[color=#333333]组织破碎提取法是在常温液体状态下利用高速破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗透等技术,数分钟内对药材进行组织破碎、研磨至细微颗粒,通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与溶解,使药材组织细胞内的目标生物活性成分以最快的速度、最低的能耗、最大的收率迅速从细胞中解离出来进入溶剂体系中,实现药材组织细胞内外有效成分分子浓度的平衡,且不会破坏热敏成分、并达到快速绿色提取的效果。[/color]
1、高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度http://www.39kf.com/Txt2Img/ju.png此法适用于动物内脏组织、植物肉质http://www.39kf.com/Txt2Img/named.png子等。 2、玻璃匀浆器匀浆:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机http://www.39kf.com/Txt2Img/iuy87612.png高,适用于量少和动物脏器组织。 3、超声波处理法:用http://www.39kf.com/Txt2Img/2008-9-13.png定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法http://www.39kf.com/Txt2Img/kmmn675.png适用于微生物材料,用http://www.39kf.com/Txt2Img/datu.png肠杆菌制备各种酶,常选用50-100毫克菌体/毫升浓度,在1KG至10KG频率下处理10-15分钟,此法的缺点是在处理过程会产生大量的热,应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。 4、反复冻融法:将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。 5、化学处理法:有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏,细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果http://www.39kf.com/Txt2Img/877667jkdkk.png好。 无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使http://www.39kf.com/Txt2Img/jsdh766289sdmkxu.png些条件都要适合于目的物质的提取。
条形酵母是将酵母通过小孔注入到装有液体氮的气罐中压缩制成的。将有1mm的筛子扣入到装有10-20 ml球状酵母的50ml破碎罐的顶部,经过离心破碎变成了2L的条状物。压力是由人工用60ml的自由活塞注射器注入罐内,条状可以在-80C°下被保存。 使用上海净信JXFSTPRP全自动样品快速研磨仪对酵母进行研磨,将不锈钢钢珠和样本分别装入研磨钢罐中,然后放入到用聚苯乙烯盒子盛放的液氮中,当预冷冻过程结束后,时间一分钟左右,或者直到原来沸腾的液体氮恢复平静,将破碎罐从液氮中取出,并要将破碎罐沾有的液体全部清理干净,以避免在破碎过程中发生爆炸。研磨钢罐最好用坩埚钳或大镊子夹取出来,而且通常要带经过冷冻的手套,冻伤以免。 研磨钢罐中酵母量不要太多,否则可能会研磨不充分,留有残渣,一般为研磨钢罐的1/3左右为宜,把刚从液氮中取出的钢罐安装在净信JXFSTPRP全自动样本快速研磨仪中,分5次进行研磨,设置频率55hz,20s,每次间隔都把研磨罐放入液氮中冷却。 在每次破碎后都要将破碎罐取下,放入到液氮中进行冷冻,当液氮不在沸腾时,可以将钢罐取出,破碎可以继续进行。 经过100秒的破碎后,我们通过显微镜观察可以发现95%的酵母已经达到破碎效果,用于下一步的实验过程。剩余的酵母可以储存,备用。研磨钢罐和钢珠都可重复利用,破碎罐和破碎球可以用温的乙醇清洗,放到干燥处贮存。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502051131_534361_2983531_3.jpg http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502051131_534362_2983531_3.jpg
[b][font=微软雅黑][size=10.5pt]一、机械破碎法:[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器[/font] [font=微软雅黑]等将细胞破碎开来[/font] [font=微软雅黑]。[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]1. 高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]2. 玻璃匀浆器匀浆:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。[/size][/font][b][font=微软雅黑][size=10.5pt]二、物理破碎法:[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt]指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]1.用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂(借助超声的震动力破碎细胞壁和细胞器)。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]机制:可能与强声波作用溶液时,气泡产生、长大和破碎的空化现象有关,空化现象引起的冲击波和剪刀力使细胞裂解。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]超声波破碎的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度和细胞类型等。(使用时注意降温,防止过热)。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]2. 高压破碎:细胞悬浮液从高压室的环状隙喷射到静止的撞击环上,被迫改变方向经出口管流出。此过程中细胞经历了高速造成的剪切的碰撞及高压到常压的变化,从而破碎释放内含物。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]这是一种温和的、彻底破碎细胞的较理想的方法。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]3. 反复冻融法:将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。[/size][/font][b][font=微软雅黑][size=10.5pt]三、化学破碎法:[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜,使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变[/font] [font=微软雅黑]。[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠([/font]SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏。浓度一般为1mg/ml。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]四、酶学破碎法[/font] [font=微软雅黑]:[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]选用合适的酶,使细胞壁遭到破坏,进而在低渗溶液中将原生质体破碎开来。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]细菌细胞壁较厚,可采用溶菌酶处理效果更好。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]裂解液标准配方[/font]: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]综合叙述:无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸([/font]DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入PMSF也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且应该在破碎的同时多加几次;另外,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。[/size][/font]
[b][color=#ff0000] 绿色快速提取技术--组织破碎提取法[/color][/b] 推荐“绿色快速提取技术”--《中草药组织破碎提取法》(闪提)。该技术的核心就是:在室温和液体状态下,利用高速破碎、精准研磨、和超分子渗透等技术,对药材进行瞬间组织破碎、研磨至细微颗粒,使药材组织细胞内的目标生物活性成分以最快的速度(60秒完成)、最低的能耗、和最大的收率迅速从细胞中解离出来进入溶剂体系中,且不会破坏热敏成分,实现药材组织细胞内外有效成分分子浓度平衡,从而达到快速提取之目的。 中草药组织破碎提取器,运用上述技术,从容器底部进行精准研磨,快速完成提取,该技术已申请到了专利。 《医药工业发展规划指南》:提到“提高制药设备的集成化、连续化、自动化、信息化、智能化水平。”中药装备有其特殊性,中药的原料为中药材或中药饮片,存在“品种规格多,物料不规则、加工技术繁杂”等特点,尤其在前处理与提取环节,问题较为突出。建议在这两个环节增加关于中药生产关键技术的支持。[color=#ff0000]提取[/color]是制造各种中药片剂、丸剂、胶囊、冲剂、颗粒剂及注射剂等各种制剂的首要及核心关键工艺。传统提取技术中的煎煮法、回流法、浸泡法及晚近的超声波法等均存在有时间长、效率低、能耗高、浪费大、污染重等缺点,且对一些热不稳定性成分破坏严重。这些缺点的存在,直接对种植、运输、储存、加工、成本、环境、及可持续发展影响极大。工业和农业现代化、人类大健康产业的发展、实现绿色、生态、和谐的可持续发展社会呼唤创新性技术去克服这些制约因素。近年来出现的“闪式提取-《组织破碎提取法》”等中药超快速提取技术,将大大的提升中药生产效率,更好的满足绿色、生态的要求。 [img=,690,859]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907241406163853_6309_3382228_3.png!w690x859.jpg[/img]
一、产品介绍LCY6系列组织研磨仪是一种特殊的、快速的、高效率的、多试管的一致系统。它能将任何来源(包括土壤、植物和动物的组织/器官、细菌、酵母、真菌、孢子、古生物标本等)的原始DNA、RNA和蛋白质进行提取和纯化。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307261606_453907_2758009_3.jpg 二、应用范围1.适用于各种植物组织包括根、茎、叶、花、果、种子等样的研磨破碎;2.适用于各种动物组织包括大脑、心脏、肺、胃、肝脏、胸腺、肾脏、肠、淋巴结、肌肉、骨骼等样品的研磨破碎;3.适用于真菌、细菌等样品的研磨破碎;4.适用于食品、药品成分分析检测的研磨破碎;5.适用于易挥发样品包括煤炭、油页岩、蜡制品等样品的研磨破碎;6.适用于塑料、聚合物包括PE、PS、纺织品、树脂等样品的研磨破碎。 三、产品特点LCY6系列组织研磨仪与目前已有的其它样品制备方法相比,具有通用性广、高效灵活的优点。该系统避免了研磨、匀浆、超声波处理等传统方法的费力、耗时、低效等诸多缺点,可以高效、快速、稳定地裂解并纯化各种类型样品的核酸与蛋白。LCY6系列研磨机采用了特殊的垂直上下震动模式,通过研磨珠(氧化锆、钢珠、玻璃珠、陶瓷珠)的高频往复振动、撞击、剪切。快速的实现目的。使研磨的样品具有更加充分、更均匀、样品重复性更好、样品之间没有交叉污染,操作数量多,效果好。 1.高效快速的工作可以在1分钟内完成2×24、2×48、4×96个样品的研磨。省时省力,批间,批内差异小。抽提的蛋白比活更高,核酸片断更长。 2.无交叉污染 样品管在破碎过程中处于全封闭状态,可采用一次性离心管和珠子。样品完整保留在管内,避免样品间的交叉污染以及外界污染。 3.操作简便3.1 内置程序控制器,可对研磨时间、转子的振动频率等参数进行设置;3.2 人性化操作界面。 4.稳定性好4.1 采用垂直振荡方式,研磨更充分,稳定性更好;4.2 仪器运行过程中,噪音小于70dB,不会对其它实验或仪器产生干扰。 5.方便低温操作当需要低温研磨环境,可将放有样本的适配器浸入液氮中冷却1-2分钟,取出后移至主机快速固定即可开始研磨,不需要进行再次冷冻处理,节省液氮。 6.重复性好同一组织样本设定相同程序,获得相同的研磨效果。工作时间短,样本温度不会上升 四、技术参数应用领域组织研磨、细胞破碎、匀浆、材料分散、制备、样品混匀、振荡液晶显示微电脑控制,大屏幕5.7"TFT液晶屏,显示工作状态标准配制可选两款适配器标准配制可根椐用户的实验要求,配送两个标准的试剂盒,方便快速的做实验均质速度10—70 HZ/秒防震原理[/al
Fastwinbt MTM-60 多功能组织细胞研磨器在大量DNA样品提取中的强大作用作为一名植物分子生物学实验室的成员,我们经常会遇到大量提取DNA样品进行检测的实验,而成百上千的样品的DNA提取成为了这种检测的重要限速步骤。为了对上千株的油菜的基因组进行PCR检测,我不得不对它们的DNA分别进行提取。做过植物DNA样本提取的朋友都知道,研磨是这个简单实验中最最令人头疼的部分。我是一个比较懒惰的分子生物学科研人员,所以在开始这项头疼的研磨工作之前,我开始四处打听有没有方便快速的研磨的工具。进口的多样本自动研磨器都很贵,不适合我这种偶尔进行一次这种大规模研磨的需要;幸好,与此同时,同事向我推荐了下面Fastwinbt MTM-60 多功能组织细胞研磨器,几千块钱的价格,并且可以满足我的实验需求,我很满意。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/11/201211130911_403606_1306303_3.jpg 研磨样品的过程中,我发现油菜样品虽然比单子叶的水稻,小麦要容易研磨的多,但是与培养间嫩嫩的拟南芥相比还是有很大差异。方统公司提供的助研磨的小钢珠要重复使用,每次还需清洗灭菌,个人认为比较麻烦。为了提高研磨效率,我去批发市场买了很多自行车上用的滚珠子,每个样品放两颗,一次使用后扔掉,真是方便快捷。下面秀一下仪器的工作场面。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/11/201211130912_403607_1306303_3.jpg 怎么样,还不错吧?一次可以磨60个样品,让我的实验事半功倍。方统公司的售后服务还是很热情周到的,我用过之后,帮我解决遇到的问题,随访了好几年呢如果你也有类似的需求,不妨试一下。不过最后声明一下,我跟他们公司可没有任何关系哟,不是做广告,只是有了好的东西与大家分享一下。
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细胞壁,要采取专门的细胞破碎方法。1.机械破碎(1)研磨研磨是将剪碎的动物组织置于研钵或匀浆器中,加入少量石英砂研磨或匀浆,即可将动物细胞破碎,这种方法比较温和,适宜实验室使用。工业生产中可用电磨研磨。细菌和植物组织细胞的破碎也可用此法。(2)匀浆匀浆这是一种较剧烈的破碎细胞的方法,通常可先用家用食品加工机将组织打碎,然后再用10000r/min-20000r/min 的内刀式组织捣碎机(即高速分散器)将组织的细胞打碎,为了防止发热和升温过高,通常是转10秒-20秒,停10秒-20秒,可反复多次。(3)胶体磨胶体磨的基本原理是流体或半流体物料在离心力的作用下,强制通过高速相对运动的定齿与动齿之间,使物料受到强大的剪切力,磨擦力、高频振动和高速旋涡等复杂力等作用,有效地被粉碎、乳化、均质、混合,从而达到精细超微的效果。定转子间的高速相对运动是使胶体磨工作获得物理微细度的主要条件,只有提高磨盘的精密度与线速度,才能达到良好的加工效果。2. 物理破碎(1)压榨压榨是一种温和的、彻底破碎细胞的方法。在1000×105Pa-2000×105Pa 的高压下使几十毫升的细胞悬液通过一个小孔突然释放至常压,细胞将彻底破碎。这是一种较理想的破碎细胞的方法,但仪器费用较高。(2)冷热交替冷热交替是在90℃左右维持数分钟,立即放入冰浴中使之冷却,如此反复多次,绝大部分细胞可以被破碎,细菌或病毒中提取蛋白质和核酸时可用此技术。(3)反复冻融反复冻融是将待破碎的细胞冷至15℃-20℃,然后放于室温(或40℃)迅速融化,如此反复冻融多次,由于细胞内形成冰粒使剩余胞液的盐浓度增高而引起细胞破碎。(4)超声波超声波是借助超声波的振动力破碎细胞壁和细胞器。破碎微生物细菌和酵母菌时,时间要长一些,处理的效果与样品浓度和使用频率有关。使用时注意降温,防止过热。3.化学与生物化学破碎(1)有机溶剂有机溶剂是利用氯仿、甲苯、丙酮等脂溶性溶剂或SDS(十二烷基硫酸钠)等表面活性剂处理细胞,可将细胞膜溶解,从而使细胞破裂,此技术也可以与研磨法联合使用。(2)自溶自溶是将新鲜的生物材料存放于一定的pH 和适当的温度下,细胞结构在自身所具有的各种水解酶(如蛋白酶和酯酶等)的作用下发生溶解,使细胞内含物释放出来,此法称为自溶法。该法使用时要特别小心操作,因为水解酶不仅可以使细胞壁和膜破坏,同时也有可能会把某些要提取的有效成分分解。(3)溶胀溶胀是在低渗溶液和低浓度的稀盐溶液中,由于存在渗透压差,溶剂分子大量进入细胞,将细胞膜胀破释放出细胞内含物。(4)酶解酶解是利用各种水解酶,如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶和酯酶等,于37℃,pH8,处理15分钟,可以专一性地将细胞壁分解,释放出细胞内含物,酶解破碎适用于多种微生物。例如从某些细菌细胞提取质粒DNA 时,可采用溶菌酶(来自蛋清)破细胞壁,而在破酵母细胞时,常采用蜗牛酶(来自蜗牛),将酵母细胞悬于0.1mmol/L 柠檬酸一磷酸氢二钠缓冲液(pH=5.4)中,加1%蜗牛酶,在30℃处理30分钟,即可使大部分细胞壁破裂,如同时加入0.2%疏基乙醇效果会更好。此法可以与研磨联合使用
超声波细胞破碎仪是利用超声波在液体中的分散效应,使液体产生空化的作用,从而使液体中的固体颗粒或细胞组织破碎。常规使用方法是把要破碎的材料放到烧杯中,开电源设定时间(震动时间和间歇时间),将破碎仪的探头放到材料中。使用过程中,超声波发生器电路将50/60Hz的市电转换成18-21KHz的高频高压电能,因此破碎过程中会大量产热,一般在冰浴下破碎。超声波细胞破碎仪的两大组成部件为超声波发生器和换能器(有的配置有隔音箱)。1、超声波发生器:工作原理:由信号发生器来产生一个特定频率的信号,这个特定频率就是换能器的频率,一般应用在超声波设备中的超声波频率为20KHz、25KHz、28KHz、33KHz、40KHz、60KHz。2、换能器组件:换能器组件主要由换能器和变幅杆组成。3、隔音箱:可以有效地的降低工作过程中的所发出的噪音,保持实验室安静。超声波细胞破碎仪在我国的行业推广已进入成熟阶段,而应用仍不够普及!该仪器(设备)应用范围非常广泛,这是其它仪器设备所不能比拟的。也正因如此,该仪器(设备)的市场潜力很大,所以生产厂家也日趋增多,这也同时造成了超声清洗行业及市场的相对混乱,可以用八个字来形容“鱼龙混杂,良莠不齐”!超声波细胞破碎仪分类如下:一、按探头(“tip”)直径分类处理不用体积的样品需要选择不同“tip”头的超声波破碎仪。由于各制造厂家的产品结构不同,其“tip”头直径不尽相同。一般“tip”头从微量5mm(适合1ml处理量)到25mm(适合1000ml处理量),有连续流探头,处理量可达80升/小时。可能会发生磨损的高能应用中会用到可更换“tip”头。当能量通过“tip”头被传递时,金属表面留下痕迹的地方会发生腐蚀。随着时间的推移,发生腐蚀的地方会产生轻微的蚀损斑。“tip”头可以用砂纸或纱布来打磨,除非是损坏到一定的程度;当这种情况发生时,“tip”头将很难进行调谐频率,取而代之的可能是发出长而尖的噪音,最终产生裂纹。 要有效地加工给定剂量的样品,有两个主要的因素需要考虑:“tip”头尺寸和输出功率。这两个因素必须同时匹配才能获得最佳效果。小功率大“tip”头,则“tip”头无法工作;而太大的功率则“tip”头可能损坏。购买时请注意所需型号附件。二、按功率分类超声波细胞破碎仪的功率大小是客户的首选指标,它决定着被破碎物的数量、大小、质量及效果。所以各生产厂家对此指标也都非常重视。一般情况下,实验室、化验室、研究所、药品检验所等科研单位,使用的功率都不大,(一般在500W以下);而生物公司、制药厂、化工企业等生产单位,所用的功率大都在500W-2000W左右。由于各制造厂家的产品结构不同,其功率的标注方法也不尽相同。不过按照用户常用的惯例,一般有以下几种:50W、100W、150W、250W、300W、350W、500W、1000W、2000W。一般超声波细胞破碎仪输出功率可根据需要适度调节。 标准超声波细胞粉碎机产品的额定工作频率是20千赫兹。一些超声波细胞粉碎机有自动调谐功能可以使频率在一个小的范围内变化。
随着分子生物学的快速发展,许多实验的目标物质都是细胞内物质,要进行实验研究或产物收集就必须将细胞破壁,使产物得以释放,才能进一步提取,因此细胞破碎就变成了提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将常用的几种细胞破碎方法介绍如下。1.超声波破碎 利用超声波高强度声能产生的空化现象引起冲击波和剪切力进行细胞破碎。超声破碎的效率与超声频率、超声功率、处理时间、细胞浓度及处理量等因素有关。 不足及须加强的问题:超声波破碎在实验室规模应用较普遍,处理少量样品时操作简便,液量损失少,但超声波产生的化学自由基团可能使某些敏感性活性物质变性失活影响实验结果。且大容量装置声能利用率低,装置散热性差。2.生物酶溶法 就是用生物酶将细胞壁和细胞膜消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1.3-葡聚糖酶、蛋白酶等。 不足:易造成产物抑制作用,这可能是导致胞内物质释放率低的最主要因素。而且溶酶价格高,限制了大规模利用。若回收溶酶,则又增加分离纯化溶酶的操作。另外酶溶法通用性差,不同菌种需选择不同的酶。3.物理珠磨法 微生物细胞悬浮液与极细的研磨剂在搅拌浆作用下充分混合,珠子之间以及珠子和细胞之间和互相剪切、碰撞,使细胞壁破碎,释出内容物,在珠波分离器的协助下,珠子被滞留在破碎室内,浆液流出,从而实现连续操作,破碎中产生的热量由夹套中的冷却液带走。缺陷:效能利用率仅为1%左右,且破碎过程产生大量的热能无法利用。4.化学渗透法 某些有机溶剂(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使细胞内容物物有选择地渗透出来。其作用机理;化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。 不足:时间长,效率低;化学试剂毒性较强,同时对产物也有毒害作用,进一步分离时需要用透析等方法除去这些试剂;通用性差。
随着重组DNA技术得到广泛应用以来,生物技术发生了质的飞跃。很多基因工程产物都是胞内物质,必须将细胞破壁,使产物得以释放,才能进一步提取,因此细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将近年来常用的几种细胞破碎方法介绍一下。 1. 高压匀浆法 设备是高压匀浆器,它由高压泵和匀浆间组成,美国Microfluidics公司和ATS公司均有产品出售。其破碎机理:细胞在一系列过程中经历了高速造成的剪刀,碰撞以及由高压到常压的变化从而造成细胞的破碎。 存在的问题;较易造成堵塞的团状或丝状真菌,较小的革兰氏阳性首以及有些亚细胞器,质地坚硬,易损伤匀浆阀,也不适合用该法处理。 2. 高速珠磨法 设备是珠后机,瑞士WBC公司和德国西门子机械公司均制造各种型号的珠磨机,其破碎机下:微生物细胞悬浮液与极细的研磨剂在搅拌浆作用下充分混合,珠子之间以及珠子和细胞之间和互相剪切、碰撞,促使细胞壁破碎,释出内含物,在珠波分离器的协助下,珠子被滞留在破碎室内,浆液流出,从而实现连续操作,破碎中,生的热量由夹套中的冷却液带走。 存在的问题:操作参数多,一般赁经验估计并且珠子之间的液体损失30%左右。 3. 超声破碎 频高于15-20KHz的超声波在高强度声能输入下可以进行细胞破碎。其破碎机理:可能与空化现象引起的冲击波和剪切力有关。超声破碎的效率与声频、声能、处理时间、细胞浓度及首种类型等因素有关。 存在问题;超声波破碎在实验室规模应用较普遍,处理少量样品时操作简便,液量损失少,但是超声波产生的化学自由基团能使某些敏感性活性物质变性失活。而且大容量装置声能传递,散热均有困难。 4. 酶溶法 就是用生物酶将细胞壁和细胞腊消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1.3-葡聚糖酶、蛋白酶等。 存在的问题;易造成产物抑制作用,这可能是导致胞内物质释放率低的一个重要因素。而且溶酶价格高,限制了大规模利用。若回收溶酶,则又增加百分离纯化溶酶的操作。另外酶港法通用性差,不同菌种需选择不同的酶。 5. 化学渗透法 某些有机溶剂(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使内合物有选择地渗透出来。其作用机理;化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。 存在的问题;时间长,效率低;化学试剂毒性较强,同时对产物也有毒害作用,进一步分离时需要用透析等方法除去这些试剂;通用性差:某种试剂只能作用于某些特定类型的微生物细胞。 本文介绍了几种细胞破碎的方法,可谓各有千秋,在实际应用中,应尽量考虑全面,选择最科学、有效的方法。
[b]组织破碎提取器[img=,690,491]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/06/201706131532_01_3241243_3.jpg[/img]工作原理:中草药组织破碎提取器(ATS-150012AS)利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在常温液体状态下数秒内把植物组织破碎、研磨至细微颗粒状,通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与包容,使组织内有效成分分子迅速解离并进入到溶剂体系中,并迅速实现药材组织内外有效成分分子浓度的平衡,达到快速提取的效果。特点及用途:1、室温提取、保护成分:把溶解提取成分的溶剂装入提取容器内,再将适量中草药饮片也装入提取容器,物料和溶剂混合后在常温状态下进行组织破碎提取,有效的保护了热敏成分;2、剪切研磨、瞬间完成:提取器利用高速液体破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在60秒左右完成组织破碎提取过程;3、速度可调,对不同材料方便个性化处理;4、全不锈钢结构,耐各种有机溶剂;5、刀具与容器一体化设计,清洗更为容易, 一冲即可;6、该仪器为集成了高速液体破碎、高速研磨、高速匀浆、高速搅拌功能与优势为一体的设备;刮膜闪蒸仪[img=,690,491]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/06/201706131534_01_3241243_3.jpg[/img]工作原理:刮膜闪蒸仪(ASZ-2000AS)利用降膜和刮膜技术优势,使物料液体在刮板的作用下沿加热管壁呈膜状向下流动而进行传热和蒸发,优点是传热效率高,蒸发速度快,物料停留时间短,再根据液体气化的速度与温度、压力和表面积的关系,在真空状态下将各种因素达到最佳配合,从而形成了真空直流、连续进液、瞬间蒸发的新一代中草药提取液的快速浓缩设备。特点及用途:1、瞬间受热:被浓缩液体从进入系统到完成浓缩离开热源最长仅30秒,从而最大限度的避免了因长时间受热对有效成分的破坏;2、连续循环进液:尤其适用于大量溶液的浓缩任务,整个过程有进液控制、 蒸发分离及浓缩液和溶剂回收来完成;3、最适用于易热变的物质及易发泡、粘稠度高的物质的浓缩、提纯、脱色、除臭、脱气;4、适用于制药、食品、化工等行业稀溶液的蒸馏、浓缩、分离任务。北京金鼐科技发展有限公司电话: 15515875551(刘)[/b]
[b]组织破碎提取器:[img=,690,491]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/06/201706131504_01_3241243_3.jpg[/img]工作原理:中草药组织破碎提取器(ATS-150012AS)利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在常温液体状态下数秒内把植物组织破碎、研磨至细微颗粒状,通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与包容,使组织内有效成分分子迅速解离并进入到溶剂体系中,并迅速实现药材组织内外有效成分分子浓度的平衡,达到快速提取的效果。特点及用途:1、室温提取、保护成分:把溶解提取成分的溶剂装入提取容器内,再将适量中草药饮片也装入提取容器,物料和溶剂混合后在常温状态下进行组织破碎提取,有效的保护了热敏成分;2、剪切研磨、瞬间完成:提取器利用高速液体破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在60秒左右完成组织破碎提取过程;3、速度可调,对不同材料方便个性化处理;4、全不锈钢结构,耐各种有机溶剂;5、刀具与容器一体化设计,清洗更为容易, 一冲即可;6、该仪器为集成了高速液体破碎、高速研磨、高速匀浆、高速搅拌功能与优势为一体的设备;7、广泛用于中草药提取、生物工程、农林化工、烟草化工、制药、保健食品、天然美容品、洗浴疗养品及轻工等领域。刮膜闪蒸仪:[/b][img=,690,491]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/06/201706131514_01_3241243_3.jpg[/img][b]工作原理:刮膜闪蒸仪(ASZ-2000AS)利用降膜和刮膜技术优势,使物料液体在刮板的作用下沿加热管壁呈膜状向下流动而进行传热和蒸发,优点是传热效率高,蒸发速度快,物料停留时间短,再根据液体气化的速度与温度、压力和表面积的关系,在真空状态下将各种因素达到最佳配合,从而形成了真空直流、连续进液、瞬间蒸发的新一代中草药提取液的快速浓缩设备。特点及用途:1、瞬间受热:被浓缩液体从进入系统到完成浓缩离开热源最长仅30秒,从而最大限度的避免了因长时间受热对有效成分的破坏;2、连续循环进液:尤其适用于大量溶液的浓缩任务,整个过程有进液控制、 蒸发分离及浓缩液和溶剂回收来完成;3、最适用于易热变的物质及易发泡、粘稠度高的物质的浓缩、提纯、脱色、除臭、脱气;4、适用于制药、食品、化工等行业稀溶液的蒸馏、浓缩、分离任务。北京金鼐科技发展有限公司电话: 15515875551(刘)[/b]
超声波细胞破碎仪是利用一种超声波在液体中产生的空化效应而使目标细胞破碎的多功能、多用途的仪器。超声波细胞破碎仪的原理:由换能器将电能转换为超声能,超声能量作用于液体介质产生密集的空泡,随着空泡的生长破裂,产生巨大的剪切力及高温高压,从而起到将目标细胞破碎乳化的目的。超声波细胞破碎仪用途广泛:1、超声波提取生物纳米在超声波化学反应中,由空化效应产生的强压力脉冲,能够产生许多化学合成所要求的高温高压,超声波化学合成所利用的正是空化效应的能量,利用这些能量能在一些特殊粉末表面合成出需要的纳米粒子。 2、超声波制药(1)注射用药的细化、均化——将磷脂类与胆固醇混合用适当方法与药物混合在水溶液中,经超声细化、均化得到更小的利于静脉注射的微小药物粒子。(2)中草药提取——利用超声分散破坏植物组织,加速溶剂穿透组织作用,提高中草药有效成分提取率。如金鸡纳树皮中全部生物碱用一般方法侵出需5小时以上,采用超声分散只要半小时即可完成。(3)制备混悬剂——在超声空化和强烈搅拌下,将一种固体药物分散在含有表面活性剂的水溶液中,可以形成1um左右口服或静脉注射混悬剂。例如“静注喜树碱混悬剂”、“肝脏造影剂”、“硫酸钡混悬剂”等。(4)疫苗制备——将细胞或病菌借助于超声作用将其杀死以后,再用适当方法制成疫苗。 3、超声波对化妆品的分散为了更进一步提取药物精华和粒子微细化,并节约生产成本,达到分散、乳化效果,使化妆品更深入渗透到肌肤里层,让肌肤很好的吸收,发挥药物的效力和作用,采用超声波乳化可达到非常理想的效果。 4、超声波对酒的醇化酒味醇厚的主要影响因素是酸的形成、酯化。刚出厂的白酒含有戍醇,有辛辣味,传统制造时,这种气味要经过很长时间贮藏才能使酒味变醇。而利用超声波处理的白酒可使酒的老熟时间缩短1/3到1/2。超声波细胞破碎仪可以并且已经被广泛用于生物化学、微生物学药理学、物理学、动物学、农学、医学、制药等领域的教学、科研、生产。
超声波细胞破碎仪是一种利用超声波在液体中产生空化效应的多功能、多用途仪器;用于多种动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎,同时可用来乳化、分立、裂解、匀化、提取、消泡、清晰、纳米材料的植被、分散及加速化学反应等。主要技术参数:1.超声功率常用超声输出功率有150W、250W、650W、1000W、1200W、1800W不等,亦有功率可调类型。因此超声破碎仪可以按照功率大小分150W到1800W等各个型号; 2.破碎容量超声波细胞破碎仪的破碎容量有0.5-500ml、0.5-600 ml、10-100 ml、50-1000 ml、550-1200 ml不等,所配破碎杯根据实验样品的量选择;一般根据超声功率和破碎容量即可选定型号。 3.温度控制一般超声输出功率650W以上都配有温度控制功能,可以防止样品过热破坏样品;4.控制面板控制面板有传统的旋钮式操作面板与较先进的大屏液晶显示两种类型,液晶显示操作简便,并带有程序存储功能。
破碎大量样品、低温破碎大量样品、破碎坚硬或韧性较强的样品时,人工手动研磨就成了实验猿的噩梦。当然,也有很多实验猿已经尝试过市面一些研磨机/超声波粉碎机,发现自己那顽固的样品依然无法被完全破碎/破碎过程损坏了目标成分而十分心塞。 分享个高通量高效破碎动植物组织和微生物的方法,别逗,当然不是靠徒手研磨能做到的,必须入手个神器——tissuelyser系列和JXFSTPRP系列多样品组织研磨机。对于动植物组织和微生物,包括一些难以破碎的组织样品,都可以使用这个研磨机对其进行完全粉碎。 特别地,一些尤其坚硬/韧性比较强的样品,或要求维持低温条件进行破碎提取的样品,需要结合液氮进行研磨,如:皮肤、硬骨骼、软骨、血管、结缔组织、种子等;使用普通机械研磨方法,很难既保证研磨破碎效果又保证样品一直处于低温状态,尤其是提取RNA、酶等对温度敏感的物质时,低温状态的控制显得尤为关键。入手一台上海净信的多样品组织研磨机,这些都不再是问题了。看招:注:由于样品的具体差异及实验要求的不同,下文数据部分请咨询厂家。第一部分 破碎动物组织1)样品:猪肌肉组织2)仪器:Tissuelyser多样品组织研磨机(品牌:上海净信);耗材:***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠3)步骤:a.取***克左右肌肉组织样品,均匀地剪切成少量样品块,分别放入若干***毫升的研磨离心管中。b.每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠和800μLPBS裂解液,分别盖紧管盖后,置入24孔研磨适配器中,再将适配器固定在研磨机中。c.将Tissuelyser多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹,研磨***秒,启动研磨器。d.研磨完全停止后,拿出研磨离心管,旋开管盖,取出研磨好的肌肉组织样品。4)结果:研磨后的效果如图1,猪肌肉组织成很细腻的泥浆状,说明Tissuelyser多样品组织研磨机对猪肉组织的研磨效果良好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150947_546190_3397_3.jpg图1 猪肌肉研磨对比第二部分 破碎植物组织1)样品:水稻叶片2)仪器: Tissuelyser多样品组织研磨机(品牌:上海净信);耗材:***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠3)步骤:a.取***克左右叶片组织样品,均匀地剪切成少量样品块,分别放入若干***毫升的研磨离心管中。b.每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠,分别盖紧管盖后,置入24孔研磨适配器中,再将适配器固定在研磨机中。c.将Tissuelyser多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹,研磨***秒,启动研磨器。d.研磨完全停止后,拿出研磨离心管,旋开管盖,取出研磨好的叶片组织样品。4)结果:研磨后的效果如图2,叶片组织成很细腻的泥浆状,说明Tissuelyser多样品组织研磨机对叶片组织的研磨效果良好。顺带附上研磨黄豆(坚硬的植物种子)的研磨对比图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150948_546191_3397_3.jpg图2 水稻叶片研磨对比http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150948_546192_3397_3.jpg图3 黄豆研磨对比第三部分 结合液氮使用tissuelyser研磨机 当样品死活无法破碎完全/样品傲娇要低温环境时,Tissuelyser多样品组织研磨机+液氮=问题轻松解决。以血管和植物叶片为例,具体操作方法如下: 血管: 取0.1克新鲜血管,用剪刀剪成若干小块,然后放入2毫升离心管中,加入1颗6mm研磨钢珠,盖上管盖。将整个试管放入液氮中冷冻1分钟左右或直到液氮不沸腾,然后放入机器处理30秒钟。取出样品管可见样品被破碎成乳白色粉末,然后加入提取缓冲液,可以进行接下来的后续提取,加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃以下。 叶片: 取0.2克植物叶片,清洁叶片表面后放入离心管中,加入1颗直径5mm不锈钢研磨钢珠,盖上管盖。将整个试管和适配器放入液氮中冷冻1分钟左右或直到液氮不沸腾,然后取出放入研磨机器中机器处理30秒钟。取出样品管可见叶片被破碎成绿色粉末,然后加入提取缓冲液,进行接下来的后续提取即可,加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃以下。后记 想入手这个神器,但又对研磨效果有所犹疑的小伙伴,现在上海净信部分研磨机产品可申请试用,是时候下手了。激动人心的还有,近期研磨机好价,试用爽了直接入手一台也是毫不含糊的。
目前国内对细胞破碎机的研究局限于实验研究,仅对某种结构均质阀的均质效果进行验证与分析,或是选择结构参数。实验研究的局限性使这种分析不够全面。高压细胞破碎机是目前生物工程领域广泛使用的一种细胞破碎机。作者结合近期国外对高压细胞破碎机的理论研究工作,应用半经验半理论的方法,分析探讨了高压细胞破碎机的均质理论。高压细胞破碎机的结构及工作原理: 高压细胞破碎机由高压泵和破碎阀两部分组成,高压泵通常采用柱塞往复泵,其结构与一般柱塞泵相同。破碎阀安装在柱塞泵的排出管路上,一般由阀芯和阀座构成,阀芯和阀座的结构形式对破碎效果、能耗以及阀的磨损影响极大。国外对破碎阀的结构进行了大量研究,设计出许多不同结构的破碎阀,研究主要围绕下列问题进行:1,在较低操作压力下提高破碎效果2,提高阀的使用寿命。意大利Niro Soavi公司为此,开发出R型细胞破碎阀,经过多年的实际使用,获得用户的认可。高压细胞破碎机工作原理: 高压细胞破碎机有一个或数个往复运动的柱塞,物料在柱塞作用下进入可调节压力大小的阀组中,经过特定宽度的限流缝隙(工作区)后,瞬间失压的物料以极高的流速(1000米/秒,最高可达1500米/秒)喷出,碰撞在阀组件之一的碰撞环上,产生三种效应: 空穴效应:被柱塞压缩的物料内积聚了极高的能量,通过限流缝隙时瞬间失压,造成高能释放引起空穴爆炸,致使物料强烈粉碎细化。(主要应用于均质) 撞击效应:物料通过可调节限流缝隙的以上述极高的线速度,喷射到用特殊材料制成的碰撞环上,造成物料粉碎。(主要应用于细胞破碎) 剪切效应:高速物料通过泵腔内通道和阀口狭缝时会产生剪切效应。(主要应用于乳化)经过这三种效应处理过的物料可均匀细化到0.1μm-2μm粒径。
[align=center] [b]中草药快速常温提取--组织破碎提取法(闪提)[/b][/align][align=left] 绿色提取(green extraction)是由本团队核心专家刘延泽教授于2013年在南京举行的全国第四届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上首次提出,绿色提取是指:利用安全、易得、无毒、易回收、无残留的适当溶剂,将目标生物活性成分以最快的速度、最低的消耗、最大的收率从动植物材料中转移出来,并且实现目标活性成分与母体残渣全利用、零排放、零污染的一种或一类提取技术。2014、2015年又分别在长沙、青岛举行的全国第五届、第六届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上进一步阐述其原理、应用成果和前景,得到了与会专家的热烈响应和一致认可。[/align] 绿色提取的基础是刘延泽教授等于1993年首次提出并在河南科学上发表的植物组织破碎提取法,当时主要是应用于热敏感成分丹宁及多元酚类化合物的提取。之后,相继在河南省、国家自然科学基金、科技部等的支持下研制出了实现这一方法的设备—中草药组织破碎提取器。经过20余年的实践证明,该方法不仅适用于几乎所有类别中药有效成分的提取,其独特的快速、节能、环保、可持续利用的优势是当今任何方法都无可比拟的,完全具有当今人类发展关键元素的“绿色科技、可持续利用、和谐自然”。但是,由于人们对新生事物的接受及其他多种因素的影响,目前经该方法研究的中草药尚不足百种,并且尽管几乎都取得了预期效果,但仍未真正应用到生产中去,与我们国家的近万种中草药和数十个应用领域相比仅仅沧海一粟,前景极其巨大。 本项目将在20余年成功实践的基础上,首先完善不同规格组织破碎提取器的研制和定型生产,满足本提取计划的需求,包括微量分析型(20ml)、实验研究型(2L)、中试规模型(200L)、和生产应用型(1000L);对一期目标中的药典提取物、单味中药提取物(药典)、国际标准提取物、特色中草药提取物(色素、香料、调味剂、添加剂)等进行提取。[b] [/b]中草药组织破碎提取器利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在室温液体状态下数秒内把植物组织破碎、研磨至细微颗粒状,通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与包容,使组织内有效成分分子迅速解离并进入到溶剂体系中,并迅速实现药材组织内外有效成分分子浓度的平衡,达到快速提取的效果。产品特点及用途:● 室温提取、保护成分: 把溶解提取成分的溶剂装入提取容器内,再将适量中草药饮片也装入提取容器,物料和溶剂混合后在室温状态下进行组织破碎提取,有效的保护了热敏成分;● 剪切研磨、瞬间完成: 提取器利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在30秒左右完成组织破碎提取过程;● 速度可调,对不同材料方便个性化处理;● 全不锈钢结构,耐各种有机溶剂;● 刀具与容器一体化设计,清洗更为容易,一冲即可;● 该仪器为集成了高速液体组织破碎、高速研磨、高速匀浆、高速搅拌功能与优势为一体的设备,广泛用于中草药提取、生物工程、农林化工、烟草化工、制药、保健食品、天然美容品、洗浴疗养品及轻工等领域。
[b][url=http://www.f-lab.cn/cell-disruptors/sonic-2000wt.html]温控高功率超声波细胞破碎仪SONIC-2000WT[/url][/b]是一种利用超声波探针在液体中产生空化效应的而制成的Sonicator[b]温控型号高功率超声波细胞破碎均质仪器[/b],具有温度显示控制功能避免样品过热,广泛用于细胞均质破碎,由超声波发生器,超声波转换器和超声波探针均质器件构成。用于多种动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎,可用来乳化、分立、裂解、匀化、提取、消泡、清晰、纳米材料的植被、分散及加速化学反应等。由超声波发生器,转换器和探针组成,具有温度检测器供选配,[img=超声波均质器]http://www.f-lab.cn/Upload/SONIC-1200W.jpg[/img]采用LCD屏清晰显示左右操作参数和选项:温度,时间,输出功率等,具有温度显示控制功能避免样品过热损坏[b]超声波细胞破碎仪:[url]http://www.f-lab.cn/cell-disruptors.html[/url][/b]
中草药提取是指将中草药本身所含的有效或有用成分与无效或无用的部分分离开来,其中的有用部分称之为提取物,无用部分称之为药渣。根据浓缩程度不同,中草药提取物可以是固体,也可以是稠稿和浓缩液。中草药提取物无论在中药制药工业、保健品与食品工业,还是化妆品工业、农兽药工业等都有着广泛的使用并起着不可替代的作用。传统提取技术包括压榨法、升华法、煎煮法、浸渍法、回流法、连续回流发、逆流萃取法、超声波法及其他辅助提取技术。绿色提取(green extraction)是由刘延泽教授于2013年在南京举行的全国第四届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上首次提出,绿色提取是指:利用安全、易得、无毒、易回收、无残留的适当溶剂,在常温状态下将目标生物活性成分以最快的速度、最低的消耗、最大的收率从动植物材料中转移出来,并且实现目标活性成分与母体残渣全利用、零排放、零污染的一种或一类提取技术。2014、2015年又分别在长沙、青岛举行的全国第五届、第六届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上进一步阐述其原理、应用成果和前景,得到了与会专家的热烈响应和一致认可。[b] 技术目的:[/b]节约能源、降低消耗,减少排放、保护环境,提高收率、节约资源,促进技术进步,解脱繁重劳动,增进人类健康[b]技术背景:[/b] 绿色提取的基础是刘延泽教授等于1993年首次提出并在河南科学上发表的植物组织破碎提取法,当时主要是应用于热敏感成分丹宁及多元酚类化合物的提取。之后,相继在河南省、国家自然科学基金、科技部等的支持下研制出了实现这一方法的设备—中草药组织破碎提取器(闪提)。经过20余年的实践证明,该方法不仅适用于几乎所有类别中药有效成分的提取,其独特的快速、节能、环保、可持续利用的优势是当今任何方法都无可比拟的,完全具有当今人类发展关键元素的“绿色科技、可持续利用、和谐自然”。[b]技术特点:[/b]1、室温提取、保护成分:[color=#333333]传统的提取方法,例如煎煮、回流等都需要加热,而组织破碎提取法在室温下即可操作,不需要加热,充分保护了热敏成分。[/color]2、快速提取、瞬间完成:[color=#333333]传统提取工艺需要数小时才能完成的提取,组织破碎提取法只需60秒左右即可完成。[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、绿色环保、节约能源[/color][color=#333333]由于提取过程不需要加热,[/color][color=#333333]提取后母体残渣全利用、零排放、零污染,[/color][color=#333333]而且提取时间短,所以整个提取过程节能能源、绿色环保。[/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]技术原理:[/color][/b][color=#333333]组织破碎提取法是在室温液体状态下利用高速破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗透等技术,数分钟内对药材进行组织破碎、研磨至细微颗粒,通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与溶解,使药材组织细胞内的目标生物活性成分以最快的速度、最低的能耗、最大的收率迅速从细胞中解离出来进入溶剂体系中,实现药材组织细胞内外有效成分分子浓度的平衡,且不会破坏热敏成分、并达到快速绿色提取的效果。[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]应用领域:[/color][/b][color=#333333]1[/color][color=#333333]、[/color]中药及天然药物成分提取;[color=#333333]2[/color][color=#333333]、化工领域提取等;[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、生物技术、化妆品、食品、保健品等领域。[/color][b][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333]提取方法比较:[/color][/b] [table][tr][td][b]提取方法[/b][/td][td] [align=center][b]优点[/b][/align] [/td][td] [align=center][b]缺点[/b][/align] [/td][/tr][tr][td]煎煮法[/td][td]经济、安全、易行[/td][td]选择性差、成分易破坏、后期处理困难[/td][/tr][tr][td]回流法[/td][td]选择性好、收率高[/td][td]受热长、效率低、成分易破坏[/td][/tr][tr][td]浸泡法[/td][td]简单、投资小、安全[/td][td]效率低、耗时长、易变质[/td][/tr][tr][td]蒸馏法[/td][td]选择性强、处理方便[/td][td]适用范围窄、需要专用设备[/td][/tr][tr][td]渗漉法[/td][td]室温、简单、节能[/td][td]费时、有污染[/td][/tr][tr][td]连续回流法[/td][td]省溶剂、效率高[/td][td]受热长、规模小、成分易破坏[/td][/tr][tr][td]超临界萃取[/td][td]近室温、安全、收率高[/td][td]设备复杂、投资大、规模小[/td][/tr][tr][td]超声提取法[/td][td]近室温、安全、收率高[/td][td]投资大、规模小、较耗时[/td][/tr][tr][td]微波萃取法[/td][td]快速、易行[/td][td]规模小、成分易变化[/td][/tr][tr][td]组织破碎提取法[/td][td]室温、快速、安全、节能,不破坏成分、规模可调、宜各种溶剂[/td][/tr][/table][b][color=#333333]研究论文、综述等检索:[/color][/b][color=#333333]一、中国专利、CNKI(2016年6月前)[/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、闪式提取 1072篇 [/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、组织破碎提取 82篇[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]相关论文:[/color][/b][color=#333333]1[/color][color=#333333]、《中国天然药物》2007-11 [/color][color=#333333]植物组织破碎提取法及闪式提取器的创制与实践 [/color][color=#333333]被引用:163 次,下载:855次[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、《中草药》2010-02[/color][color=#333333]用于中药提取的新技术进展 [/color][color=#333333]被引用:57 次,下载:4100次[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、《中国医院药学杂志》2015-01[/color][color=#333333]闪式提取技术在中药成分提取中的研究进展[/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]、《中药材》2015-07[/color][color=#333333]闪式提取在中药中的应用进展[/color][color=#333333] [/color]
超声波是物质介质中的一种弹性机械波,它是一种波动形式,因此它可以用于探测人体的生理及病理信息,既诊断超声。同时,它又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用.超声波是物质介质中的一种弹性机械波,它是一种波动形式,因此它可以用于探测人体的生理及病理信息,既诊断超声。同时,它又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用,能引起生物体的功能和结构发生变化,即超声生物效应。超声对细胞的作用主要有热效应,空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时,摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动,使部分能量转化为局部高热(42-43℃),因为正常组织的临界致死温度为45.7℃,而肿瘤组织比正常组织敏感性高,故在此温度下肿瘤细胞的代谢发生障碍,DNA、RNA、蛋白质合成受到影响,从而杀伤癌细胞而正常组织不受影响。空化效应是在超声照射下,生物体内形成空泡,随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡,使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。另外,空化泡破裂时产生瞬时高温(约5000℃)、高压(可达500×104Pa),可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子,由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应,超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化,引起细胞结构损伤。杀伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。工作原理 同时,它又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用.超声波是物质介质中的一种弹性机械波,它是一种波动形式,因此它可以用于探测人体的生理及病理信息,既诊断超声。同时,它又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用,能引起生物体的功能和结构发生变化,即超声生物效应。超声对细胞的作用主要有热效应,空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时,摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动,使部分能量转化为局部高热,因为正常组织的临界致死温度为45.7℃,而肿瘤组织比正常组织敏感性高,故在此温度下肿瘤细胞的代谢发生障碍,DNA、RNA、蛋白质合成受到影响,从而杀伤癌细胞而正常组织不受影响。空化效应是在超声照射下,生物体内形成空泡,随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡,使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。另外,空化泡破裂时产生瞬时高温、高压,可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子,由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应,超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化,引起细胞结构损伤。杀伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。超声波细胞破碎仪的原理并不是太神秘、太复杂。简单说就是将电能通过换能器转换为声能,这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡,这些小气泡迅速炸裂,产生的象小炸弹一样的能量,从而起到破碎细胞等物质的作用
大肠杆菌表达外源蛋白,在超声破碎的时候,用含有1%triton-X-100的PBS悬浮,然后超声的效果较好,1%triton-X-100的作用还是很明显的,对其他的一些细菌同样起作用,比如链霉菌。 细菌沉淀直接加样品1buffer,再加5ul的巯基乙醇,混匀,离心,煮沸10min,直接上样,染色脱色步骤如下:将胶放入适量的染色液微波炉里加热1min(下次适当补点醋酸即可),将染色液换成大量的水(自来水即可)在微波炉煮10min 就可以。 在表达重组蛋白后超声波破碎细胞,采用冰浴,400w,破2s停1s,但是不一会就产生大量泡沫,影响了破碎功率,pbs和tris缓冲液都是这样,最后都是破碎不完全,而我的目的蛋白就在这些未破碎的细胞中。1*会产生气泡是因为你的探头位置没放好。探头一定要接近底部,约1cm(我一般是距底部0.5mm)。功率根据仪器不同会有所不同,但你可以观察液面,有波动但不要太剧烈就好。2*破3S停10S,破个二三十次看看。 3*变幅杆位置摆放也要注意,听声音如果不对的话就要及时调整。另外可以从菌浓度方面考虑。 在破碎时试着加大体积,强度最好不要超过60%. 4*尝试超8s停8s,对有些菌体蛋白来说,你的方法很难散热,导致蛋白变性产生气泡,最好停顿时间稍长一些,这种情况多见于包涵体形式的蛋白。链霉菌(放线菌)超声破碎的,用的方法条件是什么?前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。使用超声破碎时采用的具体条件是:(1)取细菌的24 h培养液于5 000 r/min 下离心5 min收集菌体.(2)用pH 7.5的Na2HPO -NaH2PO 缓冲液洗涤3次,再用该缓冲液将菌体配成1:3的菌悬液.置于40 mL大塑料试管内.(3)将大塑料试管置于冰浴中,采用超声波破碎(功率200 W,1/2”探头,破碎30 s,间歇30 S).(4)破碎液于12 000 r/min下高速冷冻离心30 min,收集细胞碎片和上清夜. 超声破菌流程与 上述基本一致,就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或pH8的Tris-HCl,洗涤一次就可以。另外,超声剂量随样品量、菌体改变比较大,功率可以到400-600w,超5s,停5s,冰浴,要加终浓度1 mM的PMSF。为确定合适的超声强度和次数,有必要随时镜检观察菌体是否完全破碎。 放线菌属于原核生物系统进化树上的(G+C)摩尔百分含量(mol%)高的革兰氏阳性菌(Eubacteria)分枝类群,它虽然具有原核生物特有的分子生物学特性,但在其不同类群中,细胞壁的化学组分变化很大。 在做大肠杆菌超声时,采用的是400W,超5停5的方法,效果不错,但是用在链霉菌上,似乎没什么效果。会不会就是由于细胞壁组成差异造成的呢,因为大肠杆菌式属于革兰氏阴性菌的。 再有镜检是检验破碎效果,但是细胞破碎程度和我需要的酶获得之间有正比关系吗?破碎时间长也会影响到酶的活性。所以想问问anaisai战友,你提供的“功率200 W,1/2”探头,破碎30 s,间歇30 S”的条件好像是用于破碎链霉菌孢子的,也可以用于发酵离心后的菌泥吗?如果可以,你破碎的全程时间大概是多少呢? 如果你需要的是胞内酶,细胞破碎程度和需要的酶获得之间基本上有正比关系。破碎时间长的确会影响到酶的活性。这就需要在最佳的破碎时间和酶活性之间做出判断,最直接的办法是先绘制相关曲线(酶活性和时间的关系曲线)。 实验中,破碎的是棒状杆菌(也是很难破壁的G+菌),破碎时间控制在30min左右,酶活较好。
细胞,生活中无处不在,我们身体里有细胞:脑细胞,造血细胞……路边的小草也有细胞,就连我们看不到的细菌都是细胞构成的。细胞与生活息息相关,所以说细胞决定人类健康。 [b][url=http://www.xo-yq.net/]智能超声波细胞破碎仪[/url][/b],一款将电能通过转换器变成声能,然后这种能量通过液体介质而变成一个个小气泡,这些小气泡会在短时间内迅速炸裂,产生能量,从而起到破碎细胞的作用。 生病是人之常情,免不了吃药。药品是怎么来的呢? 首先通过观察细菌,通过分析细菌的组成,然后讲细胞提取出小部分,导入化合物,最后确定候选物,漫长的过程肯定需要[b]智能超声波细胞破碎仪[/b]啊。 南京先欧科技,专业制造[b]智能超声波细胞破碎仪[/b],[b]超声波细胞粉碎机、裂解仪[/b]……[img=智能超声波细胞破碎仪,50,50]http://www.xo-yq.net/img/%E6%99%BA%E8%83%BD%E8%B6%85%E5%A3%B0%E6%B3%A2%E7%BB%86%E8%83%9E%E7%A0%B4%E7%A2%8E%E4%BB%AA.jpg[/img]
http://www.instrument.com.cn/show/Breviary.asp?FileName=C162479%2Ejpg&iwidth=200&iHeight=200 北京鼎昊源科技有限公司 的 DHS TL2010S 中通量组织研磨仪(TL2010S)已参加“国产好仪器”活动并通过初审。自上市以来,这款产品已经被多家单位采用,如果您使用过此仪器设备或者对其有所了解,欢迎一起聊聊它各方面的情况。您还可以通过投票抽奖、参与调研等方式参与活动,并获得手机电子充值卡。【点击参与活动】 仪器简介: DHS TL2010S中通量组织研磨破碎仪/组织研磨机/研磨器好用的组织研磨仪!间歇振荡,冷冻研磨,功能强大!点击上方 免费索取资料-报价 ,或发送邮件、qq消息、免费拨打 4006-756-207,立即了解更多信息~点击上方 免费索取资料-报价 ,或发送邮件、qq消息、免费拨打 4006-756-207,立即了解更多信息~眼见为实?下方就有 TL系列组织研磨仪使用视频 供您随时观看哦~性能特点:*适用样品广泛:硬的,中硬性,软性的,脆性的,弹性的,含纤维的*粉碎原理:撞击力,摩擦力*配件齐全-----包括2×12孔2.0ml离心管,2×5孔5.0ml离心管,及25ml的研磨罐。*水平振荡研磨,效率更高。可以干磨,也可以湿磨*具有安全锁紧装置参数:*振荡速度(100–2000次/分钟)可调*可编程设置研磨时间、暂歇时间及循环数*一次最多研磨样品数量:24个2.0ml试管或10个5.0ml试管或2个25ml研磨罐*机体尺寸:320×160×450mm订货信息:货号描述0401265TL2010S中通量组织研磨仪主机0401265-12×12×2.0ml试管适配架0401265-22×5×5.0ml试管适配架0401265-325ml不锈钢研磨罐(一对)↓点击观看TL系列组织研磨仪使用视频↓点击上方 免费索取资料-报价 ,或发送邮件、qq消息、免费拨打 4006-756-207,立即了解更多信息~产品关键词:中通量组织冷冻研磨仪,组织研磨破碎仪,组织均质器,组织均相仪,组织研磨机,组织研磨器,组织研磨仪,样品研磨机,样品研磨器,样品研磨仪【了解更多此仪器设备的信息】
产品概述:震动球磨仪震动球磨仪GT100是针对现代实验室应用而设计生产,可对小量、大批次样品,如植物、动物组织细胞,以及对小量样品进行干磨、湿磨或者冷冻研磨。技术参数 应用粉碎、混合及核算提取样品前处理应用实例植物的根、茎、叶、谷物、种子;人体及动物的动物的组织、内脏、骨头、毛发;矿石、土壤、玻璃、陶瓷;橡胶、塑料制品、固废、电子废物;纸张、纺织品;化学品、药品、中药材、食品。样品类型硬的, 中硬性, 软性的, 脆性的, 弹性及纤维的工作原理:振动撞击研磨最大进样尺寸最大10mm最终出料粒度~ 5 μm批次加料量0.2-100ml振动频率设置200-2100转/分钟,连续可调,数字显示干磨是湿磨是低温研磨是研磨套件材料硬质刚, 不锈钢, 碳化钨, 玛瑙, 氧化锆, PTFE研磨罐尺寸微孔管处理数量1.5 ml / 5 ml / 10 ml / 25 ml / 35 ml / 50ml/100ml同时处理5×2、6×2、10×2、24×2、96×2个样品电源100-120 /200-240V, 50/60 Hz机体尺寸(宽x高x纵深)370 x 330 x 470 mm净重26 kg
我想问超声破碎仪能用于细胞器分离吗?有人做过相关实验吗?其中的原理是怎么样的呢,是用不同的能量打碎不同的细胞器吗?还是……?
一般都采用什么办法破碎细胞?谢谢
针对市面上眼花缭乱的研磨机,每一种产品的经销商都号称自己的研磨机是最好的。那么,实验室在选择研磨机时候,如何才能选择一款自己满意呢?看外观?看用户数量的多少?看售后服务质量?还是实验效果?本文主要针对市面上目前最流行的三种研磨机做对比分析。水平式组织研磨机垂直式组织研磨机三维一体式组织研磨机生产厂家名称高通量组织研磨仪全自动样品快速研磨仪多样品冷冻研磨机型号Tissuelyser-IITissuelyser-24、48、96、192JXFSTPRP-24机器实物图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502021450_533893_2983531_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502021450_533894_2983531_3.jpg http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502021451_533895_2983531_3.jpg运动方式水平左右运动上下垂直运动三维运动年代第一代研磨机第二代研磨机第三代研磨机适用范围各种植物组破碎各种动物组织破碎真菌、细菌破碎各种植物组破碎各种动物组织破碎真菌、细菌破碎食品、药品成分分析检测各种植物组破碎各种动物组织破碎真菌、细菌破碎
最近实验室准备购买一台超声波细胞破碎仪,希望帮忙推荐几款价廉物美的,经销商和我联系也可以,最好要把优惠的价格告诉我,谢谢 EMIAL:yangliang870221@126.com 电话:15173250907 杨
大家谈谈固体样品的破碎研磨解决方案,所使用的仪器,其性能如何?备注:比如说把500g的块状岩石,体积是2×2×2cm,最终处理为细度是1um的样品,该怎么办?