液相色谱室设计

我单位要建立一个高效液相色谱实验室，由于没有招标的资金，所以自己设计。请问，建立高效液相色谱实验室应考虑哪些方面的问题？如何解决？[em07]

求：液相色谱仪高压输液泵设计方案或技术咨询 email: zhang_1900@126.com

[b]高效液相色谱系统适用性试验设计的变化趋势[/b][i]周晓源,李雪茹[/i]高效液相色谱法（HPLC 法）是药物分析中常用的一种定性、定量色谱分析方法。具有较强的专属性，相对较高的检测灵敏度和良好的量化功能。2005版《中国药典》使用 HPLC 法的品种中，色谱系统适用性试验设计有了较大的变化：指标更加细致、周到，检测更重实效，色谱系统适用性的试验用溶液的制备方法也呈现多样化，体现出一些变化趋势。 １． 色谱系统适用性试验的设计与实验目的更加匹配 系统适用性试验的严格细腻程度取决于实验目的。首先应考虑色谱系统被用于何种实验，根据实验目的来设计系统适用性试验。如果一个 HPLC 方法仅用于定性鉴别，就其色谱系统的适用性试验而言可以相对简单宽松，只要可以确保被测成分峰与其他色谱峰有一定的分离度，具有适宜的出峰时间即可达到实验目的。 如果用于定量分析（如含量测定），则除要保证被测成分峰具有适宜的出峰时间外，还需检验系统是否能够保证被测成分峰与其他色谱峰完全分离，分离度一般应在1.5以上，同时还应测试被测成分峰峰面积的重复性是否良好，对照品溶液连续进样5针的峰面积相对标准偏差应不大于２％，被测成分峰的峰型也应基本对称，以保证分离效果和测量精度。对于小峰（如占总面积10％以下的色谱峰）峰面积的定量，或用峰高法定量时，就应对拖尾因子或对称因子加以严格的规定，一般来说，拖尾因子应在 0.95～1.05之间，因为峰的对称性对测量结果影响较大。 如果检查某种药品的有关物质，且还需要分别检查单个杂质和杂质总量，那么系统适用性试验还应有一个重点，就是要有常见杂质难分离物质对分离度的测定指标。此外系统的检测灵敏度试验也就相对比较重要。如盐酸二甲双胍的有关物质检查项下要求： 盐酸二甲双胍与双氰胺的分离度应大于1.5，检测灵敏度要求调节双氰胺峰高为满量程的10％。 如 果色谱系统是一个梯度洗脱系统，有时一个难分离物质对分离度的测试也不能完全达到实验目的。如果在梯度变化的前后均有需要检测的杂质，分离度的测定指标一般应根据需要在梯度变化之前和之后都可加以制订。在梯度洗脱系统中某个成分峰的保留时间也经常用来做系统适用性检测的指标，给出吐峰时间范围，如头孢地尼，主成分头孢地尼峰的保留时间要求22分钟，Ｅ-异构体峰保留时间约为33分钟，理论板数按头孢地尼峰计算应不低于 7000。 在2000年版《中国药典》中，有些标准色谱系统适用性试验的要求就与其色谱系统的实验目的不完全匹配。如有些品种含量测定与有关物质共用一套色谱系统，且有关物质还需要分别检查单个杂质和杂质总量，但系统适用性试验指标仅有一个理论板数的要求，或对分离度的设计为“被测成分峰与相邻杂质峰间的分离度应符合规定”这样一个对系统性能缓冲空间很大的一个指标要求。在2005年版《中国药典》中，这种实属很虚的指标开始减少。如2000年版头孢曲松反式异构体（光降解产物）峰的保留时间应为头孢曲松峰保留时间的1.3倍，两峰之间的分离度应不小于3.0，理论板数按头孢曲松峰计算应不低于1500，2005年版修订为头孢曲松峰和头孢曲松反式异构体峰间的分离度应不小于6.0。２.系统适用性试验用溶液的制备更加注重方便性、实用性和可操作性系统适用性试验用溶液的配制方法，最简单的莫过于用主成分对照品与杂质对照品混合配制，但有些杂质对照品不能得到，如性质不稳定或与主成分理化性质太接近，分离提取技术要求太高，成本太大等，但这些杂质峰恰恰又是与主成分峰最难分离的色谱峰，且较常存在于 药 品中需要检查的，在2005年版《中国药典》中，这一问题得到了较好的解决。如喹诺酮类药物中较常出现光降解产物，而此光降解产物是引起这类药物不良反应的主要因素，所以需要在有关物质检查中做为重点检测的杂质之一。 因 此 ，在2005年 版 《 中 国 药 典 》中，这些药物系统适用性试验用溶液的制备就通 过把对照 品溶液进行 光 照 处理，得到能产生明显光降解产物色谱峰的溶液。 3.实验过程、操作步骤趋于严谨规范 色谱系统适用性试验设计、规定的完备、灵敏度检测试验的规范，溶剂的选择、溶解制备方式等各方面均体现出对实验目的的理解更加明确，对实验细节考虑更加严谨周到，标准的书写格式均更 加规范 、统 一 ，如2005年 版《中 国 药典》收载的 β-内酰胺类抗生素中检查高分子聚合物的品种将原来收载的8个品种的色谱条件与系统适用性试验均修订与新增 13个品种项下书写格式相同，系统适用性试验统一为理论板数以蓝色葡聚糖2000峰计算均不低于……。拖尾因子均应小于2.0，在两种流动相系统中蓝色葡聚糖 2000峰保留时间比值均应在0.93～1.07之间，对照品溶液主峰与供试品溶液中聚合物峰与相应色谱系统中蓝色葡聚糖 2000峰保留时间的比值均应在0.93～1.07之间。

液相色谱图的优化 我刚刚开始用液相色谱，用的是lc1200 怎样进行报告的设计、数据采集、数据分析、校正表的设计、谱图优化，先谢谢各位前辈了！！！

液相色谱仪的应用 现在液相色谱仪的应用很多、很广，液相能检测有机物的70%以上的物质，检测的项目很多。现在国家规定越来越严，尤其是在食品行业，药品行业，饲料行业，水质，土壤等，这样也是促进液相色谱仪发展的一个机会。在科研、医疗、医药、教学上用的也越来越多。在农业、石油、石化、炼钢、水利、商检、法检、环境、大气、卫生等很多行业都有很大的发展和需求。 市场需求大是液相色谱发展的动力，市场要求高是液相色谱发展的立足点。液相色谱能承受高压，能采用梯度洗脱，能很好的分离化合物，具有多种检测器，能满足各种化合物的检测，有着种类繁多的色谱柱，能满足不同需求及要求。 液相色谱还有一个很大的特点就是现在很多仪器和行业为了达到某种功能，逐渐采用了联用技术。比如液相色谱和原子吸收、原子荧光联用，叫形态分析。液相色谱与ICP联用，与质谱联用等。在很多像制备、纯化技术也在不同程度的采用了液相分离、检测技术。随着微量液相色谱，超高压、超高效液相色谱，手性液相色谱，亲和液相色谱，手性液相色谱，毛细管液相色谱等的发展，相信液相涉及的技术和市场领域还会越来越广，前景还会更好。当然像离子、凝胶色谱这几大类色谱也属与液相色谱范围，这样液相色谱的领域和覆盖面就相当广了吧。 所以液相色谱的市场很大、很好，前景一片光明。

当前液相色谱仪器厂商推出的高效液相色谱仪和超高效液相色谱仪，从仪器的外观设计、相关仪器组件的配置、仪器使用功能的扩展等方面来看，都反映了近年来各个厂商在仪器的设计，硬件配备、软件开发等方面取得的重要进展。 [b]1、高效液相色谱仪器的发展方向[/b] 主要是高端的用于科研的通用型仪器和应用于常规分析的专用型高效液相色谱仪。 高端科研通用型仪器 这部分仪器主要以Agilent、Waters、Dionex、ThermoFishier等国外知名厂家为主，国内的厂商上海通微生产的trisepTM2100PCECsystem【加压毛细管色谱（PCEC）、微径液相色谱（UHPLC）和毛细管电泳（CE）三合一仪器】，在国外有一定的销售量。 常规分析的专用型高效液相色谱仪 占有高端市场的国外产品的厂商，近年也针对中国市场现状，以及常规分析专用型高效液相色谱仪市场，生产了适用于常规分析、造价低的专用型高效液相色谱仪. 国内的液相色谱厂商在这个市场上的优势是多种型号、价格适当的高效液相色谱仪。在此类仪器中，备受关注的仪器有： 依利特P1201型高效液相色谱仪、福立FL-2200-2型高校液相色谱仪、伍丰LC-100型智能全控高效液相色谱仪、东西LC5510型高效液相色谱仪在仪器外观设计上有重大改进，已经与国外仪器相近。 依利特公司和通微公司都是生产了激光诱导荧光检测器。 优联公司生产的UC-3281型超小型输液泵、UC-2191型超小型UVD可组成UC3231型超小型高效液相色谱仪，在国内首次出现，是很有发展前景的新型仪器。 [b]2、超高效液相色谱仪的发展[/b] 自从2004年Waters公司推出了ACQUITYUPLC后，Agilent、Dionex、CVC、Jasco等公司都先后推出了各自的超高效液相色谱仪，都在力争实现快速、超高效的液相色谱分析的理想结果。 虽然各个厂家采用的科技路线有所不同，但在超高效液相色谱柱的研制上却有共同的特点，即采用了粒度在1.7-2.2um的微粒固定相和小内径（1~2mm）的色谱柱，这也是他们获得高柱效的根本原因。 [b]超高效液相色谱技术的实现，主要是依靠以下几个方面的进步： [/b][color=#d40a00] （1）小颗粒、高性能微粒固定相的出现； [/color][color=#d40a00] （2）超高压输液泵的使用； [/color][color=#d40a00] （3）高速采样速度的灵敏检测器； [/color][color=#d40a00] （4）使用低扩散、低交叉污染自动进样器，配备了针内进样探头和压力辅助进样技术； [/color][color=#d40a00] （5）仪器整体系统优化设计：色谱工作站配备了多种软件平台，实现超高效由于液相分析方法与高校液相分析方法的自动转换。 [/color] 超高效液相色谱仪由于具有高速、高效分析性能，在国外已经大力推广使用，在国内至今还未引起足够的重视，并且由于国内制造技术的限制，至今仍无国内厂商开展超高效液相色谱仪的研制。

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跟大家分享一本书《高效液相色谱方法及应用》第二版，感兴趣的版友可以下载附件查阅，也欢迎补充。全书的目录如下：作 者： 于世林出 版 社： 化学工业出版社 本社特价书所属丛书： 色谱技术丛书 册 数： 条 形 码： 9787502569068 ; 978-7-5025-6906-8I S B N ： 7502569065 出版时间： 2005-6-1开 本： 小16开 页 数： 333定 价： 39 元第一章 绪论第一节 高效液相色谱法的特点一、与经典液相(柱)色谱法比较二、与气相色谱法比较三、高效液相色谱法的优点四、高效液相色谱方法发展简介第二节 高效液相色谱法的分类一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类二、按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程分类第三节 高效液相色谱法的应用范围和局限性一、应用范围二、方法的局限性参考文献第二章 高效液相色谱仪简介第一节 流动相及储液罐一、储液罐二、流动相脱气第二节 高压输液泵及梯度洗脱装置一、高压输液泵二、输液系统的辅助设备三、梯度洗脱装置第三节 进样装置一、停流进样装置二、六通阀进样装置三、自动进样器第四节 色谱柱一、柱材料及规格二、柱填料三、保护柱四、柱连接方式五、柱温控制第五节 检测器一、检测器的分类和响应特性二、紫外吸收检测器三、折光指数检测器四、电导检测器五、荧光检测器六、蒸发光散射检测器第六节 色谱数据处理装置一、微处理机二、色谱工作站参考文献第三章 液固色谱法和液液色谱法第一节 分离原理一、吸附系数二、分配系数第二节 固定相一、液固色谱固定相二、液液色谱固定相第三节 流动相一、表征溶剂特性的重要参数二、液固和液液色谱的流动相第四节 二元溶剂体系中液固和液液色谱的保留规律一、溶质保留值的基本方程式二、液固色谱的保留值方程式三、液液色谱的保留值方程式参考文献第四章 键合相色谱法第一节 分离原理一、正相键合相色谱法的分离原理二、反相键合相色谱法的分离原理第二节 固定相一、键合固定相的制备及分类二、键合固定相的性质三、使用键合固定相应注意的问题第三节 流动相一、溶剂的选择性分组二、在键合相色谱中选择流动相的一般原则三、改善色谱分离选择性的方法四、多元混合溶剂的多重选择性五、溶质保留值随溶剂极性变化的一般保留规律六、用线性溶剂化自由能关系（LSER）来表征反相液相色谱中溶质的保留值方程式第四节 新型高效液相色谱的固定相和流动相一、新型高效化学键合固定相二、化学键合固定相分类方法简介三、整体色谱柱四、超热水流动相第五节 离子对色谱法一、分离原理二、固定相、流动相和对（反）离子三、影响离子对色谱分离选择性的因素参考文献第五章 梯度洗脱第一节 基本原理一、等度洗脱二、梯度洗脱第二节 影响梯度洗脱的各种因素一、梯度洗脱时间(tG)对分离的影响二、强洗脱溶剂组分B浓度变化范围的影响三、梯度陡度对保留值的影响四、柱温变化对保留值的影响五、梯度洗脱程序曲线形状的影响六、影响梯度洗脱的其他变量第三节 优化梯度洗脱的方法一、建立梯度洗脱方法的一般步骤二、梯度洗脱中的实验条件第四节 梯度洗脱的图示方法一、二元溶剂梯度洗脱二、三元溶剂梯度洗脱三、四元溶剂梯度洗脱四、用极坐标和球面坐标描述梯度洗脱参考文献第六章 体积排阻色谱法第一节 分离原理一、分布系数二、体积排阻色谱法的特点第二节 固定相一、固定相的分类二、凝胶固定相的特性参数三、凝胶色谱柱的制备及谱图特点第三节 流动相一、凝胶渗透色谱的流动相二、凝胶过滤色谱的流动相第四节 凝胶渗透色谱法测定聚合物分子量分布一、聚合物分子量、分子量分布及测定的意义二、凝胶渗透色谱图的解析及数据处理参考文献第七章 高效液相色谱法的基本理论第一节 表征液相色谱柱填充性能的重要参数一、总孔率二、柱压力降三、柱渗透率第二节 高效液相色谱的速率理论一、影响色谱峰形扩展的各种因素二、范第姆特方程式的表达及图示第三节 诺克斯方程式一、描述色谱柱性能的折合参数二、诺克斯方程式第四节 色谱柱操作参数的优化一、三个柱操作参数的表达式二、HPLC中实用柱操作参数的优化三、柱操作参数优化的图示表达方法第五节 “无限直径”效应和柱外效应一、“无限直径”效应二、柱外效应第六节 超高效液相色谱一、超高效液相色谱的理论基础二、实现超高效液相色谱的必要条件三、超高效液相色谱的应用参考文献第八章 高效液相色谱分离条件的优化第一节 高效液相色谱中色谱参数的相关性一、色谱参数的分类二、色谱参数的相关性第二节 色谱分离条件优化标准的选择一、难分离物质对的峰对分离优化标准二、整体色谱图的优化标准第三节 色谱响应函数和色谱优化函数一、Morgan和Deming提出的色谱响应函数二、Watson和Carr提出的色谱响应函数三、Glajch和Kirkland提出的色谱优化函数四、Berridge提出的色谱响应函数第四节 色谱分离条件的优化方法一、单纯形法二、窗图法三、混合液设计实验法四、重叠分离度图法五、等强度洗脱和梯度洗脱的优化图示法第五节 优化HPLC分离的计算机辅助方法一、实验设计系统二、人工智能系统第六节 高效液相色谱专家系统简介一、专家系统的组成二、专家系统的使用方法参考文献第九章 微柱液相色谱法第一节 方法简介一、微型柱的分类二、微柱液相色谱法的优点和缺点第二节 基本理论一、柱外效应二、管壁效应三、稀释效应四、分离阻抗第三节 仪器装置一、输液泵系统二、进样系统三、柱系统四、检测器系统五、连接管和接头第四节 微柱的制备一、评价微柱性能的重要参数二、影响微柱分离效率的相关参数三、微柱的制备方法第五节 微柱液相色谱的新技术一、纳米液相色谱技术二、超高压液相色谱技术参考文献第十章 二维高效液相色谱法第一节 描述分离体系效能的参数一、峰容量二、信息量第二节 二维高效液相色谱的技术功能一、切割功能二、反冲洗脱功能三、痕量组分的富集功能第三节 二维高效液相色谱的流路系统一、多通路切换阀二、二维高效液相色谱的流路系统第四节 二维高效液相色谱在蛋白质组学研究中的应用参考文献第十一章 建立高效液相色谱分析方法的一般步骤和实验技术第一节 样品的性质及柱分离模式的选择一、样品的溶解度二、样品的分子量范围三、样品的分子结构和分析特性第二节 分离操作条件的选择一、容量因子和死时间的测量二、色谱柱操作参数的选择三、样品组分保留值和容量因子的选择四、相邻组分的选择性系数和分离度的选择第三节 高效液相色谱法的实验技术一、溶剂的纯化技术二、色谱柱的装填技术三、色谱柱的平衡、保护与清洗、再生技术四、梯度洗脱技术五、色谱柱前和柱后的衍生化技术六、样品的预处理技术参考文献符号表

液相色谱仪的那些事中文名称：液相色谱仪英文名称：liquid chromatograph ,简称LC定义：用液相色谱法对物质进行定性、定量分析的仪器。 利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。简介液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC）及液-固色谱(LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。对高沸点、难气化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。应用于生物化学、生物医学、环境化学、石油化工等部门。工作原理系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要

刚进入实验室仪器岗，涉及到高效液相色谱，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]，色素山梨酸苯甲酸糖精钠 富马酸二甲酯 安赛蜜一些项目的测定，可是本人基础知识很薄弱，需要看一些什么资料来弥补弥补，求大家给建议！

制备型加压液相色谱，按照色谱柱和样品量的大小，分为：（1）低压液相色谱；（2）中压液相色谱；（3）高压液相色谱；（4）快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠，没有统一、明确的标准。1快速色谱柱压通常为2bar（或30psi）左右，对于那些容易分离的简单混合物，由于快速色谱具有操作简便、经济等优点，常常是实验室的首选。但快速色谱不同于一般的层析分离，这种分离没有压力，而快速分离通常使用瓶装氮气加压，使流动相具有一定的流速，从而缩短了分离时间。Still等人率先于1978年详细研究了快速色谱，并于1981年获得了专利保护(美国专利4，293，422)。快速色谱使用的柱子一般是玻璃柱，柱直径为3～10cm．长度为7～15cm。快速色谱中使用最广泛的固定相为硅胶。采用的粒径通常为：25～40μm，40～63μm或63～200μm的球形固定相。其它如键合相、氧化铝、聚酰胺吸附剂也常用作快速色谱的固定相使用。2低压色谱（LPLC）柱压一般低于5bar（或75psi）。低压色谱一般是由蠕动泵、进样阀和检测器组成，可以连续化，实现自动的梯度淋洗和馏分收集等操作。色谱柱管一般是玻璃或聚合物材料的，长度一般为240-440mm，内径为10-40mm。对于大多数在紫外区有吸收的物质，光学检测器很常用。填料一般使用软质的葡聚糖、琼脂糖、纤维素、合成高聚物或离子交换剂，粒径一般为40-60μm。3中压液相色谱（MPLC）柱压在5-20bar（或75-300psi）之间，广泛用于实验室和工业规模的生物制品(如动物脏器提取液、浓缩液、体液、植物提取液、生物技术发酵液等--往往需要经过滤膜作初级净化)的处理，以提取或纯化所需的产品。中压液相制备色谱的主要部件为输液泵、进样阀、检测器、馏分收集器等，比如瑞士公司的早期的中压液相制备色谱，其输液泵最大流速可达156mL/min，并配有阻尼器，以保证液流的稳定；进样器配有0.5-50mL的不同体积的定量管；检测器有紫外和示差折光检测器，流通池体积比较大，允许大流量流动相通过而无需分流；馏分收集器有原盘式和排式两种，原盘式的接收管最多达80个，而后者则更多；色谱柱内径9-105mm，长度250-1760mm不等。对于一般中压制备色谱，当色谱柱直径较大时，柱头往往设计成锥形或有类似于伞状的液流导向结构，使得当大量样品进入到柱头上时，能迅速地分散到整个柱横截面上，及时被流动相冲走，避免了因样品的局部过浓而引起柱超负荷和谱带加宽。柱子填料则采用比较耐压的交联改性的多糖凝胶(如Sepharose CL，Superose等)，聚合物微球，复合材料介质或硬质SiO2基体的化学键合相等，粒径一般在25～40μm（最常用的填料尺寸是15-25μm，25-40μm或40-63μm），可采用湿法或干法装柱。4高压液相色谱(HPLC)是指柱压一般大于20bar（或300psi）的“高压(或高效)液相色谱”，通常指所用色谱柱的塔板数大于2000，一般是在2，000～20，000的范围之间。当需要从大量的物质中分离纯化不足1％的所需成分时，分离工作将会十分困难，往往在纯化的最后阶段需要使用10μm或更小颗粒的高效填料。为获得所需微量组分，可采用如下分离手段：制备型分离→半制备型分离→分析型分离→产物。为提高每次分离获得纯品的数量，制备型高压液相色谱分离通常在超载情况下运行。高压液相色谱，即目前常用的高效液相色谱。色谱柱内填装的是粒度范围较窄的微小颗粒固定相(3～30μm)，为使流动相流出，需采用较高的压力，同时系统的复杂性及成本亦增大，但分辨率可得到较大的提高。而填装较大颗粒的固定相时，如中压液相色谱系统，装柱较容易，柱的通透性较高(只需较低的泵压力)，可采用更大的色谱柱和更经济的仪器，由此分辨率也较低。5用分析型高压液相色谱进行制备型分离当所需纯化合物的量很少时(微克级至几毫克)，可用分析型色谱柱进行多次分离。效果和利用大直径色谱柱进行一次性分离相同。采用小直径色谱柱时，可利用已有的分析型仪器，而无需在色谱柱、填料及附件方面投入更大资金；另外，还可在很大程度上避免由于放大所产生的问题，使分离速度加快。小直径色谱柱的尺寸一般为250×4.6mm，通常装有反相填料，每次可进样5～100ug，通过多次进样分离，可获得足够的纯品。例如，Suzuki等(1994)报道从豆科植物羽扇豆(Lupinus Hirsutus)中分离一羽扇豆生物碱糖苷时，其最后的分离步骤采用LiChrosorb Si60，5μm，250×4.6mm色谱柱进行高压液相色谱分离，洗脱剂为含25％甲醇的yi醚溶液－5％氨水50:1。经常需用分析型色谱柱进行分离的一个领域是对肽类化合物的纯化。生物活性肽的含量通常很低，用分析型高压液相色谱作为最后的纯化手段时，不会使色谱柱超载。为了提高分离效率，可将分析型高压液相色谱柱连接起来使用。此时可采用颗粒度在20～30μm的填料，以保持适当的通透性，尤其是当使用含水溶剂时。当使用己烷等有机溶剂时，由于流动相的粘度较低，可使用颗粒度为10μm的填料。然而由于分析型色谱系统无法提供大规模制备型分离所需的流速，其应用受到一定限制。（来源：分析测试百科网）

液相色谱与分光光度计测试的数据有没有可比性，液相色谱仪每天测样时都需要重新进标吗？

释放疲惫的身心——超高效液相色谱EX1700作者：朱志华在科技越来越发达的今天，人们似乎比任何时候都有着更强烈的追求美好生活的愿望，而频频爆出的食品药品安全问题不时给人们带来冲击。分析仪器的重要性从未有过如今这般受人重视。随着分析仪器在社会生活的各个领域日益普及，作为分析仪器家族一个重要成员——液相色谱仪也有了巨大的发展，从昔日的高端宠儿变身为实验室必备基础仪器。从上个世纪70年代高效液相色谱法正式建立以来，经过40多年的发展，高效液相色谱仪已经成为实验室最为常用的分离和检测仪器之一。广泛应用于化学化工、医药食品、环境监测、商品检验等各个领域。自从高效液相色谱诞生那一刻开始，高效和快速分析一直是色谱柱分析技术永恒不变的主题。研究出能够进行高速分离，同时又超快速分析的液相色谱仪是色谱工作者们长期努力的方向。根据经典的液相色谱理论，当色谱柱填料粒径接近或低于亚2μm水平时，不但能获得极高的柱效，而且柱效不会随流速或线速度的增大而减小。根据这一理论，超高效液相色谱诞生了。EX1700S-HPLC是伍丰公司10年液相色谱制造技术集中体现的核心产品，她集自动化、智能化、高可靠性于一身，与传统的高下液相色谱技术相比，效率更高，分离能力更强，结束了人们多年来人们不得不在速度和分离度之间不断取舍的历史。EX1700S-HPLC的出现，也将带领国产液相分析技术进入全新的时代。EX1700S-HPLC 由超高压恒流泵，超高压自动进样器，超高速紫外检测器，柱温箱以及相匹配的数字工作站组成。EX1700S-HPLC 超高压恒流泵采用新的输液技术，在0～5ml范围内实现60MPa的超高压输液能力，实现高分析速度和分离度的统一，与在其他平台上开发的方法兼容；采用双柱塞往复式并联泵设计，运行更稳定，无缝对接LC/UV，LC/MS应用相匹配的超快速梯度分离方法；采用流量补偿技术，提供实时流量监控优化技术，噪音降至最低，确保获得最高精度的保留时间特性；使用性能优异的进口宝石柱塞杆，密封垫寿命更长，延长了仪器正常运行时间。EX1700S-HPLC 配备自主研发生产的超高压自动进样器，采用计量泵和定量环双系统进行定量，可完成0.1～50μl可靠进样，在不更换定量环的情况下，保证大体积和小体积进样都有高度的重现性。EX1700S-HPLC 采用高精度电动进样阀，死体积更小，延迟时间更短，基本无记忆效应，可工作在60MPa系统下；使用超耐磨材料加工自主专利设计的切换阀阀芯部件，系统工作更稳定，使用寿命更长；具有超强的自我保护功能，尽可能降低由于操作不当造成的对仪器的损害；可自动识别托盘规格，自由使用2ml，4ml，10ml规格的样品托盘；采用取样针内外壁清洗方式，让样品的交叉污染无处遁形。为了保证EX1700S-HPLC和常规HPLC下都能达到优越的检测灵敏度，EX1700 S-HPLC采用带微流控制技术的最大光强卡套式流通池设计，最大限度的降低通过流通池的光强的损耗，使得光传输率几乎达到100%，使用普通氘灯就能满足[font=Times New Roman

新人请教大侠们，我找公司设计了一些12个碱基的单链DNA，打算和一些致癌物反应，但是我单独跑单链DNA液相色谱峰不明显，DNA有紫外吸收应该是有峰的吧？还是我的浓度太低了？我顶的是10OD的，用500微升去离子水配的溶液，差不多是6.6mg/mL吧？求解。刚做实验，各种不懂啊。。。

2013年10月23日晚, 第十五届北京分析测试学术报告会暨展览会（BCEIA 2013）招待会在北京新世纪日航饭店隆重举行，会上公布了此次“BCEIA金奖”最终获奖名单，其中，大连依利特分析仪器有限公司推出的新产品iChrom 5100 高效液相色谱仪，获得金奖。还记得RIGOL的 L-3000系列高效液相色谱系统获得“2011BCEIA 金奖”，这次又有一款液相色谱获奖，不知道大家对这个金奖知道多少？花絮：2012年10月，依利特公司推出了iChrom 5100高效液相色谱仪。该色谱仪外观经过精心设计，并加强了各部件的细节处理，如自动进样器采用托盘与进样针同时相对运动的工作模式，缩短了进样周期，且兼容120孔托盘、72孔托盘与96孔板;检测器采用电机直接驱动光栅方式，取代传统机械式正弦结构，以提高波长定位的准确性和重复性等，力求给客户带来更满意的使用效果。1、iChrom 5100 高效液相色谱仪是因为哪里的技术获得了金奖呢？2、你对它了解多少？3、你觉得它在国产液相中都有哪些创新性？

大家都知道液相色谱经常基线不平，漂移很大，那么竟什么原因能照成基线不平呢？ 大家详细列举一下，包括 色谱柱 检测器 泵等列举越多奖励越多大家回复要详细各个方面都要涉及到，可以重复，力求找到最详细的一个，给予奖励。

液相色谱正常情况下，色谱柱上到液相后用纯甲醇冲柱时压力很低，只有1是怎么回事

[align=center][b]浅谈超高效液相色谱柱和液相色谱柱的区别[/b][/align]从色谱柱填料的发展大趋势来讲，色谱柱填料一直是超更小粒径微粒的方向发展的，2004年超高效液相色谱应运而生。更小的粒径，意味着更高的泵压。在色谱柱的发展历程中，泵压、粒度、柱长、柱效这四个因素是相互制约的。随着技术的发展超高效液相色谱可以提供的泵压为140Mpa,而大多数液相色谱仪的最大压强仅为40Mpa。泵技术的突破为超高效液相色谱的产生奠定了基础。两者的区别如下：1、UPLC比HPLC有更好的分离度；我们不难理解填料粒径变小以后，分离度会变好。1.8um颗粒的分离度比5um颗粒提高了70%；2、UPLC比HPLC有更高的分析速度；常规的液相色谱通常在20分钟内完成分离，而超高效液相通常情况下5分钟内就可以完成分析；3、UPLC比HPLC有更高的灵敏度。分析过程中峰展宽变窄，峰高会更高，提升了色谱检测的灵敏度。单纯从色谱柱填料来讲，主要有三个方面的区别 1、Kromasil提供给超高效液相色谱柱的填料粒径为1.8um,普通色谱柱通常填料的粒径为5um。作为液相色谱来说，填料硅胶球的尺寸分布要求非常严格，填料的粒径越小，实际上对硅胶球的要求更高。所以超高效液相色谱柱的填料成本也是高于液相色谱柱的。2、超高效液相的柱压更高，要求填料的抗压性更强，这就要求在填料合成过程中要考虑抗压性的影响，无疑增加了合成难度。3、色谱柱的装填也更加严苛，超高效液相对装填工程师的要求也更高。超高效液相的柱管和柱塞板也是升级和优化过的。

国产液相色谱仪大全 大连依利特P1201 [IMG]http://www.instrument.com.cn/show/pic/C30915.jpg[/IMG]主要特点：● 计算机实时控制及状态反馈功能 通过新型的EC2006色谱数据处理工作站可以实现数据的双向传输，不仅可以通过工作站实时控制仪器，而且工作站还可以实时反馈、显示仪器各种状态信息。 ● 精确的流量补偿校正功能 不同的有机溶剂由于压缩系数的不同，在高压条件下，其流量与设定流量会有差异，通过流量补偿校正功能，可以精确控制流量，满足不同用户的需要。 ● 泵头在线清洗功能 定期清洗泵头，对于使用含有无机盐的流动相的高压恒流泵来说，是十分必要的，可以有效减少泵漏液的机率。P1201高压恒流泵所具有的泵头在线清洗功能让这种操作不再麻烦，只需按键，就可自动执行泵头清洗工作。 ● 自动光谱扫描功能 可帮助用户确定所测样品的最佳测定波长。 ● 波长时间程序设定功能 在同时分析多种化合物时，因为各种化合物的最佳检测波长不一定一致，若选择一特定波长检测，会损失部分样品的检测灵敏度。而使用波长时间程序，使不同的样品在其最佳检测波长处检测，可以有效提高各种化合物的检测灵敏度。 ● 全新的设计，时尚的外形 采用VFD高亮度真空荧光显示，美国高性能材料制成的仪器面板通过模具制造，不仅外形更加美观，而且耐各种溶剂的腐蚀让您的实验无后顾之忧。人性化的结构及按键设计，操作更加便利。 伍丰EX1600HP [IMG]http://www.kexiao.com/admin/UploadFiles/200834162417917.jpg[/IMG]主要特点：1、网络化，远程化控制和管理 2、智能化、人性化，实现人机对话 3、自动化，实现准无人操作 4、高精度、高稳定性 5、丰富的配置福立液相色谱仪FL2200 [IMG]http://www.chinasepu.com/products/UploadFiles_9305/200611/20061103083552678.jpg[/IMG] 主要特点：1.输液泵采用细分技术进行控制，具有恒流和恒压二种工作模式。 2.高压输液泵适用于等度系统和可编程流量控制及双泵对控梯度淋洗，只要两个同型号的泵加一个高压混合器即可实现二元高压梯度淋洗，不需要专用的带梯度控制的控制器或工作站。 3.实现智能化功能，如色谱文件设置及存贮（可存贮20个文件），设置参数菜单化、自动诊断、各种历史参数储存、操作使用提示等功能，显示界面全是中文，阅读十分方便。 4.采用流动相压缩率补偿技术，保证在梯度淋洗时，减少由于流动相组份变化而引起的混合液压缩率发生变化而造成的流量波动，保证流量更加稳定。 5.紫外检测器可实现可变波长调节和波长扫描功能，并且整套仪器符合GLP规范 6.检测器信号处理计算全数字化，以高精度的转换器为最终色谱信号输出，使仪器的线性范围为105。 7.检测器采用全息凹面光栅、双光束光路，波长调节使用步进电机，氘灯和光电池全部采用日本滨松公司的产品,氘灯寿命达2000小时。 8.仪器的显示器采用5英寸LCD屏，全中文信息显示，并可在屏幕上显示梯度淋洗运行图和色谱图，操作使用十分方便。 天美液相色谱仪LC2000 [IMG]http://www.instrument.com.cn/show/pic/C15150.jpg[/IMG]主要特点：键技术和部件从国际知名的厂商引进，按一流的质量标准和性能要求进行组合与生产，其主要性能达到了国际一流产品的水平。 LC2000液相色谱系统具有性能稳定、性价比高的特点，充分满足制药/化工等行业生产过程中的质量控制、科研院校/质量检验部门等领域的使用要求。 上海禾工 Vertex Sti 5000 [IMG]http://www.chem17.com/Products/member/images/633590553779777500.jpg[/IMG]主要特点：独特的柱塞杆自动清洗装置，使STI P5000系列高压输液泵不需要花钱购买在线清洗装置，也无须担心盐类晶体的析出对柱塞杆造成损伤； 专利设计的“浮动式泵柱塞杆密封圈”技术，可设定溶剂相应的压缩因子，泵头可以自动排空，无须手动排空即可输液；可延长密封圈使用寿命； STI P5000型输液泵使用的“自吸式单向阀”，是世界上最好的单向阀，阀球能在溶剂通过单向阀后回流之前回到阀座将之密封，保障了泵流量超常的稳定。 优秀的单向阀设计与先进的“浮动式泵柱塞杆密封圈”技术，使STI P5000输液泵在0-10ml/min的流量范围内都能耐压6000Psi，且压力波动远小于10Psi，成为国内外压力波动最小的泵之一。 输液泵拥有用户至关重要的两大功能 ①自动排空 ②自动清洗 杭州赛尔泰 syltech 500高效液相色谱仪 [IMG]http://www.instrument.com.cn/show/pic/C61469.jpg[/IMG]主要特点：具有波长自动校正功能，波长准确度和稳定性高。 多量程输出选择满足各浓度分析需求。 具有RS-232数字通讯功能，分析结果更准确。 软件与仪器的联控功能，直接鼠标点击，就可以完成各种检测。 样品和参比能量显示便于故障的判断和排查。 仪器内部安全报警与自动故障排查功能，维护方面快捷。 仪器通用性良好，应用范围广，适合医药食品化工环境及科研等各个领域。 德国原装进口氘灯和氘灯电源，使用寿命长，极其稳定安全可靠，无后顾之忧。 高亮度OLED显示屏，优越的美观可视效果，超高的质量稳定性。 可手动关/开氘灯，延长灯的使用寿命。 更换氘灯时，不必调整光轴，维护简便。 人性化、便携化的软件界面，操作便捷、快速，可根据用户要求进行定制。 普析通用L6 [IMG]http://www.instrument.com.cn/show/pic/C10801.jpg[/IMG]主要特点：1. 准：“准确是分析的灵魂”。先进的结构设计，精密的机械加工，为您展现出无可比拟的准确度和精密度；精密的流速确保了定量结果的准确性和分析结果的重现性。 2. 稳：卓越的稳定性和可靠性。泵头中心部件采用世界先进的数控加工中心定制，创新的结构设计实现了极小的压力波动。稳定的液流，超低的噪声，卓越的品质为您提供令人信赖的分析结果。 3. 强：功能强大的完全反控软件。图形式的中文界面，强大的数据处理和报告功能，智能化的诊断系统，向导式的仪器维护能够灵活应对您分析工作的任何要求。 4. 美：艺术感结合人性化。刀锋一般硬朗的个性体现给您全新的视觉享受，独特的实用性设计更能够使您的使用和维护得心应手，实现了美观与实用性的完美结合。 5. 廉：超高的性价比是您进行色谱分析的最佳选择。完善的应用平台为您提供培训和学习的机会，强大的应用专家队伍可以为您提供详尽的技术支持与完备的实验方案。 北京温分 LC98II [IMG]http://www.instrument.com.cn/show/pic/C20966.jpg[/IMG]主要特点：引进国外产品，选用关键部件；目的是生产一流产品。精于开发，注重细节，目的是超过国外产品。永争第一，迎接挑战；我们会做的更好。 北京东西电子 LC-5500　 [IMG]http://www.instrument.com.cn/show/pic/C10415.jpg[/IMG]主要特点：传统的液相色谱仪均采用积木式结构将进样阀、柱箱与检测器完全分离，不可避免地延长了连接管道，扩大了液体扩散效应，减低了分离效果. LC-5500独创一体化结构，将进样阀、恒温柱箱与可控波长紫外检测器集成一体，最大限度地缩短连接管道，获得优异的基线稳定性与高的分辨率能力，极低的检出极限，优异的光学设计，信号提高数倍，大大降低了信号噪声. 双柱塞泵达到了低脉冲水平,高精度的稳定输液保证了高分离性能和高灵敏度分析。 其他没有找到的还请大家补充！其实国内有这么多液相色谱生产厂家应是好事情，竞争多了，才会进步。现在国内厂家也开始注重售后服务了，其中上海禾工，赛尔泰的仪器都是免费保修三年，北京温分的仪器免费保修两年；可见现在国内厂家的竞争不仅体现在质量和价格上，售后服务上也开始下功夫了。

我是做本科毕业设计的，用茴香脑制备茴香醛。 产品分析用的是液相色谱，现在需要做一条原料的标准曲线，但是原料的出峰位置不固定，不仅不同浓度的原料溶液出峰位置不一样，相同浓度进针走样出峰位置也会变。还有一个问题是：峰很宽，跨度有2-3分钟。 溶质：茴香脑，溶剂：甲醇。 液相色谱流动相：水:甲醇:乙腈=5:3:2。 怀疑溶液和流动相发生了反应，所以配了另一瓶茴香脑甲醇溶液，加入了一定量乙腈，尝试用气相色谱分析，定性地看看出峰位置是否一样（因为气相色谱不能用水，所以只加入了乙腈），结果是出峰位置都在9-10分钟之间。 是否有高手能告诉我问题出在哪里，以及怎么解决？PS：液相色谱做其它分析都正常的，学姐在做的茴香醚制备茴香醛也没问题。

由于液相色谱版面问题较多，涉及分析面也较广。因此针对目前系统设定的“专家”职位。特用自己的积分征集有一定空余时间，具有一定高效液相色谱使用经验、在液相色谱版活跃的版友，作为专家。可以自荐或推荐。也可以在这里跟帖，由我推荐。一经审核通过，我就发积分。为期2个月。推荐提前结束！

[align=center][b]谈一谈对液相色谱及其柱子的看法[/b][/align]2010年，我来到单位上班，彼时的单位有一台液相和一台[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]，上班一个月以后，我被领导安排到省局技术中心去学习。学习液相色谱的感觉是什么呢？就是看两遍就八九不离十了，我曾经听别人说过，学习液相色谱对于一个外行来说，如果做的样品很单一，一天就差不多了。其实，液相色谱是一项好学难用的仪器。液相色谱的维护是需要相当的细致的。液相色谱涉及的领域很多，标准品、溶剂、色谱柱等诸多环节，每一个环节处理不好都有可能出问题。由于仪器复杂，所以保养不易，高压系统出故障的可能性也很大。液相色谱柱是液相色谱的核心，作为分离通道，非常重要！液相色谱柱的保养才是大学问，有的人使用色谱柱的时候不会保养或者不懂得保养，往往是使用几次以后就峰拖尾很厉害了。早些年我参加液相色谱的能力验证，那个时候能力验证允许的误差还是比较大的，所以色谱柱稍微有点问题，出现轻微的前伸或者拖尾的现象，能力验证还是可以通过的。随着形势的发展，能力验证的D值越来越小，要求越来越高。对色谱柱的要求也越来越高！所以我想借助本论坛，[b]向kromasil的专家提议，能否搞一个色谱柱保养的线上讲座，或者准备一些色谱柱保养的方法文件，以飨读者！色谱柱如果保养的好，是非常得心应手的！如果有系统性生物色谱柱保养手册是非常好的！各位做分析测试的老师也殊为不易，尤其是检测机构混岗很厉害，大家都是全能型选手，全能型选手的另一方面就是整体基础薄弱，很多只涉猎皮毛，这个就需要大家多学多问，我认为仪器信息网论坛的出现也是大家的福音，我们也希望kromasil论坛能够成为大家交流的通道。[/b]

[align=center][b]高效液相色谱在橡胶检测中的应用[/b][/align]高效液相色谱是一种高效能的分离手段,在橡胶原材料检测以及硫化橡胶中配合剂检测等方面应用广泛.高效液相色谱是一种常温分离分析方法,对于高温条件下易发生反应的硫化促进剂,防焦剂等的分析具有其独特的优势。一、 橡胶原材料的检测高效液相色谱可以对橡胶防老剂，促进剂进行定性定量的检测。现行的相关标准和方法中涉及诸多高效液相色谱定量检测方法，如防老剂RD有效含量的测定 (包含二聚体、三聚体以及四聚体的相对含量)，防老剂4020纯度的测定，防老剂4010NA纯度的测定，促进剂NS纯度的测定，促进剂CZ纯度的测定等。其中促进剂在高温条件下极易发生分解，因此对其进行检测一般采用可进行常温分析的高效液相色谱法。二、 硫化橡胶中配合剂的检测高效液相色谱法可以通过对硫化橡胶抽提液的分析，定性检测其中的配合剂。本实验室建立了多种相关的检测方法，如防老剂的定性检测，促进剂CZ和促进剂NS的定性检测，防焦剂的定性检测等。现行的橡胶防老剂、促进剂的定量检测方法，一般是采用面积归一的数据处理方法。这种方法在分析时具有明显的局限性，本实验室曾采用外标法处理实验数据，方法的精密度好，准确度高。

跟大家分享一下液相色谱讲义，里面包括（1）液相色谱基础知识（2）液相色谱的方法开发-分离机理及色谱柱（3）分离方法，离子抑制及离子对方法介绍（4）梯度方法的开发及梯度分离时的注意事项（5）液相色谱的实用技术，色谱柱的保养、样品前处理（6）液相色谱的定性、定量分析（7）色谱泵和进样器的原理及操作（8）检测器的原理及操作

国产精品液相色谱仪促销开始了！http://bimg.instrument.com.cn/show/NewsImags/Image/2009/8/2009081510273324207.jpg即日起至2009年10月31日，购买STI 5000液相色谱仪，即可获赠价值6100元的大礼！礼品包括：价值2600元的样品前处理设备一套（超声波、溶剂过滤器、真空泵、过滤膜、样品过滤器）同时我们将额外赠送您，时尚上网本、PH620酸度计、VERTEX C18 液相色谱柱中的一样。STI 5000高效液相色谱仪简介：VERTEX STI5000系列液相色谱系统是一款性价比非常高的液相色谱仪器，这款仪器的定位就是：可靠、实用、经济。从仪器的技术方面来看，其电子技术、零部件的加工工艺、内部机械结构、外形设计、工作站软件的功能，技术指标及其质量的稳定可靠性都已达到国内一流水平，有些性能指标甚至优于国外知名产品。STI5000系列液相色谱仪能根据用户需要扩展各种检测器，紫外、示差、荧光、蒸发光散射检测器等，可配置手动及自动进样系统。广泛地应用于化工原料分析，饲料企业、农药企业，大型生产企业中的生产过程控制等领域。如有需要请来电与我们联系！

紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器（UV），是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质，所以该检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器，几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。其检测灵敏度在mg/L至mg/L范围。可见光检测器 visible light detector 可见光检测器 visible light detector 又称分光光度检测器，是基于溶质分子吸收可见光的原理设计的检测器。能够直接采用可见光检测的溶质不是很多，而且多数灵敏度也不高，但采用具有高摩尔吸光系数的有机试剂（配位体和螯合剂）作为衍生化试剂进行柱前或柱后衍生操作的衍生化光度检测法是相当有用的，特别是在金属离子配合物液相色谱中的应用是相当成功的。蒸发光散射检测器克服常见的HPLC检测难题 虽然阵法光散射检测器(Evaportive light Scattering,ELSD)已经开发生产15年，但是对于许多色谱工作者来说，它仍是一个新产品。第一台ELSD是由澳大利亚的Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的，并在八十年代初转化为商品，八十年代以激光为光源的第二代ELSD面世。此后，通过不断设计提高了ELSD的操作性能。现在ELSD越来越多的作为通用型检测器]用于高效液相色谱，超临界色谱（SFC）和逆流色谱中。ELSD最大的优越性在于能检测不含发色团的化合物，如：碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性剂、药物，并在没有标准品和化合物结构参数未知的情况下检测未知化合物 。ELSD的通用检测方法消除了常见于传统HPLC检测方法中的难点，不同于紫外和荧光检测器，ELSD的响应不依赖与样品的光学特性，任何挥发性低于流动相的样品均能被检测，不受其官能团的影响。ELSD的响应值与样品的质量成正比，因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。示差检测器（RI）也可以说是一种通用型检测器，打它灵敏度低，并与梯度脱洗不相容。质谱是另一种通用型检测器，但它的昂贵操作费用和复杂性限制了它的应用。ELSD的独特检测方法，对于它的多种用途和高性能至为关键。ELSD检测只要分为三个步骤：（1）用惰性气体雾化脱洗液（2）流动相在加热管（漂移管）中蒸发（3）样品颗粒散射光后得到检测。

是针对纳升级、毛细管、窄径分离而设计的，目的在于获得最高效色谱分辨率、灵敏度及重现性。 直接纳升流速在常规纳升流纳升级液相色谱速分离技术的基础上又有了重大改进。用户将看到改进后的峰容量和峰形，每次分离后检测得到的组分数量增加。 纳升级液相色谱可高效分离各种多肽和蛋白质，与质谱联用后是蛋白组学研究的最佳工具，纳升液相色谱采用微流控制系统，可在20 nL/min 的流量水平下实现精确控制和梯度洗脱；微流控技术也极大地提高了质谱检测的灵敏度，可对更多的低丰度多肽进行分离和鉴定。 此外，纳升级液相色谱还可拓展应用至代谢靶分子、致病蛋白分子的鉴定，在纳升级稳定流量下质谱检测器可获得很好的灵敏度、分辨率和重现性。[color=#f10b00][size=6]说说你的认识、见解、或者使用经验吧？[/size][/color]