培养板

问：生化培养箱和一般培养箱有什么不同?答：1.最简单的说法就是：生化培养箱可以代替普通的恒温培养箱！它可以制冷，也可以制热！而一般的恒温培养箱只可以制热。2.一般的食品企业用不上生化的培养箱对不对? 3.一般做生化的时候就要用到的！具体看你们要检测什么了？如果就做细菌和大肠菌群，一般恒温培养箱就可以了！4.关键要看环境温度是多少，如果培养温度高于环境温度，一般培养箱就可以了，如果培养温度低于环境温度，必须要用生化培养箱，因为它有制冷功能，比如一般霉菌酵母的培养温度是27度左右，我们就可以用生化培养箱。5.我们这一般夏天有30多度，如果你处的地方长年低于25度……那么一般食品企业用普通的培养箱比生化培养箱用起来更不容易坏。6.我用的生化培养箱制冷功能坏了，做霉菌酵母的培养温度是27度左右，温度精度要求不是很高，培养温度低于环境温度我用空调来保证温度。 7.做霉菌酵母培养要求用恒温恒湿培养箱。8.生化培养箱的“恒湿”是如何实现的。我们的生化培养箱没有“恒湿”这功能的。有可以“恒湿”的生化培养箱吗？9.恒温也只是一定范围内的恒温，就是在设定的温度范围处波动（如设定为25度，它会在24.5-25.5之间波动，当然其波动范围也是通过调节设定的，可以设为1度、2度或0.5度等）。以前我用的老式恒温培养箱是用夹层中通入自来水或恒温循环水实现的 。10.恒湿是可以有的，不过那就是不是生化箱了，而是人工气候箱。具体的原理就是：1。湿度高时，需要除湿，是通过压缩机来作用的。2。干燥时，需要加湿，是通过外接的家用加湿机，就可以实现了。11.做霉菌培养时，由于压缩机的作用，培养箱内会比较干燥，这样不利于霉菌的培养。可以在培养箱内放置一只装满水的烧杯就可以了！12.正在郁闷这个问题呢。我们做霉菌和酵母菌数检查也是用的普通的霉菌培养箱，没有湿度控制的，不知道是否符合法规的要求？箱体内部湿度只有20％，但是实际用平皿培养的时候，三天内应该说里面都有冷凝水的，是否说明里面的适度依然保持在90％以上，满足检查需要呢？ 13.还有控温精度不一样，生化培养箱精度要求很高，大约正负0.1度，恒温培养箱正负1度！14.霉菌培养时，培养皿内冷凝水比较多，应该不会很干燥的吧。15.学习了，一直在用，但是没想到还有这么多学问的，以后要多多观察了。还以为生化培养箱是要做生化试验的呢，呵呵16.霉菌和菌落总数放在一个培养箱培养行的通吗？我们霉菌培养放在霉菌培养箱里的。

做微生物检验时，平板放在培养箱中培养时，为什么要倒置？培养基

我请教过几个人，他们对这个问题的回答不一致，有人说倒置是怕染菌，还有人说倒置是因为怕培养皿顶部的水珠滴到平板上，不易形成清晰规则的菌落。我昨天培养酵母时，实验室的人告诉我酵母不用倒置。为什么？？

欢迎大家一起交流，这是我做实验室行业总结出来的一点东西，呵呵一、实验室 组织培养是在无菌条件下进行，需要一定的实验室条件，应具备： （一）化学试验室 用于存放各类化学药品，配制培养基等。需要的物品有： ⒈药品柜　存放化学药品。 ⒉玻璃器皿柜　存放各类玻璃器皿。 ⒊实验台　最好是采用具有抑菌能力的实芯理化板台面或环氧树脂等，这是分别用来安放天平和配制培养基。 ⒋通风橱 这是用于整体实验室通风和排风的，并且会产生异味的实验最好在通风橱内操作。⒌冰箱　存放配好的母液和一些需低温保存的药品及植物材料等。 6.其它　天平、水浴锅、酸度计、水池等。 （二）洗涤消毒室 用作器皿的洗刷、消毒、干燥等，配有高压灭菌锅、烘箱、铁架、水池等，也可与化学实验室合并。 （三）无菌操作室 用于植物材料的消毒、接种、转移、原生质体制备等。要求室内封闭，保持无菌。并具备以下物品： ⒈超净工作台　用于消毒、接种、转移培养材料。 ⒉紫外灯　用于空气消毒。 ⒊解剖镜　用于胚胎培养、茎尖培养时剥取外植体。 ⒋低速离心机　用于原生质体制备。 （四）培养室 是供培养物生长的场所，主要有培养架、控温、控光设备等。培养架可分4－5层，上面安装30－40Ｗ日光灯照明，每天照明10－16小时左右，用自动定时器控制。温度最好保持在15－25℃左右。此外还可根据需要安置液体培养所需的摇床、转床等。附上培养常用药品 培养所需药品主要用于培养基的配制，也有部分用于消毒，主要有以下几类： （一）消毒药品　　　主要有次氯酸钠、次氯酸钙、双氧水、漂白精片、溴水、硝酸银等。（二）无机盐类　 　　包括大量元素和微量元素两类，主要的盐类有KNO3、MgSO47H2O、NH4NO3、KH2PO4、CaCl22H2O、Fe2（SO4）3、Na2HPO4、CuSO4、NaNO3、Na2SO4、ZnSO4、MnSO44H2O、MnCl22H20、KI、H3BO3等，无机盐是供外植体吸收的基本营养成分，各有不同作用，如N、P影响蛋白质的合成，Ca、K、S、Mg影响酶活性等。 （三）有机化合物　 主要有蔗糖、维生素类、氨基酸等。其中蔗糖是不可缺少的碳源，也是渗透压调节物质。维生素的主要作用是促进细胞分裂和诱导器官分化。氨基酸是蛋白质组成成分，也是有机氮源。 （四）植物生长调节剂　 用于组织培养的主要有生长素、细胞分裂素及赤霉素三大类： ⒈生长素类　主要有吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、2，4－D和吲哚丁酸（IBA）。2，4－D有利愈伤组织生长，NAA、IAA、IBA有利于器官分化。 ⒉细胞分裂素类　主要有激动素（KT）、6－苄基腺嘌呤（BA）、玉米素（ZT）等。其作用是促进细胞分裂与分化，其中KT能明显促进芽的分化而抑制根的形成。 ⒊赤霉素　以GA3运用最广泛，有促进不定芽和幼株伸长的作用。 （五）有机附加物　 包括人工合成和天然的有机物，常用的有酵母提取物、椰乳、果汁等及相应的植物组织浸出液。对细胞和组织的增殖和分化有一定促进作用。此外琼脂在组培中作为凝固剂，是外植体的支持体，常用浓度为0.5－1％。 （六）水　 培养基用水原则上使用蒸馏水，去离子水等，尤其在对化学成分要求较精确的试验中。但在组培苗的批量生产中，可选用自来水配制，以降低成本。

[color=#333333]使用生化培养箱是不是要做生化试验的呢？其实不然，关键要看环境温度是多少，如果培养温度高于环境温度，一般培养箱就可以了，如果培养温度低于环境温度，必须要用生化培养箱，因为它有制冷功能，比如一般霉菌酵母的培养温度是27度左右，我们就可以用生化培养箱。[/color][color=#333333]zui简单的区别方法就是：生化培养箱可以代替普通的恒温培养箱！生化培养箱可以制冷，也可以制热！而一般的恒温培养箱只可以制热。[/color][color=#333333]还有控温精度不一样，生化培养箱精度要求很高，大约正负0.1度，恒温培养箱正负1度！恒温也只是一定范围内的恒温，就是在设定的温度范围处波动(如设定为25度，它会在24.5-25.5之间波动，当然其波动范围也是通过调节设定的，可以设为1度、2度或0.5度等)。[/color][color=#333333]常州高德仪器制造的智能型生化培养箱采用LCD大屏幕背光液晶显示屏显示各设定参数和实测参数，可用于植物的发芽、育苗、微生物的培养，以及其他用途的恒温试验，组合式生化培养箱每一工作仓有独立的门可开关，上下工作仓采用蜂巢式保温层，有效的解决了工作仓与工作仓之间串温问题，控温更精准。多个温区可同时运行，也可其中一个或二个工作，便于节约能源；当一个工作区工作有障碍时，可将此工作区关闭而不妨碍其他实验，提高可靠性。[/color]

不知道现在的培养温度是多少来着？貌似我用36度很容易出现培养基被蒸干失水的情况！郁闷死！培养基用量应该在15-20mL之间，因为200mL只倒了12个平板。

用到平板培养基抑菌圈的实验有哪些？

1 外观控制制备好的培养基应有相应的颜色，一般的培养基应澄清、无浑浊、无沉淀。使用前应检查培养基的颜色是否发生变化，是否蒸发／脱水。2 污染控制 从每批制备好的培养基中选取部分进行污染测试(无菌试验)，确定无微生物生长方可使用。3 性能测试3.1 测试菌株选择测试菌株是具有其代表种的稳定特性并能有效证明实验室特定培养基最佳性能的一套菌株，应来自国际／国家标准菌种保藏中心ATCC标准菌株，菌株的选择参考卫生行业标准WS/T232-2002《商业性微生物培养基质量检验规程》。3.2 定量测试方法改良Miles-Misra法测试菌株过夜培养物10倍递增稀释；测试平板和参照平板划分为4个区域并标记；从最高稀释度开始，分别滴一滴稀释液于试验平板和对照平板标记好的区域；将稀释液涂满整个1/4区域，37℃培养18小时；对易计数的区域计数，按公式计算生长率(生长率=待测培养基平板上得到的菌落总数／参考培养基平板上获得的菌落总数)。非选择性培养基上目标菌的生长率应不低于0.7，该类培养基应易于目标菌生长；选择性培养基上目标菌的生长率应不低于0.1。3.3 半定量测试方法 改进的划线法接种法平板分ABCD四区，共划16条线，平行线大概相隔0.5cm，每条有菌落生长的划线记作1分，每个仅一半的线有菌落生长记作0.5分，没有菌落生长或生长量少于划线的一半记作0分，分数加起来得到生长指数G。目标菌在培养基上应呈现典型的生长，而非目标菌的生长应部分或完全被抑制， 目标菌的生长指数G大于6时，培养基可接受。3.4 定性测试方法平板接种观察法用接种环取测试菌培养物，在测试培养基表面划平行直线。按标准中规定的培养时间和温度对接种后的平板进行培养， 目标菌应呈现良好生长，并有典型的菌落外观、大小和形态，非目标菌应是微弱生长或无生长。

请教一下，LB培养基是不是可以培养一般的细菌，如枯草芽孢杆菌、李斯特菌和苏云金等？

单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体，称为菌落（colony）。当固体培养基表面众多菌落连成一片时，便成为菌苔（lawn）。不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征，可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。大多数细菌、酵母菌、以及许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落，采用适宜的平板分离法很容易得到纯培养。所谓平板，即培养平板（culture plate）的简称，它是指固体培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，盛固体培养基的平皿。这方法包括将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面。固体培养基用琼脂或其它凝胶物质固化的培养基，每个孤立的活微生物体生长、繁殖形成菌落，形成的菌落便于移植。最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基平板。这种由Kock建立的采用平板分离微生物纯培养的技术简便易行，100多年来一直是各种菌种分离的最常用手段。　　　1. 稀释倒平板法（pour plate method）　　先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如1:10、1:100、1:1,000、1:10,000......），然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。　　　2. 涂布平板法（spread plate method）　　由于将含菌材料先加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，而且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。其做法是先将已熔化的培养基倒入无菌平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，经培养后挑取单个菌落。　　3. 平板划线法（streak plate method）　　用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。　　　4. 稀释摇管法（dilution shake culture method）　　用固体培养基分离严格厌氧菌有它特殊的地方。如果该微生物暴露于空气中不立即死亡，可以采用通常的方法制备平板，然后置放在封闭的容器中培养，容器中的氧气可采用化学、物理或生物的方法清除。对于那些对氧气更为敏感的厌氧性微生物，纯培养的分离则可采用稀释摇管培养法进行，它是稀释倒平板法的一种变通形式* 。先将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在50℃左右，将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释，试管迅速摇动均匀，冷凝后，在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物，将培养基和空气隔开。培养后，菌落形成在琼脂柱的中间。进行单菌落的挑取和移植，需先用一只灭菌针将液体石蜡--石蜡盖取出，再用一只毛细管插入琼脂和管壁之间，吹入无菌无氧气体，将琼脂柱吸出，置放在培养皿中，用无菌刀将琼脂柱切成薄片进行观察和菌落的移植。

不知道论坛里是否有朋友试过做霉菌培养时用的是普通培养基或者用专用培养基用的是普通培养箱培养霉菌

对于微生物培养，大家常用的是恒温培养箱、霉菌培养箱、震荡培养箱、恒温水浴箱、发酵罐等，满足了日常工作需要；当然，这都是针对好氧菌而言。 而对于厌氧菌和兼性好氧菌，则需要考虑选用合适的厌氧、微好氧/低氧培养装置（如厌氧培养盒/袋、厌氧罐以及专业的厌氧培养箱、厌氧工作站、微好氧/低氧培养箱、厌氧发酵罐/反应池等）。 常规的动物细胞培养，一般选用CO2培养箱、滚瓶培养装置、悬浮培养装置、生物反应器/细胞培养罐等。为更接近或模拟体内微环境，三气培养箱（即CO2培养箱加配O2传感器）逐渐为人们所熟知！当然，更专业的Biospherix 系列O2/CO2控制器加培养盒、H35微好氧/低氧细胞培养箱、X vivo 一体化细胞工作站等三气培养装置也给大家提供了更多的选择！

问个问题，微生物培养，比如真菌，和金葡，增菌是在工作台进行，是不是接种BP平板需要在生物安全柜进行，那么划板之后还可以继续放到培养室吗，还是可以在生物安全柜边上当一个培养箱？真菌技数是不是要在安全柜进行？？

一般的生化培养箱能培养果蝇吗？本来想买专门的果蝇培养箱但是很贵，不知道一般的能不能培养

大多数细菌均可以通过人工方法培养，而衣原体和病毒的分离培养往往需要活组织、鸡胚、特殊细胞株及动物接种。只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。一、接种与分离方法根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类，采用不同的接种方法。1．平板划线分离培养法对混有多种细菌的临床标本，采用划线分离和培养，使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离，得到分散的单个菌落，以获得纯种。临床送检的标本如痰、咽试子、泌尿生殖道的分泌物和粪便等细菌检验均需要借助琼脂平板划线分离目的菌。平板划线分离法通常有两种方法：（1）分区划线分离法：此法常用于含菌量较多的标本如痰、泌尿生殖道的分泌物和粪便或混合细菌的分离。先用接种环挑取标本涂布于琼脂平板1区（占培养基总面积的¼）并作数条划线，再于2、3、4区依次划线。每划完一个区域，均将接种环烧灼灭菌1次，冷后再划下一区域，每一区域的划线均与上一区域的划线交接1~3次。一个成功分区划线的平板，培养后分别观察1区形成菌苔，2区菌落连成线，3区和4区可分离到单个菌落。（2）连续划线分离法：此法常用于含菌量不多的标本或培养物中的细菌分离培养。方法是先将接种物在琼脂平板上1/5处轻轻涂抹，然后再用接种环或拭子在平板表面曲线连续划线接种，直至划满琼脂平板表面。琼脂斜面接种法主要用于菌落的移种，以获得纯种进行鉴定和保存菌种等。用接种环（针）挑取单个菌落或培养物，从培养基斜面底部向上划一条直线，然后再从底部沿直线向上曲折连续划线，直至斜面近顶端处止。生化鉴定培养基斜面接种，用接种针挑取待鉴定细菌的菌落，从斜面中央垂直刺入底部，抽出后在斜面上由下至上曲折划线接种。3．穿刺接种法此法多用于半固体培养基或双糖铁、明胶等具有高层的培养基接种，半固体培养基的穿刺接种可用于观察细菌的动力。接种时用接种针挑取菌落，由培养基中央垂直刺入至距管底0.4cm处，再沿穿刺线退出接种针。双糖铁等有高层及斜面之分的培养基，穿刺高层部分，退出接种针后直接划线接种斜面部分。4．液体培养基接种法用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等的接种。用接种环挑取单个菌落，倾斜液体培养管，在液面与管壁交界处研磨接种物（以试管直立后液体淹没接种物为准）。此接种法应避免接种环与液体过多接触，更不应在液体中混匀、搅拌，以免形成气溶胶，造成实验室污染。5．倾注平板法本法主要用于饮水、饮料、牛乳和尿液等标本中的细菌计数。取纯培养物的稀释或原标本1ml至无菌培养皿内，再将已融化并冷却至45~50℃左右的琼脂培养基15~20ml倾注入该无菌培养皿内，混匀，待凝固后置37℃培养，长出菌落后进行菌落计数，以求出每毫升标本中所含菌数。先数6个方格（每格为1cm2）中菌落数，求出每格的平均菌落数，并算出平皿直径，然后按下列公式计数，求出每毫升标本中的细菌数。全平板菌落数=每方格的平均菌落数×лr2每ml标本中的细菌数=全平板菌落数×稀释倍数6．涂布接种法本法多用于纸片扩散法药敏试验的细菌接种。将一定量或适量的菌液加到琼脂培养基表面，然后用灭菌的L型玻璃棒或棉拭子于不同的角度反复涂布，使被接种液均匀分布于琼脂表面，然后贴上药敏纸片，或直接培养，本法经培养后细菌形成菌苔。

请教各位、培养后出完结果的平板应该是正着放还是倒着放！！

牛乳中独立细菌数IBC和平板培养CFU的异同？？？

1、生化培养箱外壳应可靠接地。 2、生化培养箱要放置在阴凉、干燥、通风良好、远离热源和日晒的地方。放置平稳，以防震动发生噪音。 3、为保证冷凝器有效地散热，冷凝器与墙壁之间距离应大于100mm。箱体侧面应有50mm间隙，箱体顶部至少应有300mm空间。 4、生化培养箱在搬运、维修、保养时，应避免碰撞，摇晃震动;最大倾斜度小于45度。 5、仪器突然不工作，请检查熔丝管(箱后)是否烧坏，检查供电情况。 6、本生化培养箱制冷工作时，不宜使箱内温度与环境温度之差大于25度。

实验室工作7年了，很多人问我怎要才可以把实验做好，做得漂亮。对于这个问题，我再看看到很多做事毛糙，手忙搅乱的师弟师妹时，只能笑而不语。生物实验不是化学实验，很少会爆炸，真的没必要慌乱，和很多工作一样，需要用“心”去做。 不说废话，回归正传。今天谈谈“含抗生素平板培养基的配制窍门”。当然，对于很多做这个实验做得炉火纯青的同行，实在没必要看下去了。下面写的只是供那些在这个环节不太了解的朋友看。 基本步骤如下： A.琼脂、蛋白粉、无机盐、…..去离子水….等等，混匀，溶解，具体成分看你培养神马菌了； B. 120度，高压灭菌； C. 加抗生素，加神马抗生素，看你要筛选神马菌，氨苄青霉素？链霉素？潮霉素B? D. 倒平板。 别以为这个大家都会。讲一个真实故事给大家听，以前有一个做实验也是蛮拼的同学，要做含青霉素的筛选平板培养基，他一次不成功，就做第二次，但是还是不成功，一直做了2个月还是不成功。。。他的科研热情实在值得学习，只是财力不是很雄厚的老板实在伤不起。我们好奇，怀疑他没加青霉素，就问他加了没，他回答时也很有底气，自信地告诉我们，加了，加了不少------可惜都是在高温灭菌前加的！如此高温，哪家的抗生素不分解啊？ 在这里，我想强调的是，加抗生素，除了要选择时，还要择温度！加抗生素必须在灭菌之后加，加的时候一定要等琼脂培养基凉下来再加。温度降到什么时候为宜呢？就是45~50度的范围。当然，有些牛人，靠手摸，感觉不烫，就刚好是45~50度。作为搞科研的，我不推荐用这种方法。我推荐大家用恒温循环水浴。建议不要用国产的水浴，因为隔壁实验室发生过漏电事件……我用过几个进口品牌,发现德国IKA的恒温水浴最好,安全,精准,好用。可惜当时递交采购单时太草率，就选了一个基本型的ICC恒温水浴。五楼的小黄老师有钱就这么任性，挑了个IKA控制型，可以远远的无线控制~~听说无线控制距离可达10米~~~ 45~50度是一个很合适的温度，一方面可以保持抗生素的活性，另一方面，琼脂在这个时候不凝。轻轻晃动几下培养基，让抗生素混匀，切忌不要使劲，否则起了起泡就很难看了。后续，只要小心的把培养基倒到培养皿上，于是高质量的含抗生素的培养基就做好了~

请教一个小白问题：实验需要半固体培养基，能否在直接购买来干粉培养基（肉汤培养基）中添加一定量的琼脂？琼脂的加入会改变培养基的Ph值吗？

用于菌数计数的半固体琼脂培养基促菌生长（灵敏度）检查的方法：对每个不同批号的脱水培养基均应进行灵敏度检查（促菌生长检查）。取预先制备好的琼脂培养基平皿3~5个，用表面涂布法每块平板表面接种30~100个试验菌，同时用已知质量保证的同型号培养基平皿3~5个（如较著名的如MERCK，DIFICOL，青岛海博产品）做对照试验，待培养基表面的菌液被琼脂培养基吸干或风干后，将培养皿倒置于培养箱的使用温度下培养48~72小时，（也可采用浇碟法进行）取出培养后的平皿点计菌落数。样品培养基上的微生物数量应不得低于对照培养基上微生物生长数量的70%。否则，需重新检查，或该培养基被视为不符合促生长要求。

生化培养箱是生物、遗传工程、医学、卫生防疫、环境保护、农林畜牧等行业的科研机构、大专院校、生产单位或部门实验室的重要试验设备生化培养箱维护和培养： 1、生化培养箱外壳应可靠接地。 2、培养箱要放置在阴凉、干燥、通风良好、远离热源和日晒的地方。放置平稳，以防震动发生噪音。 3、为保证冷凝器有效地散热，冷凝器与墙壁之间距离应大于100mm。箱体侧面应有50mm间隙，箱体顶部至少应有300mm空间。 4、培养箱在搬运、维修、保养时，应避免碰撞，摇晃震动；最大倾斜度小于45度。 5、仪器突然不工作，请检查熔丝管(箱后)是否烧坏，检查供电情况。 6、生化培养箱制冷工作时，不宜使箱内温度与环境温度之差大于

培养箱温度不稳定怎么办？偏差在2-5度见，如何调整呢？

培养基是发酵过程或动植物细胞大量培养中供微生物或动、植物细胞的生长、繁殖或积累代谢产物，以合成生物化工产品所必需的营养基质。培养基的选择应根据微生物生长代谢活动的需要，并有利于合成细胞物质和生物化工产品的生成。培养基中主要含有水、碳源(能源)、氮源、矿物质，有的还需要提供维生素等。在酶反应过程中，原料液中被转化的物质亦即酶的作用物，亦可称为底物。 培养基的选择一般尽可能要满足以下要求：①单位质量基质，应能产生最大量的生物物质或生物化工产品，并且要使所产生的生物物质或生物化工产品在发酵液中的浓度最高，产率最高，使不需要的其他代谢产物的生成，限在最低范围内。②培养基成本低、质量均一并随时保证提供使用。③培养基使用时，对通气、搅拌、后处理和三废治理等方面所产生的问题最少。 分类 按其组成成分分成三类:①天然培养基,全由天然产物组成，例如含淀粉、黄豆饼粉等天然物质；②复合培养基，由部分天然产物和部分已知成分的化合物组成，例如其中的氮源既有天然物质黄豆饼粉，又有合成化合物硫酸铵；③合成培养基，全由已知成分的化合物所组成，例如以纯的碳水化合物或碳氢化合物为碳源，以铵盐为氮源。天然培养基和复合培养基常用于工业生产，而合成培养基(偶尔包括复合培养基)则常用于试验。 按用途分类包括：①基础培养基，营养需求相似的一些生物其所需的营养物大体相同，因之可配制一种适合于它们共同需要的含有基本营养成分的基础培养基；②增殖培养基，又称丰富培养基，常用于菌种选育方面。它是由基础培养基，再加入特殊的营养物质，以使某种差异型微生物在其中迅速生长繁殖；③鉴别培养基，即在培养基中加入某种试剂，从而在培养过程中表现出特殊反应，用以鉴别不同类型的微生物，如无菌试验用的酚红肉汤培养基，就是一种鉴别培养基；④选择培养基，根据某些微生物具有特殊营养要求，或对某些化学物质具有抗性而设计的,例如在配方中加入某种化学药物,以限制对敏感菌的生长繁殖，而将对其不敏感的所需的微生物分离出来。如在分离酵母菌时，可加入青霉素、链霉素等以抑制细菌的生长。 培养基还可根据其形态分成液体或固体培养基。例如用于无菌试验的肉汤培养基为液体培养基。用于培养青霉菌孢子的小米或大米为固体培养基，在培养基中加入适量琼脂而形成的凝胶培养基，也称固体培养基。 成分 培养基的成分包括:碳源、氮源、矿物质,以及其他必需物质。这些成分通过生物反应过程，生成生物物质、生物化工产品，并放出CO2、H2O和热量。 培养基的成分还可以由发酵过程中所需的元素出发，如C、H、O、N、S、P、Mg、K等。此外,必要时还有一些需要量很少的微量元素,如Fe、Zn、Cu、Mn、Co、Mo、B等。在发酵过程中某些生物本身不能合成的物质，如氨基酸、维生素或核苷酸等，必要时亦作为营养物质加入到培养基中。 碳源 具有双重作用。生物在产生生物物质或生物化工产品过程中，它不仅为其提供碳源，也为其提供能源。碳水化合物是微生物发酵中的主要碳源，包括淀粉、葡萄糖、蔗糖和乳糖等。此外，植物油如豆油、棉籽油、玉米油等亦常被应用作为碳源。这类油常与表面活性剂合用，以消除发酵过程中所产生的泡沫。甲醇可用以生产单细胞蛋白。正烷烃类可用以生产有机酸、氨基酸和维生素等，甚至二氧化碳也可作为光合细菌的碳源。 氮源 包括无机氮源和有机氮源。无机氮源包括氨、铵盐及硝酸盐等，它们在被应用时应注意发酵中pH的变化；有机氮源包括氨基酸、蛋白质及尿素等，有机氮源的加入往往加快了生物的生长。因考虑到成本因素，一些有机氮源，如黄豆饼粉、花生饼粉、棉籽饼粉、玉米浆、鱼粉、酵母粉等常被选用。 培养基的组成中除了水分外，碳源和氮源的含量是最大的。碳源含量一般不超过10％，氮源含量较低，一般碳氮比应为3[

最近因培养箱坏，换了一个生产厂家及型号相同的培养箱，但出现了平板培养基表面失水干燥，并有开裂现象，甚至出现了培养基完全失水干燥，无法长菌和读数的现象。现求助各位同仁，找出原因，在下万分感激！！

注意事项： 1.配制溶液时必须用新鲜的蒸馏水。2.安装蔡式滤器时通常使用孔径 0.45 微米 和 0.22 微米滤膜各一张，放置位置为 0.45 的位于 0.22 微米的滤膜上方，并且要特别注意滤膜光面朝上。 3.配制 RPMI1640 培养基时因为还要加入小牛血清，而小牛血清略偏酸性，为了保证培养液 PH 值最终为 7.2 ，可在配制时调 PH 至 7.4 。 细胞培养的一般过程 一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。R 理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置 4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。由组织并分离分散细胞的方法可参阅有关文献。 三、培养将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的 PH是否太酸或太碱（由酚红指示剂指示），此外对培养温度和 CO2浓度也要定时检查。一般原代培养进入培养后有一段潜伏期（数小时到数十天不等），在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质，也可能仅有不死性（Immortality）而无恶性。培养正在生长中的细胞是进行各种生物医学实验的良好材料。四、冻存及复苏为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度?－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入 37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。

厌氧培养箱简介该培养箱是一种可在无氧环境下进行细菌培养及操作的专用装置，可培养最难生长的厌氧生物，又能避免往厌氧生物在大气中操作时接触氧而死亡的危险性。　　结构特点：　　该产品由恒温培养室、厌氧操作室、取样室、气路及电路控制系统、箱架、瓶架、熔蜡消毒器等部分组成。设备具有以下主要　　特点：　　※ 使用科学先进手段达到高精度、恒温的厌氧环境，便于操作者在厌氧环境中进行操作和对厌氧菌培养。　　※ 温控采用微电脑智能控温仪，能准确直观地反映箱内实际温度，加上有效的限温保护装置，安全可靠。　　※ 箱内装有紫外线杀菌灯，气体经过滤后进入箱内，可有效地避免细菌污染。　　※ 气路装置，可任意调节流量，能任意输入各种所需气体。　　※ 操作室均由不锈钢板制成，其前窗采用厚透明耐冲击特种玻璃板制成，操作使用专用手套可靠舒适、灵活，使用方便。　　※ 操作室内备有特殊接种棒灭菌器，并附设有试管架、熔蜡消毒装置，还装有除氧催化器。　　技术指标　　取样室形成厌氧状态时间 12小时　　培养室使用温控范围 室温 +3～50℃　　培养室温度波动 ±0.3℃　　培养室温度均匀性 ±1℃　　电源/功率 220，50Hz/600W　　净重/毛重（Kg） 240/320　　培养室内尺寸（cm） 25×19×29 操作室尺寸（cm） 90×65×65　　外形尺寸（cm） 132×75×140　　包装箱尺寸（cm） 145×94×158

数显生化培养箱是生物、遗传工程、医学、卫生防疫、环境保护、农林畜牧等行业的科研机构、大专院校、生产单位或部门实验室的重要试验设备 数显生化培养箱维护和培养： 1、数显生化培养箱外壳应可靠接地。 2、培养箱要放置在阴凉、干燥、通风良好、远离热源和日晒的地方。放置平稳，以防震动发生噪音。 3、为保证冷凝器有效地散热，冷凝器与墙壁之间距离应大于100mm。箱体侧面应有50mm间隙，箱体顶部至少应有300mm空间。 4、培养箱在搬运、维修、保养时，应避免碰撞，摇晃震动；最大倾斜度小于45度。 5、仪器突然不工作，请检查熔丝管(箱后)是否烧坏，检查供电情况。 6、数显生化培养箱制冷工作时，不宜使箱内温度与环境温度之差大于25度。