分光光度法测定亚硝酸盐氮标准

[font=&] 各位老师，本人小白一枚，由于中心近期进行扩项，需进行食品中亚硝酸盐检测方法验证，[/font][font=&] 在购买有证标准物质（卤肉基质）时，只能买到硝酸盐/亚硝酸盐混标，（供货商有限制）[/font][font=&] 请问：（1）这个混标中硝酸盐对于GB5009.33第二法分光光度法测定食品中亚硝酸盐有影响吗？[/font][font=&] （2）能直接用混标（硝酸盐、亚硝酸盐）来进行GB5009.33第二法分光光度法亚硝酸盐测定方法验证吗？[/font][font=&]谢谢各位老师[/font]

用分光光度法测水中亚硝酸盐氮（GB-7493-87）其中用高锰酸钾标定亚硝酸氮标准储备液时，消耗的高锰酸钾标准溶液总用量是仅指滴定时消耗的量，还是要加上先加入锥形瓶的50毫升高锰酸钾？因为是刚接触这个项目，以前没人做过，也没有任何的经验，所以上来问问各位，请赐教！谢谢。

锅炉用水和冷却水分析方法 亚硝酸盐的测定 紫外分光光度法GB/T 6912-2008求一个这个这个标准中的紫外分光光度法的标准曲线！在线急等谢谢!!!!

锅炉用水和冷却水分析方法 亚硝酸盐的测定 紫外分光光度法GB/T 6912-2008求一条这个标准中的紫外分光光度法的标准曲线！在线急等谢谢!!!!

[摘要] 叙述了以盐酸-氨水缓冲溶液为介质，以磺胺和N-1-萘基-乙二胺二盐酸盐为显色剂直接测定乳与乳制品中亚硝酸盐的双光束分光光度法。由光谱分析得最大吸收波长为538nm，以滤液为参比，有效的消除了干扰，方法简便、快速。对6个样品进行了测定，测定结果与国标方法基本一致。相对标准偏差为4.76%~2.50%之间，回收率在95.36%~104.63%之间。 关键词：双光束分光光度 亚硝酸盐 乳与乳制品亚硝酸盐广泛存在于自然界，在乳与乳制品中都有一定的含量。现已证明，亚硝酸盐与食品中固有的胺类化合物是产生致癌物质-亚硝胺的前体物质，是潜在的致癌物质，亚硝酸盐含量过高会引起高铁蛋白症。因此，对乳与乳制品亚硝酸盐含量的检测和控制是非常有必要的。在乳与乳制品测定亚硝酸盐的过程中，将样品沉淀脂肪和蛋白质后，进行过滤。在滤液中加入磺胺和N-1-萘基-乙二胺二盐酸盐，使其显粉红色，然后用分光光度计在其最大吸收波长538nm下测定其吸光度。将测得的吸光度与亚硝酸钠标准系列溶液的吸光度进行比较定量。1 主要试剂和仪器1.1仪器：UV-2550型紫外可见分光光度计（岛津有限公司）1.2试剂：标准亚硝酸盐溶液：GBW（E）0802230504水中亚硝酸盐-氮,浓度：100mg/mL,并逐级稀释为0.9857μg/mL的标准贮备液；硫酸锌溶液：535g/L 亚铁氰化钾溶液：172g/L 盐酸-氨水缓冲溶液：pH9.6~9.7；显色液1：盐酸：水= 450：550（V：V）盐酸溶液；显色液2：5g/L磺胺溶液；显色液3：1g/L萘胺盐酸盐溶液。试验中所用试剂均为分析纯，所用水为去离子水。2 试验方法2.1入射光波长的选择国标《GB/T5413.32-1997 乳粉 硝酸盐、亚硝酸盐的测定》中规定最大吸收波长为538nm，但在实验过程中，做光谱扫描时，最大吸收波长往往因为样品的不同而发生变化，发上红移或蓝移的现象。考虑到测定的灵敏度，应采用最大吸收波长作为入射光波长。所以，在进行定量分析之前，应先才用光谱扫描进行峰形和峰位的确认。以表1的仪器条件，对亚硝酸盐标准系列进行扫描，光谱图如图1。图1中曲线均比较平滑，为了消除干扰组分的吸收，采用“吸收最大，干扰最小”的原则，即所选择的测定波长处待测组分的吸收最大，但干扰组分的吸收最小；从消除非单色光引起的对郎伯比尔定律的偏离角度考虑，应选用吸收曲线比较平坦部分对应波长的光作为入射光波长。综上所述，应选择图1中538nm作为入射光波长，与国家标准一致。表1 仪器条件波长扫描范围/nm420~650光谱带宽/nm0.5采样间隔0.5扫描速度中速 图1 标准系列吸收光谱图 2.2标准曲线　 标准曲线的绘制：取 6个50mL容量瓶，分别加入浓度为0.9857μg/mL的亚硝酸钠标准贮备液0.0，0.5，1.0，2.0，5.0，10.0mL，加水至20mL，然后依次加入3mL显色液1，2.5mL显色液2，混合均匀后，静置5min,加1mL显色液3, 静置5min，用去离子水定容至刻度,此溶液浓度分别为0.00、9.86、19.72、59.14、98.56、197.14μg/L。静置5min后于538nm处，用１cm比色皿进行测定，并以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线(见图2)。 图2 亚硝酸盐标准曲线 标准曲线方程为A=0.0011C-0.0005，相关系数r2=0.9999。2.3样品测定2.3.1 样品前处理称90.0g左右牛乳样品，按顺序加入25mL硫酸锌溶液，25mL亚铁氰化钾溶液，40mL盐酸-氨水缓冲溶液，每加一种试剂充分混合，用去离子水定容于250mL容量瓶中，静置40min,用定性中速滤纸过滤后收集滤液。2.4.2样品测定移取20mL滤液于50mL容量瓶中，加3mL显色液1，2.5mL 显色液2，摇匀，静置5min；加1mL显色液3，静置5min，定容后静置5min，上机测定。3结果与讨论干扰消除一般有两种方法，一类是不分离的情况下消除干扰，另一类是分离杂质消除干扰。因为在分离过程中，会造成硝酸盐和亚硝酸的损失，所以一般在不分离的情况下消除干扰。本试验采用双光束分光光度法，在不分离的情况下消除干扰。3.1在样品前处理后，在滤液中的某些成分影响被测组分吸光度时，将构成干扰，影响测量结果的准确性。干扰离子与试剂生成有色配合物，使测定结果偏高；干扰离子与试剂反应，生成的配合物虽然无色，但消耗大量的显色剂，使被测离子的显色反应不完全，使测定结果偏低；与被测离子结合成离解度小的另一种化合物，使被测离子与显色剂不反应，使测定结果偏低。加入盐酸-氨水缓冲溶液，控制溶液的酸度，从而有效的消除了干扰。因为控制溶液酸度在一定范围，可以使亚硝酸盐与显色剂反应，干扰离子不能生成有色化合物。3.2选择适当的参比溶液，消除显色剂本身颜色和某些共存的有色离子的干扰。干扰离子本身有颜色，使测定结果偏高； 本试验选择溶剂参比和试液参比分别进行考察：溶剂参比：当显色剂及其他溶剂均无色，被测溶液中又无其他有色离子时，可用溶剂-去离子水做参比溶液。试液参比：显色剂无色，被测溶液中有其他有色离子，可采用不加显色剂的被测溶液做参比溶液。 以去离子水作溶剂参比，只能消除吸收池壁对光的反射和散射所带来的干扰；以被测溶液作试液参比，不仅能消除吸收池壁对光的反射和散射带来的干扰，还能消除滤液中共存离子对光的选择性吸收所带来的干扰。所以采用不加显色剂的滤液作试液参比。 3.3选择适当的波长消除干扰。入射光波长的选择必须从灵敏度与选择性两方面来考虑，从吸收曲线的峰形来看，无杂峰干扰，应选择最大吸收波长进行测定，这样灵敏度高，偏离郎伯-比尔定律的程度较小。本实验通过光谱扫描，从吸收光谱图上测定最大吸收波长后进行定量分析，避免了波长偏差带来的误差和干扰。3.4精密度试验分别称取纯牛乳﹑原味酸牛乳﹑全脂乳粉和乳清蛋白粉样品，用上述方法进行测定，计算结果见表2：（单位：μg/L）表2精密度试验 n=6样品名称测定值范围/mg• kg-1平均值/mg• kg-1标准偏差S相对标准偏差RSD/%纯牛奶0.21~0.220.210.0104.76原味酸牛奶0.31~0.350.330.0144.06全脂奶粉1.08~1.171.120.0312.79乳清蛋白粉2.41~2.592.500.0622.503.5加标回收率试验在纯牛乳﹑原味酸牛乳﹑全脂乳粉和乳清蛋白粉样品中，分别吸取0.50，1.00，1.50，2.00mL 浓度10mg/mL的标准亚硝酸盐溶液进行加标回收试验，结果见表3。表3加标回收率试验样品名称本底值/ mg• kg-1样品质量/g加标量/ mg• kg-1测定值/ mg• kg-1回收率/ %纯牛奶0.21 90.200 0.055 0.268 104.63原味酸牛奶0.33 71.300 0.140 0.471 97.68全脂奶粉1.12 10.234 1.466 2.624 102.34乳清蛋白粉2.50 5.145 3.887 6.203 95.364．结论双光束分光光度法测定纯牛奶中的亚硝酸盐，灵敏度高，检出限低，选择性强，准确可靠，有效的消除了共存离子干扰，测定方法简便，快速。参考文献：[1] 国标GB/T5413.32-1997 乳粉 硝酸盐、亚硝酸盐的测定[2] 国标GB/T5009.33-2003 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定[3] 杜岱春，分析化学，复旦大学出版社，1993[4] 黄伟坤等，食品检验与分析，中国轻工业出版社，1989.1[5] 张振辉，张改兰，痕量分析，1989.1

食品－亚硝酸盐测定－分光光度法1 适用范围本方法适用于食品中亚硝酸盐的测定。2原理本文利用邻氨基苯甲酸作重氮化试剂，间笨二酚为偶联剂，测定水、土壤和肉制食品中的亚硝酸盐。反应生成的偶氮染料呈亮黄色，产物的最大吸收波长为435nm，摩尔吸光系数为3.52´104 L·mol－1·cm－1。3试剂NaNO2标准贮备液：准确称取0.7500克NaNO2(100℃干燥3小时)，溶于去离子水中定容至500ml，此浓度为2.17´10－2mol/L，低浓度标准液用此溶液稀释；邻氨基苯甲酸溶液2.0´10－2mol/L；间苯二酚溶液1.2´10－2mol/L；NaOH溶液6.0mol/L，EDTA溶液2.0´10－1mol/L。4仪器分光光度计；酸度计。5操作步骤取一定体积(不超过5.00ml)的含0－50μgNO-2溶液至已盛有20ml去离子水的50ml容量瓶中，加入0.5ml邻氨基苯甲酸、2.0ml盐酸，轻摇后加入0.5ml间苯二酚，2.5mlNaOH，稀至刻度，摇匀，在435nm波长下以试剂空白为参比，用2cm比色皿测量其吸光度。

最近在做面条中的亚硝酸盐，我们采用GB/T 5009.33的分光光度法测定，在加入乙酸锌亚铁氰化钾之后静置2h后都无法得到澄清液，过滤之后都是乳白色的溶液，根本无法上分光光度计测定。我想问一下大家有没有遇到这种情况啊？

亚硝酸盐氮用分光光度法空白有是不是只能是0.000不能有值呀？

[b][size=4][color=red][marquee]欢迎大家前来与zhouyuhu版主一起关于“分光光度法测定乳与乳制品中硝酸盐和亚硝酸盐的含量及干扰消除方法”一起交流~！活动时间：2009年11月11日——23日[/marquee][/color][/size] [/b][color=#fff8dc]00[/color][size=5][b][center]【线上讲座19期】分光光度法测定乳与乳制品中硝酸盐和亚硝酸盐的含量及干扰消除方法[/center][/b][/size][b][center]主讲人：zhouyuhu[/center][/b][color=#00008b][center]活动时间：2009年11月11日—23日[/center][/color][center][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191651_625854_1622715_3.gif[/img][/center]叙述了测定果酱中亚硝酸盐的双光束分光光度法。采用双光束分光光度法,有效的消除了果酱滤液中的色素干扰。精密度和准确度试验都表明:该方法准确可靠.1、概述：硝酸盐与亚硝酸盐在乳品中的含量及对人体的危害2、不同类别的乳制品选择的称样量的原则及经验3、前处理方法的优化研究4、分光光度计仪器性对测定的影响5、标准曲线的制作方法及选择原理6、上机应该注意的问题7、镉柱的装填对硝酸盐还原的影响及填充方法8、计算中存在的问题及解决方案9、总结[center][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191651_625854_1622715_3.gif[/img][/center][color=#dc143c][b]交流切磋时间：即日起至2009年11月23日[/b][/color][b]特邀佳宾：[/b]食品版区的全体版主：[color=#dc143c]tonyding、 rnjm yy_0324、hotdoglet 、realtiger、 watericecat 、sdzx888、mifeng7530、 lifen4607 、qhdzn 、ynsfeed、emoc98311、03yx2、 hgycook 、haoyuaimama、 xy4585618[/color]；食品版区的全体专家：[color=red]elixirqin、163xin、mcds、pingguwu、sharkwein、sujianfeng、Yt456net、jssyjcs、gase001[/color][b]参与人员：[/b]仪器论坛全体注册用户[b]活动细则：[/b]1、请大家就[b]乳与乳制品中硝酸盐和亚硝酸盐检测时[/b]遇到的相关技术问题进行提问，直接回复本帖子即可，自即日起提问截至日期2009年11月23日2、凡积极参与且有自己的观点或言论的都有积分奖励（1-50分不等），提问的也有奖励[u][b]3、提问格式：[/b][/u]为了规范大家的提问格式，请按下面的规则来提问 ：[color=#dc143c]zhouyuhu版主您好！我有以下问题想请教，请问：……[/color][center][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191651_625854_1622715_3.gif[/img][/center][b]讲座详细内容将于16日贴出，敬请关注！[/b]

在今年年初的肉制品中亚硝酸盐检测的能力验证中，我们的结果是离群值，而且离得很离谱，在分析原因的过程中我们考虑到了标准物质的使用是否正确，当时我们是购买了液体的20ml一瓶的标准溶液，名称是亚硝酸盐标准物质以亚硝酸根计，标准上说用固体的亚硝酸钠配制，还有我在购买这个标准物质的时候还有一种标准溶液是亚硝酸盐以氮计，这让我很迷惑，到底哪种标准物质适合这个检测方法呢？希望前辈指点。以亚硝酸根计、以氮计、亚硝酸钠计之间是该怎么换算呢？

用这个新标准做蔬菜亚硝酸盐后，发现如果按照分光光度法实验的话，根据限量回算，好像限量值在0.0~1.0ug的标准曲线范围内，是不是公式中测定用样夜体积可以理解为40ml，式样处理液总体积为500ml呢？

第19期线上讲座正在进行，欢迎大家前去讨论本期话题：分光光度法测定乳与乳制品中硝酸盐和亚硝酸盐的含量及干扰消除方法活动地址： http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20091111/2205881/主讲人：zhouyuhu

昨天测一样品中亚硝酸盐含量，剪碎称样超声过滤离心等等后过膜进样，标准系列为0.05、0.10、0.20mg/L，线性良好，检测结果为未检出，但是包装上标明含亚硝酸盐，所以今天有用分光光度法测了一遍，前处理为加硼砂溶液后沸水浴，沉淀蛋白后过滤，显色标准系列浓度也是0.02-0.20mg/L，做出来样液中为0.04mg/L，为什么结果差异这么大，难道是处理方法不一样，国标方法不会有问题吧

[color=#444444]本人多次用分光光度法测过肉制品的亚硝酸盐含量，发现制作标准曲线时，每次测定加入0.2ml亚硝酸钠标准使用液的那个标准管的吸光度偏低，而加入0.4ml的那个标准管吸光度偏高，每次制作的标准曲线惊人地相似，今天甚至加0.2ml的那个标准管吸光度甚至低于空白管的吸光度，可是明明加0.2ml的那个标准管略呈现粉红色，而空白管的那个肉眼看就是无色（与零管一样）呀，测了多次都是这样，难道分光光度计有问题，去年才新买的呀。望老师解答一下。[/color]

[color=#444444]本人多次用分光光度法测过肉制品的亚硝酸盐含量，发现制作标准曲线时，每次测定加入[/color][color=#444444]0.2ml[/color][color=#444444]亚硝酸钠标准使用液的那个标准管的吸光度偏低，而加入[/color][color=#444444]0.4ml[/color][color=#444444]的那个标准管吸光度偏高，每次制作的标准曲线惊人地相似，今天甚至加[/color][color=#444444]0.2ml[/color][color=#444444]的那个标准管吸光度甚至低于空白管的吸光度，可是明明加[/color][color=#444444]0.2ml[/color][color=#444444]的那个标准管略呈现粉红色，而空白管的那个肉眼看就是无色（与零管一样）呀，测了多次都是这样，难道分光光度计有问题，去年才新买的呀。望老师解答一下。[/color]

摘要 综述了近年来环境中硝酸盐和亚硝酸盐光谱法测定的研究进展，包括原理、测定参数及其适用范围等。并对各种光谱法的优缺点作了评述。 1 引言亚硝酸盐是潜在的致癌物质，人体摄入的硝酸盐含量过高可能使血液中的变性蛋白增加。在环境监测中，硝酸盐和亚硝酸盐是重要的分析项目。光谱法测定NO3--N、NO2--N 是最常用、最普通的方法，容易满足测定要求，且限制较少。本文通过对多种硝酸盐、亚硝酸盐的光谱测定法（分光光度法、化学发光法、荧光法、催化动力学法、红外线法、电子顺磁共振法等）进行评价，指出了不同光谱法的优点及其适用范围的限定，并推荐了几种典型的、有代表性的硝酸盐、亚硝酸盐的光谱测定法。 2 分光光度法2.1可见分光光度法光谱法中最常用的测定亚硝酸盐的方法是Griess法。NO2-在酸性条件下与偶氮反应生成红色的偶氮苯，偶氮在500～600nm有最大吸收光谱（若所选择的反应物不同，最大吸收光谱也有所不同）。目前，使用得最多的反应剂是磺胺和N-1-盐酸奈乙二胺，在540nm处比色测定。因所选择的反应剂不同，Griess 法的测定极限是0.02～2μmol/L。Griess法测定NO2-具有高灵敏性、高准确度和再现性的特点，且方法简单有效，但在复杂介质中测定会受到影响。用Griess法测定NO3-时，必须先将NO3-还原为NO2-，再用Griess法测定NO2-的含量。近年来，许多学者对Griess法进行了改进，使其操作更为简便，灵敏性更高。姚庆祯等[1]采用超声波振荡法，并对锌－镉法测定硝酸盐的试验条件进行了改进，方法的精密度和回收率都较好，可用于江河水、雨水、海水等天然水体中硝酸盐的测定。周本军等[2]采用固体格氏试剂快速测定水中的亚硝酸盐氮，与液体试剂法相比效果相同，且固体格氏试剂法简化了操作手续，减轻了工作人员的工作强度，降低了分析成本，减少了试剂损耗，另外，配成的固体试剂可长期保存，随时可以适用，更适合大批水样的测定。王海鹰等[3]采用自行设计的低频振荡还原仪，可在8min还原100个样液，而且还原效率高，操作简便，大大提高了测定的速度，具有重要推广价值。张霞等[4]用H酸（1，8-氨基萘酚-3，6-二磺酸）代替α-萘胺或盐酸萘乙二胺作为重氮化合物的偶联试剂测定水中亚硝酸盐，亚硝酸盐在0.025～1.0μg /mL范围内呈线性关系。Xu 等[5]用改进的E.大肠杆菌膜－Griess反应微量滴定板法测定基质中微量硝酸盐。微量滴定板法和常规的可见分光光度法相比有其优势：样品量大、样品容积小、消耗的反应剂少、测定效率高；且其使用的还原剂具有专一性（专一还原硝酸盐）,试验材料没有健康的危险,废物没有损害、伤害等优点。E.大肠杆菌膜还原法已经成功地应用于植物、土壤和水中硝酸盐的测定。Wang等[6]探讨了用柱式浓缩分光光度法同时测定水、蔬菜样品中的硝酸盐和亚硝酸盐。此方法灵敏性、选择性高，而且准确性高、简单，可同时测定硝酸盐和亚硝酸盐。任志刚等[7]增大比色皿宽度，将原用3cm改为5cm比色皿，增大了低浓度样品与空白样的差值，提高了方法的灵敏度。与此同时，液相色谱和连续流动分析与Griess法相结合，拓宽了硝酸盐测定的样品多样性，使其能够测定一些更为复杂样品中的硝酸盐，例如生物液体、食品中的硝酸盐，这是分光光度法研究中的一个新的热点。Kazemzadeh等[8]使用连续流动分光光度法同时测定多种样品中的硝酸盐和亚硝酸盐，亚硝酸盐和硝酸盐测定的范围分别为0.003～2.00μg /mL、0.030～2.00μg /mL，每小时可测20±3个样品，其测定的极限分别为0.001μg /mL、0.010μg /mL，对水样中、食品样品中硝酸盐、亚硝酸盐的测定取得了满意的结果，这个方法简单、快速、灵敏度高。Legnereová等[9]依靠连续注射分析法全自动同时测定表层水样的硝酸盐和亚硝酸盐，发现SIA法（Sequential Injection Analysis）与FIA法（Flow Injection Analysis）相比，前者能够测定的样品浓度范围大，并且是全自动分析，准确度和精密度高；与其他方法相比，消耗的反应液和样品量小；另还有一个优点是纤维光学探测器小，可用在便携式测定中。 Petsul等[10]用微流注射分析法(µ FIA)测定硝酸盐。NO3-的测定极限为0.026μg /mL，在0.5～20µ mol/L范围内，相关系数为0.985。流动分析还可与其他比色法相结合，测定硝酸盐与亚硝酸盐。Kazemzadeh等[11]依据亚硝酸盐与番红O反应形成重盐，重盐引起桔红色的溶液在酸性介质中变成蓝色，在520nm处有吸收光谱。亚硝酸盐和硝酸盐的测定范围分别是0.0001～3.00μg /mL和0.005～3.40μg /mL，测定的极限分别为0.5n g /mL和3n g /mL，用此种方法测定食品中硝酸盐和亚硝酸盐取得了满意的结果。Monser等[12]利用在加入亚硝酸盐条件下，磷钼蓝蓝色化合物衰减，并且减少的吸收光谱可在820nm处测定，引入了流动注射分析方法同时测定硝酸盐和亚硝酸盐。亚硝酸盐在0.05～1.15μg /mL范围内，硝酸盐在0.06～1.6μg /mL范围内呈线性关系，测定的极限分别为0.01μg /mL和0.025μg /mL。此方法快速、简单，并且不受pH值限制。Zatar等[13]提出了利用磷钼蓝络合物用分光光度法测定硝酸盐和亚硝酸盐的一种新方法。这个方法依赖于通过硫化钠还原磷钼酸，形成的磷钼蓝化合物与加入的亚硝酸盐偶氮化，引起蓝色吸收光谱的减少，减少的程度与加入的亚硝酸盐的量成正比，然后在814nm处测定蓝色络合物的吸收光谱。这个方法可用来测定水、肉制品、蔬菜中的硝酸盐（先用Jones还原器还原）和亚硝酸盐，具有测定时间短、测定浓度低的特点。亚硝酸盐与原黄素在酸性条件下反应生成稳定的紫红色化合物，在328nm处有最大吸收光谱，最小的测定极限是2nmol/L。然而，当Fe3+超过1mg /L时会对颜色的稳定性有很大的影响，类似的问题也出现在酚醛塑料（苯酚、间苯二酚、间苯三酚）作为指示剂时[14、15]。丘星初[16]研究了在硫酸介质中，邻氨基苯甲酸与NO3-和NO2-离子显色体系的光度性质与形成条件，显色产物最大吸收波长为560～565nm，符合比耳定律的浓度范围NO2--N 为0.03～0.15μg /mL，NO3--N 为0.05~0.20μg /mL, 应用于地表水中硝酸盐和亚硝酸盐的联合测定。关虹等[17]研究了NO2-藏红T显色体系及其光度特性，用来测定地面水和污水中的亚硝酸盐氮。该方法线性范围为0.0～3.5μg /mL，检出限为0.88μg /mL，含亚硝酸盐氮1.0μg /mL时相对标准偏差为4.2%。该方法选择性高、反应灵敏，准确度和精密度良好，试剂稳定且无毒性，操作简便，易于推广应用，是测定亚硝酸盐氮的一个较有实用价值的分光光度法。

亚硝酸盐主导方法是分光光度法，近年来有研究者建立了比较新颖的柱前衍生-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]荧光法测定亚硝酸盐，操作简便，准确度和灵敏度高。主要原理是亚硝酸盐在酸性条件下和2,3二氨基萘反应生成有强荧光的物质2,3-萘三唑，反应产物经C8柱分离,流动相为水和乙腈（体积比为70∶30）,流速为1.0 ml/min。采用荧光检测器进行检测,激发波长为375 nm,发射波长为415 nm。亚硝酸盐在0μg/L～200μg/L时具有良好的线性,相关系数为0.999 9,检出限和定量限分别为0.015 mg/kg和0.050 mg/kg,回收率在94.4%～99.1%,相对标准偏差为4.11%～7.78%。详见[b]王小芳等，中国卫生检验杂志[font=&][size=12px][color=#666666]. [/color][/size][/font]2021,31(07)。[/b]

肉制 品 在 加工和贮存过程中，加人适量的亚硝酸钠作为防腐剂，它能与血红蛋白作用产生血红色素，使肉制品保持色泽鲜艳。但如果摄人过量，会对人和动物产生急性或慢性危害甚至致癌。本文是基于酸性条件下，亚硝酸盐能与间苯二酚及错氧离子反应生成有色鳌合物这一特性，建立了一种简易快速，可用于测定肉制品中微量亚硝酸盐含量的方法。该分析方法操作简便、快速、干扰少，有良好的选择性，显色反应产物的稳定性高，是一种较为理想的测定肉制品中亚硝酸盐的方法。 仪器与主要试剂Car y 5 。 紫外分光光度计(美国瓦里安公司);pHS-3C型数字酸度计(上侮雷磁仪器厂)。饱和 硼 砂 溶液;228/L的ZnS04溶液;1Og/L的亚铁氰化钾溶液。显色 剂 溶 液:将1.Og 间苯二酚和1.1g Z rOCI2·8H20溶于25mL3 .7m ol/I.的HCl溶液中，然后转移至500mI.棕色容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。硫酸 钠 和 醋酸钠混合溶液:将1.Og N a2SOa和1.5gN aC2H302·3H20溶于少量蒸馏水中，然后转移至500mL棕色容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。N0 2 标准 溶液的配制(500Ieg/mL):准确称取0.37 498已用浓HZS04干燥过的亚硝酸钠，将其溶于少量蒸馏水，然后转移至500mI.容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。使用时稀释至所需浓度。

群友问：分光光度法测亚硝酸盐回收率偏低的原因群友周玉虎认为造成回收率偏低的原因可能来自以下几个方面：一、前处理。一般实验，如果回收率，我都建议做分步回收实验。也就是绕过前处理，在滤液中加标。看看回收率如何。如果滤液回收率很高，则问题来自于前处理。如果滤液回收率很低，再往后分步回收。二、加标量。一般加标量控制在本底的0.5-2倍之间。不宜太大或太小。三、也有可能是低级错误，计算问题。是以亚硝酸盐计呢，还是以亚硝酸根计，有一个换算系数。 硝酸盐检测主要考虑过柱问题。柱子的填充问题，柱子本身的回收率等等，都会影响硝酸盐的测定。 由于分光光度计坏了，不容易察觉，所以检查仪器性能也很重要，一般用重铬酸钾溶液，镨铷滤光片等方式检查波长的重复性，准确性。有条件的可以进行全波长扫描，看看钨灯的能量等方式判断。

酚二磺酸分光光度法测定硝酸盐氮配制酚二磺酸需要发烟硫酸，这个现在很不好买，很多厂家都不生产了，但是用浓硫酸消煮时间又太长，所以大家有什么好的建议和方法吗

我用重氮偶合分光光度法测水中亚硝酸盐时 有几个样品出现了橙色 但是其他样品与标准颜色都正常 请问有哪位大侠碰到这种情况 而且540nm测吸光度 比标准管都高 但是明显不是亚硝酸盐显色应该有的颜色

水中亚硝酸盐的测定是国标中的一项，我单位采用的是重氮化偶合分光光度法，曲线线性好，方法稳定，是一个很好做的项目，但现在却遇到了问题。我单位水源分为地表水和地下水，地表水系为黄河，在做亚硝酸盐氮加标时发现，凡是地面水其回收率都很好，但对于地下水加进去的亚氮标准就不知道到哪去了。我曾怀疑水中有氧化性物质将亚氮氧化成了硝酸盐氮，但做了实验硝氮没有增加。同理，亚氮也没有被还原为氨氮。查了相关资料，知道有些物质会引起亚氮的减少，但水中没有那么高的含量。不知各位大侠有没有遇到过相关问题，大家帮帮忙，思考一下。谢谢啦！

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亚硝酸盐氮标液可以用亚硝酸根离子溶液代替吗，需要怎么换算啊

测定水中亚硝酸盐的时候，用分光光度法显色盐酸萘乙二胺显色盐酸非常红，但同一个水样使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法却测不出亚硝酸盐，请问以哪个方法为准？

在紫外分光光度法测定硝酸盐氮中，吸光度的校正式：A校=A220-2A275。请问在275nm处的吸光度值前为什么有2这个系数啊？

大家好，我想请问一下，你们做亚硝酸盐用的是什么方法 ，是用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法还是用的N-（1-萘基）-乙二胺光度法。做亚硝酸盐和做亚硝酸盐氮的方法应该是一样的吧。只是把以氮计还是以亚硝酸盐计是吗？比如说，我们测出来的亚硝酸盐氮是50MG/L，那么亚硝酸盐是多少了。是不是50*（46/14）。 我还想请问，我们在做分光光度法的时候，方法里面不是常常提到用一定规格的比色皿,比如30MM、50MM的。但我们实验室都是用10MM的比色皿.这样在算结果的时候是不是要进行什么处理,怎么样处理.

最近碰到一个这样的问题，我接到一个这样的委托任务.生活饮用水检测其中的亚硝酸盐氮，因为生活饮用水中规定了检测方法是分光光度法。我就想问能不能用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法测亚硝酸盐氮。这样测出来能不能出报告，能否合理？还是必须用规定方法

一、案例在食品加工过程中，添加适量的化学物质与食品中的某些成分发生作用，从而使食品呈现良好的色泽，这种物质称为护色剂。硝酸盐和亚硝酸盐是常用的护色剂，用于腌制香肠、腊肉、火腿时，可使肉色鲜红。但硝酸盐和亚硝酸盐对人体有一定的毒性，尤其是亚硝酸盐可转化为致癌物亚硝胺，应严格控制其使用。我国《食品添加剂使用卫生标准》规定，亚硝酸盐用于腌制肉类、肉类罐头、肉制品时的最大使用量为O.15g／kg，硝酸钠最大使用量为O.5g／kg；残留量(以亚硝酸钠计)肉类罐头不得超过O.05g／kg，肉制品不得超过0.03g／kg。二、选用的国家标准GB 5009．33—2010食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定——分光光度法。三、测定方法1．样品预处理(1)新鲜蔬菜、水果 将整棵蔬菜或水果用去离子水洗净，凉干后，取可食部切碎混匀。将切碎的样品用四分法取适量，用组织捣碎机制成匀浆备用。如需加水应记录加水量。(2)肉类、蛋、水产及其制品 用四分法取适量或取全部，用组织捣碎机制成匀浆备用。(3)乳粉、豆乳粉、婴儿配方乳粉等固态乳制品(不包括乳酪) 将样品装入能够容纳2倍试样体积的带盖样品容器中，通过反复摇晃和颠倒容器使样品充分混匀直到使样品均一化。(4)酸乳、牛乳、炼乳及其他液体乳制品通过搅拌或反复摇晃和颠倒容器使样品充分混合。(5)乳酪取适量的样品研磨成均匀的泥浆状。为避免水分损失，研磨过程中应避免产生过多的热量。2．提取与净化(1)水果、蔬菜、水产、肉类、蛋类及乳酪等 称取5g(精确到0．001g)制成匀浆的试样(如制备过程中加水，应按加水量折算)，置于50mE烧杯中，加12．5mL硼砂饱和液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300mL将试样洗入500mL容量瓶中，于沸水浴加热15min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。(2)乳及乳制品(不包括乳酪) 称取5g(精确到0.001g)混匀的样品(牛乳等液态乳可取10-20g)置于50mL烧杯中，加12．5mL硼砂饱和液，搅拌摇匀，以50～60℃左右的水约300mL将试样洗入500ml。容量瓶中，置超声波清洗器中提取20min。(3)提取液净化在上述提取液中，一边转动，一边加入5ml。亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置0.5h，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用。3．亚硝酸盐的测定吸取40.Oml,上述滤液于50mL带塞比色管中，另吸取0、0．20mL、0．40ml一、0．60mL、0．80ml一1．OOmL、1．50mL、2．OOmL、2．50ml亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1．O／μg、2．Oμg、3．0μg、4．Oμg、5．Oμg、7．5μg、10．0μg、12．5μg亚硝酸钠)，分别置于50mL带塞比色管中。于标准管与试样管中分别加入2mL对氨基苯璜酸溶液(4g／L)，混匀，静置3～5min后各加入lmL盐酸萘乙二胺溶液(2g／L)，加水至刻度，混匀，静置l5min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。同时做试剂空白实验。结果计算(1)亚硝酸盐含量的计算 以亚硝酸钠计的含量计算如下：X1=A1*1000/m*V1/V0*1000式中 X1——试样中亚硝酸钠的含量，mg／kg；A1-——测定用样液中亚硝酸钠的质量，μg；m——试样质量，g；V0——试样处理液的总体积，mL；V1——测定用样液的体积，mL。