食品中草甘膦草铵磷氨甲基磷酸残留检测

本文参考标准SN/T 4655-2016《出口食品中草甘膦及其代谢物残留量测定方法 液相色谱-质谱/质谱法》，采用生物惰性超高效液相色谱四极杆质谱联用仪建立了一种直接测定食品中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留量的方法。该方法使用非衍生化法，前处理操作简单。生物惰性超高效液相色谱仪可抑制金属吸附，改善峰形，提升灵敏度，降低残留。草甘膦和氨甲基膦酸在2~500 ng/mL线性范围内线性良好，相关系数均大于0.999，准确度在92.3%~111.5%之间。该方法定量限为2.5 μg/kg，远低于标准规定的50 μg/kg。

草甘膦（GLY）是一种高效、低毒、廉价的内吸传导型广谱灭生性除草剂，被广泛施用于茶园等农业生产中。随着草甘膦的广泛使用，其在茶叶、水果等植物源食品中残留量的检测越来越受到关注。草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸具有极性强、易溶于、难溶于各种有溶剂，这给常规检测带来了极大的困难和挑战。逗点生物在2021年推出过检测茶叶中Copure® 草甘膦的专用柱（货号：COGLY3000）及其应用方案。然而，客户在方法开发时依然遇到了很多问题，如方法很难重现、峰形不好、质谱找不到母离子等，鉴于此我司对该法进行了完善，详细考察了其前处理条件，并用优化后的方法对红茶、绿茶、青茶进行了样品处理，都能够获得满意的实验结果。本文把完善后的方案及优化过程一并呈现给大家，供参考。

本应用简报介绍了一种基于液相色谱?三重四极杆质谱联用技术，同时测定饮用水中的草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸的方法。该方法采用 Hilic 模式色谱柱实现三种强极性化合物的分离，各化合物的定量限在 0.20–0.58 µ g/L 之间 ；在自来水基质中的两种加标浓度下，各化合物的加标回收率在 63.3%–88.3% 的范围内，且六次平行测定结果的相对标准偏差在 1.3%–7.4% 的范围内。这些结果表明，该方法不仅快速简便，而且具有出色的灵敏度、准确度和精密度，适用于对饮用水中的草甘膦等强极性除草剂进行高通量检测

草甘膦是世界上应用最广的除草剂之一。超过30年来它被用作系统除草剂来对付野草和杂草，例如控制铁路上的植被。草甘膦最主要的降解产物是氨甲基磷酸，它也可以由其他的磷酸降解形成。 德国饮用水法案对除草剂和农药设定的含量限度为单个物质不得高于0.1µ g/L且总物质不得高于0.5µ g/L。地表水研究显示草甘膦的含量有时达到µ g/L水平。曾发现在鲁尔河的基本污染物中氨甲基磷酸含量达到0.73 µ g/L。因此对草甘膦的可靠检测显得势在必行

草铵膦是作为氨基酸类除草剂而被广泛使用的农药，草甘膦是作为茎叶处理除草剂而被广泛使用的农药。草甘膦在土壤中和水中代谢，生成氨甲基磷酸（AMPA）。二者均为极性极高的化合物，在HPLC、LC-MS中很难在反相模式下保持，因此，一般使用FMOC进行衍生化分析。

我国《GB 5749-2022 生活饮用水卫生标准》规定饮用水中草甘膦及2,4-滴的限值分别为0.7 mg/L及0.03 mg/L，氨甲基膦酸未给出具体限值，但氨甲基膦酸及草甘膦均属于有机磷农残，同样会对人体健康造成危害。因此，《GB/T 5750.6-2022 生活饮用水检验方法 》中推荐以离子色谱方法检测饮用水中氨甲基磷酸含量，并且与草甘膦同时分析。2,4-滴是用于防治阔叶杂草的除草剂，与草甘膦混在一起使用，增强除草效果，但其会污染水源，影响人类身体健康。 《GB/T 5750.6-2022 生活饮用水检验方法 》中推荐用液液萃取气相色谱法及液相色谱质谱联用检测饮用水中2,4-滴含量。其中，液液萃取气相色谱法需要在酸性条件下用乙酸乙酯萃取目标物，然后在碱性条件下用碘甲烷溶液进行酯化，操作繁琐，容易造成前处理损失，影响检测结果。液相色谱质谱联用法前处理步骤如下：先将目标物富集在浓缩柱中，然后丙酮洗脱，氮气吹干，用水复溶后进样，同样存操作繁琐的缺陷，并且目标物的富集效率会影响检测结果的准确性。本方法结合2,4-滴，草甘膦及氨甲基膦酸的强极性及易电离的特点，采用抑制电导法同时分离、检测以上化合物。本方法样品直接进样即可，无需任何衍生化、富集等前处理步骤，操作简单、高效，且高灵敏度的电导检测器满足《GB 5749-2022 生活饮用水卫生标准》中的限量要求。同时为了提高分析效率，本方法将常规阴离子与以上三种化合物同时分析，借助于氢氧根体系的梯度洗脱优势，将样品中ppm级别的常规阴离子与ppb级别的杂质离子之间分离度满足色谱定量要求。本方法通过方法学验证，其检出限、稳定性及准确性满足色谱定量要求，可用于饮用水中以上离子的同时分析。

我国《GB 5749-2022 生活饮用水卫生标准》规定饮用水中草甘膦及2,4-滴的限值分别为0.7 mg/L及0.03 mg/L，氨甲基膦酸未给出具体限值，但氨甲基膦酸及草甘膦均属于有机磷农残，同样会对人体健康造成危害。因此，《GB/T 5750.6-2022 生活饮用水检验方法 》中推荐以离子色谱方法检测饮用水中氨甲基磷酸含量，并且与草甘膦同时分析。2,4-滴是用于防治阔叶杂草的除草剂，与草甘膦混在一起使用，增强除草效果，但其会污染水源，影响人类身体健康。 《GB/T 5750.6-2022 生活饮用水检验方法 》中推荐用液液萃取气相色谱法及液相色谱质谱联用检测饮用水中2,4-滴含量。其中，液液萃取气相色谱法需要在酸性条件下用乙酸乙酯萃取目标物，然后在碱性条件下用碘甲烷溶液进行酯化，操作繁琐，容易造成前处理损失，影响检测结果。液相色谱质谱联用法前处理步骤如下：先将目标物富集在浓缩柱中，然后丙酮洗脱，氮气吹干，用水复溶后进样，同样存操作繁琐的缺陷，并且目标物的富集效率会影响检测结果的准确性。本方法结合2,4-滴，草甘膦及氨甲基膦酸的强极性及易电离的特点，采用抑制电导法同时分离、检测以上化合物。本方法样品直接进样即可，无需任何衍生化、富集等前处理步骤，操作简单、高效，且高灵敏度的电导检测器满足《GB 5749-2022 生活饮用水卫生标准》中的限量要求。同时为了提高分析效率，本方法将常规阴离子与以上三种化合物同时分析，借助于氢氧根体系

参考标准:《SN/T 1923-2007 进出口食品中草甘膦残留量的检测方法 液相色谱-质谱 质谱法》实验结论：月旭CRP小柱和Xtimate UHPLC C18柱可以满足此国标的检测。

参考《SN/T 1923-2007 食品中草甘膦及其代谢物的测定》，草甘膦（GLY）是一种高效、低毒、廉价的内吸传导型广谱灭生性除草剂，被广泛施用于茶园等农业生产中。随着草甘膦的广泛使用，其在茶叶、水果等植物源食品中残留量的检测越来越受到关注。草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸具有极性强、易溶于、难溶于各种有溶剂，这给常规检测带来了极大的困难和挑战。

草甘膦( Glyphosate) 是由美国孟山都公司开发的一种高效、低毒、广谱灭生性除草剂，广泛用于橡胶、桑、茶、果园及甘蔗地等。近年来，草甘膦的产量和销售额一直占据世界除草剂品种的首位，但随着草甘膦产量和使用量的日益增加，草甘膦会在环境和生物体内不断富集，然后通过食品和饮用水进入人体，从而对人体造成危害。随着草甘膦的使用量不断增加，特别是在茶园中的运用日益剧增，其残留问题也越来越受到关注。国家标准GB2763-2016《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》中规定：茶叶中草甘膦的最大残留量为≤ 1mg/kg。故对草甘膦的准确检测显得尤为重要。本方法采用了在线固相萃取-液相色谱/串联质谱(SPE-LC/MS-MS)联用系统对茶叶中的草甘膦及其代谢物进行全自动分析。采用全自动在线前处理平台与在线SPE结合的方法,自动提取及衍生化，处理400微升茶叶样品，采用专用于草甘膦分析的萃取柱对目标物进行萃取，采用C18反相分析柱在24分钟内实现色谱分离。这种新开发的方法具有较高的灵敏度和准确性，只需进行最少的样品预处理，并且运用了全自动在线SPE技术，分析通量较高，适用于检测。

草甘膦一直以来被认为是 “安全” 的除草剂， 然而，近年来的研究表明，其能够造成大量益虫死亡，对水生生物也具有极强的毒性。 此外，草甘膦还能够使土壤中的微生物种群比例发生改变，造成有益微生物活性降低，土壤有机质含量下降，从而降低土壤的质量。 近些年的研究也显示环境中的草甘膦（在转基因大豆等制品中有残留）可能与先天性心脏病以及其他先天畸形有关。新颁布的《生活饮用水卫生标准 (GB5749—2006)》中草甘膦的卫生标准为小于 0.7 mg/L。其易溶于水，难溶于一般有机溶剂，缺少发色团和荧光团，因此， 对其分析测定难度很大，尤其在环境中有其他常见化合物存在情况下，进行痕量测定愈加困难。采用高效液相-柱后衍生法测定水中的草甘膦含量， 先用次氯酸盐将草甘膦氧化成氨基乙酸，氨基乙酸将与 OPA 反应生成具有强荧光性的异吲哚产物进入荧光检测器检测。该方法灵敏度和精确度高，干扰少且成本相对低，重现性好，能直接进样测定，适合于大批量样品的检测。

本研究基于 PCS-MS-Mate 联用质谱分析系统开发了 血液中农药类毒物的快速检测方法，无需繁琐的样品前处理，简单操作即可完成样品分析，本方法 百草枯、敌草快、草甘膦、草铵膦的检出限分别为 100ng/mL、10ng/mL、 50μ g/mL、50μ g/mL。

高效液相色谱柱后衍生技术应用在农作物中草甘膦（Glyphosate）与氨甲基膦酸(AMPA)上面的分析 ─使用一种用于柱后衍生的简单且可重现的萃取与过滤方法近年来用于农作物中草甘膦及其主要代谢产物氨甲基膦酸分析的方法往往要承受一个很昂贵和费时的过滤过程，且重现性不够理想，尽管过滤后配备的柱后衍生离子交换色谱法的分析严谨且灵敏。我们现在终于找出了新的方法来提高样品的制备，这就是AOAC的 方法。我们将展现给您这种适宜于经典的离子交换/柱后衍生法的样品制备是如何的简便。

适用范围适用于食品中炔草酯的测定 。（本实验样品为鸡肉、黄瓜样）参考标准《GB 23200.60-2016 食品安全国家标准 食品中炔草酯残留量的检测方法 》

“农达”中的活性成分草甘膦是世界上使用最广泛的除草剂。在美国，美国环境保护署 (EPA) 对草甘膦进行了监管，并设定了允许在各种作物和饮用水中存在的除草剂的*量。 然而，最近的研究引起了人们对草甘膦安全性及其在环境中的普遍性的担忧。美国食品和药物管理局 (FDA) 宣布将开始测试包括大豆、牛奶和鸡蛋在内的食品中的草甘膦。

迪马科技在参考各种标准及文献的基础上，建立了水果中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸的测定SPE-UPLC-MS/MS法：采用水提取，ProElut GLY固相萃取专用柱净化样品，收集流出液，Dikma Polyamino HILIC色谱柱分离检测

本文介绍使用LCMS-8050，不进行附录方法22中规定的固相萃取的浓缩过程，分析草铵膦、草甘膦、AMPA的案例。结果表明，3种组分均为目标值1/100以下的浓度（0.2 μ g/L），加标回收率良好，可实现高准确度分析。

这里我们介绍一种新 LC-MS/MS 分析方法，用于无需衍生的草甘膦及其相似极性的杀虫剂检测。实验中展示的原始数据建立在 AB SCIEX公司 LC-MS/MS 平台上，利用 HILIC 色谱柱分离，通过不同食物基质中添加标准溶液的方式模拟日常检测工作。实验中使用溶剂萃取提取样品，得到采集的原始数据，这些数据用于展示如何利用该方法检测食品中草甘膦等强极性化合物。

草甘膦（glyphosate，GLY）为内吸传导性强的广谱灭生性除草剂，其主要代谢物为氨甲基膦酸 (AMPA)，它们均呈弱酸性，极性高，水溶性强，不易溶于有机溶剂。草甘膦作为一种常用的水溶性除草剂，具有高效、低毒、广谱性的特点，已成为目前世界上应用最广生产量最大的除草剂。常见的检测方法有分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、色谱—质谱联用法、LC-ICP-MS 联用法等。本文选择的是直接进样高效液相色谱 - 柱后衍生法测定水中草甘膦及其代谢产物氨甲基膦酸。实验结果表明该方法简便、灵敏、快速、准确，具有很好的通用性。

氮磷检测器测定食品中的有机磷农药残留

本文采用Thermo Scientific GC-FPD 配合大体积不分流组件，以改进的 QuEChERS 方法（去离子水浸泡、乙酸乙酯丙酮混合溶剂对烟草中的有机磷农残进行提取），经 Carbon-NH2 复合柱净化，不经浓缩直接进样分析。在进样体积为 30ul 时，对各有机磷农残的检测相比传统不分流进样1ul，灵敏度提高了近 25 倍。该方法的操作步骤简单、稳定，无需繁琐、耗时的除溶剂步骤，可以避免挥发性农残的损失；对各有机磷农残的检测限度均低于 CORESTA指导性残留限量要求。同时对烟草样品进行了 0.5mg/Kg和 1.0mg/Kg 两个水平的加标回收试验，14 种有机磷农残除了二溴磷回收率大于 120%，其它均在 75%-110% 之间，能够很好地符合对有机磷农残的日常检测需求。

草甘膦是一种广谱除草剂,几十年来一直被用于保护各种各样的农作物。由于在农业上被大量的使用，许多杂早都产生了耐药性，寻找草甘膦的替代物引起了更多的关注。

应用概述： 扑草净是均三氮苯类( 或三嗪类) 除草剂中的一种, 化学名称是2-甲硫基-4, 6-双异丙胺基-均三氮苯。扑草净在三嗪环上用硫甲基将第三个氯原子取代, 不仅保留了三嗪类除草剂杀草谱广、药效长等优点, 而且克服了对农作物的药害, 适用范围得到很大的提高, 除玉米、高粱外, 也可用于小麦、水稻、棉花、大豆、花生、薯类、甘蔗、蔬菜和水果等。但扑草净的广泛应用导致其在农作物、土壤及水体中广泛分布。水中低生物活性又使得其在水中持续多年而不分解, 容易在生物或人体内富集,从而对整个生态圈产生危害。2006年初, 日本厚生劳动省通报我国出口紫菜中扑草净残留量超标, 2006年5月29日起, 日本实行“肯定列表制度”， 对扑草净在100余种食品设定了非常严格的**残留限量标准, 大部分食品中其**残留限量为0、05 m g /kg，对于没有制定**残留限量标准的食品将执行“一律标准”- 0、01 mg /kg。因此, 建立快速、准确、灵敏的扑草净残留检测技术非常迫切和重要。 本文使用PrepElite-GV全自动凝胶净化-定量浓缩样品前处理平台结合液相色谱串联质谱净化检测花生中除草净药物残，大大简化了人工操作，并且有较理想的结果。

应用概述： 扑草净是均三氮苯类( 或三嗪类) 除草剂中的一种, 化学名称是2-甲硫基-4, 6-双异丙胺基-均三氮苯。扑草净在三嗪环上用硫甲基将第三个氯原子取代, 不仅保留了三嗪类除草剂杀草谱广、药效长等优点, 而且克服了对农作物的药害, 适用范围得到很大的提高, 除玉米、高粱外, 也可用于小麦、水稻、棉花、大豆、花生、薯类、甘蔗、蔬菜和水果等。但扑草净的广泛应用导致其在农作物、土壤及水体中广泛分布。水中低生物活性又使得其在水中持续多年而不分解, 容易在生物或人体内富集,从而对整个生态圈产生危害。2006年初, 日本厚生劳动省通报我国出口紫菜中扑草净残留量超标, 2006年5月29日起, 日本实行“肯定列表制度”， 对扑草净在100余种食品设定了非常严格的**残留限量标准, 大部分食品中其**残留限量为0、05 m g /kg，对于没有制定**残留限量标准的食品将执行“一律标准”- 0、01 mg /kg。因此, 建立快速、准确、灵敏的扑草净残留检测技术非常迫切和重要。 本文使用PrepElite-GV全自动凝胶净化-定量浓缩样品前处理平台结合液相色谱串联质谱净化检测花生中除草净药物残，大大简化了人工操作，并且有较理想的结果。

方法概要：参考GB/T 5009.161‐2003 建立本法。适用于检测动物性食品中甲胺磷、敌敌畏、久效磷、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、倍硫磷、三唑啉等8 种有机磷农药的多组分残留。

本文采用Thermo Scientific GC-FPD 配合大体积不分流组件，以改进的 QuEChERS 方法（去离子水浸泡、乙酸乙酯丙酮混合溶剂对烟草中的有机磷农残进行提取），经 Carbon-NH2 复合柱净化，不经浓缩直接进样分析。在进样体积为 30ul 时，对各有机磷农残的检测相比传统不分流进样1ul，灵敏度提高了近 25 倍。该方法的操作步骤简单、稳定，无需繁琐、耗时的除溶剂步骤，可以避免挥发性农残的损失；对各有机磷农残的检测限度均低于 CORESTA指导性残留限量要求。同时对烟草样品进行了 0.5mg/Kg和 1.0mg/Kg 两个水平的加标回收试验，14 种有机磷农残除了二溴磷回收率大于 120%，其它均在 75%-110% 之间，能够很好地符合对有机磷农残的日常检测需求。

本文采用Thermo Scientific GC-FPD 配合大体积不分流组件，以改进的 QuEChERS 方法（去离子水浸泡、乙酸乙酯丙酮混合溶剂对烟草中的有机磷农残进行提取），经 Carbon-NH2 复合柱净化，不经浓缩直接进样分析。在进样体积为 30ul 时，对各有机磷农残的检测相比传统不分流进样1ul，灵敏度提高了近 25 倍。该方法的操作步骤简单、稳定，无需繁琐、耗时的除溶剂步骤，可以避免挥发性农残的损失；对各有机磷农残的检测限度均低于 CORESTA指导性残留限量要求。同时对烟草样品进行了 0.5mg/Kg和 1.0mg/Kg 两个水平的加标回收试验，14 种有机磷农残除了二溴磷回收率大于 120%，其它均在 75%-110% 之间，能够很好地符合对有机磷农残的日常检测需求。

介绍一种新 LC-MS/MS 分析方法，用于无需衍生的草甘膦及其相似极性的杀虫剂检测。利用 HILIC 色谱柱分离，通过不同食物基质中添加标准溶液的方式模拟日常检测工作。实验中使用溶剂萃取提取样品，得到采集的原始数据，这些数据用于展示如何利用该方法检测食品中草甘膦等强极性化合物。研究中清楚的展示了草甘膦及一些相似极性的杀虫剂分析方法，该方法可用于定量检测低水平的复杂基质样品，过程中无需衍生，仅需借助高灵敏度的 LC-MS/MS 系统分析样品。这样对质谱的灵敏度要求比较高，需要像 AB SCIEX QTRAP 5500 这样高灵敏度的质谱，利用新型HILIC 液相色谱柱分离。即使不是在最理想的酸性流动相条件下，即使流动相中水相比例非常高，即使流速超过 1mL/min，由于使用 TurboVTM 离子源超强雾化能力，能够实现快速分析这些化合物。这意味着将不再需要 FMOC 衍生或者超长的离子色谱分析方法分析草甘膦等强极性杀虫剂，采用本方法即可满足甚至超出分析要求。

本文采用Thermo Scientific GC-FPD 配合大体积不分流组件，以改进的 QuEChERS 方法（去离子水浸泡、乙酸乙酯丙酮混合溶剂对烟草中的有机磷农残进行提取），经 Carbon-NH2 复合柱净化，不经浓缩直接进样分析。在进样体积为 30ul 时，对各有机磷农残的检测相比传统不分流进样1ul，灵敏度提高了近 25 倍。该方法的操作步骤简单、稳定，无需繁琐、耗时的除溶剂步骤，可以避免挥发性农残的损失；对各有机磷农残的检测限度均低于 CORESTA指导性残留限量要求。同时对烟草样品进行了 0.5mg/Kg和 1.0mg/Kg 两个水平的加标回收试验，14 种有机磷农残除了二溴磷回收率大于 120%，其它均在 75%-110% 之间，能够很好地符合对有机磷农残的日常检测需求。

本研究利用自动进样器将草铵膦衍生后进样分析，完成对精草铵膦原药中 L-草铵膦的质量分数以及 L-草铵膦占整个草铵膦对映体的百分含量的测定。相比于手动衍生方法，自动进样器自动衍生方式可以准确地控制吸样量、混合速度和次数，衍生反应时间等参数，从而保证方法的稳定性以及高通量分析的可行性。从标样和样品的分析结果看，可以保证本文衍生方法峰面积重现性低于1.5% (n = 6)，保留时间重现性低于 0.1% (n = 6)。另一方面，衍生后的草铵膦具有很强的紫外吸收官能团，因此与手性分析直接测定相比，可以达到更低的检测限和定量限。同时，草铵膦衍生产物的极性减小，可以利用常规反相 C18 色谱柱进行保留和分离，使用成本也较手性柱有所降低。