我要做农药残留检测,找不到乙酰胆碱酯酶,可直接用酶片(京蓬生物科研有限公司产的)代替吗?[em63]
与乙酰胆碱酯酶活性位点结合的荧光探针有哪些 ?9-CHLORO-N-METHYLACRIDINIUM IODIDE 这种物质可以做乙酰胆碱酯酶的荧光谈探针不?谢谢!!!
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请问现在检测农药用的快速检测仪器需要用到乙酰胆碱脂酶和丁酰胆碱酯酶二者有什么区别吗,哪个效果更好些?国标上有没有规定必须用哪种酶呢?
我试过好多从小麦中提取胆碱酯酶的方法,但是提取的酶,在用碘化硫代乙酰胆碱(BuTCI)做底物的时候,对农药的敏感性不高;而用靛酚乙酸酯做底物的时候,对农药的敏感性还可以,不知道为什么?如果我要坚持用碘化硫代乙酰胆碱(BuTCI)做底物,从哪些材料里提取会更好?欢迎有相关经验的同仁进行交流探讨!
与乙酰胆碱酯酶活性位点结合的荧光探针有哪些 ?9-CHLORO-N-METHYLACRIDINIUM IODIDE这种物质可否做乙酰胆碱酯酶的荧光探针?它的相关性质有哪些?
农残速测中为什么小麦中提取的胆碱酯酶无法推广应用?胆碱酯酶抑制率法GB/T18630-2002欢迎专业人士发表讨论意见,解析该法的缺点
我要做农药残留检测实验,需要购买乙酰胆碱酯酶,但不知道向谁购买。我找到有进口的,但超出预算,需要改购国内的,谁可以提供点国内有卖这种产品的厂家信息吗? 急!谢谢![em63]
与乙酰胆碱酯酶活性位点结合的荧光探针有哪些 ?谢谢!
哪位前辈能告诉我什么是酶抑制法(乙酰胆碱酯酶)?
藏红T是荧光物质,请问它能否做乙酰胆碱酯酶的荧光探针呢?急用!谢谢好心人的帮忙
最近我从鸭血中提取的胆碱酯酶对乐果、氧化乐果、辛硫磷、对硫磷等含硫农药不敏感,而对呋喃丹、敌敌畏等不含硫农药相当敏感。即使克百威(呋喃丹)与丁硫克百威(好年冬)结构很相似,只是因为丁硫克百威多了硫元素,该酶对丁硫克百威的检出限高了近50倍,想跟高人交流其中的原因!并求能提高酶对含硫农药敏感性的解决办法!
请问有做胆碱和乙酰胆碱传感器的吗?有知道胆碱酯酶和乙酰胆碱酯酶的化学结构的吗?最好有分子结构,给出个图片来比较直观一些。还有就是这些蛋白的性质,它们的圆二色谱数据什么的。谢谢!
农残检测仪的工作原理主要基于酶抑制法和光电比色法。以下是对其工作原理的详细解释: 酶抑制法是一种检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的方法。这两类农药对胆碱酯酶的正常功能有抑制作用。在正常情况下,胆碱酯酶会催化神经传导代谢产物(如乙酰胆碱)的水解过程。然而,当有机磷或氨基甲酸酯类农药存在时,它们会与胆碱酯酶结合,导致酶活性受到抑制,进而减少乙酰胆碱的水解。 农残检测仪利用这一原理,将待检测的农产品样本与特定的酶和底物混合,在一定的条件下反应一段时间后,测定反应液的颜色变化。这种颜色变化与农药对酶的抑制程度成正比。通过光电比色法,仪器可以测量反应液在特定波长下的吸光度,从而计算出农药对酶的抑制率。抑制率越高,说明样本中农药残留量越大。 除了酶抑制法,农残检测仪还可能采用其他检测原理,如免疫分析法、生物传感器法等,这些方法的工作原理略有不同,但都是基于特定的化学反应或生物识别过程来检测农药残留。 农残检测仪通过自动化的操作和数据处理系统,可以快速、准确地得出检测结果。这些仪器通常具有智能操作系统和人性化的操作界面,使得用户能够方便地进行样品检测和数据管理。 总的来说,农残检测仪的工作原理是通过特定的化学反应和信号处理过程,利用农药对特定酶的抑制效应或其他识别机制,来快速、准确地检测农产品中的农药残留量。
有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测方法(酶抑制率法-乙酰胆碱酯酶)可以定性的测定蔬菜水果中的乙烯利吗?
[size=16px][font=宋体]随着我国人民生活水平的提高,市民对餐桌上的安全问题也越来越关注,农药残留、兽药残留更是关注重点,接下来,会针对[font=宋体]目前[/font]农[/font][font=宋体]药残留快检仪器应用展开讨论,希望能抛砖引玉,吸引其他朋友一起分享目前国内外快检市[/font][font=宋体]场发展进程。[/font][font=宋体]关于农药残留快速检测技术的讨论篇(一)[/font][font=宋体]——酶抑制法的影响因素及基本分类[/font][font=Calibri][font=宋体]酶抑制法是是相对成熟的农药残留速测技术原理,适用于有机磷和氨基甲酸酪类农药[/font][/font][font=宋体]。[/font][font=宋体][font=Calibri]一、影响因素[/font][font=Calibri][/font][/font][font=Calibri][font=宋体](1)[/font][/font][font=Calibri][font=宋体]温度:[/font][font=宋体]酶的活性都随着温度的升高,先升后降[/font];[/font][font=Calibri][font=宋体](2)[/font][font=Calibri]PH;[/font][/font][font=Calibri][font=宋体](3)[/font][font=Calibri]反应[/font][font=Calibri]时间;[/font][/font][font=Calibri][font=宋体](4)测试[/font][font=宋体]农药的品种;[/font][/font][font=宋体]二、分类[/font][font=Calibri]∶[/font][font=宋体]1.胆碱酯酶法[/font][font=宋体][font=Calibri]1.1 原理:乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制法的检测原理以乙酰胆碱为底物,在AChB的作用下,乙酰胆碱水解成胆碱和乙酸,胆碱和二硫对硝基苯甲酸(DT[/font][font=宋体]N[/font][font=Calibri]B)产生显色反[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]应,使反应液呈黄色。[/font][/font]1.2、注意事项:[font=Calibri][font=宋体]各种农药因其化学结构和作用不同对[/font]AChE [font=宋体]的抑制能力也不相同:[/font][/font][font=Calibri][font=宋体](1)硫代型有机磷农药;的抑制能力较差,最小检出浓度较高[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri][font=宋体](2)氧化型有机磷农药;的抑制能力较强,[/font][font=宋体]灵敏度较高,最小检出浓度较低[/font][font=Calibri];[/font][/font][font=Calibri][font=宋体](3)辛硫磷类农药:因为含有肟基选择毒力大大增强,最小检出浓度较低[/font][/font][font=宋体];[/font][font=Calibri][font=宋体](4)对氨基甲酸酯类农药:检测灵敏度相对较高。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2、植物酶抑制法[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.1、原理:[/font][/font][font=宋体]利用植物酯酶水解[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]6-[/font][font=宋体]二氯乙酰靛酚,水解产物[font=宋体]靛[/font]蓝色,[/font][font=宋体]根据反应溶液在水解前后颜色的变化,用目测/仪器来判定农药对酶的抑制程度从而判断有机磷或氨基[/font][font=宋体]甲酸酯类农药的残留量。[/font][/size][font=宋体][size=16px]2.2、注意事项:[font=宋体]植物酷酶方法的精确度和灵敏度不及乙酰胆碱酯酶法,乙酰胆碱酯酶法的检出限可至ppb量级(部分)[/font][font=宋体],而植物菌酶法只能在[/font][font=Calibri][/font][font=宋体]ppm[/font][font=宋体]级,[/font][font=宋体]灵敏度相对较低,但[/font][/size][/font][font=宋体][size=16px]是在生产成本[/size][/font][font=宋体][size=16px]上有优势。[/size][/font]
[size=16px][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b]便携式农药残留检测仪的原理是什么[/color][/font]便携式农药残留检测仪的原理是酶抑制率法。它利用有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性,造成神经传导介质的积累影响正常传导,使昆虫中毒。便携式农药残留检测仪通过将特异性抑制胆碱酯酶与样品提取液反应,若胆碱酯酶受到抑制,就表明样品提取液中含有有机磷或氨基甲酸酯农药。此外,便携式农药残留检测仪还具备多个通道检测,可同时检测多个样品,数据会被自动存储,并能利用4G/WIFI方式无线方式将储存数据上传计算机中,方便对数据的分析、统计,有效提高了蔬菜农残检测的工作效率。因此,便携式农药残留检测仪是一种快速、准确、方便的检测仪器,广泛应用于种植基地、批发市场、超市、食肆及相关监管部门等场所,为农产品质量安全筑起安全防线。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/02/202402020940515949_6343_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]
[size=18px] 农产品检测仪检测原理 农产品检测仪的检测原理主要可以归纳为以下几种: 一、光学原理 测量光在物质中的传输特性:农产品检测仪中的光学系统通过测量光在物质中的传输特性来检测农产品中的农药残留。这个过程包括光源照射农产品表面,样品吸收部分光线并反射部分光线。 光电转换:经过透镜聚焦后的光线进入检测器,被检测器转化为电信号。 信号处理:电信号经过处理,由计算机系统转化为数字信号。 结果分析:通过比对和分析这些数字信号,可以得出农产品中农药残留的含量。 二、化学原理 样品前处理:涉及样品分散、去杂、分储等步骤,目的是为后续的化学分析做好准备。 农药提取:将农产品中的化学成分(如农药)提取出来。 蒸发浓缩:将提取得到的溶液浓缩至一定体积,便于后续分析。 色谱分析:依据成分的物理化学特性分离并检测成分。通过色谱分析,可以准确检测出农产品中的农药残留。 三、酶抑制率法 抑制原理:基于有机磷和氨基甲酸酯类农药可以抑制昆虫神经中枢和四周神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性。这种抑制率与农药浓度呈正相关。 反应过程:在正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产生黄色物质。当存在农药残留时,酶的活性受到抑制,导致产生的黄色物质减少。 结果判定:通过测量吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,从而判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留。 四、光电比色法 光电比色法是在一定条件下,通过测量样品中特定物质的吸光度来定量分析其含量。在农药残留检测中,它主要用于检测有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的抑制程度,从而判断农药残留情况。 总结:农产品检测仪的检测原理主要基于光学原理、化学原理和酶抑制率法等多种方法。通过这些方法的综合运用,可以实现对农产品中农药残留的快速、准确检测,为农产品安全提供有力保障。[/size]
根据食品安全国家标准规定,胆碱为婴幼儿奶粉的必需成分,然而市面上很多婴幼儿奶粉经常被发现胆碱含量不符合国家标准![align=center][img=,317,296]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071313225596_2182_960_3.png!w317x296.jpg[/img][/align][align=center]等等.....[/align][align=center]胆碱是什么东西?[/align][align=center][/align] [b]胆碱[/b]是一种有机碱,是卵磷脂的组成成分,也存在于神经鞘磷脂之中。胆碱被称为“记忆因子”,是合成乙酰胆碱的重要原料,能帮助中枢神经传递资讯,是大脑思维、记忆等智力活动的必需物质。因为婴幼儿处于发育期,合成胆碱的能力有限,因此国家规定胆碱为婴幼儿奶粉中的必需成分。[align=center][img=,400,164]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071314026095_9084_960_3.jpg!w900x370.jpg[/img][/align][align=center][b][img=,406,376]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071314354769_1725_960_3.png!w406x376.jpg[/img][/b][/align][align=center][b]胆碱检测知多少?[/b][/align][align=center][b][/b][/align]安谱实验参照食品安全国家标准GB5413.20-2013“婴幼儿食品和乳品中胆碱的测定”开展应用实验,为您提供全套试剂、酶、标品及耗材等相关产品。[b]1.方法原理[img=,560,110]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071315051175_5759_960_3.png!w560x110.jpg[/img]2.样品前处理[/b][align=center][b][img=,433,697]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071315229915_5731_960_3.jpg!w433x697.jpg[/img][/b][/align][b]3.标曲的建立[/b][align=center][b][img=,433,480]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071315447965_8437_960_3.jpg!w433x480.jpg[/img][/b][/align][align=center][img=,556,257]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071316407065_6610_960_3.png!w556x257.jpg[/img][/align][align=center][b]标准曲线[/b][/align][align=center][b][img=,433,350]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071316112752_4406_960_3.jpg!w433x350.jpg[/img][/b][/align][align=center][img=,376,376]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071316579004_6437_960_3.png!w376x376.jpg[/img][/align][align=center][b]别走,下面还有![/b][/align][b]4.市售品牌婴幼儿奶粉中胆碱的含量检测[/b]取A、B、C三品牌婴幼儿奶粉样品前处理滤液,按照标曲建立步骤检测吸光度,并带入标准曲线计算胆碱含量。(注意:A为试样净吸光值,Atot为总吸光值,Aex为滤液吸光值,Abl为试剂吸光值)[align=center][img=,900,710]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071317224645_3917_960_3.png!w900x710.jpg[/img][/align][align=center][img=,529,296]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071318228735_1113_960_3.png!w529x296.jpg[/img][/align][align=center][b]产品信息[/b][/align][align=center][b][img=,688,771]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903071317467768_9259_960_3.png!w688x771.jpg[/img][/b][/align]
农药残留在农业生产中施用农药后一部分农药直接或间接残存于谷物、蔬菜、果品、畜产品、 水产品中以及土壤和水体中的现象;农药残留是农药使用后一个时期内没有被分解而残留于生物体、收获物、土壤、水体、大气中的微量农药原体、有毒 代谢物、 降解物和杂质的总称。农药残留检测仪检测方法分类有:1、试纸法2、酶抑制率法3、酶联免疫法4、薄层色谱法5、光谱分析6、色谱分析最快捷的农药残留检测方法纸片法:CSY-N12便携式农药残留测定仪是根据国标方法---速测卡法(纸片法)而专门设计的仪器。主要用于水果、蔬菜、茶叶、粮食、水及土壤中有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测,特别适用于各级食品安全检测机构现场执法使用,便携式农药残留检测仪还可用于果蔬茶生产基地和农贸批发销售市场现场检测,餐馆、食堂、家庭果蔬加工前的安全速测等。仪器检测原理:采用单片机对温度和时间等参数进行控制,配合生化反应对蔬菜、水果等食品的有机磷和氨基甲酸酯类农药进行半定量检测。生化反应原理:速测卡中的胆碱酯酶(白色药片)可催化靛酚乙酸酯(红色药片)水解为乙酸与靛酚,由于有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的活性有抑制作用,使催化水解后的显色发生改变。因此,根据结果颜色的深浅,即可判断样品中有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留情况。
GB/T 5009.199─2003中华人民共和国国家标准 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测 Rapid determination for organophosphate andcarbamate pesticide residues in vegetables 2003-08-11发布 2004-01-01实施1 范围 本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。 本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。 速测卡法(纸片法) 2 原理 胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。 3 试剂 3.1 固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片(速测卡)。 3.2 pH7.5缓冲溶液:分别取15.0g磷酸氢二钠 [Na2HPO412H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2 PO4 ],用500mL蒸馏水溶解。 4 仪器 4.1 常量天平 4.2 有条件时配备37℃±2℃恒温装置。 5 分析步骤 5.1 整体测定法 5.1.1 选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取5g放入带盖瓶中,加入10mL缓冲溶液,振摇50次,静置2min以上。 5.1.2 取一片速测卡,用白色药片沾取提取液,放置10min以上进行预反应,有条件时在37℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。 5.1.3 将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。 5.1.4 每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。 5.2 表面测定法(粗筛法) 5.2.1 擦去蔬菜表面泥土,滴2滴~3滴缓冲溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。 5.2.2 取一片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。 5.2.3 放置10min以上进行预反应,有条件时在37℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。 5.2.4 将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。 5.2.5 每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。 6 结果判定 结果以酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制(为阳性)、未抑制(为阴性)表示。 与空白对照卡比较,白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果。 对阳性结果的样品,可用其它分析方法进一步确定具体农药品种和含量。 7 附则 7.1 速测卡技术指标 7.1.1 灵敏度指标:速测卡对部分农药的检出限见表1。表1 部分农药的检出限农药名称检出限/(mg/kg)农药名称检出限/(mg/kg)农药名称检出限/(mg/kg)甲胺磷1.7乙酰甲胺磷3.5久效磷2.5对硫磷1.7敌敌畏0.3甲萘威2.5水胺硫磷3.1敌百虫0.3好年冬1.0马拉硫磷2.0乐果1.3呋喃丹0.5氧化乐果2.3 7.1.2 符合率:在检出的30份以上阳性样品中,经[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法验证,阳性结果的符合率应在80%以上。8 说明 8.1 葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法,减少色素的干扰。 8.2 当温度条件低于37℃,酶反应的速度随之放慢,药片加液后放置反应的时间应相对延长,延长时间的确定,应以空白对照卡用手指(体温)捏3min时可以变蓝,即可往下操作。注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。空白对照卡不变色的原因:一是药片表面缓冲溶液加的少、预反应后的药片表面不够湿润,二是温度太低。 8.3 红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为准,3min后的蓝色会逐渐加深,24h后颜色会逐渐退去。酶抑制率法(分光光度法) 9 原理 在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。 10 试剂 10.1 pH8.0缓冲溶液:分别取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾,用1000mL蒸馏水溶解。 10.2 显色剂:分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸氢钠,用20mL缓冲溶液溶解,4℃冰箱中保存。 10.3 底物:取25.0mg硫代乙酰胆碱,加3.0mL蒸馏水溶解,摇匀后置4℃冰箱中保存备用。保存期不超过两周。 10.4 乙酰胆碱酯酶:根据酶的活性情况,用缓冲溶液溶解,3 min的吸光度变化DA0值应控制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用,保存期不超过四天。 10.5 可选用由以上试剂制备的试剂盒。乙酰胆碱酯酶的DA0值应控制在0.3以上。 11 仪器 11.1 分光光度计或相应测定仪。 11.2 常量天平。 11.3 恒温水浴或恒温箱。 12 分析步骤 12.1 样品处理:选取有代表性的蔬菜样品,冲洗掉表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取样品1g,放入烧杯或提取瓶中,加入5mL缓冲溶液,振荡1 min ~2min,倒出提取液,静置3 min ~5min,待用。 12.2 对照溶液测试:先于试管中加入2.5mL缓冲溶液,再加入0.lmL酶液、0.1mL显色剂,摇匀后于37℃放置15min以上(每批样品的控制时间应一致)。加入0.lmL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即放入仪器比色池中,记录反应3 min的吸光度变化值DA0。 12.3 样品溶液测试:先于试管中加入2.5mL样品提取液,其它操作与对照溶液测试相同,记录反应3min的吸光度变化值DAt。 13 结果的表述计算 13.1 结果计算 见式(1)。 抑制率(%)=[ (DA0-DAt)/ DA0]×100…………………………(1) 式中: DA0 ——对照溶液反应3min吸光度的变化值; DAt——样品溶液反应3min吸光度的变化值。 13.2 结果判定 结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在,样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。 对阳性结果的样品,可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。 14 附则 14.1 酶抑制率法技术指标 14.1.1 灵敏度指标:酶抑制率法对部分农药的检出限见表2。 表2 酶抑制率法对部分农药的检出限农药名称检出限/(mg/kg)农药名称检出限/(mg/kg)敌敌畏0.1氧化乐果0.8对硫磷1.0甲基异柳磷5.0辛硫磷0.3灭多威0.1甲胺磷2.0丁硫克百威0.05马拉硫磷4.0敌百虫0.2乐果3.0呋南丹0.0514.1.2 符合率:在检出的抑制率≥50%的30份以上样品中,经[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法验证,阳性结果的符合率应在80%以上。 15 说明 15.1 葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法,减少色素的干扰。 15.2 当温度条件低于37℃,酶反应的速度随之放慢,加入酶液和显色剂后放置反应的时间应相对延长,延长时间的确定,应以胆碱酯酶空白对照测试3min的吸光度变化DA0值在0.3以上,即可往下操作。注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。胆碱酯酶空白对照溶液3min的吸光度变化DA0值<0.3 的原因:一是酶的活性不够,二是温度太低。
植物酯酶检测农残可以达到与动物胆碱酯酶相当的准确度和精密度。近年来备受研究者关注。植物酯酶酶原丰富,取材方便,在农残快速检测中应用前景会更加广阔。因此,研制具有高检测灵敏度和具有高保存性高稳定性的植物酯酶是开展这种技术的基础。 这个论文在广泛筛选植物酶原的基础上,选定敏感性最好的大豆酯酶作为农药快速检测用生物识别元件,并已申请了专利。 本文报道了自制大豆酯酶的保存条件稳定性,保存剂稳定性,温度和 pH 值稳定性,目的在于寻找酶较优的保存条件和保存剂,确定使酶保持稳定的温度和 pH 条件,为该酶的保存方法提供一定的依据。 有需要的版友可以下载附件查看。
RT谢谢!
有没有人做过磷脂酰胆碱的测定啊?本人要检测大豆磷脂里面的磷脂酰胆碱按GB/T 21493-2008方法检测高效液相法,正相Si 60柱子,250mm*4.6mm,5μm流动相:正己烷:异丙醇:1%冰醋酸=8:8:1流速1ml/min,柱温30度,波长205但是走了两个小时对照都没有出峰因为之前很少做正相找不到问题的原因请各位前辈指点一下!万分感谢!
某制剂品种的原料药中含有磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱为其降解产物。磷脂酰胆碱会引起溶血反应,因此要控制制剂中磷脂酰胆碱的限度。药品保质期为两年,根据国家局要求,为了更系统、全面的掌握药物的性质,对储存36个月的样品进行检验。色谱条件:Agilent 1200液相色谱仪;SEXDE 80蒸发光检测器;柱温为40℃;流动相为甲醇-冰醋酸(500:10),用三乙胺调pH值至6.0。色谱柱为TopsilTM(拓谱)Silica 4.6*250mm,5μm(Part Number:Tp5SI425; Serial Number: T11261504 )系统适用性溶液制备:取对照品适量制成含磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰胆碱分别约为0.48mg/ml,0.08mg/ml的混合溶液。精密量取20ml注入液相色谱仪,连续进样5次,记录色谱图,规定磷脂酰胆碱峰与溶血磷脂酰胆碱峰的分离度应大于1.5。溶血磷脂酰胆碱峰面积的相对标准偏差不得大于3.0%。对照液制备:取溶血磷脂酰胆碱对照品约20mg,精密称定,置25ml棕色量瓶中,加异丙醇溶解,并稀释至刻度,作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液3ml,置50ml量瓶中,加异丙醇稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。供试液制备:精密量取样品3ml,置50ml容量瓶中,加异丙醇溶解并定容至刻度,摇匀。即为供试液溶液。测定法:取供试品溶液和对照品溶液各20ml注入液相色谱仪,记录色谱图。标准规定,供试品中溶血磷脂酰胆碱的峰面积不得大于对照品溶液中溶血磷脂酰胆碱的峰面积。系统适用性溶液色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301844_468834_1609327_3.jpg对照色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301844_468835_1609327_3.jpg样品色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301844_468836_1609327_3.jpg结果:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309301845_468837_1609327_3.jpg结论:36月后,溶血磷脂酰胆碱的含量已超标。
砷胆碱标准物质证书中,给出砷胆碱摩尔浓度为0.374umol/g,质量浓度:以砷计为28.0ug/g,以砷胆碱计为91.6ug/g,要配置成砷工作液0.05ug/g,用天平称取还是用吸管吸取,怎样配置
[size=16px] 农药检测仪器如何检测 农药残留检测仪是用来检测农药残留的仪器,主要根据酶抑制法的原理进行检测,具有快速、方便的特点。具体操作步骤如下: 制备样品溶液:按照试剂说明书中的步骤制备样品溶液。 放入比色杯:将样品溶液比色杯放入相应通道,点击样品名称按钮选择【样品名称】,点击检测。注意检测时间与对照液一致。 设置反应时间:点击反应时间设置对应的样品反应时间。 显示检测结果:进度条走完后,显示检测结果。如需打印,点击【打印】按钮,点击打印后,数据会自动保存。 继续测量其他样品并重复步骤2--5。 此外,使用农药残留检测仪时应注意: 仪器检测无故障后方可进行检测操作。放置比色皿时,要注意透光面的方向和光源的方向。 当温度低于37℃时,酶反应速度会相应减慢。加入酶液和色原后,反应时间要相对延长。确定延长时间,应采用胆碱酯酶空白对照试验3分钟。若胆碱酯酶空白对照液吸光度变化ΔA0值在0.3以上,可继续操作。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/01/202401250947304655_6160_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]
农药残留检测仪法可以把食品安全风险监测的关口提前,在蔬菜上市前快速判断出其农药残留是否超标,这样能防止许多农药中毒事件的发生,确保消费者的饮食安全。 检测仪采用酶抑制法,胆碱酯酶对底物分解反应的催化能力与其活性成正相关。而蔬菜中的农药对胆碱酯酶的活性起抑制作用,抑制程度的大小与农药的残留毒性成线性相关。 因此,通过农药残留检测仪测试蔬菜样品与胆碱酯酶作用前后催化反应的速率变化,即可测试胆碱酯酶的活性变化,从而计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷类农药的存在。 取蔬菜2~5g(菜叶类2g,块茎类4g),剪成面积约1cm2大小,放入锥形瓶中,加入磷酸缓冲液10ml,震摇1~2min,然后将提取液到入取样瓶,静置2~3min,用于农药残留检测仪待测。干净的取样瓶中依次取0.1ml酶液、2.5ml缓冲液,混匀,再加入0.1ml显色液,摇匀后放于37℃静置10~15min。在比色皿中加0.1ml底物溶液,再将上述培养后的反应液倒入比色皿中,迅速放入检测仓中第一检测通道,农药残留检测仪进行对照测试,一般1~3min。 在研究用农药残留检测仪分析蔬菜农药残留,该快速检测法的优点是检测时间短、操作简单,可以连续使用,携带方便,相对来说成本不是很高,对于现场的使用也比较合适,该仪器可以作为普通场所的使用推广,另外对于农贸市场、监测站以及蔬菜水果加工企业中的应用都是合适的选择。
本人要检测大豆磷脂里面的磷脂酰胆碱按GB/T 21493-2008方法检测高效液相法,正相Si 60柱子,250mm*4.6mm,5μm流动相:正己烷:异丙醇:1%冰醋酸=8:8:1流速1ml/min,柱温30度,波长205但是走了两个小时对照都没有出峰因为之前很少做正相找不到问题的原因请各位前辈指点一下!万分感谢!
我们是一家经销商,主要做农业系统的仪器,我主要负责仪器安装及培训,就当前遇到的问题与大家讨论一下。现在检测农残方面主要是农业部门,检测方法也多以速测为主,多做初筛来用,接触时间长了就发现很多厂家的仪器标准不一,比如:有的厂家推荐用乙酰胆碱酯酶国标中是乙酰胆碱酯酶,但有的推荐用丁酰胆碱酯酶,查找了一些资料说丁酰胆碱酯酶灵敏度要比乙酰胆碱酯酶高,但是无论是哪种酶,文献上所说的最佳反应条件大概是温度37-40,时间大概10分钟,但是现实当中厂家仪器都推荐在室温下,反应1-3分钟。。。等等问题吧,这些公说公有理婆说婆有理的厂家让人一时摸不着头脑,感觉农残速测领域让人很怀疑他的可靠性。希望大家都各抒己见讨论下。