[font='calibri'][size=13px]什么是中和抗体？如何检测[/size][/font][font='calibri'][size=13px]假病毒[/size][/font][font='calibri'][size=13px]中和抗体？[/size][/font]什么是中和抗体？中和抗体是一类与病毒结合并使病毒失去传染性的抗体。当病毒侵入人体时，浆细胞会产生病毒特异性抗体，但只有少数是中和抗体。中和机制如下：(1)改变病毒表面的构象；(2)与吸附相关的病毒表位结合，阻断其与宿主细胞受体的相互作用；(3)与病毒形成免疫复合物，易于被巨噬细胞清除；(4)当病毒表面抗原与中和抗体结合时会激活补体，从而导致病毒裂解。S蛋白（spike protein）是SARS-CoV-2病毒的主要包膜蛋白，由S1和S2亚基组成的三聚体跨膜糖蛋白，负责识别宿主细胞受体即血管紧张素转换酶2(ACE2)并介导膜融合。S1亚基上的受体结合域(RBD)直接参与宿主受体识别并介导病毒入侵。S蛋白上的受体结合结构域(RBD)，被认为是病毒感染宿主细胞的关键位点和大多数中和抗体的靶标。中和抗体可阻止S1或RBD与ACE2结合，从而防止病毒侵入宿主细胞并最终阻止病毒感染(图1)。因此，S1或RBD的突变可能会导致SARS-CoV-2有较强的传染性。如何检测假病毒中和抗体？中和抗体检测试验包括病毒中和试验、假病毒中和试验和替代病毒中和试验。病毒中和试验中和抗体检测的金标准是病毒中和试验，主要包括空斑减少中和试验和微量中和试验。两种方法都使用定量的活病毒与不同稀释度的等量血清混合，并接种预先准备好的单层细胞。最后，根据空斑形成单位或细胞病变效应来评估中和抗体的效价。由于涉及到活病毒的操作，这些检测只能在生物安全三级实验室进行，极大地限制了空斑减少中和试验和微量中和试验的使用。假病毒中和试验目前，越来越多的实验室使用假病毒中和试验进行中和抗体检测。SARS-CoV-2假病毒以非致病性病毒(如复制缺陷型HIV-1)为载体，将载体病毒的包膜蛋白替换为SARS-CoV-2的S蛋白，并引入检测信号分子，例如GFP和荧光素酶。假病毒利用S蛋白的RBD结构域与ACE2结合，模拟病毒入侵的过程。中和抗体可有效抑制SARS-CoV-2假病毒感染宿主细胞(图2)，并通过信号检测评估中和抗体效价。由于假病毒为一次性感染病毒，不具备自我复制能力，无生物安全危险，所以这种方法可以在生物安全二级实验室进行。替代病毒中和试验替代病毒中和试验是基于竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)的原理，利用重组RBD蛋白与重组ACE2蛋白的结合作用来模拟病毒-细胞相互作用。样品中的中和抗体可有效阻断RBD蛋白与ACE2蛋白的结合。与病毒和假病毒中和试验相比，替代病毒中和试验更安全、更容易执行且耗时更少。中和检测服务信息由北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc.)为您提供，如您想了解更多关于SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike假病毒中和检测服务报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。具体详情可点击：https://cn.sinobiological.com/services/pseudovirus-neutralization-assay-service
[align=center][font='arial'][size=14px]浅谈[/size][/font][font='arial'][size=14px]口蹄疫A型抗体水平检测[/size][/font][font='arial'][size=14px]流程[/size][/font][/align][table][tr][td][font='arial'][size=14px]目标[/size][/font][/td][td][font='arial'][size=14px]监测口蹄疫A型抗体水平及疫苗的保护效力从而制定合理的免疫程序[/size][/font][/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]个人防护装备[/size][/font][/td][td][font='arial'][size=14px]一次性口罩，一次性防护服[/size][/font][font='arial'][size=14px]，一次性丁腈手套，一次性鞋套[/size][/font][/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]操作时间[/size][/font][/td][td][font='arial'][size=14px]免疫口蹄疫疫苗后[/size][/font][font='arial'][size=14px]21-28[/size][/font][font='arial'][size=14px]天[/size][/font][/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]复审[/size][/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]健康安全环境与食品质量安全经理签字[/size][/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]牧场经理签字[/size][/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][font='arial'][size=14px]总经理签字[/size][/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td] [/td][td] [/td][/tr][/table][table][tr][td][font='times new roman'][size=16px]请对照图片检查自己是否按要求佩戴了劳动保护用品[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][align=center][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827218554_5523_6216082_3.jpeg[/img][/align][/td][/tr][/table][font='arial'][size=14px]版本历史[/size][/font][table][tr][td] [/td][td][align=center][font='times new roman']版本[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']生效日期[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']主要变化[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']01[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']02[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']03[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']04[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][/table][font='arial'][size=14px]健康安全关键风险点和食品安全关键控制点[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman']本章节的目的：当员工执行此SOP时，提高员工关于关键风险点和食品安全关键控制点的意识）[/font][table][tr][td] [/td][td][align=center][font='times new roman']序号[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']健康安全关键风险点[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']食品安全关键控制点[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']1[/font][/align][/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827219009_2558_6216082_3.jpeg[/img][font='times new roman']化学品！[/font][/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827220750_5451_6216082_3.png[/img][font='times new roman'] 无[/font][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']2[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']3[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][/table][font='arial'][size=14px]程序[/size][/font][table][tr][td] [/td][td][align=center][font='arial'][size=14px]步骤[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='arial'][size=14px]行动[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='arial'][size=14px]关键点[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1 [/align][/td][td][font='times new roman']血清准备[/font][font='times new roman']全血样品2000rpm离心5分钟。立即检测或者-20℃（最好-80℃）保存并尽快检测。[/font][/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827222491_876_6216082_3.jpeg[/img] [font='times new roman'][color=#ff0000]须避免人员皮肤直接接触血清。[/color][/font] [font='times new roman'][color=#ff0000]严格穿戴好PPE。[/color][/font][/td][/tr][tr][td][align=center]2 [/align][/td][td][font='times new roman']口蹄疫抗体A型检测试剂盒组分[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']8[/font][font='times new roman']℃冷藏保存，实验前取出恢复到室温（18℃-2[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']℃）。[/font]将试剂取出，轻轻涡旋或者震荡混匀。[/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827223643_9215_6216082_3.jpeg[/img][font='times new roman']冬季温度低时，切勿将反应板直接放到冰冷的桌面上，应有泡沫作为缓冲。[/font][/td][/tr][tr][td][align=center]3 [/align][/td][td][font='times new roman']磷酸盐-吐温缓冲液（PBST）[/font][font='times new roman']使用前，将25倍PBST浓缩液用无离子水或蒸馏水稀释成1倍PBST（[/font][font='times new roman']浓缩液与水体积比为[/font][font='times new roman']1:24）。[/font][/td][td][font='times new roman']每板约需600ml，即600ml的去离子水中加入25ml的25倍PBST浓缩液。[/font][/td][/tr][tr][td][align=center]4 [/align][/td][td][font='times new roman']仪器准备[/font][font='times new roman']打开酶标仪预热20分钟，打开洗板机选择DailyRaise 程序进行管路清洗。[/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td=3,1][align=center][font='times new roman']操作步骤[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]5 [/align][/td][td][font='times new roman']抗原抗体反应[/font][font='times new roman']（以20份/板为例）[/font][font='times new roman']首先在抗原抗体反应板上加入PBST，以进行抗体稀释。在A1~A10以及E1~E10每孔加入7[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']uL PBST；其余（B1~B10；C1~C10；D1~D10；[/font][font='times new roman']F1~F10[/font][font='times new roman']；G1~G10；H1~H10；第11列全部和第12列A、B孔）加入40 uL PBST。[/font][font='times new roman']加入待检血清和对照血清：[/font][font='times new roman']在[/font][font='times new roman']A1~A10[/font][font='times new roman']，[/font][font='times new roman']E1~E10[/font][font='times new roman']孔[/font][font='times new roman']加入[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']uL待检血清[/font][font='times new roman']，[/font][font='times new roman']混匀[/font][font='times new roman']后，[/font][font='times new roman']血清浓度为1:[/font][font='times new roman']16[/font][font='times new roman']，[/font][font='times new roman']分别[/font][font='times new roman']吸取40uL到B1~B10及F1~F10，血清浓度从1:[/font][font='times new roman']16[/font][font='times new roman']开始做连续2倍稀释至1:[/font][font='times new roman']128[/font][font='times new roman']，最后一[/font][font='times new roman']行[/font][font='times new roman']（D1~10，H1~10）吸取40uL混合液后弃掉。第11 列为阳性对照孔，直接吸取40 uL的阳性血清作2倍稀释至1:2048；第12列A、B孔为阴性对照孔，吸取40 uL的阴性血清对倍稀释到B孔[/font][font='times new roman']。见表1。[/font][font='times new roman']然后每孔加入40 uL用PBST稀释到[/font][font='times new roman']工作[/font][font='times new roman']浓度的口蹄疫病毒抗原；病[/font][font='times new roman']毒[/font][font='times new roman']抗原对照孔[/font][font='times new roman']（E12[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']F12,[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']G12,H12[/font][font='times new roman']）各[/font][font='times new roman']加80 uL。振荡混匀，封板，4[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']湿盒过夜或37[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']震荡孵育[/font][font='times new roman']90min[/font][font='times new roman']。[/font][font='times new roman']（见表2）[/font][/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827225248_4142_6216082_3.png[/img][font='times new roman']口蹄疫[/font][font='times new roman']A[/font][font='times new roman']型病毒抗原工作浓度 1:[/font][font='times new roman']3为例，具体抗原浓度须按照试剂盒说明书进行配制, 每板需要工作浓度的抗原5ml，通常多配出1-2ml，为6ml，即6mlPBST加入2ml的病毒抗原液；[/font][font='times new roman']阳性对照血清已稀释浓度为1:[/font][font='times new roman']8；[/font][font='times new roman']口蹄疫[/font][font='times new roman']A[/font][font='times new roman']型病毒抗原[/font][font='times new roman']放于-80℃更有利于储存；[/font][font='times new roman']湿盒内的反应板也要有湿纱布覆盖[/font][font='times new roman']；[/font][font='times new roman']U型96孔板为重复利用板，可以刷干净后，用去离子浸泡晾干备用，可以用普通12孔板条代替。[/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827228646_6154_6216082_3.jpeg[/img] [font='times new roman'][color=#ff0000]避免人员皮肤直接接触血清溶液。[/color][/font] [font='times new roman'][color=#ff0000]废弃液存放废弃槽内，由专业资质机构回收[/color][/font][font='times new roman'][color=#ff0000] [/color][/font][font='times new roman'][color=#ff0000]处理。[/color][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827227441_929_6216082_3.png[/img][/td][/tr][tr][td][align=center]6 [/align][/td][td][font='times new roman']将抗原抗体混合液从抗原抗体反应板上按次序转移至酶标板上的相应孔，50uL/孔，封板，37[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']孵育60min。[/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center]7 [/align][/td][td][font='times new roman']洗板5次，[/font][font='times new roman']甩干，拍净。[/font][/td][td][align=center][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]8 [/align][/td][td][font='times new roman']按[/font][font='times new roman']50uL/孔[/font][font='times new roman']加入口蹄疫A型豚鼠抗体工作液（红色），[/font][font='times new roman']封板，37[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']孵育[/font][font='times new roman']3[/font][font='times new roman']0min[/font][font='times new roman']。[/font][/td][td][font='times new roman']口蹄疫A型豚鼠抗体已稀释为工作浓度。[/font][/td][/tr][tr][td][align=center]9 [/align][/td][td][font='times new roman']洗板5次，方法同[/font][font='times new roman']步骤7[/font][font='times new roman']。[/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center]10 [/align][/td][td][font='times new roman']按[/font][font='times new roman']50uL/孔[/font][font='times new roman']加入兔抗鼠IgG-HRP抗体工作液（蓝色），[/font][font='times new roman']封板，37[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']孵育[/font][font='times new roman']3[/font][font='times new roman']0min。[/font][/td][td][font='times new roman']兔抗豚鼠血清IgG-HRP已稀释为工作浓度。[/font][/td][/tr][tr][td][align=center]11 [/align][/td][td][font='times new roman']洗板5次，方法同[/font][font='times new roman']步骤7[/font][font='times new roman']。[/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center]12 [/align][/td][td][font='times new roman']将TMB[/font][font='times new roman']底物[/font][font='times new roman']A溶液和B溶液以1：1比例混合均匀，[/font][font='times new roman']加[/font][font='times new roman']入混合后的[/font][font='times new roman']底物溶液50uL/孔，37[/font][font='宋体']℃[/font][font='times new roman']孵育15min；[/font][font='times new roman']显色反应结束后，[/font][font='times new roman']每孔加50uL终止液终止反应，[/font][font='times new roman']在酶标仪上[/font][font='times new roman']读取OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']值。[/font][/td][td][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827228889_5648_6216082_3.jpeg[/img] [font='times new roman'][color=#ff0000]操作者须熟练掌握终止液和双氧水的 [/color][/font][font='times new roman'][color=#ff0000] MSDS，培训合格后方可上岗；[/color][/font][font='times new roman'][color=#ff0000] 严格穿戴好PPE-[/color][/font][color=#ff0000]实验服、一次性丁腈手[/color][color=#ff0000] 套、化学品防护眼镜、一次性口罩和防护面[/color][color=#ff0000] 罩。[/color][/td][/tr][tr][td][align=center]13 [/align][/td][td][font='times new roman']结果判定[/font][font='times new roman']判定标准：[/font][font='times new roman']每块板设置4个[/font][font='times new roman']病毒抗原对照[/font][font='times new roman']，病毒抗原对照的[/font][font='times new roman']OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']或OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']值[/font][font='times new roman']应[/font][font='times new roman']在[/font][font='times new roman']1.0 以上；[/font][font='times new roman']阳性对照抗体效价在1:1024±1滴度以内，阴性对照血清抗体效价应＜1:8[/font][font='times new roman']，试验结果才有效。[/font][/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center]14 [/align][/td][td][font='times new roman']血清抗体效价的判定：[/font][font='times new roman']被检血清[/font][font='times new roman']OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']值[/font][font='times new roman']大于临界值的孔为阴性孔，小于或等于临界值的孔为阳性孔。以阳性孔的最高稀释倍数为被检血清的抗体效价。[/font][font='times new roman']若临界值处于2个稀释孔[/font][font='times new roman']OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']值[/font][font='times new roman']之间，抗体效价取相邻阳性孔和阴性孔稀释倍数的反对数中间值。[/font][/td][td][font='times new roman']临界值：弃去最高值和最低值，计算剩余2孔的平均[/font][font='times new roman']OD[/font][font='times new roman'][sub][size=14px]450nm[/size][/sub][/font][font='times new roman']值[/font][font='times new roman']，再除以2，即50%对照值，该值为临界值。[/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310251827232636_8392_6216082_3.jpeg[/img][/td][/tr][tr][td][align=center]15 [/align][/td][td][font='times new roman']最终结果判定：[/font][font='times new roman']单个血清样品：≥1:128判为阳性，1:64—128时，判为可疑，≤1:64时判为阴性[/font][font='times new roman']群体：70%的被检血清的抗体效价大于1:128即可判为疫苗有保护效力。[/font][/td][td][font='times new roman']抗体效价≥1:128 ，即疫苗保护效力在99%以上；[/font][font='times new roman']可疑血清样品可以复测，复测抗体效价≥1:128,判为阳性，小于1:128判为阴性。[/font][/td][/tr][tr][td][align=center]16 [/align][/td][td][font='times new roman']废弃物回收[/font][font='times new roman']废弃物置于医疗垃圾废弃物桶统一回收。[/font][/td][td] [/td][/tr][/table][font='arial'][size=14px]附件：[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][table][tr][td=6,1][align=center][font='times new roman'][size=18px]实验室操作规范[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=16px]奶牛口蹄疫[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]A[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]型抗体水平检测[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']样品名称：[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']牧场：[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']样品种类：[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']取样日期：[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']取样人[/font][font='times new roman']：[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']检测时间：[/font][/align][/td][/tr][tr][td=2,1][align=center][font='times new roman']试剂盒种类：[/font][font='times new roman']口蹄疫[/font][font='times new roman']A[/font][font='times new roman']型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]阻断ELISA抗体检测试剂盒[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']试剂盒[/font][font='times new roman']批号：[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']有[/font][font='times new roman']效期：[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']检测人：[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']复核人[/font][/align][/td][/tr][tr][td=6,1][font='times new roman']待检样品说明（或检验目的）：[/font][font='times new roman']检测牛只免疫口蹄疫疫苗21-28d后，血清中口蹄疫[/font][font='times new roman']A[/font][font='times new roman']型病毒抗体含量[/font][/td][/tr][tr][td=6,1][font='times new roman']加样顺序：[/font][table][tr][td][/td][td][align=center][font='times new roman']1[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']2[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']3[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']4[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']5[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']6[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']7[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']8[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']9[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']10[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']11[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']12[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']A[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']B[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']C[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']D[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] 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[/size][/font][font='arial'][size=14px]所有试剂盒组分是否回温充分（是/否），回温温度（ [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px]），回温时间[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]；[/size][/font][font='arial'][size=14px]2 [/size][/font][font='arial'][size=14px]记录实验室温度（ [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px]）；[/size][/font][font='arial'][size=14px]3 [/size][/font][font='arial'][size=14px]确认孵育反应温度（ [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px]和/或 [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px] ）；如为37[/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px]，请提前打开温箱；[/size][/font][font='arial'][size=14px]4 [/size][/font][font='arial'][size=14px]确认仪器（酶标仪、洗板机等）的工作状态[/size][/font][font='arial'][size=14px]。[/size][/font][font='宋体']Ⅱ[/font][font='times new roman'] 试剂准备[/font][font='arial'][size=14px]1 [/size][/font][font='arial'][size=14px]洗涤液的配制：[/size][/font][font='arial'][size=14px]（ ）毫升浓缩液 + （ ）毫升纯净水[/size][/font][font='arial'][size=14px]2 [/size][/font][font='arial'][size=14px]样品的稀释[/size][/font][font='arial'][size=14px]第一步：（ ）微升血清+（ ）微升样品稀释液[/size][/font][font='arial'][size=14px]第二步：（ ）微升血清+（ ）微升样品稀释液 （或不需要）[/size][/font][font='arial'][size=14px]第三步：（ ）微升血清+（ ）微升样品稀释液 （或不需要）[/size][/font][font='arial'][size=14px]3 [/size][/font][font='arial'][size=14px]对照是否需要稀释（是/否），如需稀释，稀释比例（ ）[/size][/font][font='arial'][size=14px]4 [/size][/font][font='arial'][size=14px]酶标抗体是否需要稀释（是/否），如需稀释，[/size][/font][font='arial'][size=14px]短期孵育模式[/size][/font][font='arial'][size=14px]稀释比例（ [/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px] ）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；过夜孵育模式稀释比例（ ）[/size][/font][font='arial'][size=14px]5 [/size][/font][font='arial'][size=14px]底物溶液配置：[/size][/font][font='arial'][size=14px]使用前将底物A和底物B按1：1体积混合，现用现配。[/size][/font][font='宋体']Ⅲ[/font][font='times new roman'] 操作步骤[/font][font='arial'][size=14px]（1）在U型反应班上加入样品稀释液 [/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]微升；（2）[/size][/font][font='arial'][size=14px]加入对照及样品（对照：＿微升；样品：＿微升）[/size][/font][font='arial'][size=14px]，轻弹混匀此时样本稀释度为[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]，并按2倍比例梯度依次稀释至[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]；[/size][/font][font='arial'][size=14px]（3）加入病毒抗原 [/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]微升（4）[/size][/font][font='arial'][size=14px]第一次孵育[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px] （时间：＿：＿至＿：＿）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；（5）取[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]抗原抗体混合液从U型反应板转移至已包被口蹄疫[/size][/font][font='arial'][size=14px]A[/size][/font][font='arial'][size=14px]型兔抗的ELISA（6）第二次孵育[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px] （时间：＿[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]：＿至＿：＿）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；（4）[/size][/font][font='arial'][size=14px]第一次洗涤（次数：＿次；体积：＿微升）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；（7）加入口蹄疫[/size][/font][font='arial'][size=14px]A[/size][/font][font='arial'][size=14px]型兔抗豚鼠抗体工作溶液[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]微升；（8）第三次孵育[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px] （时间：＿：＿至＿：＿）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；（9）[/size][/font][font='arial'][size=14px]第二次洗涤（次数：＿次；体积：＿微升）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；（10）[/size][/font][font='arial'][size=14px]加入[/size][/font][font='arial'][size=14px]兔抗豚鼠IgG-HRP[/size][/font][font='arial'][size=14px]酶标[/size][/font][font='arial'][size=14px]二抗工作液[/size][/font][font='arial'][size=14px]（＿微升）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；（11）[/size][/font][font='arial'][size=14px]第[/size][/font][font='arial'][size=14px]四[/size][/font][font='arial'][size=14px]次孵育[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]℃[/size][/font][font='arial'][size=14px]（时间：[/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px] [/size][/font][font='arial'][size=14px]：＿ 至 ＿： ＿）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；（12）[/size][/font][font='arial'][size=14px]第[/size][/font][font='arial'][size=14px]三[/size][/font][font='arial'][size=14px]次洗涤（次数：＿次；体积：＿微升）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；（13）[/size][/font][font='arial'][size=14px]加入底物（ ＿ 微升）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；（14）[/size][/font][font='arial'][size=14px]显色（时间：＿ ：＿ 至 ＿： ＿）[/size][/font][font='arial'][size=14px]；（15）[/size][/font][font='arial'][size=14px]加入终止液终止反应（ ＿微升）[/size][/font][font='arial'][size=14px]。[/size][/font][/td][/tr][tr][td=6,1][font='times new roman'] [/font][font='宋体']IV[/font][font='times new roman']酶标仪450nm读数结果：[/font][table][tr][td][/td][td][align=center][font='times new roman']1[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']2[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']3[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']4[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']5[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']6[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']7[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']8[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']9[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']10[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']11[/font][/align][/td][td][align=center][font='times new roman']12[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']A[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']B[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td][align=center][font='times new roman']C[/font][/align][/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] [/td][td] 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[/td][td] [/td][/tr][/table][font='宋体'] V结果判定：[/font][font='times new roman'] 1.实验认可标准：4个孔病毒抗原对照OD45[/font][font='times new roman']0[/font][font='times new roman']nm均大于1.0（ ）；阳性对照抗体效价（ ），是否在1[/font][font='times new roman']:[/font][font='times new roman']512-1:2048之间（ ）；阴性对照血清抗体效价（ ），是否临界值；阳性孔为被检样品OD450nm临界值 [/font][font='times new roman'] 若临界值与稀释倍数最高阳性孔的OD450nm值相同，则以被检血清阳性孔的最高稀释倍数作为该份血清的抗体效价；若临界值处于两个稀释孔之间OD450nm之间，抗体效价取相邻阳性孔和阴性孔稀释倍数的反对数中间值。[/font][font='times new roman'] 3.结果判定[/font][font='times new roman'] 抗体效价大于或等于1:128为口蹄疫[/font][font='times new roman']A[/font][font='times new roman']型抗体阳性；1:64-1:128时，判为可疑；1:64时判为阴性。可疑血清样本重新检测。 [/font][/td][/tr][/table][font='arial'][size=14px][color=#ff0000]1. [/color][/size][/font][font='arial'][size=14px][color=#ff0000]双氧水应急处理[/color][/size][/font][font='宋体'][color=#ff0000]急救措施 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]皮肤接触：[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]眼睛接触：[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟。就医。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]吸入：[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停止，立即进行人工呼吸。就医。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]食入：[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 饮足量温水，催吐。就医。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]消防措施 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]危险特性：[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 爆炸性强氧化剂。过氧化氢本身不燃，但能与可燃物反应放出大量热量和氧气而引起着火爆炸。过氧化氢在pH值为3.5～4.5时最稳定，在碱性溶液中极易分解，在遇强光，特别是短波射线照射时也能发生分解。当加热到 100℃以上时，开始急剧分解。它与许多有机物如糖、淀粉、醇类、石油产品等形成爆炸性混合物，在撞击、受热或电火花作用下能发生爆炸。过氧化氢与许多无机化合物或杂质接触后会迅速分解而导致爆炸，放出大量的热量、氧和水蒸气。大多数重金属（如铁、铜、银、铅、汞、锌、钴、镍、铬、锰等）及其氧化物和盐类都是活性催化剂，尘土、香烟灰、碳粉、铁锈等也能加速分解。浓度超过74％的过氧化氢，在具有适当的点火源或温度的密闭容器中，能产生[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]爆炸。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]有害燃烧产物：[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 氧气、水。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]灭火方法：[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 消防人员必须穿全身防火防毒服，在上风向灭火。尽可能将容器从火场移至空旷处。喷水保持火场容器冷却，直至灭火结束。处在火场中的容器若已变色或从安全泄压装置中产生声音，必须马上撤离。灭火剂：水、雾状水、干粉、砂土。 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]泄漏应急处理 [/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]应急处理：[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000] 迅速撤离泄漏污染区人员至安全区，并进行隔离，严格限制出入。建议应急处理人员戴自给正压式呼吸器，穿防毒服。尽可能切断泄漏源。防止流入下水道、排洪沟等限制性空间。小量泄漏：用砂土、蛭石或其它惰性材料吸收。也可以用大量水冲洗，洗水稀释后放入废水系统。大量泄漏：构筑围堤或挖坑收容。喷雾状水冷却和稀释蒸汽、保护现场人员、把泄漏物稀释成不燃物。用泵转移至槽车或专用收集器内，回收或运至废物处理场所处置。[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]2.[/color][/font][font='宋体'][color=#ff0000]终止液应急处理[/color][/font][font='times new roman'][color=#ff0000]急救措施[/color][/font][color=#ff0000]食入：[/color][color=#ff0000]请勿催吐。若患者清醒，让其立刻饮用大量或奶以稀释硫酸。若患者不清醒，请勿给予任何口服物品。立即就医。[/color][color=#ff0000]吸入：[/color][color=#ff0000]如果接触量很小，吸入风险不大。但是如果操作者身体有恙，需将其立刻带到空气清新处。若呼吸困难，立刻就医并输氧。如果呼吸停止，做人工呼吸。立刻就医。[/color][color=#ff0000]皮肤接触：[/color][color=#ff0000]立即脱去被污染衣着，用大量流动清水冲洗，至少[/color][color=#ff0000]15 [/color][color=#ff0000]分钟。在下次使用前将污染衣物清洗干净。用[/color][color=#ff0000]2%[/color][color=#ff0000]的小苏打溶液中和皮肤上多余的酸。立刻就医。[/color][color=#ff0000]眼睛接触：[/color][color=#ff0000]提起眼睑，立刻用大量流动清水冲洗至少[/color][color=#ff0000]15 [/color][color=#ff0000]分钟。就医。[/color][font='宋体'][color=#ff0000]消防措施[/color][/font][color=#ff0000]灭火剂：[/color][color=#ff0000]硫酸溶液不易燃。遇水稀释后发生强烈的放热反应（释放氢气），如果量小，不会产生太大影响。须使用泡沫，二氧化碳或干化学品等灭火剂。用水喷洒给着火容器降温。[/color][color=#ff0000]非常规火灾和爆炸：[/color][color=#ff0000]遇火时，可能产生有毒烟雾（硫氧化物）。与常规金属接触后可能产生氢，并与空气接触后生成易燃混合物。[/color][color=#ff0000]特殊消防程序及设备：[/color][color=#ff0000]遇火灾时，穿戴自给式呼吸器和保护眼睛和皮肤的装备。[/color][font='宋体'][color=#ff0000]泄漏应急处理措施[/color][/font][color=#ff0000]产品包装的泄漏概率较低。一旦泄漏，应用碱中和（碳酸钠，石灰粉），然后用惰性材料吸收（蛭石，沙子，土）。操作时按第8步要求穿戴PPE。清洗并确保污染区域通风。[/color][font='arial'][size=14px][color=#ff0000]防止液体流入下水道或水渠。[/color][/size][/font][font='arial'][size=14px][color=#ff0000] [/color][/size][/font]
[font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=17px][color=rgba(0, 0, 0, 0.9)]首都医科大学附属北京佑安医院感染综合科主任医师李侗曾说：“对感染过新冠病毒的人群来说，体内抗体仍处在较高水平，目前看二次感染的风险还是比较低的。[/color][/size][/font][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=17px][color=rgba(0, 0, 0, 0.9)]首都医科大学附属北京佑安医院感染综合科主任医师李侗曾说：“对感染过新冠病毒的人群来说，体内抗体仍处在较高水平，目前看二次感染的风险还是比较低的。[/color][/size][/font]
一 抗体选择指南:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体，需要考虑如下几种因素：1. 分析或应用的类型2. 样本蛋白的结构性质3. 样本的种属4. 抗体宿主的种类5. 抗体的标记和检测1 分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型，如：可以应用于WB IHC ICC ELASA 分析等，如果抗体说明书没有提及的应用类型，并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型，而仅是说明尚未经过此种分析试验验证，如果抗体不适用某些分析试验，则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。2 样本蛋白的结构性质了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体，至少两方面因素需要考虑(1)..待测样本蛋白的结构域：抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来，其中的免疫原包括：全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体（如：细菌）或细胞，抗体说明书一般都有免疫原的描述，如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域，则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。如果打算用FACS 流式检测活细胞的表面蛋白，则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。(2)样本的提取或处理过程：某些抗体要求样本经过某些特殊处理，例如：许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本，另一方面，某些抗体仅识别天然折叠状态的蛋白。当选择免疫组化的抗体时，应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织，而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织，这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来3 样本的物种 应选择物种相同或有交叉反应的抗体，抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应，因其氨基酸序列同源性较高，如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中，并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白，而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过，应通过序列比对的方法来预测交叉反应，可应用Expasy 和 NCBI BLAST 来进行不同物种蛋白同源性比对。4 一抗宿主物种的选择一般说来，在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时，一抗宿主动物的物种选择较为重要，对于免疫组化而言，尽可能选择与样本不同种系物种的一抗，从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应，例如：检测小鼠样本蛋白，则不应选择小鼠或大鼠源的一抗，最好选兔源的一抗，则二抗则可选择偶联了检测分子（酶、荧光素、生物素等）的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况，除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法，则抗体宿主物种的影响不大，如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测，尽管如此，含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白，还原变性样本中含IgG，在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。5 二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用， 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。6 双重染色抗体的选择用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一，二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。
国家卫健委5月29日通报，全国新冠病毒疫苗接种超过6亿剂次。自3月27日超过1亿剂次以来，每亿剂次所需时间为25天、16天、9天、7天、5天，间隔不断缩短，这就是疫苗接种的中国速度。接种新冠病毒疫苗后，理论上体内会产生IgM、IgG及中和抗体，这些抗体与新冠病毒结合后将使病毒失去感染性。因此新冠病毒疫苗接种后，检测IgM、IgG及中和抗体水平，对于评价疫苗的免疫效果至关重要，同时为常态化新冠疫情防护政策调整提供基础性的数据参考。
[font=宋体]主流的[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development][b]抗体开发平台[/b][/url]有多个，其中最常用的是基于杂交瘤技术的平台。该技术通过将免疫细胞与肿瘤细胞融合，产生能够产生抗体的杂交瘤细胞，从而制备出单克隆抗体。随着技术的发展，基于噬菌体展示技术的平台也逐渐成为主流。该技术通过将抗体片段与噬菌体蛋白融合，展示在噬菌体表面，从而筛选出具有所需特性的抗体。此外，基于转基因小鼠技术的平台也是常用的抗体开发平台之一。这些平台为抗体开发提供了强大的技术支持，使得研究人员能够快速、高效地开发出针对特定抗原的抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供一站式的[url=https://cn.sinobiological.com/services/custom-antibody-services][b]定制抗体开发服务[/b][/url]，包括多克隆抗体开发、单克隆抗体开发，以及针对特定应用的抗体开发，例如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹、免疫组化和流式细胞术。多年来，从抗原设计到抗体纯化和鉴定，我们花费了多年时间优化和调整抗体开发过程中的关键参数。我们以自主研发的技术和极具竞争力的效率为优势，为客户提供专业服务。由我们开发的高成功率和更高质量的抗体将使我们的客户受益其中。下面是义翘神州抗体开发平台：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原制备[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用计算机辅助模拟和设计机制，开发出应用在多肽抗原设计中的自主研发技术。这种经过优化的方法大大地提高了抗体的质量和成功的概率。义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白质，可线上购买，作为抗原用于免疫反应和筛选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②优化小鼠杂交瘤技术[/font][font=宋体]义翘神州多年来一直致力于优化小鼠杂交瘤技术，极大程度提高抗体质量和成功率。因此，义翘神州已经开发出适用多种应用的优质抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③自主研发二代兔单克隆技术[/font][font=宋体]义翘神州花费多年时间优化其自主研发的兔单克隆抗体开发平台，该平台能以合理的成本制备出高亲和力的抗体。义翘神州曾利用该平台制备出优质兔单克隆抗体产品作为目录产品，还为定制客户开发过治疗性抗体候选产品，并取得了巨大的成功。义翘神州利用这一先进平台助力于全球客户开发兔单克隆抗体，作为试剂或治疗性候选产品。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④重组抗体生产[/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发，义翘神州已建立四种抗体生产平台，可用于快速[url=https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service][b]高通量抗体生产[/b][/url]和大规模抗体批量生产。从基因序列到纯化抗体（[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克），只需几周时间，即可将成品送至您手中。义翘神州拥有先进的技术，极大节省了抗体生产的时间和成本。很多大型医药公司都利用我们的平台来支撑他们的抗体研究和开发项目。在过去的几年里，我们实现了几乎[/font][font=Calibri]100%[/font][font=宋体]的成功率，生产了成千上万的高质量单克隆抗体产品。为制药和生物技术领域客户带来了好的业务发展和市场营销。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤抗体应用验证平台[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了多个抗体应用验证平台，包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]检测平台、免疫组化（[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]）检测平台、流式（[/font][font=Calibri]FACS[/font][font=宋体]）检测平台、免疫荧光（[/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体]）检测平台以及免疫沉淀（[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]）检测平台。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development[/font][/font]
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[font=宋体]什么是抗体开发？抗体开发包含了抗体生成和表征的全过程。首先，将目的抗原注射入实验动物体内，使其免疫系统生成大量抗体。[/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development][b]抗体开发[/b][/url]的方法各有不同。例如，多克隆抗体可直接从血清中纯化，而单克隆抗体则需要先培养杂交瘤或先构建噬菌体展示抗体库。[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州作为行业领先的抗体研发公司，提供从抗原合成、研发和生产的一站式[/font][font=Calibri]CRO[/font][font=宋体]服务。通过我们的抗体制备平台，我们随时准备帮助您应对研究中遇到的严峻挑战。[/font][/font][b][font=宋体]义翘神州提供抗体定制开发服务：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]快速单克隆抗体开发、[url=https://cn.sinobiological.com/services/fast-antibody-service][b]快速多克隆抗体开发[/b][/url]、磷酸化抗体定制服务、[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体服务[/b][/url][/font][b][font=宋体]抗体开发技术平台：[/font][/b][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供一站式的定制抗体开发服务，包括多克隆抗体开发、单克隆抗体开发，以及针对特定应用的抗体开发，例如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹、免疫组化和流式细胞术。多年来，从抗原设计到抗体纯化和鉴定，我们花费了多年时间优化和调整抗体开发过程中的关键参数。我们以自主研发的技术和极具竞争力的效率为优势，为客户提供专业服务。由我们开发的高成功率和更高质量的抗体将使我们的客户受益其中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原制备[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用计算机辅助模拟和设计机制，开发出应用在多肽抗原设计中的自主研发技术。这种经过优化的方法大大地提高了抗体的质量和成功的概率。义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白质，可线上购买，作为抗原用于免疫反应和筛选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②优化小鼠杂交瘤技术[/font][font=宋体]义翘神州多年来一直致力于优化小鼠杂交瘤技术，极大程度提高抗体质量和成功率。因此，义翘神州已经开发出适用多种应用的优质抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③自主研发二代兔单克隆技术[/font][font=宋体]义翘神州花费多年时间优化其自主研发的兔单克隆抗体开发平台，该平台能以合理的成本制备出高亲和力的抗体。义翘神州曾利用该平台制备出优质兔单克隆抗体产品作为目录产品，还为定制客户开发过治疗性抗体候选产品，并取得了巨大的成功。义翘神州利用这一先进平台助力于全球客户开发兔单克隆抗体，作为试剂或治疗性候选产品。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④重组抗体生产[/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发，义翘神州已建立四种抗体生产平台，可用于快速高通量抗体生产和大规模抗体批量生产。从基因序列到纯化抗体（[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克），只需几周时间，即可将成品送至您手中。义翘神州拥有先进的技术，极大节省了抗体生产的时间和成本。很多大型医药公司都利用我们的平台来支撑他们的抗体研究和开发项目。在过去的几年里，我们实现了几乎[/font][font=Calibri]100%[/font][font=宋体]的成功率，生产了成千上万的高质量单克隆抗体产品。为制药和生物技术领域客户带来了好的业务发展和市场营销。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤抗体应用验证平台[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了多个抗体应用验证平台，包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]检测平台、免疫组化（[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]）检测平台、流式（[/font][font=Calibri]FACS[/font][font=宋体]）检测平台、免疫荧光（[/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体]）检测平台以及免疫沉淀（[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]）检测平台。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]详情可以关注义翘神州抗体开发页面。[/font][font=宋体][font=宋体]文章来源：抗体开发[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development[/font][/font][font=Calibri] [/font]
[color=black]口蹄疫病毒荧光定量PCR检测方法的模块化构建及实践[/color][color=black]1 前言[/color][color=black]口蹄疫俗名“口疮”、“辟癀”，是由口蹄疫病毒所引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。主要侵害偶蹄兽，偶见于人和其他动物，易感动物达70多种。临床特征是在口腔黏膜、蹄部和乳房皮肤发生水疱性疹。该病传播途径多、速度快，曾多次在世界范围内暴发流行，造成巨大政治、经济损失。鉴于此，世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类传染病之首，我国原农业部将其列为一类动物疫病。目前，有三分之二的 OIE 成员国流行 FMD，时刻威胁着无 FMD 国家和地区的家畜安全和畜产品贸易。[/color][color=black]口蹄疫病毒属于小RNA病毒科口疮病毒属，其最大颗粒直径为23纳米，最小颗粒直径为7~8纳米。目前已知口蹄疫病毒在全世界有七个血清型（A、O、C、南非1、南非2、南非3和亚洲1型），并可细分为65个以上亚型。[/color][color=black]该病毒对外界环境的抵抗力很强，在冷冻情况下，血液及粪便中的病毒可存活120~170天。阳光直射下60分钟即可杀死；加温85℃15分钟、煮沸3分钟即可死亡。对酸碱之作用敏感，故1%~2%氢氧化钠、30%热草木灰、1%~2%甲醛等都是良好的消毒液。[/color][color=black]牛尤其是犊牛对口蹄疫病毒最易感，骆驼、绵羊、山羊次之，猪也可感染发病。本病具有流行快、传播广、发病急、危害大等流行病学特点，疫区发病率可达50%~100%，犊牛死亡率较高，其他则较低。病畜和潜伏期动物是最危险的传染源。病畜的水疱液、乳汁、尿液、口涎、泪液和粪便中均含有病毒。该病入侵途径主要是消化道，也可经呼吸道传染。本病传播虽无明显的季节性，且春秋两季较多，尤其是春季。风和鸟类也是远距离传播的因素之一。[/color][color=black]口蹄疫病毒属于RNA病毒，非常容易发生变异，原因是由于病毒RNA是单链结构，容易断裂而发生重新组合，自身稳定性差，加之在复制过程中修复错误机制的酶活性较低，因而导致RNA病毒变异很快。[/color][color=black]为确保公共卫生安全，以及畜牧业健康发展，有必要实施口蹄疫病毒核酸监测，尽早发现疫情隐患并予以及时处置，避免重大动物疫情及公共卫生安全事件发生。[/color][color=black]2 模块化检测方法思路[/color][color=black]总体思路是：将动物疫病荧光定量PCR检测分为三个模块，核酸提取采用DNA/RNA共提试剂，核酸扩增采用预混液+引物探针方式，质控品利用抗原或商品化疫苗自制。具体思路如下：[/color][color=black]——核酸提取采用DNA/RNA共提试剂；[/color][color=black]——引物探针严格按照标准方法，委托生物工程公司合成；[/color][color=black]——反应体系中其他成分，采购商品化RT-qPCR预混液（含逆转录酶）；[/color][color=black]——质控品：阳性对照采用病毒抗原、商品化疫苗等，测定结果后按一定比例稀释，保存备用。[/color][color=black]——反应体系：设为20μL，其中包含：预混液（2×）10μL、逆转录酶1μL、ROX 0.4μL为固定量，引物探针加入量根据检测标准中的终浓度予以换算，加灭菌水补足18μL，RNA模板为2μL；[/color][color=black]——反应条件首先按照标准中的条件开展摸索，如达到预期效果则予以固定；如效果不佳则参照预混液及引物探针推荐条件进行适当调整。[/color][color=black]3 材料和方法[/color][color=black]3.1 病毒[/color][color=black]口蹄疫抗体液相阻断ELISA试剂盒附带的抗原，包括O型、亚洲I型和A型。[/color][color=black]3.2 试剂[/color][color=black]DNA/RNA共提试剂盒：FastPure Viral DNA/RNA Mini Kit试剂盒，南京诺维赞生产；[/color][color=black]RT-qPCR预混液：2× One Step Q Probe Mix，南京诺维赞生产；[/color][color=black]逆转录酶：One Step Q Probe Enzyme Mix，南京诺维赞生产。[/color][color=black]3.3 引物探针[/color][color=black]按照GB/T18935-2018《口蹄疫诊断技术》提供的序列，委托上海生工合成，引物稀释成10μmol/L、探针稀释成5μmol/L，分装成小包装冷冻保存备用。具体序列如下：[/color][color=black]正向引物：5’-ACTGGGTTTTACAAACCTGTGA-3’[/color][color=black]反向引物：5’-GCGAGTCCTGCCACGGA-3’[/color][color=black]探 针：5’-FAM-TCCTTTGCACGCCGTGGGAC-BHQ1-3’[/color][color=black]3.4 反应体系[/color][color=black]根据GB/T18935-2018《口蹄疫诊断技术》所载反应体系，按照终浓度一致原则予以转化。具体转换方法：[/color][color=black]——反应体系总体积设定为20μL；[/color][color=black]——将标准中反应体系的10×PCR Buffer、MgCl2、dNTPs、Taq酶、反转录酶等成分转换为RT-qPCR预混液10μL、逆转录酶1μL（推荐量）；[/color][color=black]——因使用ABI7500荧光PCR仪，故在体系中加入ROX 0.4μL；[/color][color=black]——标准中正向引物、反向引物、探针的终浓度分别为0.2μmol/L、0.2μmol/L和0.2μmol/L，故在修改后的体系中加入量为0.4μL、0.4μL和0.4μL；[/color][color=black]——总RNA加入量修改为2μL（根据经验该加入量已经足够）；[/color][color=black]——根据上述各成分用量，补充体积的无核酸酶水修改为5.4μL。[/color][table][tr][td=2,1][align=center][color=black]GB/T18935-2018[/color][/align][/td][td][/td][td=2,1][align=center][color=black]修改方法[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]2Χ一步RT-PCR缓冲液[/color][/td][td][align=center][color=black]10[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]2Χ RT-qPCR预混液[/color][/td][td][align=center][color=black]10[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]TAKARA EX Taq HS（5U/μL）[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]酶混合液[/color][/td][td][align=center][color=black]1[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]PrimeScript RT Enzyme Mix II[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]ROX[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]正向引物（10μmol/L）[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]正向引物（10μmol/L）[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]反向引物（10μmol/L）[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]反向引物（10μmol/L）[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]探针（5μmol/L）[/color][/td][td][align=center][color=black]0.8[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]探针（5μmol/L）[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]无核酸酶水[/color][/td][td][align=center][color=black]6[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]无核酸酶水[/color][/td][td][align=center][color=black]5.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]总RNA[/color][/td][td][align=center][color=black]1.6[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]总RNA[/color][/td][td][align=center][color=black]2[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]总体积[/color][/td][td][align=center][color=black]20[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]总体积[/color][/td][td][align=center][color=black]20[/color][/align][/td][/tr][/table][color=black]3.5 反应条件[/color][color=black]参照GB/T18935-2018《口蹄疫诊断技术》推荐的扩增程序，结合ABI7500荧光采集时间不能少于34s的要求，进行预试验。扩增程序如下：[/color][color=black]42℃15min→(95℃10s→55℃30s→72℃34s)*40[/color][color=black]如扩增结果理想，则不做修改直接采纳，否则进行适当调整。[/color][color=black]4 试验结果[/color][color=black]对口蹄疫病毒包括O型、亚洲I型和A型等毒株进行核酸检测，结果均较理想。部分扩增曲线如下：[/color][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009171106327467_6759_1627156_3.jpg[/img]口蹄疫O型抗原扩增曲线[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009171106329879_7658_1627156_3.jpg[/img]口蹄疫亚洲I型抗原扩增曲线[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009171106330953_5975_1627156_3.jpg[/img]口蹄疫A型抗原扩增曲线[color=black]5 阳性质控的制备[/color][color=black]根据GB/T18935-2018《口蹄疫诊断技术》规定，阳性对照应Ct25。对O型、亚洲I型和A型3种抗原适当稀释后进行再次检测，结果如下：[/color][table][tr][td][align=center][color=black]稀释倍数[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^1[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^2[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^3[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]H5Re-8抗原[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]17.53[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]21.35[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]25.81[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]30.43[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]H5Re-11抗原[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]12.45[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]15.96[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]19.70[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]24.65[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]H5Re-12抗原[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]13.57[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]16.98[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]20.85[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]25.41[/color][/align][/td][/tr][/table][color=black]经综合判定，最后采用口蹄疫亚洲I型抗原作1: 10^3稀释，分装为200μL/管作为阳性质控，Ct值约20，-70℃冻存备用。[/color][color=black]6 讨论[/color][color=black]6.1 检测工作更加方便高效[/color][color=black]一是在核酸提取环节采用了DNA/RNA共提试剂，待检样品经一次提取核酸，除可应用于口蹄疫、蓝耳病等RNA病毒项目检测外，还可应用于非洲猪瘟、圆环病毒等DNA病毒项目检测；[/color][color=black]二是由于实验室储备了足够量的qRT-PCR预混液及逆转录酶，在开展检测时，不必担心部分检测量较少的项目由于试剂组分不足而罢工事件的发生；[/color][color=black]三是由于qRT-PCR预混液及逆转录酶适用于多数RNA病毒项目的检测，在检测任务发生重大变化时，可以方便地调整检测项目，不必担心试剂不足或浪费情况的发生；[/color][color=black]6.2 阳性质控品制备方便[/color][color=black]动物疫病监测实验室常备口蹄疫液相阻断ELISA抗原，只需对贮存的抗原进行含量测定，取合适的抗原进行一定比例的稀释即可作为实验室内部的阳性质控品。[/color][color=black]6.3 适用性有待进一步验证[/color][color=black]尽管在构建新方法时，对适用性进行了尽可能多的验证，但对于其他毒株，尤其是较新型的变异株是否有效，尚有待进一步观察和验证。[/color][color=black]6.4 严格依法依规操作[/color][color=black]如果有关法律法规或上级有关部门出台政策，要求采用获批准的成品试剂盒用于检测，则实验室必须及时停止自建方法的使用。[/color]
[font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白是一种将抗体片段与功能蛋白融合表达的重组蛋白，具有抗体的特性和功能蛋白的活性。它可广泛应用于免疫诊断、免疫治疗、抗体纯化、抗体和抗原的定量分析以及免疫导向药物的制备等领域。根据结合的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段的不同，可以将抗体融合蛋白分为[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]与[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体（[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]scFv[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]）[/b][/url]融合蛋白。制备抗体融合蛋白的方法主要有化学交联法和基因工程技术，其中基因工程技术是目前主要的方法。在制备过程中，需要注意两蛋白间的接头序列的长度，以确保蛋白质的折叠和稳定性。抗体融合蛋白在免疫学、生物制药和医学等领域具有广泛的应用前景，为疾病的诊断、治疗和药物研发提供了新的工具和方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体如何与蛋白融合[/font][font=Calibri]?[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]双特异性抗体是一种特殊的抗体，具有两个不同的抗原结合位点。通过技术手段，可以将双特异性抗体与另一种蛋白质融合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①使用基因工程技术，将双特异性抗体的基因与目标蛋白质的基因进行融合，然后通过表达载体在细胞内表达融合蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②使用化学手段，将双特异性抗体与目标蛋白质进行化学偶联。这需要使用特定的化学偶联剂，将双特异性抗体的特定基团与目标蛋白质的特定基团连接起来。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要注意的是，融合蛋白质的功能和性质取决于其组成成分的特性和比例，因此在融合过程中需要谨慎选择和设计组成成分，以确保融合蛋白质具有所需的功能和性质。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体融合蛋白具有广泛的应用，包括但不限于以下方面：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①免疫诊断：抗体融合蛋白可以用于检测抗原，如病毒、细菌、肿瘤标志物等。通过将抗体片段与荧光蛋白、酶等标记物结合，可以实现对抗原的高灵敏度检测。[/font][font=宋体]②免疫治疗：抗体融合蛋白可以用于治疗肿瘤、感染性疾病等。通过将抗体片段与细胞毒素、免疫调节因子等效应分子结合，可以实现对肿瘤细胞的靶向杀伤或调节免疫反应。[/font][font=宋体]③抗体纯化：抗体融合蛋白可以用于分离和纯化抗体。通过将抗体片段与亲和标签结合，可以利用亲和层析等技术实现对抗体的纯化和富集。[/font][font=宋体]抗体和抗原的定量分析：抗体融合蛋白可以用于定量分析抗体和抗原的浓度。通过将抗体片段与荧光染料等标记物结合，可以利用流式细胞术等技术实现对抗体和抗原的定量分析。[/font][font=宋体]④免疫导向药物的制备：抗体融合蛋白可以用于制备免疫导向药物，即将药物与抗体片段结合，利用抗体的特异性结合能力，将药物定向引导至病变部位，提高药物的疗效并降低副作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
猪瘟抗体金标快速检测卡使用说明书【产品用途】本检测卡采用免疫原理和胶体金免疫层析技术制成，用于快速检测猪血液或猪血清中的猪瘟抗体,为国内最新检测试剂。检测时间仅需20 分钟，操作简便、快速、结果准确、直观、灵敏度高、容易判定。当猪瘟抗体滴度达到能抵御猪瘟强毒攻击时，在检测区和对照区各形成一条色线，则视为阳性，抗体滴度越高，检测线颜色越深；当猪瘟抗体滴度达不到抵御猪瘟强毒攻击的抗体滴度时，只在对照区形成一条色线，则视为阴性。本卡附带一张金标试纸与正相间接血凝试验实物参照图，将检测线的颜色深浅与参照图对照，便可粗略估计样品抗体的滴度。【操作步骤】1．打开包装袋，取出检测卡平放在桌面上，并做好标记；2．在检测卡的加样孔内加入2 滴（50-100ul）血液或血清样品；3．在20 分钟内观察和记录结果，超过20 分钟的结果只能作为参考。【结果判定】见右图阳性：在检测区（T）和对照区（C） 各出现一条紫红色线。检测线颜色越深，表明猪瘟抗体滴度越高。弱阳性：在检测区（T）和对照区（C）各出现一条紫红色线，但检测线颜色很浅。阴性：只在对照区（C）出现一条紫红色线。无效：都不出现紫红色线或只在检测区（T）出现紫红色线，对照区（C）不出现紫红色线。【结果参考意义】1．强阳性结果说明猪瘟抗体滴度较高，暂时不必进行猪瘟疫苗的接种免疫；2．弱阳性结果说明猪瘟抗体滴度只达到抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平，这时应该及时进行猪瘟疫苗接种，此时也是猪瘟疫苗接种的最佳时间；3．阴性结果说明机体内无猪瘟抗体或抗体水平低于抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平，如果动物群体健康，应该及时进行猪瘟疫苗接种。如果动物群体已有个别动物出现疑似猪瘟病时，则可作为诊断猪瘟病的一个参考依据。【注意事项】1．请严格按照说明书要求进行操作和结果判定。2．检测样品可以是猪血液或血清。3．检测卡从铝箔袋取出后应尽快使用，尽量避免长时间放置在空气中，否则吸潮后将失效。4．检测环境应保持一定的湿度，避风和避免在过高温度下进行操作。5．检测卡在室温下保存，如在2-8℃冷藏，使用时需平衡至室温后方可打开包装进行检测操作。【包装规格】单头份铝箔袋包装（内含检测卡、吸管和干燥剂）；50 头份/盒【贮藏和有效期】密封，在干燥处保存；在3-30℃下贮存，有效期为12 个月。
[font='calibri'][size=13px]抗体fc段和Fab段什么意思？抗体的功能有哪些？[/size][/font]抗体（antibody），是一种由浆细胞（效应B细胞）分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质，仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中，及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征，该外来目标被称为抗原。Fab段：抗原结合片段（fragment of antigen binding，Fab），相当于抗体分子的两个臂，由一个完整的轻链和重链的VH和CH1结构域组成。Fc段：可结晶段（fragment crystallizable，Fc）相当于Ig的CH2和CH3结构域，是Ig与效应分子或者细胞相互作用的部位。由以上信息可以看出：Fab段包含完整的可变区，以及恒定区的CH1区域。Fc段仅指Ig恒定区CH2和CH3的区域，相当于Y字结构下面那一部分。抗体的功能有哪些？(1)特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。(2)激活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。(5)具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。(7)通过与细胞Fc受体结合发挥多种生物效应。①调理作用 IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、FcμR结合，增强其吞噬能力，通常将抗体促进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理作用 (opsonization)。②发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。义翘神州在重组抗体表达方面具有丰富的经验，除了表达全长抗体外，还可以表达各种形式的抗体片段，如单链抗体 (scFv)、抗原结合片段(Fab)、纳米抗体 (VHH) 和抗体融合蛋白 (antibody-fusion proteins)等。基于优化的哺乳动物蛋白平台，义翘神州可在HEK293或CHO细胞中的表达和生产Fab抗体片段。 利用此技术生产的Fab片段较酶切全长抗体获得的Fab片段具有更好的质量。scFv可以在微生物系统如E. coli中表达, 也可以通过瞬转技术在哺乳动物细胞中表达。义翘神州具备在不同系统中表达不同抗体片段的能力，您可以根据实际需求进行选择。您只需将抗体片段的基因序列发送给我们，义翘神州负责完成从基因合成到最终纯化抗体片段的整个过程。更多抗体片段生产服务可以参看：https://cn.sinobiological.com/services/fab-scfv-antibody-production-service
奥克斯高老师的总结，给大家分享下。 第一、疫苗运输过程中，因为环节多，有些过程没有做到冷链运输和保存，造成抗原滴度下降。 第二、疫苗中抗原含量不够，杂蛋白含量高。因此按说明免疫，效果不理想。 第三、免疫的时间不合理。口蹄疫流行的时间为每年的12月到第二年的4月，南方流行的时间要早一点，北方流行的稍晚一些。今年情况比较特殊，天气回暖慢，流行的时间稍长一些。那疫苗就不能全年均衡防疫，重点流行时期重点防疫。 第四、管理的问题。口蹄疫A型、O型、亚I疫苗，三种疫苗没有打全，漏打情况很严重，特别是育成牛，有一个管理还相当规范的牛场，疫苗漏打占到10%。 第五、不做抗体检测，就不能判断疫苗效果是否理想,就不了解牛群的抗体水平是否能够达到保护。 第六、思想问题，自认为口蹄疫疫苗打了也不管事，对此项工作应付了事，畜牧局给什么疫苗就打什么疫苗，因此部分牛场漏打疫苗，有些场只注射了O型和I型，没注射A型苗 。 第七、疫病流行时，盲目打疫苗，没有科学的根据。
质谱技术是抗体药物分析最重要的技术手段之一。本文简述了抗体药物的发展和质谱技术的原理。对于质谱技术在抗体药物的分析中应用进行了归类整理，主要分为在一级结构和高级结构分析中的应用。抗体类药物是指含有抗体片段的蛋白类药物，所以在恶性肿瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、感染和器官移植排斥等重大疾病上得到了快速的发展，是当前生物药物领域增长最快的一类药物.1.抗体药物发展新趋势在生物药物领域，抗体药物占据着越来越重要的地位，全球销售排名前10位的药物中有6个为抗体药物，抗体药物按来源分类可以分为：鼠源单克隆抗体、人鼠嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。目前，批准的单克隆抗体药物中，人源化单抗和全人源单抗数量已占据大多数。1.1 抗体药物偶联物（ADC）抗体药物偶联物（ADC）由单克隆抗体和小分子化合物两部分组成。通过抗体的靶向作用，ADC 的抗体部分和肿瘤细胞表面抗原特异性识别并结合，通过细胞内吞作用，将抗体和小分子化合物一起带进肿瘤细胞内部，释放出小分子化合物。这样既可以降低小分子药物的毒性，同时具有靶向结合的作用。已经上市的两个ADC 是Kadyla 和Adcetris。1.2 双特异性抗体（BsAb）双特异性抗体（BsAb）是含有两种特异性抗原结合位点的人工抗体，能在靶细胞和功能分子（细胞）之间架起桥梁，由于基因工程的发展，目前双特异性抗体已经研发出多种类型，主要类型有三功能双特异性抗体、IgG-scFv、三价双特异性分子、串联单链抗体（串联scFv）、DVD-Ig 等多种形式。2.质谱技术近年来质谱仪性能的显著改进主要基于开发出的两种离子化技术：一种是介质辅助的激光解吸/离子化技术。另一种是电喷雾离子化技术。由于这两种电离技术的出现，使原本只能检测小分子的质谱技术，可以运用于检测生物大分子。在过去质谱技术主要运用于对一级结构和序列的表征，而现在质谱技术越来越多地运用于高级结构的分析，而高级结构对于抗体药物的生物活性至关重要。3.质谱技术在抗体药物一级结构分析中的应用3.1 完整抗体药物精确分子量测定当得到抗体药物时，可以直接通过高分辨率的MALDI-TOF或者ESI-MS进行分子量的检测。通过对于脱糖后分子量的检测，可以对于抗体药物进行初步定性分析，并将可以作为药物常规放行的分析方法。对于脱糖前的抗体药物进行分析，可以得到抗体药物的糖基化类型的信息及糖基化水平的分布，对于快速了解生产工艺与药物质量的关系具有十分重要的意义。3.2 药物抗体偶联比（DAR）对于赖氨酸链接的抗体偶联药物，采用C4色谱柱及联用的质谱对去糖基化样品进行分析，根据偶联不同数目药物分子的质量数增加判断偶联数目。对于质谱测定的结果，不仅可以给出确切的药物抗体偶联比值，更能够给出链接不同个小分子药物的分布情况，及反应过程副产物空链接头的分布情况。3.3 肽图谱分析蛋白被特异酶切后的蛋白酶水解后得到的肽片段质量图谱。由于不同的抗体药物具有不同的氨基酸序列，蛋白质被酶水解后，产生的肽片段也各不相同，肽混合物的质量数具有唯一特征。可以通过LC-ESI-MS进行肽片段的一级质量数的鉴定，也可以通过LC-ESI-MS/MS对于每个肽片段进行进一步确证，提高肽图谱的准确性。3.4 翻译后修饰研究蛋白质的翻译后修饰（PTM）对于抗体药物的生物学功能十分重要。常见的翻译后修饰有：磷酸化、脱酰胺、甲硫氨酸氧化、糖基化修饰、N端焦谷氨酸环化，C端赖氨酸切除等。质谱分析仪检测蛋白和肽片段的分子量偏差，可以实现高灵敏、高通量和高精确地鉴别蛋白质的翻译后修饰的种类。3.5 N端氨基酸序列检测常规N端氨基酸检测用Edman降解法进行检测，但是抗体药物有时候会出现N 端环化的现象，在这种情况下用Edman降解法需要先对抗体进行去封闭处理，而直接使用质谱可以直接测出N端的氨基酸序列，同时可以检测出N端环化的相对比例。4.质谱技术在抗体药物高级结构分析中的应用4.1 氢/氘交换质谱（HDX-MS）常规的质谱只能获得蛋白的一级结构信息。氢/氘交换质谱（HDX-MS）可以进行蛋白质构象，溶液动力学和表位映射进行分析。在能够调查的蛋白质的高阶结构和动态结构技术中，HDX-MS已经证明适合单克隆抗体和单克隆抗体-抗原复合物的构象分析。4.2 离子淌度质谱法（IM-MS）离子淌度是根据蛋白的电荷和形状选择性分离的方法，可以区分相同分子量的蛋白和肽段，可用于检测蛋白的简单高级结构。4.3 高分辨率傅立叶变换离子回旋共振质谱（FTICR-MS）高分辨率傅立叶变换离子回旋共振质谱（FTICR-MS）能够检测最高质量数的质谱仪器，并且有着很高的分辨率。FTICR-MS 是目前被公认为是蛋白质组学研究的有力工具，特别是和完整的蛋白质鉴定和上/下调翻译后修饰（PTM）蛋白质的鉴定。
英研究：感染新冠形成抗体有83%保护性，有效期至少5个月，但仍可能二次感染；匈牙利14日宣布已订购中国新冠疫苗，首批将交付100万剂
实验室常用的ELISA方法可以用来测定抗体，也可以用来测定抗原。我们可以根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。下面就让上海劲马ELISA试剂盒为您分享其中关于双抗体夹心法检测抗原的操作步骤。双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：1) 将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2) 加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3) 加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。只要获得针对受检抗原的异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。劲马ELISA试剂盒小提示：双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。
当我们要检测目的蛋白在组织中表达情况的时候，如何选择适合我们实验需要的抗体，并恰当保存使用，是每个科研人员需要细心考虑的。抗体种类繁多，品牌众多，技术参数不一，价格和质量更是相差甚大，如何购买到高质量价格合适的抗体，并准确地做出我们想要的结果，其中有很多细节需要注意。一、怎样选择适合你实验需要的抗体1. 一抗选择要点（1）确定抗体的名字，注意中英文名字、它名、亚型等信息。（2）确定你的实验类型，Elisa，WB，IHC，ICC，还是FACS。一般抗体的说明书都会列出该抗体经验证过适用于何种实验的类型，如果抗体说明书没有提及的应用类型，并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型，而仅是说明尚未经过此种实验验证，请根据说明书列出的已验证的类型来选择适合你实验的抗体。（3）确定实验样本的种属，Human，Mouse，还是Rat。一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种物种实验，请根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验的抗体。（4）样本蛋白的结构性质。了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体，待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性，蛋白空间构象的改变，会影响抗体的免疫亲和反应。（5）单多克隆抗体的选择。市面上的抗体还是以多克隆抗体为主，一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。2. 二抗选择要点（1）种属来源。主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可（羊、兔等均可）。（2）标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗，以与后面的SP结合反应，而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗，如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。二、抗体的稳定性1. 抗体的稳定性是自然界长期进化的结果。抗体是免疫系统中最重要的分子之一，其稳定性是自然进化筛选的结果。在众多物种中，抗体分子形成了保守而稳定的结构。2. 抗体分子的高Tm值。在室温下，甚至短时间温度达到50-60℃，抗体分子都能维持正确折叠，保持应有的活性。3. 抗体的纯度。采用先进的抗体纯化技术，确保抗体产品的高纯度，保障其抗体产品的稳定性。4. 抗体的浓度。高浓度的抗体产品可减少容器表面吸附造成的物质损失，高浓度的抗体稳定性更好，抗体产品中93%的浓度大于0.5mg/ml。三、怎样确定抗体购买渠道和品牌国外著名抗体品牌的质量一般没问题，但价格较贵，而且很多抗体品牌本身不生产抗体，所以能找到OEM抗体生产商生产的原装进口抗体，如美国的ProSci公司，大部分常用抗体都可以在ProSci网站上查找到，同样一支抗体能少花费1000元，对于一个普通实验室来说，那将节约非常多的科研经费，而且ProSci会提供信号通路的小包装抗体作为一个试剂盒，这样极大方便了用户，特别是经费不是很充足的用户。随着网络技术的越来越普及，我们自己就可以通过国内外的相关网站来检索，国外最大的生物试剂查询网站：biocompare，国内最大的生物试剂查询网站：丁香通，来查找我们所需要的产品资料。四、怎样保存已获得的抗体
[font=宋体]抗体，作为一类特殊的蛋白质，在免疫系统中发挥着至关重要的作用，它们能够特异性地识别并中和外来病原体，如细菌和病毒。而蛋白质，作为生命活动的基础分子，具有多种多样的功能，从酶催化到结构支撑，无所不包。抗体与蛋白的区别在于，抗体是一类具有特定功能的蛋白质，而蛋白质则是更广泛的一类生物分子。本文将深入探讨抗体与蛋白的具体区别，并详细解析抗体蛋白的结构与功能，为读者提供一个全面而深入的理解。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体与蛋白的区别？[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]定义：[/font][font=宋体][font=宋体]抗体（[/font][font=Calibri]antibody[/font][font=宋体]）是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它（免疫球蛋白不仅仅只是抗体）是一种由浆细胞（效应[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞）分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]形蛋白质，仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中，及其[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征，该外来目标被称为抗原。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体（天然抗体），如血型[/font][font=Calibri]ABO[/font][font=宋体]型中的抗[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]和抗[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]的抗体，和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体，异嗜性抗体，同种抗体和自身抗体。按抗原反应的凝集状态分为完全抗体[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]和不完全抗体[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]等。抗体在医疗实践中应用甚为广泛。如用于疾病的预防、诊断和治疗方面都有一定的作用。临床上用丙种球蛋白预防病毒性肝炎、麻疹、风疹等，国际上用抗[/font][font=Calibri]Rh[/font][font=宋体]免疫球蛋白预防因[/font][font=Calibri]Rh[/font][font=宋体]血型不合引起的溶血症。诊断上如类风湿因子用于类风湿性关节炎，抗核抗体（[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]）、抗[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]抗体用于系统性红斑狼疮，抗精子抗体用于原发性不孕症的诊断等；治疗上如毒素中毒用抗毒治疗以及免疫缺陷性疾病的治疗等。[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical][b]抗体相关资源[/b][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白：[/font][font=宋体][font=宋体]蛋白质是生命的物质基础，是有机大分子，是构成细胞的基本有机物，是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的[/font][font=Calibri]16%~20%[/font][font=宋体]，即一个[/font][font=Calibri]60kg[/font][font=宋体]重的成年人其体内约有蛋白质[/font][font=Calibri]9.6~12kg[/font][font=宋体]。人体内蛋白质的种类很多，性质、功能各异，但都是由[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]多种氨基酸（[/font][font=Calibri]Amino acid[/font][font=宋体]）按不同比例组合而成的，并在体内不断进行代谢与更新。点击查看：[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]蛋白相关资源[/b][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]区别与联系：[/font][/b][font=宋体][font=宋体]蛋白质还是有一定的区别以及关联性的，虽然说抗体是蛋白质，但是蛋白质不一定是抗体。[/font] [font=宋体]主要是因为抗体是通过人体内的浆细胞所产生的，而且还可以喝相应的抗原特异性相互结合，这样在一定程度上就能发挥出蛋白质。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体[/font][font=宋体]蛋白[/font][font=宋体]结构[/font][font=宋体]解析[/font][font=宋体]：[/font][/b][font=宋体][font=宋体]抗体是一种免疫球蛋白，由[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞产生。抗体的单体是一个[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]形的分子，有[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]条多肽链组成。其中包括两条相同的重链，以及两条相同的轻链，之间由双硫键连接在一起。每条重链[/font][font=Calibri]50kDa[/font][font=宋体]，每条轻链[/font][font=Calibri]25kDa[/font][font=宋体]，轻重链间存在二硫键链接。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]轻链[/font][font=宋体][font=宋体]轻链包括可变区和恒定区，可变区约占轻链的[/font][font=Calibri]1/2[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]重链[/font][font=宋体][font=宋体]重链包括可变区和恒定区。根据重链的不同，可以将抗体分为不同的种类，例如哺乳动物[/font] [font=Calibri]Ig [/font][font=宋体]的重链有α、δ、ε、γ和 μ 五种[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]相对应可以将哺乳动物[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]分为 [/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgD[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]IgM [/font][font=宋体]五类。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]可变区[/font][font=宋体][font=宋体]抗体分子的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端存在一段氨基酸序列变化较大的区域，该区域称为可变区。可变区中存在可以与抗原特结合的部位，即抗原结合位点。一个抗体有两个抗原结合位点，可以同时结合两个抗原分子。在可变区中有三个区域的序列高度变化，成为高变区（[/font][font=Calibri]hypervariable region[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]HVR[/font][font=宋体]）又称为抗原互补决定区（[/font][font=Calibri]complementarity determining region[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]）。可变区主要通过其[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个[/font][font=Calibri]CHR[/font][font=宋体]区形成[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个环状结构与抗原特异性结合。可变区中非[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]部分成为骨架区（[/font][font=Calibri]framework region[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]），其氨基酸组成和排列变化相对[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]较少。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]恒定区[/font][font=宋体][font=宋体]抗体分子[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端氨基酸序列相对稳定，该区域称为恒定区。同一种抗体的恒定区是相同的。抗体轻链的恒定区由一个[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]结构域构成；重链的恒定区由[/font][font=Calibri]3-4[/font][font=宋体]个串联的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]结构域及一个用于增加灵活性的铰链区构成。[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]有三个结构域（[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]），[/font][font=Calibri]IgD[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]有四个结构域（[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH4[/font][font=宋体]）。不同种类抗体的铰链区存在一定的差异，[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]的铰链区较短，[/font][font=Calibri]IgD [/font][font=宋体]的铰链区较长，[/font][font=Calibri]IgM [/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgE [/font][font=宋体]无铰链区。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]分子在木瓜蛋白酶的作用下可以被降解为两个[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]段及一个[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]段由抗体轻链的可变区、轻链的恒定区、重链的可变区及重链恒定区构成。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段包含了所有抗体分子共有的蛋白质序列以及各个类别独有的决定簇。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段有多种生物学活性，具有结合补体、结合[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体、通过胎盘等作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构和功能[/b][/url]详情：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
[font=宋体][font=宋体]传统意义上，抗核抗体（[/font][font=Calibri]antinuclear antibodies[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]）是所有抗细胞核抗原成分的自身抗体的总称，包括一大类抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]然而，随着[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]检测技术的改进、尤其是培养细胞抗原基质（如[/font][font=Calibri]HEp-2[/font][font=宋体]细胞，即人喉癌上皮样细胞系）的广泛运用，[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]针对的靶抗原成分已由细胞核扩展到整个细胞成分，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架及细胞分裂周期蛋白等。目前对[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]的定义为：以真核细胞的各种成分为靶抗原的自身抗体的总称。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]的检测方法，目前国际及国内指南或共识推荐的均是间接免疫荧光法（[/font][font=Calibri]indirect immunofluorescence[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]IIF[/font][font=宋体]），而且是以[/font][font=Calibri]HEp-2[/font][font=宋体]细胞为实验基质的[/font][font=Calibri]IIF[/font][font=宋体]。此外还有[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、线性免疫印迹法、化学发光免疫分析法等，各有优缺点。瑞金医院检验科实验室、皮肤科实验室均采用[/font][font=Calibri]IIF[/font][font=宋体]法检测[/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]IIF-ANA[/font][font=宋体]规范的结果报告内容应包括：检测方法、定性结果（阳性[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]阴性）、荧光模型、滴度、临床建议。[/font][font=Calibri]IIF-ANA[/font][font=宋体]荧光模型分[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]类：细胞核荧光模型（[/font][font=Calibri]14[/font][font=宋体]种）、细胞浆荧光模型（[/font][font=Calibri]9[/font][font=宋体]种）、细胞有丝分裂荧光模型（[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]种）；国内共识建议必报的荧光模型有[/font][font=Calibri]13[/font][font=宋体]种，细胞核类的有均质型、斑点型（需区分致密斑点型）、着丝点型、核点型、核仁型、核膜型，细胞浆类的有胞浆纤维型、胞浆颗粒型、胞浆网状[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]线粒体型、胞浆极型[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]高尔基体型、胞浆棒状环状型、胞浆线性[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]肌动蛋白型。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]抗核抗体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体阳性通常指的是抗核糖体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体阳性，它可能意味着身体存在结缔组织疾病，尤其是系统性红斑狼疮（[/font][font=Calibri]SLE[/font][font=宋体]）。[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]包括类风湿关节炎、干燥综合征的患者等，阳性率并不是很高，特异性也不是很好。系统性红斑狼疮是一种自身免疫性疾病，可能会对皮肤黏膜、肝功能、中枢神经系统等造成损伤。抗核糖体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体对系统性红斑狼疮具有高度特异性，尤其是在伴有典型神经系统症状的中枢神经系统损害型红斑狼疮中，出现抗核糖体[/font][font=Calibri]P[/font][font=宋体]蛋白抗体阳性的几率比较高。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]所以出现抗体阳性后，一定要到医院请专科大夫来进行诊断，并来进行合理的解释，再进行其他实验室检查，包括血沉、[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]反应蛋白 、血尿常规、肝肾功能、类风湿因子，以及相关其他，如[/font][font=Calibri]SM[/font][font=宋体]抗体、核小体抗体、[/font][font=Calibri]SSA[/font][font=宋体]抗体、[/font][font=Calibri]SSB[/font][font=宋体]抗体等自身抗体检查。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]细胞分选平台[/b][/url]，可向全球客户提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/single-b-cell-antibody-service][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/single-b-cell-antibody-service][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/single-b-cell-antibody-service][b]细胞抗体制备服务[/b][/url]，整个过程涉及单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞分离、测序、克隆和单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体筛选等步骤。更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
[font=宋体][font=宋体]抗组蛋白抗体是抗核抗体家族的一个亚基，专门针对组蛋白亚基或组蛋白复合物。[/font][font=Calibri]1959[/font][font=宋体]–[/font][font=Calibri]60[/font][font=宋体]年，[/font][font=Calibri]Henry Kunkel[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]H.R.Holman[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]H.R.G.Dreicher[/font][font=宋体]在对红斑狼疮细胞病因的研究中首次报道了这些抗体。如今，抗组蛋白抗体仍被用作系统性红斑狼疮的标志物，但也与其他自身免疫性疾病有关，如[/font][font=Calibri]Sj?gren[/font][font=宋体]综合征、皮肌炎或类风湿性关节炎。抗组蛋白抗体可作为药物诱导性狼疮的标志物。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]特异性[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]组蛋白是蛋白质的复合体，[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]储存在其周围。抗组蛋白抗体可以靶向组蛋白复合物或显示的任何蛋白质亚基。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗组蛋白抗体靶向五大类组蛋白亚基：[/font][font=Calibri]H1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]H2A[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]H2B[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]H3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]H4[/font][font=宋体]。抗组蛋白的抗体多种多样，因此除了靶向蛋白亚基外，不同的抗体也可能对不同的复合物，包括[/font][font=Calibri]H2A-H2B[/font][font=宋体]二聚体或[/font][font=Calibri]H3-H4[/font][font=宋体]四聚体。有证据表明，不同药物暴露产生的[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]抗组蛋白抗体对不同组蛋白复合物的表位具有特异性。高度修饰的组蛋白已被证明能促进更大的免疫反应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]检测抗体[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗组蛋白抗体可以使用[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]测定法进行临床检测。测试需要血样。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]间接免疫荧光也可用于检测抗组蛋白抗体。均匀、扩散染色表明存在抗组蛋白抗体、染色质和一些双链[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]。义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-servicehttp://][b]免疫荧光检测服务[/b][/url]！[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗组蛋白抗体阳性说明什么？[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]抗组蛋白是含有五个亚单位的碱性蛋白，抗组蛋白阳性说明可产生了组蛋白抗体，多存在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、风湿病等疾病中，建议患者对症治疗。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]正常值：[/font][/b][font=宋体]正常人抗组蛋白抗体为阴性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在探索抗组蛋白抗体的道路上，科学家们从未停止脚步。他们致力于解开这一生物标志物的所有谜团，以期为人类健康带来更多福祉。作为普通公众，我们也可以通过学习和了解抗组蛋白抗体的相关知识，为自己的健康保驾护航。让我们共同期待未来科学研究在抗组蛋白抗体领域取得的更多突破，为人类的健康事业贡献智慧和力量。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
[font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体]高可能是有过感染史或者现症感染，还需综合其他数据分析。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒是一种很常见的疱疹病毒，多见于不明原因发烧患者，[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原可刺激人体产生两种抗体，一种是[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体]，还有一种是[/font][font=Calibri]IGM[/font][font=宋体]。一般如果只是[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体]指标上升，[/font][font=Calibri]IGM[/font][font=宋体]保持在正常范围内，则表示患者有过[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒感染病史，现已康复 ；如[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IMG[/font][font=宋体]都处于升高范围，则表示患者近期感染[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒，可能还会伴随有发热、淋巴结肿大、皮疹等症状表现。下面对几个常见概念进行科普：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]阳性[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]阳性并不是[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒检测专有的检测，如单纯疱疹病毒、风疹病毒等多种疾病，都需要进行[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]的检测。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]当病原体等感染机体后，免疫系统会产生[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]等不同的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体：[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫应答中首先分泌的具有保护性的抗体；一般在机体收到感染时快速产生，经过一段时间[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体量逐渐减少而消失；[/font][/font][font=宋体][font=宋体]所以检测[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体阳性，在临床上是提示为目前体内存在感染的情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体：[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]当[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体出现后，随后会出现[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体；但[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体在机体内持续的时间会比较长；[/font][/font][font=宋体][font=宋体]所以检测[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体检测阳性，在临床上是提示患者存在既往感染等的情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒[/font][font=Calibri](EBV)[/font][font=宋体]是一种嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]又称人类疱疹病毒[/font][font=Calibri]4(HHV-4)[/font][font=宋体]；主要通过唾液等传染，是传染性单核细胞增多症的病原体；因[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]一旦入侵机体，可能会对[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞进行诱导，使其转化为恶性肿瘤细胞，所以[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]感染与鼻咽癌、胃癌、淋巴瘤等疾病的发生、发展有密切关系。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]编码多种结构抗原，如病毒衣壳抗原（[/font][font=Calibri]VCA[/font][font=宋体]）、早期抗原（[/font][font=Calibri]EA[/font][font=宋体]）、膜抗原（[/font][font=Calibri]MA[/font][font=宋体]）、核抗原（[/font][font=Calibri]NA[/font][font=宋体]）等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在机体感染[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]后针对不同的抗原会产生相应的抗体，如抗[/font][font=Calibri]VCA[/font][font=宋体]—[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]、抗[/font][font=Calibri]VCA[/font][font=宋体]—[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]、抗 [/font][font=Calibri]EBNA[/font][font=宋体]—[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过对这些[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]特异性抗体进行检测，可以明确目前机体的情况，如对帮助判断是否是原发性[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]感染、或是既往感染等的情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri](igG)[/font][font=宋体]、抗[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]核抗原[/font][font=Calibri](EBVNA[/font][font=宋体]一[/font][font=Calibri]igG)[/font][font=宋体]呈阳性，即提示存在既往有[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒感染，但要明确目前的身体的情况，需要配合[/font][font=Calibri],igM[/font][font=宋体]等其他的结果分析，以明确后续的方向。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前利用[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]细胞分选平台[/b][/url]，义翘神州可向全球客户提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]细胞抗体制备服务[/b][/url]，整个过程涉及单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞分离、测序、克隆和单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体筛选等步骤。详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
[font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体是一种能够特异性结合另一抗体独特位的抗体。独特型由多个抗原决定簇（[/font][font=Calibri]Antigenic determinant[/font][font=宋体]）组成，每个抗原决定簇都是一个独特位。抗原决定簇或独特位可存在于重链可变区，也可存在于轻链可变区，或者存在于两条链组成的表面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体三种类型：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原非中和型[/font][font=宋体]不具有抗体结合区特异性，治疗性抗体仍可与其目标抗原相结合。这种类型的抗独特型抗体可用于检测抗体药物总量。[/font][font=宋体]②抗原中和型[/font][font=宋体]具有抗体结合区特异性，与其目标抗原相互竞争，因此，此类型可用于检测游离型抗体药物。[/font][font=宋体]③药物靶标复合物型[/font][font=宋体][font=宋体]仅特异性地识别抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]靶标复合物，不与未结合的抗体或未结合的目标抗原相结合。这种类型的抗独特型抗体仅能检测结合型抗体药物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体的不同应用[/b][/font][font=宋体]①免疫原性分析[/font][font=宋体][font=宋体]免疫原性分析对于生物药物开发具有重要的意义。几乎所有的生物制药产品（如蛋白、抗体、多肽偶联药物或寡核苷酸等）都会诱导机体内免疫应答，从而导致抗药抗体（[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]）的产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体属于高度特异性[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]。多克隆抗体能较大限度地模拟血样中的真实情况，还具有制备周期较短和成本低的优势。因此，大多数情况下，在分析患者样本中是否存在[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]时，抗独特型多克隆抗体通常用作阳性对照。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）分析[/font][/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体也是药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）分析的关键工具试剂之一。 在临床前研究和临床研究中，[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析可用于评估抗体药物的用药剂量和毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型单克隆抗体特异性强，可作为[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析的检测试剂，用于检测人或动物血清中的抗体药物含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体制备服务[/b][/url]，同时拥有综合性的抗独特型抗体开发平台，涵盖兔多抗、杂交瘤、噬菌体、流式单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞和[/font][font=Calibri]Beacon[/font][font=宋体]单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术，为客户提供更多选择。详情可以关注抗独特型抗体制备服务[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service[/font][/font]
[font=宋体]抗体是生物体内重要的免疫分子，它们能够识别并攻击外部入侵者，如病毒和细菌。在医学、生物学和免疫学等领域，抗体标记与检测技术广泛应用于疾病诊断、治疗监测、药物研发等方面。本文将详细介绍[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记[/b][/url]与检测的种类和方法，包括直接标记、间接标记、免疫荧光、酶联免疫吸附试验等。通过对这些技术的了解和应用，我们可以更好地利用抗体进行疾病诊断和治疗监测，提高医疗水平和治疗效果。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]抗体与标记物[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体广泛应用于多种免疫分析中，用于检测和定量抗原。直接识别抗原的抗体被称为一抗（[/font][font=Calibri]primary antibody[/font][font=宋体]），赋予检测的特异性。同时，在检测中还需加入标记物（详见后文“间接标记法 [/font][font=Calibri]Vs.[/font][font=宋体]直接标记法”），标记物的加入赋予可检测性。表[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]中列出了一些常用的免疫分析技术，及可能使用到的标记物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][table][tr][td][b][font=微软雅黑]免疫分析方法[/font][/b][/td][td][b][font=微软雅黑]标记物[/font][/b][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]免疫印迹[/font][font=微软雅黑](WB)[/font][/font][/td][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]酶[/font][font=微软雅黑](通常为辣根过氧化物酶HRP或碱性磷酸酶AP)[/font][/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]酶联免疫吸附试验[/font][font=微软雅黑](ELISA)[/font][/font][/td][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]酶、生物素[/font][font=微软雅黑]/链亲和素[/font][/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]免疫荧光[/font][font=微软雅黑](Immunofluorescence)[/font][/font][/td][td][font=微软雅黑]荧光染料[/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]免疫组化[/font][font=微软雅黑](Immunohistochemistry)[/font][/font][/td][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]酶、生物素[/font][font=微软雅黑]/链亲和素[/font][/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]流式细胞术[/font][font=微软雅黑](Flow Cytometry)[/font][/font][/td][td][font=微软雅黑]荧光蛋白或染料、串联染料[/font][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]直接检测法 [/font][font=Calibri]Vs.[/font][font=宋体]间接检测法[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]检测技术可分为两大类：直接法和间接法。对于直接检测法，标记物通过共价键连接到一抗上。而对于间接检测法，标记物则是共价连接到与一抗特异性结合的二抗上。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在间接法中，检测由两个部分组成：第一步，用未标记的一抗进行孵育（通常[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]小时），[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]若存在抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]部分抗体与抗原结合，未结合的抗体则通过洗涤去掉，然后加入标记二抗。再次孵育（通常[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]小时），洗涤去掉未结合的二抗。然后对结合在抗体上的标记物进行量化。若有抗原存在时，标记物通常导致有色物质的生成或某一个波长的发射光量增加。当无抗原存在时，则无一抗的结合，也无二抗试剂的结合，因此无信号产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在直接法中，标记物直接与一抗共价结合，因此仅需一轮孵育及洗涤步骤，而间接法则需要两轮孵育及洗涤步骤。直接法简化了试验的流程，但检测的灵活性降低。下表列举出了直接法[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]间接法的主要利弊。[/font][/font][table][tr][td][b][font=微软雅黑]方法[/font][/b][/td][td][b][font=微软雅黑]优点[/font][/b][/td][td][b][font=微软雅黑]缺点[/font][/b][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑]直接法[/font][/td][td][font=微软雅黑]仅需使用一抗，检测快速[/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑]无二抗的非特异性结合[/font][/td][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]由于标记可能导致一抗的免疫反应性降低[/font][font=微软雅黑] [/font][/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑]信号放大作用较弱[/font][/td][/tr][tr][td][font=微软雅黑]间接法[/font][/td][td][font=微软雅黑]一抗含有多个标记，二抗可结合的表位，因而灵敏度升高，信号放大作用较强。[/font][/td][td][font=微软雅黑][font=微软雅黑]二抗可能发生非特异性结合[/font][font=微软雅黑] [/font][/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑]孵育及洗涤步骤增多[/font][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]尽管直接标记法具有诸多潜在的优点，但为何如今众多的免疫分析仍采用间接法原理呢[/font][font=Calibri]?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]无疑，最主要的原因就是直接标记一抗相对较复杂，确实从历来经验看，抗体标记都是由那些具有化学修饰技术的专业人员来完成的。在间接法中二抗试剂所起的信号放大效应究竟如何呢？是否直接标记法所产生的信号就很弱？其实在很多情况下，间接法的放大效应是让人产生错觉的。在与二抗试剂的孵育过程及洗涤过程中，一些一抗会与抗原发生解离，因此真正被放大的只是逐渐减少的一抗的量。其实在很多情况下，直接法也可获得与间接法相同甚至更好的结果。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]常见的抗体标记方法[/font][/b][/font][font=宋体]和所有蛋白质一样，抗体也是由氨基酸组成的。理论上，通过大多数氨基酸可以实现生物偶联。以下内容介绍了几种基于赖氨酸残基的抗体偶联和标记技术。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]（琥珀酰亚胺）酯法[/font][/font][font=宋体]应用广泛的荧光染料（如罗丹明衍生物）是采用这种方法对抗体进行偶联。通常在磷酸盐缓冲液中进行，随后与未标记的染料在柱上进行分离。该方法的主要缺点是，由于酯类对水分敏感，酯类的稳定性差。因此，反应结束后，标记抗体应立即使用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]吉妥珠单抗（[/font][font=Calibri]Gemtuzumab ozogamicin, Mylotarg[/font][font=宋体]）是全球范围内首个获批上市的抗体偶联药物（[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]）。半合成的卡奇霉素衍生物具有[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]酯，以便将卡奇霉素与人源化[/font][font=Calibri]IgG4[/font][font=宋体]的赖氨酸残基偶联。然而，由于患者的临床获益不足，[/font][font=Calibri]Mylotarg[/font][font=宋体]已于[/font][font=Calibri]2010[/font][font=宋体]年退市。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②异硫氰酸盐法[/font][font=宋体][font=宋体]这种方法主要用于异硫氰酸荧光素（[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]）染料的偶联，广泛用于荧光标记蛋白和抗体的制备。异硫氰酸盐比[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]更稳定，但也更难制备，而且利用该方法，标记的反应效率可能会降低。与[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]法一样，应在反应结束后通过层析法去除多余染料。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③碳二亚胺法[/font][font=宋体][font=宋体]碳二亚胺衍生化合物将蛋白质上的羧基转换为反应中间体，可与赖氨酸发生反应。碳二亚胺的高反应性意味着它们可用于使用相对惰性的材料（如磁性或金颗粒）标记抗体。最常用的碳二亚胺为[/font][font=Calibri]EDC[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]有时可被添加至反应中，以辅助产生相对稳定的中间体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]该方法操作简单，但与[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]一样，[/font][font=Calibri]EDS[/font][font=宋体]具有吸水性，因此，标记后抗体需立即使用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④高碘酸盐法[/font][font=宋体][font=宋体]这种方法可用于制备特异性的[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]标记抗体。高碘酸盐通过产生与赖氨酸残基相互作用的醛分子来激活[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]本身只有少量的赖氨酸残基，因此酶聚合的影响不大。[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]和抗体之间的键是可逆的，可通过添加氰基硼氢化钠使其保持稳定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]
猪瘟抗体金标快速检测卡使用说明书【产品用途】本检测卡采用免疫原理和胶体金免疫层析技术制成，用于快速检测猪血液或猪血清中的猪瘟抗体,为国内最新检测试剂。检测时间仅需20 分钟，操作简便、快速、结果准确、直观、灵敏度高、容易判定。当猪瘟抗体滴度达到能抵御猪瘟强毒攻击时，在检测区和对照区各形成一条色线，则视为阳性，抗体滴度越高，检测线颜色越深；当猪瘟抗体滴度达不到抵御猪瘟强毒攻击的抗体滴度时，只在对照区形成一条色线，则视为阴性。本卡附带一张金标试纸与正相间接血凝试验实物参照图，将检测线的颜色深浅与参照图对照，便可粗略估计样品抗体的滴度。【操作步骤】1．打开包装袋，取出检测卡平放在桌面上，并做好标记；2．在检测卡的加样孔内加入2 滴（50-100ul）血液或血清样品；3．在20 分钟内观察和记录结果，超过20 分钟的结果只能作为参考。【结果判定】见右图阳性：在检测区（T）和对照区（C） 各出现一条紫红色线。检测线颜色越深，表明猪瘟抗体滴度越高。弱阳性：在检测区（T）和对照区（C）各出现一条紫红色线，但检测线颜色很浅。阴性：只在对照区（C）出现一条紫红色线。无效：都不出现紫红色线或只在检测区（T）出现紫红色线，对照区（C）不出现紫红色线。【结果参考意义】1．强阳性结果说明猪瘟抗体滴度较高，暂时不必进行猪瘟疫苗的接种免疫；2．弱阳性结果说明猪瘟抗体滴度只达到抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平，这时应该及时进行猪瘟疫苗接种，此时也是猪瘟疫苗接种的最佳时间；3．阴性结果说明机体内无猪瘟抗体或抗体水平低于抵抗猪瘟强毒攻击的最低保护水平，如果动物群体健康，应该及时进行猪瘟疫苗接种。如果动物群体已有个别动物出现疑似猪瘟病时，则可作为诊断猪瘟病的一个参考依据。【注意事项】1．请严格按照说明书要求进行操作和结果判定。2．检测样品可以是猪血液或血清。3．检测卡从铝箔袋取出后应尽快使用，尽量避免长时间放置在空气中，否则吸潮后将失效。4．检测环境应保持一定的湿度，避风和避免在过高温度下进行操作。5．检测卡在室温下保存，如在2-8℃冷藏，使用时需平衡至室温后方可打开包装进行检测操作。【包装规格】单头份铝箔袋包装（内含检测卡、吸管和干燥剂）；50 头份/盒【贮藏和有效期】密封，在干燥处保存；在3-30℃下贮存，有效期为12 个月。
[font=宋体][font=宋体]抗体标记，作为生物学和医学领域的关键技术，它的核心在于将标记物（如酶、荧光素、生物素等）以共价的方式连接到抗体上。这一过程犹如赋予抗体一双[/font][font=宋体]“魔法眼睛”，使其能够精准地识别并结合特定的抗原。抗体与标记物的结合，再与待检测抗原发生特异性反应，形成一种多元复合物。这种复合物的形成，不仅增强了检测的灵敏度，也提高了识别的特异性。这一特性使得抗体标记技术在生物学、医学和生物工程领域中发挥着举足轻重的作用。借助高端的仪器设备，如荧光显微镜、射线测量仪、酶标检测仪、电子显微镜和发光免疫测定仪等，我们能够直接观察或自动化测定试验结果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]这不仅在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上对抗原、抗体反应进行深入的定性和定位研究，还为各种[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]和固相免疫分析方法提供了强大的技术支持，从而在体液中的半抗原、抗原进行精准的定性和定量测定。如今，抗体标记技术已经成为医学病理学、免疫组织化学、分子生物学、生物制药等领域不可或缺的分析与研究工具。而酶标记法、生物素化标记法、荧光素标记法和胶体金标记法等常见的抗体标记技术，更是推动了相关领域的飞速发展。抗体标记技术，不仅为我们打开了一扇探索生物微观世界的大门，更为相关领域的研究与应用提供了强大的技术支持。在未来的生物学、医学和生物工程研究中，抗体标记技术无疑将继续发挥其无可替代的作用。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]常用的抗体标记技术[/font][/b][font=宋体][b][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]抗体的酶标记法[/font][/b][/font][font=宋体]通过共价键经适当方法将酶联结在抗体上，制成酶标抗体，再借酶对底物的特异催化作用，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，这些有色产物可用肉眼、光学显微镜和电子显微镜观查，也可以用分光光度计测定，呈色反应显示了酶的存在，从而证明发生了相应的免疫反应。[/font][font=宋体][font=宋体]实验中使用偶联剂使酶与抗体结合，即通过应用单、双或多功能试剂，分别与大分子的抗体所存在的功能性基团发生反应，生成酶[/font][font=宋体]—抗体偶联复合物。不同的酶—抗体复合物制备方法中，最广泛应用的戊二醛法，本法与其它偶联方法相比，具有操作简单、反应条件温和，及实用面广等长处。[/font][/font][font=宋体]酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体，其次要有良好的制备方法。高质量的抗体则可通过提取纯化而获得。在制备方法上，宜选用产率高、不影响结合物的活性和不混杂干扰性物质且操作简便易行的方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1) [/font][font=宋体]辣根过氧化物酶[/font][font=Calibri](HRP)[/font][/font][font=宋体][font=宋体]辣根过氧化物酶（[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]）标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]的糖基用过碘酸钠氧化成醛基，加入抗体[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]后该醛基与 [/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]氨基结合，形成[/font][font=Calibri]Schiff[/font][font=宋体]氏碱。为了防止[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]中糖的醛基与其自身蛋白氨基发生偶合，在用过碘酸钠氧化前先用二硝基氟苯阻断氨基。氧化反应末了，用硼氢化钠稳定[/font][font=Calibri]Schiff[/font][font=宋体]氏碱。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2) [/font][font=宋体]碱性磷酸酶（[/font][font=Calibri]AKP[/font][font=宋体]）[/font][/font][font=宋体][font=宋体]碱性磷酸酶（[/font][font=Calibri]AKP[/font][font=宋体]）用于标记抗体，常用戊二醛一步法，将酶和单抗混合，再加入适量戊二醛，使酶和抗体蛋白的[/font][font=Calibri]NH2[/font][font=宋体]分别与两个醛基结合，制备成结合物。该法简便，但所得产物不均一，抗体活性损失大，酶标记率低。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]抗体的生物素化标记[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]亲和素与生物素都可与蛋白质[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]包括抗原、抗体、酶等[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、荧光素等分子结合而不影响后者的生物活性，是理想的标记剂。一个抗体分子可偶联数十个生物素或亲和素分子，而亲和素或生物素分子又可与酶或荧光素结合，从而组成一个生物放大系统，显著提高检测的灵敏度。常用的有亲和素–生物素标记法[/font][font=Calibri](Labeled avidin biotin[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]LAB)[/font][font=宋体]、亲和素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]生物素桥法[/font][font=Calibri](bridged avidin biotin, BAB)[/font][font=宋体]和亲和素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]生物素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]过氧化物酶复合物法[/font][font=Calibri](avidin biotin peroxid ase complex[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ABC)[/font][font=宋体]。本实验可使抗体或其它蛋白质的ε[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后，生物素化的分子可应用酶标[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]亲和素或荧光染料[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]链霉亲和素复合物来检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]抗体的荧光标记法[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]荧光抗体标记技术是将荧光素以化学方法与特异性抗体共价结合，形成荧光素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]蛋白质结合物（即荧光标记抗体），此结合物仍保留着抗体活性，同时具有荧光素的示踪作用。当它与相应的抗原特异结合后，借助于荧光显微镜观察呈现明亮的特异荧光。实验中常用异硫氰基荧光黄（[/font][font=Calibri]fluorescein isothiocyanate, FITC[/font][font=宋体]）作为标记物，在碱性溶液中，[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]上的化学基团异硫氰基（[/font][font=Calibri]-N=C=S[/font][font=宋体]）与抗体蛋白自由氨基（主要是赖氨酸的ε[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基）结合，形成荧光抗体，以测定细胞相应抗原的存在。[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]具有很高的量子产量（发射光与吸收光的比值[/font][font=Calibri],0 .85[/font][font=宋体]），而且形成的偶联物的稳定性很好。[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]是应用最广的荧光染料，流式细胞仪就按[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]的特性，设计了激光波长为[/font][font=Calibri]488 nm,[/font][font=宋体]很接近于[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]的最大激发波长[/font][font=Calibri]492nm[/font][font=宋体]）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]免疫胶体金标记抗体及检测抗原[/font][/b][/font][font=宋体]胶体金是一种常用的标记技术，是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能利用到。[/font][font=宋体][font=宋体]胶体金在光镜和电镜中均为有效的标记物，可以检测单一和多重抗原。胶体金在电解质中不稳定，但被蛋白质包被的胶体金是稳定的。一般常用免疫球蛋白或蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]包被胶体金，可作标记二抗进行免疫检测，本方法应用范围广，染色后的样品可以长期保存。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记[/b][/url]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]
[font=宋体]在生物医学研究和治疗领域，[/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production][u][font=宋体][color=#0000ff][b][font=宋体]单克隆抗体（[/font][font=Calibri]mAbs[/font][font=宋体]）[/font][/b][/color][/font][/u][/url][font=宋体][font=宋体]扮演着越来越重要的角色。特别是在癌症和慢性疾病的治疗中，抗体的亲和力[/font][font=宋体]——即其与目标抗原结合的紧密程度[/font][/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]直接影响[/font][font=宋体]抗体药物的[/font][font=宋体]治疗效果。因此，开发一种既准确又可靠的抗体亲和力测定方法，对于提高治疗效率和开发新型抗体药物至关重要。[/font][b][font=宋体]传统[/font][font=宋体]的亲和力测定[/font][font=宋体]技术[/font][/b][font=宋体]目前存在多种测[/font][font=宋体]定[/font][font=宋体]抗体亲和力的方法，如放射免疫[/font][font=宋体]分析[/font][font=宋体][font=宋体]、表面等离子共振（[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]）、流式细胞术[/font][/font][font=宋体]、酶联免疫吸附分析和动力学排阻分析[/font][font=宋体]等[/font][font=宋体]。作为一种成功的候选治疗药物，[/font][font=宋体][font=Calibri]mAbs[/font][font=宋体]必须能识别目标抗原上的天然表位，因此需要一种更加快速灵敏、直观简便的测定方法。[/font][/font][b][font=宋体]基于细胞的荧光法：一种新的[/font][font=宋体]检测[/font][font=宋体]技术[/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Yu[/font][font=宋体]等人在杜克大学医学中心的研究中，开发了一种基于细胞的荧光[/font][/font][font=宋体]检测[/font][font=宋体]法[/font][font=宋体]（如基于细胞的[/font][font=宋体][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]法[/font][/font][font=宋体]）[/font][font=宋体]，用于测[/font][font=宋体]定[/font][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力。这种方法通过使用荧光标记的抗体，并将其加入到固定在[/font][font=Calibri]96[/font][font=宋体]孔板上的抗原阳性和抗原阴性的细胞系中，通过计算特异性结合和非特异性结合的差值来测量抗体的亲和力。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]研究者通过与传统的流式细胞术和放射性（[/font][font=Calibri]I[/font][/font][sup][font=宋体][font=Calibri]125[/font][/font][/sup][font=宋体][font=宋体]）[/font][font=Calibri]Scatchard[/font][font=宋体]分析方法进行比较，验证了基于细胞的荧光法的有效性。结果显示，新方法得到的解离常数[/font][font=Calibri]KD[/font][font=宋体]值与传统方法相当，证明了这一新技术的准确性和可靠性。[/font][/font][font=宋体]此外，研究还展示了如何使用这种荧光法进行竞争性结合分析，进一步验证了抗体与抗原的特异性结合。这一功能对于研究抗体的结合表位和选择高亲和力抗体具有重要意义。[/font][b][font=宋体]基于细胞的荧光法的优势[/font][/b][font=宋体]与[/font][font=宋体]流式细胞术和[/font][font=宋体][font=Calibri]I[/font][/font][sup][font=宋体][font=Calibri]125[/font][/font][/sup][font=宋体]比色法等[/font][font=宋体]传统方法相比，基于细胞的荧光法具有多项优势。首先，该方法不使用放射性同位素，减少了实验的安全风险。其次，使用完整的细胞而非纯化的蛋白质，能够更真实地模拟抗体与天然抗原的相互作用。此外，该方法操作简便，成本低廉，适合高通量筛选，且能够在短时间内完成大量样本的分析。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]尽管基于细胞的荧光法具有诸多优势，但也存在一些局限性。例如，对于复杂样品的处理可能会产生非特异性结合，导致结果的误判。然而，随着技术的不断优化和发展，这些问题有望得到解决。[/font][font=宋体]尽管目前还未有人利用[/font][font=宋体]基于细胞的荧光法[/font][font=宋体]来评估抗体亲和力，但是其自身具备的优势[/font][font=宋体][color=#182026]表明[/color][/font][font='Segoe UI'][color=#182026]该方法具有作为抗体亲和力检测方法的潜力[/color][/font][font=宋体]，为抗体药物的开发和研究提供强有力的支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][/font][font=宋体]本篇[/font][font=宋体]文章[/font][font=宋体]由[/font][font=宋体]义翘神州[/font][font=宋体]编辑[/font][font=宋体]整理[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]同时[/font][font=宋体]义翘[/font][font=宋体]神州[/font][font=宋体]提供[/font][url=https://cn.sinobiological.com/services/spr-bli-assay-services][u][font=宋体][color=#0000ff][b][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]亲和力测定服务[/font][/b][/color][/font][/u][/url][font=宋体]，[/font][font=宋体]详情[/font][font=宋体]请[/font][font=宋体]点击[/font][font=宋体]！[/font][font=宋体][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]参考文献：[/font][font=宋体][font=Calibri]Yu X, Pegram CN, Bigner DD, Chandramohan V. Development and validation of a cell-based fluorescent method for measuring antibody affinity. J Immunol Methods. 2017 442:49-53. doi:10.1016/j.jim.2016.12.004[/font][/font][font=Calibri] [/font]
[font=宋体][font=宋体]目前，用细胞工程制备人单抗在技术上和伦理上都存在一些难题，治疗性抗体的开发就集中在具有治疗前景的鼠源单抗上。但是鼠源单抗对人体具有异源性反应，可诱发人抗鼠抗体效应[/font][font=Calibri](Humananti-mouseantibodies,HAMA[/font][font=宋体]反应[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]，使得单抗的治疗效果明显滞后。随着基因重组技术的发展和人们对抗体结构认识的深入，研究者们尝试对鼠源性抗体进行改造，致力于在保留与抗原结合的高亲和力的基础上，减少异源性抗体的免疫原性，推动抗体人源化研发的进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]人源化抗体主要指以用基因克隆及[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术对鼠源单克隆抗体改造，重新表达产生的抗体。其大部分氨基酸序列被人源序列取代，基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其异源性，有利应用于人体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据人源化程度不同，单抗又可分为[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/chimeric-monoclonal-antibody][b]嵌合抗体[/b][/url][/font][font=Calibri](60%-70%[/font][font=宋体]人源化氨基酸序列[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CDR(complementarity-determiningregion)[/font][font=宋体]移植抗体[/font][font=Calibri](90%-95%[/font][font=宋体]人源化氨基酸序列[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体：[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体[/font][font=Calibri](chimericantibody)[/font][font=宋体]：第一代人源化抗体。其是在基因水平上将鼠源单克隆抗体的[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区和人抗体的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区[/font][font=Calibri](variableregion,[/font][font=宋体]可变区[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]连接，在合适的宿主细胞内表达可得到人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体。嵌合抗体用于人体所产生的[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]反应比鼠源单抗明显减弱[/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]另外，人源[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区[/font][font=Calibri](constantregion[/font][font=宋体]，恒定区[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]可更有效地介导人体一些免疫反应，如[/font][font=Calibri]CDC(complement-dependentcytotoxicity,CDC,[/font][font=宋体]依赖补体的细胞毒性作用[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ADCC(antibodydependentcellmediatedcytotoxicity,[/font][font=宋体]抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]嵌合抗体虽然可以部分解决异种蛋白的排斥问题，但由于其还含有鼠源[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区，依然有可能会诱发[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]反应，干扰抗体疗效，诱发超敏反应，在临床上其应用会受到一定限制。因此人们进一步研究鼠源可变区的改造，研发出了[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植的人源化抗体，即第二代人源化抗体也是现在普遍所说的人源化抗体[/font][font=Calibri](humanizedantibody)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植抗体是研究者们在嵌合抗体的基础上进一步用人源框架区[/font][font=Calibri](Frameworkregion,FR)[/font][font=宋体]替代鼠源框架区[/font][font=Calibri](FR)[/font][font=宋体]，仅保留了[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个鼠源性[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]，其他全部为人源结构，人源性可达[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]以上。但对于特定的抗原分子，[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]并不能随意替换。多方面研究均证实，具有支持作用的[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]不仅为[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的构象提供了环境，有时还参与抗体结合。因此简单的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植往往明显降低抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体结合的亲和力，甚至是丧失抗原抗体结合的能力。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]针对这种状况，目前主要有四种策略：[/font][font=宋体][font=宋体]①同源替换，使用与鼠源对应部分具有较大同源性的[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]进行替换[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]②表面重塑，对鼠源[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]表面氨基酸残基进行重塑，以使其类似于人抗体[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的轮廓或者[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]型式[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]③补偿变化，改编关键位置氨基酸残基，以补偿完全的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]④定位保守，人源化单抗以[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]保守序列为模板进行人源化，但保留鼠源单抗可变区的关键氨基酸残基。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、全人源抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]为了彻底消除异源性抗体的不良影响，[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]年代以后，人们将噬菌体展示技术应用到抗体的表达和克隆上，产生了噬菌体抗体库技术。由此，抗体工程技术进入到了一个新的发展阶段，全人源化抗体的生产和应用也逐渐走向成熟。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]全人源化抗体是指将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术，将人类编码抗体的基因全部转移至基因工程改造的抗体基因缺失动物中，使动物表达人类抗体，达到抗体全人源化的目的。目前已建立多种方法生产完全人源性抗体，主要有噬菌体展示技术、转基因小鼠技术、核糖体展示技术和[/font][font=Calibri]RNA-[/font][font=宋体]多肽技术。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]人源化抗体的应用[/b][/font][font=宋体]目前，人源化抗体在肿瘤，器官移植排斥反应，病毒感染，血液性疾病，自身免疫性疾病等方面的治疗和临床诊断中显示出越来越大的应用前景。[/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、在肿瘤治疗中的应用[/font][/font][font=宋体]近年来，兴起的分子靶向治疗，是根本意义上的肿瘤特异性治疗手段，是以肿瘤抗原特异性结合的单抗为载体，连接放射性核素，化疗药物等对肿瘤有杀伤作用的负载而成的抗体导向疗法。其靶向性好，毒性小等特点，非常适合肿瘤的内放射治疗。采用该技术用于临床的人源性抗体有治疗转移性乳腺癌的赫赛汀，用于治疗结直肠癌的西妥昔单抗等。[/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、自身免疫性疾病治疗[/font][/font][font=宋体]自身免疫疾病多于自身抗体异常增多有关。很多临床研究发现，一些具有免疫疾病的病毒感染患者，体内病毒水平常伴随某些免疫分子水平的升高而升高，因此很多免疫分子的人源化抗体在此类病毒的治疗中显示出很好的效果。[/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、病毒感染中的应用[/font][/font][font=宋体]病毒感染几乎无特效药，现有的核苷酸类抗病毒药物效果并不理想，且毒副作用大，单抗治疗因其针对性强，和相对比较安全，已越来越多研究者将其应用于抗病毒的治疗中。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化服务[/b][/url]，详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service[/font][/font]
[font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体是能够识别抗体可变区独特型，并产生特异性结合的抗体。抗独特型抗体根据结合表位的不同，可以分为竞争型（抗原阻断型）和非竞争型（抗原非阻断型）两种。抗独特型抗体作为有目的制备的抗抗体，是抗药抗体（[/font][font=Calibri]Anti-drug antibody[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]）检测参照的最佳选择，在免疫原性分析中发挥着重要作用。并且因其特异性结合表位不同，可用于检测血液中抗体药物的含量，在抗体药物的药代动力学分析中起着重要作用。[/font][/font][font=宋体][b][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]抗独特型抗体的种类[/font][/b][/font][font=宋体]抗独特型抗体包括多克隆抗体和单克隆抗体，在药物研发过程中，需根据综合实验目的和具体需求，选择合适的抗体类型。抗独特型单抗表位单一、特异性好，制备过程长，成本相对较高，但一旦制备成功，就可以获得稳定性高的抗体，具有更高的实用性。抗独特型多抗制备周期短、成本低，但特异性差、稳定性低。单抗靶向单一表位，不能反映血液样本的整体情况，而多抗可以模拟血液样本的整体情况，可以说两种类型的抗独特型抗体各有优劣。[/font][font=宋体][b][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]抗独特型抗体的特殊性[/font][/b][/font][font=宋体]抗独特型抗体一旦被筛选出来就可以大量生产制备。由于其模仿天然抗原的抗原决定簇，具有天然抗原的免疫原性和反应原性，而没有其他性质，因此在疫苗预防接种和病毒性传染病流行病的免疫学诊断中具有优势。抗独特型抗体来自同一克隆抗体，具有高度的均一性和同质性，在临床应用上具有更大的稳定空间和可靠性。抗独特型抗体仅仅是抗原结合区域的互补体，使其比天然抗原具有更大的多样性和特异性。[/font][font=宋体]正是由于抗独特型抗体能够在体内模拟抗原这一特性，将其作为替代物不仅可用于抗体药物的药代学研究，并且在免疫学、传染病预防和恶性肿瘤的治疗等各方面研究中都有重大研究进展。[/font][font=宋体][font=宋体]比如利用抗独特型抗体模拟肿瘤相关抗原，如[/font][font=Calibri]CEA[/font][font=宋体]抗原、结肠癌、肺癌等相关肿瘤抗原而诱导产生细胞免疫反应，或者制备针对肿瘤细胞表面[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]的抗独特型抗体，让其与抗肿瘤药物结合，制备高特异性的定向作用于肿瘤细胞的“生物导弹”。还有由于抗独特型抗体本身非抗原物质，也不含传染性物质，但能够代替抗原免疫动物产生免疫应答，是一种理想的疫苗材料，这对新冠病毒疫苗的开发也要潜在意义。模拟[/font][font=Calibri]HBV[/font][font=宋体]和血吸虫相关抗原的抗独特型抗体在疾病诊断上已经得到较好的应用，显示出与原抗原相似的敏感性和特异性。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体制备比普通抗体困难，因为它属于抗抗体。抗体的独特型存在于高变区，相较于[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]端，免疫原性较弱。在免疫过程中需要兼顾抗独特型抗体对抗体药物的识别能力，还需降低非特异型区域的免疫反应，一般可通过选择合适的免疫原、免疫周期及佐剂等方法提供目的片段的免疫原性。 [/font][/font][font=宋体]义翘神州具有十多年的抗体制备经验，拥有电融合、快速抗体制备。核酸细胞免疫等技术平台，已完成大量抗独特型抗体的制备项目。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]那么抗独特型多克隆抗体和单克隆抗体该如何选择？[/b][/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型单克隆抗体主要用于检测抗体类药物的血药浓度水平，在抗体药的[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]PD[/font][font=宋体]检测广泛使用，另外，也可以用在免疫原性（[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]）评价中。抗独特型多抗直接由抗血清纯化获得，能够更好地模拟受试者血样中的真实情况，所以考虑到受试者血样中抗药抗体类型的多样性，抗独特型多抗主要用于抗体类药物的免疫原性评价。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州已成功完成了[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]多个抗独特型单抗和多抗开发项目，成功率[/font][font=Calibri]95%[/font][font=宋体]，并制备了大量高亲和力、高特异性的抗独特型抗体，充分地满足客户的[/font][font=Calibri]PK/ADA[/font][font=宋体]检测需求。[/font][/font][table][tr][td][b][font=Helvetica][color=#232323]项目[/color][/font][/b][/td][td][b][font=Helvetica][color=#232323]Anti-ID 单克隆抗体[/color][/font][/b][/td][td][b][font=Helvetica][color=#232323]Anti-ID 多克隆抗体[/color][/font][/b][/td][/tr][tr][td][font=Helvetica][color=#232323]主要应用范围[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]PK检测、PD检测、免疫原性评价[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]免疫原性评价[/color][/font][/td][/tr][tr][td][font=Helvetica][color=#232323]制备周期[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]12~24周[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]8~13周[/color][/font][/td][/tr][tr][td=1,3][font=Helvetica][color=#232323]优势[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]? 单一表位[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]? 可以模拟血样中真实情况[/color][/font][/td][/tr][tr][td][font=Helvetica][color=#232323]? 特异性好[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]? 制备周期相对较短[/color][/font][/td][/tr][tr][td][font=Helvetica][color=#232323]? 批次间稳定性好[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]? 成本低[/color][/font][/td][/tr][tr][td=1,3][font=Helvetica][color=#232323]劣势[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]? 制备周期长[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]? 特异性偏低[/color][/font][/td][/tr][tr][td][font=Helvetica][color=#232323]? 成本相对较高[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]? 批次间稳定性低 [/color][/font][/td][/tr][tr][td][font=Helvetica][color=#232323]? 不能反映血液样本的真实情况[/color][/font][/td][td][font=宋体] [/font][/td][/tr][tr][td=1,2][font=Helvetica][color=#232323]服务套餐[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]? 抗独特型鼠单抗开发服务（常规、快速免疫）[/color][/font][/td][td=1,2][font=Helvetica][color=#232323]抗独特型兔多抗开发服务（常规、快速免疫）[/color][/font][/td][/tr][tr][td][font=Helvetica][color=#232323]? 抗独特型兔单抗开发服务（常规、快速免疫）[/color][/font][/td][/tr][tr][td=1,2][font=Helvetica][color=#232323]服务保证[/color][/font][/td][td][font=Helvetica][color=#232323]? 竞争型和非竞争型抗体；[/color][/font][/td][td=1,2][font=Helvetica][color=#232323][font=Helvetica]交叉反应率[/font]2%，最低可做到无交叉[/color][/font][/td][/tr][tr][td][font=Helvetica][color=#232323]? 配对抗体[/color][/font][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体制备服务[/b][/url]，更多服务详情可以参看[/font][font=Calibri]:https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]
[font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/anti-idiotype-antibody][b]抗独特型抗体[/b][/url]是一种能够特异性结合另一抗体独特位的抗体。独特型由多个抗原决定簇（[/font][font=Calibri]Antigenic determinant[/font][font=宋体]）组成，每个抗原决定簇都是一个独特位。抗原决定簇或独特位可存在于重链可变区，也可存在于轻链可变区，或者存在于两条链组成的表面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体在治疗性抗体药物开发过程中有着非常广泛的应用。由于抗独特型抗体与抗药抗体（[/font][font=Calibri]Anti-drug antibody, ADA[/font][font=宋体]）之间的相似性，抗独特型抗体在免疫原性（[/font][font=Calibri]Immunogenicity[/font][font=宋体]）分析中可作为阳性对照用于抗药物抗体总量的测定。另外，在抗体药的药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）和药效学（[/font][font=Calibri]PD[/font][font=宋体]）分析中，抗独特型抗体可用于检测血液中抗体药物的含量（游离型、结合型和总量）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体的不同应用[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）分析[/font][/font][font=宋体][font=宋体]药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）描述并表征了药物在人或动物体内的四个不同阶段：吸收、分布、代谢和排泄（也称为[/font][font=Calibri]ADME[/font][font=宋体]）。在药物开发中，[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析提供了药物与身体相互作用以及疗效强度和疗效持续时间的基本信息。在开发生物仿制药时，需要通过比较[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析来评价与原研药在生物活性的潜在差异。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据结合模式和性质的不同，抗独特型抗体可分为三种类型：抗原阻断型、抗原非阻断型和药物靶标复合物型。基于这些特点，可以建立不同形式的[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]检测，以测量血清中的抗体药物含量，包括游离型、结合型或总量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体可用于定量检测动物或人血清中的抗体药物水平，是[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]研究的关键检测试剂。抗体药物定量分析有多种分析方法，其中[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]为最常用的形式。在抗独特型抗体捕获[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]中，将抗独特型抗体包被在平板上，再将含有抗体药物的样本加入系统中，然后用特异性结合药物的标记抗独特型抗体定量抗体药物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②免疫原性[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]抗药抗体（[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]）检测[/font][/font][font=宋体][font=宋体]免疫原性评价主要采用抗药抗体（[/font][font=Calibri]anti-drug antibody, ADA[/font][font=宋体]）分析的方法进行，这是治疗性蛋白药物（如单克隆抗体、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]和融合蛋白）开发过程中的关键步骤。在这些情况下，通常采用多层次递进式进行（图[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]）。该方法首先采用高灵敏的筛选试验鉴别阳性抗体样本，使用验证性试验尽量减少假阳性结果，然后使用表征试验评估抗体的中和能力。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在整个过程中，抗独特型抗体是必要的试剂。检测[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]的检测方法有多种，包括[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、放射免疫沉淀法（[/font][font=Calibri]RIPA[/font][font=宋体]）、表面等离子体共振（[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]）和电化学发光检测（[/font][font=Calibri]ECL[/font][font=宋体]）。其中，桥联[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]是最常用方法，可用于检测所有[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]同种型（[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等）。在典型的桥联[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]中，将抗体药物预包被在平板上，并将标记的抗体药物与患者样本一起孵育，以检测是否存在[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]（图[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]）。抗独特型抗体将用作阳性对照或参比标准品，用于样本中[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]的定性分析。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体制备[/b][/url][b]套餐[/b][/font][font=宋体][font=宋体]为支持药物开发，义翘神州为客户提供了从抗原制备、抗独特型抗体开发到检测方法建立和试剂盒开发的全方位、一站式的定制抗独特型抗体生产服务。我们拥有丰富的开发经验，包括不同抗体类型如全长[/font][font=Calibri]mAb[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]F(ab')2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]bsAb[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白等。定制的抗独特型抗体可用于建立药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）[/font][font=Calibri]/ADA[/font][font=宋体]检测方法，以测定样本中的特异性抗体药物或[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]水平。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]服务：[/font][font=宋体]①抗独特型兔多抗制备服务[/font][font=宋体]交付内容：[/font][font=宋体]? 纯化抗体[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]CoA[/font][/font][font=宋体][font=宋体]周期：[/font][font=Calibri]2-3[/font][font=宋体]个月[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②抗独特型鼠单抗制备服务[/font][font=宋体]交付内容[/font][font=宋体][font=宋体]? 阳性克隆，[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]管细胞[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]克隆[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 纯化抗体，[/font][font=Calibri]10 mg/[/font][font=宋体]克隆[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]抗体对（可选）[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]CoA[/font][/font][font=宋体][font=宋体]周期：[/font][font=Calibri]4~6[/font][font=宋体]个月[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/anti-idiotype-antibody[/font][/font]
[font=宋体]抗体偶联是一种技术，它将抗体与另一种物质（如药物、毒素、荧光染料等）连接在一起，形成偶联物。这种偶联物可以用于治疗或诊断目的。在抗体偶联过程中，抗体的特异性结合能力被用来识别和结合靶细胞或靶分子，而偶联的物质则可以发挥治疗、标记或杀伤作用。抗体偶联技术在肿瘤治疗、免疫疗法、诊断试剂等领域有广泛应用。例如，在肿瘤免疫治疗中，抗体偶联技术可以用来制备抗体药物，通过结合肿瘤细胞表面的抗原，实现定向药物治疗，提高疗效并降低副作用。总之，抗体偶联技术是一种利用抗体的特异性识别能力与其它物质的特定功能相结合，实现定向治疗或诊断的技术。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体药物偶联物[/font] [font=Calibri](antibody-drug conjugate[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ADC)[/font][font=宋体]是一种生物技术药物，它通过将具有生物活性的小分子药物连接到[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production][b]单克隆抗体[/b][/url]上，利用单抗的特异性识别能力，将小分子药物精确地导向到目标细胞中。这样既提高了药物的疗效，又降低了对其他细胞的损伤。[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]在癌症治疗等领域有广泛应用前景。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体偶联物研究前景如何？[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]一、肿瘤治疗领域[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体偶联物在肿瘤治疗领域具有巨大的潜力。利用抗体偶联物将药物定向输送至肿瘤细胞，可以实现对肿瘤的精准打击，提高疗效并降低副作用。随着免疫疗法的兴起，抗体偶联物在免疫治疗中也发挥着越来越重要的作用。例如，免疫检查点抑制剂、[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞疗法等免疫治疗方法中，抗体偶联物成为了重要的组成部分。未来，随着抗癌药物研发的不断推进，抗体偶联物在肿瘤治疗领域中的应用将更加广泛。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二、诊断领域[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体偶联物在诊断领域也有广泛的应用前景。通过将抗体偶联物与荧光染料、放射性同位素等标记物结合，可以对疾病进行灵敏、特异的诊断。例如，在免疫组织化学、[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光染色[/b][/url]等病理学诊断中，抗体偶联物被广泛应用于标记抗原，提高检测的敏感性和特异性。此外，抗体偶联物还可以用于制备免疫检测试剂盒，用于临床检验和科研实验。未来，随着诊断技术的发展和个性化医疗的需求，抗体偶联物在诊断领域的应用将更加多样化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]三、细胞疗法和基因治疗领域[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]随着基因工程和细胞疗法的不断发展，抗体偶联物在细胞治疗和基因治疗等领域也展现出巨大的潜力。例如，将抗体偶联物与细胞因子、生长因子等结合，可以实现对细胞生长、分化的调控，为细胞疗法和再生医学提供新的手段。此外，抗体偶联物还可以用于基因治疗的靶向输送，提高基因治疗的效率和安全性。未来，抗体偶联物在细胞疗法和基因治疗领域中的应用将不断拓展，为疾病的治疗提供更多的可能性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]四、技术进步和应用拓展[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体偶联物的应用前景还与其技术进步密切相关。随着抗体工程、连接子技术和药物递送技术的不断发展，抗体偶联物的稳定性、活性和靶向性将得到进一步提高。此外，随着生物技术的不断创新，抗体偶联物的研究也将不断拓展新的应用领域。例如，利用抗体偶联物进行体内成像、药物研发和疫苗开发等领域都可能取得重要进展。总之，抗体偶联物的研究前景非常广阔，随着技术的不断进步和应用领域的拓展，相信抗体偶联物将会在未来的生物医学领域中发挥更加重要的作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/recombinant-antibody-overview][b]重组抗体[/b][/url]详情可以参看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/recombinant-antibody-overview[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]
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