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自动荧光细胞计数仪工作原理

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自动荧光细胞计数仪工作原理相关的资讯

  • 超声波细胞破碎机的工作原理【莱恩德新品】
    超声波细胞破碎机,也称为超声细胞破碎仪,其工作原理主要基于超声波在液体中的空化效应。以下是其工作原理的详细解释:    1.电能转换:首先,超声波细胞破碎机将电能通过换能器转换为声能。换能器作为核心部件,能够将电能高效地转换为超声波能量。    2.空化效应:当超声波在液体中传播时,它会在液体中产生空化作用。这种空化作用表现为液体中的微小气泡迅速形成并随后炸裂。这些炸裂的气泡会产生类似小炸弹的能量,形成高强度的剪切力和高频交变水压。    3.细胞破碎:这些高强度的剪切力和高频交变水压作用于细胞壁,使细胞壁受到压力变化而破碎。同时,由于超声波在液体中的剧烈扰动,粒子会产生大的加速度,使它们相互碰撞或与装置壁碰撞而破碎。    4.主要应用:超声波细胞破碎机广泛应用于中药提取、细胞、细菌、病毒组织的破碎等领域。其高效的破碎能力使得这些生物样本的处理更加快速和有效。    此外,超声波细胞破碎仪还有一些其他的特性和功能,例如:   结构特点:超声探头通常采用进口钛合金材质,具有高能效换能器和振幅自动调节功能。这些特性保证了设备的高效性和稳定性。    技术参数:工作频率范围通常为20~25KHz,具有频率自动跟踪功能。设备可储存多套常规程序数据和一套组合程序,工作方式有定时和计数两种。这些参数和功能使得设备更加灵活和易用。    综上所述,超声波细胞破碎机的工作原理主要基于超声波在液体中的空化效应,通过电能转换、空化效应和细胞破碎等步骤实现对生物样本的高效处理。点击此处可了解更多产品详情:超声波细胞破碎机
  • 原理创新!这款“神器”让功能单细胞“无所遁形”
    每当我们仰望浩瀚无垠的夜空,目光总会被闪闪的星辰所吸引。星光和眼睛帮助我们精确捕捉夜空中最亮的星,那面对瀚如星海的细胞世界,我们如何快速发现具有特殊功能的细胞呢?12月30日,青岛星赛生物科技有限公司发布全球首台高通量流式拉曼分选仪FlowRACS,为执着于寻找细胞世界中最亮“星”的科研人员带来了发现“星”,并拿到“星”的创新型解决方案。发布会回看》》》始于拉曼,微流控让诺贝尔奖技术焕发新魅力拉曼光谱是一种散射光谱,是化合物中分子键被激发到虚能态却尚未恢复到原始态所引起的、入射光被散射后频率发生变化的现象,该技术获得了1930年度的诺贝尔物理学奖。单个细胞的拉曼光谱可反映细胞内化学物质的成分及含量等丰富信息,在微流控技术的加持下,细胞群体单细胞拉曼光谱的获取以及下游单细胞分选进入了快速发展阶段。“我们提出了拉曼组这一创新概念,即特定时空状态下一个细胞群体的单细胞拉曼光谱的集合。拉曼组能够在单细胞精度,定量检测细胞代谢各种底物的速率、各种拉曼敏感产物之多样性及其含量、细胞的环境应激性、细胞之间的代谢互作、细胞内代谢物相互转化网络等广阔的细胞代谢表型,还可区分不同的物种。”星赛生物联合创始人,青岛生物能源与过程研究所(山东能源研究院)单细胞中心主任徐健博士说。 拉曼组的定义与内涵鉴于“拉曼组”是一种直接刻画“代谢功能”的单细胞表型组,且“拉曼组”手段具有广谱适用、活体、无损、非标记、全景式表型、可分辨复杂功能、快速、高通量、低成本、能耦合下游测序、质谱或培养等重要优势,拉曼组可与现有的单细胞基因组、转录组、蛋白组和代谢物组等手段互补,共同形成一个完整的单细胞多组学方法学体系。拉曼组是单细胞多组学的拓展和延伸攻坚克难,拉曼流式让万物皆可分成为可能虽然拉曼组在细胞功能识别方面具有诸多优势,但是目前市面上并没有成熟的以拉曼光谱作为细胞功能分析与分选的仪器。少数取得突破的原理样机中,普遍存在通量低,测量与分选过程对细胞损伤较大,以及拉曼图谱采集质量差等问题。FlowRACS通过引入pDEP-RACS技术,将高速流动的单细胞精确捕获在拉曼激光位点,在保证细胞活性的前提下,采集并在线分析单细胞拉曼信号,获得细胞最真实的原位状态。同时,FlowRACS借助介电确定性侧向位移(pDEP-DLD)技术,保证目标细胞的精准、高通量、自动化分选,分选通量大于300细胞/分钟,真正实现了基于高质量拉曼光谱的高通量流式分选,让微观世界的细胞分析进入万物皆可分、万物皆可选、万物皆可测时代。析选同步,双模运行满足更多实验需求FlowRACS具备两种运行模式:(1)“流式拉曼分析”(Raman Flow Cytometry;RFC),主要支撑拉曼组、元拉曼组等单细胞代谢表型组数据的高通量采集和分析;(2)“流式拉曼分选”(Raman Flow Sorting;RFS),主要服务目标代谢功能细胞的高通量分选。“仅仅检测细胞的代谢功能与特性,并不能满足科研人员对于细胞改造与作用机理研究的需求,我们借助微流控技术与人工智能,让具备特定拉曼信号的细胞在完成光谱检测的同时,一站式完成在线AI光谱分析及特征峰比对,并激发细胞分选控制模块,将目标细胞与非目标细胞分离。”星赛生物联合创始人、中国科学院青岛生物能源与过程研究所(山东能源研究院)单细胞中心副主任马波博士表示。同时,FlowRACS可适配多种具备自主知识产权的微流控芯片耗材,满足液滴类目标单细胞导出、液流式目标细胞群导出等多样化实验需求。作为业界首台高通量流式拉曼分选仪产品,FlowRACS下游可直接开展单细胞培养、单细胞测序等实验,为单细胞多组学研究,及其在精准医学、合成生物学和生物安全等领域的应用,提供了全新的仪器解决方案。南方医科大学珠江医院检验医学部主任、国家杰出青年基金获得者、享受国务院特殊津贴专家周宏伟教授表示,流式细胞分析技术在基础医学和临床检验等领域均具广泛应用,现在星赛生物在原有的“荧光流式”和“质谱流式”两条赛道以外,开辟了“拉曼流式”这第三条赛道,作为该赛道的首个仪器产品,FlowRACS的推出具有重要的科学意义与临床价值。“针对单细胞多组学这一新兴领域研发的FlowRACS,不仅可以对细菌和肿瘤等单细胞、微塑料等微纳米颗粒实现高通量的表征和分选,也将在其他领域得到广泛应用、潜力无穷。”厦门大学教授、固体表面物理化学国家重点实验室副主任、长江学者、国家杰出青年基金获得者任斌,对高通量流式拉曼分选仪FlowRACS在更多领域的应用寄予了厚望。应用前景中国智造,原理创新实现从0到1的突破流式细胞技术因其检测灵敏、结果准确、价格低廉、耗时短、自动化水平高等优势,广泛应用于学术研究、临床疾病诊断等领域。随着仪器技术的不断创新,流式细胞术在细胞治疗、海洋生物、植物、微生物等领域的需求日益增多。受限于荧光流式细胞仪的底层数据原理,现有流式细胞技术在未知细胞探索、微生物生命暗物质解析、荧光难跟踪的细胞功能检测及目标细胞分选等方向仍无法满足市场需求。星赛生物瞄准非标记式流式细胞市场,借助原创性“拉曼组”数据集及微流控技术,成功开发全球首台广谱适用、微生物可分、高通量自动化的FlowRACS,实现了拉曼高通量分选由0到1的突破。“自2013年起,我们申请了多项国家发明专利,并顺利获得授权。可以说,FlowRACS是实实在在的中国“心”原创仪器”,马波博士表示,“虽然FlowRACS是完全的国产化,但其在拉曼活性高通量分选方面处于国际领先地位”。合成生物学领域专家、中国科学院先进技术研究院副院长、深圳合成生物学创新研究院院长、国家杰出青年基金获得者刘陈立研究员指出,当前,细胞功能测试是合成生物学研究的一大瓶颈,急需高通量自动化的手段、技术和设备。我们国家的高端仪器设备大量、长期地依赖进口,这也对国产化自研生物设备提出了紧迫需求。星赛生物此次发布的FlowRACS很好的回应了上述两大需求。单细胞领域,国产原创正当时2020年全球单细胞分析市场规模估计为26.8亿美元,预计在2019至2026年以16.9%的年复合增长率增长,国内市场规模预计35亿人民币。强大的市场需求以及市场占有率狭小的局面,对国产单细胞分析仪器的研制和产业化提出了巨大的挑战,同时也带来了前所未有的机遇。基于拉曼组、拉曼组内关联分析等概念和RAGE、pDEP-RACS等一系列核心器件,星赛生物推出了一系列原创的单细胞分析仪器产品:(1)CAST-R™ (临床单细胞拉曼药敏快检仪),(2)FlowRACS(高通量流式拉曼分选仪),(3)RACS-Seq(单细胞拉曼分选-测序耦合系统),(4)EasySort(单细胞微液滴分选系统)等。同时,星赛生物推出了支撑细菌、古菌、真菌、微藻、植物、动物、人体等单细胞分析的试剂盒与耗材,覆盖了包括单细胞分析样品采集、样品预处理、拉曼成像、拉曼分选、单细胞测序文库、单细胞培养等环节的完整实验与数据分析流程。微流控研究领域的著名学者,中国科学院大连化学物理研究所林炳承研究员表示,“星赛生物创新性地将微流控技术应用于单细胞拉曼分析和分选领域,推出了FlowRACS这一原创性的仪器产品,这一进展对于高通量细胞分析仪器产业具有重要意义,非常值得肯定与祝贺。微流控芯片作为一种颠覆性生物技术和当前分析科学的重要发展前沿,最近几年来得到飞速发展。中国是全球最大的微流控芯片市场,因此用中国的仪器产品开发与服务这一市场是这一代年轻科学家责无旁贷的使命。”人类对生命的探索已经逐步从宏观走向微观,单细胞层面的研究成为全球科研人员趋之若鹜的热门话题。面对瀚如星海的细胞世界,自动化高通量的单细胞分析仪器是链接人与细胞的重要桥梁。鹰隼试翼,风尘翕张,国产科学仪器目前还处在孕育阶段,随着国家政策的不断倾斜、国人技术攻关的持续发力,相信国产科学仪器也一定能够凭借实力在国际市场赢得自己的话语权。(青岛星赛生物科技有限公司)
  • 青岛能源所等发明基于拉曼组原理的益生菌单细胞质检技术
    目前市场上有大量的益生菌品牌和产品,但质量参差不齐,给消费者带来极大困扰,也阻碍了产业的健康发展。此问题的根源在于目前业界缺乏快速、准确、全面、低成本的益生菌产品质检手段。青岛能源所单细胞中心联合中国食品发酵工业研究院、青岛东海药业和青岛星赛生物科技有限公司等,开发了基于拉曼组原理的益生菌单细胞质检技术SCIVVS,为突破这一紧迫的技术瓶颈提供了全新的解决方案。该工作近日发表于iMeta杂志。 基于拉曼组原理发明益生菌单细胞质检技术SCIVVS   益生菌产品的市场规模已近千亿,但是存在大量的“鱼目混珠”现象。其重要原因是益生菌质检的方法学局限性。由于这些方法大多依赖于分离培养或元基因组测序,因此存在耗时长、成本高、难以快速测定细胞活性和代谢活力及其细胞间异质性、复合益生菌产品深度质检困难、流程繁琐、难以自动化等瓶颈性问题。这些局限性导致益生菌产品难以快速、低成本、全面、深度地进行质检,很大程度上阻碍了益生菌产业的健康发展。   针对这一产业瓶颈,青岛能源所单细胞中心张佳副研究员、任立辉高级工程师、张磊博士、公衍海助理研究员等带领的研究小组,联合中国食品发酵工业研究院、青岛东海药业和青岛星赛生物等团队,基于拉曼组原理,开发了一种名为SCIVVS(Single-Cell Identification, Viability and Vitality tests and Source-tracking)的单细胞精度益生菌质检技术体系。针对益生菌产品,SCIVVS首先不是提取总核酸或者进行平板培养,而是提取所有的细胞进行重水饲喂和单细胞拉曼光谱的高通量采集。在每一张拉曼光谱上,利用其指纹区,基于与益生菌单细胞拉曼光谱参照数据库的比对,快速完成每个细胞的种类鉴定环节。通过构建21种法定可食用益生菌的标准菌株拉曼光谱数据库,SCIVVS可实现平均高达93%的分辨准确度。同时,利用其重水利用峰(C-D峰),则可针对每个物种,量化每个细胞的活性、代谢活力等。进而可通过拉曼激活单细胞分选技术,快速获得目标种类或目标代谢活力的单细胞,从而对接下游单细胞全基因组测序或培养。   为了支撑SCIVVS,在国家重大科学仪器研制、国家重点研发计划等项目的支持下,青岛能源所和青岛星赛生物合作研制成功了单细胞拉曼光镊分选仪(RACS-Seq)、高通量流式拉曼分选仪(FlowRACS)等原创仪器产品。运用RACS-Seq,研究人员直接从纯种或复合益生菌产品出发,在5个小时之内,完成了精确到每个物种的活细胞计数、活力定量和活力异质性测量。同时,针对乳酸杆菌、双歧杆菌或链球菌等各种益生菌,均能产出高质量的单细胞基因组(覆盖度可高达99.4%),从而完成精准溯源。   对比目前的益生菌产品质检方法,SCIVVS具有快速、准确、全面、低成本、易于自动化等优势,较传统方法快20倍以上,而成本仅为传统方法的1/10,且能免培养、高精度、自动化、一站式地完成产品中每个物种的活细胞计数、活力定量、活力异质性测量和溯源,有望形成新的技术标准。在此基础上,该合作团队将基于“益生菌单细胞技术联盟(A-STEP)”,联合益生菌产业领军企业,建立一个“标准化”、“一站式”、“公益性”的技术服务体系,为实现从生产端到消费端的益生菌产品质量规范化,提供一个原创的、切实可行的解决方案。   该工作由单细胞中心徐健、中国食品发酵工业研究院姚粟、青岛东海药业崔云龙等主持完成,得到了国家自然科学基金、山东省自然科学基金和国家重点研发计划青年科学家项目等项目的支持。
  • 【应用干货】利用 Tempest 移液工作站让单细胞接种变得自动化
    介绍细胞系生成通常被认为是一个漫长而乏味的过程,需要大量的劳动力和材料投资。在细胞系开发中,尤其是在单克隆抗体和蛋白质治疗剂的生产中,需要具有高活性的单克隆性和稳健的克隆生长。自动细胞分配和细胞计数技术可提高通量,同时减少分配、识别和验证每孔单个细胞是否存在所需的时间和劳动力。本研究比较了使用自动Formulatrix Tempest液体分配器和Brooks Celigo成像细胞仪与电动手动移液和手动分析将CHO细胞分配和分析到384孔板的情况。 方法和材料I. 细胞培养为了制备单细胞接种和克隆生长的细胞, CHO-K1YFP细胞在T-25c㎡的烧瓶中用含有10% FBS和1%G418的F-12K培养基进行贴壁培养。细胞在37℃和98%的相对湿度下,置于5%的二氧化碳中培养。为了进行活性研究,将悬浮的CHO(CHOs)细胞培养在125mL的锥形瓶(Corning #430421)中,其中含有30mL CD CHO培养基(Gibco #10743),还添加了20mM GlutaMax(Gibco #35050-061)和1%HT(Gibco #11067)。细胞在37°C和98%相对湿度的8%CO2中置于轨道振动台(130 rpm)上培养。II. 使用Tempest或手动移液器进行单细胞接种用胰蛋白酶-EDTA (0.25%/0.5 mM) 收集表达黄色荧光蛋白 (YFP) 的 CHO-K1 细胞并重新悬浮在培养基中。细胞通过 40 µm 细胞过滤网 (BD Falcon #352340) 传代两次以获得没有聚集体的细胞悬浮液,然后使用血细胞计数器计数并稀释至200个细胞/mL。使用来自Formulatrix的 Tempest或手持式Matrix电子多通道移液器(Thermo Fisher #2231,12通道384均衡器移液器,2-125 µl)接种培养基和细胞。Formulatrix Tempest是一种非接触式的散装试剂分配器,可通过96个单独控制的喷嘴同时分配多达12种独立成分的任何体积。Tempest正在申请专利的微流控阀组利用正排量技术分配离散的液体体积,能够准确无误地分配到96孔、384孔和1536孔板。此外,使用标准移液器吸头作为源储液器可将死体积减少到100微升,是珍贵样品分配的最佳选择。在细胞接种之前,将25µL/孔的培养基分装到384孔板(Corning #3542)。随后以5微升/孔的细胞悬液(每种分配方法n=3)接种。将板离心以收集每个孔底部的细胞,然后孵化直到成像。III. 使用Brooks Celígo S进行单细胞接种成像使用Celígo成像细胞仪对孔板进行处理,以检测每孔单细胞和克隆生长。Brooks Celígo成像细胞仪是一种高速、易用、多通道亮场和荧光成像细胞仪,用于高通量、全孔细胞图像采集和多孔板处理。Celígo提供明 场成像和三通道荧光成像功能,用于可视化和量化烧瓶和6孔至1536孔微孔板中的细胞反应。该系统提供1µm/像素的全分辨率。整个Celígo是为明场和荧光成像而开发的,它结合了专有的光学器件和软件,可以在整个孔板一直到孔板边缘以一致的对比度对细胞进行成像和识别,这样能够识别细胞的位置和面积,而不需要额外的潜在细胞毒性荧光探针。在第0天使用双通道采集应用程序对孔板进行成像,使用荧光图像进行细胞检测,并使用明场图像对单细胞存在进行视觉验证。经过四天的培养期后,在双通道采集应用中再次对平板成像。明场成像用于确认克隆生长。IV. 活性和接种效率取决于Celígo在培养箱中过夜恢复后,比较了两种分配方法之间的活性测量。对于过夜恢复后的活性测定,将CHO细胞制备成细胞悬液,并使用Tempest 或电动移液器以每孔 500 个细胞的浓度移液到 384 孔板(Corning 3542)中。将板温育过夜。将浓度为 5µg/mL (8uM) 的 Hoechst 33342(Life Technologies,#H3570)和 2µg/mL(3uM)的碘化丙啶(PI)(Life Technologies,#P3566)加入孔中并孵育 30 分钟。使用Celígo对板进行成像和分析其活性。数据和结果I. 单细胞接种为了比较手持式电动移液器和Formulatrix Tempest之间细胞的正确分 配,对检测到单个细胞的孔数进行了量化。用电动移液器手动接种36%(3%CV)的单细胞孔板,Tempest接种32%(2%CV)的单细胞孔板(图1)。两种接种方法在单细胞接种中表现相同,无统计学差异(P0.01,n=3)。II. 克隆生长通过在第0天和第4天对单个细胞生长为一个菌落的孔进行视觉跟踪,可以很容易地用Celígo监测克隆生长的比较。图2显示了单个细胞生长成菌落的代表性图像。细胞和菌落都可以在Celígo的明场和荧光通道中看到。这允许对手持电动移液器和Formulatrix Tempest之间的克隆生长进行量化评估,其中91%(6%CV)和91%(4%CV)的单个细胞分别生长成一个菌落(图3)。这些结果表明,两种分配细胞的方法在克隆生长方面没有统计学差异(P0.01,n=3)。III. Celígo检测活性和接种效率对于两种接种方法,使用CHO-S细胞监测细胞活性。在一夜恢复期内,Tempest接种法的存活率测量值为97.4%(1.1%CV),电动移液器接种法的存活率测量值为98.9%(0.7%CV)(表1)。两种方法在接种后恢复得同样好。与平板上的细胞计数相比,Formulatrix Tempest的重复性更好,CV为10%,而电动手动移液器的CV为17%(表1)。IV. 手动与自动液体分配和孔板分析的对比与手动分配和孔板分析相比,自动化分配和孔板分析过程可大幅提高吞吐量。将细胞手动分配到384孔板大约需要3分钟,并且会受到更大的可变性和人为错误的影响。Tempest可以在大约40秒内将细胞有效地分配到384孔板上,节省了时间并提高了准确性。手动分析孔板以验证单个细胞的存在,这一劳动密集型过程每孔大约需要30秒,或384孔板需要192分钟,而Celigo S在大约7分钟内完成图像采集和分析过程。自动分配和分析384孔板大约需要8分钟,而手动分配和分析大约需要195分钟。因此,自动化过程将分配细胞和分析孔中是否存在单个细胞的产量提高了约25倍(图4)。总结本研究的目的是评估自动液体分配系统与基于孔板的细胞仪在单克隆细胞系开发中的使用。 要开发单克隆细胞系,必须首先分配实验孔板,然后验证每孔是否存在单个细胞。这些步骤可能既费时又费力,并且会大大增加实验费用。将 Formulatrix Tempest 液体分配器与 Brooks CeligoS 成像细胞仪相结合,创建了一个快速、高效和可靠的系统,用于分配和识别具有单细胞的孔。Formulatrix Tempest 在每块板不到 40 秒的时间内自动将细胞分配到 384 孔板,这比电动移液器分配快两分钟多。此外,使用Tempest消除了手动分配所需的材料槽和移液器吸头等材料的额外消耗成本。通过 Celígo S 自动评分对每孔细胞或菌落数量进行量化。结果分析表明,Formulatrix Tempest 将单个细胞分配到32% 的孔中,同时保持细胞活性。 与手动移液器分配和每孔单细胞分析相比,将两台机器一起使用可节省 95%以上的时间。
  • 镁伽CCEasy全自动高通量细胞计数分析仪,为细胞分析保驾护航
    01 两种通量选择CCEasy全自动高通量细胞计数分析仪镁伽CCEasy全自动高通量细胞计数分析仪,以高通量细胞分析技术为核心,兼容台盼蓝、荧光(AO/PI)两种染色方式,能自动化完成细胞计数、活率检测及生长情况分析,实现高效率、高质量、标准化的活细胞在线检测。机型提供24位转盘和96孔板两种选择,支持进行自动化整合,充分满足多领域的细胞分析实验需求。全自动24通量细胞计数分析仪全自动96通量细胞计数分析仪 滑动查看更多 CCEasy的软件系统通过高精度视觉检测系统结合智能主动学习Al算法,能在短时间内对多细胞样本进行高精度识别和计算,为细胞分析和质量控制提供更加可靠的自动化解决方案!02 全流程自动化无需人工介入,让细胞计数分析更智能标准高效全程标准化检测,无需人工介入,兼容24位转盘或96孔板不间断连续测样;无需设置细胞参数,即可准确识别细胞状态和数量。快速灵敏解放双手,预置试剂包,无需人工混合染料与样品;检测耗时短,1min内即可完成单个样品的制备及检测。智能管理多级用户、多级权限管理,支持电子签名、电子记录存档,符合FDA21 Part11要求。降本增效内置可长期持续使用的检测池,无需一次性细胞计数板,帮助客户节省耗材成本。 细胞计数分析仪运行流程 03 数据验证符合GMP规范,细胞质量控制更可靠标准颗粒梯度测试结果通过CCEasy细胞计数分析仪测试多种稀释倍数下标准颗粒的数量,测试数据呈现良好线性趋势,R2高达0.998,表明CCEasy细胞计数仪具有良好的准确性和一致性。以下分别为镁伽CCEasy24通道细胞计数仪测试数据和96通道细胞计数仪测试数据。多细胞样本直径测定通过CCEasy细胞计数仪对多细胞样本的直径进行测试,结果显示,通过24通道和96通道的细胞计数仪测量细胞直径,两台设备测量结果偏差非常小,具有良好的重复性。
  • 全自动/高通量/双荧光|浚真发布微流控AI细胞分析仪,用于生物制药领域!
    仪器信息网讯 8月26日,浚真生命科学官宣推出其全自动、高通量、双荧光的CytScop Pro智能细胞分析仪,其主要功能与应用场景如下:浚真 CytScop Pro智能细胞分析仪主要功能:细胞计数、细胞密度、活率分析、细胞形态、细胞直径、细胞圆度、细胞聚团率等,检测结果真实稳定,准确率高,符合GMP验证及FDA21CFRPart11要求。应用场景:疫苗、抗体及细胞与基因治疗药物的研发、工艺开发与批量化生产等各个阶段。特别是抗体行业,不论是研发阶段的细胞蛋白表达,抗体筛选,细胞株开发,培养基筛选,还是后期蛋白药的生产和质控,都需要对使用的细胞做密度和活率的监测,及时了解细胞生长状态。为不同领域的生物制药公司提供从研发、工艺到生产的全生命周期细胞计数与活率分析的实验记录和数据,实现更好的测试结果一致性和稳定性,保证全周期的数据完整性、合规性与可追溯性。CytScop Pro智能细胞分析仪的主要性能特点:全自动在微流控芯片的基础上,结合精巧的液流系统以及双荧光通道的宽场成像技术,从样品前处理、成像、分析到结果输出为标准化的全自动检测。最大程度减少人为操作引入的误差,保证检测流程的规范、稳定和可靠,大大提高测试结果的可重复性和准确性。高通量单次可检测24个样本,检测速度快,单个样品仅需90秒输出结果。智能化升级后的AI算法可以自适应多种细胞系,无需设置细胞参数。双荧光搭载双荧光通道的宽场成像系统,检测视野超过18m㎡,有效提高成像对比度。 数据完整可追溯更完善的审计追踪功能、电子记录电子签名功能,用户权限管理可根据不同的权限要求,导出完整数据。
  • 快速检测!NanoEntek自动细胞计数仪开启免费试用!
    在细胞生物学研究中,“细胞计数”是一道常规却又尤其重要的操作,可是从事细胞生物学研究的你是否有以下困惑?手工计数枯燥乏味,计数让人头晕眼花计数结果重复性差,数据可靠性大打折扣仪器设备不靠谱,结果准确性差......所以,实验室拥有一台自动细胞计数分析系统太重要啦!今天小编为大家隆重介绍一款靠谱的细胞计数仪新品——ADAM MC2 自动细胞计数仪。ADAM MC2 自动细胞计数仪(就是他!)ADAM-MC2是CAR-T细胞、干细胞等细胞治疗过程中,监测细胞数量、存活率及整个质控的理想设备。此外,在细胞治疗过程中,ADAM-MC2可以监测全血细胞、外周血细胞等细胞类型。精准测定和操作简便是他最大的特色!精准测量:该计数仪延续了NanoEntek以往产品的优质性能,同时采用高灵敏度荧光染料染色技术,结合LED光学和CMOS技术,能够大大提高细胞分析的准确性和可靠性,是自动荧光细胞计数仪的新标准。操作简单:可测量总细胞数、存活细胞数、死细胞数,并可显示存活率结果。结合一次性计数板,目前其操作非常简单、方便而又经济有效。生产商专业:这款细胞计数仪是业内知名的韩国公司NanoEntek研发推出。NanoEntek专注于细胞分析仪器的研发和生产,并于2006年韩国KOSDAQ上市。旗下细胞分析产品受到全球用户的广泛推崇。独家总代靠谱:本次活动的主办方是VWR(艾万拓)。该公司成立于1852年,作为一家全球性的制造商和分销商,是全球的实验室仪器设备、试剂、耗材供应商的领军者。2019年,VWR(艾万拓)正式宣布成为NanoEnTek细胞计数仪产品及耗材中国区独家总代理。好物需要分享~想拥有这台全自动细胞计数仪却还在头疼经费的同学看过来~价值30万的ADAM MC2自动细胞计数仪免费试用!而且,试用结束后,用户还可以特价购买他!心动了吗?仅限20台噢~先到先得!扫码提交信息即可申请噢~活动说明如下:产品名称:Nano Entek自动细胞计数仪试用名额:20名申请时间:即日起-2021/2/10用户规则说明:- 每个最终用户仅能试用一次- 试用结束后提供试用反馈表- 试用期间或者结束时,用户可以以特价购买该机器本次活动最终解释权归艾万拓威达优尔国际贸易(上海)有限公司所有。
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    艾力特国际贸易有限公司是一家专业代理全球高端实验室仪器设备的公司,拥有众多国际著名仪器品牌的总代理权公司为了更好更便捷的服务于全国各地的客户,已先后在上海、北京、广州设立分公司,并建立起了完善的售前售后体系和专业的技术支持团队,致力于为生命科学、生物工程、制药、精细化工、食品等领域客户提供最佳的产品和技术服务,让您的产品研发,生产过程控制,产品质量控制始终与世界同步。 我公司作为 Countstar自动细胞计数仪 全国总代理,诚邀全国各地的代理商加盟我们的团队,我们将秉承精诚合作、互惠互利的原则为每一位合作伙伴提供完善的服务和技术指导,实现双赢。 Countstar自动细胞计数仪是一款基于经典台盼蓝染色法原理开发,采用最新的光学成像技术和智能图像识别技术,能快速准确进行细胞计数、细胞形态检测和细胞统计图分析的实验室通用仪器。Countstar自问世以来,以其卓越的性能受到用户的一致好评。产品特性:快速自动化检测:20ul样本,20s内完成单个样本检测,自动检测细胞浓度。宽广的适用范围:5-180um大小的各种哺育动物细胞、昆虫细胞、部分浮游动物都均可适用。准确清晰的结果:520万专业级彩色成像、大范围样本采集、固化焦距保证结果准确性。全面的参数分析:从浓度、活率、直径、圆度、团聚等指标全方位考察细胞变化,自动生成细胞生长曲线和统计图表。数据储存和输出灵活:数据结果自动储存,并可通过JPEG、PDF和EXCEL格式输出。耗材成本经济节约:一片5槽的设计,提供实验结果的平行性检测,最大化节省实验成本。 更多详细产品信息请登录艾力特国际贸易有限公司网站www.alit.com.cn地址:上海市闵行区紫秀路100号(虹桥总部1号)4号楼3D室联系电话:021-62299622/62297958/62290336全国客服专线:400-820-2912
  • 技术线上论坛|5月25日《如何实现自动化、高通量单细胞力谱测量?单细胞显微操作技术一步搞定!》
    [报告简介]单细胞粘附力作为生物机械学分支的重要组成部分,是细胞与外周相互作用的直观体现,能够有效的反映出细胞与基质或细胞之间相互作用能力。细胞与基质之间的作用力十分微小,一般都在nN别,过去通常使用原子力显微镜才能够进行测量。但是原子力显微镜方案往往具有通量低,操作繁琐等问题,使得单细胞力谱的研究非常繁琐。基于此,Cytosurge推出的全新多功能单细胞显微操作FluidFM技术给细胞力谱测量带来了新的希望。该技术结合了的原子力显微镜探测技术与微流体控制系统,能够直接通过使用中空的原子力探针将细胞通过负压抓取在探针表面,并不需要激活细胞的任何通路信号,为粘附力的测量带来了大的优势。一方面,这种方法能够提供远比蛋白结合牢固的多的粘附力,能够将细胞牢固的固定在探针上并且无需包被探针。另一方面,由于没有生物化学处理,这种方法不会改变任何细胞表面的通路,从而能够得到接近细胞原生的数据。该系统具备高度自动化,能够快速,全自动的完成力学的测定,让单细胞力谱研究变得十分容易。本报告将介绍FluidFM单细胞显微操作技术的原理和发展,并结合多篇发表在期刊Nature、Cell、Bioactive Materials等上的近科研成果,深入阐述这种技术在单细胞力谱测量方面的新进展。[直播入口]请扫描下方二维码进入FluidFM单细胞显微操作技术群,届时会在微信群中实时更新直播入口,无需注册!扫码进群,即刻获取直播链接,无需注册![报告时间]05月25日 下午15:00-16:00 [主讲人介绍]Tamás Gerecsei 亚太区席应用科学家,高FluidFM解决方案工程师,Cytosurge AGTamás是一位生物物理学家,毕业于Etvs Loránd(ELTE罗兰大学)。 在与FluidFM在学术环境中合作多年后,他加入了Cytosurge公司,成为了一名训练有素的微纳米系统工程师。在Cytosurge AG,Tamás不断推动并拓展FluidFM技术的应用边界,并使FluidFM技术应用于各地研究人员的课题中。您可以经常发现他在各种专业的学术会议上传播关于Cytosurge和FluidFM技术的信息。 郭亚茹 北京大学口腔医院,口腔医学中心,获中国博士后科学基金,并入选北京大学医学部 2021年博雅博士后项目,在Advanced functional materials、Bioactive Materials、Journal of dental research等杂志上以作者或共同作者的身份发表5篇。 2021年,在Bioactive Materials发表了题为:Matrix stiffness modulates tip cell formation through the p-PXN-Rac1-YAP signaling axis的研究文章,报道了基质硬度通过p-PXN-Rac1-YAP信号轴调节细胞形成,这项工作不仅有助于在组织工程和再生医学中寻找佳材料,也为肿瘤治疗和病理性血管再生提供了新的治疗策略。在生物材料设计和治疗一些病理情况方面具有特殊意义。本实验研究人员采用了多功能单细胞显微操作系统——FluidFM技术,实现了单个细胞的分离,单个细胞粘附力的测量。 [原理&应用简介]FluidFM技术如何测定细胞粘附力?众所周知,细胞在基质上进行单层培养时,吸附在基质表面时主要会产生两种不同类型的力,一种是细胞与基质之间的粘附力,另一种是细胞与细胞之间的粘附力。因此对于细胞粘附力来说,单个细胞的粘附力就是细胞与基质之间的作用力。而单层细胞的细胞粘附力则是细胞之间相互作用力和细胞基质与细胞之间作用力之和。如下图所示:因此只要同时测定单个细胞粘附力即可得到细胞与基质之间的相互作用力,而细胞间的相互作用力则可以通过同时测量单层细胞的细胞粘附力和单个细胞的粘附力做差得到,如下公式所示:Force cell-cell ≌ Force Monolayer – Force Indiv.cellFluidFM测量力学步骤与一般的原子力显微镜十分类似,但是操作却远比原子力显微镜简单,这得益于FluidFM有的中空探针。这种探针无需像普通原子力探针一样对探针进行修饰或者将细胞提前粘连在探针上,可以直接在液体中原位抓取细胞,完成粘附力测定,并且在测量后探针仍然可以继续进行测试,并且无需对探针进行更换或再修饰。FluidFM技术测量单细胞力谱的基本流程。仅需操作鼠标系统即可自动完成对细胞的抓取和粘附力的测量。此外FluidFM系统会自动记录探针运动轨迹和力学曲线,如上图中所示当探针开始靠近细胞后,探针表面开始出现压力变化,当系统达到设定力学值后系统会自动停止下降并开始施加负压抓住细胞。随着探针开始上升,细胞给予探针的拉力随之增高,并逐渐达到临界,随后细胞脱离基质,探针受力趋近于零,而这一过程中探针受力的大值即为细胞粘附力。FluidFM技术测量HeLa细胞核CHO细胞的粘附力。能够高通量测量单细胞粘附力谱FluidFM测量粘附力十分智能化,仅需5分钟即可完成单个细胞的粘附力测定,一天可完成上百个细胞的测量,能够大幅度提升单细胞力谱测量的通量,让单细胞力谱研究变得简单、快速、高通量。 应用举例一:FluidFM技术测定衰老内皮细胞的力谱内皮细胞衰老导致细胞表型的改变与心血管疾病有着密切关系。随着细胞的衰老,细胞的粘附力等机械属性会有很大改变,因此对于细胞粘附力的研究将有助于理解细胞衰老的变化。Nafsika Chala等人利用FluidFM技术对血管内皮细胞与基底之间的粘附力进行研究发现,衰老的细胞与正常细胞存在着nN别粘附力差异。如下图所示:FluidFM技术用于衰老与正常细胞的单细胞粘附力测定。对比衰老小、大和正常细胞的细胞尺寸(a)、细胞粘附力(b)和细胞周长(c)及单细胞粘附力/面积(e)和单细胞粘附力/周长(f)的变化。研究者认为,衰老内皮细胞的粘附力增加是与细胞的粘着斑增加有关,表明衰老细胞能够加强与基质的相互作用从而防止内皮剥脱,但是受制于血流的影响这种能力受到了很大限制。 应用举例二:FluidFM揭示应力依赖性酵母交配中的分子相互作用性凝集素是芽殖酵母酿酒酵母介导细胞聚集交配的关键蛋白。交配细胞表达的互补凝集素类“a”型和“α”型的结合是促进细胞的凝集和融合的关键。Marion Mathelié-Guinlet等通过测量“a”型和“α”型结合的单个特定键的强度(~100 pN),发现延长细胞间的接触能够大地增加了交配细胞间的粘附力,而这种增强可能是由于凝集素的表达。FluidFM技术用于酵母属间交配过程单细胞力谱测量。MATa与MATα相互作用的示意图(a)和Fluid测量细胞间相互作用示意图(b)及测量结果(c);用DTT和DEPC药物刺激研究二硫键和His273对粘附的影响(d)、其示机制意图(e)和无粘附、DTT和DEPC粘附发生的概率(f);以及物理应力增强MATa和MATα细胞之间的粘合力(g)、发生频率(h)及破裂长度(i)。此外,研究组发现凝集素二硫键在粘附过程中起到了关键作用,而这一作用主要来自于α-凝集素的组氨酸残基His273。更为有趣的是,作者发现机械张力增强了相互作用的强度,这可能是由于激诱导凝集素构象从弱结合折叠状态转换成强绑定伸展状态导致。这项研究很好地展现了一种理解控制酵母性别的复杂机制的可能方法。 总结 细胞粘附力测定在细胞生命科学研究中起着至关重要的作用,然而传统手段中有着各种各样的局限性,主要原因是缺乏一种能够有效抓取细胞并进行力学测定的手段。现如今FluidFM技术在细胞粘附力测定中的使用,使得研究者们有了一种能够有效、低损的方式抓取细胞,配合原子力显微镜的测量的特性,真正意义上做到、无损、快速的测量单细胞粘附力,帮助研究者寻找细胞粘附力与细胞生命发展、肿瘤细胞转移之间的关系。
  • 美国Etaluma全自动活细胞成像系统厂商来访参观交流
    2018年10月23日,美国Etaluma CEO Chris Shumate, PHD来访锘海生命科学。Etaluma公司的全自动活细胞成像系统Lumascope可广泛应用于各类活细胞,细胞球体,组织,切片,微流控,细菌,活体成像。Dr. Shumate 给大家进行了专业的显微成像原理,Etaluma对比传统显微镜的优势,以及应用方向等的培训。大家就建立市场合作、了解中国客户需求、在各地高校进行巡回演讲等进行了深入的探讨和学习交流。关于Etaluma全自动活细胞成像系统 Lumascope美国的etaluma公司的全自动活细胞成像系统Lumascope,还可以放入培养箱内进行长时间的活细胞成像观察,保证细胞稳定的生长环境。同时也适用于观察动物、植物组织以及活体。形态小巧可便携式携带,可放入超净台中,自由组合度高。它光路设计简单,灵敏度高,成像质量好,媲美传统共聚焦显微镜。同时该显微镜可以做三色荧光(红、绿、蓝),物镜选择范围1.25X-100X,支持Z轴成像。支持培养皿,培养瓶,载玻片以及微孔板,并且通可以做1536板。其配套显微成像分析软件Lumaquant操作简单,功能强大。Lumaquant可以帮您实现在荧光,在相差和明场成像中2D以及长时间2D图像的分析,可实现检测和跟踪物体(细胞,细胞核,颗粒等)。欢迎参加慕尼黑生化展,现场测样!案例分享BPAE细胞里的DNA,alpha微管蛋白,以及F-肌动蛋白使用LS620拍摄的BPAE细胞里的DNA(蓝),alpha微管蛋白(绿),以及F-肌动蛋白(红)。使用奥林巴斯40x镜头,LifeTech FluoCell slide #2。 小鼠肾脏组织切片细胞球体形成心肌细胞钙流信号检测相差成像关于锘海:锘海生物科学仪器(上海)股份有限公司(Nuohai Life Science)成立于2004年,总部设在上海,并陆续在北京,广州,成都等地设立了8个办事处。锘海致力于提供先进的实验/研究与生产仪器、相关试剂耗材, 并提供专业的应用和技术服务支持。不断促进生命科学领域新技术发展,及时引进国外最新的技术和产品。同时,锘海生命科学为科研及企业客户提供全方位的CRO/CMO 服务,满足产业中的研发和生产需求。
  • Countstar2017北方区细胞荧光分析技术交流活动
    2017年7月17日至20日,Countstar北京办事处的产品经理陆续拜访了黑龙江干细胞存储中心、哈尔滨医科大学肿瘤医院等新老客户。针对当前细胞检测存在操作繁琐,使用成本高等问题,Countstar产品经理携带Countstar全自动细胞荧光分析仪,通过对客户提供的细胞样本进行检测,为大家成功演示了借助荧光检测技术,快速实现细胞转染、凋亡、CD marker等参数的检测过程,准确稳定的实验结果得到了工作人员的肯定。另外,Countstar产品经理们还向客户询问了细胞计数仪的日常使用情况,并为客户提供了常规的维保培训,以此为客户提供更好的使用体验。
  • 化学所在新型细胞原位荧光探针研究中取得进展
    荧光探针具有敏感性高、选择性好、响应时间短、易于直接观测、便于实时监测等优点,可以在一些特殊的应用体系和生物活性物质的检测等方面发挥重要作用,其基础研究和应用开发受到了广泛关注,特别是新原理的开发和新型探针材料的设计、合成,成为了近年来光功能材料的研究热点之一。  在科技部、国家自然科学基金委和中国科学院的支持下,中国科学院化学研究所光化学院重点实验室的课题组多年来致力于荧光传感材料的设计合成及其新型器件的研究,他们设计、合成了一系列高效的新型荧光探针分子,包括ESIPT类化合物、分子内电荷转移化合物和一类新型的三芳基硼类发光分子,并应用于纯水体系中氟离子和汞离子的检测(Angew. Chem. Int. Ed. 2010, 49 (29), 4915-4918, Anal. Chem. 2013, 85 (8), 4113-4119.)、宽范围温度的检测等领域(Angew. Chem. Int. Ed. 2011, 50 (35), 8072-8076 Adv. Funct. Mater. 2013, 23 (3), 340-345 Chem. Comm. 2014, 50, 2778-2780.)和细胞内的pH值检测等(Chem. Comm. 2014,50, 8787&mdash 8790)。  最近,在前期对三芳基硼化合物的特性研究基础上,研究人员通过分子设计,合成了一种含有咪唑盐和醚链的水溶性三芳基硼化合物。该化合物遇ATP后可发生有限的聚集,导致三芳基硼基团周围的环境极性发生显著降低,使三芳基硼的荧光大大增强。该化合物对ATP选择性好、细胞毒性小、渗透细胞膜能力强,并且在细胞内的分散性好,因此可作为活细胞内的ATP探针,对ATP的分布及示踪开展研究。通过荧光显微成像及荧光寿命显微成像等技术,研究人员利用该荧光探针研究了NIH/3T3细胞中ATP的分布及浓度。相关研究结果发表于近期的《德国应用化学》(Angew. Chem. Int. Ed. 2014, 53 (30), 7809-7813.)。  图1 利用荧光探针进行ATP 检测原理示意图  图2 共聚焦显微荧光成像,检测细胞内ATP的分布
  • 索尼以蓝光光盘技术开发两种细胞分析仪
    索尼意欲扩大其医疗业务,在最近接连发布了两款细胞分析仪。与其他公司的同类产品不同的是,索尼充分利用了该公司擅长的蓝光技术,实现了产品的差异化。   索尼新开发的是完全以光学测量手段对细胞的种类及大小实施分析的、名为流式细胞仪(Flow Cytometer)的设备。流式细胞分析术是一种基于细胞的尺寸、数量、外表层以及内部元素(如结构、功能和生物指标等)、利用光学测量对各种不同的细胞进行分析和分选的技术。该技术在血液学、免疫学和肿瘤学领域以及干细胞(如诱导性多能干细胞和胚胎干细胞)和再生医学等前沿研究领域发挥着重要的作用。鉴于在上述和其他临床领域的研究持续扩大,流式细胞分析术将有望得以进一步传播。  流式细胞仪通过向高速流过微细流路的细胞照射激光,检测细胞发出的散射光及荧光来掌握细胞的状态。其原理与利用激光读取高速旋转的光盘上的微细凹坑的光盘检测原理相似,所以索尼认为可在这一领域应用自已的技术资产。2010年,索尼收购了总部位于美国的从事细胞分析仪业务送往iCyt Mission Technology公司,开始涉足流式细胞术业务,开发融合两公司技术的新一代机型,Cell Sorter SH800是索尼的蓝光光盘技术与iCyt的细胞分选技术相结合的首个商业化产品。  将于2012年秋季开始受理订单的“Cell Sorter SH800”通过运用索尼的激光聚集技术及小型机构设计技术,实现了体积仅为以往产品约1/3的小型化(宽55mm x深55cm x高72cm),而且还为实现低价格化及作业自动化等进行了改进,相比现有的同类器材,SH800在价格上更具竞争力,它拥有实现基本细胞分选功能所需使用的最多四束激光和六色荧光的检测功能,具备完全自动化的激光束光轴调节和细胞分选电子计时功能,无需专业操作者进行复杂的设置和调整。索尼宣称即使没有专职操作人员的研究室也可轻松导入。采用一次性塑料芯片,而非原来那种又贵又难清洗的石英固定式芯片。   与使用价格昂贵的、固定的石英零部件且每次使用完毕都需进行清洗的常规细胞分选仪不同,SH800的测量通道中采用一种新研发的塑料细胞分选芯片。该芯片的生产基于索尼在光盘领域研发的精密加工技术。SH800还可以让操作者根据待测细胞的类型及大小而选择不同喷嘴直径、易于更换和安装的芯片。由于流过细胞的流路部分芯片采用便宜的一次性塑料产品,不但成本降低,而且使用更加方便,原来的产品大多使用昂贵的石英产品,而且使用后的清洗也很麻烦。   这一塑料芯片是应用了在蓝光光盘等领域培育出的微细加工技术开发而成的。据索尼介绍,其制造工序与采用层构造的光盘极为相似,比如将1mm厚的成型基板精密地贴合起来,等等。索尼医疗事业部生命科学事业部门生物科学事业室高级产品主管、部长篠田昌孝介绍说,实际上,该芯片“就是利用与蓝光光盘相同的设备制作的”。   除Cell Sorter SH800以外,索尼开发的另一款细胞仪是可分离众多荧光波形的细胞分析仪,无需原来必需的修正作业,提高了分析精度、再现性及处理速度等,是最高档机型。索尼医疗事业部生命科学事业部门生物科学事业室高级产品主管古木基裕表示,该产品“有望在不远的将来实现实用化”。   以前的流式细胞仪为了检测众多细胞发出的荧光等,需要使用满足数量要求的光学滤波器、检测器及荧光色素,而且还需要对混合在一起的荧光色素信息进行修正,将各个色素分离出来。此次索尼通过将新开发的棱镜与光电子倍增管组合使用,实现了荧光色素信息的自动分离。其原理是,用棱镜按照各色对混合在一起的荧光信息进行分离,然后通过光电子倍增管高精度测定各荧光色素的波形形状。   在使用这些仪器的再生医疗领域,随着技术的进步,研究活动日趋活跃,而且研究人员的数量也在迅猛增加。因此,索尼打算乘着这一势头,向再生医疗领域大力推广其产品及品牌。
  • 【莱恩德新品】ATP荧光测定仪的原理与应用
    点击此处可了解更多产品详情:ATP荧光测定仪  ATP荧光测定仪是一种用于测量生物样品中ATP浓度的设备。ATP,即三磷酸腺苷,是细胞内的一种能量代谢物质,其浓度可以反映细胞活力和代谢状态。因此,ATP荧光测定仪在生物医学领域有着广泛的应用。    首先,ATP荧光测定仪可以用于测量细胞活性。细胞活性是指细胞对刺激的反应能力,是评估细胞健康状况的重要指标。通过测量细胞中ATP的浓度,可以间接反映细胞的活性。因此,ATP荧光测定仪在药物筛选、细胞培养、疾病诊断等领域有着广泛的应用。    其次,ATP荧光测定仪还可以用于测量细胞内能量代谢状态。细胞内的能量代谢是一个复杂的过程,涉及到多个酶促反应和化学物质的转化。ATP是能量代谢中的关键物质,其浓度可以反映细胞内的能量代谢状态。因此,ATP荧光测定仪在研究细胞能量代谢、药物对能量代谢的影响等领域有着重要的应用价值。   此外,ATP荧光测定仪还可以用于测量生物样品中的微生物数量。微生物是生物样品中的重要组成部分,其数量和种类可以影响样品的性质和功能。通过测量样品中ATP的浓度,可以间接反映样品中微生物的数量和种类。因此,ATP荧光测定仪在食品检测、环境监测、疾病诊断等领域也有着广泛的应用。    总之,ATP荧光测定仪是一种重要的生物医学检测设备,可以用于测量细胞活性、细胞内能量代谢状态以及生物样品中的微生物数量。其应用范围广泛,对于生物医学领域的研究和发展具有重要的意义。【莱恩德新品】ATP荧光测定仪的原理与应用
  • 干货 ∣ 3D细胞球技术了解一下
    建立生理相关的体外模型对于进一步了解神经疾病的机制以及靶向药物开发至关重要。iPSC衍生的神经元显示出对化合物筛选和疾病建模的巨大希望,然而目前已经开发出使用三维(3D)培养物作为对神经元细胞的测定开发的有效方法。3D细胞培养被认为是更接近人类组织的重演方式,包括结构、细胞组织、细胞- 细胞和细胞- 基质相互作用等领域。 3D 细胞培养模式较传统的单层细胞培养模式能够更加真实地反应出细胞相互作用和化合物筛选过程中其生理变化的过程。采用手动操作进行相应检测分析会复杂而繁琐,而且随着样品量增加变得越来越困难。自动化系统能够以更加精准、更高通量的方式进行3D 细胞成像分析,ImageXpressMicro Confocal共聚焦高内涵成像分析系统将会成为您的得力研究助手。 目前,比较常见的的两种3D细胞球培养模式包括3DProSeedTM水凝胶和微流控OrganoPlate平台培养系统。水凝胶通过掺入MMP切割位点来帮助细胞迁移,并包含RGD细胞粘连基序以支撑细胞的粘附作用。这种水凝胶预制板使用方法简便,同时能很好地兼容自动化设备(图1)。OrganoPlate是一个高通量平台,结合了最新的3D细胞培养技术、Phaseguides™ 和微流体技术,它包含96个适合长期培养活细胞的组织芯片,适用于筛选目的,并且与标准实验室设备或自动化系统兼容,如ImageXpressMicro Confocal共聚焦高内涵成像分析系统(图2)。图1:图解3DProSeedTMsurface工作原理以及在模具中培养神经元细胞的过程图2:OrganoPlate中培养的神经元细胞。在充满基质胶的OrganoPlate培养槽内对接种的iCell神经元细胞进行透射光成像。细胞以每芯片30,000个细胞的密度培养72h,然后用20X平场荧光物镜进行透射光成像。 更多实验内容请扫描下面二维码获取。
  • ThawSTAR细胞复苏仪—无水自动化解冻细胞“黑科技”
    前言:深低温下细胞出于“休眠”状态得以长期保存,解冻后需要维持较好的活率才能达到应用效果 ,细胞解冻需要一个”舒适“的温度范围,如何实现过程控温?如何有效安全解冻细胞?如何维持工艺可重复?今天小编向各位介绍一款全系列产品,它就是美国百奥莱BioLife公司开发的ThawSTAR细胞程序复苏仪,一直被业内视为解锁细胞解冻工艺黑科技产品,ThawSTAR可以轻松实现细胞自动化解冻,标准工艺高度重复,解冻安全、操作方便、性能稳定!一、ThawSTARTM CFT系列细胞复苏仪(冻存管专用)2021年6月23日CFDA正式批准由复星凯特引进美国Kite的嵌合抗原受体CAR-T细胞治疗产品奕凯达(阿基仑赛注射液)上市,该药品为中国首个获批上市的细胞治疗产品,行业士气颇受鼓舞,9月3日,国内第 2 款CAR-T! 药明巨诺 “瑞基仑赛注射液”获批上市 。一时间,朋友圈瞬间被刷爆,翘首期盼,艰辛付出,终于硕果累累!近二十年,随着世界生物技术快速发展,国内生物制药行业生机盎然,新的制药工艺不断引进与改进,免疫细胞靶向治疗已然成为实体肿瘤、癌症等决定患者生与死的最后救命稻草。对于采用“活体”细胞静脉注射的方式备受关注!白血病女孩Emily通过CAR-T疗法实现痊愈的故事,让患者再次看到希望。实际上,细胞解冻复苏需要一个“舒适温度”范围才能维持较好的解冻后活率,美国百奥莱BioLife 公司自2015年推出首款ThawSTARTM CFT系列细胞程序复苏仪以来,一直被视为业内黑科技产品,在无水干式的条件下自动化轻松解冻冻存管内细胞,而且维持与水浴一致的解冻活率,该款仪器设计小巧,操作简单,通过STARTM低温传感技术监控细胞样本解冻过程温度变化,可以在BSC生物安全柜内洁净度较高的环境中直接使用,相比传统水浴操作,ThawSTAR 解冻更安全、更稳定、更方便!ThawSTARTM 操作简单,流程如下:1. 连接电源启动仪器,预热至起始温度2. 垂直插入冻存管3. 仪器自动启动解冻程序4. 程序达到解冻终点后,冻存管弹出5. 取出样本后,轻轻晃动,冰晶消失。ThawSTARTM CFT系列细胞复苏仪订购信息,如下:二、ThawSTARTM CB系列细胞复苏仪(冻存袋专用)当前,已上市的几款CAR-T细胞药主要采用冻存袋灌装解冻,复杂且昂贵的生产工艺决定了其在终端市场的售价,此前,复星凯特阿基仑赛注射液被流出的药品销售订单来看,国内首款CAR-T疗法阿基仑赛注射液零售价为120万元/袋(约68ml),复星凯特相关负责人回复记者称,“公司CAR-T细胞治疗产品定价将根据价值、疗效、成本等各项综合考量制定,目前定价方案尚未最终确定,正在进行多方沟通中,希望可以惠及风多中国患者。” 但毫无疑问的是CAR-T细胞疗法确实很贵!(来源:资料图)(来源:资料图)CAR-T细胞疗法的全称是嵌合抗原受体T细胞免疫疗法,其中CAR指的是嵌合抗原受体,它的原理在于先激活免疫细胞,然后再去杀死癌细胞,即利用T细胞来杀死癌细胞。针对冻存袋细胞给患者静脉注射前最关键的一步解冻复苏工艺,美国百奥莱公司开发了ThawSTARTM CB细胞程序复苏仪!为实现冻存袋细胞标准化解冻方式提供了新途径!ThawSTARTM CB细胞程序复苏仪是一款针对细胞冻存袋细胞标准程序解冻的复苏仪,针对25~1000mL 容量6个标准规格冻存袋,提供了12个标准的解冻程序,通过STARTM低温穿透传感技术,直接检测细胞样品温度,实时传感系统自动判断解冻结束终点,给细胞解冻时控温提供了有效途径,人性化的操作界面一目了然,密码登录,解冻过程温度数据记录,方便追溯。对于不同细胞剂量美国百奥莱厂家还可以提供订制化解冻程序服务,仪器整体设计结构紧凑,桌面型触摸屏操作,操作简单、安全、稳定。 同样,ThawSTARTM CB优化了操作设计,流程如下:ThawSTARTM CB细胞复苏仪,程序可选、操作简单、解冻安全!ThawSTARTM CB系列细胞复苏仪订购信息,如下:三、ThawSTARTM AT系列细胞程序复苏仪(冻存瓶专用)传统的细胞药主要采用冻存袋存储细胞并在临床上注射使用,但是,受冻存袋包材本身柔软等材料本身特性限制,无法自动化批量分装,液体残留偏高。最近十年,由比利时Aseptic Technologies公司研发生产的AT-Closed Vials可谓是火遍了全球生物技术靶向治疗行业,解决了小剂量分装,深低温冻存、同时也实现了自动化放大分装工艺。尤其干细胞用户群体普遍采用6mL的AT-Closed Vial,那么针对6mL规格的AT-Closed Vial 如何实现有效干式精准解冻呢?美国百奥莱公司早在2018年便开发了ThawSTAR AT6细胞程序复苏仪,并被国外多家知名免疫细胞公司所采用,通过订制化标定解冻过程温度执行程序,可实现自动且精准的判断解冻结束终点,操作简单,工艺高度重复,避免了人为主观判断解冻终点造成的细胞药“失效”!ThawSTAR AT6 细胞复苏仪对于不同剂量下,液氮与干冰冻存过的样本解冻时间表现对比,如下:ThawSTARTMAT系列细胞复苏仪有多款型号,订购信息如下:如果您需要申请Demo机试用,请抓紧联系我们吧!中国区授权总经销:上海朗喜工业科技有限公司
  • 索尼发布全自动光谱细胞分析仪SA3800
    2015年6月17日,索尼公司(下称&ldquo 索尼&rdquo )今日发布SA3800全自动光谱细胞分析仪,一款配备了全新研发的3D驱动(X, Y, Z 轴)自动取样器的新型流式细胞分析仪。SA3800实现了完全自动化的便捷操作,其自动取样器将能实现高速的分析及处理功能。 ▲SA3800光谱细胞分析仪和全新研发的3D驱动自动取样器  流式细胞分析仪使用激光照射荧光试剂染色的细胞,并通过测量荧光和散射光分析细胞类型及特性。流式细胞分析仪广泛应用于免疫学、肿瘤学、再生医学以及药物开发等细胞学研究领域。尤其在药物开发和生物指标1开发等需要分析各类细胞的领域,非常需要快速、高效、精准地分析大量样本。  在传统的自动取样器中,孔板采取水平式移动,而试样探针2则是垂直移动来收集样本,这就导致样本需要来回移动较长的距离才能被采集到,这将有可能影响处理速度和样本残留率(样本间交叉感染的几率)。SA3800中的新款自动取样器使用了固定试样探针和可3轴(X,Y, Z 轴)移动的孔板,可以加速样本取样及分析过程。同时,该取样探针还自带自我清洁功能,可以进一步将样本残留率降低至0.1%或以下。这些独特性能将保证SA3800实现高速且稳定的样本收集,这在大量样本的分析工作中将是一个极受欢迎的产品特性。  此光学单元使用了索尼原有的探测荧光反应的光谱分析系统,该系统已用于此前发布的索尼SP6800Z系列3细胞分析仪,并在市场上取得了不错的成绩。该系统采用了高感应度的32通道光电倍增管(PMT),可检测并分辨出原先无法测量的细胞自体荧光因素4。它还能大大缩短荧光试剂修正的费时过程,确保结果的可靠性且减少人为因素。  今年6月26日,索尼将在英国格拉斯哥举办的第30届细胞学推进国际学会大会上中进行SA3800的展示。  1.一种物质,例如在血液中检测到的某种特殊蛋白质等,通过它的聚集显示出某种疾病的存在和发展  2.可萃取细胞样本的管子  3.请访问索尼网址获取SP6800Z系列产品相关信息  4.可由细胞自身反射的微弱荧光性SA3800的主要功能  1.新开发的3D 自动取样器SA3800的自动取样器使用3D驱动,快速和有效收集细胞样本。当和96孔孔板或384孔孔板结合使用时,可在保持较低样本残留的情况下,实现对大量样本的快速自动化分析。  3D自动取样器的主要性能 -  ●高速自动取样,在25分钟内完成96孔孔板的取样  ●低样本残留比例:0.1%以下  ●试样探针具备内置的自动清洗功能  ●可配合96孔孔板、384孔孔板及5毫升试管管架  ●通过摇晃对样本激活的功能;对样本进行冷却的功能  2.使用索尼自行开发的光谱分析技术实现高准确度的、可靠的分析  ①在不进行滤光的情况下,荧光波长将被索尼独家设计的棱镜所分解。在使用32通道的光电倍增管之后,可对荧光波形进行高度准确的分析。  ②索尼自行开发的分析算法。使用索尼开发的分析算法,根据波形将多种荧光物信号分解为不同的颜色信息。这些数据随后将依据密度等特征进行分析。这一分析算法可以分辨出具有非常相近波形的荧光物,以及位置非常接近的光波波峰,这在常规滤光技术下是很难实现的。▲传统细胞分析器的分析结果▲特殊细胞分析器的分析结果  ③自发荧光检测。因为个体样本拥有不同的自发荧光水平以及其它因素,对大量样本进行测量会因为不一致的荧光背景变得很复杂,这使通过数量去比较样本难以实现。索尼开发的光谱分析技术,通过将自发荧光识别为一种颜色,从而与其它信号区分开来,这就解决了上述问题并令分析更为可靠。  3.灵活的光学系统可以根据需求兼容四种激光。  除了常规的488nm以外,还有405nm、561nm、638nm。今后对SA3800加入更多激光也是有可能的。
  • 第三届微流控细胞分析学术报告会圆满落幕——新原理、新技术未来可期
    2021年9月29日,为期两天的第三届微流控细胞分析学术报告会在北京中国国际展览中心(天竺新馆)圆满落幕。本届论坛由中国分析测试协会和清华大学化学系联合举办,旨在为从事相关领域专家学者、科研人员等提供多学科交叉学术交流平台。本届会议,共计20余位资深专家学者就微流控细胞分析领域的最新科研成果分别作精彩报告!会议首日,10余位专家就器官模拟与细胞代谢分析等领域进行分享探讨(点击查看首日精彩报告:微流控技术大有可为)。会议次日,7位专家学者分别就微流控新原理、新技术等方向带来精彩主题报告,详情如下:报告人:南京大学 李仲秋副研究员报告题目:《生物传感和能源转化的纳流控器件》李仲秋副研究员报道了各类纳流控器件应用于不同的材料与生物的成果,对比说明了纳流控器件之于传统器件在性能上的优势,并提出了纳米通道中分子检测方法的一般模型。报告人:南方科技大学 蒋兴宇教授报告题目:《微流控-液态金属的细胞调控与分析》蒋兴宇教授介绍了用微流控芯片来提升细胞分析检测性能的系列方法与各类应用,此外还着重介绍了结合微流控芯片的金属高分子导体(MPC),拓展了微流控芯片研究的新思路。报告人:北京工业大学 汪夏燕教授报告题目:《基于超薄可控温微坑阵列芯片的单细胞胞内递送》汪夏燕教授介绍了一整套单细胞操作的基本流程,包括对细胞的捕获、固定到探针递送等步骤,结合三光路显微镜成像技术,能有效实现对单个细胞的精准检测研究。报告人:中国农业大学 林建涵教授报告题目:《用于病原微生物快速检测的微流控生物传感器研究》林建涵教授提出了食源性致病微生物检测的重要性,并针对此问题提出了免疫磁珠分选的方法,实现了对目标微生物的高通量检测;此外还针对提升检测灵敏度介绍了电化学生物传感器等有效新型分析方法。报告人:清华大学 梁琼麟教授报告题目:《药物分析“芯”方法》梁琼麟教授介绍了建立“芯片药物实验室”的基本思路,并基于此设计了一系列的芯片器官与仿生材料,以物理结构重现、细胞结构重现和器官功能重现为目标,完成了肾小球模拟的重要工作。报告人: Chinese Chemical Letters编辑部 郭焕芳副主编报告题目:《中国化学快报进展》郭焕芳副主编介绍了CCL杂志的创办理念与该期刊目前取得的优异成绩,并呼吁各位学者在撰写高水平论文的同时,保持学术端正。报告人:华中农业大学 何子怡副研究员报告题目:《微流控芯片质谱联用细胞分析仪器的研制与应用》何子怡副研究员通过总结传统芯片液滴产生的模式,提出了基于声控产生液滴的新型方法,兼备了仪器的便携性与实验的可控性,为芯片液滴技术发展提供了新的思路。报告环节过后,清华大学林金明教授就闭幕式致辞。清华大学林金明教授闭幕式致辞林金明教授总结了为期两天的专家报告内容,为各位从事微流控生命分析的学者们提出了期许,希望大家铭记该会议的追求创新的精神,共同推动中国微流控分析领域更上一层楼。后记放眼未来,林金明教授认为微流控芯片在单细胞分析等领域应用意义重大,将会对生命科学的研究起到巨大的促进作用。与此同时,我们期待各位专家学者在微流控细胞分析技术领域取得更多的突破与创新,也期待在下一届微流控细胞分析技术学术会议能继续为听众带来如此前沿技术的饕餮盛宴。
  • 中科院分子细胞卓越中心俞珺璟博士:流式细胞技术平台发展与使用心得分享
    生命科学基础研究与人类健康和社会经济发展密切相关,在科学和经济社会领域中的重要性日渐增强。Science 曾发布125 个挑战全球科学界的重要基础问题,其中涉及生命科学的问题约占 54%。生命科学研究过程离不开各类科学仪器的帮助,今年,仪器信息网特别策划话题:“生命科学技术平台经验分享”,邀请高校、科研院所公共技术平台的老师分享技术心得和经验,方便生命科学领域研究人员了解相关技术进展、学习仪器使用方法。本篇为中国科学院分子细胞科学卓越创新中心细胞分析技术平台副主任俞珺璟撰写,俞老师根据多年工作经验,详细介绍了流式细胞术的发展,并分享了长期工作中仪器使用的心得体会。以下为供稿内容:流式细胞术最初诞生于20世纪60年代末,发展之初主要应用于计数和评估颗粒的大小。随着硬件和软件的不断升级发展以及各种荧光试剂的迭代更新,流式细胞术作为一种能够对细胞群、细胞亚群及单个细胞或者颗粒进行多参数、快速的定性/定量的分析手段,已经被深入应用于细胞生物学、免疫学、病毒学、肿瘤生物学、传染病检测、食品和环境监控及生物制药等多个研究领域。流式细胞技术部门作为中国科学院分子细胞科学卓越创新中心细胞分析技术平台的一个重要分支,从成立最初的只有一台2激光4色流式细胞检测仪和2激光7色流式细胞分选仪发展至今已经具备了高低不同配置的流式细胞检测仪8台、流式细胞分选仪7台、高活性全自动磁珠分选仪1台(http://sjzx.sibcb.ac.cn/Cn/Index/pageView/catid/32.html/list/48 ),最大程度地满足中心及周边乃至全国科研院所在流式细胞仪方面的实验需求。平台流式的建设和发展与流式技术的不断更新、科研方向的转变是息息相关的。现就平台在流式方面的使用心得进行分享及对未来流式潜在的需求做一些展望。一、流式细胞检测传统流式细胞仪的硬件系统通常由一个或者多个激光器组成的光照系统、二向色镜以及带通/长通滤光片组成的分光光学器件、高灵敏度光电倍增管(PMT)或雪崩光电二极管组成的检测系统组成。传统流式细胞仪内一个激光器可以搭配2个或多个PMT通道,一个PMT对应一个检测通道,接收发射光谱的峰值信号。激光器越多检测通道越多,可检测荧光信号也越多。平台根据中心各课题组的实验需求配置了不同型号的基于传统检测原理的流式细胞检测设备。1.1 细胞內源荧光蛋白或自发荧光的流式细胞检测细胞内源荧光蛋白或自发荧光的检测主要包括三个方面的应用:1.细胞系转染质粒后阳性比例的检测;2.组织来源带有内源性荧光标记蛋白的细胞比例情况,例如细胞示踪实验;3.细胞自发荧光的测定,比如细胞富含某类化合物,而该类化合物具有较强的自发荧光,可以作为该类细胞的识别标志物。这三类实验基本只用单色或者两色的流式设备配置就可以开展实验。通常转染了只带有GFP标签蛋白的质粒细胞进行流式检测时,只需有488nm激光器,但是如果有mCherry之类的荧光蛋白,必需要有561激光器进行激发。如果带有GFP和mCherry两种融合荧光蛋白的小鼠组织来源细胞进行实验时,要注意两种荧光蛋白的表达水平,尤其是mCherry表达强而GFP表达弱时,mCherry的荧光溢漏会影响GFP通道,所以要利用合适的单荧光样品管作为单染管进行补偿调节。对于一些自发荧光的细胞,例如富含维生素A的细胞类型,可以用405nm激光器激发,450/50带通滤光片进行收集。对于这些荧光蛋白检测的实验,平台需要配备405nm/488nm/561nm的流式检测设备即可。1.2 常规细胞生理健康的流式细胞检测细胞凋亡、倍型、周期是流式平台做的最多的和细胞生理健康相关的实验。细胞凋亡实验一般会采用PI/Annexin V-FITC双指数染色,只有488nm激光器的设备就可以满足实验需求,但是如果有488nm/561nm独立光斑的仪器就可以省略调补偿的过程。细胞倍型一般会采用Hoechst 33342进行染色,以区分单倍体、二倍体等。Hoechst和双链DNA结合后最大激发波长为350nm,最大发射波长为461nm,因此需要配备了355nm激光器的设备,450/50带通滤光片收集。细胞周期一般会采用PI染色的方法,488nm或者561nm激光器都可以激发。因此,对于细胞生理健康的检测,如果使用上述染料基本配备355nm/488nm/561nm激光器的流式检测设备即可。1.3 多色流式细胞检测平台在多色流式细胞检测上主要围绕免疫细胞、造血干细胞、成体干细胞等的分型鉴定。多色流式检测从配色方案设计、设备选择、样品制备、上机和数据分析,过程相对更为复杂。因此,平台配备了4激光12色,4激光14色,5激光18色,5激光19色,5激光28色等多参数流式细胞仪,以满足各种实验需求。在实验过程中,如果多色实验,补偿调节依然是许多用户困惑的地方。如何获得正确的补偿矩阵是保证后期样品数据分析准确性的前提。现在的流式细胞分析仪基本都具备自动调节补偿的功能,因此可以用样品来确定各检测通道的电压后,用补偿微球进行补偿调节可以避免细胞阳性群不明显的困扰。随着仪器光路结构/检测器、电子元器件和分析软件的不断迭代,光谱流式技术的实用性得到了发展。在2005年的时候,Robinson等人提出了可以通过使用棱镜或光栅系统进行分光,配合32通道PMT或CCD检测器阵列可实现500-800nm波长范围内的全光谱信号检测技术。与棱镜分光相比,光栅分光系统可以通过单缝衍射原理对复合荧光实现均匀色散分光,在保证荧光信号真实性的基础上确保所有波段的荧光信号可以同时到达PMT检测器阵列中,实现全光谱信号检测的时空一致性,确保染料光谱的真实性。全光谱流式细胞仪可以跨越所有激光线,检测到可见光波长范围内(360-920nm波长)的全光谱信息,获得每一种荧光的整个发射光谱信息,最后利用WLSM算法(最小加权二乘法)对多个光谱进行拆分,获得每个单一荧光探针的完整光谱信号,从而避免使用传统的补偿计算矩阵,收集到更加全面与准确的荧光信号。因此,通过引入光谱流式技术,可以避免传统流式实验中高参数实验的补偿困扰。比如,通过光谱流式,平台已经实现了小鼠肠道23色免疫细胞分析方案、28色肿瘤免疫细胞亚群分析实验等。但是值得注意的是,光谱流式需要正确的光谱信息,比如样品固定会影响光谱信号,所以固定前后需要建立不同的荧光光谱库。1.4 高通量流式细胞检测流式分析上样方式除了传统的5ml流式管上样外,现在的注射泵和蠕动泵进样方式还可以支持1.5ml EP管上样。而对于一些高通量筛选的时候,尤其是悬浮细胞,利用高通量上样器可以很好地解决这类实验数据采集问题。尤其是带有声波聚焦技术的出现,可以将待测细胞精确聚焦在样本流的中心位置,每个细胞样本都可以准确地聚焦在激光检测区,即使在高流速1ml/min进样速度也能保证信号的变异系数较小,数据质量更高。同时伴随注射泵式的上中下三点混匀模式和推入式进样可以最大限度避免细胞堵塞,从而实现提高样本通量的同时,保证读取样品速度及获取的数据质量和精度。平台配备这种高通量流式检测设备可以提升科研的效率,有效节约科研工作者的时间成本。二、流式细胞分选2.1 传统流式细胞分选常规流式细胞分选早期是基于空气激发原理,此类流式分选仪低压高频的分选特点保证样品分选速度快,对分选后细胞的活性保持得更好。但是它需要手动校准光路和液路,对仪器操作者的技术要求很高,对环境条件的要求也比较苛刻。随着技术发展,现在大型仪器平台都会配备基于石英杯激发原理的流式分选仪,因为是固定光路,只需对仪器进行基本的质控校准和液滴延迟校准,使得分选仪开机工作变得相对简便。加电式的分选模式基本对细胞的活性都会有损伤,所以在分选速度、纯度和活性三者之间如何进行条件优化也是对仪器操作者的一种考验。对激光器的配置要求可以根据实验需求来决定。以我们平台为例,因为有大量的分选实验涉及单倍体细胞的分选,需要使用核酸染料Hoechst 33342,以区别不同倍型细胞中处于不同减数分裂时期的细胞,因此需要功率可调的355nm激光器进行激发,保证此类核酸染料的激发效率。根据DNA浓度和DNA构型,使用450/50(Hoechst Blue)和670/30 (Hoechst Red)带通滤光片双指数显示获取数据。但是核酸染料的使用也往往造成管路、流动室等位置会有样品或染料残留,需要更多的维护时间和人力成本,同时不可避免地减少了可使用机时。因此从平台的用户群角度出发,可以将355nm激光器和405nm激光器分开配置到两台设备,这样可以兼顾保证核酸染料用户群和多色分选用户群的使用需求,也最大程度地避免了两类样品的交叉污染。2.2 芯片式流式细胞分选芯片式流式分选仪最大的特点在于“分选芯片-喷嘴一体化”代替传统的石英杯与喷嘴,因此避免了因流动室或喷嘴支架无法更换造成的样品残留和污染。更换了新的芯片后,可以真正将样本在流动室中的残留率降低到零,这种设计对细胞移植和生物危害性样本分选等对交叉污染零容忍的分选应用更为友好。传统流式细胞分选仪在实验前须对仪器进行一系列复杂的调试步骤,包括光路校准,液流断点优化、侧液流校准和液滴延迟计算等,对仪器操作人员的依赖性更大,普通用户短时间内难以掌握。微流体芯片分选仪已经实现了上述所有调试和校准步骤自动化,并能在分选过程中对液滴状态进行实时监控和自动调节,简化了仪器操作过程,保证了每日仪器状态的稳定性,而且还能匹配不同规格的微流体芯片(70um,100um,130um)可以适用于更多的细胞类型。校准模式中还设计了大液滴模式,液流会更加稳定,更加适用于大细胞和多孔板(96或者384孔板)的分选。鉴于这种芯片式流式分选的特性,平台中一些抗体的单克隆筛选,384孔板测序建库,原代神经细胞等实验会借助这种分选平台进行。2.3 磁珠分选免疫磁珠分选主要基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合,在外加磁场中,通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中,而没有这种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性,先被洗脱下来,撤离了磁场后,带有抗体的细胞再被洗脱下来。因此,可以快速地分选得到阴选和阳选的细胞。作为一种功能较为独立的分选设备,磁珠分选主要应用于简单抗体标记的细胞分选和稀有细胞样品前期的富集,提高目的细胞的比例,可以帮助缩短在后期的流式细胞分选的时间提高获取细胞的纯度。分选后细胞纯度高、活性大,通过阳选,还能有效去除细胞碎片。但是对于一些需要内源蛋白标记的细胞还不能通过这种技术实现快速的分选。三、流式平台管理心得和未来可提升空间第一、 在流式使用方面,日常的维护是必不可少的,特别是使用频率特别高或者使用核酸染料样品较多的设备,可以将仪器维护频率提高到一周一次大清洗,同时在每一个用户实验结束后配合使用高浓度clean液-Rinse液-去离子水的冲洗流程,最大程度地保证管路和流式室的清洁,保证仪器正常的使用状态。第二、 对流式技术人员的要求日渐提升,除了会日常的开关机、维护、指导学生上机实验外,需要技术人员对不同样品的特性有更多的认知,判断其数据采集或分选过程中结果不如预期的潜在关键所在,此外还需要具备简单故障排除和硬件故障断定的能力,以缩短流式维修时间成本。第三、 平台设备需要密切结合用户群的实验特性、使用频次、科研目的等关键指标进行合理的配置,同时也要关注平台的技术空白和短板,予以填补和提升。第四、 随着对外泌体、病毒、细菌、亚细胞结构如线粒体等天然纳米颗粒检测需求的提升,可识别直径小于100nm颗粒的纳米级流式细胞术因其在外泌体研究、囊泡运输、纳米药物开发等方面的应用,可以作为纳米尺度小颗粒检测的金标准。第五、 随着光谱分析技术的提升,解决了光谱数据实时解析的问题后,整合了空气激发、低压高频、全自动校准、生物安全等功能的全光谱流式细胞分选仪势必在高参数高速流式分选中发挥更重要的作用。最后,国产流式技术团队在整机开发、配套试剂、技术能力、科研应用、售后服务等方面的不断提升,例如国产光谱流式、国产质谱流式在科研平台的落地化比例逐年上升。作者简介:俞珺璟 细胞分析技术平台副主任/高级工程师俞珺璟,中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学和细胞生物学研究所)细胞分析技术平台副主任,博士,高级工程师。2004-2009中国科学院生物物理研究所获博士学位;2007-2009年美国密苏里州Stowers Institute for Medical Research访问学者;2010-2018在中国科学院生物物理所感染与免疫重点实验室从事细胞生物学及天然免疫学相关研究;2018年9月加入中科院生物化学和细胞生物学研究所细胞分析平台,副主任,主要负责流式平台仪器运维、大型仪器理论及实操培训,承担院级功能开发研制项目等,曾作为特邀主编,编撰《流式细胞术实验手册》,已在线发表于Bio-Protocol。2021年被评选为"中国科学院关键技术人才"。相关阅读:细胞生物学研究的利器——仪器平台负责人经验谈点击进入话题页面
  • Spark微孔板多功能酶标仪,专为高性能细胞荧光检测而设计
    实施荧光检测是提高检测质量和灵敏度的一个快捷有效的途径。实现荧光检测最优化要求光学系统同时具有灵敏度和灵活性。以使用发射光束能横跨整个波长光谱的荧光染料为前提,高性能的光电倍增管 (PMT) 可以帮助您进行多重分析检测,给您清晰分离的信号和绝对的检测灵敏度。 细胞荧光检测增加了其他复杂因素:分析微孔底面分布不均匀的贴壁细胞极具挑战性,以及如何最大限度地减少培养基的自体荧光。Tecan Spark微孔板多功能酶标仪,采用荧光Fusion Optics™ 技术,能够应对这些挑战并提供您在设计及运行高等生物化学检测及基于细胞的荧光检测所需要的所有技术支持。 Tecan Spark多功能酶标仪,准确、灵敏地测定细胞荧光。使用灵活的Fusion Optics技术,发展高灵敏度的荧光检测方案 Spark独特的Fusion Optics功能为您的检测方案的提供了灵活且灵敏的开发平台。利用Fusion Optics技术, 您可以在同一检测试验中按需组合使用滤光片和光栅。这是相对于全功能酶标仪性能上的重大飞跃。 滤光片选择的灵活性既能够使激发端的光束输入最大化,也能使发射端信号检测效果最大化,而光栅能通过扫描以确定最优化设置的波长。用户选用的深阻二向色镜能提高波长谱末端常见染料的灵敏度。大功率氙闪灯减少了得到可靠灵敏的结果所需的闪光次数,因此您不必在灵敏度和速度间犹豫不决。结合应用了SparkControl软件后,系统可以通过自动调节扩大动态范围,避免荧光检测进入饱和状态。 使用光栅/光栅系统(浅绿)和光栅/滤光片系统(深绿)来扫描激发和发射波长的最大值。第二种组合系统能识别出更鲜明且灵敏的最大值。细胞检测时聚焦于微孔底面进行酶标可以使背景的自发荧光最小化 在细胞荧光分析中,使用传统的微孔底面酶标技术会降低检测的灵敏度,因为光束在到达样品之前必须要先穿过塑料或者玻璃板。这就降低了可以激活荧光的光束的量。Tecan Spark酶标仪能为您提供高性能的微孔底面酶标模块,以解决上述问题。Tecan Spark酶标仪拥有基于透镜的底面酶标系统,结合能将光束引导到样本焦点的Z-focus程序, 能提供极高的灵敏度。优化的酶标功能通过多次测量排列在微孔中的分离的样本点,可以使细胞分布不均导致的差异最小化。 基于细胞的检测所得的安全可靠的结果 为了可以得到可以在不同实验,不同微孔间比较的细胞检测结果,您需要特别注意细胞数量、细胞分布和细胞的健康状况。Tecan Spark酶标仪运用明视场及免标记技术、激光自动对焦技术,使您能够检查这些自动检测参数。细胞图像和细胞汇合度可以进行自动测量。使用SparkControl的实况查看器, 您可以使用Snapshot功能,记录开始实验之前的最后一个图像。 Tecan Spark酶标仪的细胞孵化功能如温度控制、气体控制和湿度控制允许细胞在酶标仪中孵育几天的时间。Tecan Spark酶标仪的自动开盖和进样器功能,以及可以进行有条件动力学编程,使检测的完成实现了智能自动化。例如,正常生长控制条件下细胞可以在酶标仪中生长;达到预定的细胞汇合度之后,酶标仪可在微孔中加入某种物质,激发GFP的产生。这是额外的荧光动力学监测功能, 在运行的同时监测图像以控制细胞的生长。总结Tecan Spark多功能酶标仪,以它独特的Fusion Optics技术,能在荧光检测领域带给而我们绝佳的性能体验。在同一检测中,滤光片和光栅的组合带给我们前所未有的灵活度,却丝毫没有影响其准确性。 环境控制特征、 成像能力及其动力学条件,使您的细胞检测实验得以自动化和标准化,且具有极高的重复性。结合了特殊的酶标功能,如基于透镜的底面酶标系统、自动化的z-focus以及优化的酶标功能,Tecan Spark是研究细胞和荧光时最理想的多功能酶标仪。
  • 免疫荧光显微成像详解(上)——免疫荧光原理、步骤
    前言免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术,它是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术(比如流式细胞仪)测定含量。直接法将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经一定的温度和时间的染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检。间接法如检查未知抗原,先用已知未标记的特异抗体(第一抗体)与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗抗体(第二抗体)与抗原标本反应,使之形成抗体—抗原—抗体复合物,再用水洗去未反应的标记抗体,干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体,则表明抗原标本是已知的,待检血清为第一抗体,其它步骤的抗原检查相同。标记的抗抗体是抗球蛋白抗体,同于血清球蛋白有种的特异性,如免疫抗鸡血清球蛋白只对鸡的球蛋白发生反应,因此,制备标记抗体适用于任何抗原的诊断。一、实验步骤免疫荧光实验的主要步骤包括 样片制备、固定及通透(或称为透化)、封闭、抗体孵育、封片及荧光检测等。1、 样品准备对于单层生长细胞,在传代培养时,将细胞接种到预先放置有处理过(70%乙醇中浸泡)的盖玻片的培养皿中,待细胞接近长成单层后取出盖玻片即可,操作过程要小心,防止细胞脱片。对于悬浮生长细胞,有两种方式,一种是取对数生长细胞,制备细胞片或直接制备细胞涂片,把细胞片浸入封闭液中固定,封闭后滴加一抗和二抗孵育;另一种是先在悬浮液中进行固定和染色,离心洗脱后,用移液管移至盒式玻片进行后续抗体孵育。对于冰冻切片制备,建议用新鲜组织,否则组织细胞内部结构破坏,易使抗原弥散。组织一定要冷冻适度,切片时选用干净锋利的刀片,防止裂片和脱片。对于石蜡切片的制备,要先进行脱蜡和抗原修复的处理。2、固定做好切片并风干后立即用合适的固定液(固定液包括有机溶剂和交联剂,其选择取决于抗原的性质及所用抗体的特性)进行固定,尤其要较长时间保存的白片,一定要及时固定和适当保存。固定时间则取决于固定组织切片的大小和类型,对大多数组织,18-24h即可,而细胞的固定时间较短。3、通透针对胞内抗原,使用0.5% Triton X-100或丙酮等通透剂进行通透,这一步的目的是使抗体进入胞内。 4、封闭为防止内源性非特异性蛋白抗原的结合,需要在一抗孵育前先用封闭液(一般包括与二抗同一来源的血清、BSA或者羊血清)封闭,减弱背景着色。封闭开始后,要注意样品的保湿,避免样品干燥,否则极易产生较高的背景。5、一抗孵育一抗孵育温度一般分为:4℃、室温、37℃,其中4℃效果更佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37℃孵育1-2h,4℃过夜(从冰箱拿出后37℃复温45min)。具体条件还要根据样品、稀释液等条件进行摸索尝试。6、荧光二抗孵育荧光二抗孵育一般在室温或37℃孵育30min-1h,该过程必须在避光环境下进行,防止荧光淬灭。荧光素标记的二抗随着保存时间的延长,可能会有大量的游离荧光素残留,需要注意配制时采用小包装并进行适当的离心。7、复染一般采用DAPI进行复染,目的是形成细胞轮廓,从而更好地对目标蛋白进行定位。8、封片为了长期保存,我们需要对样本进行封片,用吸水纸吸干爬片上的液体,一般用缓冲甘油等或专门的抗荧光淬灭的封片液。9、 荧光观察有条件的话最好立即用荧光显微镜观察拍照,若不能及时拍照,也要做好封片和封固,保持避光和湿度。荧光显微镜的成像能力对最终的结果也会造成很大的影响,好的荧光显微镜能够最大限度地收集荧光信号,并呈现高分辨率的图片,使细节更清楚,更易得到一张效果极佳的结果图。注意:切片清洗:为了防止一抗、二抗等试剂残留而引起非特异性染色,所以适当地加强清洗(延长时间和增多次数)尤为重要,一般在一抗孵育前的清洗是3min*3次,而一抗孵育后的清洗均为5次*5min。(1)单独冲洗,防止交叉反应造成污染;(2)温柔冲洗,防止切片的脱落。可使用浸洗方式;(3)冲洗的时间要足够,才能彻底洗去结合的物质;(4)PBS的PH和离子强度的使用和要求(建议PH在7.4-7.6,浓度是0.01M;中性及弱碱性条件有利于免疫复合物的形成,而酸性条件则有利于分解;低离子强度有利于免疫复合物的形成,而高离子强度则有利于分解)。根据上述步骤完成免疫荧光实验后,就需要进行荧光显微成像,得到我们想要的结果。选择一款操作简单、成像清晰、效果卓越的荧光显微镜进行观察拍照,才能轻松得到更为理想的结果图,达到事半功倍的效果。Echo Revolve正倒置一体荧光显微镜Echo Revolve正倒置一体荧光显微镜作为一款电动化、智能化的显微镜,具有以下优势:☑ 正倒置一体快速切换:切片、细胞观察随心切换,无惧任何耗材;☑ DHR数字降噪功能:极大地降低了背景噪音和荧光干扰,提高图像锐度,加深细节,得到分辨率更高的图片;☑ 强大的Z-Stacking功能:通过高精度电动化Z轴层扫来扩大景深,解决厚样本观察问题,提高图像分辨率;☑ 500MP单色相机:能够采集更多荧光信号,助力低荧光强度样本观察;☑ 多通道荧光自动拍摄叠加功能:可自动进行多通道成像的叠加,个性化选择查看/保存各通道的组合图像。
  • 400万!山东大学自动化细胞培养和药物筛选工作站采购项目
    项目编号:SDJDHF20220581-Z347项目名称:山东大学自动化细胞培养和药物筛选工作站采购预算金额:400.0000000 万元(人民币)最高限价(如有):400.0000000 万元(人民币)采购需求:标包货物名称数量简要技术要求1自动化细胞培养和药物筛选工作站 1台详见公告附件合同履行期限:详见招标文件要求。本项目( 不接受 )联合体投标。参数-自动化细胞培养和药物筛选工作站.pdf
  • 追踪单个活细胞 细胞条码完胜荧光标记
    p style="TEXT-ALIGN: center"img style="WIDTH: 500px HEIGHT: 404px" title="2015812530441140.jpg" border="0" hspace="0" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201508/uepic/28a495d3-f847-4968-980e-a818f89bc0ae.jpg" width="500" height="404"//pp style="TEXT-ALIGN: center"strong活细胞中的塑料球能发出激光。图片来源:M. SCHUBERT/strong/pp  两组研究人员分别将微小激光器放置在了活细胞内。这听上去可能有点像蚂蚁侠的下一代武器,但这个“小玩意”将极大提高生物学家追踪单个细胞活动的能力——这可能惠及从发育生物学到癌症研究的诸多领域。/pp  “这有可能做一些你利用其他技术做不到的事。”英国敦提大学生物物理学家David McGloin说。例如,该激光器能追踪的细胞比荧光标记能追踪的更多,并且比高频ID等萌芽技术更简单易用。剑桥大学神经生物学家Kristian Franze也赞同这一观点。“如果他们能开发出适用于活细胞的此类技术,那对许多人而言将非常有趣。”他说。/pp  要制作一个激光器,你需要两件东西:一种能被激发产生光的材料或“媒介”以及一个回荡着特定波长的光的“共振腔”,就像管风琴会同特有频率的声波共鸣一样。与谐振腔共振的光会刺激该材料发出更多光,极大地放大其效果来创造激光,结果将产生一个能放大光量的反馈回路。/pp  之前,科学家也曾“摆弄”过以细胞为基础的激光器。例如,2011年,美国哈佛大学医学院生物医学家Seok Hyun Yun和现供职于英国圣· 安德鲁大学的物理学家Malte Gather,利用工程改造后包含绿色荧光蛋白的单个细胞作为发光媒介,并将其置于一个共振腔内,从而制造了一个激光器。但没有人制出放置在单个细胞内的激光器。/pp  研究小组多年来一直在探索以单细胞为基础的激光,希望在活组织内造出会发荧光的细胞,以便在这些细胞工作时跟踪它们,深入揭示身体内部机制,比如癌症是如何开始的。目前,Gather和Yun正在利用类似技术分别进行研究。/pp  一个困难环节是将腔囊放置在细胞内。Gather和同事将细胞与直径约为5~10微米的塑料球混合,这些小球被掺杂了荧光染料。小珠子充当了空腔,而染料则充当了媒介。细胞经由内吞作用将小球吸入“体内”,这一过程就像免疫细胞吞噬病原体。由于这些球体用荧光染料浸过,所以用一种颜色的光撞击后,它们会发出另一种颜色的光。这种光接着在球体内共振,引发激光作用,并放大自己。重要的是,每一束激光会根据球体的精确尺寸发出12种不同波长的光。相关论文发表在近日出版的《纳米快报》上。这一技术能作用于4类细胞,包括人类巨噬细胞和一种白血细胞。/pp  研究人员指出,这一技术在细胞传感、医疗成像等领域有着广泛应用。“改写传统激光研究领域的知识并在这个平台上展开研究以便将激光性能最优化,将是一件有趣或者说非常激动人心的事情。”Yun表示。/pp  之后,研究人员设计出一种5纳秒的光脉冲激活这些染料。它发射的光能沿球体的中间线运行——通过一种名为全内反射的过程进行约束。特定波长的共振和增加会更强烈,直到珠子发出足够的激光。/pp  Yun和同事Matjaz Humar还设法诱导细胞“吞下”塑料珠子,并且他们制造了两类共振球,相关成果日前在线发表于《自然—光子学》期刊。研究人员利用一个细胞内的脂肪滴或油滴反射和放大光,从而产生激光。Yun和Humar报告说,他们能改变波长,并且利用不同直径的荧光聚苯乙烯微球而不是被注射进去的油滴或脂肪滴标记单个细胞。理论上,利用不同组合的微球和具有不同光谱特性的染料,应当可以使为人体中存在的几乎所有细胞进行单独标记成为可能。/pp  Yun和Gather表示,这些激光器最显著的应用可能将是追踪单个细胞的行动。每个塑料珠子的直径和光学特性都略有不同,因此它们能有效区分波长,充当细胞条形码。Gather和同事用19小时在细胞培养皿中追踪了少量巨噬细胞,而Yun和Humar也进行了类似验证。/pp  由于激光器能在明确的波长上照亮细胞,这让它们比荧光蛋白质标记等其他细胞追踪技术更有优势。包含荧光染料和蛋白的传统荧光探针拥有相对较宽的发射光谱——约30~100纳米。这限制了能被同时使用的探针数量,因为通常很难从组织中天然分子广泛的背景发射中区分出这些发光源。但这种激光器的光谱特性使其能同时追踪数千个微小指向标。研究人员通过为每个细胞装载数个小球将这一数字扩展到数百万或数十亿。然后,每个细胞将以不同的波长组合发射激光。/pp  但这一技术还有很长的路要走。首先,研究人员需要确定不同的细胞类型都能“吞下”小球,尤其是活组织中的细胞。Gather预测,这将不是问题。“我相信该技术是可归纳的。”他说。另外,研发人员必须缩小塑料球的尺寸。Yun承认,现在的小球会将细胞填满。但Yun和Gather已经证实,他们可以用更小的玻璃球代替塑料球。/pp  由于细胞发光可以持续一个较长的周期,可以在较长时间里识别和跟踪活组织内的细胞,有望为研究人员提供一种很有潜力的手段,执行细胞内传感、自适应成像,还可能真正看到肿瘤细胞的生长过程。但科学家指出,目前这一技术还只用在实验室培养的活细胞中,但他们希望进一步研究能带来用于动物实验的细胞跟踪系统,并最终用于人类。“不管怎样,它非常酷!”McGloin说。/p
  • 又一家全自动流式荧光免疫分析仪正式获批上市!
    12月29日,宜乐芯全自动流式荧光免疫分析仪P16获四川省药品监督管理局医疗器械注册证(注册证编号:川械注准2022220241),批准正式上市销售!这是宜乐芯继全球最小发光后推出的又一款战略级重磅产品,充分体现了宜乐芯在IVD细分领域硬核的创新能力。2021年四川省唯一创新IVD产品全球首创单人份全自动流式荧光多重检流式荧光原理流式荧光又被称为液相芯片,多重荧光免疫,是以流式细胞术为核心,结合荧光编码微球技术,使每一个微球成为一个特定的检测单元,在鞘流的包裹下,逐个通过流动室的激光聚焦区,微球上的荧光物质被激光激发后,编码荧光信号及反应物荧光信号会被分别记录,最终通过软件处理获得待检测物质的浓度。P16特点全自动:样本进、结果出,30个原始管进样位,随到随检;单人份:单人份多指标耗材一体化分装,即开即用,无开瓶有效期;多重检:经典流式荧光方法学,通过编码微球实现精准多联检;速度快:最快760T/H,超越大型发光的检测速度;高灵敏:细胞因子检测下限可达1pg/ml;高精准:CV≤5%;体积小:流式技术与POCT完美结合,xPOCT横空出世,应用场景多元;全原研:自研编码微球、自研流式系统、自研细胞因子试剂盒,无惧封锁,尽在掌控。MaxPlex编码微球近期,新冠导致的重症患者越来越多,细胞因子作为非常重要的重症监测指标,有着非常重要的临床价值,宜乐芯推出了4、7、12联检细胞因子检测试剂,灵敏度最高可达1pg/ml,配合P16全自动流式荧光,实现了真正的全自动细胞因子检测,可以为重症患者监测保驾护航。关于宜乐芯宜乐芯生物成立于2018年8月,致力于通过硬核创新,实现全链可控,为临床提供高性价比的临床免疫及分子诊断系统,力争在未来10年成为全球体外诊断细分领域的创新者。创始团队在IVD行业耕耘多年,具有深厚的研发功底及产业化能力。通过突破上游核心部件、整合前沿科技、跨界组合创新、精准市场定位,实现差异化竞争,为客户提供5A级产品—Anytime,Anyplace,Anyone,Affordable, Accuracy。公司现有POCT全自动化学发光、全自动液相芯片、实验室自动化三大技术平台,在成都国际医学城有近4000平米的产业化基地。我们将持之以恒聚焦临床需求、推动价值创新,为客户提供极具竞争力的产品和服务,同时我们秉持开放合作,可以提供从仪器定制、试剂匹配、授权开放、CDMO委托生产、产品注册等一站式产品和服务。
  • 安捷伦宣布针对免疫肿瘤学、病毒学和疫苗开发市场推出自动化细胞分析工作流程
    2023年3月2日,北京——安捷伦科技公司(纽约证交所:A)近日宣布其 xCELLigence RTCA HT(实时细胞分析高通量)平台现已与 BioTek BioSpa 8全自动培养箱集成。为了响应市场需求,安捷伦将二者组合,实现了更高水平的自动化工作流程,为免疫肿瘤学领域的无标记高通量效价分析和疫苗市场的高通量病毒介导的细胞病变效应 (CPE) 检测提供了全新功能。制药研究人员要完成免疫肿瘤治疗的使命,面临着激烈的竞争,因此正在不断开发使临床研究加速成功的方法。同样,由于存在不断变化的公共卫生威胁,疫苗开发人员也面临着前所未有的压力。自动化工作流程可以提升候选药物筛选能力,是一种更快、更有效将研究转化为发现的手段。然而,许多现有的自动化工作流程解决方案仍然依赖大量的手动干预步骤,从而阻碍了通量并限制了方案开发的范围。配备 BioTek BioSpa 8 全自动培养箱的 xCELLigence 实时细胞分析高通量 (RTCA HT) 平台xCELLigence RTCA HT - BioSpa 8 的集成可为细胞增殖和细胞毒性提供无标记的非侵入性动力学结果,使研究人员能够分析多达八个 384 孔 板,从而提高通量并减少样品量。BioSpa 8 培养箱提供实时温度和 CO2/O2 控制,以及湿度监测功能。xCELLigence 仪器配备加热支架,因此可以保护细胞在从培养箱自动转移期间,免受不必要的扰动和培养条件的波动。用户友好的软件便于进行自动化检测和数据分析,使其成为真正无人值守的系统,此系统可用于鉴别对抗疾病的治疗方法,并为这一技术组合提供一定的自动化支持。安捷伦副总裁兼细胞分析事业部总经理 Todd Christian 说道:“这是免疫肿瘤治疗和疫苗开发的创新解决方案,表明安捷伦一直致力于抗击癌症和传染病。将我们的非侵入式实时细胞分析检测功能与生理条件的孵育培养结合,可提供简单的自动化工作流程,以提高生理条件下的通量和筛选灵活性。”范德堡大学医学中心范德堡疫苗中心副主任 Robert Carnahan 博士谈道:“xCELLigence RTCA HT 技术一直是促进高通量、快速和定量细胞病变效应 (CPE) 监测的关键,它是一种评估中和活性和效价的工具。我们能够绕过空斑或病灶形成实验中所需的众多动手、多步骤过程来测量病毒活性。”安捷伦提供包括用于实时细胞和代谢分析的工具,以及流式细胞仪、孔板和成像/显微镜平台,这些产品和服务有助于利用广泛的学科和方法进行药物发现。此次推出的这一全新集成解决方案展现安捷伦应对解决现实挑战的能力,兑现作为药物开发领域合作伙伴的承诺。关于安捷伦科技安捷伦科技有限公司(纽约证交所:A)是生命科学、诊断和应用化学市场领域的全球领导者,致力于为提高生活质量提供敏锐洞察和创新经验。安捷伦的仪器、软件、服务、解决方案和专家能够为客户最具挑战性的难题提供更可靠的答案。2022财年,安捷伦的营业收入为68.5亿美元,全球员工数为18,000人。如需了解安捷伦公司的详细信息,请访问 www.agilent.com。
  • 安捷伦推出自动化细胞分析工作流程|针对免疫肿瘤学、病毒学和疫苗开发市场
    仪器信息网讯 近日宣布其xCELLigence RTCA HT(实时细胞分析高通量)平台现已与 BioTek BioSpa 8 全自动培养箱集成。为了响应市场需求,安捷伦将二者组合,实现了更高水平的自动化工作流程,为免疫肿瘤学领域的无标记高通量效价分析和疫苗市场的高通量病毒介导的细胞病变效应 (CPE) 检测提供了全新功能。制药研究人员要完成免疫肿瘤治疗的使命,面临着激烈的竞争,因此正在不断开发使临床研究加速成功的方法。同样,由于存在不断变化的公共卫生威胁,疫苗开发人员也面临着前所未有的压力。自动化工作流程可以提升候选药物筛选能力,是一种更快、更有效将研究转化为发现的手段。然而,许多现有的自动化工作流程解决方案仍然依赖大量的手动干预步骤,从而阻碍了通量并限制了方案开发的范围。xCELLigence RTCA HT - BioSpa 8 的集成可为细胞增殖和细胞毒性提供无标记的非侵入性动力学结果,使研究人员能够分析多达八个 384 孔 板,从而提高通量并减少样品量。BioSpa 8 培养箱提供实时温度和 CO2/O2 控制,以及湿度监测功能。xCELLigence RTCA HT(实时细胞分析高通量)平台xCELLigence仪器配备加热支架,因此可以保护细胞在从培养箱自动转移期间,免受不必要的扰动和培养条件的波动。用户友好的软件便于进行自动化检测和数据分析,使其成为真正无人值守的系统,此系统可用于鉴别对抗疾病的治疗方法,并为这一技术组合提供一定的自动化支持。安捷伦副总裁兼细胞分析事业部总经理 Todd Christian 说道:“这是免疫肿瘤治疗和疫苗开发的创新解决方案,表明安捷伦一直致力于抗击癌症和传染病。将我们的非侵入式实时细胞分析检测功能与生理条件的孵育培养结合,可提供简单的自动化工作流程,以提高生理条件下的通量和筛选灵活性。”范德堡大学医学中心范德堡疫苗中心副主任 Robert Carnahan 博士谈道:“xCELLigence RTCA HT 技术一直是促进高通量、快速和定量细胞病变效应 (CPE) 监测的关键,它是一种评估中和活性和效价的工具。我们能够绕过空斑或病灶形成实验中所需的众多动手、多步骤过程来测量病毒活性。”安捷伦提供包括用于实时细胞和代谢分析的工具,以及流式细胞仪、孔板和成像/显微镜平台,这些产品和服务有助于利用广泛的学科和方法进行药物发现。此次推出的这一全新集成解决方案展现安捷伦应对解决现实挑战的能力,兑现作为药物开发领域合作伙伴的承诺。关于安捷伦安捷伦科技有限公司(纽约证交所:A)是生命科学、诊断和应用化学市场领域的全球领导者,致力于为提升人类生活品质提供敏锐洞察和创新经验。安捷伦的仪器、软件、服务、解决方案和专家能够为客户最具挑战性的难题提供更可靠的答案。2022 财年,安捷伦营业收入为 68.5 亿美元,全球员工数约为 18,000 人。
  • 单个活细胞&细胞器操纵新突破丨多功能单细胞显微操作技术首次实现活细胞间线粒体移植
    前所未有的全自动高精度单细胞操纵平台!多功能单细胞显微操作FluidFM技术首次将原子力系统、显微成像系统、微流控系统、活细胞培养系统融为一体的单细胞显微操作平台,其核心技术——FluidFM技术采用了纳米级别中空探针,完美实现了单个细胞水平、fL级别超高精度、全自动化的细胞及细胞器的操作。是一套超温柔,纳米级,全自动的细胞操纵方案。这项技术将传统细胞显微操作实验无法触及领域的大门彻底打开,科学家可以在单个细胞上实现前所未有的精妙操纵。其主要功能包括单细胞提取、单细胞分离、活细胞细胞器移植、单细胞注射、单细胞力谱等。图1 FluidFM技术整机外观及原理示意图在活细胞中也能进行细胞器操纵?多功能单细胞显微操作FluidFM技术首次实现活细胞间线粒体移植线粒体和复杂的内膜系统是真核细胞的重要特征。到目前为止,对活细胞内的细胞器进行操纵仍然十分困难。多功能单细胞显微操作FluidFM技术能够从活细胞中提取、注射细胞器,将定量的线粒体移植到细胞中,同时保持它们的活力。近期,Julia A. Vorholt课题组使用多功能单细胞显微操作FluidFM技术,将线粒体移植至培养的细胞中,并实时跟踪线粒体注射后的情况,监测它们在新宿主细胞中的命运。通过跟踪,作者发现与受体细胞线粒体网络融合发生在移植后20分钟,持续16小时以上。活细胞之间移植线粒体不仅为细胞器生理学的研究开辟了新的前景,也为机械生物学、合成生物学和疾病治疗开辟了新的前景。该篇文章以” Mitochondria transplantation between living cells.”为题,发表在BioRxiv.上。1从活细胞中提取线粒体在FluidFM负压下的线粒体小体会经历形状的转变,类似于“串上珍珠”的形态。其特征是离散的线粒体基质球体状,并且通过细长的膜结构相互连接,在进一步负压拉力的作用下,这些球状结构最终被拉断,并在悬臂中呈现为球状线粒体(图2)。当牵引力保持数秒后,OMM在先前形成的“珍珠”之间的一个或多个收缩点分离,从而产生独立的球形线粒体,而管状结构的其余部分放松并恢复。图2 提取线粒体后的FluidFM悬臂探针的显微图像及示意图2线粒体移植至新细胞研究人员的下一个目标是将线粒体移植到新的宿主细胞中,并保持细胞活性。FluidFM技术为线粒体转移提供了最佳的两步走方案:第一步,用FluidFM技术直接提取线粒体,第二步,将提取的线粒体注入到新的宿主细胞中。该方案的成功率高达95%,而且保持了细胞活力,其优点是细胞器在细胞外停留的时间短(1分钟),并且通过FluidFM采样的线粒体最大限度地集中在原生细胞质液中,完全避免了人工缓冲液的使用。保持了线粒体和细胞的纯度,避免了其他因素的影响。作者标记供体细胞的线粒体(su9-mCherry)和受体细胞的线粒体(su9- BFP),能够观察移植细胞线粒体网络的实时状态(图3)。实验跟踪了22个细胞的移植命运:18个细胞显示移植的线粒体完全融合,4个细胞的线粒体发生降解。多数细胞样本(18个细胞中的14个)在移植后30分钟内首次观察到融合事件而后扩展到线粒体网络。综上所述,作者建立了将线粒体转移到单个培养细胞的方法。该方案显示移植后细胞活力高,允许观察移植后线粒体的动态行为,是一种高效方案。图3 单个移植线粒体的延时图像序列(su9-mCherry)。细胞器供体为HeLa细胞,受体细胞为U2OS细胞,带有荧光标记线粒体网络(su9-BFP)。Scale bar = 10 μm。本文使用的FluidFM技术采用微型探针,可以在微环境中以高时空分辨率操纵单细胞或者对单个细胞进行采样,并与组学方法相结合,使细胞器的研究成为可能。FluidFM技术将原子力显微镜的高精度力学调节手段与光学检测下的纳米尺度微流控系统相结合,提供与单细胞操作相关的力学和定量的体积控制。这些特性在现有微型探针中是独一无二的,在本研究中,作者将FluidFM单细胞技术用于活细胞真核内和细胞间的细胞器微操作。成功实现了活细胞之间的线粒体移植。,时长00:07单个线粒体移植视频该研究将启发人们将FluidFM技术应用于更多领域,例如,干细胞治疗中低代谢活性细胞的再生,作为线粒体替代治疗方法的一种备选方案等。此外,FluidFM技术为解决细胞生物学、生物力学和细胞工程等问题提供了新的视角。
  • 适用于单细胞内单分子动态观测的层状光超高分辨率扫描荧光显微系统的研究
    成果名称适用于单细胞内单分子动态观测的层状光超高分辨率扫描荧光显微系统的研究单位名称北京大学联系人马靖联系邮箱mj@labpku.com成果成熟度□研发阶段 &radic 原理样机 □通过小试 □通过中试 □可以量产成果简介:超分辨技术是利用随机光学重构等方法,突破光学衍射极限的一种新型显微技术,它使得我们有机会在单分子水平上观察亚细胞结构。但是传统意义的超分辨技术是基于全内反射照明的,这就使得我们可观测的样品厚度远小于细胞厚度,从而无法对细胞深处,如细胞核内的分子进行实时观测。层状光扫描技术是利用高斯光束的性质,通过光线的单方向汇聚产生亚微米级的层状光,从而可以对组织样品进行3D扫描。层状光荧光扫描显微系统有着成像速度快,光致漂白与光毒性效应小等优势,非常适合于组织及真核细胞的观测,但它的分辨率会受到衍射极限的限制。生命科学学院孙育杰课题组将这两种技术进行了优势互补,发展了新型集成芯片技术,研发出了一种适用于单细胞内单分子动态观测的新型显微系统。在基金的资助下,通过相关设备的购置和材料的加工,有力地推动了项目组相关工作的开展,其主要工作包括:(1)层状光-荧光扫描系统的实现;(2)适用于单细胞层状光成像的新型细胞芯片技术的研究;(3)单分子超高分辨率荧光技术的实现;(4)超高分辨率一层状光荧光扫描复合光路的实现。通过以上工作的开展,单分子超高分辨率荧光显微系统的样机搭建已经完成,顺利通过了第四期项目的验收。这项工作获得了国家自然科学基金委重大项目的后续支持,项目名称为&ldquo 细胞中活性分子实时动态变化与相互作用的荧光探针研究&rdquo 。应用前景:该研究成果在细胞生物学,特别是干细胞定向分化、胚胎早期发育、胞内运输等生物过程的研究领域中有着重要的应用前景。
  • Leica的宠儿——PAULA(细胞培养个人自动实验助手)
    可能很多人对Leica的产品PAULA(Personal AUtomated Lab Assistant)相对陌生,此产品的推出被Leica高层极度重视,被视为“掌上明珠”。PAULA是一款与客户共同设计开发的用于细胞培养实验室常规应用的数字细胞检测仪,是世界首台细胞培养个人自动实验助手。PAULA是可以放置在细胞培养箱中的小型倒置荧光显微镜,具有相差和红绿两色荧光的观察功能,在平板中直接下载APP进行连接观察和使用,可以实时进行实验的分析和检测为下游实验获取最佳细胞提供保障。细胞实验中无法进行样本的实时监测、对细胞计数的不准确和浪费时间、细胞状态不适用于下有实验、缺乏细胞的生长曲线以及转染蛋白的表达水平等问题会一直环绕在每一个实验操作者的身边。PAULA的出现这些烦恼将不再存在。PAULA部分功能简介使用用户管理模式进行使用:Administrator, Standard User, Guest (只能拍照)三种用户类型进行使用,有效地管理和使用彼此之间的实验数据,保护实验数据的安全。管理员身份可以对其他账号进行管理和查看,及时进行实验的指导和完善。数据自动命名:根据培养的细胞系种类和实验人员姓名来对细胞培养瓶进行命名,该命名会自动匹配到所拍摄的图片、视频、分析结果等等。并且配有条形码、二维码的扫描功能,准确的记录观察样本的信息。样本信息记录集成化数据库:所有数据都储存在电脑中具有备份功能、所有信息一目了然、具有过滤功能并且可以直接将结果导出到Excel中。集成化数据库Audit trail:操作记录可查,数据结果可被归为文档格式实验操作查询PAULA中含有分析模块,可以直接对样本进行分析和检测,抛弃只能人工目测检测的方法,使实验更佳严谨和专业:细胞融合度检查:没有PAULA之前只能靠目测进行估算,这种方式缺乏规范性、并且误差较大,很容易会对下游实验造成不良影响。PAULA可以进行自动快速检测,进行保存,并且可以绘制生长曲线、划痕实验检测,通过邮件提醒功能得知实验已经完成,不用担心样本的生长状态不适合而导致实验失败。细胞融合度检测和划痕实验检测转染效率检测:将外源基因导入样本细胞中对带有荧光细胞和总细胞数的检测,从而进行转染效率分析。转染实验和HELA细胞转染图北京德泉兴业商贸有限公司为徕卡授权代理商。徕卡显微系统是显微镜和科学仪器领域的全球先驱。十九世纪,公司从家族事业起步,如今成为全球知名企业,以无可匹敌的创新精神铸就辉煌历史。与科学界一贯的紧密合作是徕卡显微系统创新传统的关键,从而将用户的想法付诸实践并根据用户需要为其量身定制解决方案。徕卡显微系统的全球运作分为四个部门,它们均已成为其各自领域的领头羊:生命科学部门、工业部门、病理系统部门以及医疗显微镜部门。徕卡病理系统是一家自主运营的公司,为组织病理学实验室提供丰富多样的产品,适用于组织学中的每一步工作,并帮助提高整个实验室工作流程的生产率。公司在全球 100 多个国家设有代表处,在 7 个国家设有 12 家制造厂,在 19 个国家设立了销售和服务机构,并且具有全球性的代理商网络。公司总部设在德国的韦茨拉尔 (Wetzlar)。
  • 显微镜还能细胞计数--你所不知道的细胞计数方式
    前言当我们进行细胞实验的时候,很多时候都会对培养或者消化细胞的数量进行计算,最常规的就是细胞计数了。原始的细胞计数方法是通过对细胞进行染色,在显微镜下人工观察细胞状态判断细胞死活,进行计数。显微观察是细胞计数的基本原理,但是人工细胞计数是一件非常耗时耗力的工作,特别是要面对大量样本的计数需求时,因此就衍生出了细胞计数仪。我们常见的细胞计数仪是这样的:图源:网络,侵删这些自动细胞计数仪的原理又是怎样的呢?它们的底层原理是这样的:图源:网络,侵删其实自动细胞计数仪就是一个简化版的显微镜,然后搭载了对图片进行识别的软件功能,从而实现对细胞的计数。既然自动细胞计数仪可以做到,那么专业显微镜一定可以做得更好。Echo Rebel和传统的细胞计数仪不同,其具有极高的普适性,无需细胞计数仪的专用耗材,无论载玻片还是培养皿都可以进行计数。Echo Rebel的细胞计数仪是这样的:还可以是这样的:与传统的细胞计数仪相比,Echo Rebel细胞计数采用嵌入式设计,与显微镜完美融合,细胞计数时间短,普适性高,无需专用耗材,使用和维护成本低。你以为这就结束了,不,我们还可以这样:
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