微流控电泳仪工作原理

导读2019年，“非洲猪瘟”疫情持续，为全面提升动物疫病防控能力，中国动物卫生与流行病学中心与中国动物疫病预防控制中心于去年8月编制了非洲猪瘟病毒检测操作试行规程。该规程从分子生物学角度出发，针对非洲猪瘟病毒核酸进行检测，主要方式为常规PCR检测和实时荧光PCR检测。多种病毒同时检测是常规PCR方法的特点。 微芯片电泳仪MultiNA是常规PCR检测方法之一，快速自动化的方式检测多重PCR扩增产物，可适用于古典猪瘟病毒、非洲猪瘟病毒、禽流感病毒、冠状病毒等各类RNA、DNA病毒。 下面以古典猪瘟病毒检测方法为例，介绍MultiNA在病毒检测中的应用。 ★古典猪瘟病毒检测方法★基于病原学检测指南的古典猪瘟病毒标准检测流程古典猪瘟病毒(CSFV)是一种单股正链RNA病毒，属于黄病毒科瘟病毒属。CSFV在抗原和结构方面与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和边境病病毒(BDV)非常相似，属于同一属。病原学检测指南中，可以使用RT-PCR方法检测瘟病毒属的扩增片段。这些扩增产物被限制性内切酶切断，进一步通过微芯片电泳仪MultiNA检测，确定是否古典猪瘟病毒(CSFV)。MultiNA应用于野猪来源的古典猪瘟病毒检测古典猪瘟病毒也会感染野猪，是引发古典猪瘟的感染途径之一，通常用病原学检测方法确认野生动物的感染情况。在这里我们介绍，使用MultiNA进行野猪来源的古典猪瘟病毒检测的方法。 注：非洲猪瘟(一种DNA病毒)是一种不同于古典猪瘟的传染病。检测方法为，PCR扩增（扩增产物，231 bp）之后，扩增产物被限制性内切酶切断，并检测出135 bp和96 bp片段。MultiNA的分离能力可以同时满足非洲猪瘟和古典猪瘟。 ★MultiNA特点★MultiNA的3大特点提高实验效率1.是否想要更多时间专注于您的研究和工作？2.是否觉得分析数据和编写报告是件麻烦事？ 3.是否曾经因不明确的结果苦恼过？ ★试剂盒选择★不同的试剂盒的选择即可满足各种应用需求！基因编辑中的应用含有突变位点的区域进行PCR，通过对扩增产物进行变性、退火形成异源双链DNA。MultiNA的高灵敏度、高分辨率可分离检测异源双链DNA，能确认只有链长差异导致很难区分的短突变。NGS中的应用MultiNA带有NGS文库质控所需的弥散（smear）分析软件。

2009年8月31日，国家发展改革委、财政部、商务部联合发布“关于发布鼓励进口技术和产品目录(2009年版)的通知”，通知中明确规定，电泳仪、其他质谱仪（除BOD/COD/TOC水质多参数检测仪器）、离子射线的测量或检验仪器及装置等仪器设备被列入鼓励进口技术，通知详细内容如下： 关于发布鼓励进口技术和产品目录(2009年版)的通知 发改产业[2009]1926号 　　各省、自治区、直辖市、计划单列市发展改革委、财政厅(局)、商务主管部门、新疆生产建设兵团发展改革委、财务局、商务局： 　　为积极扩大先进技术、关键设备及元器件和重要资源性产品、原材料进口，根据国务院工作安排，制定《鼓励进口技术和产品目录(2009年版)》。现就有关事项通知如下： 　　《鼓励进口技术和产品目录(2009年版)》分为四个部分： 　　第一部分是鼓励引进的先进技术。主要指国内尚未掌握的先进技术，国家批准或核准的重点建设工程引进的先进技术。引进技术是指买断或许可方式进口国外先进专有技术或专利，或通过合作开发，获得自主知识产权和掌握先进专有技术的行为。对引进此类先进技术，给予贴息支持。 　　第二部分是鼓励进口的重要装备。指目前国内尚不能自行研发制造，国民经济各领域急需的重要设备，以及为生产国家鼓励发展的重大技术装备所需进口国内尚不能生产的关键零部件。对此类产品进口，给予贴息支持。 　　第三部分是鼓励发展的重点行业。主要是从《产业结构调整指导目录(2005年本)》鼓励类目录，以及《国务院关于加快振兴装备制造业的若干意见》、重点产业调整和振兴规划确定重点支持发展的领域范围内选择的重点行业。对符合国家产业政策和专项规划的投资类项目项下进口生产性设备、零部件(不予免税产品目录中产品除外)给予贴息支持。因涉及到设备、零部件较多，此部分设备和零部件进口贴息，参照鼓励类投资项目进口设备减免税管理方式进行。 　　第四部分是资源性产品、原材料。鼓励进口资源性产品和原材料，对其进口给予贴息支持。 　　本通知自发布之日起实施，国家发展改革委、财政部、商务部《关于发布鼓励进口技术和产品目录的通知》(发改工业〔2007〕2515号)同时废止。国家发展改革委会同财政部、商务部将根据情况需要，适时对目录进行调整。 　　附： B103 90268000 其他检测液体或气体变化量的仪器及装置：三通道以上的超声流量计与物位仪表 B104 90272020 电泳仪 B105 90278019 其他质谱仪（除BOD/COD/TOC水质多参数检测仪器） B106 90301000 离子射线的测量或检验仪器及装置 　　附件：鼓励进口技术和产品目录（2009年版） 　　国家发展改革委 　　财　　政　　部 　　商　　务　　部 　　二〇〇九年七月二十二日

&mdash &mdash &ldquo 国产好仪器&rdquo 活动约稿 　　毛细管电泳(CE)是一类以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术，其迅速发展于二十世纪八十年代后期。CE实际上包含电泳、色谱及其相互交叉的内容，是分析科学中继高效液相色谱之后的又一重大进展，它使得分离分析科学从微升级水平进入到纳升级水平。 　　我们的研发团队真正开始关注CE是在2004年，这是由于考虑到CE的高效分离能力、温和的分离条件、友好的水相运行特点和多种分离模式，而这些优点恰恰非常适合进行不同元素形态化合物的分离。而检测仪器的高速发展，特别是ICP-MS，灵敏度和检出限的大幅提高也为形态分离后的检测提供了坚实的基础，所以我们认为CE与ICP-MS的联用将会成为非常有力的元素形态分析工具。 　　在福建省科技厅的大力支持下，我们于2005年成立了以付教授为首，由多位博士和硕士研究生共同组成的科研团队，开始了对CE的调研和设计。 　　仪器设计：每一个细节都是难点 　　进入了团队之后，我发现之前自己的职业行为原则&mdash &mdash 科研和生活分开，无法执行了。现在填满我们生活的是科研工作&mdash &mdash 遇到问题时的彷徨，项目进展不顺时的揪心，以及进程中突破难点的快乐，占满了我的生活。而这些却都需要和有相同经历或了解这一切的人分享，我们的团队无疑就是最好的对象。 　　第一年里，在无休止的理论学习、资料查阅和方案的不断设定/推翻重设定过程中，我们的CE平台也初具规模。但是到了2006年，我们遇到了阻碍研究整个实验平台的最大的障碍，那就是CE与ICP-MS接口的设计。 　　这个接口好比一条生命通道，不能出现任何堵塞，设计要求平稳畅通，更重要的是还必须对其提供一个稳定的心脏起搏器&mdash &mdash 高压电源 这个通道必须刚好能容纳毛细管，必须能解决由于ICP-MS和CE流量不匹配而引起的拖拉效应 由于CE的进样量非常小，也必须要求接口设计的死体积非常小&hellip &hellip 这些苛刻的条件就犹如一道道深深的沟壑，难以逾越&hellip &hellip 　　记得最清楚的是在开始进行接口制作时钢管材料制备的艰辛，我们在市场上找不到符合要求的短而小的导电钢管，怎么办呢?付老师一句话：自己做!我们首先想到了可以利用注射器针头。经过试验，虽然针尖很容易用钳子夹断，但是断口处极易被夹扁，所以在剪掉部分针尖后，我们再拿砂纸一点一点磨平磨光，当钢管制备成功时，一大叠磨废的砂纸在我们身边悄然成堆。 　　辅助流的流量匹配亦是相当重要，只有匹配了雾化器的自吸量，才能保证CE的分离分辨率，这就需要对进样口和辅助流进样口的流量控制得相当精确，所以钢针的相对位置显得尤为重要，我们常常为了零点几毫米距离而拆废粘制好的接口。随着接口的研制成功，我们很快尝到了阶段性胜利的果实，在随后的一年里，我们成功地在Talanta和Food chemistry上各发表了一篇文章。 　　仪器生产：研发成功并不是终点 　　能够研发还是不够的，研发的最终目的是生产出具有独特竞争力的实用产品，这就必须将研发、生产，到最后市场流通和应用环节贯穿起来。这不是一个单位在短时间就能完成的工作，科学仪器的极端专业性导致了在研制的不同阶段有着不同的研制领导者出现。 　　在CE的定型生产阶段，以林志杰为首的研发团队成为中坚。但好事总与多磨相缠绕，最简单的东西总是最容易被忽视，例如我们在组装仪器时，要将不同性质的电子部件紧密的联系在一起。当一切都准备就绪，导入程序时，运行完全正常，和预想的一样，但在导入高压后，程序瞬间混乱了!关机、拆板和检测，却又一切正常。这下我们都懵了。关键时候，根据研发部领导的提议，我们采取了适当的电磁屏蔽方法，问题解决了。 　　类似的问题还有许许多多，但在同事们的努力下，最终成功地将CE推向了市场。这要感谢林志杰，他总能将富有创造力的年轻人凝聚在一起，并给予他们充分开放的思维空间，这才让我们最终设计并生产出这款睿科CEi-SP20毛细管电泳仪。 　　睿科CEi-SP20毛细管电泳仪 　　在推出CE的头一年里，我们就接连开发出了砷、硒、铅、汞和铬等元素在实际样品中的形态分析方法，并且仪器的重现性和检测限都极具竞争力。有了这些努力，我们的客户群也开始从高校用户起步，逐渐走进了各个检测机构。截至目前，我们已经拥有了数十名用户!相信在不久的将来，相关领域的各位研究学者与专家都能使用上这款性能优越的形态分析仪。 　　作者：睿科仪器(厦门)有限公司产品专员 叶培荣