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配体

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配体相关的论坛

  • 【原创】有机配体的合成-（双齿、多齿配体再配位化学中的应用）

    配位化学中的有机金属配合物的合成需要有机配体和金属离子。有机配体多种多样，双齿多齿的，如：4，4'-bipy,等，金属离子一般用过渡金属的和稀土离子，这样形成单核、双核、或多核0D\1D\2D\3D等的配位聚合物。还可以形成纳米体系的金属聚合物体系。配位聚合物一般由水热和溶剂热法得到单晶，然后经过xrd得到它的结构，进而测出它的性质。值得一提的是，形成的配位聚合物往往会是非常美观的的结构，拓扑结构等等。关键是要选择配体和金属离子，推出它们结合的方式，会得到怎样的结构，又怎样的新颖性。因而，在原有的简单配体上，合成新的配体非常重要和有必要。这就跟有机合成有点关系，看怎样能合成新型的配体应用于配位当中，进而产生更多结构和性质新颖的配位聚合物！

  • 【原创】有机配体的种类

    各位大家，有机配体对金属离子友好的配位作用，尤其是过渡金属元素。可以形成1D等多维结构，大家知道有哪些较好的有机配体呢？最好是多齿配体，谢谢！要找它们的结构有那些好的去处？

  • 【原创】有机配体配合物

    各位大家，有机配体对金属离子友好的配位作用，尤其是过渡金属元素。可以形成1D等多维结构，大家知道有哪些较好的有机配体呢？最好是多齿配体，谢谢！要找它们的结构有那些好的去处？

  • 如何做配合物的质谱？？？？配体与金属离子的配位问题

    [color=#444444]想通过做质谱，来得到配体与金属离子的配位情况。也就是说，希望得到的质谱为：配体+金属离子的分子量...不知道大家，是如何做这个质谱的。。本来我通过10-5M浓度的配体，加入1当量，5当量，10当量的金属离子。。。打质谱均没得到想要的质谱峰。。。想请教高人，如何可以有效得得到配体与金属离子的配位峰？？？[/color]

  • 配合物的化学式、 配体位次原则，及命名原则

    1 化学式 “原则”在IUPAC1970规定一致，即：（1）“在配位个体中如既有无机配体又有有机配体，则无机配体排列在前，有机配体排列在后。” 例：cis-[PtCl2(Ph3P)2]。因此，如[Cr(en)2Cl2]Cl，[Co(en)2(NO2)(Cl)]SCN，[Pt(en)CO3]等都不符合（1）。 (2) “无机配体和有机配体中，先列出阴离子，后列出阳离子和中性分子。” 例：K[PtCl3NH3]，[Co(N3)(NH3)5]SO4。因此如[Co(NH3)5Cl]Cl2，[Pt(NH3)2Cl2]，[Co (NH3)5(CO3)]+， [Co(NH3)3(OH2)Cl2]+，[Co(en)2(NO2)(Cl)]+，[Pt(en)(NH3)(CO3)]等都不符合（2）或（1）和（2）以及“原则”10.3（见下文）。(3) “同类配体的名称，按配位原子元素符号的英文字母顺序排列。” 例：[Co(NH3)5H2O]3+。据此不能写成[CoH2O(NH3)5]3+。(4) “同类配体中若配位原子相同，则将含较少原子数的配体排在前面，较多原子数的配体列后。” 例：[PtNO2NH3NH2OH(Py)]Cl。因此，[Co(NH3)3(NO2)3]不符合（4）。2 命名 配体命名的顺序，按“原则”示例可知，与配位个体中中心离（原）子后的配体书写顺序（化学式）完全一致；IUPAC的规则却不同，是按配体的英文名称词头字母（例中有底线者）的英文字母顺序命名，故与化学式的顺序不一致；日本则按阴离子配体、阳离子配体、中性分子配体的顺序命名[2]，与我国的“原则”大体一致。例：（1）K3[Fe（CN）6] 六氰合铁（Ⅲ）酸钾（stock方法）， 六氰合铁酸（3－）钾（Ewen—Basett方法）； potassium hexa cyanoferrate（Ⅲ）或potassium hexa cyanoferrate(3－)（英）以下仅用stock方法。 （2） [Co(N2)(NH3)5]SO4 硫酸叠氮五氨合钴（Ⅲ） penta ammine azidocobalt（Ⅲ）sulfate （3） NH4[Cr(NCS)4(NH3)2] 四（异硫氰酸根）二氨合铬（Ⅲ）酸铵 ammonium di ammineterakis (isothiocyanato) chromate （Ⅲ）（英） （4） Na2[Fe(CN)5NO] 五氰亚硝酰合铁（Ⅲ）酸钠 sodium penta cyano nitrosylferrate（Ⅲ）（英）有的教材中，将K4[Fe（CN）6]称为六氰合亚铁（Ⅱ）酸钾，其中的“亚”字实无必要；而有的则称之为六氰合铁酸（Ⅱ）钾，并将K[Co(NH3)2(NO2)4]称为四硝基二氨合钴酸（Ⅲ）钾，这些显然不是笔误。至于如将[Co(NH3)3(H2O)Cl2]称为一氯化二氯一水三氨合钴（Ⅲ），则从化学式到命名均无符合“原则”之处。二 配体命名（“原则”10.3）“原则”规定，“带倍数词头的无机含氧酸阴离子配体命名时，要用括号括起来，如：（三磷酸根）。有的无机含氧酸阴离子，即使不含倍数词头，但含有一个以上直接相连的代酸原子，也要用括号，如：（硫代硫酸根）、……。”对于有机配体，也“一律用括号括起来。”据此[Ag(S2O3)2]3－应称为二（硫代硫酸根）合银（Ⅰ）离子；[Fe(NCS) 6] 3－应称为六（异硫氰酸根）合铁（Ⅲ）离子，不应称为六异硫氰合铁（Ⅲ）离子。事实上，“硫氰”、“异硫氰”、“硫代硫酸”等的叫法，在各教材中出现的频率不低，而且括号也常被忽略。其他与命名有关的例如配位个体的化学式，应该用“[]”号括起来，但不少书中误用了“〔〕”号；又如Fe3+离子与SCN－离子所形成的一系列配合物，根据“HSAB”原理，已用[Fe(NCS)n]3－n，（n=1－6）表示，但至今仍不乏用[Fe(SCN)n]3－n来表示者。最后尚须说明，当讨论配合物的结构和反应时，其化学式可以根据需要而不必拘泥于“原则”所规定的顺序书写

  • 核酸适配体在固相萃取技术中的研究进展

    [color=#333333] 核酸适配体是一种经由体外指数级富集系统进化技术筛选得到的随机寡核苷酸片段,该寡核苷酸片段能特异性结合靶物质。核酸适配体与固相萃取技术相结合,可以高选择性地应用于复杂样品中痕量组分的萃取、分离、富集和纯化,由此引起了广泛关注。该文综述了基于核酸适配体的固相萃取研究进展,着重评述了核酸适配体固相萃取柱的制备、固相萃取过程、面临的问题和应用前景。 [/color]

  • 双配体锌配合物的结构表征

    双配体锌配合物的结构表征

    [align=center][font='黑体'][size=29px]双配体锌配合物的结构表征[/size][/font][/align][font='宋体'][size=12px]摘要：[/size][/font][font='宋体'][size=12px]本文合成了一种锌的混配配合物：[[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]Zn(4-ABS)(phen)[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]([/size][/font][font='times new roman'][size=12px]H[/size][/font][font='times new roman'][sub][size=12px]2[/size][/sub][/font][font='times new roman'][size=12px]O[/size][/font][font='times new roman'][size=12px])[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]］[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]ClH[/size][/font][font='times new roman'][sub][size=12px]2[/size][/sub][/font][font='times new roman'][size=12px]O[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]。[/size][/font][font='宋体'][size=12px]利用[/size][/font][font='宋体'][size=12px]红外光谱([/size][/font][font='times new roman'][size=12px]IR[/size][/font][font='宋体'][size=12px])、荧光光谱([/size][/font][font='times new roman'][size=12px]FL[/size][/font][font='宋体'][size=12px])[/size][/font][font='宋体'][size=12px]、紫外光谱（[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]UV[/size][/font][font='宋体'][size=12px]）[/size][/font][font='宋体'][size=12px]和热重分析([/size][/font][font='times new roman'][size=12px]TG/DTG[/size][/font][font='宋体'][size=12px])[/size][/font][font='宋体'][size=12px]等测试手段对[/size][/font][font='宋体'][size=12px]该[/size][/font][font='宋体'][size=12px]配合物进行表征，结果表明过渡金属锌离子分别与[/size][/font][font='宋体'][size=12px]对氨基苯磺酸[/size][/font][font='宋体']上[/font][font='宋体'][size=12px]的[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]1[/size][/font][font='宋体'][size=12px]个[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]O[/size][/font][font='宋体'][size=12px]、[/size][/font][font='宋体'][size=12px]邻[/size][/font][font='宋体'][size=12px]菲罗啉上的[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]2[/size][/font][font='宋体'][size=12px]个[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]N[/size][/font][font='宋体'][size=12px]和[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]1[/size][/font][font='宋体'][size=12px]个[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]H[/size][/font][font='times new roman'][sub][size=12px]2[/size][/sub][/font][font='times new roman'][size=12px]O[/size][/font][font='宋体'][size=12px]配位。[/size][/font][font='宋体'][size=12px]关键词：[/size][/font][font='宋体'][size=12px]混配[/size][/font][font='宋体'][size=12px]；表征手段；谱图解析[/size][/font][font='黑体']1.[/font][font='黑体']实验原理[/font][font='宋体']红外光谱是研究分子振动和转动信息的十分有力的分析手段，能够反映出分子化学键的特征吸收频率；热重分析是一种热分析技术，在程序控制升温下，通过测量样品的失重变化，探究样品的热稳定性及其组分；紫外可见光谱研究[/font][font='宋体']特定波长或一定波长范围内物质对光的吸收度，可用于定性或定量分析[/font][font='宋体']；荧光发射光谱是在一定波长的激发下，物质发出的[/font][font='宋体']荧光强度在不同波长的分布情况[/font][font='宋体']。[/font][font='黑体']2.[/font][font='黑体']实验仪器[/font][font='times new roman']布鲁克[/font][font='times new roman']Tensor 27[/font][font='times new roman']傅里叶红外光谱仪[/font][font='times new roman'](KBr[/font][font='times new roman']压片法，[/font][font='times new roman']4000[/font][font='times new roman']～[/font][font='times new roman']400 cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-1[/size][/sup][/font][font='times new roman'] )[/font][font='times new roman']；北京恒久[/font][font='times new roman']HTG-1[/font][font='times new roman']热重分析仪[/font][font='times new roman']，测定条件为空气气氛，升温速率为[/font][font='times new roman']10℃min[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-1[/size][/sup][/font][font='times new roman']，终点温度为[/font][font='times new roman']800[/font][font='times new roman']℃；紫外光谱采用岛津[/font][font='times new roman']UV-2600[/font][font='times new roman']紫外可见分光光谱仪；荧光光谱采用日立[/font][font='times new roman']F[/font][font='times new roman']70[/font][font='times new roman']00[/font][font='times new roman']型荧光分光光谱仪，在室温下测定（激发狭缝和发射狭缝均为[/font][font='times new roman']2 nm[/font][font='times new roman']，扫描速率[/font][font='times new roman']600 nm/min)[/font][font='times new roman']。[/font][font='黑体']3.[/font] [font='黑体']谱图解析[/font][font='黑体'][color=#000000]3.1 [/color][/font][font='黑体']红外光谱[/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211161501457322_9243_5853070_3.jpeg[/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=12px]图[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]1.[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]配合物的红外吸收光谱[/size][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=12px]Fig.1 IR spectrum ofcoordinationcompound[/size][/font][/align][font='times new roman']配合物的红外光谱以KBr为基质，4000～400 cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]1[/size][/sup][/font][font='times new roman']范围内测定(如图1)。根据文献中图谱对照解析，配位化合物的IR谱图的主要吸收峰为:3463[/font][font='times new roman']，[/font][font='times new roman']1624，1599，1516，1427，1122，1049[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]1[/size][/sup][/font][font='times new roman']。分别作如下指派：1624，1599，1427[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]1[/size][/sup][/font][font='times new roman']为苯环的特征吸收峰；3463[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]1[/size][/sup][/font][font='times new roman']为对氨基苯磺酸配体上-NH[/font][font='times new roman'][sub][size=13px]2[/size][/sub][/font][font='times new roman']的伸缩振动，1122、1049[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]1[/size][/sup][/font][font='times new roman']为对氨基苯磺酸配体上-SO[/font][font='times new roman'][sub][size=13px]3[/size][/sub][/font][font='times new roman']基团的不对称伸缩振和对称伸缩振动，1516[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]1[/size][/sup][/font][font='times new roman']为邻菲罗啉配体[/font][font='times new roman']C[/font][font='times new roman']-N的伸缩振动峰，724-843[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]1[/size][/sup][/font][font='times new roman']为邻菲罗啉配体上苯环面外的碳氢键的弯曲振动吸收峰。[/font] [font='times new roman']经与文献中[/font][font='times new roman']配体[/font][font='times new roman']ABS、phen的标准[/font][font='times new roman']红外谱图对[/font][font='times new roman']照分析[/font][font='times new roman']可[/font][font='times new roman']知[/font][font='times new roman']，对氨基苯磺酸配体上-NH[/font][font='times new roman'][sub][size=13px]2[/size][/sub][/font][font='times new roman']伸缩振动峰没有发生位移，表明金属离子未与氨基氮配位。而对氨基苯磺酸配体上-SO[/font][font='times new roman'][sub][size=13px]3[/size][/sub][/font][font='times new roman']基团的特征吸收峰发生了位移（1122~1118[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]1[/size][/sup][/font][font='times new roman']，[/font][font='times new roman']1049~1034[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]1[/size][/sup][/font][font='times new roman']），邻菲罗啉上的[/font][font='times new roman']C-N[/font][font='times new roman']特征吸收峰发生了位移（1516~1587[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']cm[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]-[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]1[/size][/sup][/font][font='times new roman']），归属于两[/font][font='times new roman']个[/font][font='times new roman']配体[/font][font='times new roman']参与锌离子[/font][font='times new roman']配位的结果[/font]。[font='黑体'][color=#000000]3.2 [/color][/font][font='黑体'][color=#000000]热重分析[/color][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211161501459512_358_5853070_3.jpeg[/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=12px]图[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]2.[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]配合物的热重曲线[/size][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=12px]Fig. 2 TGA of[/size][/font][font='times new roman'][size=12px] [/size][/font][font='times new roman'][size=12px]coordination[/size][/font][font='times new roman'][size=12px] [/size][/font][font='times new roman'][size=12px]compound[/size][/font][/align][font='times new roman']配合物的热重曲线如图[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']所示，由失重百分比推测，配合物在75[/font][font='宋体']℃开始[/font][font='times new roman']失去[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']个水[/font][font='times new roman']分子[/font][font='times new roman']，对应的[/font][font='times new roman']失重率为7.2[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']（[/font][font='times new roman']理论值[/font][font='times new roman']为7.3[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']），实验值与理论值基本一致。[/font][font='times new roman']随后TG曲线在285℃[/font][font='times new roman']后[/font][font='times new roman']急剧下降，表明配合物[/font][font='times new roman']结构坍塌[/font][font='times new roman']；在560℃[/font][font='times new roman']后继续[/font][font='times new roman']下降，表明配合物继续分解[/font][font='times new roman']，[/font][font='times new roman']760℃之后曲线趋于平稳，此时残余[/font][font='times new roman']物重约[/font][font='times new roman']20.7%[/font][font='times new roman']，推测为ZnO（理论值16.6[/font][font='times new roman']％[/font][font='times new roman']），残余量高于理论值，原因可能与配合物含碳量较高而产生的积碳效应有关[/font][font='宋体'][sup][size=13px][[/size][/sup][/font][font='宋体'][sup][size=13px]5[/size][/sup][/font][font='宋体'][sup][size=13px]][/size][/sup][/font][font='times new roman']。[/font][align=left][font='黑体']3.3 [/font][font='黑体']紫外光谱[/font][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211161501462780_686_5853070_3.png[/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=12px]图[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]3. [/size][/font][font='times new roman'][size=12px]配合物的紫外光谱[/size][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=12px]Fig.3 UV-vis ofcoordinationcompound[/size][/font][/align][font='times new roman'] 由图3可知，配合物的最大吸收峰为[/font][font='times new roman']292[/font][font='times new roman'] nm；与两个配体ABS(最大吸收峰为248 nm)、phen（两个吸收峰位置分别为229 nm，263 nm）不同，形成配合物后配体的吸收峰发生位移，由此推测两个配体与锌离子发生配位作用。[/font][align=left][font='黑体']3.4 荧光光谱[/font][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211161501464470_9673_5853070_3.png[/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=12px]图4. [/size][/font][font='times new roman'][size=12px]配体及[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]配合物的荧光光谱[/size][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=12px]Fig. 4 Fluorescentspectrum of [/size][/font][font='times new roman'][size=12px]ligands and [/size][/font][font='times new roman'][size=12px]coordination compound[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]s[/size][/font][/align] [font='times new roman']如图[/font][font='times new roman']4[/font][font='times new roman']所示，与配体[/font][font='times new roman']ABS（342 nm）[/font][font='times new roman']、[/font][font='times new roman']phen（361 nm，378 nm）[/font][font='times new roman']的荧光发射峰位置不同，目标产物双配体锌配合物[/font][font='times new roman']在300 nm波长激发下，显示[/font][font='times new roman']发射峰为[/font][font='times new roman']366 nm和382 nm[/font][font='times new roman']，且荧光强度大大增强。作为对照，[/font][font='times new roman']我们发现[/font][font='times new roman']单配体的配合物[/font][font='times new roman']Zn(ABS)[/font][font='times new roman']荧光光谱发射峰位置为348 nm，表明第二配体phen的引入，使得目标产物双配体配合物的荧光发射峰红移了18 nm，且显示出[/font][font='宋体']更强的荧光性能[/font][font='宋体']。[/font][font='times new roman']由于[/font][font='times new roman']Zn离子的d[/font][font='times new roman'][sup][size=13px]10[/size][/sup][/font][font='times new roman']电子构型难以[/font][font='times new roman']被氧化[/font][font='times new roman']或还原，[/font][font='times new roman']配合物的发光机制[/font][font='times new roman']可能归属于以配体为中心的电子跃迁[/font][font='times new roman']，由于phen的引入，使得双配体配合物的分子平面性更好，发光性能得以显著提高[/font][font='times new roman'][sup][size=13px][[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]6[/size][/sup][/font][font='times new roman'][sup][size=13px]][/size][/sup][/font][font='times new roman']。[/font][font='times new roman'][color=#000000]此外，进一步探究了配体ABS、phen、单配体锌配合物和双配体锌配合物在紫外灯254 nm照射下的发光性质（如图5）。结果发现，phen呈现蓝色，ABS和单配体锌配合物几乎不发光，而目标产物双配体锌的配合物显示出亮黄色，可以[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]明显看出[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]，[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]引入[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]第二配体[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]phen[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]后[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]，生成的[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]配合物[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]显示出[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]很好的[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]发[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]光性能[/color][/font][font='宋体'][color=#000000]。[/color][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211161501464053_1160_5853070_3.png[/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=12px]图5.[/size][/font][font='times new roman'][size=12px] 紫外灯下配体和配合物的发光图[/size][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=12px]Fig. 5 Luminescence of ligands and coordination[/size][/font][font='times new roman'][size=12px] [/size][/font][font='times new roman'][size=12px]compound[/size][/font][font='times new roman'][size=12px]s[/size][/font][font='times new roman'][size=12px] under [/size][/font][font='times new roman'][size=12px]UV[/size][/font][font='times new roman'][size=12px] lamps[/size][/font][/align][font='仿宋'][size=18px]3.结论[/size][/font][font='宋体']本[/font][font='宋体']文对所制备的双配体[/font][font='宋体']锌的[/font][font='宋体']混配[/font][font='宋体']配合物[/font][font='times new roman']［Zn(4-ABS)(phen)(H[/font][font='times new roman'][sub][size=13px]2[/size][/sub][/font][font='times new roman']O)］ClH[/font][font='times new roman'][sub][size=13px]2[/size][/sub][/font][font='times new roman']O[/font][color=#000000]进行了热重、红外、紫外、荧光等[/color][font='times new roman']表征，证实锌离子为四配位的结构，配位原子分别来[/font][font='times new roman']自对氨基苯磺酸上的1个O[/font][font='times new roman']、[/font][font='times new roman']邻菲罗啉上的2个N和1[/font][font='times new roman']个[/font][font='times new roman']H[/font][font='times new roman'][sub][size=13px]2[/size][/sub][/font][font='times new roman']O[/font][font='times new roman']。研究表明，由于第二配体phen的引入，[/font][font='times new roman']锌和对氨基苯磺酸的[/font][font='times new roman']配位键合方式发生了显著改变：当只有[/font][font='times new roman']对氨基苯磺酸[/font][font='times new roman']作为配体与锌离子结合时，[/font][font='times new roman']对氨基苯磺酸[/font][font='times new roman']是以双齿配体的形式参与到锌离子的配位中，[/font][font='times new roman']而[/font][font='times new roman']第二配体phen[/font][font='times new roman']的引入[/font][font='times new roman']，调控了[/font][font='times new roman']对氨基苯磺酸[/font][font='times new roman']的配位方式，[/font][font='times new roman']仅有[/font][font='times new roman']磺酸根的[/font][font='times new roman']O[/font][font='times new roman']参与[/font][font='times new roman']锌[/font][font='times new roman']的[/font][font='times new roman']配位[/font][font='times new roman']，[/font][font='times new roman']同时大大增强了配合物的荧光性能[/font][font='times new roman']，[/font][font='times new roman']这与[/font][font='times new roman']phen[/font][font='times new roman']自身结构中共轭体系大[/font][font='times new roman']、[/font][font='times new roman']电子流动性好密切相关[/font][font='times new roman']。[/font]

  • 有没有做核酸适配体检测方面的老师

    现在买到适配体是从文献里找的找生工合成的，结果怎么都结合不了靶标物质，传感体系加靶标和不加靶标基本没有变化，有没有做过老师有遇到这样的情况吗，大家是怎么解决的，是孵育条件的影响吗

  • 【原创大赛】【第十四届原创】流式细胞仪监测适配体与靶细胞的结合

    [align=center][size=24px]流式细胞仪监测适配体与靶细胞的结合[/size][/align][align=center]肖书棋 18122884967[/align][align=center][/align]本次说明是基于核酸适配体能与靶标进行特异性结合的原理，利用流式细胞仪监测适配体与靶细胞的结合状况，还能比较不同适配体与靶细胞之间的结合强度的比较；本次所使用的流式分析仪是BD FACSAria III。[font='times new roman'][size=16px]1.原理介绍：[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1.1核酸适配体：[/size][/font]核酸适配体(Aptamer，Apt）：是一段寡核苷酸序列（ssDNA或RNA），是利用指数富集的系统进化技术（the Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment，SELEX）在多样寡核苷酸序列的文库中，进行体外筛选得到。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111301026239049_1528_5413603_3.jpeg[/img][/align][align=center][size=13px]Aptamer结合靶标原理[/size][size=13px]图[/size][/align]如图所示，在合适的缓冲液环境下，单链寡核苷酸序列具有弯曲以及折叠成特定的三级空间结构的能力，该结构可以与靶分子特异性结合，SELEX技术就是应用该原理来进行选择的。将信息量巨大且随机的的寡核苷酸文库与靶标孵育，经过多轮的优胜劣汰和PCR扩增，最后得到能与靶标高亲和力性结合的寡核苷酸序列，即核酸适配体(Aptamer)。由于核酸适配体具有靶向特异性的特点，因此应用广泛；那么如何监测适配体靶向细胞亲和力的方法，就需要用到流式细胞术进行表征。[font='times new roman'][size=16px]1.2流式细胞仪原理：[/size][/font]流式细胞术能够快速检测细胞或者生物颗粒的特征，其检测灵敏，能够定性或者定量分析颗粒的参数，还具有细胞分选的功能，功能强大，分析参数多，实用性较强。流式细胞仪（flow cytometer，FCM）的设计应用了光学、细胞化学、电子学等技术，拥有较强大的细胞及微粒分析功能，在临床医学、免疫学、微生物学等等研究领域发挥着巨大的作用。流式分析可以检测细胞表面颗粒复杂程度、核酸以及蛋白质的含量、细胞表面积或者细胞表面的抗体、细胞受体等等，在多种研究领域起到重要作用。在本研究中应用流式分析细胞荧光强度的基本步骤原理是：（1）制备成单细胞悬液：将待测细胞预处理进行荧光标记后制成单细胞悬液，通过气压将流式管中的细胞悬液通过管道压进流动室，同时喷出的鞘液将细胞包裹，形成圆形的鞘流，细胞在鞘液的包被下单行排列，依次通过流动室检测区域。（2）形成光散射：激发光源侧向垂直射向单个细胞，含有荧光的细胞形成两种光：①前向散射光（forward scatter， FSC）：激光束照射细胞时，光束偏移量较小（10°以内），散射至前方，可用于检测细胞等粒子的表面信息，颗粒体积越大，信号越强。②侧向散射光（side scatter，SSC）激光束照射颗粒，产生偏移角度为直角的散射光，可反应细胞内含物的信息。（3）光信号转化成电信号：光信号导入到计算机中，依次形成电信号，再转化为数字信息。应用FlowJo软件处理数据，可以获得相应的散点图、直方图等形式，便于直观分析。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111301026241158_6946_5413603_3.jpeg[/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]流式分析基本原理图[/size][/font][/align][font='times new roman'][size=16px]2.分析步骤：[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2.1细胞预处理：[/size][/font]通过流式分析预处理，可以使细胞在特定的环境，与带有FAM荧光的适配体进行特异性结合，通过平行实验使细胞与不同的适配体文库进行标记，最终表征其荧光强度，进行亲和力的分析与比较。如表所示，流式分析条件为：[align=center][size=13px]流式细胞分析条件探寻[/size][/align][table][tr][td][align=center][size=13px][color=#000000]孵育时条件[/color][/size][/align][/td][td][size=13px][color=#000000]孵育时体积[/color][/size][/td][td=2,1][align=center][size=13px][color=#000000]孵育时浓度[/color][/size][/align][align=center][size=13px][color=#000000]细胞浓[/color][/size][size=13px][color=#000000]度 [/color][/size][size=13px][color=#000000]单链DNA浓度[/color][/size][/align][/td][td][align=center][size=13px][color=#000000]第二次洗涤用液[/color][/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=13px][color=#000000]4 ℃，30 min,BB,摇晃[/color][/size][/align][/td][td][align=center][size=13px][color=#000000]500 μL[/color][/size][/align][/td][td][size=13px][color=#000000]2.5×10^6个/mL[/color][/size][/td][td][align=center][size=13px][color=#000000]125 nM[/color][/size][/align][/td][td][align=center][size=13px][color=#000000]PBS x 2[/color][/size][/align][/td][/tr][/table]流式分析的大致步骤为：消化细胞、细胞与文库孵育、润洗重悬、上样分析。最终确定，初始的细胞悬液浓度为5×10[font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font] 个/mL，初始文库的浓度为250 nM；孵育时体系的总体积为250 L，细胞浓度为2.5×10[font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font]个/mL，适配体浓度为125 nM，环境为4 ℃、30 min，震荡。最后上样的细胞悬液体积为500 L，细胞浓度为2.5×10[font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font]个/mL。[align=left][font='times new roman'][size=16px]2.1.1材料准备：[/size][/font][/align][align=center][size=13px] 流式分析主要仪器与试剂[/size][/align][table][tr][td][align=center]名称[/align][/td][td][align=center]规格/型号[/align][/td][td][align=center]作用[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]流式细胞仪[/align][/td][td][align=center]FACSAria III[/align][/td][td][align=center]对细胞进行流式分析[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]可调式混匀仪[/align][/td][td][align=center]MX-S[/align][/td][td][align=center]混悬适配体悬液[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]震荡仪[/align][/td][td][align=center]MX-M[/align][/td][td][align=center]震荡孵育体系，防止细胞贴壁[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]制冷恒温金属浴[/align][/td][td][align=center]HX-20L[/align][/td][td][align=center]热击适配体，使核酸变性恢复到自由的无规则卷曲状态[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]显微镜[/align][/td][td][align=center]DMI1[/align][/td][td][align=center]观察细胞[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]水浴氮吹仪[/align][/td][td][align=center]FY-DCY12S[/align][/td][td][align=center]加热试剂[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]电子天平[/align][/td][td][align=center]JA2003[/align][/td][td][align=center]称量药品[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]离心管[/align][/td][td][align=center]15 mL×10、50mL×10[/align][/td][td][align=center]分装试剂，装载需离心的细胞[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]低吸附离心管[/align][/td][td][align=center]2 mL×20[/align][/td][td][align=center]装适配体悬液，减少适配体与细胞在管壁上的吸附[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]一次性使用吸管[/align][/td][td][align=center]3 mL×20[/align][/td][td][align=center]方便地吸取PBS[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]细胞刮刀[/align][/td][td][align=center]3010×1[/align][/td][td][align=center]刮下贴壁生长的细胞[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]PBS[/align][/td][td][align=center]50 mL×2[/align][/td][td][align=center]ScienCell[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]Cell Dissociation Solution[/align][/td][td][align=center]100 mL[/align][/td][td][align=center]消化细胞[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0.25%Trypsin-EDTA[/align][/td][td][align=center]100 mL[/align][/td][td][align=center]Gibco[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1×PBS缓冲液[/align][/td][td][align=center]500 mL[/align][/td][td][align=center]润洗细胞，重悬细胞[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]Cell Dissociation Solution[/align][/td][td][align=center]100 mL[/align][/td][td][align=center]消化细胞[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0.25%Trypsin-EDTA[/align][/td][td][align=center]100 mL[/align][/td][td][align=center]Gibco[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1×PBS缓冲液[/align][/td][td][align=center]500 mL[/align][/td][td][align=center]润洗细胞，重悬细胞[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]无酶无菌水[/align][/td][td][align=center]500 mL[/align][/td][td][align=center]溶解适配体文库[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]DMEM高糖培养基[/align][/td][td][align=center]50 mL[/align][/td][td][align=center]停止消化[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]细胞[/align][/td][td][align=center]＞5×10[font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font]个[/align][/td][td][align=center]作为目的细胞进行流式表征[/align][/td][/tr][/table]①配置Binding buffer（结合缓冲液BB）：配置10 g/L BSA：称量0.1g BSA，溶于10 mL Washing Buffer，过膜；取上述溶液5 mL，加入到445 mL Washing Buffer中；再加入500 L鲑精DNA，混匀。②将U盘格式化，提前打开制冰机和金属浴（95℃）；③37℃水浴：将无酶消化液、ECM、PBS（1）放入37℃水浴。④4℃冰敷：向泡沫盒中加碎冰，离心管架、温度计，准备4℃孵育环境，放入PBS和BB预冷。⑤打开显微镜（酒精擦拭载物台）。⑥打开离心机：120 g，1 min，25℃。[align=left][font='times new roman'][size=16px]2.1.2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]计数和文库预处理[/size][/font][/align]（1）细胞计数（20倍或者40倍显微镜）：①采用直接计数法，在显微镜中随机选择五个点进行计数取平均值，根据视野的面积以及T75培养瓶面积计算细胞总数，推出公式：Y为总细胞数；X为视野中细胞平均数；Y=27886.12X（20倍镜下）/Y=111111.11X（40倍镜下)。为了保证流式有足够的细胞，需要保证细胞总数＞5×10[font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font]个/mL。②计算BB体积：V=Y/（2×10[font='times new roman'][size=16px]7[/size][/font]）mL，用V体积的BB重悬细胞沉淀，可获得细胞浓度为5×10[font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font]个/mL的初始细胞悬液。（2）文库预处理：①将粉末状适配体文库进行离心：4000 r，5 min，4℃；使适配体粉末聚集在离心管底部，防止打开离心管时干粉状适配体飞出。②按照说明用一定体积的无酶无菌水溶解适配体，使适配体母液浓度在5 M。③取100 L母液，并加入900 LBB，使适配体浓度在500 nM。④再去上述液体500 L，并用BB稀释至浓度为250 nM，最终得到250 nM的适配体文库悬液。⑤95℃热击3 min，热击后放在泡沫盒中冰敷。[align=left][font='times new roman'][size=16px]2.1.3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞处理[/size][/font][/align]（1）消化：①PBS（37℃）润洗3次。②无酶消化液3 mL，消化9 min（等待期间准备好孵育用离心管；确认离心机参数为：120 rcf，1 min，25 ℃），吹打细胞使其从培养瓶表面脱落。直接转移至15mL离心管中，吹打混匀约20次（吹散细胞团，分离成单个细胞）。③显微镜观察确认细胞均从培养瓶上脱落，加入2-3 mL ECM至培养瓶中润洗，然后转移至上述离心管中，吹打终止消化。④离心：120 rcf，1 min，25℃。（等待期间各加入250 L待测文库至低吸附离心管中,注意要快速，吸取之前需要先混悬文库）。⑤离心之后小心倒出，用枪吸出剩下的ECM，加入2V L BB，重悬吸打混匀，获得5×10[font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font]个/mL的细胞悬液。[align=left][font='times new roman'][size=16px]2.1.4[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞与文库结合[/size][/font][/align]①孵育：分别加入250 μL上述细胞悬液至250 μL ssDNA文库中，进行孵育：4℃，30 min，打开摇床第二格。②等待期间离心机调至4℃；用密封袋装好洁净的1000 L枪头准备流式上样用；2.2.2.5 润洗重悬细胞①取出孵育好的体系，进行离心：4℃，120 g，1 min（等待期间准备好4℃ PBS)。②倒掉上清液，用枪头小心吸出管口残留的上清液，每管加500 L PBS（4℃）用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]吸打重悬约20次。③再次离心4℃，120 g，1 min。④第二次重悬：重复①-③步骤。⑤每管加入500 L PBS重悬，忽略实验损失，最后得到理论细胞浓度为2.5×10[font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font]个/mL的细胞悬液。[font='times new roman'][size=16px]2.2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]送样分析[/size][/font]FAM荧光染色较弱，在预处理之后应尽快进行流式分析，流式分析上样程序复杂，需要正确进行开机，测样，关机的步骤，才能够得到准确的数据。[align=left]（1）准备工作：[/align][align=left]准备1000 mL[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]，1000 mL 洁净枪头，流式管，质控微球。[/align][align=left]①开启液流系统：由上至下打开流式细胞仪开关；再开启计算机，打开FACSDiva软件，在“Cytometer仪器框”中确认流式细胞仪已与电脑连接，启动液流之前，确认液流系统水平，进行补充鞘液、去离子水、乙醇以及漂水，并清空废液。[/align][align=left]在“Cytometer”菜单中，点击“Fluidics Startup（启动液流系统）”，按照提示进行操作：确定气路和液路是从乙醇桶连接到了鞘液桶上：将蓝色液路管接到过滤器下方，透明气路管接到鞘液桶上；确定闭合的喷嘴是在流动检测池上。[/align][align=left]②将70 m的喷嘴放入装有超纯水的烧杯中，超声30 s，用无尘纸蘸干；抽出闭合的喷嘴；插入70 m的喷嘴（红圈朝上）。[/align][align=left]③点击“×steam”，开启液流，出现水滴状，调整使上端横线位于第二个或者第三个水滴的尾部，下端横线位于第三个或者第四个液滴的中部，调整好后关闭液流。[/align][align=left]（2）做质控：[/align][align=left]①用CS&T微球，用之前一定将微球甩匀（保证取出的微球呈均匀体系）用涡旋震荡；取一支洁净的流式管加入333 L的鞘液，再加一滴微球（用之前用混悬仪混匀，正常的微球为浑浊状）。[/align][align=left]②打开液流系统，在“Cytometer”菜单下点击“CST”；展开Setup Control窗口：在Characterize菜单中中选择“Check Performence”；在Configuration流式设置中：喷嘴的大小：选择70m，点击左下角“set configuration”，再点击“OK”。[/align][align=left]③选择微球的Lot ID：与微球瓶身上编号对应：10549。[/align][align=left]④敲弹准备好的微球悬液使其混匀，进行上样，打开液流；确认激发光源没问题即可关掉页面并关掉液流。[/align][align=left]（3）上样：[/align][align=left]①新建样品，并勾选FITC、SSC、FSC的H、A、W、log数据项。[/align][align=left]②作图：建立散点图，横坐标为FSC-H，纵坐标为SSC-H；再建立一个图：横坐标：FITC-H，纵坐标为：Count。[/align][align=left]③打开液流至3，选择对应样品；吹打混匀并放置样品，点击“LOAD”上样。调整FSC和SSC的电压，使散点图的中的点都集中在所圈的门中。（若散点偏右，则FSC电压过大，调整FSC电压使其变小，若散点偏上，则调整SSC使其变小。）当调整合适时点击“RECORD”记录数据。[/align][align=left]④计数完毕，调低流速，点击“unload”，选择第二个样品并重复第③步。[/align][align=left]⑤上样完毕之后，保存数据。[/align][align=left]（4）关机步骤：[/align][align=left]①上一管clean液，高速冲2 min；再上一管去离子水，高速冲5 min；关闭液流，检查液路系统。[/align][align=left]②在“Cytometer”菜单中，选择“shutdown”，根据指示操作：取下70 m的喷嘴，超声清洗，安装闭合喷嘴（红色点朝上）。[/align][align=left]③把液路和气路连接到乙醇桶上，用乙醇冲洗（先拔气路再拔液路）。[/align][align=left]④装一管clean液，清洗上样针和流动池。[/align][align=left]完成上述步骤之后即可关闭界面。[/align][align=left][/align][font='times new roman'][size=16px]2.3数据处理：[/size][/font]将原始数据用Flowjo软件进行处理，得到散点图以及荧光强度直方图，接下来通过举例来说明数据如何分析：（1） 散点图分析：[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111301026242555_5228_5413603_3.jpeg[/img][size=13px]数据处理分析散点图[/size][/align]该图为散点图，可以看出大体分为两个集团，散点图有两个集团说明体系中有两种细胞粒子，并且在该图片的左下角粒子较少，说明细胞碎片较少，在预处理时较好地保护了细胞的完整性。散点图中可以区分出整个上样的体系中主要含有两种大小的细胞颗粒，在预处理的过程中，无酶消化液的消化能力较弱，并且细胞团密度较大，细胞间黏连较多，在最后孵育结束用PBS进行重悬的时候仍然能够肉眼可见有白色细微絮状物。FSC值越大，代表颗粒的体积越大；SSC值越大，代表颗粒内部的复杂程度越高。故可初步判断，G1门中的颗粒为未消化完全的细胞团，而G2门中的颗粒为分散的单个细胞。（2） 直方图分析：[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111301026243736_5071_5413603_3.jpeg[/img][size=13px]数据处理分析直方图[/size][/align]图中为G2门选中的样品的荧光强度，该图中有两个峰，横坐标10[font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font]附近所产生的荧光峰可以判定是残留的细胞碎片，可视为背景值，横坐标10[font='times new roman'][size=16px]4[/size][/font]~10[font='times new roman'][size=16px]5[/size][/font]附近的峰代表四个适配体分别与细胞结合所产生的荧光强度，SYL3C-Aptamer结合偏移量最大，荧光较强，且高荧光事件次数较多，说明SYL3C-Aptamer与单个细胞的结合能力最强，并且G2门中的颗粒大多数为消化完全的单个细胞，呈现出较好的特异性。总之，该组结果对比体现出，单个细胞靶点较多，适配体与单个细胞结合能力较高，通过荧光强度波峰的偏移所反映的适配体与细胞特异性结合能力的大小依次为SYL3C-Aptamer＞EP166-Aptamer＞CA2-Aptamer＞ARC1172-Aptamer。同时，由图中可以看出：10th-ssDNA pool与SYL3C-Aptamer在10[font='times new roman'][size=16px]4[/size][/font]～10[font='times new roman'][size=16px]5[/size][/font]荧光强度波峰较高，说明二者与单个细胞的结合能力较好，结合位点较多，呈现良好的特异性和亲和性。SYL3-Aptamer荧光波峰明显右移，与单个细胞的结合位点较多。[font='times new roman'][size=16px]三、总结[/size][/font]本次说明旨在利用带荧光的适配体靶向特异性结合目的细胞的原理，利用流式细胞仪监测适配体结合靶细胞能力的强弱，同时还可以应用于不同适配体靶向同一种细胞的结合能力强弱的比较。进一步利用流式细胞仪，还可以测定适配体的Kd值；还可以根据预处理的条件不同，与对照组比较，来测定适配体靶向细胞的受体是位于细胞膜表面还是细胞内，从而进一步测定适配体的生物学稳定性。同时，流式细胞仪还有很多方面的应用，例如鉴定细菌、检测细胞凋亡等，一些抗体-细胞复合物的结合情况也能够由流式细胞仪来进行监测。 在进行流式上样的过程中，预处理、上样以及数据处理阶段都有需要注意的细节，例如：本次所使用的细胞为贴壁生长的内皮细胞，故在细胞预处理时需要先消化细胞；在进行上样前，需要将样品进行吸打混匀，以免细胞沉积在流式管底部，导致未吸取到样品；在应用流式细胞仪的过程中，使用前的维护、质控流程十分重要，该流程会直接影响所得数据的稳定性；不同的流式细胞仪的维护程序稍有不同，本次说明中的使用方法只适用于BD FACSAria III，流式细胞仪具有强大的分析功能，其在细胞研究中具有重要的作用。[align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align]

  • 【文献】－高效液相色谱手性拆分中的配体交换色谱手性固定相

    摘　要:综述了高效液相色谱配体交换色谱手性固定相的发展、制备及其在手性拆分中的应用,讨论了洗速、进样量、中心金属离子及其浓度、流动相pH 值、柱温、有机改性剂等对对映体分离的影响,阐述了对手性识别机理的认识.[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=23983]高效液相色谱手性拆分中的配体交换色谱手性固定相[/url]

  • 【求助】能否用NMR技术加以确定晶体中是(NO3)－还是(CO3)2－

    我一个氨基酸配体的La配合物晶体结构中可能含有NO3－或CO32－片段，但却无法从晶体结构加以区别，因为C-O和N-O的半径键长相似构型相近，也不能用电荷守恒加以排除，荷因H无法用X－ray观察，同时分子还含有酰胺基团和其他确定的NO3－。能否用NMR技术加以确认。

  • 毛细管电泳仪的使用以及在适配体筛选中的应用

    毛细管电泳仪的使用以及在适配体筛选中的应用

    [img=,690,709]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021504594653_5711_3237657_3.png!w690x709.jpg[/img][img=,690,706]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021505128213_4053_3237657_3.png!w690x706.jpg[/img][img=,690,696]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021505229231_2342_3237657_3.png!w690x696.jpg[/img][img=,690,335]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021505325433_629_3237657_3.png!w690x335.jpg[/img][img=,690,723]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021505426554_7016_3237657_3.png!w690x723.jpg[/img][img=,690,620]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021505519221_100_3237657_3.png!w690x620.jpg[/img][img=,690,423]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021506012977_9863_3237657_3.png!w690x423.jpg[/img][img=,690,712]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021506098857_8471_3237657_3.png!w690x712.jpg[/img][img=,690,683]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021506190366_9338_3237657_3.png!w690x683.jpg[/img][img=,690,270]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021506290914_2229_3237657_3.png!w690x270.jpg[/img][img=,690,672]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021506449530_4394_3237657_3.png!w690x672.jpg[/img][img=,690,236]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021506563800_9423_3237657_3.png!w690x236.jpg[/img]

  • 【求助】FLS920测试固体荧光

    新手求助：各位高手请帮帮忙，本人用FLS920测试固体粉末样品的荧光，根据文献先确定配体的激发大约在280-310nm,发射峰在490nm,然后测试配合物的荧光时，第一次在420nm出现较尖的峰，请问这种蓝移是合理的吗？接着做了很多次，用450nm激发，发射峰为一个非常宽的带状峰，大约在480-530nm范围内，请问我怎么确定到底配合物的荧光发射峰是什么样？样品的纯度对荧光很有影响吗？谢谢各位了。P.S. 金属是二价锰~~~

  • 亲和层析注意事项

    亲和层析过程中的注意事项1.上样亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短，通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件，包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等，以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。一般生物大分子和配体之间达到平衡的速度很慢，所以样品液的浓度不易过高，上样时流速应比较慢，以保证样品和亲和吸附剂有充分的接触时间进行吸附。特别是当配体和待分离的生物大分子的亲和力比较小或样品浓度较高、杂质较多时，可以在上样后停止流动，让样品在层析柱中反应一段时间，或者将上样后流出液进行二次上样，以增加吸附量。样品缓冲液的选择也是要使待分离的生物大分子与配体有较强的亲和力。另外样品缓冲液中一般有一定的的离子强度，以减小基质、配体与样品其它组分之间的非特异性吸附。生物分子间的亲和力是受温度影响的，通常亲和力随温度的升高而下降。所以在上样时可以选择适当较低的温度，使待分离的物质与配体有较大的亲和力，能够充分的结合；而在后面的洗脱过程可以选择适当较高的温度，使待分离的物质与配体的亲和力下降，以便于将待分离的物质从配体上洗脱下来。上样后用平衡洗脱液洗去未吸附在亲和吸附剂上的杂质。平衡缓冲液的流速可以快一些，但如果待分离物质与配体结合较弱，平衡缓冲液的流速还是较慢为宜。如果存在较强的非特异性吸附，可以用适当较高离子强度的平衡缓冲液进行洗涤，但应注意平衡缓冲液不应对待非特异性洗脱。2.洗脱亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种：特异性洗脱和非特异性洗脱。（1）特异性洗脱特异性洗脱是指利用洗脱液中的物质与待分离物质或与配体的亲和特性而将待分离物质从亲和吸附剂上洗脱下来。特异性洗脱也可以分为两种：一种是选择与配体有亲和力的物质进行洗脱，另一种是选择与待分离物质有亲和力的物质进行洗脱。前者在洗脱时，选择一种和配体亲和力较强的物质加入洗脱液，这种物质与待分离物质竞争对配体的结合，在适当的条件下，如这种物质与配体的亲和力强或浓度较大，配体就会基本被这种物质占据，原来与配体结合的待分离物质被取代而脱离配体，从而被洗脱下来。例如用凝集素作为配体分离糖蛋白时，可以用适当的单糖洗脱，单糖与糖蛋白竞争对凝集素的结合，可以将糖蛋白从凝集素上置换下来。后一种方法洗脱时，选择一种与待分离物质有较强亲和力的物质加入洗脱液，这种物质与配体竞争对待分离物质的结合，在在适当的条件下，如这种物质与待分离物质的亲和力强或浓度较大，待分离物质就会基本被这种物质结合而脱离配体，从而被洗脱下来。例如用染料作为配体分离脱氢酶时，可以选择NAD+进行洗脱，NAD+是脱氢酶的辅酶，它与脱氢酶的亲和力要强于染料，所以脱氢酶就会与NAD+结合而从配体上脱离。特异性洗脱方法的优点是特异性强，可以进一步消除非特异性吸附的影响，从而得到较高的分辨率。另外对于待分离物质与配体亲和力很强的情况，使用非特异性洗脱方法需要较强烈的洗脱条件，很可能使蛋白质等生物大分子变性，有时甚至只能使待分离的生物大分子变性才能够洗脱下来，使用特异性洗脱则可以避免这种情况。由于亲和吸附达到平衡比较慢，所以特异性洗脱往往需要较常的时间和较大的洗脱条件，可以通过适当的改变其它条件，如选择亲和力强的物质洗脱、加大洗脱液浓度等等，来缩小洗脱时间和洗脱体积。（2）非特异性洗脱非特异性洗脱是指通过改变洗脱缓冲液pH、离子强度、温度等条件，降低待分离物质与配体的亲和力而将待分离物质洗脱下来。当待分离物质与配体亲和力较小时，一般通过连续大体积平衡缓冲液冲洗，就可以在杂质之后将待分离物质洗脱下来，这种洗脱方式简单、条件温和，不会影响待分离物质的活性。但洗脱体积一般比较大，得到的待分离物质浓度较低。当待分离物质和配体结合较强时，可以通过选择适当的pH、离子强度等条件降低待分离物质与配体的亲和力，具体的条件需要在实验中摸索。可以选择梯度洗脱方式，这样可能将亲和力不同的物质分开。如果希望得到较高浓度的待分离物质，可以选择酸性或碱性洗脱液，或较高的离子强度一次快速洗脱，这样在较小的洗脱体积内就能将待分离物质洗脱出来。但选择洗脱液的pH、离子强度时应注意尽量不影响待分离物质的活性，而且洗脱后应注意中和酸碱，透析去除离子，以免待分离物质丧失活性。对于待分离物质与配体结合非常牢固时，可以使用较强的酸、碱或在洗脱液中加入脲、胍等变性剂使蛋白质等待分离物质变性，而从配体上解离出来。然后再通过适当的方法使待分离物质恢复活性。分离物质与配体的结合有明显影响，以免将待分离物质同时洗下。

  • 如何用分析纯级别的盐酸、硝酸配置一定体积分数的盐酸、硝酸溶液

    如何用分析纯级别的盐酸、硝酸配置一定体积分数的盐酸、硝酸溶液

    [size=18px]因为做实验需要用到体积分数为2%的硝酸和体积分数为3%的盐酸（GB33042-2016）,然后我们只有AR级别的盐酸、硝酸，我看到网上有用C1*V1=C2*V2的方法，比如我现有的盐酸65%，配100ml体积分数是3%的盐酸，0.65x=100*3%，所以取3/0.65=4.615ml分析纯盐酸,定容于500ml就得到了3%的盐酸，但是这个方法是配质量分数为3%的吧，配体积分数3%要怎样配置呢？真是难倒我了家人们，求大佬帮帮我要咋把这个实验进行下去啊。[/size][img=,690,445]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112081124134124_2082_5448029_3.png!w690x445.jpg[/img]

  • 请教配合物中非相邻的P-C偶合

    今天在文献中见到,有人在含有Ni-C键和膦配体的Ni络合物的核磁鉴定中,观测到膦配体中的31P和Ni-C键中的13C之间的偶合,从而证明配合物的结构.请问配合物中配体的杂核与配合物其他与金属成键原子之间的偶合是否是通常的现象?能否作为结构的可靠证据?

  • 【求助】关于配合物NMR分析的疑问: 配位如何影化学位移?

    对于金属配合物的NMR谱分析通常情况下采取与自由配体的图谱进行比较，但是配合物的NMR谱常较配体的复杂。有文献说配体中的质子化学位移向低场移动，这说明配位发生。但是，配位反应是理论上如何影响结构中的化学位移的？对于这类化合物分析是有无经验可循？

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