元素磷的测定磷钼蓝比色法标准

纳氏试剂比色法是氨氮测定的经典方法,具有较高的灵敏度,且简便快速,是环境监测方法,也是氨氮测定的国家标准方法。该方法虽然操作简便、灵敏度高,但水中钙、镁和铁等金属离子、硫化物、醛和酮类、颜色以及混浊等均干扰测定,尤其是对于低浓度样品,干扰更为明显。现就各种干扰与排除进行研究。

UV1500比色法测定酱油中羟脯氨酸含量的探讨UV1500比色法测定酱油中羟脯氨酸含量的探讨UV1500比色法测定酱油中羟脯氨酸含量的探讨

土样经沸水浸提5分钟，浸出液中的硼用姜黄素比色法测定。姜黄素是由姜中提取的黄色色素，以酮型和稀醇型存在，姜黄素不溶于水，但能溶于甲醇、酒精、丙酮和冰醋酸中而呈黄色，在酸性介质中与B结合成玫瑰红色的络合物，即玫瑰花青苷。它是两个姜黄素分子和一个B原子络合而成，检出B的灵敏度是所有比色测定硼的试剂中最高的(摩尔吸收系数E sso=1.80× 10' )最大吸收峰在550nm处。在比色测定B时应严格控制显色条件，以保证玫瑰花青苷的形成。玫瑰花青苷溶液在0.0014—0.06mg/LB的浓度范围内符合Beer定律。溶于酒精后，在室温下1—2小时内稳定。

土壞样品与氢氧化钠熔融,使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液中的磷酸根与钥锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，其颜色的深浅与磷的含量成正比，通过分光光度法定量测定。

利用自样品中提取出来的山梨酸及其盐类，在硫酸及重铬酸钾的氧化作用下产生丙二醛，丙二醛与硫代巴比妥酸作用产生红色化合物，其红色深浅与丙二醛浓度成正比，并于波长530nm处有最大吸收，符合比尔定律，故可用比色法测定。

纳氏试剂比色法测氨氮，操作简单、快速、准确。从试剂配制、取样、实验、读数只需要10分钟。是广大用户的良好选择！

在食品生产中，测定蔗糖的含量可以判断食品加工原料的成熟度，鉴别白糖、蜂蜜等食品原料的品质，以及控制糖果、果脯、加糖乳制品等产品的质量指标。但蔗糖是葡萄糖和果糖组成的双糖，没有还原性，不能用碱性铜盐直接测定，通过一定条件处理，蔗糖水解为具有还原性的葡萄糖和果糖，可以用还原糖测定方法测定蔗糖含量。食品中蔗糖的测定方法除酸水解方法外，还有酶比色法。

一、 土壤全磷的测定1． 分析意义及方法选择土壤全磷含量即磷的总贮量，大部分以迟效态存在，土壤有效磷与全磷含量并不相关，全磷含量高时并不显示磷素供应充足，而土壤全磷量低于某一水平（P2O5在0.05—0.10%以下）时，则往往意味着磷素供应不足。土壤全磷测定，首先要求把土壤中无机磷全部溶解，同时把有机磷氧化成无机磷，使均成正磷酸盐进入溶液，然后对溶液中磷进行定量测定。所以土壤中全磷的分析一般分为样品分解和溶液中磷的测定两步。土壤全磷样品分解方法较多，一般分为碱熔和酸溶两大类，碱熔又有Na2CO3和NaOH两种，Na2CO3融熔温度高（920℃）分解完全，是全磷分解的经典标准方法，可以作为仲裁方法，但融熔时需用铂坩埚，一般不适于常规分析，NaOH融熔法分解亦较完全，接近Na2CO3法，不需很高的温度（720℃），可在银或镍质坩埚中融熔，所得溶液可同时测定全磷和全钾。酸溶法也有H2SO4—HClO4法和HF—HClO4法，H2SO4—HClO4法对钙质上分解率较高，对酸性土分解不易完全，分解率在97%左右，HF—HClO4法亦称酸的全分解法，可在铂或聚四氟乙烯坩埚中进行，其特点是溶液中引入其他盐类元素较少，溶液组成分简单，适于全磷全钾及其他元素的系统分析。以上分解方法各有利弊，可根据要求及条件选用。溶液中磷的测定方法也较多，一般有重量法，容量法和比色法，随着仪器分析发展，目前一般多用比色法，比色法又有钼黄法和钼蓝法，钒钼黄法适应浓度高范围广，灵敏度较低，多用于植物、肥料等含磷较高的样品分析。钼蓝法根据还原剂不同又可分为氯化亚锡还原、抗坏血酸还原及1、2、4有机酸还原法等。氯化亚锡还原法虽然灵敏度较高，但对显色酸度、温度、时间等要求都较严格，1、2、4酸法也很少有人应用，现在多采用钼酸铵酒石酸锑钾抗坏血酸法测定磷，简称钼锑抗比色法。为了与土壤全钾前处理相一致这里介绍的是，用HF—HClO4酸溶、钼锑抗显色，应用FJA-1型常规分析仪器工作站与分光光度计联用，比色法测定土壤全磷。2． 方法要点在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物，经HF和HClO4分解，然后用过量的酸溶解，溶液中磷酸盐在适宜的条件下，经钼锑抗显色成磷钼蓝，用分光光度计比色，由溶液的透光度计算磷的含量。这里采用一流动比色皿代替721型或722型等分光光度计的比色槽，使显色后的溶液在流经流动比色皿中进行比色FJA-1型工作站采入透光度读数后，自动计算并打印出样品含磷百分数。这样不但减轻繁杂的比色手续，大大提高分析速度（比原手工分析提高十多倍），又避免由于各比色管之间的差异以及人工划曲线查曲线带来的分析误差，提高了分析精度，也可避免因操作不慎溶液溅洒污染比色计。 3 试剂及仪器设备(略)4分析过程（1）样品前处理称取通过100号筛孔土壤0.2克左右，放入聚四氟乙稀（或铂坩埚）坩埚中，加少量蒸馏水润湿土样，加3mL HClO4试剂，再加HF5mL，在电炉上低温消化，至HClO4大量发烟时取下稍冷，如溶液没有变清可补加HF5mL继续消化，直至溶液清亮，将HCLO4蒸干，再沿坩埚壁加1mLHClO4蒸干以赶去HF，整个消化过程在通风橱中进行，最后用1:1HCl 1mL溶解残渣并用蒸馏水洗入50mL容量瓶中，定容摇匀（此溶液也可以供测全钾用）。吸取清液5mL于50mL容量瓶中，加蒸馏水至30mL左右，加二硝基酚指示剂1滴，用氢氧化钠溶液及稀H2SO4反复调节至溶液显微黄色，加入5mL钼锑抗显色剂定容摇匀，同样方法做含P0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mg/L标准系列溶液。（2）FJA-1型工作站与分光光度计联用的操作(略)5 结果与讨论根据实验结果表明，本法具有较高的测定精度和较好的重现性，在溶液含P 0.3mg/L时本法测定变异系数为0.57，小于手工法的3.76。从表2中也可看出，两种方法测定结果在允许误差（0.005%）范围以内。完全适用于土壤全磷的常规分析。由于采用二次多项式拟合标准曲线，在一定范围内避免了由于化学或物理因素造成的误差。二 土壤有效磷的测定： 和全磷一样，分为提取和测定两步，提取剂的选择根据土壤性质而定，现在一般多用0.5 mol/L NaHCO3法，它特别适用于石灰性土壤，也可用于中性及酸性水稻土。对于强酸性土壤，也有用0.03 mol/L NH4F—0.025M HCl提取法及0.025 mol/L H2SO4—0.05 mol/L HCL提取法的，不同提取剂各有特点，提取量也不相同，对各自测定结果的评价和应用也不同。只有用同一方法在相同条件下测定的结果才有相对比较的意义。

一、 土壤全磷的测定1． 分析意义及方法选择土壤全磷含量即磷的总贮量，大部分以迟效态存在，土壤有效磷与全磷含量并不相关，全磷含量高时并不显示磷素供应充足，而土壤全磷量低于某一水平（P2O5在0.05—0.10%以下）时，则往往意味着磷素供应不足。土壤全磷测定，首先要求把土壤中无机磷全部溶解，同时把有机磷氧化成无机磷，使均成正磷酸盐进入溶液，然后对溶液中磷进行定量测定。所以土壤中全磷的分析一般分为样品分解和溶液中磷的测定两步。土壤全磷样品分解方法较多，一般分为碱熔和酸溶两大类，碱熔又有Na2CO3和NaOH两种，Na2CO3融熔温度高（920℃）分解完全，是全磷分解的经典标准方法，可以作为仲裁方法，但融熔时需用铂坩埚，一般不适于常规分析，NaOH融熔法分解亦较完全，接近Na2CO3法，不需很高的温度（720℃），可在银或镍质坩埚中融熔，所得溶液可同时测定全磷和全钾。酸溶法也有H2SO4—HClO4法和HF—HClO4法，H2SO4—HClO4法对钙质上分解率较高，对酸性土分解不易完全，分解率在97%左右，HF—HClO4法亦称酸的全分解法，可在铂或聚四氟乙烯坩埚中进行，其特点是溶液中引入其他盐类元素较少，溶液组成分简单，适于全磷全钾及其他元素的系统分析。以上分解方法各有利弊，可根据要求及条件选用。溶液中磷的测定方法也较多，一般有重量法，容量法和比色法，随着仪器分析发展，目前一般多用比色法，比色法又有钼黄法和钼蓝法，钒钼黄法适应浓度高范围广，灵敏度较低，多用于植物、肥料等含磷较高的样品分析。钼蓝法根据还原剂不同又可分为氯化亚锡还原、抗坏血酸还原及1、2、4有机酸还原法等。氯化亚锡还原法虽然灵敏度较高，但对显色酸度、温度、时间等要求都较严格，1、2、4酸法也很少有人应用，现在多采用钼酸铵酒石酸锑钾抗坏血酸法测定磷，简称钼锑抗比色法。为了与土壤全钾前处理相一致这里介绍的是，用HF—HClO4酸溶、钼锑抗显色，应用FJA-1型常规分析仪器工作站与分光光度计联用，比色法测定土壤全磷。2． 方法要点在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物，经HF和HClO4分解，然后用过量的酸溶解，溶液中磷酸盐在适宜的条件下，经钼锑抗显色成磷钼蓝，用分光光度计比色，由溶液的透光度计算磷的含量。这里采用一流动比色皿代替721型或722型等分光光度计的比色槽，使显色后的溶液在流经流动比色皿中进行比色FJA-1型工作站采入透光度读数后，自动计算并打印出样品含磷百分数。这样不但减轻繁杂的比色手续，大大提高分析速度（比原手工分析提高十多倍），又避免由于各比色管之间的差异以及人工划曲线查曲线带来的分析误差，提高了分析精度，也可避免因操作不慎溶液溅洒污染比色计。 3 试剂及仪器设备(略)4分析过程（1）样品前处理称取通过100号筛孔土壤0.2克左右，放入聚四氟乙稀（或铂坩埚）坩埚中，加少量蒸馏水润湿土样，加3mL HClO4试剂，再加HF5mL，在电炉上低温消化，至HClO4大量发烟时取下稍冷，如溶液没有变清可补加HF5mL继续消化，直至溶液清亮，将HCLO4蒸干，再沿坩埚壁加1mLHClO4蒸干以赶去HF，整个消化过程在通风橱中进行，最后用1:1HCl 1mL溶解残渣并用蒸馏水洗入50mL容量瓶中，定容摇匀（此溶液也可以供测全钾用）。吸取清液5mL于50mL容量瓶中，加蒸馏水至30mL左右，加二硝基酚指示剂1滴，用氢氧化钠溶液及稀H2SO4反复调节至溶液显微黄色，加入5mL钼锑抗显色剂定容摇匀，同样方法做含P0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mg/L标准系列溶液。（2）FJA-1型工作站与分光光度计联用的操作(略)5 结果与讨论根据实验结果表明，本法具有较高的测定精度和较好的重现性，在溶液含P 0.3mg/L时本法测定变异系数为0.57，小于手工法的3.76。从表2中也可看出，两种方法测定结果在允许误差（0.005%）范围以内。完全适用于土壤全磷的常规分析。由于采用二次多项式拟合标准曲线，在一定范围内避免了由于化学或物理因素造成的误差。二 土壤有效磷的测定： 和全磷一样，分为提取和测定两步，提取剂的选择根据土壤性质而定，现在一般多用0.5 mol/L NaHCO3法，它特别适用于石灰性土壤，也可用于中性及酸性水稻土。对于强酸性土壤，也有用0.03 mol/L NH4F—0.025M HCl提取法及0.025 mol/L H2SO4—0.05 mol/L HCL提取法的，不同提取剂各有特点，提取量也不相同，对各自测定结果的评价和应用也不同。只有用同一方法在相同条件下测定的结果才有相对比较的意义。

在本应用报告中，使用酚红比色法对溴（Br-）进行定量分析。使用LAMBDA™ 465紫外可见分光光度计快速获取数据，并用UV Lab® 软件进行处理。

C=O）的糖，能将其它物质还原而其本身被氧化。（1） 还原糖在碱性条件及有酒石酸钾钠存在下加热，可以定量地还原二价铜离子为一价铜离子，产生砖红色的氧化亚铜沉淀，其本身被氧化。具体反应如下：（2）氧化亚铜在酸性条件下，可将钼酸铵还原，还原型的钼酸铵再与砷酸氢二钠起作用，生成一种蓝色复合砷钼蓝，其颜色深浅在一定范围内与还原糖的含量（即被还原的Cu2O 量）成正比，用标准葡萄糖与砷钼酸作用，比色后做标准，就可测得样品还原糖含量。

氟是人体所需的一种微量元素，氟摄入过多会导致牙齿中的钙化酶活性降低，就可能因牙齿钙化失败，存在色素沉积在釉质表面，使牙釉质受到损害，形成氟斑牙。在饮水、食物中存在长期过量摄入氟的情况，还可能引起慢性的氟中毒，导致骨头脆性增加，骨髓造血功能下降，影响体内钙磷的正常代谢，从而引发氟骨症，也易发生骨质疏松和骨折。本实验为试样经硝酸镁固定氟，经高温灰化后，在酸性条件下蒸馏分离氟，蒸出的氟被氢氧化钠溶液吸收，氟与氟试剂、硝酸镧作用、生成蓝色三元络合物，与标准比较定量。

氟是人体所需的一种微量元素，氟摄入过多会导致牙齿中的钙化酶活性降低，就可能因牙齿钙化失败，存在色素沉积在釉质表面，使牙釉质受到损害，形成氟斑牙。在饮水、食物中存在长期过量摄入氟的情况，还可能引起慢性的氟中毒，导致骨头脆性增加，骨髓造血功能下降，影响体内钙磷的正常代谢，从而引发氟骨症，也易发生骨质疏松和骨折。本实验为试样经硝酸镁固定氟，经高温灰化后，在酸性条件下蒸馏分离氟，蒸出的氟被氢氧化钠溶液吸收，氟与氟试剂、硝酸镧作用、生成蓝色三元络合物，与标准比较定量。

氟是人体所需的一种微量元素，氟摄入过多会导致牙齿中的钙化酶活性降低，就可能因牙齿钙化失败，存在色素沉积在釉质表面，使牙釉质受到损害，形成氟斑牙。在饮水、食物中存在长期过量摄入氟的情况，还可能引起慢性的氟中毒，导致骨头脆性增加，骨髓造血功能下降，影响体内钙磷的正常代谢，从而引发氟骨症，也易发生骨质疏松和骨折。本实验为试样经硝酸镁固定氟，经高温灰化后，在酸性条件下蒸馏分离氟，蒸出的氟被氢氧化钠溶液吸收，氟与氟试剂、硝酸镧作用、生成蓝色三元络合物，与标准比较定量

随着发动机油档次的提高，发动机油磷含量越来越低。磷的测定对发动机油和含磷添加剂的质量控制有着重要意义。目前，磷含量的测定使用的SH／T 0296—92比色法。实践表明，原方法工作曲线的绘制较繁琐，试剂用量大，试剂浓硝酸的刺激性大，稀释不方便。改进法在比色法的基础上对以上几个方面进行了改进试验，将两种方法的测定结果进行比较，取得了较好的效果。改进法RSD％1．89％，与原方法相比相对误差± 1.15％，回收率97．0％～100．2％。

植物油中的磷脂含量，是植物油生产中的重要质控指标。在加工工艺中，磷脂的存在会增加脱酸环节中中性油的损失以及脱色白土的用量，同时还会导致加氢催化剂的中毒。在油品储藏环节，磷脂会使油脂反色，同时也会导致大豆油等油品的回味。因此，磷脂作为油品加工工艺中的重要质控指标，一直受到关注。油品的磷脂测定一般采用钼蓝比色法（GB/T 5537-2008），该方法将油品灰化加酸预处理后用分光光度计测定，经典的钼蓝比色法虽然可以准确的测定油品磷含量，但却存在耗时过长，分析效率低的缺点。近年来，中储粮某下属油脂加工企业，开始采用 TL2350 浊度仪用于油品磷脂含量的快速检测，该方法能基本满足油品行业磷脂检测的内部质控要求。

方案优势传统比色法测肥料中的磷，因显色稳定、受干扰因子影响较小，而得到广泛应用，但手工比色法操作相对繁琐，损耗人力、物力较多。流动注射分析仪（FIA）采用分光光度法的原理，将复杂的手工操作简化成仪器的自动化操作，分析速度快，准确度高，节省试剂消耗。整个反应过程在密闭管路中进行，更加绿色安全。

水杨酸根与铁离子起反应，形成一种紫色络合物，根据紫色络合物的颜色进行比色得光密度，将光密度代入公式计算得半衰期。

根据《GB 8978-2002 污水综合排放标准》，排污企业向环境中排放元素磷的限制为：0.1 mg/L（一级标准）、0.3 mg/L（二级和三级标准）。污水中磷的测定，传统的方法为磷钼蓝分光光度法，该方法样品处理过程繁杂，对试剂及操作人员要求高，引入污染的来源多，对测量结果造成影响的因素多。由于P-O 键能大，在低温下难以解离成基态的自由原子进行测定，因此，至今未出现过采用AAS 对P 进行测定的相关资料。本文利用PerkinElmer PinAAcle 900T AAS对污水样品中的P 进行了有效测定，四个实际污水样品回收率在94% - 105% 之间。

磺胺类药物及苯环上有游离氨基的化合物在酸性溶液中与亚硝酸钠进行重氮化反应，生成重氮盐，此外在碱性溶液中与酚类物质(如麝香草酚)发生偶联反应，生成橙红色偶氮化合物，可在560 nm波长下进行比色测定磺胺嘧啶的浓度。

中国大陆地区检测铬的方法主要集中于比色法，原子吸收法和原子荧光法，比色法容易受到基体有色物质的干扰应用范围受到制约，而原子光谱法仅能针对铬元素进行总量检测，无法区分铬的价态。因此，本应用建立了一种专属测定塑料中六价铬的方法，以满足迫切的塑料玩具及其他塑料制品的安全监控需求。

目前，测定金属元素的方法主要有传统的化学分析方法和仪器分析方法中的原子吸收光谱法和电感耦合等离子体发射光谱法。对于铁粉中低含量的元素分析，若采用传统的比色法测定，干扰因素多，本文利用在同一试液中，不分离、无需基体匹配，用原子吸收光谱法直接测定铁粉中的Al、Ti、K、Na、Ca、Mg、Zn及Mn等元素含量的分析方法，供相关人员参考。

GB 11893-89 水质 总磷的测定 钼酸铵分光光度法总磷：在中性条件下用过硫酸钾（或硝酸一高氯酸）使试样消解，将所含磷全部氧化位正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。

电解质水中微量元素含量很低，测定方法要求具有较高的灵敏度、特异性、准确性，多采用原子吸收分光光度法、化学比色法。随着电感耦合等离子体技术的不断发展，电感耦合等离子体发射光谱法、电感耦合等离子体质谱法受到越来越多的青睐。本文建立采用电感耦合等离子体发射光谱法测定电解质水中微量元素Ni、Pt、Ti元素的方法，供相关人员参考。

酵母细胞壁是一种很有发展前景的新型添加剂，主要成分是葡聚糖、甘露寡糖、糖蛋白和几丁质，其具有抗生素和益生素双重功效。其中两种低聚糖的含量成为评价酵母细胞壁品质好坏的一个衡量标准。目前常见的低聚糖直接测定方法主要有比色法和酶法，比色法无选择性，而酶法则专一性太强。而另一种测定思路则是将低聚糖通过水解得到相应单糖后再进行检测，最终换算得到相应低聚糖含量。气相色谱法和毛细管电泳法都需衍生，而高效液相色谱法虽无需衍生，但方法的灵敏度很低。

Phosphax sc LR 低量程在线分析仪在原有的 Phosphax sc 基础上进行来了改进，其采 用了全新的比色单元，且分析方法也改进到钼黄 2.0 版本，可以更好地消除水样自身色度的 影响，在低浓度情况下获得更好的性能表现，指导污水厂化学加药除磷药剂的投加。Phosphax sc LR 低量程在线分析仪，在磷酸盐低浓度情况，可以获得更好的测量结果，其测量重复性和准确性均有了很大的提升，相比采用钼蓝比色法的在线磷酸盐分析仪，采用钼黄 2.0 版本的 Phosphax sc LR 低量程在线分析仪的试剂无需冷却即可在现场使用保存 6 个月。且仪器具备自动校准和自动清洗功能，维护量低，对指导污水厂加药除磷控制非常有价值。

试样经消化后，在弱酸性溶液中四价锡离子与苯芴酮形成微溶性橙红色络合物，在保护性胶体存在下与标准系列溶液比较定量。

样品经消化后，在碱性溶液中镉离子与6一溴苯并噻唑偶氮萘酚形成红色络合物，溶于三氯甲烷，与标准系列比较定量。

临床化学使用化学过程测量血液中化学成分的含量。这对于疾病的早期诊断以及器官功能的监测是非常有用的。最常见的用于临床化学的试样是血液和尿液。表1提供了使用UV/Vis分光光度计进行的最常见的血液检测和可测试的项目。在这篇应用文献中，将介绍使用LAMBDATM 465 UV/Vis分光光度计和UV Lab TM软件，通过酶催化方法测试人血清中胆固醇的水平。

果胶(多聚半乳糖醛酸)，由d-半乳糖醛酸以a-1,4-糖苷键连接形成的直链.聚合物,部分d-半乳糖醛酸上的羧基被甲醇酯化而形成甲酯。半乳糖醛酸，在硫酸溶液中与咔唑进行缩合反应，形成紫红色化合物，颜色与浓度成正比。反应1-2h后最深。在530nm波长处测定吸光值。