亲和层析预装柱

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  • 无锡中德伯尔生物技术有限公司 银牌1年
    400-860-5168转4030
    中德生物集团是国内最早进入食品安全行业的企业之一，也是国内专业从事食品安全领域检测技术及产品开发的高新技术企业，目前也是国内食品安全领域中最具影响力的企业之一。中德生物以高品质的产品在食品安全行业树立了良好的品牌，迄今为止开发了百余种快速检测产品：食品安全快速检测仪器：多参数食品安全检测仪、有毒有害食品安全检测仪、ATP检测仪、智能型干式食品安全检测仪等；ELISA酶联免疫试剂盒（激素类、真菌毒素类、抗生素类、违禁添加类）、真菌毒素亲和层析柱；胶体金检测卡、食品安全箱等，涵盖从农畜产品的种植、养殖到食品的加工、流通和公共场所食品卫生等各个领域，为国家各级各地监管机构（食品药品监督管理局、工商局、公安局、农贸市场、超市、质监局等）的食品安全监控工作提供了高效、灵敏、快速、廉价的解决方案。 食品安全检测仪器：多参数食品安全检测仪（50合一）、多参数食品安全检测仪（10合一）、多参数食品安全检测仪（20合一）、智能干式食品安全检测仪，农药残留检测仪、兽药残留检测仪、酶标仪、保健品化妆品检测仪、胶体金读卡仪、食品添加剂安全检测仪、药品安全检测仪、油品安全检测仪、肉制品安全检测仪、便携式食品安全分析仪、ATP检测仪等 食品安全检测试剂（理化）：水质理化箱、食品采样箱、食品中毒应急保障检测箱、罗丹明B试剂盒、罂粟壳检测卡、甲醛、吊白块试剂盒、漂白剂（二氧化硫）试剂盒，亚硝酸盐试剂盒、硫氰酸钠试剂盒、双氧水试剂盒、农药残留检测卡、余氯试剂盒、塑化剂快检试剂盒、地沟油速测盒、食用油酸价和过氧化值检测卡等上百种快速检测试剂盒 胶体金检测卡：瘦肉精检测卡、莱克检测卡、沙丁检测卡、孔雀石绿检测卡、呋喃唑酮检测卡、呋喃西林检测卡、呋喃它酮检测卡、呋喃妥因检测卡、氯霉素检测卡、磺胺检测卡、喹诺酮检测卡、四环素检测卡、三聚氰胺检测卡等（可检测乳制品、水产品禽类等组织、粮食、饲料等） 亲和层析柱：黄曲霉毒素M1亲和层析柱、黄曲霉毒素B1亲和层析柱、总黄曲霉毒素亲和层析柱、玉米赤霉烯酮亲和层析柱、呕吐毒素亲和层析柱等 保健品安全检测箱：西布曲明快筛试剂盒、那非类快筛试剂盒、拉非类快筛试剂盒、双胍类快筛试剂盒、二氢吡啶快筛试剂盒、苯二胺卓快筛试剂盒、酚酞快筛试剂盒、噻唑烷酮快筛试剂盒、白蛋白快筛试剂盒、褪黑素快筛试剂盒、磺胺类快速试剂盒等 化妆品安全检测箱：砷、汞、铅、甲醛快速筛查试剂盒、氯霉素快筛试剂盒、喹诺酮快筛试剂盒、甲硝唑快筛试剂盒、苯二胺类快筛试剂盒、林可霉素、酮康唑、氢醌、苯酚等快筛试剂盒等 药品安全检测箱：基本药物（沙丁胺醇）快筛试剂盒、基本药物（茶碱）、（氨茶碱）快筛试剂盒、 布洛芬、吲哚美辛、双氯芬酸、对乙酰氨基酚等快筛试剂盒 无锡中德伯尔生物技术有限公司（证券代码：839805）成立于2002年，是国内最早专业从事食品安全检测类产品研发、生产与销售的国家级重点高新技术企业。公司建立和完善了免疫检测技术、生化检测技术、自动化检测技术、微生物检测技术、信息化建设等五大平台，先后研制生产了约200余种食品安全快速检测产品，为客户提供了高效、灵敏、快速、价廉的解决方案。凭借强大制造水平和研发能力，中德生物多次承担国家级科研项目，如国家“十五”攻关项目、国家“863”、科技部“十五”国家重大科技专项、农业部“948”项目课题承担单位等。2010年国家科技部、农业部等5部委批准成立“食品安全检测试剂与装备产业技术创新战略联盟”，中德生物被推荐为第一届理事长单位。
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  • 北京博尔西科技有限公司
    北京博尔西科技有限公司致力于为企业提供诊断试剂原料及科研原料，拥有着动物免疫技术，抗原抗体纯化技术，蛋白纯化处理技术等，欢迎各界朋友指导和业务洽谈。产品包括：重组蛋白（肠激酶、链霉亲和素、蛋白AG等）、血凝试剂原料（兔脑粉、兔脑磷脂、牛凝血酶、组织因子）、多克隆单克隆抗体原料（羊抗鼠IgG、酶标荧光二抗）、血液制品（抗血清、小牛血清、新生牛血清、小鼠血清、红细胞）、填料（真菌素免疫亲和柱、亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等）。
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  • 苏州纳微科技有限公司
    纳微科技（NANO-MICRO）通过提供革命性的色谱层析填料或介质、色谱柱、预装柱及分离纯化技术服务，开创单分散色谱分析和制备的新时代。我们在天然产物、抗生素类、蛋白、多肽类、糖类、核酸、标准品、杂质等分离制备方面拥有广泛的专业技术，为业界提供数千种高质量产品类别，涵盖色谱层析微球填料如硅胶正相、反相、HILIC、手性、聚合物反相、离子交换、疏水、PROTEIN A亲和、金属螯合亲和、硼酸亲和、凝胶渗透(GPC)、固相萃取及特殊功能填料，以及各种规格的分析色谱柱、层析制备预装柱、标准微纳米颗粒、功能磁珠、磁珠母球以及光电微球等产品，还提供分离纯化整体解决方案、分析检测服务以及实验技能培训，拥有规模化生产、供货能力和质量保证，致力于为广大色谱分析制备、制药分离纯化以及光电显示产业提供可持续、高品质及创新性的产品和技术服务。 NANO-MICRO通过ISO9001：2008质量管理体系认证，确保产品的质量、批次间重复性，大规模出口高性能色谱填料到欧美、日本、韩国等国际知名制药和色谱企业，成为中国色谱行业的领军企业之一。
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  • 默克ProSep® Ultra Plus亲和层析填料 400-622-8982
    ProSep® Ultra Plus是一种蛋白A亲和层析填料，是当前市场上动态结合载量及通量较高的一种亲和树脂。根据在填料粒径与孔径上的优化，抗体动态载量随着每一代的ProSep®填料而增加。基于原有ProSep®填料的成熟技术，ProSep® Ultra Plus具有较同类树脂产品更大的处理能力和产率。此外，其硬性基质有利于后续规模放大，也增强了操作的灵活性，为抗体生产商节约设备，缩小占地面积，及在短期内生产大量高浓度产品提供了极大的便利。ProSep® Ultra Plus的优势在于：动态载量最高；成熟技术；通量高，实现最大产率；操作灵活；易于放大；运行成本低。了解更多：更多信息，e.g., 填料表现，详细性能列表等，可参见本页面核心参数 – 样本下载中的资料手册。
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    厂商： 默克工艺解决方案
    品牌： Millipore
    型号： ProSep® Ultra Plus
    价格： 面议
  • 默克预装层析柱Chromabolt 400-622-8982
    Chromabolt™ 是一款经过预先验证且预装有默克（Merck Millipore）层析介质的层析柱，可用于早期临床阶段生产。现有3 种尺寸规格可供用户选择——内径（i.d.）10、20 和32 cm，这些预装柱无需人工封装和清洗，大大节省了终端用户宝贵的时间和资源。使用Chromabolt™ 预装柱，可以让您将宝贵的时间用在制造产品上，而不是浪费在封装层析介质上。 优点：1. 消除了费时费力的封装2. 安装时间比传统层析柱更快3. 无需清洁硬件4. 规格齐全，适用于试验工厂应用和小批量生产5. 无需额外的资金投资或备件 了解更多：
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    厂商： 默克工艺解决方案
    品牌： Millipore
    型号： Chromabolt预装层析柱
    价格： 面议
  • 默克Fractogel®层析介质 400-622-8982
    Fractogel®介质为基于合成甲基丙烯酸酯的聚合物小球，提供优良的压力稳定性，从而能够采用高流率。视您的应用而定，我们可提供中等大小的M型填料（粒度40-90 µm）和较小的S型填料（粒度20-40 µm）。Fractogel®介质的独特组成，是纯化策略的有力工具。触手是长线形的聚合物链，携带功能配位体。全部触手与Fractogel®介质的羟基以共价键连接。该构型提供了高表面积，使生物分子不受空间位阻，与可及的配位体结合。许多配位体可用于各种层析应用（包括离子交换、亲和、疏水性相互作用和分子筛）。优点：- 更佳的产品收率官能团与目标分子之间的空间位阻最小，更易接触。与常规方法相比，触手介质提供了更高的结合力，特别是对于大型蛋白质、抗体、病毒和质粒。由于目标分子的结合更紧密，使用Fractogel®离子交换介质的捕获步骤，常比其他介质更高效，从而有更大的总收率。- 更安全的产品与基于碳水化合物的介质不同，Fractogel®介质不易为微生物降解。因此，内毒素污染风险大大减少。此外，Fractogel®介质可以多次清洁，也延长了其使用寿命。- 更低的运行费用由于Fractogel®介质的优良化学耐受性，循环次数可以很高。介质寿命极长，更换频率降至最低，从而减少了运行费用。分类：- 用于离子交换层析的Fractogel®介质可以实现从各种来源（例如细胞培养上清液、微生物表达系统、血浆等）中分离天然和重组蛋白质；有效地纯化肽和低分子量物质；DNA、内毒素和HCP，获得优良的对数减少值；安全去除病毒；很适合于有效纯化单克隆抗体。E.g., Fractogel® EMD TMAE, Fractogel® EMD TMAE Hicap, Fractogel® EMD DEAE, Fractogel® EMD SO3, Fractogel® EMD SE Hicap, Fractogel® EMD COO-, etc.- 用于金属螯合亲和层析的Fractogel®介质Fractogel® EMD Chelate选择亚氨基二乙酸作为功能亲和配基，非常适合于金属离子配位作用。金属离子的自由配位点，被用来与各种蛋白质和肽结合。适合于分离重组、组氨酸标签蛋白质；可应用于肽的分离、柱内的在位复性。- Fractogel® EMD BioSEC分子筛填料Fractogel® EMD BioSEC是基于交联聚甲基丙烯酸的分子筛层析填料，机械稳定性强，化学稳定性好，适合生产规模，可应用于精致纯化。更多信息，e.g., 详细参数，填料、预装柱货号信息等，可参见本页面核心参数 – 样本下载中的资料手册。
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    厂商： 默克工艺解决方案
    品牌： Millipore
    型号： Fractogel®
    价格： 面议
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  • 耶鲁大学医学院实验室的选择 | 月旭预装NTA和IDA镍亲和层析柱！
    2020年2月29日，月旭科技董事长兼总经理屠炳芳先生、国际市场总监赵枭先生前往访问耶鲁大学医学院实验室（Yale University School of Medicine）。针对耶鲁大学医学院实验室使用月旭科技蛋白纯化系列产品进行研究的情况，与研究学者展开了深切的沟通和交流。具体探讨了关于研究过程中产品使用心得及建议等问题，并就未来如何更好的为海外提供优质的产品进行了讨论。本次耶鲁大学医学院实验室中，采用了月旭科技预装NTA和IDA镍亲和层析柱。柱子采用1/16英寸接口可以直接与AKTA蛋白纯化仪相配套使用，也可随实验条件不同与注射器、恒流泵或其他色谱系统配套使用，性能稳定，重复性好、使用简单。月旭PreCot Ni 6FF（NTA）5ml和PreCot Ni 6FF（IDA）5ml两款预装柱可以满足大多数实验室级别的小量纯化His-tag融合蛋白的需求。同时也可以根据客户的需求预装不同规格的预装柱，方便客户进行规模化放大。下面，就跟着小编一起来具体了解一下吧！层析柱参数NTA和IDA填料性能对比注：二价的镍离子有六个螯合价位，Ni-NTA螯合了四价，剩余两价；而Ni-IDA螯合三价，剩余三价，因此Ni-IDA结合能力要比Ni-NTA强，在同样条件下Ni-IDA的载量要比Ni-NTA的高，但Ni-NTA更稳定，耐受更强的还原剂，镍离子不易脱落。因此需要根据不同纯化条件选择纯化所需的镍柱，以达到纯化的zui佳效果。此次交流活动，不仅收获了耶鲁大学医学院实验室和科研学者对月旭产品的一致认可。也标志着月旭科技在开拓海外市场中迈出了更加成功的一步。正如我们所倡导和坚信的，国产仪器及产品在某些方面比进口产品更好。而月旭科技作为民族品牌，励志要将国产产品推出国门，并通过不断创新和自我勉励，生产出更优质的产品，为我国的科学仪器事业发展贡献出自己的一份力量！并将“让国货在海外的舞台上发光发亮”的愿景铭记于心，脚踏实地走好每一段奋斗拼搏的路！
    时间： 2020-03-03
    作者： 月旭
  • 赛分科技推出填料新品-MabPurix亲和层析填料
    近日，赛分科技成功开发了首款亲和层析填料——MabPurix™ Protein A，该填料以琼脂糖凝胶为基质，表面键合配体Protein A，主要应用于生物制药领域——抗体的纯化。作为全球色谱产品最为完善的企业之一以及生物分离色谱的领航者，赛分科技十分重视新产品研发，目前的色谱分离填料已涵盖反相、正相、离子交换、手性、体积排阻、亲和、HILIC、离子排斥、配体交换等十几种类型，产品品种齐全，性能优越。其中，色谱填料产品包括硅胶基质和聚合物基质两大类，几十小类，可根据客户实际需要分别应用于不同的领域中。本次所开发的MabPurix™ Protein A填料是赛分科技推出的首款亲和层析填料，也是首次推出的以琼脂糖凝胶为基质的填料，此前，赛分科技的填料基质包括球形硅胶、不定形硅胶、聚甲基丙烯酸酯、PS/DVB等。与其它基质相比，琼脂糖基质填料具有更好的生物相容性。MabPurix™ Protein A的加入使得赛分科技的产品品种更加齐全，尤其对于生物分离色谱产品家族里，MabPurix™ Protein A的成功推出具有里程碑的意义。赛分科技的聚合物基质填料家族MabPurix™ 亲和层析填料 MabPurix™ 亲和层析填料专为大规模抗体纯化而设计，是由高纯度Protein A与高交联度琼脂糖偶联后的产物，用于从血清、腹水、细胞培养上清和细胞提取物中分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。Protein A是金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白，单链，它通过与免疫球蛋白的Fc区相互作用，可结合大多数哺乳动物的IgG，尤其对人IgG1、IgG2、IgG4，小鼠IgG 2a和IgG 2b具有高亲和力。MabPurix™ Protein A亲和层析填料具有高稳定性、高选择性、高效率的特点，是抗体纯化的优选。● 可根据用户的需要提供各种规格的预装柱；● 强化基质保证了高流速、低背压；● 特殊设计的定向键合技术保证了高的载量；● 可耐受苛刻的在线清洗条件；● 可以很容易的由小规模的实验室制备向大规模的工业化生产进行线性放大。更多信息请登录：http://www.sepax-tech.com.cn/products/gytl/juhe/infinity/99.html关于赛分科技 赛分科技有限公司（Sepax Technologies, Inc）总部位于美国特拉华州高新技术开发区，致力于开发和生产药物与生物大分子分离和纯化领域的技术和产品。赛分科技是集研发、生产和全球销售为一体的实业型企业。公司主要产品为液相色谱柱及耗材、固相萃取柱（SPE）及耗材、液相色谱填料以及分离纯化仪器设备。在液相色谱领域里，赛分科技已开发出了100多种不同型号的液相色谱材料，涵盖了反相、正相、超临界（SFC）、手性（Chiral）、离子交换、体积排阻、亲和、HILIC等各种类别，为世界范围内液相色谱产品最为完善的企业之一。 赛分科技的创新技术使之生产出具有最高分辨率及最高效的生物分离产品，包括体积排阻、离子交换、抗体分离、和糖类化合物分离色谱填料和色谱柱，可广泛地应用于单克隆抗体、各种蛋白、DNA、RNA、多肽、多糖和疫苗等生物样品的分析、分离和纯化。赛分科技先进的技术和完善的产品线已使赛分成为全球生物分离的领航者。 公司网站：www.sepax-tech.com.cn www.sepax-tech.com
    时间： 2012-04-17
    作者： 赛分科技
  • 亲和层析之蛋白A
    球菌的细胞壁，与IgG的Fc片段具有非常强的特异性，分子量约为42×103，如图所示。一般在蛋白 A亲和层析中，配基在中性pH条件下结合抗体，在酸性pH条件下与蛋白解离。‍蛋白A与抗体IgG的Fc片段结合模式基于蛋白 A 亲和层析的抗体捕获工艺较为稳定，但也存在一些不足，主要包括：（1）介质成本高。（2）配基易脱落。（3）洗脱条件苛刻。（4）Protein A介质的再生比较困难。针对以上问题，部分商业化蛋白A亲和层析介质中使用的基本为改造的蛋白A配基，改善了天然蛋白A的缺点，提高了耐碱能力和洗脱 pH。月旭科技推出的耐碱抗体亲和介质-耐碱Protein A Solid/耐碱Protein A 4FF， 由大肠杆菌表达，经层析纯化获得，纯化过程不适用抗体柱亲和层析，避免了产品中掺入无关IgG的可能，改配基pH耐受0.5M NaOH和0.5M HCl处理，不降解，抗体结合能力不变。该介质适合从大批培养液捕获单克隆抗体或Fc融合蛋白，也适合与从腹水或者血浆中捕获多克隆抗体。技术参数‍应用实例订货信息
    时间： 2021-09-10
    作者： 月旭
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亲和层析预装柱相关的方案

  • 低场核磁共振技术在层析填料孔径分布研究中的应用
    层析填料的基质一般为交联多糖（琼脂糖、葡聚糖等）、高分子聚合物等。一般根据层析技术原理（凝胶过滤、离子交换、亲和层析、疏水层析、反相层析）、目的物性质等分类选择填料，来满足过滤、分离纯化、批量吸附、提高载药量等生产需要。层析填料的孔道大小对生物蛋白产品的分离、装载等过程有重要的意义，孔道过大则会导致蛋白全部通过，孔道过小则导致蛋白无法进入孔中，无法有效过滤或装载[1]。蛋白分子尺寸从几纳米到几百纳米不等，因此对不同尺寸的目标对象有效地设计合适的孔径就显得非常关键。
  • 纳微盘点速览Protein A亲和抗体层析的突破性创新（二）
    近期华人抗体协会发布一篇文章介绍到连续制造工艺被FDA推崇备至：连续制造工艺基于其稳定高效率的优势，已经在其它许多行业成为极其成功的生产模型。然而很长一段时间以来，制药行业以严格监管和法规要求过于保守而被行业所诟病，故多数仍以批次生产为主。近年来，随着业界对于产能效率和生产成本的不断重视，生物制药行业对于连续工艺的关注度也在不断增加，希望能借以提高生产效率和设备利用率，且已有案例表明特定连续技术整合到现有生物药生产流程后，显现了诸多优势。作为全球药物监管的领先者，FDA一直是连续制造工艺的有力倡导者。早在2017年，FDA就发布了关于连续制造（Continues manufacturing, CM）的意见征求稿；2018年FDA 向三个连续制造项目提供近六百万美元资金，旨在帮助实施创新技术以提高产品质量并实现行业现代化；2019年2月26日，FDA颁布了涉及CM的关键指南草案《Quality Considerations for Continuous Manufacturing》，必将对此技术的推动起到巨大作用，同时FDA 局长 Scott Gottlieb 和药品中心主任 Janet Woodcock 也为CM高调站台，在随指南发布的声明中一再强调连续制造的优势，由此看来CM未来或许已不远。令人高兴的是，得益于纳微科技在纳米材料及键合等多方面取得的突破性进展，UniMab Protein A亲和层析介质因其诸多独有领先优势而特别适合用于连续柱色谱体系。
  • 谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验
    法谷胱甘肽-琼脂糖树脂的处理1. 轻轻顛倒盛有谷胱甘肽-琼脂糖树脂的容器，将树脂混成匀浆。2. 取部分匀浆放入 15 ml 聚丙烯管（每 100 ml 细菌培养物需要 2 ml 匀浆)。3.4° C500 g(2100r/min Sorvall SS-34 转头）离心 5 min, 小心去掉上清。4. 在树脂中加入 10 倍柱床体积的冷的 PBS, 顛倒数次，混合均匀，4° C 500 g(2100r/min SorvallSS-34 转头）离心 5 min, 小心去掉上清。5. 每毫升树脂加入 lml 冷的 PBS, 制成 50% 匀浆，顛倒数次，混合均匀，悬液冰上放置待用。
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亲和层析预装柱相关的资料

  • 亲和层析
    亲和层析
    文档类型： 文档
    时间： 2009-03-30
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  • 亲和层析技术
    亲和层析技术
    文档类型： 文档
    时间： 2013-04-09
    下载量： 11次
  • 亲和层析手册
    亲和层析手册
    文档类型： 文档
    时间： 2010-09-02
    下载量： 11次
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亲和层析预装柱相关的试剂

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亲和层析预装柱相关的论坛

  • 亲和层析法的原理及操作步骤

    [font=宋体]蛋白纯化介质在研究目的蛋白的结构、功能以及相互作用过程中起着至关重要的作用。亲和层析法因其出色的选择性、结合力和分辨率，成为一种常用的蛋白和抗体纯化方法。义翘神州提供的多种亲和纯化介质，不仅简单易用，而且适用于批量操作或重力驱动的纯化过程。这些介质能够高效、便捷、可靠地分离蛋白和抗体，为下游应用提供了强有力的支持，确保实验结果的可靠性和重复性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]亲和层析法的原理[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]亲和层析法是利用生物大分子与特定分子间特异性、可逆结合的特性，实现生物大分子的分离。作为蛋白质分离的有效手段，通常仅需一步操作，即可获得高纯度的蛋白质。在亲和层析中，蛋白质的分离基于其与特定配体的特异性相互作用，而非共价结合的能力。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]凝胶过滤层析，又称分子筛层析法，是一种独特的蛋白质分离和纯化技术。当样本流经葡聚糖凝胶或琼脂糖凝胶等介质时，这些介质根据蛋白质的大小和形状进行筛选。经过这一过程，目的蛋白得以纯化，为后续的下游应用提供了高质量的原料。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]亲和层析操作步骤：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在进行亲和层析时，需将蛋白在适宜的条件下加载至柱子上，确保蛋白（或标签）与其配体之间能够发生特异性结合。随后，通过洗涤步骤，清除与固定相发生非特异性结合的污染蛋白，同时保持蛋白与配体之间的特异性相互作用不受干扰。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]接下来，采用含有竞争性分子的缓冲液进行洗脱，竞争性分子能够与配体结合，从而将目标蛋白从柱子上取代下来。这一步中，竞争分子通常会在后续的色谱流程或透析处理中予以去除。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]通过以上步骤，亲和层析成功实现了目标蛋白的纯化和分离，为后续的实验和应用提供了高质量的原料。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情请关注：[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-ac][b]亲和层析纯化蛋白[/b][/url][/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-ac[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 亲和层析注意事项

    亲和层析过程中的注意事项1.上样亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短，通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件，包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等，以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。一般生物大分子和配体之间达到平衡的速度很慢，所以样品液的浓度不易过高，上样时流速应比较慢，以保证样品和亲和吸附剂有充分的接触时间进行吸附。特别是当配体和待分离的生物大分子的亲和力比较小或样品浓度较高、杂质较多时，可以在上样后停止流动，让样品在层析柱中反应一段时间，或者将上样后流出液进行二次上样，以增加吸附量。样品缓冲液的选择也是要使待分离的生物大分子与配体有较强的亲和力。另外样品缓冲液中一般有一定的的离子强度，以减小基质、配体与样品其它组分之间的非特异性吸附。生物分子间的亲和力是受温度影响的，通常亲和力随温度的升高而下降。所以在上样时可以选择适当较低的温度，使待分离的物质与配体有较大的亲和力，能够充分的结合；而在后面的洗脱过程可以选择适当较高的温度，使待分离的物质与配体的亲和力下降，以便于将待分离的物质从配体上洗脱下来。上样后用平衡洗脱液洗去未吸附在亲和吸附剂上的杂质。平衡缓冲液的流速可以快一些，但如果待分离物质与配体结合较弱，平衡缓冲液的流速还是较慢为宜。如果存在较强的非特异性吸附，可以用适当较高离子强度的平衡缓冲液进行洗涤，但应注意平衡缓冲液不应对待非特异性洗脱。2.洗脱亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种：特异性洗脱和非特异性洗脱。（1）特异性洗脱特异性洗脱是指利用洗脱液中的物质与待分离物质或与配体的亲和特性而将待分离物质从亲和吸附剂上洗脱下来。特异性洗脱也可以分为两种：一种是选择与配体有亲和力的物质进行洗脱，另一种是选择与待分离物质有亲和力的物质进行洗脱。前者在洗脱时，选择一种和配体亲和力较强的物质加入洗脱液，这种物质与待分离物质竞争对配体的结合，在适当的条件下，如这种物质与配体的亲和力强或浓度较大，配体就会基本被这种物质占据，原来与配体结合的待分离物质被取代而脱离配体，从而被洗脱下来。例如用凝集素作为配体分离糖蛋白时，可以用适当的单糖洗脱，单糖与糖蛋白竞争对凝集素的结合，可以将糖蛋白从凝集素上置换下来。后一种方法洗脱时，选择一种与待分离物质有较强亲和力的物质加入洗脱液，这种物质与配体竞争对待分离物质的结合，在在适当的条件下，如这种物质与待分离物质的亲和力强或浓度较大，待分离物质就会基本被这种物质结合而脱离配体，从而被洗脱下来。例如用染料作为配体分离脱氢酶时，可以选择NAD+进行洗脱，NAD+是脱氢酶的辅酶，它与脱氢酶的亲和力要强于染料，所以脱氢酶就会与NAD+结合而从配体上脱离。特异性洗脱方法的优点是特异性强，可以进一步消除非特异性吸附的影响，从而得到较高的分辨率。另外对于待分离物质与配体亲和力很强的情况，使用非特异性洗脱方法需要较强烈的洗脱条件，很可能使蛋白质等生物大分子变性，有时甚至只能使待分离的生物大分子变性才能够洗脱下来，使用特异性洗脱则可以避免这种情况。由于亲和吸附达到平衡比较慢，所以特异性洗脱往往需要较常的时间和较大的洗脱条件，可以通过适当的改变其它条件，如选择亲和力强的物质洗脱、加大洗脱液浓度等等，来缩小洗脱时间和洗脱体积。（2）非特异性洗脱非特异性洗脱是指通过改变洗脱缓冲液pH、离子强度、温度等条件，降低待分离物质与配体的亲和力而将待分离物质洗脱下来。当待分离物质与配体亲和力较小时，一般通过连续大体积平衡缓冲液冲洗，就可以在杂质之后将待分离物质洗脱下来，这种洗脱方式简单、条件温和，不会影响待分离物质的活性。但洗脱体积一般比较大，得到的待分离物质浓度较低。当待分离物质和配体结合较强时，可以通过选择适当的pH、离子强度等条件降低待分离物质与配体的亲和力，具体的条件需要在实验中摸索。可以选择梯度洗脱方式，这样可能将亲和力不同的物质分开。如果希望得到较高浓度的待分离物质，可以选择酸性或碱性洗脱液，或较高的离子强度一次快速洗脱，这样在较小的洗脱体积内就能将待分离物质洗脱出来。但选择洗脱液的pH、离子强度时应注意尽量不影响待分离物质的活性，而且洗脱后应注意中和酸碱，透析去除离子，以免待分离物质丧失活性。对于待分离物质与配体结合非常牢固时，可以使用较强的酸、碱或在洗脱液中加入脲、胍等变性剂使蛋白质等待分离物质变性，而从配体上解离出来。然后再通过适当的方法使待分离物质恢复活性。分离物质与配体的结合有明显影响，以免将待分离物质同时洗下。

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