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核酸提取仪有两种分类分类方式,一种是按用途进行分类,另一种是按照应用试剂的不同进行分类。(1)按照用途分类:一类是自动液体工作站,自动液体工作站是功能非常强大的设备,液体分液、吸液等自动完成,甚至可以整合扩展、检测等仪器设备,实现标本提取、扩增、检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用,不太适合常规实验室提取核酸,一般都应用在单一类标本并且一次提取标本量非常大(至少96个,一般几百个)的实验需求上。自动工作站的平台建立及平台的运作,需要比较大的资金。另一类是小型的自动化仪器,小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊设计来达到自动提取核酸的目的,可以在任何实验室得到应用,最近几年有很多机型陆续投放市场。(2)根据应用的试剂不同分类:一类是应用磁珠法试剂的仪器,另一类是应用离心柱法试剂的仪器。应用磁珠法的自动核酸提取仪操作简便,容易自动化,是目前市场上的主流,如QAGEN、Lab-Aid 820等仪器。与传统的手工操作相比核酸提取仪的优势:核酸提取仪一般具有以下的特点:(1) 无交叉污染:仪器部件未接触到生物学样本;(2) 自动化系统:每次提取工作,操作者只需要做好安装工作,布置好孔板(提供提取所需要的试剂).提取整个过程都不需要人为的帮助,仪器自动完成;(3)提取控制:在提取过程中,如果操作者需要,该系统允许您对提取过程进行控制。
核酸提取(核酸的分离与纯化)主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开,但在分离核酸时,应保证核酸分子一级结构的完整性,并排除其他分子污染。核酸提取方法一般包括细胞裂解、酶处理、核酸与其他生物大分子物质分离、核酸纯化等几个主要步骤,而每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。操作过程中首先通过物理、化学或酶解作用裂解细胞,使核酸释放出来,并去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂肪类等生物大分子的过程。在此基础上,沉淀核酸、去除盐类和有机试剂等杂质,从而得到纯化的核酸。核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。在传统的手工核酸提取过程中通常采用离心澄清的方法,操作时费时费力。近年来,出现了磁珠分离技术,利用磁珠在一定条件下对核酸具有很强亲和力的特点,吸附核酸。当条件改变时,磁珠又可以与其吸附的核酸分离,从而得到纯化的核酸。这种方法简便、高效、易于操作,是目前核酸提取仪采用的主要方法。具体来说,磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞,从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后,再在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。磁珠法不需要离心、不需要加入多种试剂,操作简单,符合核酸自动化提取要求,是未来核酸纯化方法发展的一个重要方向。
单位计划采购自动核酸提取仪,听几个进口厂家推介了,得出来的观点相悖,特求助高人指点一二。到底是滤膜法好还是磁珠法好?是否为真正的全自动怎样去区分?高通量与否怎样鉴定?