同时分析方案,一种培养基需要多种仪器多种方法完成检测;▷ 耗时费力,一种培养基大致需3天的时间才能完成检测。 为解决上述问题,岛津开发了细胞培养上清液多组分同时分析技术,可快速检测细胞培养上清液中有机组分和无机元素的含量。 岛津自首次在业内推出细胞培养上清液分析技术以来,紧贴用户需求,深入研究,目前已形成以下解决方案: ★ 有机组分分析解决方案,包括细胞培养上清液LC-MS/MS分析方法包,可以分析糖类、氨基酸、维生素、核苷酸和细胞代谢物等125种有机组分;以及脂质介质LC-MS/MS分析方法包,可以分析196种脂类及其代谢物;★ 无机元素分析解决方案,可以同时分析多种无机元素。 以上解决方案,助您揭开细胞培养上清液组分及其在培养过程中变化趋势的神秘面纱。 该技术真的如此神奇吗?接下来为您细细道来。 1有机组分分析解决方案 大家已知晓细胞培养上清液分析方法包的大致轮廓,接下来让我们认识它丰富的内涵: ★ 岛津专利技术(申请号:201610888146.3,申请日:2016.10.11);★17分钟内,同时分析125种培养基组分及代谢物;★专属数据处理软件,快速绘制化合物含量变化 趋势图;★ 内置液相分离条件、质谱参数和前处理方法,即装即用,无需优化;★ 化合物种类全,包括糖类、核苷酸、氨基酸、有机酸、抗生素等,支持自行扩展。 该方法包不仅囊括了您所关注的各类组分,而且分析时间短、分析参数无需优化… … 就连前处理也是简单到没朋友呢!只需要简单蛋白沉淀和离心,即可上机分析。 下面给大家分享两个细胞培养上清液分析方法包的应用案例: 抗体药物生产用三种不同培养基组分含量差异对比 部分分析结果展示如下: 上图中纵坐标为目标物和内标物的峰面积比,横坐标代表三种不同的培养基。结果显示1#和2#培养基各组分的含量相近,而3#培养基各组分的含量与1#和2#培养基相差较大。 由此可见,该技术既可用于培养基组分检测,也可用于不同品牌和不同批次培养基组分含量差异检测,更好地进行培养基质量控制。 融合蛋白药物补料工艺优化 该药物生产过程中需要在第3、5和8天添加补料。每天取样后添加补料,含量变化在补料后一天体现。连续14天取样,采用本方法进行分析,并绘制含量变化趋势图。部分结果如下所示。 三个代表化合物的含量均在第4、6和9天有明显提升,与补料工艺相符。通过添加补料,葡萄糖含量在整个培养过程中较为稳定。胱氨酸含量需酌情增加。天冬氨酸含量可酌情减少。可见,该技术可以指导补料工艺优化,也可以用于培养基配方优化,助力药物表达量的提高,同时更好地进行培养基成本控制。 除上述“细胞培养上清液分析方法包”包含的糖类、氨基酸、核苷酸和维生素等物质外,脂类物质也是细胞培养基常见添加物质。 对细胞培养来说,脂类化合物是一类水不溶性的、与生物合成相关的脂肪酸及其衍生物的总称。这类化合物可作为能量储存,也可作为细胞膜的结构组分,还可以在运输和信号系统中起作用。 因此,越来越多的客户开始关注细胞培养上清液中脂类化合物的分析。《岛津脂质介质LC-MS/MS分析方法包》,包含花生四烯酸、DHA、EPA、乙酰醇胺和其他脂肪酸及它们的代谢物,共196种脂质介质化合物,可用于细胞培养上清液中脂类物质的分析,揭示其在培养过程中的含量变化趋势,从而助力培养工艺优化。 2无机组分分析解决方案 细胞培养液中除了含有糖类、氨基酸、维生素等有机营养成分,还含有微量和痕量的无机元素,它们对细胞培养又有什么作用呢? ▷钠、钾、镁、钙、铁等微量元素,可以维持细胞渗透压平衡;▷钴、铜、铅、镉等痕量元素,影响代谢途径、某些酶和信号分子的活性;▷ 额外补充的Zn2+、Cu2+、Mn2+等,还可以提高产率和改善蛋白质量。 可以说这些微量和痕量元素,对细胞培养可是少而精,万万不可缺少的呢! 岛津公司作为细胞培养上清液分析领域的领军者,率先推出了元素分析解决方案,开发了ICPMS-2030 测定细胞培养液中多种元素含量的分析方法。 应用该技术测定了市售某细胞培养液中钠、镁、钾、钙等多种元素含量。样品平行处理6份,测定结果的RSD3%,加标回收率在94%~109%之间。 本方法操作快速简便,样品前处理简单,可以满足细胞培养液中多元素含量的测定要求。 基于岛津LC-MS/MS和ICPMS开发的细胞培养上清液分析平台,可以用于细胞培养基组分含量测定,也可以用于培养基配方优化,还可以用于培养基批间质量稳定性监控。该技术可以实现多组分同时检测,方法简单、快速、易上手。助力国产培养基研发和质控,迈上新台阶,迎来新发展,创造新奇迹!
  • 市值破百亿|细胞培养基第一股:奥浦迈首日涨60%
    2022年9月2日,奥浦迈正式在科创板挂牌上市,截至目前股价涨60%,市值达到104亿元人民币。中国细胞培养基市场仍以进口产品为主,赛默飞(Gibco品牌)、丹纳赫(HyClone品牌)和默克三大供应商占到三分之二的市场份额,国产化替代空间巨大。国产细胞培养基厂商中,甘肃健顺、奥浦迈占比较大,其他的供应商还有中山康天晟和、上海倍谙基、源培生物、沃美生物、迈邦生物、多宁生物等。抗体和蛋白药物的细胞培养基,进口产品一般在200-300元/升,国产产品一般在100元/升左右。细胞和基因治疗的培养基几乎完全依赖进口,售价一般在3000-4000元/升。根据咨询机构的数据,2020年中国抗体和蛋白药物细胞培养基市场规模为7.27亿元左右。考虑到中国生物医药从2015年的爆发开始,2019年开始才陆续进入商业化阶段,未来几年仍将高速增长的趋势。赛默飞、丹纳赫、默克占据国内培养基市场的三分之二,如果具体到抗体和蛋白药物领域,三家外企的份额更是达到了81.4%,国产化替代空间更加巨大。2019-2021年,奥浦迈的营业收入从2602万元迅速增加到1.28亿元。相比之下,纯化填料供应商纳微科技2021年的营业收入为4.46亿元。总结中国生物医药行业处于蓬勃发展的新时代,商业化也处在发端,未来几年国际化热潮也将来临。在这种背景下,供应链的国产化替代迎来重要的发展机会。除了细胞培养基、纯化填料,工艺设备端的细胞反应器、纯化设备是国产化替代的重要部分。除了试剂耗材和工艺设备外,分析仪器的差距更大,国产化替代面临更大的挑战
  • 岛津推出《细胞培养上清液及培养基组分分析应用文集》
    现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的;细胞工程中更是离不细胞培养,杂交瘤单克隆抗体,完全是通过细胞培养来实现的。正在倍受重视的基因治疗、细胞治疗也要经过细胞培养过程才能实现,发酵工程和酶工程有的也与细胞培养密切相关。总之,细胞培养在整个生物技术产业的发展中起到了关键的核心作用。开发合适的培养基配方与优化细胞培养条件是保证产品质量、产量以及批次之间一致性的重要因素,尤其是抗体药物偶联物、双靶点/特异抗体类药物、抗体片段融合蛋白等相对分子量大、结构复杂的抗体类药物,对其重要性不言而喻。而对于生物类似药的研发与质量控制来说,尽可能通过优化工艺缩小差异,更有利于生物类似药与原研参比品的质量对比研究,提高生物类似药的质量研究结果与参比品之间的相似性,从而使各项质量属性达到预先设置的可接受范围。目前生物制品公司的生物过程工艺开发与优化偏重于监测常规的温度、搅拌、溶解气体、OD值等理化条件和少数培养基成分与代谢物等的变化,缺乏对于细胞培养上清液组分直接、全面且快速的客观动态数据分析,因此无法精准优化细胞培养工艺条件,甚至影响抗体类药物等的产品品质;而培养基生产商为了开发高效低成本培养基配方,并且要保证批次间一致性,则需要投入大量的人力物力,配备不同检测功能的仪器来实现培养基成分的全方位检测。 为满足快速全面分析细胞培养上清液组分和培养基组分,将基础碳源、氮源、核酸、维生素和其他主要代谢物同时检测分析的需求,我们开发出“细胞培养上清液方法包”。该技术平台采用超快速三重四极杆液质联用仪,仅需17分钟,即可同时监测95种细胞培养上清液营养成份和代谢物等的相对丰度变化 。无需用户自行开发方法,即装即用。所有目标化合物信息与实验方法全内置,且根据需要可增加,可拓展。为增进用户对“细胞培养上清液方法包”的深入了解和方便使用,岛津企业管理(中国)有限公司分析中心整理编写了本册《细胞培养上清液及培养基组分分析应用文集》。本册文集介绍了“细胞培养上清液方法包”在不同培养基组分分析以及细胞培养过程监控中的应用,共收录应用文章 10 篇,为相关领域的客户使用该系统提供参考。 关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站,已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念,始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,为中国社会的进步贡献力量。
  • 霉菌培养箱操作使用注意事项
    霉菌培养箱操作使用注意事项霉菌培养箱一般应用于医疗卫生、生物制药、农业科研、环境保护等研究应用领域,是水体分析、BOD测定,细菌、菌种、微生物的培养、保存和植物栽培、育种实验生物培养的专用设备。要菌培养箱使用时的注意事项具体如下:1、用霉菌培养箱底部调节螺钉调节高度,使箱体安置平稳2、搬运时必须小心,搬运时与水平面的夹角不得小于45°3、加湿器的安装:将加湿器的电源插头插在仪器背面的电源插座上,再将仪器的加湿管与加湿器相连,相连处一定要紧密连接。加湿器水箱里加水一定要按说明书上正确操作作。4、当使用温度较低时,应定期倒掉位于箱内底部积水盘内的积水.5、如箱内不用杀菌时,应将面板上的杀菌开关置于“关”的位置.6、当温度设定好之后,不能随便将控温旋钮来回多次旋转,以免压缩机启动频繁,造成压缩机出现过载现象,影响压缩机的使用寿命。7、仪器背部装有二组保险盒,2A为制冷加热负载保险丝盒,8A为控制电源保险丝盒,若机器运转出现故,例如控温失灵,不加热或不制冷,须切断电源,分别检查保险丝是否完好,再检查相应部位。8、当湿度传感器长时间处于高湿状态,会形成结露即湿度显示值会居高不下,若需要准确的湿度显示值,则应关机后,将培养箱箱门打开,让湿度传感器处于室温中,自然干爆后,即可继续使用。9、为了保证设备的外观完好,禁止用酸或碱及其它腐蚀性物品来擦表面,箱内可以用干布定期擦干。激活 Windows转到“设置”以激活Wind10、当仪器在停止使用时,应拔掉电源插头。 ● 仪器试用环境适用于恒温试验、环境试验、低温培养、冷藏保存等场合。是水体分析培养、发酵、各种恒温试验、环境试验、水体分析、 BOD测定、微生物培养物质变性试验和培养基、血清、药物等物品的储存等。广泛应用于医疗卫生、生物制药、农业科研、环 境保护等研究应用领域。●仪器特点◆ 配备进口带刹万向脚轮,外形小,承重性好,双轮设计转动顺畅,移动安全便捷。◆ 门与箱体之间采用耐高温之高张性密封条以确保测试区的密闭,保证测试数据的精度和稳定。 以高质量抗菌不锈钢材质和经圆边处理而制成的光滑表面.易于清洁和保持完美的清洁度。◆ 独特的风道结构,进口风扇马达搭配耐高、低温的多翼式结构循环搅拌风叶,以达到空气的强制对流垂直扩散循环效果。◆ 采用模糊PID智能控制方式,具有可编程的程序运行模式,温度控制输出功率由微电脑自动演算,以达高精度及高效率之 用电效益。◆ 配备外部RS232通讯接口及警报输出端口,方便用户连接外部PC机对试验数据进行监控显示和打印输出。加强了人机对话功能,有效确保了试验的直观性。◆ 标配有漏电保护、独立的可调温度安全装置、压缩机过压保护、冷却风机过热保护、开门报警、停电报警、传感器报警 等功能确保用户使用的绝对安全性。◆ 控制系统具有自动除霜和手动除霜两项除霜功能供用户选择(做长期试验时建议选择自动除霜功能),可有效避免设备 运行中因蒸发器结霜严重而造成设备箱体内温湿度产生漂移等现象。◆ 配置进口品牌压缩机和德国EBM散热风机.霍尼韦尔PT1000三芯高精度温度传感器。◆培养箱内部可以选配万用防水插座,便于用户在培养箱内使用其它实验设备。◆具备超大可视观察窗,能在外门不被开启的情况下,全方位、立体式观察设备内部各个区域的实验情况。风道结构:独特的风道结构,进口耐高温电机搭配耐高温的多翼式结构循环搅拌风叶,以达到空气的强制对流垂直扩散循环效果。放置隔板::用户可随意调节测试区域隔板间间距和 言密,具跳也瓦方便安装和取出雨板
  • ATCC指定用培养基Cellgro诚征代理商
    深圳市赛泰克生物科技有限公司,是Corning@ Cellgro@目前在国内华南区最大的销售细胞培养基的生物高新技术企业。产品详情请登录本公司网站。作为美国Cellgro(http://www.atcc.org/CulturesandProducts/TechnicalSupport/tabid/457/Default.aspx指定用细胞培养基)华南总代理,现诚征下列区域独家代理商:湖南、福建、广西、贵州、海南热忱欢迎上述各地代理商来电来函咨询,深圳市赛泰克将以优惠的代理政策、合理的代理价格及统一的客户服务与您共创Cellgro的美好未来,共创公司的美好未来!深圳市赛泰克生物科技有限公司地址:深圳市福田区福华路京海花园30K电话:0755-83773516/26/36传真:0755-83753549邮箱:info@cy-tech.cn网址:http://www.cy-tech.cn/cn
  • 高压灭菌器做九管法时如何避免气泡残留在培养基
    大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一。而检测食品中大肠菌群的方法中,国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准,国家标准的三步九管法,即乳糖发酵试验、分离培养、证实试验。 由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,即:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。1.乳糖发酵试验:样品稀释后,选择三个稀释度,每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h,观察是否产气。2.分离培养:将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上,36±1℃培养18-24h,观察菌落形态。3.证实试验:挑取平板上的可疑菌落,进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h,观察产气情况。 在乳糖发酵试验工作中,经常可以看到在发酵倒管内极微少的气泡(有时比小米粒还小),有时可以遇到在初发酵时产酸或沿管壁有缓缓上浮的小气泡。实验表明大肠菌群的产气量,多者可以使发酵倒管全部充满气体,少者可以产生比小米粒还小的气泡。 在试验过程中,会用到高压灭菌器来进行灭菌,九管法灭菌时,大肠菌在高温下会产生气泡,如果用的是ALP高压力灭菌锅,可以通过进入工程师菜单,调整在升温过程中的排气时间,可以有效的排走残留在培养基中的气泡。初始界面灭菌中灭菌结束 培养基中有气泡 目前市面上,高压灭菌器品种繁多,有进口的有国产的高压灭菌器,高压灭菌器产品质量参差不齐。在业内质量口碑最好的当属东南科仪总代理的日本ALP高压灭菌器,日本ALP高压灭菌器具备《进口压力容器生产许可证》、《进出口锅炉压力容器安全性能检验证书》以及高压灭菌器上的压力表和减压阀,送当地计量部门计量后取得计量证书。 ALP高压灭菌器开关轻松简便,电子锁仅在通电时才可开启,避免因断电或关机时意外泄漏未灭菌物质。高压灭菌器可清晰显示所处的状态,如温度、压力、程序及操作过程中的其它相关信息。高压灭菌器脉冲空气净化反复进行,直至压力高于对应温度而产生过饱和蒸汽压保证灭菌效果。ALP高压灭菌器可根据被灭菌物质的情况调整蒸汽排放情况,ALP高压灭菌器具备快速冷却功能可使灭菌后快速降温到80℃以下的安全温度。ALP高压灭菌器通过真空泵及经0.2um的滤膜过滤后的热空气快速干燥样品,使其快速可用。高压灭菌器标配物温探头安装孔,选配物温探头,方便进行内部灭菌效果的验证。ALP高压灭菌器三重脉冲,预真空设备配置强大的真空泵强行排空腔内留存的空气,使饱和蒸汽良好的渗透入灭菌物品中,从而确保充分有效的灭菌效果。 更多详细参数可关注ALP高压灭菌器中国总代理:东南科仪!
  • 金坛市晶玻BOD恒温培养箱中标
    BOD恒温培养箱  金坛市晶玻实验仪器厂BOD恒温培养箱在内蒙古自治区环境保护厅环保仪器及设备采购项目的投标项目中中标!  产品特点: SHP-JB型系列BOD培养箱是具有冷、热控制的高精度恒温设备,是细菌、霉菌、微生物培养及育种、试验的恒温培养装置,特别适用于生物工程、医学研究、环境保护、农林科学、水产、畜牧等领域从事科研和生产使用的理想设备。  BOD恒温培养箱的详细资料:  BOD培养箱具有制冷、加热和BOD培养功能(BOD仪必须自配)。是生物、微生物、遗传、医学环保等教育、科研和生产部门对微生物、组织细胞培养,种子了芽、育种以及昆虫、小动物饲养等不可缺少的实验室设备。  使用说明  1、 培养箱放置在清洁整齐干燥通风的工作环境内。  2、 使用前,面板上各控制开头就处于非工作状态。  3、 培养架上放置各培养皿时就保持适当的间隔,以利于冷热空气的对流。(作生化培养箱时)  4、 接通外电源,打开开关。  5、 将自配BOD仪平稳放入箱体内,将BOD仪电源插头插入箱体内插座上,将所需数据设定好。工作时,不必打开箱体,利用BOD电源便可开或关闭BOD仪。  主要技术参数:  制冷系统: 任选  环境温度:5-35℃  温度范围:5-50℃  温度分辨率:0.1℃  温度均匀性:±1℃  温度波动度:±0.5℃  电源:~220V 50Hz  定时范围:1-9999min  备注:特殊规格和特殊要求可以订制  金坛市晶玻实验仪器厂  电话:0519-82323801  手机:18915816688  网址:www.jbscience.com
  • 2013国家基础科学人才培养基金预算1.5亿元
    国家基础科学人才培养基金2013年度项目评审会议6月19-21日在京举行。基金委副主任高瑞平出席会议并讲话,计划局局长孟宪平、副局长王长锐及计划局人才处相关人员参加会议。  高瑞平副主任指出,国家基础科学人才培养基金已经成为国家自然科学基金人才资助链的重要组成部分,要巩固已经取得的成果,进一步促进基础研究与高等教育的有机结合,加强对本科生的科研训练以及青年科研人员的培养,为我国基础研究提供高素质的后备人才。高瑞平副主任希望本次会议评审工作准确把握国家基础科学人才培养基金定位,严格按照国家自然科学基金项目的评审原则,遴选出建议资助的优秀项目。  2013年度国家基础科学人才培养基金预算为1.5亿元,资助计划为1.28亿元。  本次会议分为数学(含力学)、物理学(含天文)、化学、地学、生物学、医学与心理学6个组,共邀请72名评审专家出席评审会,共65个申请项目参加了会议答辩。
  • WIGGENS发布WIGGENS WOS-101SRC CO2 培养箱专用振荡器新品
    维根斯(WIGGENS)CO2培养箱专用振荡器详细说明* 维根斯(WIGGENS)CO2培养箱专用振荡器采用电磁感应驱动技术,驱动力强,但发热量小保证了培养箱体内的温度稳定性* 控制系统与驱动系统独立,驱动系统中电子元件均有涂层保护,这些设计保证了维根斯(WIGGENS)CO2培养箱专用振荡器能够在高湿度环境下稳定运行* 远程控制器,使得WIGGENS二氧化碳培养箱专用振荡器可以在箱体外控制振荡器,有效的减少热损失及CO2消耗* WIGGENS CO2培养箱专用振荡器的控制器与驱动器通过电缆线连接,控制器后部有磁铁,保证了使用过程的舒适,便捷维根斯(WIGGENS)CO2培养箱专用振荡器特点* 低发热量 采用电磁感应驱动技术,驱动力强大,但几乎不发热,几乎没有任何热量进入培养箱。保证了培养箱中的温度稳定性,是放在培养箱或者其他箱体里细胞培养的理想选择。* 防水蒸汽设计 电线圈、振动电机等电子元件都有环氧树脂涂层保护,适用于高湿度环境。而其余的电路元件如控制面板、LED 显示器全都放置在箱体外部。* 远程控制单元 远程控制器置于箱体外面。清晰显示各参数值,不需要开启培养箱即可查看设置参数及运行状态。节省操作时间并且减少了由于开启箱门造成的热损失和CO2 消耗。* 远程控制器跟摇床通过电缆线连接 WIGGENS 的远程控制器是采用一个很薄的线缆连接到振荡摇床上,线缆通过密封的玻璃门,即使您的培养箱内没有电源接口也可以使用。 远程控制器还可以通过磁铁,或挂钩固定在箱体外侧壁,或直接放置在箱体顶部维根斯(WIGGENS)CO2培养箱专用振荡器技术参数:型号WOS-101SRC WOS-101MRC 控制方式微电脑控制,LED 数显,远程控制器驱动方式磁力驱动振荡模式圆周振荡转速(rpm) 30 ~ 300 精度(rpm) ±1 振幅(mm) 22 定时范围连续或者47h 59min 定时增长1min 外形尺寸(W x Lx H mm) / 重量(Kg) 305 x 350 x 75/7.5 465 x 540 x 125/35 平板尺寸(W x Lx H mm) 300 x 330 460 x 455 控制器尺寸(W x Lx H mm) / 重量(Kg) 190 x 50 x 140 / 2 电源220V 50/60HZ 承载量100mL x 16 250mL x 9 500mL x 5 1000mL x 4 2000mL x 1 100mL x 36 250mL x 23 500mL x 16 1000mL x 9 2000mL x 4 订货号189321-02 189322-02维根斯(WIGGENS)CO2培养箱专用振荡器其他可选型号WIGGENS WCI-40 CO2培养箱详细说明* 维根斯(WIGGENS)CO2培养箱可根据客户要求选配包括氧气控制,紫外灭菌等诸多配件,用来满足客户生物培养的最苛刻要求* 六面箱体侧部加热,顶置循环风扇保证了维根斯(WIGGENS)CO2培养箱卓越的空气对流和温场均匀性,同时也避免了使用过程中的液体冷凝问题* 空气夹套的设计,使得WIGGENS二氧化碳培养箱能够保证温度的快速恢复,有效的减少热损失,也不需要定期维护* WIGGENS便携式MINI CO2培养箱在箱体内部设置有双光束CO2传感器,水盘加湿,同时设有报警系统和温度上限设置,保证了生物培养过程中出现异常现象时的迅速响应以及及时处理* 维根斯便携式二氧化碳培养箱使用PID控制系统,自动控制 CO2浓度、温度和报警。WIGGENS WCI-40 CO2培养箱技术参数型号WCI-40WCI-180WCI-850箱体体积(L)42179850温度(℃)范围室温+5~60精度±0.1℃(37"C)分辨率0.1"C控制数字PIDCO2范围0% ~ 20%精度±0.1% (at 5% at 37℃)分辨率0.1%传感器双光束红外CO2传感器控制微电脑控制内部压力范围0.5~0.6bar0.6~' 0.7bar0.9~1.0bar显示LED显示,双显示屏操作面板独立的双通道按键夹套类型气套式(六面梯度加热设计)腔体材料不锈钢(304)隔板数(标准/最大)2/43/83/15内部尺寸(WxDxH)mm320x350x370473x528x710698x799x1528外部尺寸(WxDxH)mm408x482x550560x665x945820x950x1840重量(kg)3578266订货号189121189122189123维根斯恒温培养箱详细说明* 维根斯(WIGGENS)恒温培养箱采用硅胶密封垫和玻璃门的搭配,保证了操作者在无污染状态下观察培养过程* 不锈钢喷涂聚酯内胆及隔板,保证了维根斯(WIGGENS)恒温培养箱箱体内通气性好,清理方便,高低可调* 独特的Bias补正功能,使得WIGGENS恒温培养箱可以在温度发生偏差时及时补正,操作便宜* WIGGENS恒温培养箱有定时功能,可以根据实验计划,设置培养时长,节省人工成本维根斯恒温培养箱技术参数产品型号WH-05WH-15WH-25有效容积 L5070140温度范围 ℃室温+5~ 80温度精确度(ATC 校准) ℃±0.1温度稳定性 ℃ (37℃ )±0.1温度控制器薄膜式按键,数显 PID 自动调节材质内胆: 不锈钢喷涂聚酯(亮白)外壳: 优质冷轧钢板静电喷涂搁板: 不锈钢丝喷涂聚酯(亮白)保温材料: 不可燃聚苯乙烯(EPS )玻内门: 耐高温安全玻璃(5mm)定时器定时开机,定时关机,定时报警(1 分~99 时 59 分)加热功率W450电源AC 220~240 V,50/60 Hz隔板数量(标准/ 最大)2/32/42/5箱内尺寸(WxDxH) mm400 x 400 x 320400 x 400 x 400550 x550 x 460外形尺寸(WxDxH) mm510 x 535 x 698550 x 535 x 778660 x 690 x 858可选配置RS232/RS485 通讯接口及软件,温度编程控制,测试孔订货号211622117221182创新点:1、低发热量采用电磁感应驱动技术,驱动力强大,但几乎不发热,几乎没有任何热量进入培养箱。保证了培养箱中的温度稳定性,是放在培养箱或者其他箱体里细胞培养的理想选择2、防水蒸汽设计WIGGENS WOS-101SRC CO2 培养箱专用振荡器
  • 深圳赛泰克隆重推出cellgro培养基
    cellgro为世界培养基品牌,由Mediatech公司生产。Mediatech公司总部位于美国弗吉尼亚州的赫恩登,拥有符合美国FDA(21 CFR,820)cGMP标准的生产厂房。公司创建于1984年,是一家集研发、生产、销售、技术服务为一身的生物技术公司。旗下的cellgro品牌产品遍及全球,产品种类齐全,产品质量处于行业领先地位,已被广泛应用于各大院校、科研机构、医药及生物技术企业。   Mediatech公司的经营理念是不仅要为客户提供优质的产品,而且要将产品质量作为对客户的一种承诺。多年来,公司始终坚持不懈的致力于创新和改进生产工艺及操作流程的标准化。Mediatech公司是全球率先通过ISO13485:2003认证的细胞培养液制造商之一。
  • 细胞培养的步骤和注意事项
    1、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。将融化的细胞移入离心管中,加入37℃预热的DMEM完全培养基中(其中胎牛血清约为10%),轻轻吹匀,离心,500g离心2min,弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,制成细胞悬液,接种于培养皿/瓶中,在含5% CO2的细胞培养箱中培养。BIOCEN系列离心机WA系列恒温水浴 2、细胞传代当细胞密度达到80%~90%(过早产量不足,过晚细胞状态不佳,1:2至1:10以上的比率传代培养,一般1:3至1:5细胞一代,即从细胞接种到分离再培养的一段时间,非细胞有丝分裂次数)时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度)进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。加入适量DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,吸取10微升进行计数,然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。WCI系列二氧化碳培养箱二氧化碳培养箱专用摇床超高产率微型细胞工厂高密度培养专用摇瓶 3、细胞冻存当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。加入DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入lml冻存液(90%胎牛血清,10%DMSO。 一般来讲血清含量可以在10%-90%之间调整,冻存液中加入血清一方面可以为细胞提供营养,另一方面可以在细胞冻存过程中提供非渗透性保护物质,如蔗糖,白蛋白等从而更好地保护细胞),放入冻存管内(管内有异丙醇,以保证温度降低的速度),立即放入4℃冰箱中冻存30min,然后放入-20℃冰箱中冻存30min,再置于-80℃冰箱内过夜。第二天放入液氮中,可以保存至少两年,如不放人液氮,可以保存三个月。 细胞冻存和复苏的原则是:慢冻速融,这样更加有利于保持细胞的活力。冻存细胞不加任何保护剂,会导致细胞内冰晶的产生,从而使细胞产生内源性的机械损伤,引起细胞内环境渗透压,PH,电解质等的改变,进而促使细胞死亡。WIGGENS液氮罐系列冻存管冻存支架4、注意事项(1)预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热;(2)用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手;(3)正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且减少污染;(4)点燃酒精灯:注意火焰不能太小;(5)严格的无菌操作;(6)贴壁细胞消化适度:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化;(7)传代细胞所有的操作尽量靠近酒精灯火焰。每次最好只进行一种细胞的操作,每种细胞使用一套器材。避免交叉感染;(8)传代细胞瓶口每次打开或者关闭都需要在酒精灯上消毒。悬浮细胞培养瓶贴壁细胞微载体培养瓶贴壁细胞滚瓶培养
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