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胆碱酯酶测定仪测胆碱酯酶的原理

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胆碱酯酶测定仪测胆碱酯酶的原理相关的资讯

  • CAIA标准《乙酰胆碱酯酶 活性检测 分光光度法》将于12月1日实施
    10月25日,中国分析测试协会发布《乙酰胆碱酯酶 活性检测 分光光度法》CAIA标准,于12月1日实施。据悉,此标准由中国分析测试协会标准化委员会和中国材料与试验团体标准委员会科学试验领域委员会提出;由中国分析测试协会标准化委员会和中国材料与试验团体标准委员会科学试验领委员会科学试验创新方法技术委员会归口;由北京市科学技术研究院分析测试研究所、吉林大学、广东省科学院测试分析研究所、长春吉大小天鹅仪器有限公司、盘锦检验检测中心、广州市食品检验所六家单位为起草单位。文件规定了用分光光度法测定乙酰胆碱酯酶活性的方法,适用于有机磷与氨基甲酸酯类农药残留检测专用试剂中乙酰胆碱酯酶活性的测定。 具体内容详见附件:《乙酰胆碱酯酶 活性检测 分光光度法》.pdf更多内容:《中国分析测试协会标准》团体标准合集
  • 婴幼儿乳粉中胆碱的测定等7项国家标准审查会召开
    12月20日,受全国食品安全管理技术标准化技术委员会(SAC/TC313)、全国乳制品标准化技术委员会SAC/TC433和全国食品工业标准化技术委员会食品通用检测技术分技术委员会(SAC/TC64/SC8)的委托,吉林省质量技术监督局在长春主持召开了婴幼儿乳粉中胆碱的测定等7项国家标准(送审稿)审查会。  会上,标准审查委员会听取了标准编制组国家标准送审报告和征求意见稿反馈意见的处理意见汇报,查看了送审资料,并对标准送审稿中重要内容的编制依据和成熟度进行了认真审查,经充分讨论和协商,专家一致认为这7项标准的编制工作符合国家标准编制程序,提供的审查资料齐全、内容翔实,试验验证数据准确,送审稿达到了科学性、先进性、协调性和可操作性的要求,并在诸多方面具有重要创新。  据专家介绍,这7项标准项目主要涉及婴幼儿乳粉、燕窝等食品主要营养成分测定、植物源性食品农残含量测定、植物毒素含量测定、动物源性食品药残含量测定等食品质量和食品安全检测方法国家标准的研究制定,具有技术含量高、采标率高、覆盖范围广等特点,部分标准技术指标达到甚至超过国际标准,达到了国际先进水平,填补了国内空白。这些标准的发布和实施将为提高我国食品检测效率,及时应对食品安全突发事件,维护广大消费者的利益,保护消费者身体健康,提供科学依据和技术支撑。同时,也将促进食品工业技术进步,为我国农产品、食品生产企业应对国外技术性贸易壁垒,提升出口产品质量,提高产品国内外市场竞争力提供强有力的技术保障。  同时,这7项国家标准的制定也对完善我国的食品检测标准体系具有积极意义。不仅填补了国内食品质量安全检测方法标准空白,而且部分标准技术指标达到甚至高于国际标准,达到了国际先进水平。  相关链接  《婴幼儿乳粉中胆碱的测定-离子色谱法》《食品中胆碱的检测-液相色谱法》《燕窝及其制品中唾液酸含量的测定-液相色谱法》《大豆和花生中稀禾定的测定液相色谱/液相色谱-质谱/质谱法》《粮食、水果中戊唑醇残留量的测定—气相色谱-质谱法》《动物源性食品中庆大霉素、链霉素的测定液相色谱柱后衍生荧光法》《豆类食品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定》7项国家标准项目2007年列入了国家标准制修订项目计划。  根据国家计划,这7项标准的起草制定工作由国家农业深加工产品质量监督检验中心暨吉林省产品质量监督检验院承担。  项目承担单位经过充分的调研、试验论证等前期工作,起草并形成了国家标准征求意见稿,在相关归口的国家专业标准化技术委员会、分技术委员会的支持下,在全国范围内进行了广泛的征求意见,完成了这7项国家标准送审稿。  审查会后,编制组将依据审查会专家提出的意见和建议,作进一步修改后形成报批稿。
  • 岛津成像质谱显微镜应用专题---酶组织化学分析
    镜质合璧 还原真实质谱成像应用于酶组织化学分析 摘要检测酶促反应通常通过底物和酶反应后的产物继续反应显色并测量吸光度来实现。现有的酶促反应检测方法既要求底物和酶之间的初级反应,又要求随后产生颜色的二级反应。一种新的酶促反应检测方法利用质谱技术无需进行二级反应即可直接检测初级反应产物。将这种方法用于组织表面分析,还可以对酶活性进行可视化分析。本文描述了使用高空间分辨率质谱成像系统iMScope进行酶组织化学分析的新应用。 引言酶在组织中的分布通常用免疫组织化学(IHC)方法来测定。虽然IHC能够可视化表征酶蛋白的位置,但无法区分活性酶和非活性酶。酶组织化学作为一种成熟的方法,能够可视化分析酶活性,这是无法通过IHC分析实现的1),2) 。酶组织化学依赖组织切片表面上发生的酶活性化学反应,以此识别酶活性及其强度。可视化分析通常将反应底物涂敷到组织切片,组织切片与内源酶发生反应,产物继续通过另一种反应显色。采用这种方法,每种显色反应对应一种化合物,因此,多化合物可视化分析需要进行多种显色反应。使用这种方法来可视化分析酶活性的分布通常并非是一种简单的将底物添加到组织切片的过程。作为替代常规酶组织化学显色反应步骤的一种方法,本研究考察了利用成像质谱(MSI)直接检测小鼠脑切片和整个果蝇切片中酶促反应产物的方法3) 。 实验本研究试图对野生型小鼠脑切片和整个野生型果蝇切片中乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的分布进行可视化分析。AChE能够催化底物乙酰胆碱分解为胆碱和乙酸。因此,本研究将乙酰胆碱涂敷到组织样本的表面,并检测其降解产物胆碱并评价酶活性。为与内源性胆碱进行区分,将氘标记的乙酰胆碱-d9(ACh-d9)作为底物,并检测胆碱-d9(Choline-d9)(图1)。利用喷枪将底物手动涂敷至组织切片表面。图1 MSI法酶组织化学原理将标记后的底物涂敷于样本表面,利用质谱检测酶促反应产物,并进行可视化分析。 本研究同时考察了进行半定量分析的反应时间和方法。 将α-氰基-4-羟基肉桂酸(α-CHCA,Sigma-Aldrich)作为基质,通过两步法4) 进行基质涂敷,该方法结合了基于iMLayer基质升华仪(图2)的升华法和手动涂敷α-CHCA溶液的喷雾法。 使用iMScope成像质谱显微镜(图3)进行MSI检测,并使用IMAGEREVEA MS质谱成像分析软件进行数据分析(图4)。iMScope实验参数如表1所示。 图4 IMAGEREVEA MS质谱成像数据分析软件 表1 MSI分析参数结果与讨论图 5:转化率公式和酶活性公式 图6(A) 样本组织表面底物转化比例与酶反应时间关系以底物涂敷时间为0分钟,结果显示所有乙酰胆碱-d9(底物)在5分钟内转化为胆碱-d9。(B) 乙酰胆碱酯酶活性在小鼠脑组织中比较MSI结合HE染色分析结果显示,酶活性在纹状体(CPu)、海马体(HP)和下丘脑(TH)中较高,而在胼胝体(CC)和小脑皮质(CBX)中较低。(C, D) HE染色和高空间分辨率成像分析小鼠海马体酶活性显示CA3区中酶活性较高。标尺:1mm 根据图5(1)中的公式计算底物转化率并绘制转化率与反应时间的关系图表明,乙酰胆碱-d9在涂敷于样品表面后迅速开始分解为胆碱-d9,并且在5分钟内转化停止并耗尽乙酰胆碱-d9(图6A)。因此,5分钟是用以测量酶活性的足够的反应时间。由于组织定位相关的生物基质效应会给半定量分析带来影响,图5(2)中的公式被认为是一种标准化方法用以校正乙酰胆碱-d9和胆碱-d9的离子化效率。 使用IMAGEREVEAL MS质谱成像数据分析软件提取m/z 155.17乙酰胆碱-d9和m/z 113.16胆碱-d9的质谱图像。利用IMAGEREVEAL MS中提供的四则运算方法,根据公式(2)计算胆碱酯酶活性分布的图像(图6B和图6D)。这些图像显示纹状体(CPu)、海马(HP)和下丘脑(TH)的AChE活性较高,而胼胝体(CC)和小脑皮质(CBX)的AChE活性较低(图6B)。 这些结果与传统酶组织化学方法高度匹配,证明该技术的可靠性。iMScope的高空间分辨率质谱成像还用于可视化分析大脑海马区的酶活性(图6C、6D)。 由于哺乳动物除AChE外还产生丁酰胆碱酯酶(BuChE),因此尝试对不同胆碱酯酶的活性分布进行可视化研究。BuChE将乙酰胆碱和各种其他胆碱酯转化为胆碱。将底物乙酰胆碱与四异丙基焦磷酸酰胺(iso-OMPA,一种BuChE抑制剂)一起涂敷于样品表面,利用MSI观察AChE活性的特异性分布。针对BuChE活性的特异性分布,也通过在一系列组织切片涂敷底物乙酰胆碱和AChE活性抑制剂加兰他敏(galantamine)进行研究。这些实验表明,在不含任何抑制剂样本的胼胝体(CC)中酶活性,在很大程度上被iso-OMPA抑制,这表明胼胝体中的大部分胆碱酯酶活性是由BuChE引起的(图7A)。图7使用抑制剂后在小鼠脑切片中可视化观察酶活性,以及整个果蝇切片中胆碱酯酶活性分布的MSI(A) 使用抑制剂后可视化观察酶活性Iso-OMPA抑制丁酰胆碱酯酶活性实现特异性检测乙酰胆碱酯酶活性加兰他敏抑制乙酰胆碱酯酶活性实现特异性检测丁酰胆碱酯酶活性(B) 果蝇中胆碱酯酶活性的分布尽管果蝇属于不同的门类,但该方法同样适用,并揭示了大脑和胸腹区的酶活性。尤其是在胸腹区,检测到了可溶性酶活性,表明该方法可提供常规酶组织化学难以获得的结果。 因此,将标记稳定同位素的底物与抑制剂一同涂敷于组织样本表面是一种更精确的酶组织化学研究方法。 本方法甚至可以用于果蝇(一种不同门的动物)的研究。如图7B所示,ChE活性在整个果蝇中分布不均匀,在大脑中ChE活性极高,在胸腹区ChE活性也较高。果蝇头部具有极高酶活性的结果与先前报告一致5),表明活性来自中枢神经系统中头神经节的胆碱能神经中的AChE。相比之下,胸腹区的ChE活性很可能不是由中枢神经系统中的AChE引起的。报告显示除中枢神经系统外,血液淋巴中也存在AChE6),并且Zador等人观察到可溶性AchE的存在,其结构与神经系统中的膜结合AChE不同7)。胸腹区的AChE活性与以往报告一致,证明本方法可有效进行ChE活性定位的研究。 结论本文描述了一种基于MSI进行酶组织化学的新方法,结果显示MSI无需显色反应即可获得酶活性的半定量分布结果。该方法同时还被用于果蝇切片分析,可有效可视化分析膜结合AChE和可溶性AChE的活性。尤其是可溶性酶活性的分布难以通过传统方法获得,这显示了本方法的优越性。对于其他酶(不仅包括水解酶,还包括转移酶),我们还将开发更多的可视化分析方法。 致谢诚挚感谢京都工业大学应用生物科学系染色体工程实验室的Masamitsu Yamaguchi教授提供果蝇样本。 参考文献1.Takamatsu, H. Histochemische Untersuchungen der Phosphatase und deren Verteilung in verschiedenen Organen und Geweben. Trans. Soc. Path. Japan 29, 429 (1939)2.Gomori, G. Microtechnical demonstration of phosphatase in tissue sections. Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine 42, 23 (1939)3.Takeo E, Fukusaki E, Shimma S. A mass spectrometric enzyme histochemistry method developed for visualizing in situ cholinesterase activity in Mus musculus and Drosophila melanogaster. Anal. Chem. 92, 12379 (2020)4.Shimma S, Takashima Y, Hashimoto J, Yonemori K, Tamura K, Hamada A. Alternative two-step matrix application method for imaging mass spectrometry to avoid tissue shrinkage and improve ionization efficiency. J Mass Spectrom. 48, 1285 (2013)5.Toutant, J. P., Insect acetylcholinesterase: catalytic properties, tissue distribution and molecular forms. Prog Neurobiol. 32, 423 (1989)6.Chadwick, L. E., Actions on Insects and Other Invertebrates. In Cholinesterases and Anticholinesterase Agents, Koelle, G. B., Ed. Springer Berlin Heidelberg: Berlin, Heidelberg, 1963 pp 741-798.7.Zador, E., Tissue specific expression of the acetylcholinesterase gene in Drosophila melanogaster. Mol Gen Genet. 218, 487 (1989) 文献题目《质谱成像应用于酶组织化学分析》 使用仪器岛津iMScope TRIO 作者Shuichi Shimma1,2,3;Emi Takeo1;Kaoru Nakagawa;Takushi Yamamoto;Eiichiro Fukusaki1,2,31 大阪大学工学研究生院生物技术系2 大阪大学Shimadzu Omics 创新研究实验室3 大阪大学开放与跨学科研究倡议研究所
  • 兰州化物所邱洪灯、陈佳等天然产物中酶抑制剂筛选研究取得新进展
    天然产物具有资源丰富、安全有效、环境友好和毒副作用小等特点,是天然酶抑制剂的重要来源之一。从天然产物中筛选有效、低毒、价廉的酶抑制剂具有重要意义。低共熔溶剂(Deep eutectic solvents, DES)作为一类新型离子液体,具有制备简单、蒸气压低、可生物降解、成本低和设计性强等特点。近年来,中国科学院兰州化学物理研究所中科院西北特色植物资源化学重点实验室手性分离与微纳分析课题组在新型碱性DES的设计合成及用于纳米酶分析方面取得了系列成果。最近,研究人员以L-脯氨酸为氢键供体、六水合硝酸铈为氢键受体,结合理论计算合成了新型DES(图1)。图1. L-脯氨酸与六水合硝酸铈以不同的摩尔比形成的混合物的玻璃化转变温度及三维结合模式图研究人员以摩尔比为1:1的L-脯氨酸和六水合硝酸铈组成的DES为溶剂、反应物和模板,制备出CeO2-Co(OH)2复合材料。结果表明,与水溶液中制备的CeO2、Co(OH)2和CeO2-Co(OH)2材料相比,在该DES中制备的CeO2-Co(OH)2复合材料具有更显著的类氧化酶活性,这主要是由于DES中制得的CeO2-Co(OH)2具有丰富的氧空位。基于CeO2-Co(OH)2纳米材料优异的类氧化酶活性,构建了可视化检测乙酰胆碱酯酶活性和不可逆抑制剂筛选的新方法。在此基础上,研究人员将其成功应用于生物碱类天然产物(盐酸小檗碱、咖啡因、喜树碱、苦参碱和吴茱萸碱)中乙酰胆碱酯酶可逆抑制剂的筛选,并通过分子对接和动力学模拟实验探讨了其作用机理(图2)。该研究不仅拓展了DES在纳米酶中的应用,而且为从天然产物中筛选阿尔茨海默病等神经退行性疾病的治疗药物提供了一种新策略。图2. CeO2-Co(OH)2复合材料用于乙酰胆碱酯酶活性检测及抑制剂筛选该研究发表在Analytical Chemistry上,硕士研究生刘芸为该论文第一作者,兰州化物所陈佳副研究员、邱洪灯研究员和东北大学于永亮教授为共同通讯作者。前期相关研究成果发表在Chinese Chemical Letters(2020, 31, 1584)、Analytical and Bioanlytical Chemistry(2020, 412, 4629)、Microchimica Acta(2020, 187, 314)、ACS Applied Nano Materials(2021, 4, 2820)、Talanta(2021, 222, 121680)和ACS Sustainable Chemistry & Engineering(2021, 9, 15147)上。以上工作得到了国家自然科学基金、中科院青年创新促进会和甘肃省自然科学基金项目的支持。
  • 水质28种有机磷农药检测标准来了,您准备好了吗?
    导读有机磷农药,指含有磷元素的有机物农药,主要用于植物病虫害防治,具有明显的刺激性气味及较强的挥发性,因在农业生产中大量使用,并受地表径流等汇集作用而在环境水体中存在不同程度的残留。为规范环境水中有机磷农药的测定方法,生态环境部颁布了《水质 28种有机磷农药的测定 气相色谱-质谱法》(HJ 1189-2021),并将于2022年4月1日起正式实施。 有机磷农药的危害有机磷农药具有神经毒性,通过与胆碱酯酶结合,形成磷酰化胆碱酯酶,抑制胆碱酯酶活性,使胆碱酯酶失去催化乙酰胆碱水解作用,积聚的乙酰胆碱进而引起神经毒性。有机磷见光易分解、受热不稳定、在碱性条件下更是会迅速降解,目前常用的有机磷农药主要有乐果、敌敌畏、甲拌磷、毒死蜱、甲基对硫磷等。图1. 4种常见有机磷农药 有机磷农药可经地表径流汇入地表饮用水源,并通过食物链富集进入动物及人体内,对人类健康造成不可忽视的风险。此外,有机磷农药一旦渗入地下水,在地下环境中受光照及温度影响较小,难以自然降解,极易造成长期残留,因此对水体中有机磷农药残留量监测变得刻不容缓。 新标准实施在即,岛津GCMS助您从容应对参考HJ 1189-2021标准,使用岛津气质联用仪GCMS-QP2020 NX建立了一种快速准确测定环境水中28种有机磷农药含量的方法,同位素内标定量,轻松应对新标准。图2. 岛津气质联用仪(GCMS-QP2020 NX) ◦分析条件图3. 有机磷农药及内标溶液色谱图1、萘-d8(内标)2、敌敌畏3、(E)-速灭磷4、(Z)-速灭磷5、苊-d10(内标)6、内吸磷7、灭线磷8、治螟磷9、甲拌磷10、特丁硫磷11、二嗪磷12、地虫硫磷13、异稻瘟净14、(E)-磷胺15、菲-d10(内标)16、氯唑磷17、乐果18、甲基毒死蜱19、(Z)-磷胺20、甲基对硫磷21、毒死蜱22、马拉硫磷23、杀螟硫磷24、对硫磷25、甲基异柳磷26、溴硫磷27、水胺硫磷28、稻丰散29、苯线磷30、丙溴磷31、三唑磷32、䓛-d12(内标)33、蝇毒磷 ◦样品处理流程参照HJ 1189-2021标准,水样中敌百虫经碱解转化为敌敌畏间接测定,其他27种有机磷农药经萃取浓缩后直接测定。图4. 样品前处理流程简图 ◦方法学结果考察0.2-20 μg/mL浓度范围内各目标物线性关系,将0.5 μg/mL标准溶液连续进样6次计算峰面积重复性以考察进样精密度,并以50 μg/L浓度添加回收试验并平行处理3份进行回收率测试。结果表明,方法准确度及精密度均满足相关标准要求。 表1. 28种有机磷农药方法学考察结果 结语使用岛津GCMS-QP2020 NX气质联用仪,可准确测定环境水中有机磷农药含量,轻松应对《水质 28种有机磷农药的测定 气相色谱-质谱法》(HJ 1189-2021)标准要求,水质监测刻不容缓,岛津方案助您从容应对。 本文内容非商业广告,仅供专业人士参考。
  • 抗色素干扰农残检测新技术研发成功
    近日,中国农业科学院茶叶研究所茶叶质量与风险评估创新团队在农药残留快速检测技术方面取得新进展,研发出近红外仿生荧光探针抗干扰检测农药残留新技术。相关研究结果发表于《生物传感与生物电子》(Biosensors and Bioelectronics)。据介绍,胆碱酯酶抑制法在有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测中具有广谱、便捷、高通量、低成本等优点,是农产品质量安全筛查的重要手段。然而,天然色素复杂多样且存在于几乎所有植物源性样品中,极易对光学检测造成干扰,因而开发一种通用、抗色素干扰的酶抑制检测方法具有重要实用价值。该研究根据天然色素光学背景特点,构建了一种能够靶向响应乙酰胆碱酯酶活性的近红外荧光探针,采用近红外激发策略实现了不同植物色素共存下荧光响应信号的准确测量,并在此基础上建立了灵敏度高、可靠性好的农药残留抗干扰快速检测方法。利用该探针,实现了对甜菜、胡萝卜、蓝莓、生菜等不同色系样品中有机磷和氨基甲酸酯类农药的直接快速检测;对样品中敌敌畏的检出限(5.0 微克/千克)低于液质联用等常规仪器检测方法。该研究得到了国家自然科学基金、浙江省公益计划研究项目、中国农业科学院科技创新工程等项目资助。
  • 农药残留检测仪器设备-农药残留检测仪器设备-农药残留检测仪器设备
    随着我国经济水平的不断提高,农产品生产的重点逐渐从数量转移到质量安全方面。目前,国内农产品质量安全检测的主要是蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类二大类农药残留。国内用于农药残留的常用检测方法有气相色谱法和酶抑制法。气相色谱法成本高,适合用于定性定量检测 酶抑制法操作简便、成本低廉,适合用于定性的快速检测。实现对农产品中蔬菜、水果的农药残留监督,需要推行快速、简便、准确的检测方法,才能达到有效监控的目的。  农药残留检测仪器设备就是依据国家标准方法(GB/T5009.199-2003)以及世界卫生组织WHO、世界粮农组织FAO残留农药检测标准、世界环境保护局EPA参照摄入量等要求来设计。采用酶抑制率比色法对水果、蔬菜等农林产品中有机磷和氨基甲酸酯类农药含量进行快速准确的检测。  广泛应用于主要用于蔬菜、水果、茶叶、粮食、农副产品等食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测 此外还可用于果蔬茶生产基地和农贸批发销售市场现场检测,餐馆、学校、食堂、家庭果蔬加工前的安全速测等。  性能描述:  1、乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶试剂均可以使用,符合国家标准和农业部标准的要求。  2、自动判断样品是否合格,检测结果更加直观。  3、仪器具有100多种蔬菜名称菜单库,分类管理,并可按需添加或删除蔬菜名,编辑蔬菜名称,可直接打印出蔬菜名称。  4、检测通道:24个检测通道,可以同时测试多个样品,循环检测,即放即检,每个样品由程序控制分别独立工作,不会互相干扰。  5、智能操作系统,采用更加人性化操作,主控采用多核处理器,主频1.88Ghz,运转速度更快速,稳定性更强。  6、显示方式:7英寸高灵敏真彩触摸屏显示,人性化中文操作界面,读数直观、简单。  7、打印机采用串口5v打印,可选择手动打印或者自动打印,三分钟出打印结果,打印格式为检测人姓名、吸光度差值、检测时间、检测机构、样品名称及结果判定。  8、光源采用进口超高亮发光二极管,具有低功耗、高精度、稳定性强、光源可控可以关掉不使用的光源,响应速度快等优点。  9、智能恒流稳压,光强自动校准,长时间连续工作光源无温漂现象。  10、仪器具有GPRS远传功能,可实现数据远传平台,wifi联网功能,可将数据快速上传电脑,进行数据管理与统计。  11、采用USB2.0接口设计,方便数据的存贮和移动,并可随时与计算机直接相连,并且可用计算机控制仪器。实现数据查询、浏览、分析、统计、打印等。  12、智能化程度高,仪器具有自检功能:具有开机自检和调零功能,具有自动检测重复性功能  13、仪器具有自身保护功能,可设置用户名及密码,防止非工作人员操作等。  14、采用DC12v直流供电,安全系统更高,并且配备6A锂电池充电器。  15、仪器具有重新校准、锁定、恢复出厂设置功能。
  • 快速检测技术终极版
    1. 食品加工中危害分为哪三个方面,每一方面包括哪些因素?  ⑴生物性危害:细菌性危害、真菌性危害、病毒性危害、寄生虫危害、虫鼠害  ⑵化学性危害:天然毒素及过敏原、农药残留、兽药残留、激素残留、重金属超标、添加剂滥用和非法使用、包装材料、容器与设备带来危害  ⑶物理性危害:非正常外来杂质(如玻璃、石头、金属、塑料等)。  2. 简述快速检测定义?  在短时间内,如几分钟、十几分钟,采用不同方式方法检测出被检物质是否处于正常状态,检测得到的结果是否符合标准规定值,被检物质本身是不是有毒有害物质,由此而发生的操作行为称之为快速检测。  3. 简述食品安全快速检测意义?  ①快速检测是食品安全监管人员的有利工具:在日常卫生监督过程中,除感官检测外,采用现场快速检测方法,及时发现可疑问题,迅速采取相应措施,这对提高监督工作效率和力度,保障食品安全有着重要的意义。②快速检测是实验室常规检测的有益补充: 采用快速检测,可使食品安全预警前移,可以扩大食品安全控制范围。对有问题的样品必要时送实验室进一步检测,既提高了监督监测效率,又能提出有针对性的检测项目,达到现场检测与实验室检测的有益互补。③快速检测是大型活动卫生保障与应急事件处理的有效措施:在大型活动卫生保障中,为了防止发生群发性食物中毒④快速检测是中国国情的一种需要:中国在提高食品安全整体水平方面仍有很长的路要走,快速检测将会在其中起到积极有效的作用。  4. 现场快速检测方法形式有哪些?  试纸法:用试纸直接显色来定性并作为限量指示、用试纸层析显色或层析后胶体金显色来定性或作为限量指示、用试纸显色的深浅来半定量。试管法:用速测管显色来定性、用速测管显色的深浅半定量。滴瓶法:将标准溶液放在滴瓶中,根据消耗的滴数来判定被检物质的含量。便携式仪器法  5. 快速检测结果表述形式有哪些?  ①定性检测:即快速地得出被检样品中是否含有有毒有害物质,或其本身就是有毒有害物质。通常以阴性或阳性表述。阴性表示用本方法未检出要检测的物质。阳性表示检出了有毒有害物质。②限量检测:即快速地得出被检样品中有毒有害物质是否超出标准规定值或有效物质是否达到标准规定值。通常以合格或不合格表述。③半定量检测:能够快速地得出所测物质的大概含量,通常以合格或不合格表述,也可标示出具体数值。④定量检测:如温度、湿度、消毒间紫外线辅照强度、纯净水电导率等物理指标的检测。通常以具体数值表述。  6. 简述快速检测注意事项及采样的注意事项?  检测注意事项:①对于阳性结果以及不合格结果的样品:应重复测试,排除偶然误差。重要样品,如含急性中毒物质或可能会对后期处理带来较大社会影响或较大经济损失的样品,应注意留样,并将样品送实验室进一步确证。②对于阴性与阳性、合格与不合格之间不易判定的样品:应重复测试,以多次重复相同的结果报告之。  采样注意事项:①为了监测总体样品的安全卫生状况,应注意采样的代表性原则。均衡地,不加选择地从全部批次的各部分随机性采样。②为了检验样品掺假、投毒或怀疑中毒的食物等,应注意采样的典型性原则。根据已掌握的情况有针对性地采样。如怀疑某种食物可能是食物中毒的原因食品,或者感官上已初步判定出该食品存在卫生质量问题,而进行有针对性的选择采样。③当检出阳性样品或不合格样品时,应考虑采样方法是否正确。必要时送实验室进一步检测。  7. 简述利用农药速测卡快速检测有机磷农药的基本原理,并简述基于农药速测卡采用表面测定法快速检测蔬菜中有机磷农药的方法过程?  原理:利用对有机磷和氨基甲酸脂类农药高敏感的胆碱酯酶和显色剂做成的试纸。胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。  方法过程:擦去蔬菜表面泥土,滴2~3滴浸提液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。取一片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。放置10min进行预反应,将速测卡对折后,用手捏3min时,打开与空白对照实验卡比较判定。白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果,白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性结果。  8. 简述利用试剂盒法测定毒鼠强的原理并简述此方法检测固体样品的过程?  试剂盒法检测原理:毒鼠强可与二羟基萘二磺酸发生反应变为淡紫色,本方法检出限为1ug,最低检出浓度为2ug/ml,浓度高时可变为深红色。  检测固体样品过程:取2mL或2g样品放入比色管中,加入5mL乙酸乙酯,充分振摇,静置,取上清液2mL于试管中或表面皿上,在 85℃左右水浴中加热,待乙酸乙酯剩余1mL以下时,提高水浴温度挥干余液,放至室温后,加入1mL的纯净水充分溶解残渣,加入3滴毒鼠强显色剂,轻轻摇匀,加入 5mL毒鼠强试液,轻轻摇动后,将试管放入90℃以上水浴中,加热5min后取出,观察颜色变化。溶液颜色变为淡紫红色为毒鼠强阳性反应,随着毒鼠强浓度增加,紫色加深。  9. 简述利用异羟肟酸铁快速检验氟乙酰胺的原理,简述此方法检测固体样品的过程?  检测原理:氟乙酰胺与羟胺在碱性条件下,生成异羟肟酸,与三价铁离子作用生成色异羟肟酸络合物。检出限50&mu g/ml。  方法:取待检液1ml左右于试管中(同时取一份同等量的蒸馏水或纯净水于另一试管中做阴性对照实验),各加盐酸羟胺溶液5滴,加氢氧化钠溶液10滴,置沸水中水浴10分钟以上,取出放冷后,加盐酸溶液调整溶液pH值到3~4之间,加三氯化铁溶液3~4滴,观察溶液颜色变化情况,阳性结果为粉红或紫红色。  固体过程:取2g~5g捣碎后的样品,加3倍于样品重的纯净水,充分振摇,静置或过滤得到1mL左右的澄清液。测定:取待检液1mL左右于试管中,加氢氧化钠溶液10滴,加盐酸羟胺溶液5滴,置沸水中水浴10min,取出放冷,加盐酸溶液调pH值3~5后,加三氯化铁溶液3~10滴,阳性结果为粉红或紫红色,阴性结果为浅黄或黄色。  10. 叙述砷的快速检测原理方法以及过程?  原理:氯化金与砷相遇产生反应,可使氯化金硅胶柱变成紫红或灰紫色,在装有氯化金硅胶的柱中砷含量与变色的长度成正比,以此可达到半定量的目的。  方法过程:取粉碎后的固体样品1g于反应瓶中,加入20mL蒸馏水或纯净水,固体样品需要振摇后浸泡10min,加入两平勺酒石酸,摇匀,加10滴消泡剂,摇匀。取检砷管一支,将空端较长的一端头朝下,在台面上轻敲几下后,剪去两端封头,将空端较长的这头插入带孔的胶塞中。向反应瓶中加入一片产气片, 立即将带有检砷管的胶塞插入反应瓶口中,待产气停止,观察并测量检砷管中氯化金硅胶柱变成紫红或灰紫色的长度。  11. 亚硝酸盐的快速检测方法并简述基本原理和检测固体样品的过程?  亚硝酸盐(速测管快速测定法)原理:亚硝酸盐与对氨基苯磺酸在偏酸性条件下发生重氮化形成重氮盐,重氮盐与盐酸萘乙二胺发生偶合反应而呈现酒红色。  检测固体样品过程:取粉碎均匀的样品1.0g或1.0ml至10ml比色管中,加蒸馏水或去离子水(纯净水)至刻度,充分震摇后放置,取上清液(或过滤或离心得到的上清液)1.0ml加入到检测管中,盖上盖,将试剂摇溶,10分钟后与标准色板对比,该色板上的数值乘上10即为样品中亚硝酸盐的含量mg/ kg,L(以NaNO2计)。如果测试结果超出色板上的最高值,可定量稀释后测定,并在计算结果时乘上稀释倍数。  12. 液体样品甲醇的快速检测方法及基本原理?  方法:速测盒测定法。(用滴管取酒样6滴于离心管中,加入5滴A试剂氧化剂,放置5min,加入4滴B试剂还原剂,盖盖后上下振摇20次以上使溶液充分混匀,打开盖子,等溶液完全退色,加入2滴C试剂显色剂后,再加入15 滴D试剂,观察管内颜色变化,3min后与对照图谱对比判断酒样中甲醇含量。)  原理:首先向样品中加入酸性高锰酸钾溶液,甲醇很容易氧化成甲醛,而其他醇类则不易氧化成相应之醛类。再与亚硫酸氢钠反应,将未反应的紫色高锰酸钾转变为无色,再加人0.01 g的变色酸二钠盐和1mL的浓硫酸,此指示剂只和甲醛起反应,变色酸二钠盐与甲醛反应的最终产物显紫色,与标准比色卡对照显示样品中甲醇含量。  13. 叙述胶体金免疫层析检验技术的基本原理并叙述结果判断方法以及举例说明在食品安全检测中的应用?  基本原理:样品加入样品吸收垫,样品中的液体首先溶解胶体金垫中含有的胶体金标记的鼠源性单克隆抗体。其次样品中待测抗原与胶体金颗粒标记的鼠源性单克隆抗体结合,形成抗原-抗体-胶体金复合物,并靠毛细作用向检测线移动。在硝酸纤维薄膜的检测线上固定有另一鼠源性单克隆二抗。当样品层析至检测线时,可以进一步形成抗体-抗原-抗体-胶体金双抗体夹心复合物,并在检测线上聚积显现出一条可见的显色反应。无显色反应则表示样品中无抗原存在。而胶体金的量反应了待测抗原的量。从加样垫中泳动过来的过量胶体金标记的单克隆抗体是鼠源性的,无论携带抗原与否,均可被固定于标准的羊抗鼠抗体所捕获,形成显色反应,这种显色反应,既代表了整个反应体系是正确的,同时C区的显色反应的深浅,与检测区中被测抗原的量呈对应关系。  结果判断:将制备好的样品滴加到加样孔中,在指定时间内判定结果。如果检测线上出现红色条带,说明样品呈阳性,如果检测线上没出现红色条带,说明样品呈阴性。如果质控线无条带,说明试纸条无效。  应用:可用于快速检测乳品&mdash 饲料中三聚氰胺的快速检测(造假、非法添加物类)。  14. 酶联免疫检测法检测原理以及本方法的优点?  原理:酶联免疫吸附试验法的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。  优点:具有很高的特异性 另一方面由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性 ELISA法还具有简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点,且适用于大批量标本的检测。  15. 说明黄曲霉毒素试剂盒主要包括哪些组分并采用图示的方式说明双抗体夹心法测抗原的方法?  组分:已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂) 酶标记的抗原或抗体(结合物) 酶的底物 阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中) 结合物及标本的稀释液 洗涤液 酶反应终止液。  过程:1) 将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。  2) 加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。  3) 加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。  4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。  16. 目前针对苏丹红油溶性非食用色素现场快速检测方法原理及过程?  检测原理:层析法利用混合物中各组分物理化学性质的差异(如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等),使各组分在两相(一相为固定的,称为固定相 另一相流过固定相,称为流动相)中的分布程度不同,从而使各组分以不同的速度移动而达到分离鉴定的目的。  过程:①样品处理:取约1克样品于容器中,加入2~4 ml乙酸乙酯,充分混匀,提取1分钟,静置3分钟以上。②样品点样:在层析纸端底向上约1cm处、平行相隔约1cm,分别用毛细管沾取样品点出5个直径在0.5cm左右的圆点,用毛细管分别沾取苏丹红1、2、3、4号对照液少许点在1、2、3、4号样品点上。③样品展开:取一个250ml以上的烧杯,加入约5ml展开剂,将层析纸(样品端朝下)插入展开剂中靠在杯壁上,待展开剂延层析纸向上平行展开至层析纸顶端约1厘米处时取出层析纸,观察结果。④结果判断:如果样品在展开轨迹中出现斑点,其斑点展开(向上跑)的距离与某一对照液展开后的斑点距离相等、颜色相同或颜色虽浅却相近时,即可判断样品中含有这一色素。  17.目前针对水发水产品中甲醛的快速检测方法及原理?  ①间苯三酚显色法:在碱性条件下,甲醛与间苯三酚反应后使溶液出现橙红色。由于此方法的灵敏度较低,水产品本底存在的甲醛很难参与反应。当人为加入甲醛时,本方法可迅速检测出来。(方法:将水发水产品的浸泡液或水产品上残存的浸泡液滴加到检测管中,加入2滴试剂。当甲醛含量10mg/L时,在试剂与样品接触的局部会出现橙红色,并很快退色。 40mg/L时,试剂与样品接触的局部颜色会较深,整体样品溶液都变为橙红色,显色的时间可达30min。甲醛含量越高,颜色越深,显色的时间较长。空白对照管为试剂本色或淡紫色。)  ②AHMT试剂显色法:甲醛与AHMT试剂在碱性条件下缩合,经高碘酸钾氧化成紫色化合物,然后与比色板比对得出甲醛含量。此方法的灵敏度较高,检出限可达0.25mg/kg。(方法:取1ml澄清液体至试管中,加入4滴1号试剂,再加入4滴2号试剂,盖盖后混匀,1分钟后,加2滴3号试剂,摇匀,5~10分钟内与标准色板比对,找出相同或相近的色阶,色阶上标示的含量即为样品中甲醛的含量mg/kg。)  18. 简述利用平板培养法检测微生物的方法以及ATP荧光法检测餐具表面洁净度的方法?  ATP荧光检测法:ATP是三磷酸腺苷的英文缩写,是生物能量转化产物,存在于所有活的细胞体中。当ATP接触到荧光素酶后,就会发生反应产生出光,物体表面残留的食物和微生物越多,ATP也就越多,发出的荧光也就越强,采用荧光光度计,可将这种光的强度加以记录。在被检物体表面10cm× 10cm的区域内,用拭搽拭抹采样,按仪器使用说明书操作记录测试结果。
  • CISILE 2015 食品安全检测技术专题论坛召开
    仪器信息网讯 2015年4月24日上午,作为第十三届中国国际科学仪器及实验室装备展览会(CISILE 2015)&ldquo 食品安全检测技术专题论坛&rdquo 在国家会议中心召开。100余位从事食品安全检测的专家学者、企业代表参会。会议现场  来自农业部农产品质量标准研究中心的刘广洋作了题为&ldquo 纳米金聚集效应在农药残留检测中的应用研究&rdquo 。农业部农产品质量标准研究中心 刘广洋  刘广洋在报告中说,发展集高灵敏度、高通量,高特异性且稳定性好、重现性好于一体的快速检测技术是当前的趋势。目前国内外针对纳米金聚集效应的研究主要在两方面,一是利用乙酰胆碱酯酶水解产物乙酰胆碱(硫代胆碱)可以让纳米金聚集,然后通过农药使乙酰胆碱酯酶的活性降低来间接检测农药 二是根据农药本身具有与纳米金结合的集团,或者通过农药与纳米金的修饰集团相互作用可以引起纳米金聚集而达到直接检测农药的目的。  来自北京市化学工业研究院的王丽丽作了题为&ldquo 现代仪器捍卫舌尖上的安全&rdquo 的报告。北京市化学工业研究院 王丽丽  王丽丽在报告中介绍了色谱、光谱、质谱、电化学、生物芯片等方法在食品中检测应用实例。在报告中总结道,食品安全问题的解决,需要依靠分析检测技术有效支撑。食品安全的重要保证之一,应该体现在对有害物质的分析、检测上,没有相应的分析、检测技术,就无法得到食品构成的基础数据,不能够确认食品的质量标准是否得到有效执行,最终的结果必然是无法确定食品的安全性。  来自中国军事医学研究院的高志贤作了题为&ldquo 饮水和食品安全现场快速检测新技术和装备研发&rdquo 的报告。中国军事医学研究院 高志贤  高志贤研究员在报告中从突发自然灾害等事件介绍、样品前处理和检测材料研制、生物传感和芯片技术、现场检测技术与设备研制、国外的现场检测设备等方面系统分析了国内、外的突发公共事件和大型活动饮食安全现场检测技术和装备现状及发展概况 最后从新理念或新思路、新技术或工艺、新材料等方面展望了生物预警监测技术的发展设想。
  • 创新产品:电化学式酶抑制法快速农残检测仪
    仪器信息网讯 7月18日,2015北京国际食品及农产品安全检测技术展览会在北京国家会议中心召开。在同期举办的“食品和农产品安全检测技术研讨会”中,来自台湾的恩莱生医科技股份有限公司王文博士给与会听众介绍了一款全新的农药残留快速检测产品。该产品仍然采用酶抑制发的原理,但与传统相比不同的是酶抑制率是通过电化学方式进行表达。恩莱生医科技股份有限公司 王文博士  该产品原理是采用双酵素反应机制,乙酰胆碱通过乙酰胆碱酶水解生成胆碱和乙酸,胆碱在胆碱氧化酶的作用下生成双氧水和甜菜碱,双氧水通过外加电位生成氧气、两个氢离子和两个负电子,通过电极产生电信号。有机磷及氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酶的抑制,影响后续的反应机制,进而产生有别电信号,通过分析有别电信号与原信号的差异来进行检测结果的判定。反应原理图  传统的酶抑制率是通过目测颜色变化或通过分光光度计测定吸光度值来计算,目测颜色变化很难精确表达检测结果 而采用分光光度计测定吸光度值尽管数据相对精确,但是在仪器小型化、便携化发展趋势下有其局限性。市场上的小型化的光学式酶抑制法快速检测仪器,通常采用LED光源,但测量准确度不高。  而电化学技术相对成熟,仪器设计简单,价格低廉,灵敏度及准确性高。在仪器满足小型化的需求的同时,还能保持高准确度,检测结果可直接读数。其优势明显,可携带,准确性和再现性佳,操作简单,检测时间短,10分钟即可完成检测。安心测农药残留快速检测系统恩莱生医科技股份有限公司展位编辑:孙立桐
  • 如海光电推出农药残留快速筛查解决方案
    近年来,随着人们对自身健康的关注,有机食品成了人们的宠儿,越来越多的人愿意付出更高的价格购买天然、环保、健康、安全的瓜果蔬菜。但曾在2018年,央视曝光“有机”蔬菜不有机,顶着10倍的身价,仍被检测出多种农药残留。高价购买的“放心蔬菜”却不能放心,可见农药残留之泛滥,针对此现象,如海光电基于表面增强技术,推出了食品中农药残留快速检测方案。蔬菜瓜果中农药残留最常见的是有机磷类农药,例如三唑磷、保棉磷、对硫磷,倍硫磷、乐果等,大部分是用做杀虫剂的,也有一些品种可做杀菌剂、除草剂、灭鼠剂等。目前有机磷农药也是农药工业的主体,在品种的数量、产量和市场占有率方面居于农药的首位。有机磷农药是含磷的有机物,有的还含硫、氮元素,大部分是磷酸酯类或酰胺类化合物。其通式如下:其中R1、R2多为甲氧基(CH3O-)或乙氧基(C2H5O-),X多为烷氧基、芳氧基或其他取代基团,如:有机磷农药进入靶标生物体内可与乙酰胆碱酯酶结合,产生抑制乙酰胆碱水解的作用,而乙酰胆碱作为神经递质大量积聚,可作用于乙酰胆碱受体,同时突触部位的正常神经冲动传导受阻,进一步产生严重的神经功能紊乱。有机磷农药与胆碱酯酶结合生成的磷酰化胆碱酯酶有两种形式。一种结合不稳定,如对硫磷、内吸磷、甲拌磷等,部分可以水解复能:另一种形式结合稳定,如三甲苯磷、敌百虫、对溴磷等,被抑制的胆碱酯酶不能再复能:综上,有机磷农药用作杀虫剂的生物活性作用机理主要是其对靶标生物体内的乙酰胆碱酯酶有强抑制作用,进而抑制乙酰胆碱的水解,引起神经调节功能紊乱,表现为神经异常兴奋,发生异常活动,最后强烈痉挛,致死。传统的食品中有机磷农药残留检测方法是液相色谱、气相色谱及其与其他设备联用等方法检测,由于其定位的使用场景,比如仪器昂贵、体积大、操作复杂,一次只能检测量少,费时费力,目前尚难以满足大批量样品检测的需求。而利用表面增强拉曼的方法,通过提取分离富集等操作步骤,可以对有机磷类农药做快速检出,整个检测过程在15分钟之内即可完成。方法操作简单快捷,并可对多种有机磷类农药进行检测。以下是苹果基质中加标检测谱图:除食品农药残留检测,如海光电还研发了包括减肥保健品西布曲明、保健品那非类药物、兽药残留等多达上百种常用科目快速检测方案,致力于分析与研究、服务与分享,为保健食品安全行业保驾护航!
  • 另辟蹊径斗“农残”——访上海理工大学华泽钊教授
    2006年国庆节前夕,《文汇报》刊登了一则令人振奋的消息,被国内外报刊、网络广为转载:将蔬菜打成汁,把一根待测酶柱放入菜汁中1~2分钟,然后取出置入探测仪器里,与另外一支酶柱做参照,整个过程只要9分钟,就可以迅速检测出蔬菜中是否存在农药残留。日前,上海理工大学华泽钊教授等成功研究出新型的“农药残留现场快速检测技术”,此项技术的使用将使市民们以后更放心地购买蔬菜。 而在本网转载这条新闻之后不久,就有网友发表评论,希望能够了解这一技术更加详细的情况。根据新闻中的线索,本网工作人员(以下简称Instrument)在上海理工大学迎来百年华诞之际,通过电话采访了华泽钊教授(以下简称华)。 Instrument:华教授,您好!从有关资料中我们了解到,您是我国首批“低温工程”的博士生导师,特别是在人体细胞和组织的低温保存以及冷冻干燥等方面建树颇多。那么,是什么原因使您开始关注“农药残留检测”,这个与您原来的专业相距甚远的科研领域的呢? 华:说起来话长,那还是1999年8月份的一件事,我当时正在参加一个在上海召开的学术会议。一次晚餐后,在近120名与会者中,有过半人食物中毒,我本人也不幸名列其中。当时就估计是吃了含有残留农药的蔬菜。那天晚上,我可以说是上吐下泻。去医院急诊,高烧39度,不得不住院治疗一周。在医院时我就萌生了一个想法,是否有办法能快速检测果蔬中的农药残留。   出院后,我又断断续续地看了一年的国内外书籍、文献,2000年11月撰写开题报告,决心探索如何快速检测果蔬中的农药残留,防止急性中毒的发生。 Instrument:那么,果蔬中的农药残留究竟是如何形成的?是否还有其他的手段可以对它们进行检测? 华:我们知道,现在蔬菜使用的农药普遍都是有机磷化合物,这些农药经过一段时间会自然降解转为无毒。国家规定,在果蔬上市前一段时间(一般7天)内是不允许再施农药的。可是有些不法菜农为了让果蔬贩卖时看上去更好看,常常乱施农药,甚至在果蔬上市前还施加农药,而来不及降解的果蔬中的农药残留,就是造成食用者急性中毒的原因。 关于农药残留的检测方法,FAO/WHO的国际农药残留法典委员会于1993年颁布了针对183种农药残留的推荐检测方法,我国也于1996年以国家标准的形式公布了食品卫生检验分析方法标准。食品中农药残留检测的一般程序先要经过取样、提取、净化、浓缩等诸多过程,然后用气相色谱、高效(压)液相色谱等方法进行检测。另外,目前国家有关部门已经开始着手进行部分相关标准的修订,检测手段开始采用更加精密的质谱仪器。   虽然这些方法的检测精度高、能够测出农药的具体组分和含量,适合于微量的检测和长期的跟踪,但由于仪器贵重、运行费用高、检测费时长等原因,并不适合用于在现场的快速检测。 Instrument:据我们了解,目前市场上已经有不少品牌的“农药残留速测仪”在销售,与这些仪器采用的技术相比,上海理工大学所开发的“新型农药残留现场快速检测技术”有哪些独到之处? 华:在回答这个问题之前,我想首先应该弄清农药残毒导致人体中毒的毒理学原理。以有机磷农药为例,有机磷农药引起人急性中毒的途径可描述为:有机磷农药经呼吸道、胃肠道、皮肤、黏膜等均可侵入人体,吸收后经血液循环很快分布于全身,毒作用广泛,能抑制多种酶,主要为乙酰胆碱酯酶,使其发生磷酰化而失去活性,从而造成乙酰胆碱大量蓄积,以乙酰胆碱为传导介质的神经过度兴奋,最后转入抑制和衰竭,使各项功能失调,而呈中毒症状。 在明确了这一点后,课题的目标也就随之明朗了。为了达到能够在现场快速判断出果蔬中是否含有会引起急性中毒的农药残留(主要是有机磷和氨基甲酯类农药)的目的,首先就必须要寻找到一种类似于乙酰胆碱酯酶的酶,作为生物敏感元件,研制能检测出有机磷农药的生物传感器。 在研究初期,我们也想到了用乙酰胆碱酯酶来制成生物传感器,当时国内外也开始有类似的研究,但结果发现乙酰胆碱酯酶太贵,2000单位就要93.5美元,根本无法推广应用。所以课题组在另一成员徐斐老师的负责下,开始寻找可供实用的新的酶,并研究其固定化工艺和最佳运行条件。 经研究我们发现可以从小麦中提取小麦酯酶,作为传感元件,制取2000单位的小麦酯酶,只需50至100克小麦,成本只有几角钱,但它的缺点是对某些有机磷农药不够敏感。后来,利用上海大江鸡场废弃的鸡肝,我们从中提取了鸡肝酯酶,它的优势是能对七八种常用的有机磷农药产生反应,而且灵敏度都较高。 然后我们再利用自己开发的离子交换技术将小麦酯酶和鸡肝酯酶固定化,并制成一次性酶柱。目前,该技术已获得了国家发明专利,这种探测仪,每次使用时只要更换一对酶柱,成本只有几角钱,推广性很强。 此外,由于酶的反应是和温度密切相关的,为了保证反应能在确定的温度下进行,我们还研制了一种微型的半导体制冷—加热恒温器。 而在生物传感器方面,我们提出了一类新型量热式生物传感器概念。它有两个相同的酶柱,一个是待测的,另一个是作为参比的,但已被完全抑制。两个酶柱同置于一个反应腔中,由于采用了同种失活酶作为参比的方法,消除了系统的非特异性干扰,得到的温差是由酶反应柱中发生的酶水解反应产生的热量引起的。通过测量流经此两酶柱的流体出口的微小温差,来探测酶水解热反应的被抑制程度,进而得出微量的农药浓度。 此外,经过不断地摸索、补充和发展,我们又将流动注射技术引进到了这一系统当中。这种流动注射式酶传感器一方面大大提高了检测结果的重现性;另一方面使得酶反应是在仪器中完成,实现了操作过程的自动化,缩短了检测时间。 Instrument:还有一个问题也是我们很感兴趣的,对于和您一道共事的项目其他参与者而言,您是如何评价他们在这一项目中所发挥的作用的? 华:从最初的一个念头发展到一种新的产品,其间的过程是非常艰难的,要发挥众人的聪明才干才能克服,徐斐、陈儿同两位老师,许学勤、肖建军、郑艺华博士生和一些硕士生在这一项目中都做出了重要的贡献。 尤其是徐斐老师,几年前她从江南大学食品科学专业博士毕业后来上海理工大学工作时,我曾经亲自打电话给她的导师王璋教授了解情况,王教授和她的妻子许时婴教授对徐斐一致的评价是“很求上进、富有钻研精神”,而我挑选徐斐看中的也是这一点。 徐斐到校不久,我就让她研究与有机磷农药有特异反应的酶,后来又请她担任研制任务的负责人。坦率地将,这个项目是很有挑战性的,而且难度和风险都非常大,但徐斐欣然接受了这个挑战。值得欣慰的是,经过这个项目的锤炼,她的业务能力和组织能力已经有了质的提高,已经成为名副其实的学科带头人。 同时,结合此研究项目,我们还培养了3名博士、4名硕士,在国内外权威期刊发表论文20余篇,已获得发明专利2项、实用新型专利2项、公布发明专利1项。目前,已经有不少企业和我们接触,希望能够就这一项目进行合作,并最终将其推向市场。 采访后记: 最初获悉有关上海理工大学“新型农药残留现场快速检测技术”这条消息时,并没有引起笔者太多的注意,毕竟目前国内已有不少单位在进行这方面的探索,而且业内人士对于相关技术的适用性也存在着一定的争议。 网友的留言使笔者开始重新审视这一“看似平凡”的科技消息,而有关专家专为这一消息的深夜来电则使笔者最终下定决心去挖掘信息背后更深入的内容,也才有了后来对华教授的电话采访。现在本文即将脱稿,但是社会对于“农药残留速测技术”的关注,相信在很长一段时间里还会保持相当的热度,尤其是新技术在检测过程中是否存在“假阳性”以及“假阳性”的比例有多大等问题还有待于未来实践的检验。 单位地址:上海市军工路516号(200093)
  • 基于气相色谱-串联质谱开展白芍中33种禁用农残的检测
    背景介绍药用植物中经常施用的农药主要包括有机氯、有机磷、有机氮和拟除虫菊酯类等。有机氯农药在食物链中有极强的富集作用,在人类和动物的脂肪组织内长期积累容易引起慢性中毒;有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶有抑制作用,易产生急性中毒,有时严重危及生命。中药作为一种特殊的食品为患者及体弱者所服用,且服用时间长,更易造成蓄积中毒。目前,农药残留检测方法主要有气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)。*文章来源:中国农科院ICS重大平台中心中国科学仪器自主创新应用示范基地实验流程NO.1 样品前处理将白芍样品参照《2341农药残留测定法》中第五法药材及饮片(植物类)中禁用农药多残留测定法中的直接提取法进行样品前处理NO.2 仪器谱育科技GC 2000气相色谱仪、EXPEC 5230三重四极杆串联质谱仪(GC-MS/MS)配置:自动进样器、柱温箱、Mass Expert质谱工作站NO.3 仪器分析参数设置气相色谱条件色谱柱:DB-17MS气相色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm)升温程序:初始温度为60℃,保持1min,以每分钟10℃的速率升温至160℃,再以每分钟2℃的速率升温至230℃,最后再以每分钟15℃的速率升温至280℃,保持13min进样口温度:250℃进样方式:不分流进样载气控制方式:恒压,146KPa进样量:1uL质谱条件离子源为电子轰击(EI)离子源,监测模式为多反应监测(MRM)。NO.4 标准样品测试标曲限值点TIC图谱NO.5 样品测试平行白芍样品检测图谱NO.6 结果与分析GC-MS/MS法测得部分化合物标准曲线及回归方程结论白芍样品按照2020版《中国药典》2341农药残留量检测方法,使用谱育科技EXPEC 5230 GC-MS/MS测定,快速、准确对其中33种禁用农药进行筛查测定,33种禁用农药化合物线性良好,线性系数r值0.995。参考文献[1]Lehotay Steven J, de Kok André, Hiemstra Maurice,et al.Validation of a fast and easy method for the determination of residues from 229 pesticides in fruits and vegetables using gas and liquid chromatography and mass spectrometric detection. Journal of AOAC INTERNATIONAL,2005,88(2):595-614 [2]梁健滔,谭庆显,陈锐均,王建皓.我国食品中农残检测技术现状的分析与思考.食品界,2019(04):112.[3]陶晓杰,赵宇飞,白龙律,朱传祥.GC-MS/MS在土壤农残检测中的应用研究.食品安全导刊,2021(19):181+183.
  • 上海瑞鑫2018推出CNY-1217LS粮食农药残留速测仪
    CNY-1217LS粮食农药残留速测仪,采用7寸彩色触摸显示屏,具有数据传输和联网功能的新一代农药残留速测仪。可对粮食中有机磷和氨基甲酸酯类农药的含量 进行快速的检测。适合粮食收购部门检测使用。●采用7.0寸高分辨率彩色液晶触摸屏全中文显示,界面直观,操作便捷。●智能中文输入功能,可通过智能键盘和触摸笔直接输入中文,使检测记录更加详细直观。●仪器带有常规粮食样品名,直接点击选择,也可在仪器中直接中文编辑修改。●带有嵌入式微型热敏打印机,直接打印每个检测通道的测试报告,报告详细直观,内容包含通道号、抑制率、结果、中文样品名、检测日期、检验员、检测单位。●自动识别通道内是否有检测样品功能,有样品通道自动检测,无样品通道不检测不打印。●仪器采用光路自校正系统,实现开机自校,省略校0和100的步骤。●仪器既可显示吸光值又能显示透光值,便于开展其它实验使用。●反应时间和自动判定标准任意设定,设定范围宽,便于实际应用。●具有大容量自动保存检测结果,并能随意查询保存的记录。●乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶试剂均可使用,符合国家标准和农业部标准的要求。●仪器带有通讯接口,方便数据储存和移动,可与电脑实现快速连接●带有检测软件,实现数据管理、数据联网、查询、浏览、分析、统计、打印和发布信息。同时可与第三方软件公司进行系统集成和联网。1、 彩色液晶触摸大屏尺寸:7.0寸2、 吸光值显示范围:0.000-4.000a3、 透光值显示范围:0.00-100.00%t4、 透光值分辨率:0.01%t5、 吸光值分辨率:0.001a6、透射比准确度:±2.0%(t) 7、透射比重复性:≤0.2% (t) 8、光电流漂移(稳定性):≤0.3%(3分钟)9、抑制率显示范围:0-100% 10、抑制率测量范围: 0-100% 11、抑制率准确度:±10% 12、抑制率重复性:5% 13、检测通道: 12个14、波长:410nm15、通讯接口:rs232\usb16、工作电源:220v±10%
  • 环境LCMSMS新标准来袭,水质中有机磷农药检测无忧应对
    导读有机磷农药是一类高效广谱的杀虫剂,也是目前农业生产活动中使用最多的农药种类之一,其大量使用已对环境水体造成污染。水体中残留的有机磷农药,通过食物链富集后,可对人畜健康构成潜在危害。在检测低含量环境污染物方面,液质联用系统凭借其高灵敏度、高准确度、高通量等特点,在环境监测领域得到越来越广泛的应用。近期,生态环境部发布了《HJ 1183-2021 水质 氧化乐果、甲胺磷、乙酰甲胺磷、辛硫磷的测定 液相色谱-三重四极杆质谱法》,并将于2021年12月15日起正式实施。 有机磷杀虫剂类化合物的危害有机磷杀虫剂是一类常用的含磷有机合成杀虫剂,品种繁多,药效高,使用浓度低,广泛用于防治植物病、虫害,但容易造成人、畜急性中毒,毒性主要来自抑制乙酰胆碱酯酶引起的神经毒性。大多数品种对光、热不稳定,在碱性条件下会迅速分解而失效。目前,广泛使用的有机磷杀虫剂品种主要有氧化乐果、甲胺磷、乙酰甲胺磷、辛硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、敌敌畏、马拉硫磷、敌百虫等。图1 4种常见有机磷杀虫剂类化合物 由于农药会随地表径流进入地表水,通过不断积累和浓缩,必然影响生态系统本身的种类组成和群体数量,破坏生态平衡。另一方面,地下水生物量少,无光解作用,一旦污染,难以治理,对人体生命健康造成极大威胁。因此,水质中有机磷农残污染也随之成为水环境研究的热点问题。 新标准来袭,岛津方案助您从容应对参考HJ1183-2021标准,使用岛津液相色谱仪 LC-40 与三重四极杆质谱仪 LCMS-8040,建立了一种LC-MS/MS法快速准确测定水质中4种有机磷杀虫剂含量的方法,同位素内标定量,助您及时应对新标准! 图2 岛津液相色谱质谱联用仪(LCMS-8040) • 分析条件 表1 MRM优化参数注:*表示定量离子 • 标准曲线与检出限氧化乐果、乙酰甲胺磷在2~100 µg/L浓度范围内,甲胺磷、辛硫磷在2~200 µg/L浓度范围内,均具有较好的线性关系,线性相关系数均≥0.997,各校准点准确度在85.4~116.8%之间。 表2 校准曲线参数图3 4种化合物的校准曲线 • 样品测试结果及加标回收率对某地表水样品进行分析,未检测出上述4种有机磷杀虫剂类化合物。2 µg/L样品加标平均回收率分布在88.17~116.62%之间,满足标准要求,方法可靠。 图4 地表水样品色谱图图5 加标样品回收色谱图(2 µg/L) 表3 回收率结果(n=3) 结语水质安全是环境安全的重要一环,也关系到千家万户的用水安全与身体健康。HJ1183-2021新标准即将实施,岛津提供“交钥匙”全流程培训指导,经验丰富的工程师将在您的实验室提供全流程解决方案的现场培训服务,助您轻松掌握从样品前处理到分析报告生成的整个流程。
  • 发展食品快速检测技术刻不容缓
    “毒豇豆事件”暴露出检测技术缺陷科学时报:发展食品快速检测技术刻不容缓 [科学时报]今年2月,海南“毒豇豆事件”暴露出果蔬农残快速检测技术的缺陷。 海南豇豆一次次逃过例行的快速检测,最终在实验室的色谱检测中才查出了违禁高毒农药的具体品种和残留量。这让媒体对农残快速检测技术产生质疑。 我国目前普遍使用的农残速测法是酶抑制法。酶抑制法快速检测技术为什么让高毒农药一再漏网?快速检测技术在食品安全领域的发展前景究竟如何?《科学时报》记者日前采访了几位业内专家。 农残速测法缘何“执法不严” 在“毒豇豆事件”的报道中,媒体指出,农残速测技术缺点多多:只能作农药残留定性检测,不能作定量检测;只能作粗略检测,武汉用色谱仪器测出每公斤零点几毫克的水胺硫磷残留量,海南的农残快速检测根本不能测出;此外,农残快速检测还有很多假性结果。 中国农科院标准与检测技术首席科学家王静给记者解释了酶抑制法的基本原理:酶抑制法是用来检测有机磷类和氨基甲酸酯类农药的方法,这两类农药能够抑制乙酰胆碱酯酶或丁酰胆碱酯酶的活性。人们可以从苍蝇或电鳗的头部等处来提取这种酶。快速抽检时,将蔬菜汁提取出来,加入酶反应液。如果有这两类农药存在,就会对酶产生抑制,使其活性下降,反应溶液的颜色就会有变化,从而得知有农药残留。 但这种方法的局限性很明显。蒋士强是中国仪器仪表学会农业仪器应用技术分会常务副理事长,他表示,酶抑制法早在1951年由美国提出,1968年由加拿大作了改进,我国在上世纪80年代也着手研发过。但是该方法只能检测有机磷和氨基甲酸酯二类农药,而有机磷和氨基甲酸酯两类农药中包含多种农药,同类而不同种农药的酶抑制率差别很大,所以用统一的抑制率确定农药残留是否超标,必然会产生假阳性或假阴性的漏检。 王静告诉记者,药物交叉反应也会带来复杂情况,此外,葱姜蒜等辛辣食品以及一些有颜色的农产品都会对反应结果产生影响。 由于这些局限性,一些专家甚至称现在的酶抑制农残速测法是“假警察”、“稻草人”。 蒋士强说:“酶抑制法可说仅适用于基层初检,起警示作用。发现超标现象时,必须用标准方法复测、确证,即使不超标也应按比例抽样,用可靠的方法复测和确证,决不能仅依靠酶抑制法的农残速测仪。对快速检测方法的应用,在《农产品质量安全法》第36条第二款有明确界定。” 蒋士强进一步指出,当前酶抑制法在我国仅是“不得已而采用的速测法”,建议尽快修订应用酶抑制法检测农残的标准。 快速检测技术在我国仍有重要地位 据专家介绍,酶抑制法在国外已经逐渐退出。而目前酶抑制农残速测法在我国的广泛使用,与我国食品生产的现实情况息息相关。 我国农产品与食品的生产、经营、监管等与西方发达国家不同。我国食品生产和供给渠道多、数量大、规模小、分散,且法制和自律意识弱,人口与消费人群又众多。国家质检总局的调查数据显示,我国45万个食品生产企业中,员工人数10人以下的食品生产加工小作坊有35万家,比例近80%,基本上都缺乏相应的技术和食品安全意识。另外,尽管我国目前的养殖和种植方面的规模在不断扩大,但是大部分直接食用和食品加工用的农产品仍以分户生产为主。 在检测实验室中,依据国家标准和行业标准装备的大型检测仪器有很多优点:精度高、可以定量和定性(确证)分析,但是高昂的价格和较长的耗时及要求较高的使用技能是它的软肋。据了解,色谱仪一般每台十几万元,色—质联用仪则需要几十万甚至上百万元,检测一个样品成本从几百元到两千元不等,而且样本提取和净化步骤等前处理比较费时;但市场上一台速测仪加配套设备不到1万元,从取样到检测只需10~20分钟,检测一个样品成本在2元左右,对操作人员的技术水平要求也不高。 以上情况决定了快速检测技术目前在我国仍有重要地位,而且只有发展快速筛查检测技术才能实现从源头进行监控。 北京望尔生物技术有限公司是我国一家致力于食品安全快速检测技术研究的高新技术企业,近几年来该公司的销售业绩一直快速增长。该公司总经理万宇平认为,快速检测技术“必然会在国家的发展过程中扮演这样一个过渡的重要角色”,而且,即使在发达国家,“快测技术目前也在用”。 现在,望尔的兽药残留快速检测产品占有约1/3的市场份额。其用免疫技术研发的“三聚氰胺检测试纸条”可以在很短时间内完成检测,灵敏度也非常高。 那么,为什么农残快速检测的灵敏度不够高呢?万宇平表示,免疫法与酶抑制法这两种快速检测技术不在一个平台之上。在“毒豇豆事件”出来后,他们从技术角度评估了很多次,认为用免疫方法来做相关的农残快速检测是可行的,也尝试进行相关研究。在国外,用免疫方法快速检测农药残留也已经是成熟技术。 但是,目前国内尚未有真正推广使用的免疫法农残快速检测产品。 万宇平指出其中的关键是成本。免疫技术的研发门槛比较高,其产品成本也比酶抑制法产品成本高多了,市场推广的难度很大。 目前望尔公司用免疫技术研发的速测产品都是用于兽药残留筛查检测的。“举例来说,白菜和鸡肉、猪肉、牛肉的售价差很多,如果采用同样的检测技术,检测成本分摊下来,白菜的价格就太高了。如果将来要做,除了技术上的突破,还离不开政府的补贴和推广政策。”万宇平说。 快速检测技术的发展趋势 王静也表示,从技术上看,免疫法快速检测的确可以达到很高的检测精度。她说,放射免疫法和酶免疫法的精度甚至可以与色—质联用分析相接近,能够测定很低的残留量。 “但是蔬菜种植过程中往往不止使用一种农药,而且农药可以复配。”王静说,要想跟检测兽药残留一样,针对一种药物做一种试剂盒,是不现实的。“每年农业部例行抽查监测的农药都有50种左右,一个试剂盒根本涵盖不了这么多种农药,每种都做一个试剂盒又太划不来了”。 王静认为,这正好说明了快速检测技术发展的一个重要趋势——要大力发展“类特异性”。 万宇平同意这个观点:“免疫技术要在农残检测上大规模应用,还是需要突破一个难题——就是要做出一类的药物的检测方法,而不仅仅是针对一种药物。” 蒋士强也指出,为应对多目标物和提高灵敏度等要求,免疫技术必然向重组抗原、酶的定向改造以及与其他技术复合或联用,如化学发光免疫分析、引入分子印迹技术等方向发展。 据王静和蒋士强介绍,快速检测技术通常采用化学和生物两方面的分析技术。化学方面主要指化学检测试剂盒(试纸、卡、简易的光度计)、电化学传感器和化学发光技术等,如吉林大学采用以经典的分析化学为基础,有针对性地整合和优化不同检测目标与任务,推出一系列与食品安全检测相关的化学分析试剂盒,并配合快速提取和富集技术,构成多种、多参数食品安全速测仪。生物方面则包括免疫学方法、生物传感器技术和蛋白质芯片等。 王静强调,免疫学方法是当今的研究重点和主流方向。在农药检测方面,用免疫方法可以检测的农药类别很多:包括有机磷类、氨基甲酸酯类、硫代氨基甲酸酯类、有机氯类、三嗪类、拟除虫菊酯类和酰胺类等几十类农药。 此外,王静和蒋士强还指出,化学发光技术、生物传感器技术、特种电化学传感器、蛋白芯片技术、微流控芯片系统、专用的激光拉曼光谱、很前沿的深紫外光谱、离子迁移谱以及新离子化技术的便携式质谱等,也是未来快速检测技术发展的重要方向,值得关注。 “除了类特异性,未来的快速检测技术还不可避免地要求检测速度越来越快、灵敏度越来越高、操作越来越简便,‘无试剂化’、仪器更微型化和便携化,联用技术应用越来越广泛。”王静说。 万宇平认为,在快速检测技术的研发方面,国内与国外的差距不像大型仪器研发方面那么大,在有的领域几乎“不相上下”。现在的望尔也可以攻克国外大公司不能解决的技术难题,吸引国外大厂商与之合作,因此他们对未来很有信心。 望尔很看好快速检测技术在中国的市场。“即使在未来,快测技术在不同阶段也有不同的项目来支持它的发展,这是没有问题的。大型仪器检测技术与快速筛查技术配合,更加经济有效和即时——不管是现在,还是以后。”万宇平说。
  • 近红外仿生荧光探针抗干扰检测农药残留研究取得新进展
    近日,中国农业科学院茶叶研究所茶叶质量与风险评估创新团队在农药残留快速检测技术方面取得新进展,相关研究结果以“Near-infrared-excitable acetylcholinesterase-activated fluorescent probe for sensitive and anti-interference detection of pesticides in colored food”为题发表在Biosensors and Bioelectronics杂志上。   基于乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制机理的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术具有广谱、便捷、高通量、低成本等显著优点,是农产品质量安全筛查的重要手段。然而,天然色素复杂多样且存在于几乎所有植物源性样品中,极易对光学检测造成干扰,因而开发一种通用、抗色素干扰的AChE抑制检测方法具有重要实用价值。本研究根据天然色素光学背景特点,采用近红外(NIR)激发策略实现了不同植物色素共存下荧光响应信号的准确测量;通过仿生分子设计与化学合成构建了一种能够靶向响应AChE活性的NIR荧光探针,并在此基础上建立了灵敏度高、可靠性好的农药残留抗干扰快速检测方法。利用该探针,本工作实现了对甜菜根、胡萝卜、蓝莓、生菜等不同色系样品中有机磷和氨基甲酸酯类农药的直接快速检测;对样品中敌敌畏的检出限(5.0 μg/kg)低于UPLC-MS等常规仪器检测方法。   本研究得到了国家自然科学基金、浙江省公益计划研究项目、中国农业科学院创新工程等项目资助。我所2020级硕士研究生吴正浩为论文第一作者,郝振霞副研究员、陈红平研究员和鲁成银研究员为共同通讯作者。
  • 功能性MRI技术在阿尔茨海默病药物治疗效果研究中的应用
    p  阿尔茨海默病(AD)是晚年痴呆最常见的原因。该病以渐进性神经变性为特征,表现为逐渐丧失记忆力和认知能力,以及其他脑功能的下降。尽管在过去十年中人们进行了广泛的研究,但AD的病因和治疗仍然大多未知。/pp  人们已对AD相关的几种缺陷进行治疗干预,包括基于淀粉样变性,β, 和炎症假说的干预。但是,目前只有2种药物——胆碱酯酶抑制剂和美金刚(memantine),已被批准用于控制AD的认知症状,例如记忆丧失,语言和执行功能的丧失。/pp  已经有研究人员使用无创的体内功能磁共振成像(MRI)技术,包括血氧水平依赖性功能性MRI,基于动脉自旋标记的灌注MRI和质子磁共振光谱术,来研究胆碱酯酶抑制剂和美金刚在脑中的作用。这些研究中的大多数已经证实了AD和轻度认知功能障碍患者的功能激活和连接性增加,局部脑血流量和治疗后容量增加,以及反映神经元状态和功能的关键脑代谢物的阳性反应。这些发现有助于了解药物治疗的机制,并支持功能性MRI技术在AD药物治疗的发展和完善中的关键作用。/pp  原文请查阅:/pp  Hui Guo, Lukas Grajauskas, Baraa Habash, Ryan CN D' Arcy, Xiaowei Song . Functional MRI technologies in the study of medication treatment effect on Alzheimer' s disease. Aging Medicine, 2018, 1, 75-95/pp style="text-align: right "  符斌供稿/ppbr//p
  • 采用中和法原理的柴油汽油煤油酸度测定仪
    柴油汽油煤油酸度测定仪适用标准:GB/T264-83 GB/T7599-87 GB258-77, 用于检测变压器油,汽轮机油及抗燃油等样品的酸值分析测量。酸值是中和1克油品中的酸性物质所需要的氢氧化钾毫克数,用mgKOH/g油表示,它是油品质量中应严格控制的指标之一。该仪器通过机械、光学以及电子等技术的综合运用,采用微处理器,能够自动实现多样品切换、滴定、判断滴定终点、打印测量结果等功能,该系统稳定可靠,自动化程度高。可广泛运用于电力、化工、环保等领域。仪器特点1.液晶大屏幕、中文菜单、无标识按键;2.自动换杯、自动检测、打印检测结果;3.该仪器可对六个油样进行检测;4.采用中和法原理,用微机控制在常温下自动完成加液、滴定、搅拌、判断滴定终点,液晶屏幕显示测定结果并可打印输出,全部过程约需4分钟;5.用试剂瓶盛装萃取液和中和液,试剂在使用过程不与空气接触,避免了溶剂挥发和空气中CO2的影响。技术参数工作电源:AC220V±10% ,50Hz耗电功率: ﹤100W测定范围: 0.0001~0.9999mgKOH/g 分辨率: ≥0.0001 mgKOH/g测量准确度:酸值<0.1时 ±0.02 mgKOH/g酸值≥0.1时 ±0.05 mgKOH/g重复性: 0.004 mgKOH/g环境温度:10℃~40℃相对湿度:<85%
  • 赛默飞发布分析8种氨基甲酸酯农药的解决方案
    2015年8月25日,北京——科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技(以下简称:赛默飞)近日发布双三元柱后衍生法分析8种氨基甲酸酯农药的解决方案,旨在帮助客户更加便捷地检测氨基甲酸酯类农药残留。氨基甲酸酯类农药的结构特性是分子中含有一个N-甲基基团,是一类以甲酸酯为前体化合物发展而来的农药,具有分解快、残留低、低毒、高效、选择性强等特点,代表品种有甲萘威(西维因)、涕灭威、呋喃丹(克百威)等。20 世纪70 年代以来,由于有机氯农药品种相继被不同国家禁用或者限制使用,以及抗有机磷农药的昆虫品种的日益增多,氨基甲酸酯类农药的使用量逐年增加。大多数氨基甲酸酯类农药的半衰期较短,在碱性和高温条件下容易分解,施用后短时间内就会被降解为相应的代谢产物。其代谢产物通常具有与母体氨基甲酸酯类农药相同或更强的生物活性,例如涕灭威亚砜( 涕灭威的代谢产物) 与涕灭威相比,具有更强的抗胆碱酯酶的作用。因此,在测定氨基甲酸酯类农药残留时,必须考虑如何有效地对代谢产物进行测定。分光光度法是较早用于氨基甲酸酯类农药残留测定的方法之一,但由于操作繁琐,易受其他物质干扰,现已很少使用。从1977 年Moye 等第一次采用HPLC 柱后衍生测定氨基甲酸酯类农药残留以来,采用HPLC 柱后水解或柱后衍生方法对复杂介质中氨基甲酸酯类农药的残留量进行检测越来越普遍。国家农业标准NY/T 761-2008 第三部分蔬菜和水果中氨基甲酸酯类农药多残留的测定中,规定了该类化合物采用液相色谱法分离,柱后在线水解生成甲胺进行荧光衍生后检测的方法。本方法参考NY/T 761-2008 方法,建立了采用双三元液相色谱配合AXP 泵辅助柱后衍生,实现了8 种氨基甲酸酯农药的检测,最低检测限可达0.008~0.015mg/L,满足NY/T 761-2008 的要求。 双三元流路连接图本文探索了利用Thermo ScientificTM DionexTM UltumateTM 3000 DGLC双三元液相色谱结合AXP 辅助泵,实现氨基甲酸酯柱后两级衍生并荧光检测的可行性。结果表明,该方法完全可以满足NY/T 761-2008 方法的灵敏度要求。本方法所分析的化合物中,杀线威并未包含在NY/T 761-2008 方法中,但在色谱图中,杀线威和涕灭威砜出峰时间相近,如果二者在色谱柱上分离度差,势必会对实际样品检测有影响,因此对于色谱柱的选择非常重要;本方法中,杀线威和涕灭威砜的分离度为1.62,可达到完全基线分离,因此该条件下Acclaim C18, 5μm 4.6×250mm 色谱柱完全可以用于氨基甲酸酯的分析,此外选用Acclaim PAII, 5μm 4.6×250 mm 色谱柱,同样可以达到很好的分析效果。该柱后衍生系统为实验室自己搭建,在双三元的基础上,只需额外配置一台AXP 泵和常规柱温箱即可实现氨基甲酸酯的检测,与Pickering 等柱后衍生仪相比,成本大大降低,且完全满足NY/T 761-2008 的灵敏度要求。如果用户需要更高灵敏度的分析,如环境方向,建议配置Pickering 等柱后衍生仪。应用方案下载:www.thermoscientific.cn/content/dam/tfs/Country%20Specific%20Assets/zh-ch/CMD/Chrom/product%20brochures%20and%20AN/LC/Analysis-of-8-kinds-of-carbamate-pesticide-by-post-column-derivatization.pdf ---------------------------------------------------关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技(纽约证交所代码:TMO)是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额170亿美元,在50个国家拥有约50,000名员工。我们的 使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们的产品和服务帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战,促进医疗诊断发 展、提高实验室生产力。借助于首要品牌Thermo Scientific、Applied Biosystems、Invitrogen、Fisher Scientific和Unity Lab Services,我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合,为客户、股东和员工创造价值。欲了解更多信息,请浏览公司网站:www.thermofisher.com赛默飞世尔科技中国赛默飞世尔科技进入中国发展已有30多年,在中国的总部设于上海,并在北京、广州、香港、台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉、昆明等地设立了分公 司,员工人数约3700名。我们的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等,提供实验室综合解决方案,为各行各业的客户服务。为 了满足中国市场的需求,现有8家工厂分别在上海、北京和苏州运营。我们在全国共设立了6个应用开发中心,将世界级的前沿技术和产品带给国内客户,并提供应 用开发与培训等多项服务;位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术,研发适合中国的技术和产品;我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成 立的中国技术培训团队,在全国有超过2000名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息,请登录网站:www.thermofisher.com
  • 喜讯 ▏食安科技荣获2020年度广东省食品行业协会科学技术奖一等奖
    近日,由食安科技和广州市食品检验所联合开发的食用农产品中农药残留数字化检测卡及配套仪器产业化应用项目荣获2020年度广东省食品行业协会科学技术奖一等奖。 数字农药残留速测卡由胆碱酯酶法和侧向层析技术结合,大大缩短检测时间(8min),灵敏度更高,抗干扰能力更强,显色更均匀,配合我司自主研制的新型农残速测仪,采用先进的色差分析技术,使检测结果更准确可靠。该技术获得发明专利,专利号为2017109477880。数字农药残留速测卡 与数字农药残留速测卡配套使用的是农药残留快速检测仪智能分析终端,采用先进的数据采集系统实时采集数字化检测卡的检测结果原始图像,通过图像处理算法对速测卡检测结果原始图像进行处理,分析将检测结果数据化,形成量化的检测结果数据,并对结果进行分析,快速检测农产品的农药残留情况;集成GPRS/3G无线数据传输模块、GPS定位模块,实现仪器实时在线在网、各类数据采集的实施传输及实时定位。智能分析终端采用流行性外观设计,液晶显示屏幕,界面人性化,读数直观,超大容量内存,可存储多条检测数据。农药残留快速测试仪器 该项目在全国范围内市场监督管理局、农业监管部门、粮食系统、海关、农贸农批市场、大型商超、学校、机关饭堂等单位都得到广泛的推广应用。
  • 财政部发文:多类仪器继续不加征我为反制美301措施所加征的关税
    据财政部消息,国务院关税税则委员会于近日发布对美加征关税商品第十一次排除延期清单。检测温度的半导体传感器、显微镜(光学显微镜除外)及衍射设备、激光器、核磁共振成像装置零件、内窥镜的零件及附件、其他非医疗用的X射线应用设备、X射线管、液位仪用探棒、傅里叶红外光谱仪、近红外光谱仪、台式与手持拉曼光谱仪、基因测序仪、流式细胞仪、转矩流变仪、超声波探伤检测仪等95项商品延长排除期限,自2023年6月1日至2023年12月31日,继续不加征我为反制美301措施所加征的关税。对美加征关税商品第十一次排除延期清单序号EX①税则号列②商品名称103063610其他小虾及对虾种苗2ex04041000饲料用乳清(按重量计蛋白含量2%-7%,乳糖含量76%-88%)312141000紫苜蓿粗粉及团粒4ex12149000其他紫苜蓿(粗粉及团粒除外)523012010饲料用鱼粉6ex27101299脱模剂(按重量计石油及从沥青提取的油≥70%)7ex27101919异构烷烃溶剂(初沸点225摄氏度,闪点92摄氏度,密度0.79g/cm3 ,粘度 3.57mm2/s)827101991润滑油927101992润滑脂10ex27101993润滑油基础油(产品粘度100摄氏度时37-47,粘度指数80及以上,颜色实测2.0左右,倾点实测-8摄氏度左右)11ex29349990环线威、杀虫环、杀虫钉、多噻烷等(包括甲基硫环磷、噻嗪酮、恶虫酮、茚虫威)12ex29349990地西他滨、氟脲苷、环磷酰胺、吉非替尼、卡培他滨、雷替曲塞、磷酸氟达拉滨、替加氟、盐酸阿糖胞苷、盐酸吉西他滨、盐酸埃克替尼、异环磷酰胺1334024200非离子型有机表面活性剂1434031900矿物油<70%的润滑剂1534039900不含石油或从沥青矿物提取油类的润滑剂16ex44039100其他栎木(橡木)原木(用油漆、着色剂、杂酚油或其他防腐剂处理的除外)1744039960北美硬阔叶木原木18ex44079100端部接合的其他栎木(橡木)厚板材(经纵锯、纵切、刨切或旋切的,厚度超6毫米)19ex44079100非端部接合的其他栎木(橡木)厚板材(经纵锯、纵切、刨切或旋切的,厚度超过6毫米)2044079400樱桃木木材,经纵锯、纵切、刨切或旋切,不论是否刨平、砂光或端部接合,厚度超过6毫米2144079500白蜡木木材,经纵锯、纵切、刨切或旋切,不论是否刨平、砂光或端部接合,厚度超过6毫米2244079930其他北美硬阔叶木木材,经纵锯、纵切、刨切或旋切,不论是否刨平、砂光或端部接合,厚度超过6毫米23ex47032100其他漂白针叶木碱木浆或硫酸盐木浆(包括半漂白的,溶解级的除外)2447062000从回收(废碎)纸或纸板提取的纤维浆2549019900其他书籍、小册子及类似印刷品2649021000每周至少出版四次的报纸、杂志及期刊2749029000其他报纸、杂志及期刊2884122100直线作用的液压动力装置2984122910液压马达3084123100直线作用的气压动力装置31ex84135010气动式耐腐蚀波纹或隔膜泵(流量大于0.6立方米/时,接触表面由特殊耐腐蚀材料制成)32ex84135020电动式耐腐蚀波纹或隔膜泵(流量大于0.6立方米/时,接触表面由特殊耐腐蚀材料制成)33ex84135031其他非农业用柱塞泵34ex84136021其他非农业用电动齿轮泵(回转式排液泵,多重密封泵除外)35ex84136022其他非农业用液压齿轮泵(回转式排液泵,多重密封泵除外)3684136031电动式叶片回转泵37ex84136040其他非农业用螺杆泵 ( 回转式排液泵,多重密封泵除外)38ex84141000专门或主要用于半导体或平板显示屏制造的真空泵3984212300内燃发动机的燃油过滤器40ex84212990用氟聚合物制造的厚度不超过140微米的过滤膜或净化膜的其他液体过滤或净化机器及装置41ex84212990液体截流过滤设备(可连续分离致病性微生物、毒素和细胞培养物) 42 ex 84219990用氟聚合物制造的厚度不超过140微米的过滤膜或净化膜的液体过滤或净化机器及装置的零件;装备不锈钢外壳、入口管和出口管内径不超过1.3厘米的气体过滤或净化机器及装置的零件4384254210其他液压千斤顶4484335920棉花采摘机4584561100用激光处理各种材料的加工机床4684564010等离子切割机4784615000锯床或切断机4884621110数控的闭式锻造机(模锻机)4984621190非数控的闭式锻造机(模锻机)5084621910数控的热锻设备,热模锻设备(包括压力机)及热锻锻锤,闭式锻造机(模锻机)除外5184621990其他非数控的热锻设备,热模锻设备(包括压力机)及热锻锻锤,闭式锻造机(模锻机)除外52ex84625100数控金属管道、管材、型材、空心型材和棒材的锻造或冲压机床及锻锤53ex84625900非数控金属管道、管材、型材、空心型材和棒材的锻造或冲压机床及锻锤54ex84626110数控锻造或冲压机床及锻锤55ex84626190非数控锻造或冲压机床及锻锤56ex84626210数控锻造或冲压机床及锻锤57ex84626290非数控锻造或冲压机床及锻锤58ex84626300数控锻造或冲压机床及锻锤59ex84626910数控锻造或冲压机床及锻锤60ex84626990非数控锻造或冲压机床及锻锤61ex84629010其他数控锻造或冲压机床及锻锤62ex84629090其他非数控锻造或冲压机床及锻锤63ex84798999生物反应器(两用物项管制机器及机械器具)6484805000玻璃用型模6584812010油压传动阀6684821010调心球轴承67ex84821040飞机发动机用外径30厘米的推力球轴承(滚珠轴承)68ex85076000纯电动汽车或插电式混合动力汽车用锂离子蓄电池系统(包含蓄电池模块、容器、盖、冷却系统、管理系统等,比能量≥80Wh/kg)69ex85415112检测温度的半导体传感器7090121000显微镜(光学显微镜除外)及衍射设备7190129000显微镜(光学显微镜除外)及衍射设备的零件、附件7290132000激光器73ex90139010激光器以及作为本章或第十六类的机器、设备、仪器或器具部件的望远镜用的零件及附件(武器用望远镜瞄准器具或潜望镜式望远镜用零件及附件除外)7490149010自动驾驶仪用零件、附件75ex90181291彩色超声波诊断仪的零件及附件7690181390核磁共振成像装置零件77ex90189030内窥镜的零件及附件78ex90192020具有自动人机同步追踪功能或自动调节呼气压力功能的无创呼吸机7990213900其他人造的人体部分80ex90221400医用直线加速器8190221990其他非医疗用的X射线应用设备8290223000X射线管83ex90251910温度传感器(半导体传感器除外)84ex90269000液位仪用探棒 85 ex 90271000用于连续操作的气体检测器【可用于出口管制的化学品或有机化合物(含有磷、硫、氟或氯,其浓度低于0.3毫克/立方米)的检测,或为检测受抑制的胆碱酯酶的活性而设计】86ex90273000傅里叶红外光谱仪87ex90273000近红外光谱仪88ex90273000台式与手持拉曼光谱仪8990275010基因测序仪90ex90275090流式细胞仪91ex90278990转矩流变仪92ex90309000频率带宽在81GHz以上,且探针最小间距在周围排列下为50微米,阵列下为180微米的用于声表面波滤波器测试的测试头9390318031超声波探伤检测仪9490328100液压或气压自动调节或控制仪器及装置95ex90329000飞机自动驾驶系统的零件(包括自动驾驶、电子控制飞行、自动故障分析、警告系统配平系统及推力监控设备及其相关仪表的零件)注:①ex表示排除商品在该税则号列范围内,以具体商品描述为准;②税则号列为《中华人民共和国进出口税则(2023)》的税则号列。
  • 固定化酶技术在中药酶抑制剂筛选中的研究现状
    中药资源丰富,历史悠久,在预防与治疗疾病中扮演着重要的角色。然而,中药的化学成分多种多样,作用机制更是复杂多样,如何从中药中筛选疾病相关药效物质是当前亟待解决的关键问题。大量研究表明,人体许多疾病过程都与体内生物酶调节作用相关,如痛风[1]、阿尔茨海默症[2]、糖尿病[3-5]等。而且,中药在治疗各种疾病中也扮演着重要角色,如白芷提取物能促进新生血管形成与成熟,从而提高自发2型糖尿病小鼠创面愈合速率和质量[6];绞股蓝叶水提物能够降低链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的血糖,其作用机制可能与增加骨骼肌肌膜葡萄糖转运体4蛋白表达和抑制骨骼肌炎症有关[7]。因此,基于酶在疾病发生发展的重要性,以酶为靶点从中药中筛选新药是一有力途径,而且开发一种快速、高效的酶抑制剂筛选方法是当前首要任务。固定化酶技术是20世纪60年代发展起来的,该技术利用物理或化学方法将游离酶固定在相应的载体上用于筛选酶抑制剂。固定化酶技术可以有效提高酶的催化性能和操作稳定性,并降低成本,是目前广泛使用的技术[8]。此外,相比于游离酶,固定酶更有利于酶-配合物的分离纯化,在pH耐受性,底物选择性,热稳定性和可回收性等方面表现出优越的性能[9-10]。不同的酶发挥催化作用的活性部位不同,将酶进行固定时,要使载体材料与酶的非活性部位结合,才可以保留酶的活性,因此载体材料的选择是固定化酶技术发挥作用的关键。本文以固定载体材料(表1)为分类综述了近10年固定化酶技术在中药酶抑制剂[α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,α-Glu)、脂肪酶等] 筛选中的研究现状,希望可以为后续的相关研究提供一定的参考依据。1 磁性载体磁性载体材料是利用铁、锰、钴及其氧化物等化合物制备的一类具有磁性的材料[11],通过改变磁力大小和外部磁场的方向来改变粒子的运动轨迹,从而使酶与载体的结合与分离可以在可控条件下完成,便于固定化酶的分离和收集,并用于酶抑制剂的筛选[12]。以磁性载体为材料的固定化酶技术的最大优点在于利用磁力吸引可使固定化酶快速从反应体系中分离,且固定化方法简单,能有效减少筛选时间及实验试剂的消耗。因此,通过不同方法对磁性载体材料进行功能化修饰,在充分发挥磁性材料优势的基础上改善其表面性质,提高对不同类型目标物的特异性,从而在各类复杂样品的前处理过程中有着良好的应用潜力[13]。目前,磁珠是近年来发展起来的一种常用的磁性载体材料,也叫做磁性纳米粒子,包括氧化铁(Fe3O4和γFe2O3)、合金(CoPt3和FePt)等。其中,Fe3O4纳米粒子具有生物相容性和无毒性等优点,被广泛应用于酶的固定化。中药酶抑制剂筛选中的常用磁珠其磁核以Fe3O4纳米粒子为主,壳层为二氧化硅、琼脂糖、葡聚糖等,是具有超顺磁性的小球形磁性粒子[14-15],可借助外部磁场从生物催化体系中分离酶抑制剂。该方法机械稳定性高、孔隙率低,利于降低反应中的传质阻力,提高了固定化酶的重复使用性。由于其具有操作稳定性高、磁响应强、磁分离速度快等优点,在生物和药物研究中得到了广泛的应用[16]。在进行酶抑制剂筛选时,磁珠的修饰位置不同,所固定的位点也不同。因此,在实验中,往往要根据靶蛋白的分子结构选择合适的磁珠或将某一磁珠进行修饰后作为固定载体。将酶固定在合适的磁珠上会增强酶与待筛选酶抑制剂的亲和力,利用磁力将固定化酶及其抑制剂从提取液中分离,然后洗去与酶不相互作用的化合物,随后可得到酶固定化磁珠配体配合物,最后通过洗脱溶剂使配体释放进而通过质谱表征[17]。在这种方法中,潜在的配体与酶相互作用,生成酶配体配合物,这有利于利用磁性[18-23]从复杂混合物中分离活性化合物。在酶抑制剂的筛选中,磁性载体材料是最常用的固定化载体材料[24-30]。1.1 无机载体材料二氧化硅是磁性纳米粒子表面修饰最常用的无机材料[23,31-34],此外还有二氧化钛[35]、介孔二氧化硅[16]等。Li等[23]首先将Fe3O4分散在水中加入聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,PVP)室温搅拌得到产物。然后在超声作用下将产物分散在含有异丙醇和氨水的混合溶剂中,室温搅拌下缓慢加入正硅酸乙酯(tetraethylorthosilicate,TEOS)溶液得到SiO2@Fe3O4磁性微球,并加入3-氨丙基三甲氧基硅烷(3-aminopropyltrimethoxysilane,ATPES)对其表面进行改性。最后将α-淀粉酶固定在表面改性的SiO2@Fe3O4磁性微球上。将制得的酶固定化磁性微球用于黄花草中α-淀粉酶抑制剂的筛选,最终得到3种黄酮类化合物对α-淀粉酶具有较好抑制作用。Liu等[35]采用溶剂热法(也称水热法或水热合成法)制备了Fe3O4@TiO2纳米粒子,并通过静电相互作用固定脂肪酶。采用透射电镜、傅里叶变换红外光谱和X射线衍射等方法对磁性纳米粒子进行表征,以确定脂肪酶是否已经被固定。研究中应用脂肪酶固定化Fe3O4@TiO2纳米粒子从6种具有脂肪酶抑制活性的藏药中筛选出脂肪酶抑制剂,获得5种具有与临床常用减肥药物奥利司他活性类似的化合物,其中1种化合物(山柰酚)的抑制活性优于奥利司他。Yi等[16]将谷胱甘肽S-转移酶固定在介孔二氧化硅磁性微球表面筛选紫苏中的酶抑制剂,利用高效液相色谱和四极飞行时间质谱法进行鉴定,筛选出6种具有谷胱甘肽S-转移酶抑制作用的物质,其中,迷迭香酸、(−)表没食子儿茶素-3-没食子酸酯和 (−)-表儿茶素-3-没食子酸酯具有较好的抑制活性。最后利用分子对接技术确定潜在抑制剂与谷胱甘肽S-转移酶的结合方式。首先,用FeCl3与柠檬酸三钠和乙酸钠合成Fe3O4,然后将其分散在含有乙醇、去离子水和氨水的混合溶液中,搅拌均匀后加入TEOS制得SiO2@Fe3O4磁性微球。为进一步合成介孔二氧化硅磁性微球(mSiO2@SiO2@Fe3O4),将SiO2@Fe3O4磁性微球分散在十六烷基三甲基氯化铵、去离子水和三乙醇胺中并滴加TEOS,产物用磁铁分离并清洗除杂后得mSiO2@SiO2@Fe3O4磁性微球。最后用PDA对mSiO2@SiO2@Fe3O4磁性微球进行表面改性并将谷胱甘肽S-转移酶固定在其表面。1.2 有机载体材料在酶抑制剂的筛选中,有机载体材料相比于无机载体材料应用较少。目前,用于磁性纳米粒子表面修饰的有机载体材料有聚酰胺(polyamidoamine,PAMAM)[36]、共轭-有机骨架[37]和金属-有机骨架[38]等。Jiang等[36]以PAMAM包覆磁性微球为基础,建立了一种筛选和鉴定赤芍提取物中α-Glu抑制剂的方法。首先,采用微修饰法合成了Fe3O4-COOH微球。然后,通过Fe3O4-COOH微球表面羧基与PAMAM氨基的偶联反应,制备了Fe3O4@PAMAM微球。最后,通过GA的交联,成功地将α-Glu连接到其表面。结果表明,没食子酸和(+)-儿茶素对α-Glu均具有较好抑制作用。Zhao等[37]将乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)固定在适配体功能化磁性纳米颗粒共轭有机骨架上构建固定化酶反应器,并将该方法用于酒石酸、(−)-石杉碱A、多奈哌齐和小檗碱4种AchE抑制剂抑制活性的测定,发现酒石酸的IC50与已报道的结果相当,证明了该固定化酶反应器的可行性。Wu等[38]将α-Glu固定在磁性纳米材料Fe3O4@ZIF-67上,构建了快速筛选α-Glu抑制剂的生物微反应器。然后,将酶生物微反应器通过外加磁场固定在连接高效液相色谱仪(high performance liquid chromatography,HPLC)和微注射泵2端的管中,形成一个磁性在线筛选系统。以信阳毛尖粗茶提取物为实验对象,对该在线筛选方法进行验证,利用该在线筛选系统筛选出3种抑制剂(儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯和表没食子酸酯)。与传统方法相比,该方法可将筛选、洗脱和分析结合起来,可以简单、高效、直接地从天然来源筛选和鉴定潜在的α-Glu抑制剂。磁珠分散性好,磁分离速度快,酶结合量大,酶活性高,是固定化酶的理想载体,现已广泛应用于酶抑制剂的筛选中。将酶固定在特定的磁珠上,可实现酶抑制剂的分离。此方法操作较稳定,非特异性结合率低。因此,酶固定化磁珠技术因其快速的生物分析、导向性分离和从复杂混合物中直接捕获配体而受到越来越多的关注。2 非磁性载体2.1 无机载体材料2.1.1 石英毛细管 毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)具有分离效率高、分析速度快、操作简单和样品消耗少以及可与多种检测手段联用等优点,在酶分析研究中越来越受到关注[39-41]。近年来,固定化酶微反应器与生物活性靶向技术相结合已应用于中药酶抑制剂的筛选[42]。该方法将酶固定在经过修饰的石英毛细管内,捕获抑制剂后,洗涤未结合组分,进而通过蛋白质变性洗脱活性结合配体,允许直接并可重复注射生物样品到高效液相色谱上进行检测,筛选和分离一步完成,大大缩短了操作时间。但该方法制备过程中是比较复杂繁琐的[43-44],而且载体的孔隙率[45]、孔径[46]和表面化学[47-48]等因素也很容易影响固定化酶的性能。Wu等[49-50]用PDA对石英毛细管进行表面改性,并与氧化石墨烯共聚形成聚多巴胺/氧化石墨烯涂层,增加了固定化酶的结合率,并将该方法成功用于凝血酶和凝血因子Xa以及黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选。有研究者用3-氨基丙基三乙氧基硅烷对石英毛细管进行表面改性,采用戊二醛交联法进行酶的固定,并成功用于酶制剂的筛选。Rodrigues等[51]将此修饰方法用于黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)抑制剂的筛选,成功地从不同天然产物中筛选出30个潜在的XOD抑制剂。Zhang等[52]将此修饰方法用于组织蛋白酶B抑制剂筛选,并从中药中发现了17个具有抑菌潜力的活性成分,发现山柰酚等5种天然产物有潜在的抑制作用,并以分子对接进行验证。Tang等[53]将此修饰方法用于脂肪酶抑制剂的在线筛选,结果发现6种天然产物对脂肪酶活性均有抑制作用。Zhao等[54]将此修饰方法用于神经氨酸酶抑制剂的筛选,发现了6种天然产物为潜在抑制剂。进一步测定了这6种化合物对神经氨酸酶潜在的抑制活性,由大到小分别为:甲基补骨脂黄酮A>补骨脂甲素>黄芩素>黄芩苷>白杨素和牡荆素。此外,还有研究者采用单片毛细管固定化酶反应器与液相色谱-串联质谱联用技术,成功用于酶抑制剂的筛选[55-56]。毛细管的高表面体积比有利于足够高浓度的酶用于酶促反应[57-58]。此外,由于注入的底物溶液直接与固定化酶分子接触,使传统的采样、反应、分离和检测多步操作简化为一步操作,因此该分析变得更简单,不需要额外的混合程序。与磁性载体相比,该技术将筛选和分离集成为一步,大大缩短了操作时间。该技术适用于复杂混合物中酶抑制剂的快速筛选,而且样品消耗量少,节省了试剂成本,可以实现酶抑制剂的快速分离。2.1.2 硅酸铝纳米管 硅酸铝纳米管(halloysite nanotubes,HNTs)是一种天然存在的硅酸盐纳米管,由于其优异的物理特性,引起了人们越来越多的兴趣。HNTs的内径为20~30 nm,外径为30~50 nm,长度为1~2 µm,为药物、酶和杀菌剂的储存提供了理想的纳米级包埋系统。更重要的是,HNTs的外表面主要由O-Si-O基团组成,内表面由Al2O3组成,为酶提供了更多的选择性结合位点,从而减少了配体在HNTs上的非特异性吸附[59]。因此,有研究者将HNTs作为一种新的酶固定载体材料用于酶抑制剂的筛选。Wang等[59]通过静电吸附作用将脂肪酶固定到羟基纳米管上用于厚朴中脂肪酶抑制剂的筛选,发现厚朴三酚和厚朴醛B 2种化合物对脂肪酶抑制活性较好。HNTs的内外表面为酶提供了更多的选择性结合位点,降低了非特异性吸附,但其合成较为复杂,收率较低,因此应用有限。2.1.3 多孔二氧化硅 多孔二氧化硅材料具有表面张力低、粘温系数小、压缩性高、气体渗透性高等基本性质,同时还具有耐高温和低温、电气绝缘、耐氧化稳定性、耐候性、难燃、耐腐蚀、无毒无味以及生理惰性等特性[60]。Hou等[61]首先将α-Glu结合到脂质体囊泡中,然后采用反蒸发法将其负载到多孔二氧化硅表面,制备成受体脂质体生物膜色谱柱,用于五味子提取物的α-Glu抑制剂筛选,并通过体外实验进一步证实了五味子苷的降糖作用。2.2 有机载体材料2.2.1 中空纤维 中空纤维是一种具有孔径和内腔的有机聚合物,具有比表面积大、生物材料和有机溶剂消耗低,且设备便宜、用于中空纤维制备的材料来源丰富,是酶、细胞、脂质体等生物材料的理想载体,已被应用于酶固定化中。首先,对中空纤维进行活化。然后,将酶与已活化的中空纤维孵育使酶被吸附在中空纤维上。最后,将待测物与中空纤维固定化酶孵育,筛选待测物中潜在酶抑制剂。Zhao等[62]提出了一种基于吸附中空纤维固定化酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)的方法,从葛根提取物中筛选潜在的TYR抑制剂。通过液相色谱-质谱分析,成功地检测出了7种潜在活性化合物,并进一步结合体外实验,发现葛根素、葛根素-6-O-木糖苷、葛根素和阿片苷具有良好的TYR抑制活性。中空纤维因其具有孔径、内腔及比表面积大等优点,为酶提供了充分的附着空间,但由于其清洗较为困难,导致重复利用率低。2.2.2 生物传感器 生物传感器是一种对生物物质敏感并可将其浓度转换为电信号进行检测的仪器。丝网印刷电极因其具有批量生产、低成本、高重现性、小尺寸等特点而被广泛应用于分析领域。所谓酶生物传感器法,是将酶固定在经过修饰的丝网印刷电极上,当与抑制剂接触时会发生电信号变化,通过检测电信号的变化,达到分析检测的目的。Elharrad等[63]为筛选药用植物中潜在的XOD抑制剂,研制了一种简便、灵敏的安培生物传感器,并用于测定多种药用植物对黄嘌呤氧化酶的抑制率,发现留兰香和马齿苋2种植物对黄嘌呤氧化酶抑制活性较高。以普鲁士蓝修饰丝网印刷电极表面,极大降低了生物传感器的检测电位,使该装置具有较高的选择性。该传感器具有结构简单、选择性好、成本低、稳定性好、结果快速等优点。2.2.3 纸 自2007年Whiteside研究小组首次提出微流体装置概念以来,纸作为一种新的载体材料,以其良好的生物相容性、大的比表面积、易于修饰、价格低廉等优点,在环境监测、化学检测、生物医学诊断等领域具有广阔的应用前景[64]。(1)滤纸:三维打印技术是利用一种纸分析仪器将纸张制作成为一种特殊的微流体装置,该装置成本低,具有较高的比表面积,易于结合分子吸附蛋白质。使用过的纸张设备可以很容易地通过燃烧来处理,可减少实验消耗品造成的污染。Guo等[65]将三维打印技术用于酶抑制剂的筛选,首先,用3D印刷的聚己内酯对滤纸进行改性,形成疏水区。然后,对滤纸进行准确切割,得到既具有亲水性又具有疏水性的改性纸。接下来,用壳聚糖对亲水区进行改性。最后,将α-Glu固定在亲水区,制备出具有独特微流体结构的三维打印技术微装置,并成功地将该方法用于筛选植物提取物中具有α-Glu抑制活性的物质,发现绿原酸、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸、异槲皮素和槲皮素4种化合物对α-Glu的抑制活性较好。该方法结合一些便携式探测器,如手机和照相机,可以获得定性和定量的结果。因此,很容易判断酶在纸上的固定化效果。(2)纤维素滤纸:纤维素滤纸(cellulose filter paper,CFP)具有成本低、来源广、表面积大、生物相容性好、表面羟基含量高等优点,被选为新型酶固定化载体,而且CFP可以快速从酶反应混合物中分离并终止反应,从而缩短了操作时间,简化了其他载体(如纳米材料和磁性纳米颗粒)所需的分离过程。Li等[66]以纤维素滤纸为载体,对α-Glu进行固定化。利用多巴胺的自聚-粘附行为,通过希夫碱反应和迈克尔加成反应,将聚多巴胺复合层包覆α-Glu与改性后的CFP共价结合形成固定化酶(CFP/DOPA/α-Glu)。用CFP/DOPA/α-Glu筛选11种中药中的α-Glu抑制剂,发现诃子对α-Glu的抑制作用最强。Zhao等[67]以CFP为载体,以壳聚糖为物理包覆剂引入氨基基团,然后以戊二醛为交联剂,通过希夫碱反应,将AchE与氨基功能化的CFP共价键合进行固定化酶。最后,将CFP固定化AchE应用于17种中药的抑制剂筛选。2.2.4 金属-有机骨架 金属-有机骨架(metal- organic framework,MOFs)为一种杂化多孔材料,由有机连接体和金属节点通过强的化学键组装而成。MOFs具有可调节孔径、大比表面积和热稳定性等优点。有研究表明,酶被固定在MOFs上后,其在可重用性、催化活性和稳定性方面的性能都有了很大的提高。Chen等[68]首先将ZrCl4和氨基对苯二甲酸溶于N,N-二甲基甲酰胺溶液中进行超声,然后分别加入HCl和HAc,得到混合物。随后,将混合物转移到不锈钢聚四氟乙烯内衬的高压釜中密封加热,反应混合物在空气中冷却至室温,然后离心。沉淀物用新鲜N,N-二甲基甲酰胺和无水乙醇洗净,后减压干燥,合成了金属有机骨架UiO-66-NH2。UiO-66-NH2通过沉淀交联固定化猪胰脂肪酶(porcine pancreatic lipase,PPL),得到的PPL@MOF具有较高的PPL载量和相对活力恢复率,并将PPL@MOF复合物用于筛选夏枯草脂肪酶抑制剂,发现了13种潜在的脂肪酶抑制剂。与磁珠、纳米粒子相比,MOFs材料酶固定量大、相对活力恢复率高。2.2.5 酶微柱 有研究者采用酶微柱法用于酶抑制剂的筛选,该方法属于固相萃取技术,操作简单,可与高效液相色谱耦合,实现了在线筛选,提高了酶抑制剂的筛选和分析效率。首先将硅胶分散在乙醇中,加入3-氨基丙基三乙氧基硅烷形成氨基功能化硅胶,然后将氨基功能化的硅胶与酶液混合,使酶固定在硅胶表面,洗去未结合酶,最后将酶固定化硅胶填入不锈钢微柱中形成酶微柱。Peng等[69]运用该方法成功的从金银花中筛选和鉴定XOD抑制剂。该方法与高效液相色谱的在线耦合提高了筛选和分析效率。与传统的与二维色谱耦合相比,该方法为直接与HPLC耦合,缩短了分析检测时间。3 总结与展望中药含有的化学成分复杂、种类繁多、作用机制比较复杂,一直是获取活性成分或者先导化合物的重要来源。以酶为靶标进行药物筛选是发现和寻找新药的重要环节之一。随着固定化酶技术的发展,研究者将固定化酶技术与中药酶抑制剂的筛选相结合,并通过高效液相色谱-质谱联用技术进行鉴定,筛选得到很多具有酶抑制活性的化合物,在一定程度上明确了中药发挥作用的活性成分及其作用机制。本文以不同载体材料为分类,综述了固定化酶技术在中药酶抑制剂筛选中的应用。磁珠是最常用的磁性载体材料,该类材料利用磁力吸引可使固定化酶配体配合物快速从体系中分离,且固定化方法简单,而且使用后的磁珠可以回收利用,能有效减少人力物力的投入。非磁性载体材料主要以石英毛细管应用最为广泛。此外,还有中空纤维、纳米管、生物传感器等材料用于筛选中药中的酶抑制剂,丰富了固定酶的载体材料。固定化酶技术在酶抑制剂筛选上的应用前景十分广泛,不仅节省了人力物力而且提高了新药研发的效率。目前,固定化酶技术仍然存在一些问题,如酶与载体材料的结合率较低、固定化酶的活力也会有所下降等。但相信随着科学技术的不断发展及酶抑制剂研究的不断深入,固定化酶技术会成为酶抑制剂筛选最有前景的方法之一。利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突
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    仪器信息网讯 2010年8月20-22日,由国家自然科学基金委员会化学科学部主办,北京大学、清华大学和中国科学院化学研究所共同承办的“第三届全国生命分析化学学术报告与研讨会”在北京大学召开。  大会同期举办了“生物纳米技术”系列报告会,300余人参加了此会。会议由厦门大学陈曦教授、郑州大学冶保献教授、中国科学院化学研究所毛兰群研究员和北京大学黄岩谊研究员共同主持,16位来自科研院所和高校的专家学者做了精彩的报告。部分报告内容摘录如下:  福州大学 池毓务教授  低毒性纳米电致化学发光体及共反应物的研究  池毓务教授的课题组对低毒性纳米电致化学发光体和纳米共反应物进行了一些研究,从中发现了环境友好、生物低毒性、容易标记、具有良好电致化学发光活性的碳量子点(CODs)发光体和SnO纳米颗粒,详细研究了相关纳米材料的制备方法、它们各自组成的电致发光电致体系、电致化学发光性能、及其反应机理,并对它们的分析应用前景进行了评价。  复旦大学 卢建忠教授  基于金纳米微粒的化学发光免疫分析和特定序列DNA分析  免疫分析和特定序列DNA分析新技术的构建多年来一直吸引着国内外学者们的热情,检测方法涵盖了电化学、色谱、质谱、比色、荧光、同位素和化学发光法(CL)等。卢建忠教授课题组以金纳米颗粒为标记物,采用CL分析法,发展了一系列基于金纳米颗粒的CL免疫分析和特定序列DNA分析法。  哈尔滨工业大学 刘绍琴教授  自组装膜纳米结构薄膜的光学性质:从器件到传感器  刘绍琴教授研究小组采用层层自组装技术构筑基于量子点的生物传感系统:(1)将具有可逆光致变色性能的多金属氧酸盐Na-POMs与具有荧光性能的CdSs@CdS量子点有序组装在玻璃、石英或硅基底表面,成功构建了具有可逆光控荧光开关功能的纳米复合薄膜;(2)将量子点与酶进行有序组装,利用量子点光学特性与酶的催化活性和特异性相结合,构建了可直接用于检测血清样品中葡萄糖以及果蔬中有机磷农药残留的光学和光电生物传感器。  华东师范大学 施国跃教授  基于室温离子液体/纳米传感器的研究及其对大鼠脑渗析液中谷氨酸的实时在线检测  施国跃教授课题组以功能化的室温离子液体[C3(OH)2][BF4]为模板,采用原位电沉积的方法,在玻碳电极表面制备了平均粒径为2.5nm的Au/Pt合金纳米粒子并构筑了GlutaOX-[C3(OH)2 min][ BF4]-Au/Pt-Nafion生物传感器。结合微渗析在线体系,对大鼠纹状体内谷氨酸的含量进行了实时、在线、连续的测定。  西南大学 黄承志教授  长距离共振能量转移及其分析化学  黄承志教授在报告中首先介绍了长距离共振能量转移(LrRET)的研究背景及其基础理论,着重介绍了LrRET中供体-受体对的构建及其分析应用。他在报告中对LRET的研究进行了展望:(1)新材料(不同材质、大小、形状的供体和受体)的合成及组装技术将会进一步拓展LrRET理论;(2)LrRET对生物大分子的检测,特别是检测距离在10nm以上的生物分子相互作用中将会有广阔的应用前景;(3)LrRET将会在细胞和活体成像中得到广泛的应用;(4)在大量的实验基础上提出LrRET的机制。  东南大学 钱卫平教授  基于局域表面等离子体共振的新型纳米探针构建及其生物传感器应用研究  钱卫平教授研究了电子传递介质的金纳米壳生长过程中局部表面等离子体共振(LSPR)谱演变规律,构建了一种用于LSPR生物传感快速检测生物催化反应和抗氧化物质的抗氧化能力等的新型纳米探针,探索了利用LSPR谱变化检测生物体系中有重要生理意义的酶的活性和酶催化反应的底物和产物水平以及抗氧化物质的抗氧化能力等。  吉林大学 宋大千教授  金磁纳米粒子探针在SPR传感器中的应用  宋大千教授首先介绍了SPR技术的检测原理、仪器结构,然后介绍了金纳米粒子和磁纳米粒子在SPR中的应用和优缺点。他的课题组研究发现:通过控制纳米粒子的尺寸和组成,对其化学和物理性质进行调节,金磁纳米粒子同时具备了金纳米粒子和磁纳米粒子的优点,与其单组分金属纳米粒子相比,具有独特的光学、催化和电子学性质。  此外,在本次“生物纳米技术”报告会上作报告的还有:(排名不分先后)姓名职称单位报告题目蒋兴宇研究员中国科学院纳米研究中心微流控技术在生化分析研究中的应用 刘松琴教授东南大学自由基聚合反应在生物传感器中的应用李正平教授河北大学利用恒温指数扩增反应高灵敏度检测microRNA邱建丁教授南昌大学纳米金/聚多巴胺/四氧化三铁/石墨烯复合纳米材料制备及其免疫传感器研究汪莉教授江西师范大学普鲁士蓝-壳聚糖/乙酰胆碱酯酶修饰玻碳电极检测西维因的电化学研究苏星光教授吉林大学磁性荧光编码微球用于马病毒的多元免疫分析与分离刘继峰教授聊城大学核酸碱基自组装膜表面沉积铂电催化剂以及在H2O2和CH3OH电化学中的应用毕赛研究生青岛科技大学基于细胞适体和限制性内切酶循环放大化学发光检测肿瘤细胞的研究朱玲艳研究生青岛大学电解胶束溶液法制备聚吖啶橙/石墨烯修饰电极及其应用
  • 助战发热门诊!迪澳生物推出1小时结核病核酸快速应急检测系统
    国务院政策吹风会强化发热门诊建设,强化传染病检测能力2020年7月28日上午10时,国务院新闻办公室举行国务院政策例行吹风会。在谈及下一步将采取哪些措施补齐我国公共卫生防控和救治基础设施方面存在一些短板和漏洞时,国家发展和改革委员会社会司司长欧晓理表示:党中央、国务院高度重视,专门作出部署,国家发改委、国家卫健委和中医药局积极贯彻落实,我们在很短的时间里就研究制定了公共卫生防控救治能力建设方案。在未来一段时间,重点通过加强相关医疗卫生机构建设,强化七项能力,完善三个保障。在七项能力建设中,针对发热门诊及传染病检测,提出了以下重点:01 要强化发热门诊的接诊能力,所有二级以上综合医院要重点落实“三区两通道”要求,合理布局诊室、留观室、候诊区,扩大等候间距,配齐筛查所需的设施设备。 02 强化实验室的检测能力,新增一批达到P3水平的实验室,填补地市级P2实验室空白点,提升重大传染病检测一锤定音的能力。03 强化传染病的检测能力,所有承担收治任务的医院都要具备已知传染病的常规检测能力,同时也要充分发挥科研机构、企业等第三方实验室的作用。北京卫健委《通知》:加快发热门诊实验室及相关设备配置,发挥其在传染病防控中的探头作用7月3日,为了进一步完善传染病防控体系建设,提升传染病防控能力,切实发挥发热门诊在传染病防控中的探头作用,北京市卫健委印发了《关于加快推进我市医疗机构发热门诊建设改造有关工作的通知》。《通知》对发热门诊的功能需求,以及发热门诊实验室的建设标准和相关仪器设备的配置进行了明确的说明:功能需求:承担发热患者的筛查、诊断、治疗,对筛查出的传染病患者采取隔离救治措施,实现对传染病的早发现、早报告、早隔离、早治疗。推进建设工作:各级医疗机构需设置发热门诊的,应参照《北京市发热门诊设置指南(2020版)》和《医疗机构发展门诊临床实验室能力建设专家共识(2020版)》对发热门诊进行改造或建设,最大程度保证检查治疗在发热门诊内完成,避免与普通门诊动线、病区交叉。发热门诊临床试验开展的检验项目:1.临床血液/体液应开展项目:全血细胞计数、尿液干化学分析、粪便常规检查。建议开展项目:凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、纤维蛋白(原)降解产物、D-二聚体、抗凝血酶、ABD血型鉴定(正定型和反定型)、RhD血型鉴定、尿有形成分分析、粪便隐血试验、尿人绒毛膜促性腺激素试验等。2.临床生化应开展项目:钾、钠、氯、钙、碳酸氢盐/总二氧化碳、血糖、肌酐、尿素、尿酸、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰基转移酶、总蛋白、白蛋白等。建议开展项目:乳酸、血气分析、胆碱酯酶、脂肪酶、淀粉酶、糖化白蛋白、糖化血红蛋白A、微量白蛋白测定等。3.临床免疫/血清学应开展项目:特定流行性传染病抗原和/或抗体、降钙素原、C-反应蛋白。建议开展项目:乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、人免疫缺陷病毒抗体、梅毒螺旋体、人绒毛膜促性腺激素、孕酮、血清淀粉样蛋白A、白细胞介素-6、淋巴细胞亚群等。4.临床分子生物学应开展项目:特定流行性传染病病原体核酸检测。5.临床微生物学建议开展项目:直接涂片革兰染色镜检、无菌体液细菌培养、血液或相关体液培养、便培养等。检测仪器及辅助设备实验室应选择适用于发热门诊检验工作需求的检测设备。仪器的选型原则:小型化、检测速度快、一机多能。推荐使用闭盖穿刺的仪器设备和全自动检测设备。标准配置:1)血液分析仪(闭盖穿刺);2)全自动尿液分析仪;3)全自动生化分析仪(湿式或干式);4)全自动免疫分析仪;5)基因扩增仪;6)生物安全型离心机(如带有密闭盖或密封桶);7)显微镜;8)医用冰箱(冷藏、冷冻)。建议配置:1)尿沉渣分析仪;2)全自动粪便分析仪;3)全自动血型分析仪;4)全自动血气分析仪;5)全自动凝血分析仪;6)自动核酸提取仪;7)流式细胞分析仪;8)全自动核酸分析仪;9)血培养仪;10)细菌鉴定仪等。物资储备清单常规检测试剂盒传染性病原体检测相关的试剂;耗材(病毒采样管、带滤芯的吸头等);消毒用品(含氯消毒剂,75%乙醇,洗手液等);个体防护装备(医用外科口罩,医用防护口罩,防护服,防水隔离衣,鞋套/靴套,手套,护目镜/面屏等);意外事故处理箱,样本转运箱,急救箱,医疗废弃物转运箱等。助战发热门诊迪澳生物推出结核病核酸快速应急检测系统针对我国重大传染病结核病的防控,迪澳生物推出了针对发热门诊实验室应用的快速应急检测系统,该系统由结核分枝杆菌复合群核酸检测试剂和恒温核酸扩增荧光检测分析仪(Deaou-16P)组成,因其“安全、准确、快速、便携、联网”,被纳入国家结核病参比实验室的推荐检测方法。该技术从2015年国家卫计委疾控局推荐开展以来,已经服务于全国多个省市的结核病防控工作,并在疫情应急防控中也得到了很好的应用。其主要特点如下:01 安全:专用收集管全封闭提取痰液样本,降低气溶胶感染风险。02 准确:采用IMSA恒温扩增技术,灵敏度高;对结核分支杆菌复合群特异性的核酸片段设计了6条引物,覆盖7个区域,对靶区进行特异性扩增,对于结核诊断的特异性可达95%以上。03 快速:操作便捷、耗时短,1~16个样本/批,1个小时即可出报告。04 便携:仪器轻巧,携带方便,可用于结核病野外应急诊断。05 联网:自动上传数据,无缝接入医院的 LIS、HIS 系统。应急套装:设备展示:
  • Think-lab祝贺全球17年来首款阿尔兹海默症新药获批上市
    第二届中国国际进口博览会(CIIE)开幕前夕,11月2日,国家药品监督管理局批准了上海绿谷制药有限公司治疗阿尔兹海默症新药上市申请,认为该药可用于轻度至中度阿尔兹海默症,改善患者的认知功能。上海市政府、中科院于11月3日在上海举行的新闻发布会上披露了这一药物的研发过程、上市进展等关键信息。 阿尔兹海默症,也就是我们俗称的老年痴呆症,是一种随衰老发生的神经退行性脑部疾病。公开资料显示,阿尔兹海默症是继心脑血管疾病、恶性肿瘤之后,老年人致残、致死的第三大疾病。目前全球有大约5000万阿尔兹海默症患者,其中中国就有超过1000万人患有这种疾病,是患者数量最多的国家。发现这一病症100多年来,全球用于临床治疗阿尔兹海默病的药物只有5款。从2002年乙酰胆碱酯酶抑制剂上市以来,全球各大制药公司先后投入了近6000亿美元,用于研发针对性的药物,但是到目前为止,320多种研发中的药物,在临床试验期间全军覆没。药物的研发难度之大,让不少国际医药巨头望而却步。全球17年来首款阿尔兹海默症药物的诞生,为全球患者带来一个福音。 Think-lab超纯水全国重点用户上海绿谷制药有限公司将负责新药的生产和销售,目前所有准备已经就绪,新药最快年内投放到全国市场。绿谷制药有限公司董事长吕松涛表示,新药的申报过程,得到了上海市和国家相关部门的高度关注。 Think-lab作为目前市场上,唯一一家专注在实验室纯水/超纯水领域的进口品牌。 提供从实验室小型纯水/超纯水机器到实验室大型中央供水系统的整体解决方案。全部产品为整机德国原装进口。 Think-lab将继续一如既往的为更多科学家提供更好的产品和服务,助力科学家取得更大的成功!
  • 辉瑞宣布关闭阿尔兹海默症和帕金森新药开发
    p style="text-align: center "img title="001.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201801/insimg/ba58cbc7-738c-46b4-a9fb-a3a35e8b2926.jpg"//pp  根据《2015年世界阿尔茨海默病报告》报道,全球约有4680万AD患者,预计每20年患病人数将翻一倍,到2030年将达到7470万人,2050年更将突破1.3亿人。/pp  但到目前位置,自人类发现阿尔茨海默病以来100多年里,我们并未真正的解决阿尔茨海默病的治疗问题,乃至重大进展。/pp  目前临床使用的药物,主要为缓解认知功能障碍和精神异常,包括胆碱酯酶抑制剂、兴奋性氨基酸受体拮抗剂、中药干预、他汀类药物、抗精神病药、抗抑郁药、抗焦虑及镇静催眠药等,但大都是治标不治本,虽能起到一定的缓解作用,但最终无法控制疾病的恶化。/pp  2017年10月《自然药物发现》曾发表了一篇截至2016年失败和在研阿尔茨海默症药物研发资金去向的分析文章。文章把AD领域里59个终止项目(37个有足够公开信息用于这个分析)、88个在研项目(61个有足够公开信息)、和5个上市药物的作用机理分成8大类,然后根据各类机理招募病人数目以及各期临床单个病人消耗计算研发总投入。作者发现已经失败的项目主要集中在粉状蛋白通路、Ta蛋白、神经免疫和神经传递这几个大方向。而在研药物主要集中在粉状蛋白和Tau。有36%的项目属于机理不清类别,而胞饮、自噬等机理几乎没有临床在研项目。/pp  但众所周知,其实到目前为止,我们并未真正完全弄明白阿尔茨海默病的发病机理。目前开发的治疗手段大都基于以上各种假说,因此一定程度上言,失败再所难免。/pp  2017年2月,美国默克宣布停止开发β淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)抑制剂verubecestat治疗轻度到中度阿尔茨海默病的二/三期临床试验,原因是中期分析显示“不可能有积极的临床获益”。不过Verubecestat用于早期阿尔茨海默病的3期临床试验仍将继续,预计在2019年2月公布数据。/pp  2017年9月,美国Axovant公司宣布其开发的intepirdine在治疗轻度到中度阿尔茨海默病的3期临床试验中关于认知能力和日常生活能力的两项主要疗效终点都没有达到。不过,intepirdine仍将继续开展用于路易体认知症的2期临床试验。/pp style="text-align: center "img title="002.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201801/insimg/e31dcfbc-3631-4107-80b6-ad746aa1e60a.jpg"//pp style="text-align: center "img title="003.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201801/insimg/f50337c0-5016-44da-8a1b-e4bdf9be3e58.jpg"//pp  总之,虽然阿尔兹海默症药物研发前路波折,但空白就是巨大的蓝海,击中靶标则意味着巨大的回报。/p
  • 煤中碳氢氮含量检测标准方法比对
    目前,市场上关于煤中煤中碳氢氮含量检测的标准方法,主要采用《GBT476-2008 煤中碳和氢的测定方法》和《GBT30733---2014煤中碳氢氮的测定仪器法》,二者分别有何优劣,今天就让小编来给大家做一个全面的比对。1.测试原理《GBT476-2008 煤中碳和氢的测定方法》:采用俗称的二节炉或三节炉,通过吸收剂将煤中碳元素燃烧产生的二氧化碳吸收、氢元素燃烧产生的水蒸气吸收,由吸收剂的增量来确定煤中碳元素的含量。《GBT30733---2014 煤中碳氢氮的测定仪器法》:采用红外光谱法和热导法,煤样完全燃烧后,煤中碳元素转化为二氧化碳、氢元素转化为水蒸气、氮元素转化为氮氧化物,燃烧后的气体根据朗伯-比尔定律(不同气体在红外区有不同的吸收波段,而在特定波段,气体吸收红外光强与其浓度成一定的函数关系),计算得到被测煤样的碳氢元素含量。取一定量的气体进行还原后,进入热导池测试得到氮元素含量。2.自动化程度《GBT476-2008 煤中碳和氢的测定方法》:仪器主要包括净化系统、燃烧系统、吸收系统三大部分,每个系统均需在使用前填充试剂或其他材料,操作繁琐,若试剂或材料填充不好,将直接影响测试结果。测试结束后,需仔细、小心进行U型吸收管表面的干燥、擦拭及称量操作,稍有不慎,则会导致测试结果异常。从空白样测试(空白试验不成功则无法进行测试样的测定)、气体收集、冷却、称量到计算均需人工操作,过程繁琐、难度大,且测试结果的准确度无法保证。《GBT30733---2014 煤中碳氢氮的测定仪器法》:每次测试前开启计算机及仪器,点击升温后仪器自动恒温、控温,操作人员只需将当天需测试的所有煤样一次性称量好后放入放样盘即可(预留空白样测试孔位),录入空白样及测试样信息后,点击开始实验,仪器将自动完成所有样品的测试。3.主要试剂及材料《GBT476-2008 煤中碳和氢的测定方法》:铬酸铅(需用蒸馏水调成糊状,挤压成型,放入高温炉中,在850℃下灼烧2h,取出冷却备用)、银丝卷、高锰酸银、二氧化锰、无水高氯酸镁、铜丝卷、氧化铜、氧气、三氧化钨、碱石棉、真空硅脂、硫酸等。三节炉:需用铬酸铅和银丝卷消除硫和氯对碳测定的影响;二节炉:需用高锰酸银热解产物消除硫和氯对碳测定的影响;三节炉/二节炉:需用粒状二氧化锰消除氮对碳的测定的影响。《GBT30733---2014 煤中碳氢氮的测定仪器法》:氧气、氮气、氦气、氧化钙、无水高氯酸镁、碱石棉、线状铜、铜线、氮催化剂。4.测试时间《GBT476-2008 煤中碳和氢的测定方法》: 约30min/个《GBT30733---2014 煤中碳氢氮的测定仪器法》:约5min/个5.测试示意图《GBT476-2008 煤中碳和氢的测定方法》: 三节炉和二节炉碳氢测定示意图《GBT30733---2014 煤中碳氢氮的测定仪器法》:三德科技SDCHN536碳氢氮元素分析仪测试气路示意图结论《GBT30733---2014煤中碳氢氮的测定仪器法》与《GBT476-2008 煤中碳和氢的测定方法》相比,具备以下显著优势:01自动化程度高,操作步骤简单;02所需试剂及材料种类少;03测试速度快。《GBT30733---2014煤中碳氢氮的测定仪器法》是煤中碳元素测定的优选方法。
  • 例行快速检测 检不了那么多
    海南豇豆事件带给产业的影响,并没有完全褪去。“豇豆不能卖,少找麻烦。”近日,南方农村报记者走访广州江南果蔬批发市场,难觅其踪迹,俊来蔬菜档口老板甩下一句话就忙着批发海南辣椒、茄瓜。  即使海南承诺决不让问题豇豆出岛,仍难提振市场信心,该事件让消费者开始不信任蔬菜农药残留检测。为何豇豆在合肥、杭州、广州、深圳等11城市例行检测均合格,但在武汉下禁令后,多地又纷纷查出违禁高毒农药成分?目前推行的蔬菜农药残留检测方法还存在哪些缺陷?  “不得检出”难以做到  “不使用农药,蔬菜供应量会减少50%,而用农药就会有残留,甚至超标。”近日,在南方都市报与广东科学中心主办的小谷围科学讲坛上,农业部蔬菜品质监督检验测试中心(广州)副主任王富华认为,虽然查出海南豇豆含有要求在蔬菜上“不得检出”的违禁高毒农药成分,但不能称之为“毒”豇豆,只能说是不合格或农残超标蔬菜。  王富华解释,从目前多地的检测结果看,海南豇豆水胺硫磷最高含量是0.71毫克/千克,而比其毒性更高的甲胺磷,美国规定蔬菜中的最高残留限量值是1毫克/千克,“可见操作违反我国相关法规,但是不会威胁到人体的健康。”  也正是因为水胺硫磷、克百威、氧化乐果等禁限高毒农药在蔬菜中残留量不高,才能屡次逃过市场例行检测,菜农才敢冒险多年使用。同时也反映出,当前市面上推行的蔬菜农残快速检测方法对“堵截”禁限高毒农药,可谓形同虚设。  “不能否认农残速测法,在保障蔬菜质量安全上至少阻止了中毒事件发生。”王富华表示,目前我国的农残检测主要有三种方法,一是农残速测法即酶抑制法,利用部分农药抑制生物体内胆碱酯酶的活性来检测的方法,只限于检测蔬菜和水果中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留 二是酶联免疫法,以抗原与抗体的特异性、可逆性结合反应为基础,但受农药种类繁多、抗体制备难度大,应用并不广泛 三是色谱检测法,只要有农药标样,就可以精确检测出其含量。  “只有有机磷(水胺硫磷、氧化乐果属此类)或氨基甲酸酯类(克百威属此类)农药残留量达到1毫克/千克左右,速测法才能查出。”王富华说,蔬菜农残检测一般操作是先用速测仪检测,若发现农药超标,再用色谱检测法检出具体种类和残留量。  海南豇豆能逃过例行检测的原因也在于此。武汉、广州等地只是专门用色谱检测法进行定量检测,才查出了违禁高毒农药具体品种和数量。实际上,在卫生部制定的《食品中农药最大残留限量》(GB2763-2005)标准中,有关部分禁限高毒农药在蔬菜中“不得检出”的规定,用目前推行的速测法和检测程序是难以做到的。  速测只检两类农药  记者了解到,色谱检测设备一般需四五十万至上百万元,检测一个样品成本在2000元左右,而且技术要求高,样本提取和净化步骤等前处理比较费时 但市场上一台速测仪加配套设备不到1万元,从取样到检测只需10-20分钟,成本在2元左右,技术水平要求也不高,因此在政府相关部门、生产基地、农贸市场、超市等领域广泛使用,卫生部为此制定了《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测》(GB/T5009.199-2003)标准。  “另外,基于农户分散种植现状,目前我国例行检测不可能采用农残定量检测。”王富华表示,并不是农残检测技术落后于发达国家,美国以农场集中种植为主,蔬菜上市之前即可检测,所以能推广定量检测。  种种原因致使我国只能普遍进行农残速测,但却埋下了隐患。日前海南为将瓜菜100%纳入检测,紧急购进的500台仪器也是农残速测仪。  据查询,农药按化学结构分类,可分为有机磷、有机氯、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、硝基化合物、酚类等20多种,然而农残速测法只针对有机磷和氨基甲酸酯类农药,像早些年大量使用的六六六、DDT等高残留有机氯农药,及当前大量使用的拟除虫菊酯类农药都不在蔬菜例行农残检测范围。  “农残速测法确实有一定缺陷,但目前没有更好的可替代方法。”广东省农科院植保所副所长冯夏认为,我国生产上使用的有机磷和氨基甲酸酯类农药量约占总量70%,禁限用的高毒农药大部分也属于这两类,速测法还是可以基本保障蔬菜质量安全。  海南豇豆事件让农残速测法饱受争议,一位从事农残检测的工作人员坦言,“速测仪没什么太大的用处,因为检测中很多情况下会产生假性结果,再说农药品种根本检测不出,只能测出大概组成。若不是这次各地定量检测出具体的禁用高毒农药品种和含量,不知何时农产品安全隐患才能公之于众。”  国标与生产用药脱节  农产品从田头到餐桌,农药残留问题一直备受关注。2009年4月7月,绿色和平组织发布报告中称,在所选的5种水果样品中检测出17种农药残留,其中7种被认定致癌或有潜在致癌风险,报告一度引发消费者对农残的恐慌。2009年11月,国家卫生部公开回应到,被检出的17种农药,根据国标《食品中农药最大残留量》,均未超过国家标准限量值的规定,没有发现禁限高毒农药。  然而,记者仔细查询相关报告和标准发现,国标《食品中农药最大残留量》存在诸多漏洞。以绿色和平在甜瓜、桃子、油桃、樱桃上检出的农药吡虫啉为例,按我国农药登记管理,吡虫啉没有在甜瓜、樱桃上登记,是不允许在这些作物上使用的 同时,近年来吡虫啉作为禁用高毒农药替代品大力推广,目前登记产品近950个,但在《食品中农药最大残留量》中,根本查不到吡虫啉的最大残留量规定。至于卫生部给出的“未超过国家标准限量值”的结论是否是参考其他标准得出,便不得而知。  在该国标中没有出现的还有常用农药阿维菌素、甲维盐等。据了解,国标《食品中农药最大残留量》总共纳入136种农药,规定了52种农药在蔬菜上的最大残留限量,其中12种(如倍硫磷、百草枯、辛硫磷等)是包含所有蔬菜种类,其他只是包含部分蔬菜种类。王富华解释,“农药最大残留限量制定是按照农药登记作物来的。”  但在农业生产过程中,使用的农药种类多达500多种,而且农户用药根本不会严格按照登记作物来使用。这直接影响的是,一旦查出某种农药在非登记作物上的残留值,要判断其是否超标,都无据可依。  目前,现行国标凸显出的问题已引起相关部门关注,3月2日国务院办公厅公布《2010年食品安全整顿工作安排》,提出将修订食品中农药残留标准。但业内人士认为,如何使标准不再脱离农户生产用药实际更值得重视。
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