液相冲洗堵塞

液相C18柱堵塞，因为之前运行的样品含糖量较高，请问可以用异丙醇冲洗吗？谢谢~

机器拆下柱子和进样器，清洗过滤器后，用1ml的纯水清洗管路，压力一直为0；换10%的甲醇1ml/min，15分钟后压力上升至1.7兆帕，稳定，冲洗60分钟后，换成纯水，压力下降为1.5兆帕左右，过滤器再次堵塞。重新配置过滤10%的甲醇溶液，还是发生堵塞。请问如何排查？

我用的是安捷伦公司的进口色谱柱,液相色谱柱压力升高后(判断是堵塞拉前面的塞板),是否只有倒过来小流速冲洗才有可能恢复,那样我比较担心柱效会降低.限于技术水平,我自己又不可能把柱拆开处理,而安捷伦公司上海办事处不提供色谱柱技术服务,请问那里有这样的技术服务公司??

赛默飞液相，今年买的新机子，大概两个月前开始，每次开机执行冲洗程序时，机器会报错，自动停止冲洗，不知道哪里出了问题。冲洗阀工程师说大概逆时针拧半圈就行，记得以前打开冲洗阀冲洗时压力很小啊，今天用100%甲醇冲洗，1的流速，压力显示17bar，难道是哪里堵了？

岛津的高效液相色谱，进样口有液体往外流，在Inject状态下用注射器用流动相冲洗了一下，发现很顺畅，应该没堵，但还是漏液，应该怎么办？

仪器型号：Agilent 1260液相色谱配置：四元低压泵（内置在线脱气），自动进样器，进样器恒温器，柱温箱，DAD检测器故障描述：换流动相检测样品，打开排液阀排空气，开泵后泵不上液。维修过程：1、去掉泵上排液阀排废液管路，用注射器往外吸气，吸不动，液体不从梯度泵入泵内，疑为梯度后混合部分堵塞，导致流动相不能进入泵体；2、拧开泵主动阀上进样管路，用注射器抽气，吸不动，样品瓶内液体不往下流，正常情况下应该从管路滴出来；3、将滤头从流动相溶剂瓶中取出，自然垂下，溶液不流出；4、将脱气部分管路旋开，流动相从滤头处流出；5、用注射器抽2中管路，抽不动，依然堵塞；6、将脱气部分管路拧好，将滤头放入溶剂瓶，管路中有空气；7、用注射器网在入主动阀的管路中反复抽气打气，最终管路疏通。反思：流动相配置采用色谱甲醇、乙腈和分析纯的吡啶、乙酸，去离子水，过了4.5的滤膜，为什么堵塞了管路？是不是换用60℃温水冲洗管路也能解决问题呢？故障分析：之前学生用液相做实验，A管路是汗三氟乙酸的水溶液，4月7号做的实验，没有保存在甲醇中，4月17号继续做实验，没有更换流动相，将新配的流动相加在之前的容积凭着接着使用，应该也没啥问题。问题是不是出在我的流动相，我用的是甲醇、水、乙腈、乙酸、吡啶，因为氟化酸可以腐蚀二氧化硅，又是有机溶剂，所以虽然过了滤膜但是依然被氟化硅或其他有机盐堵塞。使用后的液相如果长时间不用，且为了避免交叉污染，4个管路应该是洗了之后保存在甲醇中的。发生了这次故障以后，更确定了以后必须得这么做。

前几天师兄用液相做了含咖啡因和茶碱的样品，到我做的时候柱压就升高了，经检查是柱子堵了，请问这个样品会造成柱子堵塞吗？还是长期使用造成的堵塞，因为我的柱子已经用了三、四年了。我该怎么冲洗柱子？

液相毛细管堵塞Aglient液相毛细管（不锈钢管，内径0.17mm），可能是缓冲盐析出堵塞了，应用10%的甲醇超声，依然不同，请问大家该怎么办啊？

[color=#3e3e3e][b]衣服穿久了要洗，色谱柱用久了要冲，不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单，到底该怎么洗，还是有些门道的：[/b][/color][color=#3e3e3e][b]第一个问题：用什么冲[/b]1.1：什么叫冲洗色谱柱通常，色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来，并且保存在合适的溶剂中；还有另一种情况，也可以算作冲洗的范畴，就是梯度方法间重新平衡色谱柱的过程。1.2：常用的溶剂针对于反相色谱柱，通常是用到纯的水和有机溶剂，水主要是作为冲洗掉色谱柱中的盐和其他添加剂，而有机溶剂则是用来冲洗掉一些在色谱柱上有较强保留的污染物，除了在分析中常用到的甲醇和乙腈之外，还有一些对污染物去除能力更强的有机溶剂也可以使用，比如异丙醇。[/color][color=#3e3e3e][b]第二个问题：冲多久[/b]色谱柱到底要冲多久，这个是经常困扰大家的问题，20分钟，30分钟，还是1小时？2.1.1：色谱柱冲洗的计算原理其实，冲洗色谱柱并不是一个时间概念，而是一个体积的问题：通常要完全置换色谱柱中的流动相，需要至少十倍柱体积，也就是说，要有至少十倍于色谱柱体积的溶剂流过色谱柱才能把里面原有的溶剂彻底置换。2.1.2：色谱柱体积的计算色谱柱的柱体积就是色谱柱的圆柱型体积乘以色谱柱柱填料的孔隙率（一般约为0.6），所以算下来，一根常用的4.6×150mm的色谱柱柱体积大约是1.5mL，如果是10倍柱体积的量，就是15mL，按照常用的1mL/min的流速，就是15min的时间。2.2.1：梯度重新平衡的冲洗时间不过，这仅仅是置换所有溶剂的时间，其实仅仅是适合于短期冲洗色谱柱，比如梯度方法间的平衡时间，但是这还要受到仪器延迟体积的影响，已经流动相是否容易重新达到化学平衡的考虑，通常仪器的延迟体积越大，这个时间要越长，如果所使用的流动相不容易达到化学平衡，还要加长时间，比如使用使用某些缓冲盐的情况。当然也有很多情况下，梯度方法间的平衡时间是不需要这么长的。2.2.2：清洁色谱柱的冲洗时间如果需要彻底冲洗色谱柱，还需要更长的时间，通常建议是20倍的柱体积，也就是说，对于4.6×150mm的色谱柱，要冲30分钟才能保证冲洗完全。其他规格的色谱柱可以根据色谱柱的规格和流速进行简单的计算。[/color][color=#3e3e3e][b]第三个问题：怎么冲[/b]色谱柱的冲洗，无非两个情况：正常情况下的冲洗和非正常情况下的冲洗[b]3.1：正常情况下色谱柱的冲洗步骤[/b]3.1.1：使用不含添加剂流动相后的冲洗正常情况下，仅仅是对色谱柱进行流动相替换和净化，对于一般的方法，只需在方法结束后使用高比例的有机相比如甲醇或者乙腈冲洗色谱柱大约20倍柱体积即可。3.1.2：使用含盐或添加剂后的冲洗如果是使用的到的方法的流动相中含有缓冲盐或者其他添加剂的时候，先要使用和方法流动相起始比例相同的纯水相替代缓冲盐一相，冲洗20倍柱体积之后，再换上高比例有机相冲洗20倍柱体积。3.1.3：色谱柱冲洗后的保存对于色谱柱的保存，一般是存放在纯的有机相中，短期存放，甲醇乙腈均可，长期存放，建议储存在甲醇中。[b]3.2：非正常状况下的冲洗[/b]如果是非正常的状况，就要考虑一些不走寻常路的冲洗办法了：什么叫做非正常状况？常见的有两种，柱效下降和堵塞：3.2.1：柱效下降色谱柱的冲洗对于柱效下降，我们首先要确定是色谱柱的问题而不是由于仪器或分析方法造成的，排除这两者，如果不是色谱柱损坏比如塌陷（物理冲击造成），键合相水解（高温低pH下长时间使用），硅胶基质水解（高pH下使用）等不可逆损伤造成的柱效下降，因为排除上述问题外，多数情况都是因为色谱柱不太正常的“脏”了，可以首先使用纯的甲醇或乙腈长时间冲洗色谱柱，如果还不能奏效，可以考虑使用纯的异丙醇冲洗色谱柱，异丙醇的洗脱能力比甲醇乙腈更强，能把很多这两种溶剂无法冲洗的污染物从色谱柱上洗脱下来。如果效果仍旧不明显，可以参考色谱柱说明书中的“色谱柱再生”一项里面的说法，使用更加强大的溶剂冲洗，不过这些溶剂通常不是常用的反相液相色谱溶剂。3.2.2：堵塞色谱柱的冲洗如果是遇到堵塞的情况，首先要确定堵塞是由于什么原因引起的，如果是由于色谱柱中残留的缓冲盐引起的，这是最万幸的堵塞了，可以尝试用高比例的水相（推荐95%）在较高的温度下冲洗色谱柱。如果是由于样品原因导致色谱柱堵塞，又要考虑另外的办法，如果是样品中含有太多吸附性很强的物质（有时是复杂样品中的某些杂质，无法通过过滤离心等办法去除）沉积吸附在柱头导致堵塞，可以尝试使用不同的溶剂（对此类物质有较好溶解性的）慢慢冲洗。如果是由于样品过滤不当或者样品在色谱柱上析出导致某些颗粒杂质堵塞了色谱柱，除了尝试寻找合适溶剂冲洗之外，只能考虑反冲了，通常，不建议反冲色谱柱，因为可能对色谱柱造成较大损害，所以反冲是迫不得已的死马当活马医的办法，一定要慎用。做好样品的前处理并使用预柱或在线过滤器才是保护色谱柱的好办法！[b]3.3：快速冲洗色谱柱[/b]看上去很好很强大的说法，其实很简单，在冲洗色谱柱的时候，可以通过增加流速来缩短冲洗时间，我们已经知道色谱柱冲洗的完全程度是通过体积衡量的，所以提高流速是可以节省下时间的。但是要特别注意的是，对于堵塞的色谱柱，提高流速可能并不是个很可行的办法...[/color][color=#3e3e3e]转载于：液相达人馆[/color]

[color=#444444]开发检测一个产品，由于考虑不周，产品易溶于水，造成色谱柱堵塞，已用异丙醇冲洗，效果不佳。请谁有好的方法说一些。[/color]

公司仪器是Ailent 1200，里面的管线使用一段时间就会有的地方发生堵塞。管线直径是0.17mm的钢柱管。使用水-甲醇-异丙醇-乙酸乙酯-四氢呋喃，冲洗、超声清洗还是不行，已经堵了好几根管线了，也倒是可以流液体就是压力比较高。没有弯折。管线也不便宜，哪位有过清洗经验的帮忙解决一下。 看网上说用5%稀硝酸水溶液清洗，有朋友试过么

各位前辈，大家好！液相在相隔一两个月才开，冲洗时冲不出流动相，怎么办呢？还有，打开工作站也看不见基线，怎么办呢？有什么方法解决吗？小妹急着用呀！谢谢大家了。

衣服穿久了要洗，色谱柱用久了要冲，不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单，到底该怎么洗，还是有些门道的：第一个问题：用什么冲1.1：什么叫冲洗色谱柱通常，色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来，并且保存在合适的溶剂中；还有另一种情况，也可以算作冲洗的范畴，就是梯度方法间重新平衡色谱柱的过程。1.2：常用的溶剂针对于反相色谱柱，通常是用到纯的水和有机溶剂，水主要是作为冲洗掉色谱柱中的盐和其他添加剂，而有机溶剂则是用来冲洗掉一些在色谱柱上有较强保留的污染物，除了在分析中常用到的甲醇和乙腈之外，还有一些对污染物去除能力更强的有机溶剂也可以使用，比如异丙醇。第二个问题：冲多久色谱柱到底要冲多久，这个是经常困扰大家的问题，20分钟，30分钟，还是一个小时？2.1.1：色谱柱冲洗的计算原理其实，冲洗色谱柱并不是一个时间概念，而是一个体积的问题：通常要完全置换色谱柱中的流动相，需要至少十倍柱体积，也就是说，要有至少十倍于色谱柱体积的溶剂流过色谱柱才能把里面原有的溶剂彻底置换。2.1.2：色谱柱体积的计算色谱柱的柱体积就是色谱柱的圆柱型体积乘以色谱柱柱填料的孔隙率（一般约为0.6），所以算下来，一根常用的4.6×150mm的色谱柱柱体积大约是1.5mL，如果是10倍柱体积的量，就是15mL，按照常用的1mL/min的流速，就是15min的时间。2.2.1：梯度重新平衡的冲洗时间不过，这仅仅是置换所有溶剂的时间，其实仅仅是适合于短期冲洗色谱柱，比如梯度方法间的平衡时间，但是这还要受到仪器延迟体积的影响，已经流动相是否容易重新达到化学平衡的考虑，通常仪器的延迟体积越大，这个时间要越长，如果所使用的流动相不容易达到化学平衡，还要加长时间，比如使用使用某些缓冲盐的情况。当然也后很多情况下，梯度方法间的平衡时间是不需要这么长的。2.2.2：清洁色谱柱的冲洗时间如果需要彻底冲洗色谱柱，还需要更长的时间，通常建议是20倍的柱体积，也就是说，对于4.6×150mm的色谱柱，要冲30分钟才能保证冲洗完全。其他规格的色谱柱可以根据色谱柱的规格和流速进行简单的计算。第三个问题：怎么冲色谱柱的冲洗，无非两个情况：正常情况下的冲洗和非正常情况下的冲洗3.1：正常情况下色谱柱的冲洗步骤3.1.1：使用不含添加剂流动相后的冲洗正常情况下，仅仅是对色谱柱进行流动相替换和净化，对于一般的方法，只需在方法结束后使用高比例的有机相比如甲醇或者乙腈冲洗色谱柱大约20倍柱体积即可。3.1.2：使用含盐或添加剂后的冲洗如果是使用的到的方法的流动相中含有缓冲盐或者其他添加剂的时候，先要使用和方法流动相起始比例相同的纯水相替代缓冲盐一相，冲洗20倍柱体积之后，再换上高比例有机相冲洗20倍柱体积。3.1.3：色谱柱冲洗后的保存对于色谱柱的保存，一般是存放在纯的有机相中，短期存放，甲醇乙腈均可，长期存放，建议储存在甲醇中。3.2：非正常状况下的冲洗如果是非正常的状况，就要考虑一些不走寻常路的冲洗办法了：什么叫做非正常状况？常见的有两种，柱效下降和堵塞：3.2.1：柱效下降色谱柱的冲洗对于柱效下降，我们首先要确定是色谱柱的问题而不是由于仪器或分析方法造成的，排除这两者，如果不是色谱柱损坏比如塌陷（物理冲击造成），键合相水解（高温低pH下长时间使用），硅胶基质水解（高pH下使用）等不可逆损伤造成的柱效下降，因为排除上述问题外，多数情况都是因为色谱柱不太正常的“脏”了，可以首先使用纯的甲醇或乙腈长时间冲洗色谱柱，如果还不能奏效，可以考虑使用纯的异丙醇冲洗色谱柱，异丙醇的洗脱能力比甲醇乙腈更强，能把很多这两种溶剂无法冲洗的污染物从色谱柱上洗脱下来。如果效果仍旧不明显，可以参考色谱柱说明书中的“色谱柱再生”一项里面的说法，使用更加强大的溶剂冲洗，不过这些溶剂通常不是常用的反相液相色谱溶剂。3.2.2：堵塞色谱柱的冲洗如果是遇到堵塞的情况，首先要确定堵塞是由于什么原因引起的，如果是由于色谱柱中残留的缓冲盐引起的，这是最万幸的堵塞了，可以尝试用高比例的水相（推荐95%）在较高的温度下冲洗色谱柱。如果是由于样品原因导致色谱柱堵塞，又要考虑另外的办法，如果是样品中含有太多吸附性很强的物质（有时是复杂样品中的某些杂质，无法通过过滤离心等办法去除）沉积吸附在柱头导致堵塞，可以尝试使用不同的溶剂（对此类物质有较好溶解性的）慢慢冲洗。如果是由于样品过滤不当或者样品在色谱柱上析出导致某些颗粒杂质堵塞了色谱柱，除了尝试寻找合适溶剂冲洗之外，只能考虑反冲了，通常，不建议反冲色谱柱，因为可能对色谱柱造成较大损害，所以反冲是迫不得已的死马当活马医的办法，一定要慎用。做好样品的前处理并使用预柱或在线过滤器才是保护色谱柱的好办法！3.3：快速冲洗色谱柱看上去很好很强大的说法，其实很简单，在冲洗色谱柱的时候，可以通过增加流速来缩短冲洗时间，我们已经知道色谱柱冲洗的完全程度是通过体积衡量的，所以提高流速是可以节省下时间的。但是要特别注意的是，对于堵塞的色谱柱，提高流速可能并不是个很可行的办法...

[size=18px][b][font='Times New Roman'][font=宋体]问题描述：[/font][/font][font='Times New Roman']waters2487[font=宋体]双波长吸收检测器堵了，拆开能够看到里面有一小块黑色的物体，[/font][/font][font=宋体]该如何冲洗？[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]解答：[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]检测器堵了之后会导致系统压力升高，但是系统压力升高并不代表一定是检测器堵了，因此首先要确定堵的症结在哪，然后才能对症下药。判定的方法有：卸掉保护柱、色谱柱、在线过滤器等部件，将管路直接连接检测器的入口，检查检测器出口端液体流出是否流畅，同时观察系统压力是否逐渐升高或者压力偏高。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]检测器堵了，可以卸掉色谱柱，反向冲洗流通池，即直接用管路连接检测器的出口，使流动相从出口进，入口出。反冲的时候需要注意，检测器流通池有一定的耐压范围，压力太大会导致流通池破裂而损坏，因此需要低流速慢慢冲。冲洗的时候观察系统压力，适当的缓慢提高流速。冲洗的溶剂可以为甲醇、水、异丙醇等，如果是缓冲盐导致的检测器堵，可以尝试用温水进行冲洗；异丙醇的黏度大，冲洗的时候压力相对较高，需要[/font][/font][font=宋体][font=宋体]特别[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]注意。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font]3[font=宋体]）[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]在线冲洗的方式不能解决问题，可以继续尝试拆下来处理。如果确定是流通池堵了，可以将流通池从检测器中取出，并将流通池拆开，用甲醇、水分别超声石英透镜和不锈钢流通池，超声好后，用擦镜纸将石英透镜擦干再装回去就可以了。拆的时候注意一些，装的时候螺丝要轮流拧，不要一次把其中一个拧死；拆的时候要注意流通池里面的透镜，容易碎，掉在地上不好找，同时注意不要把透镜弄花。流通池超声时尽量将透镜拆下来后单独清洗，[/font][/font][font=宋体][font=宋体]然后[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]再超声[/font][/font][font=宋体][font=宋体]；[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]整体超声可能会出现流通池松动，石英透镜破碎的情况，因此需要注意，[/font][/font][font=宋体][font=宋体]不到[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]万不得已[/font][/font][font=宋体][font=宋体]，[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]不要超声[/font][/font][font=宋体][font=宋体]。[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]同时注意超声波清洗机的功率，功率太大容易导致透镜破裂。[/font][/font][/size][font=微软雅黑][font=微软雅黑]领取更多《实战宝典》请进：[/font][/font][url=http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI][u][font=微软雅黑][color=#0000ff]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/color][/font][/u][/url][font=微软雅黑] [/font]

仪器：岛津[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LCMS[/color][/url]MS 8045色谱柱：岛津C18[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]用短柱第一次堵塞。时间：2019.09.27 起因：26日当夜帮同事编辑好方法、序列，二货同事竟然有一个序列没放置进样瓶！！！相当无语。。 现象：排完气0.4流速开泵，仪器直接显示泵压超过设定值，停止工作，设置泵最高耐受压力依然不能正常正常运转。 处理：第一步正常排查流露堵塞部位（其实很大概率可以预见是色谱柱堵塞，但是了流程还是要走一下）。拆下色谱柱链接双通，压力正常，链接色谱柱压力依然报表，确定色谱柱堵塞。第二步流路冲洗。考虑到堵塞原因，先把色谱柱换双通，不连接质谱部分，纯甲醇冲洗20分钟。同时检查色谱柱柱塞板，拆卸完色谱柱后发现岛津配C18色谱柱竟然没有柱塞板！！！（下巴没了），好吧决定直接冲柱！！第三步冲柱。接下来咨询了一下岛津售后，然后就是常规的反冲色谱柱了（纯甲醇低流速）。好巧不巧，恰遇国庆假期，领导批示国庆假期期间仪器全部断电关机！！！！！（妈妈皮）OK，谨遵法旨！第一根近3K大洋的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]用的色谱柱就这样GG思密达了！！！！（国庆假期回来后也有继续反冲，然鹅并无卵用）第二次堵塞。时间：2019.10月末左右（具体日期忘记了） 起因：水样你较多，不同项目，跑序列无问题，后处理的时候泵压报错。 现象：0.4流速泵压直接到30多，（正常也就十一二），设置最高泵压40泵能正常运作，但是心里异常怕（这么高的泵压力）并且柱效降低严重。 处理：还是正常排查，确认是色谱柱堵塞，拆色谱柱冲洗流路，反接色谱柱，反冲（开始用50%乙腈水。后面直接用纯乙腈），这次没遇到放假，直接冲过周末加一个周一，周三期顺接色谱柱排气开泵，泵压正常，爽吱吱！！ 此为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]色谱柱俩次堵塞经历，总结一下：第一次色谱柱堵塞是很不应该的，有批评同事，处理也不成功，恰遇国庆假期，没办法。第二次色谱柱堵塞其实疑惑很大，跑序列未堵塞，序列跑完了后处理柱子堵了，，，想不通（第二次柱子堵塞具体可看https://bbs.instrument.com.cn/topic/7363997），但好在处理好了。顺带说一句岛津这台[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]使用感受，说实话，够用而已。因为之前一直用岛津的液相[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]，上手基本没没差异，深度使用后发现跟其他品牌的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]还是有点差距，总感觉某些时候不是很人性化。希望有所改进吧！！（图文为仪器[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/12/201912021518016748_522_3425481_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/12/201912021518050958_2096_3425481_3.jpg!w690x920.jpg[/img][img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/12/201912021518096316_3644_3425481_3.jpg!w690x920.jpg[/img]

如何排查液相管路堵塞？

管路堵塞最直接解决办法就是更换管路，如果没有可更换管路，可按以下办法解决：1、用系统分段法检查堵塞管路，从后往前分别松开接头检查，找到堵塞管路后，拆下来疏导；2、如果是非刚性物质堵塞，如蛋白质、微生物等，可用极细的金属丝导通，也可在火上烧一烧，有机物碳化后再导通；3、如果是刚性物质堵塞，可采取反冲的办法有时能行，不要连色谱柱和检测器；4、用适当的溶剂，如50%甲醇水以低流速冲洗管路，遇到不溶于流动相的碎屑，可尝试加大流速至5mL/min强行冲出。

经常使用液相的小伙伴，大家有没有遇到过仪器压力偏高的现象呢？一般压力高，我们首先会想到堵塞，有可能发生在针和针座，或者色谱柱，或者冲洗阀的滤芯等，今天我们先来聊一聊针座堵塞那些事儿。[align=center]如何判断针和针座堵塞呢？[/align]判断自动进样器的针和针座是否有堵塞，可以通过查看自动进样器的主路状态和旁路状态的压力值来进行判断。通常，仪器开启并在进样结束之后，六通阀处于主路状态，可以查看一下压力值；把六通阀切换至旁路状态，待稳定后再查看一下压力值。如果两者压力差值大概3-5bar左右，代表进样针和针座可能是没有堵塞的；如果主路状态的压力值比旁路状态要大很多，比如说10bar/20bar以及更大，说明针和针座就很有可能发生了堵塞。[align=center]针座堵塞如何清洗呢？[/align] 如果针座堵塞的话，常用的方式就是反冲，我们可以借助六通阀旁路状态来进行。旁路状态下，针座连接六通阀5号位，泵的流动相连接1号位。

[color=#00008B][B]原贴[/B]：[/color]======================================================================================================================================[IMG]http://bimg.instrument.com.cn/parts/pic/WM1038914-72836.jpg[/IMG][color=#DC143C]柱子轻微堵塞，安捷伦C18 4.6*250mm，以前用纯甲醇，1ml/min，压力为55-56BAR左右，可是现在压力上升为70BAR左右，有物质在色谱柱当中没有被冲出来，峰型比以前也胖了点。有什么好的解决办法，降低柱压，提高色谱柱柱效。柱子堵塞了，一般可以用哪些溶剂冲？甲醇，乙醇，二氯甲烷，四氢呋喃，异丙醇，可以吗？ [/color] ======================================================================================================================================[color=#00008B]1、先把柱子卸下来看看柱压，如果压力升高是柱子引起的处理柱子，如果柱子卸下来柱压还是挺高那么就不是你的柱子的柱压高，而是别的地方有堵塞。柱子柱压高时可以先用含水比例较大的系统冲一下，要是系统中有盐析出而导致的柱压升高时这样应该可以使柱压适当的降低；冲完后若柱压还是没有降低可用适当比例的异丙醇冲洗，利用异丙醇的粘度冲出系统中的析出物质。2、将柱子反接，用10%~90%的甲醇冲洗，10%几甲醇保留10倍柱体积，90%至少保留10倍柱体积。冲完后用50：50=乙腈：异丙醇冲洗至少10倍柱体积。可以在甲醇和水中考虑加入0.1%的甲酸。我也碰到过这种情况，就这样冲了大概半天，好了。幸亏安捷伦的柱子还可以，不然柱子早报销了。3、首先，你应该确定一下你的柱子用了多长时间，柱子在使用的过程中柱压逐渐升高是正常的现象，你的柱子柱效也在下降，有可能是正常的使用损坏，首先使用甲醇－水梯度洗脱几个小时，如果没有效果，可尝试倒过来用甲醇－水梯度冲洗，一般可以解决。4、第一要检查是柱子的原因还是系统的原因，可以换跟新的柱子试试或者在另一台液相上用你的柱子测一下压力，从而可以检查是哪个出了问题。第二如果是柱子那就用甲醇低速冲洗。第二如果是系统的问题可能是有沉淀的无机盐，可以换上二通，用60°的水把系统冲洗。第三柱效低可以用甲醇和乙腈换着冲洗，注意要低速，可以在一定程度上提高柱效。建议一般要准备一根状态较好的柱子作为备用，可以在出问题时进行检查。以上回答希望能有帮助。5、首先要确定柱压高是柱子的原因，而不是系统其他原因；如果确定是柱子原因，建议用异丙醇冲下试试 "峰型比以前也胖了点",可能是你的柱子柱效有所下降。6、不光要看你的流动相，还要看看你的样品做什么，生物样品还是普通样品，要是生物样品建议用乙腈冲洗看看，虽然现在乙腈的价格是飙涨，要是还有盐的样品也还是要用高比例的水冲洗的。异丙醇建议用比例低点的水溶液即可，异丙醇的黏度非常大，压力会比较高，不要用太大的流速。反冲的问题不到最后一步不要用，对柱子还是有一定的损伤的。7、柱压高有许多原因，要是柱子里有脏东西，可以用甲醇多冲没也可以将柱子反接用甲醇冲洗。还可以先超声一下，再冲洗。要看具体的原因了。8、进样管路堵塞：卸下进样阀和柱子之间那根细管丝，放入异丙醇中（浸没），超声1小时以上。柱子堵塞：用异丙醇，低流速，低压力，倒着冲洗。9、用甲醇和乙腈冲一段时间十几个小时再看看实在不行就把前端柱子拆开挖掉一点填料，建议以后用的时候最好用一个预柱，这样柱子一般不会出问题了。10、柱压高时，冲柱子千万要注意，不用二氯甲烷，含氯的溶剂的比重大，容易破坏柱子里的结构，还有能用甲醇就不要用乙腈冲，因为纯乙腈冲新柱子还可以，如果是根老柱子，时间长了，纯乙腈容易对管道有溶解作用，造成柱压不稳，我用的岛津以前就是这样，咨询了岛津的工程师才发现最好少用纯乙腈的。[/color]

waters2695正常进样几针后，突然压力为0或为负，没有液体流出，有时隔一段时间又会自动恢复正常。冲洗各管路均未堵塞。已连续出现多次这种情况。请问是什么原因？

最近在用磷酸盐缓冲液测定5’-nucleotides时遇到了一个问题，希望大家能帮忙解决一下：第一天，测定结束后（峰形正常，压力稳定），用20%甲醇溶液清洗2h， 流速0.5ml/min,之后用100%甲醇清洗灌柱30min,1ml/min (压力稳定)。第二天测定前用20%甲醇过渡，在洗了几分钟后压力开始上升并超过上限3000psi。purge阀打开，流动相冲洗，压力为40psi；purge阀关闭，20%甲醇，流速0.1ml/min在五分钟内压力一直上升最后超过上限。且色谱柱入口没有溶液流出。请问这是什么原因，应该怎么解决？拜托。

请问高人，我用的是C18反相填充柱，流动相（甲醇：水=50：50）平衡时一切正常，压力7左右，当进样品后压力急剧升高，超过20。我把柱子拆下，检查保护柱出口压力很正常，证明是柱子堵塞。我接上柱子用水反冲（流速0.5，压力也达到14左右）1小时，慢慢的压力有所减小，然后再用乙腈正冲，冲的过程中发现压力慢慢减小，我就不断将流速调高到2，此时压力可降到8，再用甲醇冲洗压力也不高（流速2时压力为12），我以为此时柱子已经恢复正常。但是当我将流动相改为加水时压力又急剧上升，上升的幅度随含水比例升高而增大，证明柱子仍然没有恢复正常。所以在此请教各位怎样才能使柱子恢复正常？堵塞的原因可能是：我用的流动相是甲醇：水=50：50，样品是聚丙烯酰胺（重均分子量30万左右）用水稀释，用定性滤纸过滤后再用0.45微米的过滤头过滤进样，高分子遇到50%的甲醇会凝聚析出而堵塞。

现在有一个疑问想请教老师们，仪器[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]，分别是安捷伦1100，AB 3200，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]。做的是药代动力学，因为样品前期处理是用的简单的乙腈沉淀蛋白后进样，洗脱梯度是乙腈：1mM甲酸铵（60：40），现在走完一条标曲（8个点）、一套指控（4个点）之后，走一个人的样品（13个点），再走质控合格。继续再走一个人的样品后，质控就无法合格了。只能用水比例较大的流动相冲洗半小时到一小时，之后质控就能合格了。我想问在用水比例较大的流动相冲洗时，能不能直接用带有缓冲盐的水相，也就是用乙腈：1mM甲酸铵（10：90）冲洗，这样可以节省很多的平衡时间。我还没有试，望高手指点

[color=#444444]安捷伦1260的液相，G1314F的紫外检测器，现在发现流通池完全堵塞，如果开启流速（不管多大的流速）压力都会上升，当压力达到170左右管路就会脱落，现在已经判断出师流通池进口端的管线堵塞（这根管线是不能拆换的），已经超声过了，无效。有没有什么好方法能弄通？[/color]

[color=#444444]各位前辈们，我们有一根Waters Atlantis C18 (3 μm, 4.6×150 mm)的柱子，之前用1 ml/min的流速用的好好的，但最近只要用超过0.8 ml/min流速，柱子顶端接口就会被冲开，而换用其他柱子或二通就没有问题。我怀疑是柱子堵了，所以用甲醇水以0.2 ml/min低流速冲洗柱子，但无论流动相是什么比例，出峰都不受影响。我本来以为是柱子里有不溶性的杂质，但我已经冲洗了两天了，峰还是一如既往。以前有遇到这样的问题，是气泡导致的，对于我这次的问题而言，换用其他的柱子（Venusil XBP C18 5 μm，4.6×250 mm）基线就很平稳了，说明是柱子里有气泡？怎样才能把气泡冲掉呢？我们的液相色谱仪是岛津LC-20AT，检测器SPD-20A。已经被这根柱子折磨好几天了，如能解答，万分感激！[/color][color=#444444][img]http://muchongimg.xmcimg.com/oss2/img/2018/0719/bw265h2635276_1531981929_411.jpg[/img][/color]