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高效液相色谱仪二极管阵列检测器荧光检测

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高效液相色谱仪二极管阵列检测器荧光检测相关的论坛

  • 【转帖】高效液相色谱仪的研制与技术开发--新型二极管阵列检测器

    高效液相色谱仪的研制与技术开发--新型二极管阵列检测器洪群fa(发) 张庆和 李彤 张维冰 张玉奎(大连依利特分析仪器有限公司,中国科学院大连化学物理研究所,大连,116011)摘要:介绍一种新型的高效液相色谱二极管阵列检测器。该仪器采用光纤传导技术和全封闭光学系统,具有较高的光谱分辨率和检测灵敏度。采用虚拟设备驱动技术配合功能强大的数据处理系统可为用户提供色谱、光谱,三维谱图及色谱峰纯度等大量的信息。关键词:高效液相色谱;二极管阵列检测器;虚拟设备驱动[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=70594]新型二极管阵列检测器[/url]

  • 【资料】-一种新型高效液相色谱二极管阵列检测器

    [b]一种新型高效液相色谱二极管阵列检测器[/b][i]范安定,张云海,林从敬等;[/i]摘 要:研制了一种全封闭光学系统的高效液相色谱二极管阵列检测器。这种全封闭结构可以同时提高灵敏度、光谱分辨率和线性范围,对萘的最小检测量在230nm下可达1×10-10g,且线性范围比为5×104。该检测器所采集的连续波长吸光度数据可以形成形象直观的三维谱图,以几种芳香类化合物为研究对象,验证了该系统的各项性能。关键词:高效液相色谱 二极管阵列检测器 全封闭光学系统80年代二极管阵列检测器(DAD)的发明开创了液相色谱的新纪元,该检测器在一次分析过程中记录了所有的光谱信息,可提供最佳波长的确定、峰纯度检验和色谱峰鉴定。随着液相色谱技术的成熟,检测器的设计与应用正转向定性分析,尽管普通的紫外可变波长检测器在定量上具有灵敏度高和线性好的优点,新一代的检测器更要能提供对色谱峰进行鉴定和跟踪的定性信息。目前国内尚无商品化的仪器。基于这一趋势,我们对80年代研制的2030型DAD检测器的光学系统在技术上进行了重大改进和突破,研制了一种新型的全封闭光学系统的DAD检测器。以几种芳香类化合物为研究对象,验证了该系统的各项性能,证实了该系统性能优良。1 检测器结构与性能对比1.1 检测器结构该系统的结构由光学、电路及软件部分组成。光学部分由光源、聚光透镜、流动池、全息凹面光栅及光导纤维组成,它将光源产生的混合光经表面色散分成连续波长的平行光照射到二极管阵列上,光学部分采用全封闭的结构 电路部分接收光电二极管阵列产生的电流信号,并对所收到的电流信号进行电压转换、放大、滤波、AD转换和产生中断触发、进行数据采集,同时对光电二极管阵列进行反控 软件部分分为数据采集、数据处理、图形处理及仪器维护四个模块,数据采集模块包括数字滤波、数据读取与存储和实时显示,数据处理模块完成谱图显示、峰纯度检测、最佳波长选择及光谱、色谱处理,图形处理模块实现等高线及三维图的处理,仪器维护模块实现仪器的状态判断与维护。

  • 【求助】高效液相色谱仪检测器的成交价

    高效液相色谱仪检测器的成交价有哪位大侠知道下列高效液相色谱仪的成交价格吗?Waters 高效液相色谱仪(二极管阵列检测器)岛津高效液相色谱仪(二极管阵列检测器)Agilent 高效液相色谱仪(二极管阵列检测器)

  • 【参数解读】解析液相色谱二极管阵列检测器技术指标

    【参数解读】解析液相色谱二极管阵列检测器技术指标

    二极管阵列检测器参数解读二极管阵列检测器 即光电二级阵列管检测器又称光电二极管列阵检测器或光电二极管矩阵检测器,表示为PDA(photo-diode array)、PDAD(photo-diode array detector)或(Diode array detector,DAD)是20世纪80年代出现的一种光学多通道检测器。在晶体硅上紧密排列一系列光电二极管,每一个二极管相当于一个单色器的出口狭缝,二极管越多分辨率越高,一般是一个二极管对应接受光谱上一个纳米谱带宽的单色光。此外,还有的商家称之为多通道快速紫外-可见光检测器(multichannel rapid scanning UV-VIS detector),三维检测器(three dimensional detector)等。光电二极管阵列检测器目前已在高效液相色谱分析中大量使用,一般认为是液相色谱最有发展、最好的检测器。工作原理结构图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/03/201303051617_428518_1608710_3.jpg◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆列举部分仪器的个别参数,供参考:波长范围:190 nm ~ 950 nm; 光源:氘灯和钨灯; 二极管数量:1024个或512个光电二极管阵列; 波长准确度:± 1nm (D2峰);光谱分辨率:1.2nm (固定)噪音:10 X 10-6AU ,254nm漂移:1X10-3 AU/hr ,254nm狭缝带宽:1-16 nm 可调; 采集速率:80HZ; 流通池:标准:体积15.5μL,光程10mm,压力1000psi;半微量:体积6μL,光程5mm,压力1000psi;微量:体积2μL,光程2mm,压力1000psi.〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓分割线〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓请您来解析:1、你觉得哪些参数是这个仪器的心脏?2、光源有些厂家的检测器只有氘灯,而有些是两个灯,为什么?3、二极管数量会影响仪器性能么?4、采集速率、狭缝带宽、波长准确度这几个参数是否能显示仪器竞争优势?5、你的流通池都是什么规格的?6、仪器检定的时候都测哪几个参数?如何测?7、你对厂家的检测器噪声和漂移两个参数是如何理解和认识的?8、你的色谱工作站对检测器的控制和操作是否快捷方便?有哪些优势和缺点?比如峰纯度测试、匹配、数据的提取等等欢迎大家参与讨论,说说自己的认识或者提出自己的疑问!!!

  • 【原创】关于二极管阵列检测器波长问题

    我知道:紫外-可见光(UV-VIS)检测器 原理: 基于Lambert-Beer定律,即被测组分对紫外光或可见光具有吸收,且吸收强度与组分浓度成正比。很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团,有较强的紫外或可见光吸收能力,因此UV-VIS检测器既有较高的灵敏度,也有很广泛的应用范围。由于UV-VIS对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感,所以还能用于梯度淋洗。一般的液相色谱仪都配置有UV-VIS检测器。用UV-VIS检测时,为了得到高的灵敏度,常选择被测物质能产生最大吸收的波长作检测波长,但为了选择性或其它目的也可适当牺牲灵敏度而选择吸收稍弱的波长,另外,应尽可能选择在检测波长下没有背景吸收的流动相。  二极管阵列检测器(diode-array detector, DAD): 以光电二极管阵列(或CCD阵列,硅靶摄像管等)作为检测元件的UV-VIS检测器.它可构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号,然后,对二极管阵列快速扫描采集数据,得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。与普通UV-VIS检测器不同的是,普通UV-VIS检测器是先用单色器分光,只让特定波长的光进入流动池。而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池,然后通过一系列分光技术,使所有波长的光在接受器上被检测。二极管阵列检测器可以获得全波长的样品信息,而且可以根据吸收光谱辅助定性。但相对来说,专门的紫外检测器灵敏度能高一些。二极管阵列检测器是检测的全波长,但是我做的产品需要打印特定波长下的谱图。现在我只会一个一个在离线下改波长。但我听说lc solution是可以在一开始做样前改方法的,不知道怎么弄,希望前辈能指点!谢谢!

  • 想买一液相色谱,配二极管阵列检测器,还需要配紫外检测器吗?

    请教大家:1、想买一液相色谱,配二极管阵列检测器,还需要配紫外检测器吗?2、原有一台安捷伦1100带紫外检测器,想再增加一个蒸发光检测器,请大家推荐哪家大好,同时又能兼容(主要使两个检测器要能简便的互换使用,不要拆卸太麻烦)。3、蒸发光检测器需要用到气源,需要单独的实验室吗?需要气体间吗?谢谢大家。

  • 【采购之新品早知道5】新购的液相色谱仪你会选择二极管阵列检测器吗?

    随着安捷伦1200系列二极管阵列检测器(diode-array detector, DAD)的推出市场,你会选择购买吗?工作原理介绍:DAD构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号,然后,对二极管阵列快速扫描采集数据,得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。比较:普通UV检测器是先用单色器分光,只让特定波长的光进入流动池。而二极管阵列检测器是先让所有波长的光都通过流动池,然后通过一系列分光技术,使所有波长的光在接受器上被检出。问题来了:[color=#DC143C]1.你了解DAD的具体用途吗?2.你新购的液相会选择DAD吗?[/color][em09505]欢迎您的发言!

  • 【求助】如何将岛津二极管阵列(M20A)和荧光(10AXL)检测器串联?

    各位大侠,前辈: 你们好!想请教一下,如何能将岛津二极管阵列(M20A)和荧光(10AXL)检测器串联起来呀, 我用的是岛津高效液相色谱,控制器型号CBM-20A 现有几个疑问: A. 应该将二极管接在荧光的前面还是后面呢?(是否要考虑到哪个检测器更耐压) B. 仪器设备如何连接? C. 软件设置应该如何设置?(我用的是自动进样器,想让仪器晚上也可以跑样,能够用完二极管就能接着用荧光,或者同时用两个检测器) 刚接触液相不久,好多不太了解,希望做过这样操作的各位大侠,前辈能指点指点一下!万分感激!谢谢!

  • 【参数解读总结篇】液相色谱二极管阵列检测器

    【参数解读总结篇】液相色谱二极管阵列检测器

    【参数解读】解析液相色谱二极管阵列检测器技术指标http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20130305/4601686/工作原理结构图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_646650_1608710_3.jpg◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆列举部分仪器的个别参数,供参考:波长范围:190 nm ~ 950 nm; 光源:氘灯和钨灯; 二极管数量:1024个或512个光电二极管阵列; 波长准确度:± 1nm (D2峰);光谱分辨率:1.2nm (固定)噪音:10 X 10-6AU ,254nm漂移:1X10-3 AU/hr ,254nm狭缝带宽:1-16 nm 可调; 采集速率:80HZ; 流通池:标准:体积15.5μL,光程10mm,压力1000psi;半微量:体积6μL,光程5mm,压力1000psi;微量:体积2μL,光程2mm,压力1000psi.〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓分割线〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304181710_436034_1608710_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304181711_436036_1608710_3.jpg欢迎大家继续补充!!!

  • 高效液相色谱仪 采购调查

    单位欲增购一台高效液相色谱仪,不知道大家用的是哪些厂家的仪器,型号、价格及效果如何?目前市场上认可率较好的厂家有哪些呢?我们想配置的检测器为二极管阵列检测器和荧光检测器。咨询了一个安捷伦1260 Infinity LC仪器,报价在50-60w,价格不知道是否合理。请各位交流下。谢谢

  • 高效液相色谱仪常用检测器的种类

    检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。    1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet-visible detector,UVD)     紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。   (1)紫外吸收检测器     紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm~800nm)。它有两个流通池,一个作参比,一个作测量用,光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,无信号输出。当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。 局限:流动相的选择受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相,每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。   (2)光电二极管阵列检测器(photodiode array detector, PDAD)     也称快速扫描紫外可见分光检测器,是一种新型的光吸收式检测器。它采用光电二极管阵列作为检测元件,构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号,然后对二极管阵列快速扫描采集数据,得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。由此可及时观察与每一组分的色谱图相应的光谱数据,从而迅速决定具有最佳选择性和灵敏度的波长。     单光束二极管阵列检测器,光源发出的光先通过检测池,透射光由全息光栅色散成多色光,射到阵列元件上,使所有波长的光在接收器上同时被检测。阵列式接收器上的光信号用电子学的方法快速扫描提取出来,每幅图象仅需要10ms,远远超过色谱流出峰的速度,因此可随峰扫描。    2.荧光检测器(fluorescence detector, FD)     荧光检测器是一种高灵敏度、有选择性的检测器,可检测能产生荧光的化合物。某些不发荧光的物质可通过化学衍生化生成荧光衍生物,再进行荧光检测。其最小检测浓度可达0.1ng/ml,适用于痕量分析;一般情况下荧光检测器的灵敏度比紫外检测器约高2个数量级,但其线性范围不如紫外检测器宽。  近年来,采用激光作为荧光检测器的光源而产生的激光诱导荧光检测器极大地增强了荧光检测的信噪比,因而具有很高的灵敏度,在痕量和超痕量分析中得到广泛应用。    3. 示差折光检测器(differential refractive Index detector, RID)     示差折光检测器是一种浓度型通用检测器,对所有溶质都有响应,某些不能用选择性检测器检测的组分,如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等,可用示差检测器检测。示差检测器是基于连续测定样品流路和参比流路之间折射率的变化来测定样品含量的。光从一种介质进入另一种介质时,由于两种物质的折射率不同就会产生折射。只要样品组分与流动相的折光指数不同,就可被检测,二者相差愈大,灵敏度愈高,在一定浓度范围内检测器的输出与溶质浓度成正比。 4. 电化学检测器(elec)chemical detector, ED)     电化学检测器主要有安培、极谱、库仑、电位、电导等检测器,属选择性检测器,可检测具有电活性的化合物。目前它已在各种无机和有机阴阳离子、生物组织和体液的代谢物、食品添加剂、环境污染物、生化制品、农药及医药等的测定中获得了广泛的应用。其中,电导检测器在离子色谱中应用最多。   电化学检测器的优点是: [/colo

  • 【求助】岛津液相色谱仪DAD检测器

    本人刚使用岛津的液相色谱仪,检测器是二极管阵列检测器,我想问大家一下:怎么看光谱图和峰纯度?原来我主要用紫外检测器,对二极管阵列的性能不是很熟悉,希望大家能够指点一下,谢谢

  • 岛津LC20A二极管阵列检测器-荧光检测器法测定物质确定其荧光检测的激发、发射波长

    岛津LC20A二极管阵列检测器-荧光检测器法测定物质确定其荧光检测的激发、发射波长

    [color=#444444]用岛津LC20A高效液相色谱-二极管阵列检测器-荧光检测器法测定物质,得出等高线视图、色谱图视图、纯度视图后,如何分析该物质的最大吸收波长?[/color][color=#444444]得出最大物质吸收波长后,怎样确定其荧光检测的激发、发射波长?[/color][color=#444444][img=,553,412]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909031443365404_9125_1806906_3.jpg!w553x412.jpg[/img][/color][color=#444444][color=#008000]等高线视图、色谱图视图[/color][/color][color=#444444][color=#008000][img=,690,366]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909031444024440_2946_1806906_3.jpg!w690x366.jpg[/img][/color][/color][color=#444444][color=#008000][color=#008000]纯度视图[/color][/color][/color]

  • 【原创大赛】利用紫外和荧光光谱扫描技术开发高效液相色谱-荧光检测方法全过程

    【原创大赛】利用紫外和荧光光谱扫描技术开发高效液相色谱-荧光检测方法全过程

    利用紫外和荧光光谱扫描技术开发高效液相色谱-荧光检测方法全过程荧光是光致发光中的一种,荧光过程是物质吸收入射光进入激发态,从激发态回到基态并发出波长更长得光的过程,在此过程中,物质吸收的光为激发光,发出的光为发射光(这个定义并不准确,有兴趣的版友可以参照相关教科书)。荧光检测在高效液相色谱中是比紫外检测更灵敏的检测方法,但是能够发出荧光的物质并不多,如何判断分析物有没有荧光特性并优化荧光检测器参数是荧光检测方法开发过程的重要内容。荧光检测方法优化的最重要两个参数是确定激发波长和发射波长。二极管阵列检测器(DAD)可以提供分析物在流动相的紫外吸收光谱,基于提取的紫外吸收光谱在日常高效液相色谱分分析中主要有两大作用:1.发现并确定紫外检测器的最佳检测波长;2进行进一步的运算做峰纯度检查,判断有没有共流出物。在这里通过实例向大家介绍二极管阵列检测器的另一用处:二极管阵列检测器辅助荧光检测器开发分析物的高效液相色谱-荧光检测方法。1实验设备和基本实验条件:Waters 2695分离单元Waters 2996 二极管阵列检测器Waters 2475 荧光检测器二极管阵列检测器和荧光检测器串列,荧光检测器在后(检测池耐压较差)二者之间死体积为1ml/min×0.1min。分析物为两种原料药色谱柱:C18,4.6×150mm,5μm柱温:30℃流动相:乙腈:醋酸盐缓冲溶液=65:352实验A:二极管阵列检测器获取紫外吸收光谱,荧光检测器扫描发射光谱实验仪器设置 :2996 3D采集模式,获取210-400nm紫外吸收谱图2475 3D采集模式,固定激发波长220nm(一般有紫外吸收的物质在210-230nm都有吸收),获取250-650nm发射光谱。利用二极管阵列检测器来判断化合物的出峰时间,图1是在254nm下提取的分析物1和分析物2的色谱图,信号很弱。依照二极管整列检测器提取的色谱图,根据连接二极管阵列检测器和荧光检测器的管路体积,推算二者之间死时间约为0.1min。在荧光检测器中调出发射波长3D图,在250-650nm每间隔50nm提取一次色谱图(即250nm,300nm,350nm…),根据紫外色谱图的分析物保留时间,确定荧光色谱图中分析物的出峰时间。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112130845_337609_2265735_3.jpg图1 二极管阵列检测器色谱图和提取的分析物紫外吸收色谱图在提取的荧光色谱图中,分析物1有荧光(300nm,图2),而分析物2没有。在荧光检测中,会有很多杂质峰出现(图3,在发射400nm提取的色谱图),而紫外检测器中不一定会发现,利用二极管阵列检测器获得的谱图有利于准确定位分析物在荧光色谱图出现的位置,排除杂质干扰(图3)。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112130846_337610_2265735_3.jpg图2 从激发波谱300nm发射光提取的色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112130848_337612

  • 安捷伦二极管阵列检测器选购疑问

    最近实验室要向安捷伦购买一台1260的液相,带二极管阵列检测器,销售人员向我们提供了一个选择Agilent 1260 Infinity二极管阵列检测器(G4212B)和Agilent 1260 Infinity二极管阵列检测器(G1315D)请问G4212B和G1315D有什么区别吗?哪个更好用点?我们实验室主要检测食品的。希望各位大虾们多多指教!

  • 二极管阵列检测器PDA与DAD原汁原味的解释

    A diode array is a bank of many diodes. Each of these diodes cause electricity to flow in one direction. In the case of diodes which are sensitive to light, these diodes are termed photo diodes, hence the detector is a photodiode array detector (PDA). In HPLC Diode array detector (DAD) is a colloquial term for a PDA, it does not specify the parameter which causes the electricity to flow. The WaveQuest uses a different type of technology, which involves dynamic Absorbance detection technology, hence the term dynamic Absorbance detector (DAD). I am sorry, but the details of that technology are company confidential. 二极管是一种允许电流单向流动的设备。二极管阵列是一组二极管,每个二极管都只允许电子单向流动。有些二极管对光非常敏感,所有称为光电二极管photodiode,因此这种检测器称为光电二极管阵列检测器Photodiode array detector,PDA.液相色谱的Diode Array Detector(DAD)是PDA的口语化的表达方式,这种表达方式没有指明是什么因素导致电子的单向流动。

  • 光二极管阵列检测器

    光二极管阵列检测器是一种对光子有响应的检测器。它是由硅片上形成的反相偏置的p-n结组成。反向偏置造成了一个耗尽层,使该结的传导性几乎降到了零。当辐射照到n区,就可形成空穴和电子。空穴通过耗尽层到达p区而湮灭,于是电导增加,增加的大小与辐射功率成正比。光二极管阵列检测器每平方毫米含有15000个以上的光二极管。每个二极管都与其邻近的二极管绝缘,它们都联结到一个共同的n型层上。当光二极管阵列表面被电子束扫描时,每个p型柱就连接着被充电到电子束的电位,起一个充电电容器的作用。当光子打到n型表面以后形成空穴,空穴向p区移动并使沿入射辐射光路上的几个电容器放电。然后当电子束再次扫到它们时,又使这些电容器充电。这一充电电流随后被放大作为信号。光二极管阵列可以制成光学多道分析器。

  • 【分享】二极管阵列检测器应用经验点滴

    二极管阵列检测器可提取某一色谱峰的光谱图、可进行峰纯度检测,在药品日常检验和方法学验证中有广泛应用,这里介绍我所工作中的几个应用实例,供同行参考。 一、用HPLC法测定含量,当结果明显偏高时,进行峰纯度检查非常必要,可提示有无杂质干扰。我所按USP29检测某企业生产的三批“D-氨基葡萄糖硫酸钾盐”含量测定时,发现每批样品均在104.0%~105.0%之间,用二极管阵列检测器进行峰纯度检测,发现峰不纯,提示含有杂质。这一提示使我们进一步研究发现检测原理错误(论文发表在《中国现代应用药学》2008年6月第25卷第3期上)。二、对峰的每一点进行光谱提取,有时可提示有无疑似物。2007年,我们用HPLC法检测“天蚕镇痛片”非法添加双氯芬酸盐的过程中,用平时建立的同时鉴定多种解热镇痛药的HPLC法进行鉴定时,曾经得出不含双氯酚酸盐成分的结论,差一点错失良机。后用峰纯度检测功能对每一个峰进行纯度检测,发现其中3个峰不纯,对这3个峰的每一点进行光谱提取,发现在与双氯酚酸盐保留时间接近的色谱峰的某一较窄区段,其提取光谱基本一致,使我们得出处方中中药成分有较大干扰,导致色谱保留时间与提取光谱图与目标物不符,明确了下一步要把这一峰分开的实验思路,最终成功检出。三、利用提取光谱确定疑似目标物。我们在非标检测中,有时发现色谱图上的某一色谱峰的提取光谱形状与某一化学药品类似,进而用该化学药品的对照品进行比较,往往能减少不必要的筛选实验,加快目标物的确定。不过,这需要平时专业理论和学习经验的积累,同时应注意色谱条件不同可能引起光谱形状的不同。四、峰位置的确定。在HPLC法中,有时碰到几种主成分同时分析,事先需要分别进样确定某一成分峰的位置,当几种成分的峰形状特别是最大吸收波长有较大差别时,可用二极管阵列检测器提取光谱进行确认,不必分别定位。

  • 每周一贴谈设计——光电二极管阵列检测器

    每周一贴谈设计——光电二极管阵列检测器

    每周一贴谈设计——光电二极管阵列检测器二极管阵列检测器有多种名称,可表示为PDA(photo-diode array)、PDAD(photo-diode array detector)或(Diode array detector,DAD),是液相色谱最有发展、最好的检测器。其主要工作原理如下:复色光通过样品池被组分选择性吸收后再进入单色器,照射在二极管阵列装置上,使每个纳米波长的光强度转变为相应的电信号强度,即获得组分的吸收光谱,从而获得特定组分的结构信息,有助于未知组分或复杂组分的结构确定。至于每个厂家如何实现,接下来进入主题。首先讲Waters。Waters推出的光电二极管检测器光路如下图所示:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/05/201305142225_440058_2352217_3.jpg氘灯产生的光首先被M1向流通池反射聚焦(M1为一个椭圆形镜面)。在M1和流通池之间有一个分光镜(Beam Splitter)将一部分光反射到参比二极管上,另一部分光路不变。经过流通池后再经M2反射聚焦,经过狭缝和光闸,到达光栅,经全息光栅衍射后被光电二极管阵列(512根,190nm-800nm波长范围)检测。接下来是AGILENT G1315的光路:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/05/201305142225_440059_2352217_3.png首先钨灯产生的光经耦合透镜聚焦,经过氘灯上一个预留的孔(故此氘灯有别于G1314上使用的)与氘灯的光轴重合。重合后的光经过一片透镜和一组消色差透镜后,再经过一片透镜,流通池,光谱透镜,和狭缝到达光栅,经全息光栅衍射后由光电二极管阵列(1024根,190nm-950nm波长范围)检测。看完这两种设计以后,我能感受到的第一个感觉是AGILENT用了好多的透镜啊!我们可以来看看各个透镜的用处。首先耦合透镜,这是一个聚焦的透镜,作用是将可见光聚焦到氘灯的光轴上。然后是一组消色差透镜。消色差透镜的作用其实是用于修正不同波长的光经透镜聚焦后导致的色差。光谱透镜就是为了将经流通池的光聚焦以增强光能量。还有一些平面透镜,这些大多仅仅是用于隔开各个腔室的。而Waters设计中只有两枚反射镜(球面、聚焦)和一枚分光镜。第二点是参比。可以看到Waters的设计中参比是有一个独立的参比二极管进行能量采集并反馈调节氘灯电压以控制灯状态的。至于数据中的参比,Waters的解释是“参比光谱是在打开光闸的情况下,在曝光时间指定的间隔期间内测量灯强度和流动相吸光度”,“为得到最佳结果,参比光谱应代表初始流动相”。AGILENT光路中并没有什么独立的参比二极管,而其数据中的参比则来自于参比波长带宽内的平均吸收。第三点是可见光区。其实氘灯本身在可见光区就有能量,只是比较低。至于能否使用,个人认为只要在应用中灵敏度、噪音、漂移等达到要求即可。同时Waters放弃钨灯也让其可以使用这种不同于AGILENT的光路设计。第四点是二极管数量。这么说吧,512根二极管,平均1.2nm每根的分辨率是足够的用的。而1024根二极管,我只能说AGILENT相应配套硬件配置不够,没有发挥其优势。最简单的例子是AGILENT在任意时间提取的光谱图是非常有问题的(不详细分析了,也可能部分与其数据算法有关)。第五点是波长准确性。由于氘灯的发射光谱有特征谱线(656.1nm和486.0nm,此两处较尖锐),故广泛用于紫外检测器中,以便于波长校准。之前有版友讨论说为什么氙气灯不用于紫外检测器,我想,主要就是这个原因吧。其实所谓的校准,真正目的是确定某根二极管对应的波长。然后计算第x根二极管采集的是哪些波长吸光度的平均值。AGILENT中提供了一个验证方法,即氧化钬测试,以验证计算结果与真实结果是否相符。Waters的验证方法则是将本次校准值与上次相比较,并没有额外引入其他的标准谱线。[/si

  • 紫外+光电抢占液相检测器50%的市场——液相色谱仪检测器配置调查,蒸发光散射检测器异军突起

    紫外+光电抢占液相检测器50%的市场——液相色谱仪检测器配置调查,蒸发光散射检测器异军突起

    之前版面做了个检测器配置调查,投票得到了积极响应,而且最多的检测器有上百票,数据也体现了一定的真实性你们实验室高效液相色谱仪配置了何种检测器?http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20111124/3665675/不同的检测器,检测项目不一样,应用领域也不一样,我们配置仪器,都是根据自己所需来定。先来看看这次的投票结果吧,如下图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/06/201306301645_448473_1608710_3.jpg图例分析:1、紫外检测器还是液相色谱的主导,因为它可以检测大部分液相色谱可以检测的化合物。VWD和DAD两项的投票基本一致,只是现在检测器在可变波长与二极管阵列的价格上有很大出入,VWD相对价格便宜,所以仪器配置的比例还是更高。2、示差检测器已经商品化很多年,再加上其独特的检测领域,特别是GPC分析仪器上的配置,所以它还占有很大比例。3、异军突起的我想应该是蒸发光散射检测器(ELSD)了,它的出现没有多少年,而它的配置居然占到了12%。目前虽然ELSD的很多检测方法没有标准化,但是中国药典在一部已经有很多采用了ELSD检测,而中药的分析,也是药品分析中的重要组成,很多药品企业应该都会考虑它吧。4、荧光检测器由于其灵敏度高,而且在液相领域应用也很广,检测机构一般都会配置。5、而目前有几个检测器,比如电化学检测器、电喷雾检测器等,这些都具有专一行,通用性差,所以基本都是专用液相配置的多。大家有自己的想法,欢迎补充!!!

  • Waters 液相配二极管阵列检测器能用来检测16中PAHs吗

    如题,以前用梯度洗脱的方法,用紫外和荧光两种检测器来测16种PAHs,岛津的仪器用了十几年了,现在彻底坏掉了,研究所又买了新的Waters的液相配二极管阵列检测器,想问问不另外增减检测器,能用来测PAHs吗?

  • 【转帖】二极管阵列检测器应用经验点滴。

    二极管阵列检测器可提取某一色谱峰的光谱图、可进行峰纯度检测,在药品日常检验和方法学验证中有广泛应用,这里介绍我所工作中的几个应用实例,供同行参考。一、用HPLC法测定含量,当结果明显偏高时,进行峰纯度检查非常必要,可提示有无杂质干扰。我所按USP29检测某企业生产的三批“D-氨基葡萄糖硫酸钾盐”含量测定时,发现每批样品均在104.0%~105.0%之间,用二极管阵列检测器进行峰纯度检测,发现峰不纯,提示含有杂质。这一提示使我们进一步研究发现检测原理错误(论文发表在《中国现代应用药学》2008年6月第25卷第3期上)。二、对峰的每一点进行光谱提取,有时可提示有无疑似物。2007年,我们用HPLC法检测“天蚕镇痛片”非法添加双氯芬酸盐的过程中,用平时建立的同时鉴定多种解热镇痛药的HPLC法进行鉴定时,曾经得出不含双氯酚酸盐成分的结论,差一点错失良机。后用峰纯度检测功能对每一个峰进行纯度检测,发现其中3个峰不纯,对这3个峰的每一点进行光谱提取,发现在与双氯酚酸盐保留时间接近的色谱峰的某一较窄区段,其提取光谱基本一致,使我们得出处方中中药成分有较大干扰,导致色谱保留时间与提取光谱图与目标物不符,明确了下一步要把这一峰分开的实验思路,最终成功检出。三、利用提取光谱确定疑似目标物。我们在非标检测中,有时发现色谱图上的某一色谱峰的提取光谱形状与某一化学药品类似,进而用该化学药品的对照品进行比较,往往能减少不必要的筛选实验,加快目标物的确定。不过,这需要平时专业理论和学习经验的积累,同时应注意色谱条件不同可能引起光谱形状的不同。四、峰位置的确定。在HPLC法中,有时碰到几种主成分同时分析,事先需要分别进样确定某一成分峰的位置,当几种成分的峰形状特别是最大吸收波长有较大差别时,可用二极管阵列检测器提取光谱进行确认,不必分别定位。http://www.zjyj.org.cn/jykjdetial.asp?id=706

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