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植物活体成像设备

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  • 近红外活体荧光成像系统介绍

    [url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/fluobeam-imaging.html][b]近红外活体荧光成像系统[/b][/url]是开放式[b]活体荧光成像系统[/b]和[b]体内荧光成像系统[/b],是非侵入性[b]活体荧光成像系统品牌[/b]中具有适中的[b]活体荧光成像系统价格[/b],也可用于术中荧光成像.[b]近红外活体荧光成像系统[/b]fluobeam提供各种活体动物实时荧光图像和荧光成像视频,适合各种大小活体动物无创荧光成像,也可用于及手术或切除手术术中荧光成像.[b]近红外活体荧光成像系统[/b]fluobeam超级小巧而紧凑,适用于各种实验室研究,广泛兼容各种荧光探针,适用于不同的活体研究领域。[b]近红外活体荧光成像系统[/b]应用领域包括:• 肿瘤学淋巴结定位• 的分布和发展• 靶向探针• 心血管研究• 免疫学和传染病 [img=近红外活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluoptics_system_imaging.jpg[/img][b]近红外活体荧光成像系统[/b]fluobeam不同波长选择:• fluobeam800• fluobeam700• fluobeam650• fluobeam600• fluobeam500[img=近红外活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluobeam-results.png[/img]近红外活体荧光成像系统:[url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/fluobeam-imaging.html[/url]

  • 双波长活体荧光成像系统特点

    [url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/lab-flare.html][b]双波长活体荧光成像系统[/b][/url]是最先进的开放空间[b]近红外荧光成像系统[/b],能够真正同时获得彩色视频和两种不同波长的[b]近红外荧光图像,[/b]广泛用于[b]体外近红外荧光成像分析,活体近红外荧光成像分析,荧光造影剂研发,低温荧光层析成像[/b]等应用。双波长活体荧光成像系统是实验室近红外荧光成像研究的理想仪器,它提供A/D、D/A、TTL输入和输出,使复杂的重复实验自动化完成双波长活体荧光成像系统采用2个紧凑荧光成像头通过长距离六自由度运动支架和电磁制动臂连接到可移动的小车上,方便移动使用,并具有多种无菌操作和减少反射伪影的附件也可供使用。双波长活体荧光成像系统应用体外近红外荧光成像分析活体近红外荧光成像分析新型近红外荧光造影剂的研制低温荧光层析成像[img=双波长活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/flare-open-imaging-R1.JPG[/img]双波长活体荧光成像系统规格参数视场 从0.9厘米到25.3厘米不等。工作距离 从12"到18"[b]不等[/b]分辨率 从50微米到500微米光照波段 3(彩色视频,近红外通道# 1、近红外通道# 2)同时成像通道 3通道(彩色视频,近红外通道# 1、近红外通道# 2)无菌使用 通过专有的悬垂/盾牌组合。见附件标签。可移植性好 4医用个人脚轮刹车运输 可重复使用,防水,防火,防震运输箱声明 仅用于实验室研究使用。不用于人类或动物诊断。[img=双波长活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/FLARE-OPEN-imagin_300x239.png[/img][img=双波长活体荧光成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/FLARE-OPEN-imagin_300x239.png[/img]双波长活体荧光成像系统:[url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/lab-flare.html[/url]

  • 活体光学成像技术专栏| 活体成像中荧光蛋白的挑选指南

    活体光学成像技术专栏| 活体成像中荧光蛋白的挑选指南

    [font='Times New Roman'][font=宋体]引言[/font][/font][i][font='Times New Roman'][font=宋体]无数科学家的努力下,蛰居在水母的绿色荧光蛋白已经被导入到病毒、放线菌、酵母、植物、果蝇、线虫、小鼠、大鼠、人类细胞等几乎所有的模式生物,荧光蛋白的发现与应用被认为是点亮了生命科学,让黑暗中的生命活动被可视化的展示在科学家眼前。[/font][/font][/i][font='Times New Roman'][font=宋体]上期文章中,我们对比了活体光学成像的两种技术,生物发光和荧光成像的不同点。随着荧光标记技术的进一步发展,荧光成像的应用范围已经大大超过了生物发光,荧光成像已经可以满足绝大多数情况下的实验需求。[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]荧光成像需要对检测的细胞或分子进行荧光标记[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]。目前,主要有两种标记方法,第一种利用[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]内源荧光信号[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体],在细胞中表达荧光蛋白进行标记。第二种利用荧光分子对细胞、药物或纳米颗粒等分子进行标记。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]本期将为大家介绍荧光蛋白[/font][/font][font=宋体][font=宋体]的[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]选择方法![/font][/font][align=center][img=,581,228]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009271417587236_9957_1887_3.png!w581x228.jpg[/img][font='Times New Roman'][color=#191919] [/color][/font][/align][align=center][font='Times New Roman'][color=#191919]Rainbow of fluorescent proteins [Tsien lab][/color][/font][/align][align=center][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]选择荧光蛋白建议考虑的参数[/font][/color][/font][/align][font='Times New Roman'][color=#191919]1. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]激发波长[/font]/[font=Arial]发射波长[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:每一种荧光蛋白都有其独特的激发波长和发射波长,因此,选择的荧光蛋白必须是使用的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]成像[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]系统能够激发和检测到的。比如,使用的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]成像系统只有两个激发光源:[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]488 nm[font=Arial]和[/font][font=Times New Roman]561 nm[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]那就不能够选择远红外荧光蛋白。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]同时[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]使用超过一个荧光蛋白时,必须确保发射波长没有重叠。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]荧光蛋白应用于活体成像实验时,尽量选择红色或近红外的荧光蛋白,这类荧光蛋白的发射波长较长,具有更好的[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]组织[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]穿透[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]能力。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]2. [font=Arial]寡聚反应[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]早期开发的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]荧光蛋白易于寡聚化,[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]与[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]目的基因融合表达时可能会影响目的基因蛋白的生物学功能。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]因此[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=Arial]建议使用单体的荧光蛋白,比如[/font]mCherry[font=Arial]。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]3[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]. [font=Arial]亮度[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:荧光蛋白的亮度值由消光系数与量子产率的乘积计算得出。在许多情况下,将荧光蛋白的亮度与[/font]EGFP([font=Arial]设定为[/font][font=Times New Roman]1)[/font][font=Arial]进行比较,有一些荧光蛋白非常暗淡(例如[/font][font=Times New Roman]TagRFP657[/font][font=Arial],其具有亮度只有[/font][font=Times New Roman]0.1[/font][font=Arial])[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=Arial]因此[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]活体成像实验时,[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=Arial]亮度也需要考虑。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]4[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]. pH[font=Arial]稳定性[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]:如果计划在酸性环境中表达荧光蛋白,则此参数非常重要,一些荧光蛋白具有不同的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=宋体]激发[/font]/[font=宋体]发射[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]光谱(例如[/font]mKeima[font=Arial])或在[/font][font=Times New Roman]pH[/font][font=Arial]变化时荧光强度会发生改变(例如[/font][font=Times New Roman]pHluorin[/font][font=Arial],[/font][font=Times New Roman]pHTomato[/font][font=Arial])。[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919]5.[font=宋体]避免自发荧光:[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]生物体自身的很多物质具有较强的自发荧光,如指甲、毛发具有强烈的绿色背景信号,因此活体成像时需要对动物进行完全的脱毛处理或尽量避免绿色荧光蛋白,可选[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]RFP[font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]dsRed, mCherry, mTomato[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]等荧光蛋白。[/font][/color][/font][b][font='Times New Roman'][color=#ff0000] [/color][/font][font='Times New Roman'][font=Arial]在选择好了荧光蛋白后,后续就是做实验、拿数据、发文章了![/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=Arial]可[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]是选用什么成像[/font][/color][/font][font=Arial][color=#191919][font=Arial]设备[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]好呢?[url=http://dwz.date/cwes]点击了解更多详情![/url][/font][/color][/font]

  • 活体光学成像技术专栏| 荧光成像与生物发光成像技术的比较

    [i][font='Times New Roman'][font=宋体]引言[/font][/font][/i][font='Times New Roman'][font=宋体]在上一期的专栏里[/font][/font][font=宋体],我们对荧光成像和生物发光的基本原理进行了对比。同时也留下了几个问题:[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]针对我的课题[/font][/font][font=宋体],生物发光和荧光成像哪个好?什么情况下选择生物发光,什么情况下选择荧光成像。别急,今天将为大家解答关键问题:[/font][b][font=宋体][color=#ff0000]荧光成像和生物发光成像的优缺点是什么?[/color][/font][/b][align=center][font='Times New Roman']一、 [/font][b][font=宋体]荧光成像技术的优点[/font][/b][/align][font='Times New Roman'][font=宋体]相比生物发光成像[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光成像技术的优势主要表现在[/font][/font][font=宋体]:[/font][font='Times New Roman']1. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光蛋白及荧光染料的标记能力更强[/font][/font][font=宋体]。[/font][/b][font=宋体]荧光标记分子种类繁多,包括荧光蛋白、荧光染料、量子点标记等,可以对基因、蛋白、抗体、化合药物等进行标记。[/font][font=宋体][color=#ff0000]应用范围极广[/color][/font][font=宋体],可以对样本进行[/font][font=宋体][color=#ff0000]多色标记[/color][/font][font=宋体],一个样本同时获得多种细胞或药物的分布[/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman']2. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]信号强度[/font][/font][font=宋体]高[/font][/b][font=宋体]由于荧光成像的[/font][font=宋体][color=#ff0000]光子强度较生物发光更强[/color][/font][font=宋体][font=宋体],持续时间长,对[/font]C[/font][font='Times New Roman']CD[/font][font=宋体]的灵敏度要求相对较低,不需要必须配备低温冷[/font][font='Times New Roman']CCD[font=宋体]即可获得清晰的成像结果,节省实验成本和购置成本。[/font][/font][font='Times New Roman']3. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]实验成本低[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]成像过程简单[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]相比生物发光成像,成像前无需注射荧光素酶底物。有合适的激发光源照射就可以发出特定波长的发射光[/font][/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]只要荧光基团稳定,就可实现[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]随时激发随时发光随时检测[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]。[/font][/font][font='Times New Roman']4. [/font][b][font=宋体]从活体到离体均可成像[/font][/b][font=宋体][font=宋体]相比生物发光只能在活细胞内才会产生发光。荧光蛋白或荧光染料只需要保持荧光基团稳定即可稳定发光。可以在活体或离体组织器官进行观察,在实验前期荧光材料制备阶段,可以直接在[/font]E[/font][font='Times New Roman']P[font=宋体]管中进行成像观察[/font][/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman']5. [/font][b][font=宋体]应用范围广[/font][/b][font=宋体]相比生物发光成像,荧光成像技术应用范围极广。在肿瘤生长与转移、药物的分布与代谢、纳米颗粒的靶向性与代谢、植物基因的表达、生物相容性材料开发、新型标记技术的开发等多个研究中均可用到荧光成像技术。([/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]点击了解[/font]FOBI[font=宋体]整体荧光成像在上述领域的应用[/font][/color][/font][font=宋体])[/font][align=center][font='Times New Roman']二、 [b][font=宋体]生物发光技术的优点[/font][/b][/font][/align][font='Times New Roman'][font=宋体]相比荧光成像[/font][/font][font=宋体],生物发光成像的主要优势表现在:[/font][b][font=宋体]1[font=宋体]、特异性强,无自发荧光[/font][/font][/b][font=宋体]以荧光素酶作为体内报告源的生物发光方法,特异性极强。由于动物本身没有任何自发光,使得生物发光具有极低的背景和极高的信噪比。[/font][b][font=宋体]2[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]高灵敏度[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]由于生物体内很多物质在激发光的照射[/font][/font][font=宋体]下[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]也会发出荧光[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]这些非特异性荧光背景会影响检测灵敏度[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光成像的灵敏度最高可在动物体内检测到约[/font]10[/font][sup][font='Times New Roman']4[/font][/sup][font='Times New Roman'][font=宋体]细胞,而生物发光具有在动物体内监测[/font]10[/font][sup][font='Times New Roman']2[/font][/sup][font='Times New Roman'][font=宋体]数量级细胞的灵敏度。[/font][/font][b][font=宋体]3[font=宋体]、检测深度更高[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]对于需要在深部[/font][/font][font=宋体]组织[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]下进行的研究(检测的深度在[/font]3~4cm[font=宋体])[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]应用生物发光是最佳的选择[/font][/font][font=宋体]。[/font][b][font=宋体]4[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]精确定量[/font][/font][/b][font=宋体]由于荧光素酶基因是插入细胞染色体中稳定表达的,单位细胞的发光数量、发光条件相对稳定。即使标记细胞在动物体内有复杂的定位,亦可从动物体表的信号水平测量出发光细胞的相对数量。[/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]荧光成像和生物发光技术[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000],[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]是互为补充[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000],[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]分别满足不同的研究领域[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]。对于不同的研究,可根据两者的特定及实验要求,选择合适的方法。[/color][/font][table][tr][td][font='Times New Roman'] [/font][/td][td][align=center][font='Times New Roman']优点[/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]缺点[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]荧光成像技术[/font][/align][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]荧光染料、蛋白标记能力强,可用于多重标记[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]信号强度大,成像速度快[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]实验成本低[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=宋体][color=#333333]体内、体外,器官、活体均可成像。[/color][/font][font=Verdana][color=#333333] [/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]应用范围极广[/color][/font][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]非特异性荧光限制了灵敏度,体内检测最低约[font=Verdana]104[/font][font=宋体]细胞[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]检测深度受限制[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]较难精确体内定量[font=Verdana] [/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]生物发光技术[/font][/align][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]特异性强,无自发荧光[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]背景低[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]高灵敏度,在体内可检测到几百个细胞[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]可精确定量[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]信号较弱,检测时间较长,需要灵敏的[font=Verdana]CCD[/font][font=宋体]镜头,仪器价格贵[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]要求高[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]需要注入荧光素,实验成本高[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=宋体][color=#333333]只能用于细胞标记,应用范围窄。[/color][/font][/td][/tr][/table][i][font=宋体]结束语[/font][/i][font=宋体]随着活体成像技术的发展特别是荧光标记技术的发展,越来越多的生物学研究需要用到活体光学成像的方法。无论大家是选择生物发光或者荧光成像技术,苦恼总是随之而来,例如:[/font][font=宋体][color=#ff0000]生物素在体内可以维持多长时间?荧光蛋白和染料种类繁多,我该怎样选择呀?[/color][/font][font=宋体][font=宋体]别急,下期我们继续为大家介绍关于活体成像技术应用与选择的问题与难点。[/font][/font][font=宋体][font=宋体][url=http://dwz.date/cwes]点击了解更多活体成像技术的应用与仪器信息![/url][/font][/font][align=center][font='Times New Roman'][font=宋体]参考文献[/font][/font][/align][font='Segoe UI'][color=#222222]1. [/color][/font][font='Segoe UI'][color=#222222]Su, Y., Walker, J.R., Park, Y. [/color][/font][i][font='Segoe UI'][color=#222222]et al.[/color][/font][/i][font='Segoe UI'][color=#222222] Novel NanoLuc substrates enable bright two-population bioluminescence imaging in animals. [/color][/font][i][font='Segoe UI'][color=#222222]Nat Methods[/color][/font][/i][font='Segoe UI'][color=#222222] [/color][/font][b][font='Segoe UI'][color=#222222]17, [/color][/font][/b][font='Segoe UI'][color=#222222]852–860 (2020). [/color][/font][font='Segoe UI'][color=#222222]2. [/color][/font][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]M.Keyaerts[/color][/font][/url][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]V.Caveliers[/color][/font][/url][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]T.Lahoutte[/color][/font][/url][font='Segoe UI'][color=#222222] [/color][/font][url=https://www.sciencedirect.com/science/referenceworks/9780444536334][font='Segoe UI'][color=#222222]Comprehensive Biomedical Physics[/color][/font][/url][font=等线][color=#222222] [/color][/font][url=https://www.sciencedirect.com/science/referenceworks/9780128012383][font='Segoe UI'][color=#222222]Volume 4[/color][/font][/url][font='Segoe UI'][color=#222222], 2014, Pages 245-256.[/color][/font]

  • 活体光学成像技术专栏| 活体成像中荧光染料的选择与成像

    活体光学成像技术专栏| 活体成像中荧光染料的选择与成像

    [font='Times New Roman'][font=宋体]上期文章中,[/font][/font][font=宋体]我们介绍了活体成像实验中荧光蛋白的选择方法,荧光蛋白[/font][font=宋体]在[/font][font=宋体]肿瘤细胞株[/font][font=宋体]筛选[/font][font=宋体]、病毒载体[/font][font=宋体]表达[/font][font=宋体]、转基因小鼠[/font][font=宋体]构建[/font][font=宋体]等[/font][font=宋体]应用中被广泛使用[/font][font=宋体]([/font][font=宋体]链接[/font][font=宋体])[/font][font=宋体]。在药物分布、纳米颗粒示踪、干细胞追踪等实验中,往往需要使用荧光染料对材料或细胞进行标记。[/font][font=宋体]本期将为大家介绍[/font][font=宋体]活体成像实验中[/font][font=宋体]常用的荧光染料![/font][font=宋体][color=#ff0000]Cy5.5[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]678/701 nm[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]和[/font]Cy7[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]749/776 nm[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]是[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]对分子标记的[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]最优选择[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]之一;[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]而[/font]DiD[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]644/663 nm[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]、[/font]DiR[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]([/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]Ex/Em[font=宋体]:[/font][font=Times New Roman]748/780[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000])[/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]染料则常用于活体成像实验中对细胞进行标记。[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000]Cy5.5 [/color][/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]、[/font]Cy7[/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]避开[/font][/font][font=宋体]了[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]可见光区[/font][/font][font=宋体],[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]在生物组织中的穿透深度较大。水和血红蛋白[/font][/font][font=宋体]对[/font][font='Times New Roman']700[font=宋体]~[/font][font=Times New Roman]900 nm[/font][font=宋体]的[/font][/font][font=宋体]光[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]吸收都很少,[/font][/font][font=宋体]使得[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]近红外光可以[/font][/font][font=宋体]穿透[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]组织内部多达[/font]15 cm[font=宋体]。同时,这类染料还拥有紫外光区染料和同位素标记无法具备的生物安全性。[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/10/202010261000471506_4987_1887_3.png!w575x363.jpg[/img][/font][/font][align=center][font=宋体]DiD[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]DiR[/font][font=宋体]细胞膜荧光探针[/font][/align][font='Times New Roman'][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]DiD[/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体](红色荧光染料)[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]是亲脂性荧光染料家族成员之一,它可以用来[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]标记[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]细胞膜和其它脂溶性生物结构。当[/font]DiD[font=Arial]与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。[/font][font=Times New Roman]DiD[/font][font=Arial]可以用来对活细胞进行成像和流式分析。[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919]DiR[/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体](近红外荧光染料)[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]是一个亲脂性[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]的[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]花青[/font][/color][/font][font=宋体][color=#191919][font=宋体]染料[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#191919][font=Arial]。常用于标记细胞质膜。[/font]DiR [font=Arial]的两个[/font][font=Times New Roman]18-[/font][font=Arial]碳链插入到细胞膜,从而进行特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的染料转移。[/font][/color][/font][font=Arial][color=#191919]DiR[font=Arial]和其他细胞膜荧光染料如 [/font][font=Times New Roman]DiI[/font][font=Arial](橙色荧光),[/font][font=Times New Roman]DiO[/font][font=Arial](绿色荧光),[/font][font=Times New Roman]DiD[/font][font=Arial](红色荧光)配合使用,为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。[/font][/color][/font][font=Arial][color=#191919][font=Arial][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/10/202010261001339140_6935_1887_3.png!w572x222.jpg[/img][/font][/color][/font][font=Arial][font=宋体][font=宋体]当我们对分子或细胞成功标记后,需要选择合适的仪器进行成像获取实验数据。[/font][/font][/font]

  • 活体光学成像技术专栏| 光学活体成像前动物脱毛的必要性与操作

    活体光学成像技术专栏| 光学活体成像前动物脱毛的必要性与操作

    [font=宋体]在[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]上[/font][/font][font=宋体]几期的[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]文章中,[/font][/font][font=宋体]我们[/font][font=宋体]分别[/font][font=宋体]介绍[/font][font=宋体]了荧光成像与生物发光成像的比较、荧光蛋白、荧光染料的挑选方法。当大家选择了合适的标记方法并建立成像模型(药物注射、肿瘤注射等)后,需要对实验动物进行活体成像观察。[/font][b][font=宋体][color=#ff0000]在成像前,对实验动物进行完全脱毛是非常重要的步骤,直接关系能否获得高质量的成像数据。[/color][/font][/b][font=宋体]今天将为大家详细介绍成像前动物脱毛处理的方法与注意事项。[/font][align=center][b][font=宋体]脱毛的必要性[/font][/b][/align][font=宋体]1[font=宋体]、[/font][/font][font=宋体][color=#ff0000]毛发会阻挡、吸收和散射光线。[/color][/font][font=宋体][font=宋体]特别是黑色毛发比其他颜色的毛发会吸收更多的光,即使是白色毛发也会吸收光线,导致很难检测到荧光信号。近红外波段([/font]NIR spectrum[font=宋体])的染料在组织中有最小的散射和吸收,但依然会被毛发显著的吸收和散射 [/font][font=Times New Roman][1-2][/font][font=宋体]。研究表明,毛发的存在使皮下注射部位的荧光强度降低了[/font][font=Times New Roman]50% [3][/font][font=宋体]。因此在使用活体成像系统检测前,有必要将实验动物进行完全脱毛以减少对成像信号的干扰。[/font][/font][font='Times New Roman']2[font=宋体]、[/font][/font][font=宋体][color=#ff0000]毛发会产生强烈的自发荧光。[/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]动物组织特别是毛发和皮肤中存在内源性分子如弹性蛋白([/font][/font][font='Times New Roman']elastin[/font][font='Times New Roman'][font=宋体])、胶原蛋白([/font][/font][font='Times New Roman']collagen[/font][font='Times New Roman'][font=宋体])、色氨酸([/font][/font][font='Times New Roman']tryptophan[/font][font='Times New Roman'][font=宋体])、[/font][/font][font='Times New Roman']NADH[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体]卟啉类化合物([/font][/color][/font][font='Times New Roman']porphyrins[font=宋体])[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体]黄素类([/font][/color][/font][font='Times New Roman']flavins[/font][font='Times New Roman'][color=#333333][font=宋体])[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333][font=宋体]在波长<[/font]600 nm[font=宋体]的激发光下会产生强烈的自发荧光[/font][font=Times New Roman][4][/font][font=宋体]。这些自发荧光物质非特异性地被激发光源激发,导致在成像时产生很强的背景信号,将毛发完全脱掉可以有效降低背景信号。[/font][/color][/font][align=center][b][font=宋体]脱毛的材料准备[/font][/b][/align][font=宋体]可以说,对实验动物完全脱毛是活体成像实验的必要步骤之一。首先我们需要准备以下材料备用:[/font][table][tr][td][font=宋体]物品[/font][/td][td][font=宋体]作用[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]理发推剪[/font][/td][td][font=宋体]将大部分毛发进行去除[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]脱毛膏[/font][/td][td][font=宋体]去除剩下的绒毛以完全脱毛[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]棉签[/font][/td][td][font=宋体]用于涂抹和去除脱毛膏[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]温水[/font][/td][td][font=宋体]用于清洗脱毛膏与绒毛[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]纸巾或棉球[/font][/td][td][font=宋体]用于清洗脱毛膏和擦拭酒精[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]75%[font=宋体]酒精[/font][/font][/td][td][font=宋体]用于皮肤消毒、消除脱毛膏的味道防止动物啃咬[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]抗生素软膏(备选)[/font][/td][td][font=宋体]用于脱毛过程中偶尔的皮肤损伤消炎[/font][/td][/tr][/table][font=宋体][font=宋体]备注:脱毛膏可选进口品牌如[/font]Nair depilatory cream [font=宋体]、国产品牌如贞采源脱毛膏等均可。抗生素软膏可选进口的[/font][font=Times New Roman]Taro Pharmaceuticals[/font][font=宋体]三联抗生素、国产品牌如红霉素软膏均可。[/font][/font][align=center][b][font=宋体]脱毛的步骤[/font][/b][/align][font=宋体]在准备好材料后,按照以下步骤对实验动物进行完全的脱毛:[/font][font=宋体]1、[/font][font=宋体]动物麻醉,将实验动物使用麻醉机进行完全麻醉[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]理发推剪脱毛,将完全麻醉的动物使用理发推剪对感兴趣的成像区域进行脱毛,剔除大部分毛发。[/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体][font=宋体]用棉签蘸取脱毛膏覆盖在脱毛区域,均匀涂抹后轻轻按摩数秒,等待[/font]30[font=宋体]秒[/font][font=Times New Roman]-1 [/font][font=宋体]分钟。[/font][/font][font=宋体]4、[/font][font=宋体][font=宋体]用纸巾或棉球用温水沾湿,将脱毛膏顺着毛发的生长方向进行清洗,完全去除绒毛。若此时仍有少量毛发残留,可重新蘸取少量脱毛膏涂抹在毛发上,等待[/font]30[font=宋体]秒后再清洗脱毛膏。[/font][/font][font=宋体]5、[/font][font=宋体][font=宋体]用纸巾或棉球蘸取[/font]75%[font=宋体]消毒酒精,对脱毛区域进行再次清洁,消除脱毛膏的味道。[/font][/font][font=宋体]6、[/font][font=宋体]若皮肤有受伤的部位,涂抹上抗生素软膏,将动物放置在加热垫上等待苏醒。[/font][align=center][b][font=宋体]其他注意事项[/font][/b][/align][font=宋体]1、[/font][font=宋体][font=宋体]脱毛膏已被证明是有效的、无创伤、无毒的,但是使用时依然需要注意时间,过长的涂抹时间会导致皮肤损伤。用[/font]75%[font=宋体]消毒酒精完全清洗脱毛膏的味道可以防止动物对脱毛部位的啃咬。[/font][/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]皮肤损伤会到导致成像时出现强烈的背景荧光,理发推剪要小心操作,尽量防止大面积的皮肤损伤。[/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体]C57BL/6[font=宋体]小鼠[/font][font=宋体]脱毛后会扰乱正常的毛发生长周期,引起皮肤色素沉着,即皮肤变黑,导致成像信号被极大的衰减(可达到[/font]90%[font=宋体])[/font][font=Times New Roman][3][/font][font=宋体],因此脱毛步骤选择在成像前[/font][font=Times New Roman]1~2[/font][font=宋体]天进行最佳。此外,如果前期已经对[/font][font=Times New Roman]C57BL/6[/font][font=宋体]小鼠进行脱毛操作,则在成像前需要观察皮肤色素的沉着情况。[/font][/font][font=宋体]4[font=宋体]、可以用剃须刀片代替脱毛膏进行完全脱毛,但是需要练习和小心使用,否则容易割伤实验动物和实验人员。[/font][/font][font=宋体] [/font][font='Times New Roman'] [/font][align=center][b][font=宋体]毛发对成像质量的影响[/font][/b][/align][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/11/202011100939207430_3462_1887_3.png!w690x517.jpg[/img][font=宋体][font=宋体]如图所示,[/font]C57BL/6[font=宋体]小鼠通过尾静脉注射[/font][font=Times New Roman]ICG[/font][font=宋体]染料后使用理发推剪进行脱毛[/font][/font][font=宋体][font=宋体]。黄色框为剃毛较为干净的区域,蓝色框为残留有绒毛的区域,成像结果清楚显示:[/font]1[font=宋体]、脱毛更加干净的区域信号更强(平均荧光强度[/font][font=Times New Roman]5060[/font][font=宋体]);[/font][font=Times New Roman]2[/font][font=宋体]、残留绒毛的区域荧光信号由于被大量吸收,信号更低(平均荧光强度[/font][font=Times New Roman]1050.82[/font][font=宋体]);[/font][font=Times New Roman]3[/font][font=宋体]、颈部未脱毛区域,基本无无荧光信号(平均荧光强度[/font][font=Times New Roman]27.99[/font][font=宋体])【FOBI整体荧光成像系统拍摄】。[/font][/font][font=宋体]以上简单的例子即可表明毛发对成像质量的影响!以对腹腔中各脏器进行活体成像为例,标准的脱毛应该如下所示:完全去除绒毛并且脱毛范围需要稍大且不损伤小鼠皮肤。[/font][font=宋体][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/11/202011100939496128_1485_1887_3.png!w232x173.jpg[/img][/font][align=center][b][font=宋体]参考文献[/font][/b][/align][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]1[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Temporal Variations of Skin Pigmentation in C57Bl/6 Mice Affect Optical Bioluminescence[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413] [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Quantitation[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Allison Curtis[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413] [/color][/font][i][font='AdvTTe0754e31 . B'][color=#131413]et.al[/color][/font][/i][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Mol Imaging Biol 13:1114Y1123[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].2011.[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]2[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Simple generation of hairless mice for in vivo imaging[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Yoshikazu Hoshino[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Exp. Anim. 66(4), 437–445, 2017[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]3[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Optical Imaging on the IVIS SpectrumCT System: General and Technical Considerations[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413] [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]for 2D and 3D Imaging[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Jen-Chieh Tseng[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][i][font='AdvTTe0754e31 . B'][color=#131413]et.al.[/color][/font][/i][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]4[font=AdvTTe0754e31 . B]、[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Hair Removal on Rodents[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413]. [/color][/font][font='Times New Roman'][color=#131413]Johns Hopkins University Animal Care and Use Committee[/color][/font][font='AdvTTe0754e31 \. B'][color=#131413].[/color][/font]

  • 【求助】植物活体取样 内吸杀虫剂

    老板最近产生了个新想法,想做活体检测蔬菜果实内的活内吸活体杀虫剂的残留。小弟不是分析科班出身,老板也没做过,非常迷茫。希望各位大侠帮帮忙。搜了搜文献,倒是有用微透析做取样的,但看上去挺麻烦,有没有人能给俺指条明路呢。。。

  • 【讨论】CRI(Cambridge Research&Instrumentation)活体成像,荧光,生物学发光

    CRI活体成像系统 CRI(Cambridge Research Instrumentation)公司的Maestro系统,是一套价格平易、性能杰出的活体成像系统。由于采用了多光谱成像及分析技术,因此大幅的提升可见光几近红外光标定是的灵敏度、多重染色应用的灵活度,以及定量的精确度。看得更清楚 自体荧光-从没有进行标定的组织所散发出的背景荧光-会使得较弱的荧光讯号变得模糊不清,因此也限制了传统的活体内荧光成像技术的应用。即使高灵敏度,、超低温的CCD也于事无补,因为它们只是更有效率地捕捉到自体荧光讯号。而Maestro系统使用独特的多光谱成像技术,能够实质性的去除自体荧光,将那些用其它方法所看不到的标定物体显示出来-在接近全黑的背景中呈现明亮的讯号。这在讯号∕噪声比的显著改善,可以将灵敏度增加好几倍,因此可以检测到更细小或更模糊的靶标记。看得更准确 准确且具重现性的测量,对于一个荧光成像系统来说,是项非常必要的功能。对于自体荧光讯号进行多光谱的去混合处理,使得特定讯号的量测变得更为准确。在光谱上有重叠的标定物,彼此之间的干扰情形,也可予以消除。对于经过去混合处理后的荧光讯号,加以定量量测,将会变得非常简单。因为此时的荧光讯号是在一个接近全黑的背景中,突显为非常明亮的区域,更加适合用于人工或自动的方式进行分类及分析。看得更多 Maestro系统的多光谱成像技术,将多重荧光探针的应用加以最佳化。 Maestro系统所得的去混合处理影像,把每一个标定物的讯号彼此独立出来(即使存在着非常明显的光谱重叠)。由于这个系统在光谱上的使用弹性,所有散射波长在420到950nm的标定物,都可以单独或合并使用。这些可用的标定物包括eGFP,dsRed,Cy5,Cy5.5,Cy7,ICG,IRDyeTM700,IRDyeTM800,以及其它如量子点quantum dot荧光试剂等。应用范围1.荧光肿瘤模式2.以抗体进行的检测3.分子标定试剂4.发炎区域染色定位5.光敏染料6.荧光药物之药物动力学7.血管生成标记有任何问题,请发邮件lovesparkle@126.com,我们会马上给您回复![img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64217]CRI活体成像系统材料[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64218]CRI活体成像材料-2[/url]

  • 苏州纳米所等在硫化银近红外量子点活体成像研究中获进展

    随着生物医学影像技术的不断发展,近红外荧光成像技术在生物医学研究领域得到了越来越多的关注和应用。其中,近红外二区(1000 nm-1400 nm)荧光对生物组织穿透能力强,成像信噪比高,该区域荧光成像技术在生物活体成像领域已展现出巨大潜力。量子点(Quantum dots, QDs)作为一种新型的纳米荧光探针,具有亮度高、光稳定性强、光谱可调等传统荧光染料不可比拟的优势,在生物标记、成像与传感等方面得到了广泛应用,而开发具有近红外二区荧光发射、生物相容性好、量子产率高的QDs是当前其用于活体荧光成像所面临的重要挑战。 中科院苏州纳米技术与纳米仿生研究所王强斌研究员课题组在“单源前驱体制备Ag2S近红外量子点”(J. Am. Chem. Soc. 2010, 132, 1470–1471)的基础上,进一步优化制得了量子产率更高、生物相容性更好、尺寸均匀可控的Ag2S近红外QDs。通过与美国斯坦福大学戴宏杰教授课题组合作,利用Ag2S QDs进行了细胞成像与毒性研究。结果表明,在水溶性Ag2S QDs表面修饰不同的生物识别分子,可实现对不同细胞系的特异性标记,并且该Ag2S QDs几乎没有细胞毒性(ACS Nano 2012, 6, 3695–3702)。 在上述工作基础上,王强斌课题组与戴宏杰教授课题组继续合作,进一步将Ag2S QDs用于动物活体成像研究。结果表明,因肿瘤组织对大分子的高通透性和滞留效应(简称EPR效应),肿瘤对QDs具有很高的摄取(图2),该现象为肿瘤早期诊断以及手术的可视化提供了重要的技术基础。同时,他们对导入小鼠体内QDs的命运进行了追踪,发现除了富集于肿瘤部位的QDs外,其它QDs大部分在注射24小时后不断的随粪便和尿液排出;一周后,体内各个器官(肝和脾除外)的QDs均已基本排出(图3)。 该工作已在国际著名杂志Angewandte Chemie International Edition上发表。对Ag2S QDs的长期体内代谢、分布和毒理研究正在进行之中。 此项工作得到中科院“百人计划”、中科院先导专项、国家自然科学基金委和科技部等的大力支持。 原文链接http://www.cas.cn/ky/kyjz/201209/W020120921399246236683.gif 图1:(a)Ag2S QDs成像示意图,(b)和(c)分别为Ag2S QDs的实物和暗场中的荧光照片,(d)和(e)分别为吸收和荧光光谱,(f)为Ag2S QDs的TEM照片。http://www.cas.cn/ky/kyjz/201209/W020120921399246247360.gif图2:4T1肿瘤对Ag2S QDs的高效摄取http://www.cas.cn/ky/kyjz/201209/W020120921399246242640.gif图3:Ag2S QDs的活体滞留和排泄情况

  • MPI磁粒子成像 活体成像

    MPI磁粒子成像的原理是什么?有什么品牌的设备推荐。网上只找到北京普华量宇代理的MI和布鲁克的设备。

  • Sci Rep:林科院亚林所卓仁英| Nramp金属转运体促植物Cd积累|旭月活体研究通讯213期

    [align=center][b][b]NISC文献编号:C2017-029[/b][/b][/align][align=left]植物天然抗性巨噬细胞蛋白(Nramp)家族在重金属胁迫中起着重要的作用。然而,现有研究几乎没有发现Nramps在重金属富集植物 东南景天中的功能特征。[/align][align=left]2017年,中国林科院亚热带林业研究所卓仁英研究员课题组在[b][i]Scientific Reports[/i][/b]上发表了题目为“[i]Sedum alfredii SaNramp6 [/i]Metal Transporter Contributesto Cadmium Accumulation inTransgenic [i]Arabidopsis thaliana[/i]”([b][i]Sci Rep[/i][/b][i], [/i]2017, 7(1):13318.)的文章,探究东南景天Nramp在重金属胁迫时的作用。[/align][align=left]实验以东南景天为材料,克隆并鉴定了Nramp6基因,分析其在转基因拟南芥中的功能。SaNramp6 cDNA包含一个1638bp的ORF,编码545个氨基酸。镉(Cd)胁迫可诱导SaNramp6的表达,根和叶片分别处理一周和12h后达到峰值。[/align][align=left]SaNramp6定位于拟南芥、红花烟草下表皮、洋葱表皮细胞的原生质体质膜上。在酵母突变体的异源表达实验显示,SaNramp6增加了酵母细胞中的Cd含量。此外,在Cd胁迫下,Cd浓度、易位因子、Cd2+流速的数据结果显示,SaNramp6过表达拟南芥表现出很高的Cd积累水平。[/align][align=center][b][img=,578,433]http://cdn.sky.wkepu.com/album/201808/31/132225a310e064nvnc168l.jpg[/img][/b][/align][align=center]拟南芥根部Cd2+流检测图[/align][b]其中,利用基于非损伤微测技术(Non-invasive Micro-test Technology, NMT)的[b]NMT活体生理检测仪NMT Physiolyzer [/b]检测Cd2+流速,结果显示,相比于野生型拟南芥,过表达组中Cd2+吸收速率明显提高,而突变组明显下降。[/b][align=center][b][img=,307,780]http://cdn.sky.wkepu.com/album/201808/31/132225jjw3qyujw4y5de5i.png[/img][/b][/align][align=center]各组拟南芥的Cd2+流速结果。负值表示吸收[/align][b]卓仁英研究员主要专注于林木耐盐、重金属cd抗性的育种研究。自2017年开始,已经利用非损伤微测技术,在[b][i]Front Plant Sci[/i][/b]、[b][i]Environ Exp Bot[/i][/b]等期刊,发表[b]SCI[/b]文章4篇,累计影响因子16.789。[/b][align=center][/align]

  • 硝酸还原酶活力测定(活体法)

    一、原理硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐,产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下: http://tong.dxy.cn/upload/asset/2009/10/26/1256434988.jpg生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g-1·h-1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单,适合快速、多组测定。离体法复杂,但重复性较好。二、仪器与用具分光光度计;真空抽气泵(或20ml注射器筒);天平;单面刀片;保温箱(或恒温水浴);刻度试管(15ml);移液管(5ml×2,2ml×8,1ml×2)。三、试剂1. 亚硝酸钠标准液 称取分析纯NaNO2 0.1000g水溶后定容至100ml,吸取5ml用水稀释定容至1000ml,即为每ml含NaNO2 5μg(亚硝态氮近似1μg/ml)的标准液。2. 0.1mol/L pH7.5的磷酸缓冲液:K2HPO4 19.24g,KH2PO4 2.2g,加水溶解后定容至1000ml。3. 1%(W/V)对-氨基苯磺酸溶液:称取1.0g加入25ml浓HCl中,用蒸馏水定容至100ml。4. 0.2%(W/V)α-萘胺溶液:称取0.2gα-萘胺溶于25ml冰醋酸中,用蒸馏水定容至100ml。5. 30%三氯乙酸溶液:75.0g三氯乙酸水溶后定容250ml。6. KNO3(0.1mol/L)、异丙醇(1% V/V)、磷酸缓冲液(0.1mol/L)混合液:称3.03g KNO3溶于300ml 0.1mol/L的磷酸缓冲液中,再加3ml异丙醇混匀。四、方法1. 标准曲线制作取7支洁净烘干的15ml刻度试管按表13-1顺序加试剂,即配成0-2.0μg的系列标准亚硝态氮溶液。摇匀后在30℃保温箱或恒温水浴中保温30min,然后在540nm波长下比色。以亚硝态氮(μg)为横坐标,光密度值为纵坐标绘标准曲线或建立回归方程。表13-1 各试剂加入顺序 http://tong.dxy.cn/upload/asset/2009/10/26/1256434989.jpg

  • 活体荧光寿命光度测量系统

    [url=http://www.f-lab.cn/microscopes-system/tcspec.html][b]活体荧光寿命光度测量系统[/b][/url]能够同时[b]测量活体荧光寿命和光度值[/b],它采用时间[b]相关单光子计数TCSPC[/b]技术,非常适合动物活体荧光寿命测量和组织荧光寿命测量和光度测量。采用皮秒激光器和单光子计数探测器,集成高速电路,光学和光纤探测器,有力保证了荧光寿命测量。活体荧光寿命测量系统配备了灵活软件,使得用户随意移动动物,也可测量荧光寿命并记录光度值。而配备了4个光纤探测器确保了整套荧光寿命测量系统可以重复,长时间并且同时测量样品。[img=活体荧光寿命光度测量系统]http://www.f-lab.cn/Upload/tcspec.jpg[/img][b]活体荧光寿命测量系统特点[/b]采用TCSPC时间分辨单光子计数技术,时间通道宽度降低到813飞秒采样间隔高达10微秒皮秒脉冲激光光源可提供445nm, 473nm, 488nm, 515nm, 和640nm 波长供选择配备4个单光子计数探测器覆盖450-700nm能够与其它动物行为记录仪器和电生理学以及基因仪器同步使用方便移动,配备手推车[img=活体荧光寿命光度测量系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluorescence-lifetime-1.JPG[/img][b]活体荧光寿命测量的意义[/b]荧光强度揭示发光样品的相对丰度,而荧光寿命能够反映出直接生化环境(比如氧化,还原,PH值),分子交互作用(比如通过FRET释放小分子)以及分子内部变化。通过定量分析荧光寿命图像和光谱数据,就可知道功能荧光分子或荧光蛋白,这对于探索常规组织的活体生化化学,疾病机理以及研究药物对于组织影响非常重要。活体荧光寿命测量光度系统领先的技术这款活体荧光寿命测量系统结构紧凑,具有超高的时间分辨率,非常适合活体生物化学信号采集分析,广泛用于生命科学,医学,动物学,用于人类疾病临床前研究和药物研发以及生命科学和医学研究。这套系统采用时间分辨单光子计数技术,具有超高的时间分辨率(皮秒到纳秒),能够记录实时动态荧光信息,结合FRET技术和仪器,可提供2-8nm 尺度的超高孔径分辨率[img=活体荧光寿命光度测量系统]http://www.f-lab.cn/Upload/fluorescence-lifetime-2.JPG[/img][b]活体荧光寿命测量光度系统典型应用[/b]脑科学研究行为科学研究动态钙记录疾病机理研究神经学研究电生理学研究自由移动动物学研究[b]活体荧光寿命测量光度系统[/b]:[url]http://www.f-lab.cn/microscopes-system/tcspec.html[/url]

  • 植物GFP发光表达拍照激发光源的选择

    植物GFP发光表达拍照激发光源的选择

    植物病毒表达载体(GFP或eGFP,RFP),农杆菌侵染植株后,如果要观察GFP发光,需要选用LUYOR-3415RG激发光源来照射植物,同时需要佩戴专用的荧光观察眼镜,即可观察到明亮的GFP荧光。LUYOR-3415RG独有的双波段光源能够激发GFP,eGFP和RFP,无论是绿色荧光蛋白还是增强型绿色荧光蛋白以及红色荧光蛋白,LUYOR-3415RG均能够激发出明亮的荧光,如果需要拍照,需要选用路阳专用遮光片才可以拍到荧光。GFP荧光极其稳定,在激发光照射下,GFP抗光漂白(Photobleaching)能力比荧光素(fluorescein)强,特别在450~490nm蓝光波长下更稳定。由于GFP荧光是生物细胞的自主功能,荧光的产生不需要任何外源反应底物,因此GFP作为一种广泛应用的活体报告蛋白,其作用是任何其它酶类报告蛋白无法比拟的。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512211054_578857_1813720_3.png绿色荧光蛋白在LUYOR-3415RG激发下发光http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512211055_578858_1813720_3.gif绿色荧光蛋白在LUYOR-3415RG激发下发光http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512211055_578860_1813720_3.jpg红色荧光蛋白在LUYOR-3415RG激发下发光http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512211055_578859_1813720_3.png植物在LUYOR-3105紫外线灯(365nm黑光灯有名UV灯)下发光GFP作为一种新型的基因报告分子,可用于活体、原位、即时的检测基因表达及蛋白定位。不象其他生物发光基因报告分子需要附加蛋白或底物、辅物、辅因子等才会发光。GFP非常稳定,不依赖于物种,对活细胞没有伤害性。由于这种载体在转染细胞后很快就能通过观察荧光细胞而检测出基因的表达情况,因而,为基因转染研究中确定转染效率。在转基因作物的基因表达研究中,GFP(绿色荧光蛋白)可作为非常重要的衡量工具。通过定点观察GFP,可有利于学习如何操纵和提高有用的染色体特性,从而可以筛选出高基因表达的植物。最终可提高农作物产量、质量,并不断适应人们对粮食的更高需求。LUYOR-3415RG荧光蛋白激发光源可野外、实验室原位测定GFP(绿色荧光蛋白)。通过定点观察GFP,可有利于学习如何操纵和提高有用的染色体特性,从而可以筛选出高基因表达的植物。 LUYOR-3415RG荧光蛋白激发光源的应用:1、 野外、实验室原位测定GFP(绿色荧光蛋白)。2、 应用于转基因作物研究。3、 区别可遗传性改良生物体和不可遗传的改良生物体。4、 用于基因表达的研究。5、 用于Rhodamine(红色荧光染料)、叶绿素、荧光素的研究。

  • 德国开发出首台可观察活体细胞的超高分辨率生物显微镜

    近日,德国IBIDI公司成功开发出一款超高分辨率生物显微镜。该公司宣称基于新型随机光学重建显微技术“(d)STORM”,利用该公司独创的特殊塑料底板“μ-Slides”可实现超高分辨率观察活体细胞。 STED,SIM,(F)PALM 和(d)STORM等新型光学显微技术可有效避免衍射极限,获得纳米级水平的超高分辨率成像。这些超高分辨率显示技术可应用到生物实验研究,观察了解组织细胞分子结构。IBIDI公司采用了创新性的含有亲水性膜涂层的塑料材质底板“μ-Slides”替代传统玻璃底板,首次实现了“活体细胞”超高分辨率观察。这种被成为“ibi-Treat”的亲水性膜涂层性能可以与标准的细胞培养瓶和培养皿相媲美。 IBIDI公司相关研发工作受到了德国联邦教研部《生命科学领域光学技术—基本细胞功能》项目的资助。

  • 双光子显微镜——毛囊再生过程活体成像

    [b]摘要[/b]组织的发生与再生依赖于细胞-细胞间相互作用和指向干细胞的信号以及它们的直接增殖。但是,引导组织适当再生的细胞行为还没有被很好的理解。运用一种新的,非侵入的双光子成像技术,我们研究了活鼠随时间推移的生理性毛囊再生。通过这种方法,我们监测了真皮层干细胞和它们的后代在生理性毛囊再生过程中的行为,并指出了间充质对它们行为的影响。承接早先的研究,干细胞在毛发再生的初始阶段处于静止状态而它们的后代处于更活跃的分生状态。除了细胞分化之外,后代细胞的协调运动也允许毛囊的快速扩张。最后,我们通过切蚀目标细胞的和长时间跟踪活毛囊展示了间充质对毛发再生的要求。因此,我们建立了一种直接原位观察毛囊内生长调控的细胞机制的方法,这使得我们可以精确调查生理性再生过程对毛囊组分的功能性要求。[b]材料与方法[/b]在原位成像中,对3周龄的小鼠通过腹膜内注射克他命和甲苯噻嗪进行麻醉,头部区域的皮肤使用机械剪毛器和脱毛膏剃光。小鼠被放在一个加热平台上,头部和耳朵通过一个自制固定台固定。一个玻璃盖被放在头耳结合部的皮肤上。皮肤的图像栈通过一台装配Chameleon Vision II (Coherent)双光子激光器的[color=#ff0000]TriM II Scope[/color][color=#ff0000](LaVision Biotech[/color][color=#ff0000])[/color]显微镜获取。一束激光(at 940 nm for GFP and 1040 nm for RFP, respectively)通过aX20水浸物镜((N.A. 1.0 Olympus)聚焦并以600Hz的频率扫描0.25到0.5mm2的视野区域。系列光学切片在5分钟内以步长2-3μm成像总深度100μm的组织。从静止阶段向生长阶段转变的几个相(静止相到生长初期相)被分析。在皮肤里使用不同的内在标记以在不同试验中定位到视野的初始区域并观察同一个毛囊。实验过程中通过鼻尖吸入气化异氟醚保持麻醉状态。三维双光子激光切蚀。使用同样的光学设备进行激光切蚀。使用900nm的激光束扫描一个10μm2的区域,以25%的激光能量持续1秒钟即可获得切蚀。根据目标深度(30-80 μm)调整切蚀参数。[b]主要结果[/b] [img=,655,507]http://qd-china.com/uploads/bio-product/11.jpg[/img]Figure 1 | 新的一次生长开始,细胞分化是在毛囊中进行空间调控的。a,静止状态毛囊。参与毛发再生的不同细胞群,包括干细胞,progeny和间充质,存在于定义的毛囊解剖隔层中。 b, 来源于双光子激光扫描显微镜系列光学切片的静止态活毛囊的三维重构。上皮细胞核(绿色)通过角蛋白14启动子(K14H2BGFP)驱动的H2B-GFP融合蛋白显影。 c, 一个progeny 分裂的例子。一个活毛囊的单独光学切片(左侧)和progeny 组分中三个处于有丝分裂期间细胞核的放大图(右侧,插图)。 d, 从几个处于早期生长阶段毛囊(n=17)中定量化细胞分裂的位置和轴 (生长初期 II)。e,垂直(左图)和水平(右图)方向干细胞分裂的两个例子。一个活毛囊的单独的光学切片(左侧插图)和处于有丝分裂中的干细胞隔层(右侧插图)的细胞核放大图。红色箭头,有丝分裂中的亲代核与子代核。图片的时间推移分别为15分钟和45分钟。标尺20 μm. [img=,629,446]http://qd-china.com/uploads/bio-product/12.jpg[/img]Figure 2 |生长过程中处于形态重组的干细胞progeny隔层. a, 毛囊生长中的向下伸展。生长状态的活毛囊三个连续时间点(3小时间隔)的光学切片,展示了progeny组分向下的伸展(左三) 。核间距增加,干细胞和progen隔层(大约生长初期 II to IIIa)中的总细胞数被定量。 (右侧, 数据表示为mean±s.e.m. (n=13-20 asterisk, P 0.0001) b,毛囊内的核重组.两个光学切片(左侧)分别跟踪和测量了同一毛囊在0时刻和4h时的(右侧)冠面和切面(xy and xz)(大约生长初期II to IIIa)(底图)。c, 生长中毛囊的向下迁移。单一光学切片表明了单个毛囊在1小时间隔连续时间点的完整的(左侧)和下部局部视图(上侧)。光学切片中的红色箭头和相应的跟踪标记了一个正在向下移动的核,5h内走过了30μm(大约生长初期IIIb)。在0h所展示的绿色核的位置以灰色表示用来比较(右下方图)。标尺20μm. [img=,575,588]http://qd-china.com/uploads/bio-product/13.jpg[/img]Figure 3 | 间充质皮肤乳头的切蚀削弱了毛发再生的启动. a, 实验设计,使用激光诱导皮肤乳头细胞切蚀来测试间充质对毛发再生的要求。b, 切蚀皮肤乳头细胞的活毛囊四个时间点的高放大率光学切片。c,包含少数切蚀皮肤乳头细胞的活毛囊的一群毛囊(黄色箭头)在三个时间点的低放大率光学切片。d,两个progeny被部分切蚀的毛囊在3个时间点的低放大率光学切片。e,切蚀皮肤乳头(上)或部分切蚀progeny隔层(下)的毛囊(作为毛囊的总长度测量)生长与对照完整毛囊的量化比较。数据表示为mean±s.e.m. (n=8-10 asterisk, P 0.0001).标尺50 μm. [img=,566,365]http://qd-china.com/uploads/bio-product/14.jpg[/img]Figure 4 | 毛囊再生的细胞机制。毛发再生的初始阶段,干细胞progeny是启动增殖的第一隔层。虽然分化数量少于干细胞progeny,但是隆突内部也检测到了细胞的分化。子代隔层是沿毛囊生长的轴向分化,而隆突内的分化方向则是随机的。毛囊经历了一个向下的延伸,其中子代内而不是干细胞隔层内的核间距增加。围绕间充质皮肤乳头的上皮细胞核重新排列并围绕间充质压缩。间充质的切蚀导致了毛囊生长的减弱。

  • 【我们不一YOUNG】+ 质谱成像应用于药物的研究

    [back=transparent]质谱成像是以质谱技术为基础的可视化方法,通过质谱离子源直接扫描生物样本,可以在一张组织切片上同时分析数百种分子的空间分布特征,已成为精确解析药物分子及其代谢产物组织空间分布的关键技术之一,[back=transparent]质谱成像[/back]应用于药物ADME的研究。[/back]一般在生活中肾脏是药物排泄的主要器官。但是药物排泄过程的正常与否关系到药效强度、药效维持时间以及毒副作用。所以,这是我们必须要借助一些科学例如高分辨质谱技术来助力药物。近年来,高分辨质谱成像技术的诞生为定位药物组织分布研究提供了全新的技术和思路。本文将主要介绍TransMIT AP-SMALDI 10高分辨率质谱成像系统如何一步步揭秘伊马替尼在小鼠肾脏组织中的空间分布特征。TransMIT AP-SMALDI 10质谱成像系统是目前少有的集高空间分辨率和高质量精度于一体的质谱成像系统。该系统采用常压基质辅助激光解吸电离技术,通过先进的准直光束聚焦实现了5μm的成像分辨率;质谱端搭载Thermo Scientific? Q Exactive?系列质谱仪,保证了离子分析的高质量分辨率和高质量精度。综上所述,研究成功的揭示了伊马替尼在重要排泄器官肾脏中的组织分布特征,同时也获取了组织中各种内源性化合物的空间分布信息,为研究药物分子的累积和排泄机制提供了可靠的科学依据。TransMIT AP-SMALDI 10质谱成像系统集高空间分辨率、高质量分辨率和高质量精度于一身,不仅成为了药代动力学研究的利器,也应用于肿瘤标志物研究、植物次生代谢物研究、药用植物药效成分研究、微生物和单细胞研究等。未来,期待TransMIT AP-SMALDI 10质谱成像系统为我国药物研发人员和各领域科研工作者带来更多的惊喜,加快研究进程,加速成果转化。

  • 便携式光合测定仪适用于什么植物

    [font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=16px]  便携式光合测定仪适用于什么植物,便携式光合测定仪是一种现代化的科研工具,因其小巧轻便、易于携带、智能化程度高以及稳定性强等特点,在植物生理生态学研究中有着广泛的应用。以下是关于便携式光合测定仪适用的植物类型及相关信息:  适用植物类型:  便携式光合测定仪可广泛应用于各种植物,包括但不限于大田作物、果蔬、蔬菜、牧草、观赏植物等。该仪器主要用于测量不同植物的叶片光合速率、蒸腾速率、气孔导度等关键参数。  具体应用场景:  农林业:科研人员可利用该仪器对农作物叶片的光合速率、气孔导度、胞间二氧化碳浓度等参数进行精确测量,评估不同品种的适应性、抗逆性以及产量潜力。同时,通过测定不同生长环境下的光合参数,为优化农作物的种植管理提供科学依据。  生态学:生态学家可利用该仪器研究不同生态系统中植物的光合作用特性,了解生态系统对气候变化的响应机制。例如,通过测定不同海拔、纬度或土壤类型下的植物叶片光合参数,揭示生态系统结构、功能以及生物多样性的变化规律。  园艺和草地科学:该仪器可用于研究观赏植物和牧草的光合作用特性,为品种改良和种植管理提供理论依据。  测量参数:  便携式光合测定仪能够测量的参数非常丰富,包括但不限于CO2浓度、H2O浓度、空气温度、叶片温度、相对湿度、蒸汽压亏缺、露点温度、大气压、内置光强、外置光强、净光合速率、蒸腾速率、胞间CO2浓度、气孔导度等。这些参数能够全面反映植物的光合作用状况,为科研工作者提供宝贵的数据支持。  特点:  该仪器具有便携性、智能化程度高、稳定性强等特点,适用于野外试验、现场监测等多种环境。同时,它支持活体、离体测量,并且室内外两用,满足了科研工作的多样化需求。  综上所述,便携式光合测定仪适用于多种类型的植物,包括但不限于大田作物、果蔬、蔬菜、牧草等,能够为科研人员提供全面、准确的光合作用相关参数数据,对于植物生理生态学研究具有重要意义。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/06/202406131145594548_7165_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

  • 新闻资讯 中国制造打破国外垄断───美时医疗7T超高场成像磁体实现“零”的突破

    新闻资讯新闻资讯中国制造打破国外垄断───美时医疗7T超高场成像磁体实现“零”的突破发布时间:2016-01-25 2016年1月18日,美时医疗技术有限公司的励磁车间内一片欢腾,特斯拉计的读数停留在了激动人心的7.0366T,这标志着全亚洲首台自主研发生产的7T超高场成像磁体的诞生。 http://www.time-medical.com.cn/uploads/7Tesla.png 美时医疗的超高场磁体团队历时多年的研发、设计以及制造,通过大量的模拟和计算,制定了详尽的计划和方案,该款磁体第一次励磁测试便成功达到7T的磁场强度。该磁体通过特殊的磁体设计和精湛的制造工艺,使磁体总重量小于2吨,同时保证了液氦的零消耗,磁场漂移小于0.1ppm/h。 在过去三十年间,超导磁体技术一直被三家外国公司所垄断,尤其是4.7T以上的超高场磁体技术,全球范围内仅有2家企业具备研发和制造能力。而在这之中,用于成像的超高场磁体更是难上加难。核磁共振成像因其对被扫描对象的无创性,及在软组织成像上的高灵敏度,与其他软件平台和数学工具的自然紧密配合等独特优势,在大脑研究中被广泛应用,可以对大脑的代谢、运作、逻辑、语言和思维等各方面进行研究。分子成像可有效地揭示细胞的运作状态,揭示药物在活体细胞中的作用和机理,对于病理学和药理学的研究能起到关键作用。脑功能成像可研究人类的思维活动,了解大脑的运作机制,探索大脑学习和认知的秘密。核磁共振技术对于中风等一些脑部疾病的早期诊断和预防也能起到至关重要的作用。 由于超高场磁体的高度垄断和技术壁垒,使其价格始终居高不下,这严重阻碍了中国磁体技术、脑科学和生物制药等领域的应用研究。美时医疗通过多年的技术积累,经验沉淀和刻苦研发,终于打破了外国公司在超高场磁体领域的垄断,创立了中华第一的自主品牌,为中国科技的发展作出卓越贡献。© 美时医疗控股有限公司 2010‐2015版权所有首页 联系我们

  • 嫦娥5号引发的联想:NMT如何用于植物微重力研究?(1)

    嫦娥5号引发的联想:NMT如何用于植物微重力研究?(1)

    [align=center]嫦娥5号引发的联想:NMT如何用于植物微重力研究?(1)[/align][align=center][/align][align=center]主讲人:许越中关村NMT产业联盟理事长 [/align][align=center]现代非损伤微测技术(NMT))创始人[/align][align=center] 活体离子分子组学(imomics)创始人[/align][align=center][/align][align=center] 直播时间:2020年12月7日 下午16:00 [/align][align=center]精剪版时间:2020年12月8日下午20:00 [/align][align=center] 2020年12月9日上午08:00[/align][align=center][img=,690,1035]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/12/202012081447506078_273_3481606_3.jpg!w690x1035.jpg[/img][/align][align=center][font=Arial, Helvetica, sans-serif][size=16px]关键词:NMT、直播、植物微重力[/size][/font][/align]

  • NH4+在植物细胞层面上是如何发挥其调节作用的|第19期活体研究大家谈

    旭月点击获取视频[align=center][color=#000000][b]【内容介绍】[/b][/color][/align][align=center][/align]2014年,植物领域知名杂志Plant Cell上发表了一篇研究成果。该研究以拟南芥根毛细胞和液泡为材料,利用基于[b]非损伤微测技术的NMT Physiolyzer[sup][/sup][/b],检测了根毛尖端Ca[sup]2+[/sup]流和液泡NH[sub]4[/sub][sup]+[/sup]流。本期会介绍这篇文章的详细内容,并还有实验彩蛋。欢迎大家收看!

  • 双光子显微镜——THG成像

    [b]摘要[/b]在神经科学和神经外科中对活体大脑组织中神经元的成像能力是一项基本要求。尤其是需求一种具有测微计尺分辨率的大脑形态学的非侵入探针的开发,因为它可以在临床诊断上提供一种非侵入式光学活体组织检查的手段。在这一领域,双光子激光扫描显微镜(2PLSM)是一个强大工具,并已成为活体生物样品最小侵入性损害的高分辨率成像的标准方法。但是,(2PLSM)基于光学方法提供足够分辨率的同时,对荧光染料的需求妨碍了图像对比度的提高。本文中,我们提供了一种活体大脑组织以细胞分辨率的高对比度成像方法,无需荧光探针,使用光学三次谐波发生进行成像。我们利用细胞水平的特殊几何学和大脑组织的液体内容物来获取THG的部分相匹配,提供了一种荧光对比度机制的替代方法。我们发现THG大脑图像允许快速、无侵入性标记的神经元、白质结构、血管同时成像。而且,我们利用THG成像来引导微吸管指向活体组织中指定的神经元。这个工作是一个无标记活体大脑成像的主要步骤,并开启了活体大脑中激光引导的微注射技术发展的可能性。[b]材料与方法[/b]THG成像对于THG成像实验,我们使用了一台商业化双光子激光扫描显微镜([color=#ff0000]TrimScope, Lavision BioTec[/color])。光源是一个光学参量震荡器(Mira-OPO,APE),810nm泵浦光来自一个Ti:Sa锁模激光器(Coherent Chameleon Ultra II)。使用一个20X,0.95N.A水浸物镜(Olympus XLUMPFL-IR)将光聚焦到样品上。使用epidetection几何学描述THG实验。使用分光镜(Chroma T800lpxrxt)将背景散射THG光子从入射激光束中分离出来,用一个THG波段的带通滤波器(Chroma HQ390-70X)过滤。检测器是GaAsP高灵敏度光电倍增管(Hamamatsu H7422-40),400nm处量子效率为25%。最高分辨率成像(1024×1024像素)的典型获取时间为1.6s,我们用于目标定向实验的512 X 512像素成像时间为0.6s。 为与前向端口比较,使用了一个定制的投射端口。这个端口使用了一个1.4N.A油浸物镜,一个长波分光镜(UQG optics)和一个400nm的相干窄带滤波器。对于THG与SR-101联合实验我们用1200nm的OPO来同时产生两种信号。使用一个594nm带通和561nm隔断的分光镜将SR-101荧光从THG信号中分离。SR-101信号使用一个PMT检测(Hamamatsu H6780-20)。Nile Red和THG成像也是由1200nm的OPO同步激发。在这个案例中THG信号由投射端口测量,Nile Red荧光通过一个593∕40 nm的带宽滤波器检测。对于THG和GFP联合成像,用来泵浦OPO的Ti:Sa激光被调谐到970nm并耦合到显微镜中。组织块的GFP和THG信号使用同一个检测器连续测量。但使用一个不同的(561∕40 nm)带通滤波器检测GFP。使用显微镜软件(Imspector Pro)获取图像并以16bit 的tiff格式存储,图像分析使用Image J(MacBioPhotonics)进行。[b]主要结果[/b] [img=,575,768]http://qd-china.com/uploads/bio-product/21.jpg[/img]Fig. 1.无标记活体大脑的三次谐波显微成像(A)脑组织THG成像的epidetection几何学图示。插图:THG原理。注意基质中没有光学激发发生。(B) 树突处的聚焦激光束。通过将激光聚焦体积设定到树突直径的几倍大小,可以获得部分相匹配,显著的THG信号将会产生。(C)细胞体内的聚焦激光束。由于不好的结构相匹配状态,没有THG信号产生。(D) 小鼠大脑组织的活神经元成像。体细胞以暗影存在。 [img=,466,500]http://qd-china.com/uploads/bio-product/22.jpg[/img]Fig. 2.活体大脑组织的THG成像(A)小鼠皮质的THG图像 (B) 与A同位置的Nile Red染色的双光子荧光图像 (C) 大鼠凹陷的脑回THG图像(水平切面) (D)小鼠脑胼胝体THG图像,轴突纤维束被清晰得分辨。Movie S1是这个结构的一个3D投影 (E)小鼠大脑纹状体的THG图像(冠状面)。白质和神经元细胞清晰可见。明亮的粒状结构是垂直穿行图像平面的轴突纤维。Movie S2是这个区域的3D投影。(F)麻醉活小鼠的脑皮质上层的血管THG图像(z栈平均投影密度是50um) [img=,510,767]http://qd-china.com/uploads/bio-product/23.jpg[/img]Fig. 3. THG与双光子成像的叠加 (A)小鼠额前叶脑皮质的THG图像 (B)SR-101标记的星细胞双光子图像 (C) A、B的叠加提供了神经网络中星细胞的分布信息 (D) 小鼠额前叶皮质的THG图像 (E) GFP标记的生长抑素神经元的双光子荧光图像 (F)D、E的叠加显示了生长抑素神经元在脑前叶皮质结构中的分布 [img=,461,768]http://qd-china.com/uploads/bio-product/24.jpg[/img]Fig. 4.THG成像深度与自动化细胞检测 (A-C) 小鼠额前叶皮质的THG图像,成像深度分别为100, 200, and 300 μm 。每幅图像都是3个以2微米深度间隔独立图像的最大密度投影(D) 110 μm深度处神经元细胞的自动检测THG图像。细胞检测的运算法则定义为以红色显示的神经元 (E)红色标记:来自A-C的图像栈的细胞可见性对比。黑色标记:作为一个深度功能的平均检测到的THG密度。 [img=,531,768]http://qd-china.com/uploads/bio-product/25.jpg[/img]Fig. 5. 无标记目标定向和细胞活性(A)小鼠新大脑皮层的THG图像 (B) 在对一个神经元进行THG引导膜片钳之后同一位置的THG图像 (C)一个200um深处钳住神经元的大视野THG图像(5幅深度间隔2um的图像平均) (D)记录以100pA电流脉冲刺激B中被钳住的神经元的动力势训练 (E) 测量在THG扫描期间静止膜电位的改变。即使以最高的能量,也只观察到4%的电压变化,保持了完全的可逆性。0.8秒的周期相应于图像扫描时间。(F)最大观察到的静止膜电位Vs扫描时的激光能量。没有非线性效应出现。

  • 机器人可自动探查活体脑细胞内部运作

    中国科技网讯 据物理学家组织网近日报道,美国麻省理工学院和佐治亚理工学院研究人员开发出利用机器人操纵来自动发现和记录活体大脑中神经元信息的方法,即用一种全细胞膜片钳制动一个微小的空心玻璃针,在神经细胞的膜上开孔,以记录其内部电活性。该研究成果刊登在5月6日《自然·方法》期刊上。 这种深入大脑中神经元内部运作的方式可提供大量有用的信息,如电活性模式、细胞内部状况、甚至基因在某一时刻被闭合的剖面。然而,能够实现这个入口非常困难,目前世界上只有极少数实验室在进行尝试,这种自动发现和记录活体大脑中神经元信息的最新方法有望改变该领域研究现状。研究人员证明,在一个细胞检测的计算机程序的引导下,与人工相比,该自动装置识别和记录活老鼠大脑中的神经元信息具有更好的精度和速度。 采用新型自动化装置消除了对活体细胞的活动进行数月定向和长期搜索的需要。采用这种技术,科学家可将大脑中数千个细胞划分成不同类型,还可绘制其彼此之间的连接,并从正常细胞中找出病变细胞。 研究人员称,该方法在研究大脑疾病方面将会尤其有用,如精神分裂症、帕金森氏症、自闭症和癫痫。科学家们一直难以描述这些疾病中一个细胞与其具有电活回路和性能的分子集成。描绘出疾病如何改变活体大脑内特定细胞分子,将会更好地发现药物的靶标。 如果通过人工对这种精密仪器进行操作,需花上4个月的训练时间,最终还可能不是很精准,于是研究人员将这项任务交与机器人来操作,其机械手臂由计算机程序做指导。研究人员说,在神经科学中使用机器人来研究有生命的动物还仅仅是个开始,而像这样的机器人可能被用于在大脑中有目标点地注入药物,或提供基因治疗载体,希望新方法也能激励神经学家追求各类机器人自动化,例如在光遗传学方面,利用光有针对性地干扰神经回路和确定神经元在大脑功能中发挥的因果作用。(记者 华凌) 《科技日报》(2012-05-11 二版)

  • 活体电穿孔法介绍

    1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115μm ,这种通道能维持几毫秒到几秒,然后自行恢复。在此期间生物大分子如DNA 可通过这种微小的通道进入细胞。近年来活体电穿孔法用于转基因研究的报道不断增多,在基因治疗方面的优势也日趋显著,是一种很好的活体基因导入方法。活体电穿孔法可用于检测瞬时表达系统中载体的表达状况。大量的研究表明活体电穿孔法在基因治疗方面有非常好的应用前景。因此目前国内外对活体电穿孔法介导外源基因转移的研究越来越多。2、活体电穿孔的法的特点 活体电穿孔法基因导入和表达效率较高,它的特点主要在以下几个方面:首先,靶器官的选择面广,理论上任何组织和器官都可以作为活体电穿孔的靶器官。 在用于基因治疗方面,要考虑到靶器官组织生理特性。如果所选择的局部组织细胞不能把所转移基因的表达产物分泌到外周血液循环中,则在某种意义上说已失去了基因导入的价值,这在基因治疗中是关键性的问题。当使用组织特异性表达载体时,研究人员应根据所构建的表达载体来选择基因转移和表达的靶器官组织。例如鱼精蛋白21 启动子可指导外源基因在精母细胞中特异性表达,以小鼠的睾丸作为靶器官将含有鱼精蛋白21启动子的表达载体导入,获得外源基因的表达量远远高于该基因在肝脏和骨骼肌中的表达。其次,对导入的外源基因片段的大小没有限制,从几KB 或十几KB 的表达载体, 到100~200KB 的YAC、BAC基因组 ,都有成功导入并获得表达的报道。此外活体电穿孔法操作简单快速,电穿孔的时间只有几秒钟,而且DNA片段不需要特殊的纯化操作。但电穿孔法也存在一些的缺点:首先,外源基因表达持续的时间很短,虽然外源基因导入后最快可在215 小时有表达,但大多1~2 月后表达量降至很低。外源基因表达的时间主要由于所构建的表达载体和基因导入的靶细胞组织器官不同而存在巨大差异。由于应用不同的表达载体,Muramatsu 在小鼠肝脏进行电穿孔7天后则检测不到外源基因的表达,而Heller 21 天后还可以检测到外源基因的表达。如果选择代谢和酶活动旺盛的组织器官如肝脏,则表达持续时间会较短,表达时间在1 个月以内,但以骨骼肌为靶组织,表达可持续15个月。3、 活体电穿孔法与其他活体基因导入方法的比较 到目前为止,非病毒载体的活体基因导入方法有直接注射法、脂质体法、基因枪法、电穿孔法等。每一种方法都有其各自的特殊性,因此很难将这几种方法进行简单的比较。直接注射法:可将外源基因直接注射到靶位点或血管中,但此种方法不适合以肌肉作为靶器官,它的外源基因表达效率极低,仅为电穿孔法的百分之一。脂质体法:活体基因转移法中脂质体法更适宜较大面积组织的基因导入,但无法避免DNA浓度变低,在出血的情况下会使本来不高的DNA浓度更加降低,往往造成基因导入效率低。基因枪法:适合于DNA较易接触到的质地较坚韧的组织如皮肤,而视网膜、胚胎和禽类的胚盘等组织会由于机械刺激和出血造成器质性损伤或发育停滞,因而不能用基因枪法完成。DNA包裹的金属颗粒从基因枪发出到达组织表面大多只几百微米的距离,较深层的组织不易操作, 表达效率也较低。Muramatsu报道在材料一致的情况下,电穿孔法的基因导入和表达效率明显高于其它方法,而且电穿孔法适合多种组织的操作 。4 、活体电穿孔法施加条件的研究 波型的选择在电穿孔过程中方波较指数衰减波更能获得较高的基因表达。同时方波只要要求控制电压和时间,十分直观,而指数衰减波需要控制的电压、电容、电阻等参数,这样的条件摸索过程中,方波较指数衰减波更易得到高表达。

  • 手持式植物养分速测仪如何检测植物叶面温度

    手持式植物养分速测仪如何检测植物叶面温度

    [size=16px]  手持式植物养分速测仪如何检测植物叶面温度  手持式植物养分速测仪通常不用于测量叶面温度,而是用于测量植物的营养元素含量、叶绿素含量等参数。要测量叶面温度,通常需要使用红外热像仪或红外温度计等专门的仪器。以下是如何使用红外热像仪来测量植物叶面温度的一般步骤:  准备手持式植物养分速测仪:  打开手持式植物养分速测仪,并确保它已经达到稳定的工作状态。  根据仪器的使用说明,进行必要的校准和设置。  准备测量环境:  在测量之前,确保测量环境没有明显的干扰因素,如直射阳光、风、或其他热源。  将手持式植物养分速测仪对准要测量的植物叶面区域。  进行测量:  按下手持式植物养分速测仪上的触发按钮来拍摄或记录叶面的红外热图像。  等待仪器处理图像数据,以获取叶面温度信息。  手持式植物养分速测仪可以直接显示叶面温度,而其他仪器可能需要将数据传输到计算机或移动设备上进行分析。  分析结果:  分析所获得的红外热图像,查看叶面温度的分布情况。  记录或分析所需的温度数据,以了解植物的温度状况。  云唐手持式植物养分速测仪能够测量物体表面的温度,因此可以用于监测植物叶面的温度分布,以帮助农业和植物研究人员更好地理解植物的生长和健康状态。要获得准确的叶面温度数据,确保仪器的使用和环境设置是适当的,并根据仪器的说明进行操作。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309181128595765_5081_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 动植物样品的采集及DNA样品的提取(ZT)

    动植物样品的采集及DNA样品的提取1.动物样品的采集及处理方法 遗传学数据在野生动物和圈养动物的保护和管理中变得日益重要。在本文中,我们总结了一些能简便而有效地获得样品及数据的方法。 我们在采集样品之前,最好对将要进行的遗传学分析有所了解。然而,采集者并非都是研究者,当采集地与实验室有相当距离时,采集者常常要保存好样品直到有合适的接受者或存放地,这就要求采集者应具备一定的经验。 首先,所有样品均应以个体序号进行标注,并且应写上种名、性别、采样者姓名以及采集日期,越详尽越好,以便同一个体的不同类数据可以相互引用,另外,地理来源的标注也很重要,需要注明。对于野外捕获的动物,有条件者最好在地图上标明捕获地及其经纬度。对圈养动物的每个野外捕获种源都要有同样的记录和详尽的谱系图,因为谱系图可用于计算近交系数。 总之,背景资料越详细越好,即使不能得到这里所列的全部信息,也要尽可能详尽。1.1 样品的测量方法在一定数量的分类群中采用的标准测量方法可用于以下四个方面:(1)分类学上:一套理想的测量方法应能大致上重建机体每个主要硬件部分的形状和大小。(2)不对称性分析:机体各部分的起伏不对称,也许表明进化过程在一定程度上正在变得不稳定,这可能是环境压力或近交的结果。测量不对称时机体左右两部分均应考虑在内。(3)遗传变异:在科级水平上,如果对同一年龄的个体采用同样的测量方法,就有可能对所选特征中的遗传成分变异进行粗略的估计。虽然并非总是能做到这样,但能使遗传学家对所选特征(如生殖特征方面遗传变异的任何丢失)进行监视。(4)生理检测或记录:采用标准测量方法得到的记录,也许会有助于与用其他手段得到的数据联系起来分析。例如,如果有了精子形态的记录,或是特殊寄生物的感染记录,遗传学家就能因此寻找在不同群体中这些因素与变异水平的相关性。1.2 组织样品的采集和保存 下面详细给出针对不同研究目的的适当方法。当然,每个实验室都有各自习惯的组织处理方法,因此,本文仅给出快速保存的有关要求,但对每种组织的可用性都有所评述,以便在用途有冲突时,能对潜在数据的可能应用作出迅速判断。 使用肿瘤、毛发及精子样品,保存时应特别注意。使用细胞培养样品可减少对活体或新杀动物的依赖,如果培养物来源于肿瘤组织细胞,则可大量减少对同种动物组织的进一步需求。组织材料必须在数小时内送到有关实验室或用于其他的细胞培养。如果已经知道DNA 序列的一小部分,就可利用PCR 技术从很少一部分组织中扩增DNA,从而使极其稀少的样品(如一根毛发或单个精子)具有更高的利用价值和更大的可信度。组织必须取自活体动物或死后1~2 分钟内的动物,并且要快速保存起来,除非出现下述情况:在野外条件或是匆忙安排的活体取样,因此没有时间同实验室联系。此时要有目的地扩大采集和储存量。如果已经详细知道样品的确切用途,则有时条件可以放宽。例如,对血液样品来说,有些酶是不要求立即冻存的。快速冻存时样品可放人液氮、干冰中或直接放入-70℃冰箱。冻存样品可在—70℃液氮、冰箱、干冰或-20℃冰箱中保存和运输。样品冻存及运输均以放入液氮中效果较好。非冻结冰箱是不能用的。

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