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快速核酸提取仪原理

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  • 核酸提取仪的工作原理

    核酸提取(核酸的分离与纯化)主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开,但在分离核酸时,应保证核酸分子一级结构的完整性,并排除其他分子污染。核酸提取方法一般包括细胞裂解、酶处理、核酸与其他生物大分子物质分离、核酸纯化等几个主要步骤,而每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。操作过程中首先通过物理、化学或酶解作用裂解细胞,使核酸释放出来,并去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂肪类等生物大分子的过程。在此基础上,沉淀核酸、去除盐类和有机试剂等杂质,从而得到纯化的核酸。核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。在传统的手工核酸提取过程中通常采用离心澄清的方法,操作时费时费力。近年来,出现了磁珠分离技术,利用磁珠在一定条件下对核酸具有很强亲和力的特点,吸附核酸。当条件改变时,磁珠又可以与其吸附的核酸分离,从而得到纯化的核酸。这种方法简便、高效、易于操作,是目前核酸提取仪采用的主要方法。具体来说,磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞,从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后,再在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。磁珠法不需要离心、不需要加入多种试剂,操作简单,符合核酸自动化提取要求,是未来核酸纯化方法发展的一个重要方向。

  • 核酸蛋白检测仪应用和原理

    核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸收的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。在生化分析、环保科学、食品研究、毒理研究、新药开发等领域中对核酸、蛋白检测、纯化和提取提供了一种独特的分析手段。

  • 【实战宝典】核酸提取方式主要有哪些?有何差异?

    问题描述:核酸提取方式主要有哪些?有何差异?解答:[align=left][font=宋体][color=black]目前主流的核酸提取方法有煮沸裂解法、苯酚氯仿抽提法、离心柱法、磁珠法,接下来介绍这几个方法的原理、优劣势及适用场景。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]([/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]1[/color][/font][font=宋体][color=black])煮沸裂解法:原理是通过加热使细胞膜破裂,充分暴露核酸,核酸可溶解于上层水溶液中,通过高速离心沉淀变性蛋白质和细胞碎片,上清液即为核酸粗提液。此方法的操作相对简单,成本低,但由于是粗提,成分比较复杂,有时可能带来一定的体系干扰或者裂解不充分的情况,一般用于细菌定性鉴定时使用。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]([/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]2[/color][/font][font=宋体][color=black])苯酚氯仿抽提法:原理是苯酚和氯仿抽提除去蛋白和多糖类杂质,获得相对较为纯净的基因组核酸。成本比较低廉。缺点是试剂毒性较大,长时间操作对人员健康有较大影响。试剂需要自行配制,批次间差异显著。提取效率相对较低,不适宜少量或者微量操作。一般用于大量核酸样本的抽提。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]([/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]3[/color][/font][font=宋体][color=black])离心柱法:原理是利用裂解液促使细胞破碎,使细胞中的核酸释放出来,利用柱子中的载体吸附提纯核酸。它的优点是比传统的酚氯法提取纯度高、毒性低,有利于[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]RNA[/color][/font][font=宋体][color=black]保护,而且能进行微量操作,价格较低。缺点是不便于高通量、自动化操作,对实验室设备和人员的操作技能要求较高。目前应用广泛,常用于细菌、病毒、动物组织等多种样本的核酸提取[/color][/font][sup][font='Times New Roman','serif'][color=black][13][/color][/font][/sup][font=宋体][color=black]。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]([/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]4[/color][/font][font=宋体][color=black])磁珠法:与离心柱的操作原理基本相同,利用交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等细胞中其他物质分离。优点是能够实现自动化、高通量操作,配合核酸自动提取仪使用,操作简单、用时短,核酸纯度高、浓度大,可广泛用应用于血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中的[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]DNA[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]RNA[/color][/font][font=宋体][color=black]分离,但超高通量样本同时进行时,可能存在一定的污染风险。[/color][/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》

  • 与传统的手工操作相比核酸提取仪的优势

    核酸提取仪有两种分类分类方式,一种是按用途进行分类,另一种是按照应用试剂的不同进行分类。(1)按照用途分类:一类是自动液体工作站,自动液体工作站是功能非常强大的设备,液体分液、吸液等自动完成,甚至可以整合扩展、检测等仪器设备,实现标本提取、扩增、检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用,不太适合常规实验室提取核酸,一般都应用在单一类标本并且一次提取标本量非常大(至少96个,一般几百个)的实验需求上。自动工作站的平台建立及平台的运作,需要比较大的资金。另一类是小型的自动化仪器,小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊设计来达到自动提取核酸的目的,可以在任何实验室得到应用,最近几年有很多机型陆续投放市场。(2)根据应用的试剂不同分类:一类是应用磁珠法试剂的仪器,另一类是应用离心柱法试剂的仪器。应用磁珠法的自动核酸提取仪操作简便,容易自动化,是目前市场上的主流,如QAGEN、Lab-Aid 820等仪器。与传统的手工操作相比核酸提取仪的优势:核酸提取仪一般具有以下的特点:(1) 无交叉污染:仪器部件未接触到生物学样本;(2) 自动化系统:每次提取工作,操作者只需要做好安装工作,布置好孔板(提供提取所需要的试剂).提取整个过程都不需要人为的帮助,仪器自动完成;(3)提取控制:在提取过程中,如果操作者需要,该系统允许您对提取过程进行控制。

  • 全自动稀有样品核酸提取仪

    全自动稀有样品核酸提取仪

    [img=,257,264]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/06/201706301258_01_3194653_3.png[/img]Aurora全自动核酸提取系统采用专利SCODA( Synchro-nous Coefficient of Drag Alteration)电泳DNA操作技术,从具有挑战性的样品中浓缩和纯化DNA.SCODA根据DNA的物理特性选取长的带电聚合物(而非通过其其化学性质或化合物亲合力分离DNA).因此,系统可提供卓越的污染物排斥.此外,Aurora系统可从单一样本中提取高达100倍浓度,从几百分子到100微克的DNA.可高效稳定地纯化提取核酸和蛋白,尤其适合珍贵样品、低生物质低丰度样品、土壤、环境等各类型难提取样品的提取. 产品特征电泳纯化高分子量DNA的提取低生物量和严重抑制样品处理样品成本为零,适合低通量样品处理宏基因组学/NGS/光学测绘/单分子测序应用应用领域生命科学研究土壤与环境农业生物技术法医学 技术参数样品处理时间:2-4小时,样品盐度60%DNA / RNA片段大小: 500 nt RNA,300 bp - 50 kb DNA,可扩展到1Mb污染物抑制: 10-50,000X2产量: 60 uL 该系统避免了研磨、匀浆等传统方法的费力、耗时、低效等诸多缺点,通过非机械过程直接从环境样品,细胞提取物,或带电泳插头的琼脂糖中回收完整的高纯大片段DNA。DNA提取缓冲液、DNA凝胶柱可用于进行后续的克隆,归档,光学标测,或PCR、测序等遗传分析。系统可从至多5毫升稀释裂解液或洗出液中提取核酸,回收低生物质样品包括沉积物,土壤,苔原,和水样中的微量核酸。系统还可净化商业试剂盒受污染洗脱液,提高样品利用率,并无缝对接到现有的工作流程中.

  • 自动核酸提取仪选型的困惑

    单位计划采购自动核酸提取仪,听几个进口厂家推介了,得出来的观点相悖,特求助高人指点一二。到底是滤膜法好还是磁珠法好?是否为真正的全自动怎样去区分?高通量与否怎样鉴定?

  • 出售赛默飞核酸提取仪kingfisher prime

    出售赛默飞核酸提取仪kingfisher prime,仪器未使用过。开机正常。有意义私聊。[img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211120846072310_5286_4092743_3.png[/img]

  • 【实战宝典】核酸提取中裂解液的使用量为多少合适?

    问题描述:核酸提取中裂解液的使用量为多少合适?解答:[align=left][font=宋体]裂解液的用量原则是确保能彻底裂解样品,同时使裂解体系中核酸的浓度适中。浓度过低,将导致沉淀效率低,影响得率;浓度过高,去除杂质的过程复杂且不彻底,导致纯度下降。另外,裂解液的用量是以样品中蛋白质的含量为基准的,而不是以核酸含量为基准,这一点务必牢记。[/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》

  • 核酸抽提经验及原理

    1、核酸抽提原理 简单地讲,核酸抽提包含样品的裂解和纯化两大步骤。裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程,纯化则是使核酸与裂解体系中的其它成分,如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。 经典的裂解液几乎都含有去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和盐 (如Tris、EDTA、NaCl 等)。盐的作用,除了提供一个合适的裂解环境 (如 Tris),还包括抑制样品中的核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏(如 EDTA)、维持核酸结构的稳定 (如 NaCl)等。去污剂则是通过使蛋白质变性,破坏膜结构及解开与核酸相连接的蛋白质,从而实现核酸游离在裂解体系中。裂解体系中还可能加入蛋白酶;利用蛋白酶将蛋白质消化成小的片段,促进核酸与蛋白质的分开,同时,也便于后面的纯化操作以及获得更纯的核酸。也有直接使用高浓度的蛋白质变性剂 (如GIT、GuHCl 等) 裂解的,该方法已经成为了 RNA 抽提的主流,却不是基因组 DNA 抽提的主流。 最常用的纯化方法,一是PC 抽提 + 醇沉淀,二是介质纯化。第一种方法是利用 PC对裂解体系进行反复抽提以去除蛋白质,实现核酸与蛋白质的分离;再用醇将核酸沉淀下来,实现核酸与盐的分离。第二种方法则是利用某些固项介质,在某些特定的条件下,选择性地吸附核酸,而不吸附蛋白质及盐的特点,实现核酸与蛋白质及盐的分离。高盐沉淀去除蛋白质是第一种纯化方法的一个变体,省略了 PC操作的麻烦。当然,也有不纯化的抽提方法,但是用途多局限于简单的 PCR。其它杂质 – 如多糖、多酚等 -的去除,基本上都是在这两种方法的基础上,通过增加一些特别的试剂,或者增加一些额外的步骤来实现的。2、了解你的实验样品 如果你研究某个实验样品,并且要抽提它的核酸,以下的信息一定要先行收集:该样品的核酸含量、酶含量、特殊杂质含量。如果你对样品的特点一无所知,当样品稍微有一点复杂时,抽提核酸的实验就会碰到许多问题。以血液为例,如果你不知道鸟的血液中有核细胞的含量是人血的千倍左右,而使用人血一样的起始量去抽提鸟血的基因组 DNA,怎么可能成功?失败了又怎么知道原因所在?同时,只有对实验样品有所了解,才能正确选择裂解方法。 绝大部分情况下,使用新鲜样品可以获得最好的结果。对一些杂质含量高的样品,如果使用新鲜样品抽提基因组 DNA 是碰到杂质残留过大的问题,可以试一下 -20C保存一天后再抽提的对策,可能会有意想不到的效果。样品如果因为某些原因必须先行保存,也要先简化一下样品:血液最好只保存有核细胞;将样品分割后保存,避免反复冻融。如果实验室不具备合适的保存条件,将样品先裂解后再保存,是一个不错的选择。3、裂解方法的评价 含蛋白酶的裂解方法,可以认为是抽提基因组 DNA 的首选。裂解包括膜蛋白的游离和与基因组 DNA相连接的蛋白质的游离。蛋白酶的作用是使蛋白质变小,故而对蛋白质的游离有巨大的促进作用;同时,巨大的基因组 DNA是很容易“缠”住大分子的东西的,蛋白质被蛋白酶消化变小后,则不容易被基因组 DNA“缠”住,有利于蛋白质在纯化操作中的去除,使最终获得的基因组 DNA 的纯度更高。另外一个思路是,如果基因组 DNA 与蛋白质“缠”在一起,在纯化的过程中有两种可能:如果基因组 DNA 的特性占优势,则纯化时以 DNA的形式被保留下来,导致蛋白质的残留;如果蛋白质的特性占优势,则纯化时以蛋白质的形式被去除,导致 DNA 的损失。有些样品,如肌肉,即使是RNA 抽提,也强烈建议使用含蛋白酶的裂解液 (或者在操作中的某个时候使用蛋白酶消化蛋白质),原因在于这些样品中的蛋白质,是非常难以去除的。该方法是获得最大得率和最高纯度的基础。 不使用蛋白酶的去污剂裂解方法,仍然在细胞基因组 DNA抽提方面有优势,尤其是当得率和纯度要求不是最高,而经济性及操作简单很重要时。控制好裂解液/样品的比例是该方法成功的关键。该方法结合高盐沉淀,可以实现最简单的操作,但纯度及得率的稳定性可能会比用 PC 抽提的差一些。 高浓度蛋白质变性剂 (如 GIT、GuHCl 等)的裂解方法,是抽提 RNA 的首选。总 RNA 的抽提,最重要的是快速裂解细胞膜,至于与基因组 DNA 相连接的蛋白质的裂解以及基因组与蛋白质“缠”住的问题,因为都不会对以后的纯化产生大的影响,可以不考虑。高浓度蛋白质变性剂能快速破坏细胞膜,进而迅速抑制住细胞内的 RNA酶,从而确保了 RNA 的完整性。除了极少量不适用该方法的样品 – 主要是植物,其它绝大部分样品的 RNA的抽提,都可以以高浓度的蛋白质变性剂为基础的。该方法也可用于基因组 DNA 抽提,非常快速简单,但纯度不是很高。 含 CTAB的裂解液,几乎成为富含多糖的样品,如细菌、植物的基因组 DNA 抽提的首选裂解方法。该方法成功与否与两个因素有关:一是 CTAB的质量,二是洗涤的彻底程度。CTAB 的质量对裂解效率有很大的影响,而且,似乎还说不清楚原因,因为即使是同一公司生产的纯度一样的CTAB,批号不同,效果就可能差别很大。洗涤去除 CTAB 要比其它的盐难一些,同时, CTAB的少量残留也会对酶活性有巨大影响,所以洗涤是否彻底也是该方法成功与否的关键。裂解时的温度,多使用65C;但如果发现降解严重或者得率太低,可以试一下 37C – 45C 这个相对低温的区域。 SDS碱裂解法是质粒抽提的首选裂解方法,具有快速、得率高、几乎无基因组 DNA污染的特点。控制好裂解液/菌体的比例和操作的温和是该方法成功的关键。蛋白质的沉淀效率在 4C 会更好一些,所以,加入溶液 III 后在 4C静置一段时间以及采用 4C 离心去蛋白质,都可以提高质量。该方法不一定要使用 PC 纯化,但结合 PC 纯化,可以获得纯度很高的质粒。RNA的去除可以靠在溶液 I 中加入 RNase A (100ug/ml) 或者在最后的溶解液中加入 RNase A (25 ug/ml)来实现。总的感觉是,在溶液 I 中使用 RNase A,RNA 的残留少一些。不过,经典沉淀几乎没有办法彻底去除 RNA 残留。另外,对大质粒(50 kb 以上),该方法可能会有问题。 PCR模板的简易裂解方法,也是使用面很广的一类方法。该方法的特点是无须纯化,样品被裂解后即可直接取裂解液用于PCR,非常快速。也正因为不纯化,所以,假阴性 (即没有扩增出来的阳性)比例也比较高。该方法最简单的裂解液就是水,复杂一点的就会含有一些不会抑制后续的 PCR 反应,而且能提高裂解效率,甚至还可能部分消除样品内抑制PCR 反应杂质的东西,如 Triton X-100、甲酰胺等。再复杂一点的就会含有诸如 Chelex 100之类的能吸附部分杂质的介质。操作也非常简单,多使用温度的变化来实现样品的裂解,如煮沸、或者高温-低温的多次循环等。该方法最适合从一大堆样品中找出阳性样品,但却不适合用于判断某一个样品是阳性还是阴性。降低样品使用量可以提高阳性率,因为样品量的降低,同时意味着 PCR 的抑制物量的降低。 选择了合适的裂解液,下一步就是要控制好样品与裂解液的比例。这个问题非常重要,但却没有获得足够的重视。严肃的参考资料,都应该会提供一个简单的比例,如1ml 裂解液可以用于 T mg 组织或者 C个细胞;我的建议是,你的样品量绝对要小于资料所提供的。起始样品用多大,并没有具体的说法。如果不是样品量有限,则以能抽提出满足数次成功实验所需的核酸量,作为决定样品起始量的基础,会比较合理的。不要因为 1ml 裂解液可以抽提 100mg 样品,就一定使用 100mg样品。裂解液的用量,表面上与抽提的结果 (纯度及得率)没有关系,然而,在实际操作中,对结果是有比较大的影响的。裂解液的用量原则是:确保能彻底裂解样品,同时使裂解体系中核酸的浓度适中。浓度过低,将导致沉淀效率低,影响得率;浓度过高,去除杂质的过程复杂且不彻底,导致纯度下降。另外,裂解液的用量是以样品中蛋白质的含量为基准的,而不是以核酸含量为基准,这一点务必牢记。4、纯化方法 评价 PC 抽提/醇沉淀方法,是一个永不过时的方法。稳定、可靠、经济、方便。PC抽提可以彻底去除蛋白质,醇沉淀可以去除盐,对于一般的干净的样品 (杂质为蛋白质),该方法完全可以获得高质量的核酸。虽然每次 PC抽提都会损失一部分核酸(因为不可能将水相全部移取),以及低浓度核酸的醇沉淀效率低,但这些问题都可以靠操作的调整而得以解决或者减少影响。该方法的最大的问题是不适合大规模抽提。 PC抽提是去除蛋白质的一个非常有效的手段。苯酚能使蛋白质变性,变性后的蛋白质从水相中被析出,处于苯酚中或者苯酚/水相之间。PC抽提的关键是,一要混匀彻底,二要用量足够。彻底混匀,才能确保苯酚与蛋白质的充分接触,使蛋白质完全变性。许多人总是担心混匀的剧烈程度是否会对核酸,尤其是基因组 DNA 造成破坏,实际上大可不必如此小心。剧烈的混匀操作,是会部分打断大分子的基因组 DNA,但该破坏作用不会强烈到 DNA变成 10kb 以内的小片段。手剧烈晃动混匀后,基因组 DNA 的片段,大部分会大于 20kb,这个大小,除了一些特别的要求外,对 PCR和酶切,都是完全适用的。如果要求的片段非常大,如构建文库用,则不能使用剧烈的混匀方法,而只能来回温和颠倒混匀 –此时的关键是:裂解液的比例要足够大,使体系不要太粘稠。用量要足够,是因为苯酚去除蛋白质是有一定的饱和度的。超过了该饱和度,裂解体系中的蛋白质不会被一次去除,必须靠多次抽提,方可

  • 中草药快速常温提取--组织破碎提取法(闪提)

    [align=center] [b]中草药快速常温提取--组织破碎提取法(闪提)[/b][/align][align=left] 绿色提取(green extraction)是由本团队核心专家刘延泽教授于2013年在南京举行的全国第四届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上首次提出,绿色提取是指:利用安全、易得、无毒、易回收、无残留的适当溶剂,将目标生物活性成分以最快的速度、最低的消耗、最大的收率从动植物材料中转移出来,并且实现目标活性成分与母体残渣全利用、零排放、零污染的一种或一类提取技术。2014、2015年又分别在长沙、青岛举行的全国第五届、第六届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上进一步阐述其原理、应用成果和前景,得到了与会专家的热烈响应和一致认可。[/align] 绿色提取的基础是刘延泽教授等于1993年首次提出并在河南科学上发表的植物组织破碎提取法,当时主要是应用于热敏感成分丹宁及多元酚类化合物的提取。之后,相继在河南省、国家自然科学基金、科技部等的支持下研制出了实现这一方法的设备—中草药组织破碎提取器。经过20余年的实践证明,该方法不仅适用于几乎所有类别中药有效成分的提取,其独特的快速、节能、环保、可持续利用的优势是当今任何方法都无可比拟的,完全具有当今人类发展关键元素的“绿色科技、可持续利用、和谐自然”。但是,由于人们对新生事物的接受及其他多种因素的影响,目前经该方法研究的中草药尚不足百种,并且尽管几乎都取得了预期效果,但仍未真正应用到生产中去,与我们国家的近万种中草药和数十个应用领域相比仅仅沧海一粟,前景极其巨大。 本项目将在20余年成功实践的基础上,首先完善不同规格组织破碎提取器的研制和定型生产,满足本提取计划的需求,包括微量分析型(20ml)、实验研究型(2L)、中试规模型(200L)、和生产应用型(1000L);对一期目标中的药典提取物、单味中药提取物(药典)、国际标准提取物、特色中草药提取物(色素、香料、调味剂、添加剂)等进行提取。[b] [/b]中草药组织破碎提取器利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在室温液体状态下数秒内把植物组织破碎、研磨至细微颗粒状,通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与包容,使组织内有效成分分子迅速解离并进入到溶剂体系中,并迅速实现药材组织内外有效成分分子浓度的平衡,达到快速提取的效果。产品特点及用途:● 室温提取、保护成分: 把溶解提取成分的溶剂装入提取容器内,再将适量中草药饮片也装入提取容器,物料和溶剂混合后在室温状态下进行组织破碎提取,有效的保护了热敏成分;● 剪切研磨、瞬间完成: 提取器利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在30秒左右完成组织破碎提取过程;● 速度可调,对不同材料方便个性化处理;● 全不锈钢结构,耐各种有机溶剂;● 刀具与容器一体化设计,清洗更为容易,一冲即可;● 该仪器为集成了高速液体组织破碎、高速研磨、高速匀浆、高速搅拌功能与优势为一体的设备,广泛用于中草药提取、生物工程、农林化工、烟草化工、制药、保健食品、天然美容品、洗浴疗养品及轻工等领域。

  • 绿色快速提取技术-组织破碎提取法(闪提)

    中草药提取是指将中草药本身所含的有效或有用成分与无效或无用的部分分离开来,其中的有用部分称之为提取物,无用部分称之为药渣。根据浓缩程度不同,中草药提取物可以是固体,也可以是稠稿和浓缩液。中草药提取物无论在中药制药工业、保健品与食品工业,还是化妆品工业、农兽药工业等都有着广泛的使用并起着不可替代的作用。传统提取技术包括压榨法、升华法、煎煮法、浸渍法、回流法、连续回流发、逆流萃取法、超声波法及其他辅助提取技术。绿色提取(green extraction)是由刘延泽教授于2013年在南京举行的全国第四届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上首次提出,绿色提取是指:利用安全、易得、无毒、易回收、无残留的适当溶剂,在常温状态下将目标生物活性成分以最快的速度、最低的消耗、最大的收率从动植物材料中转移出来,并且实现目标活性成分与母体残渣全利用、零排放、零污染的一种或一类提取技术。2014、2015年又分别在长沙、青岛举行的全国第五届、第六届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上进一步阐述其原理、应用成果和前景,得到了与会专家的热烈响应和一致认可。[b] 技术目的:[/b]节约能源、降低消耗,减少排放、保护环境,提高收率、节约资源,促进技术进步,解脱繁重劳动,增进人类健康[b]技术背景:[/b] 绿色提取的基础是刘延泽教授等于1993年首次提出并在河南科学上发表的植物组织破碎提取法,当时主要是应用于热敏感成分丹宁及多元酚类化合物的提取。之后,相继在河南省、国家自然科学基金、科技部等的支持下研制出了实现这一方法的设备—中草药组织破碎提取器(闪提)。经过20余年的实践证明,该方法不仅适用于几乎所有类别中药有效成分的提取,其独特的快速、节能、环保、可持续利用的优势是当今任何方法都无可比拟的,完全具有当今人类发展关键元素的“绿色科技、可持续利用、和谐自然”。[b]技术特点:[/b]1、室温提取、保护成分:[color=#333333]传统的提取方法,例如煎煮、回流等都需要加热,而组织破碎提取法在室温下即可操作,不需要加热,充分保护了热敏成分。[/color]2、快速提取、瞬间完成:[color=#333333]传统提取工艺需要数小时才能完成的提取,组织破碎提取法只需60秒左右即可完成。[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、绿色环保、节约能源[/color][color=#333333]由于提取过程不需要加热,[/color][color=#333333]提取后母体残渣全利用、零排放、零污染,[/color][color=#333333]而且提取时间短,所以整个提取过程节能能源、绿色环保。[/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]技术原理:[/color][/b][color=#333333]组织破碎提取法是在室温液体状态下利用高速破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗透等技术,数分钟内对药材进行组织破碎、研磨至细微颗粒,通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与溶解,使药材组织细胞内的目标生物活性成分以最快的速度、最低的能耗、最大的收率迅速从细胞中解离出来进入溶剂体系中,实现药材组织细胞内外有效成分分子浓度的平衡,且不会破坏热敏成分、并达到快速绿色提取的效果。[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]应用领域:[/color][/b][color=#333333]1[/color][color=#333333]、[/color]中药及天然药物成分提取;[color=#333333]2[/color][color=#333333]、化工领域提取等;[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、生物技术、化妆品、食品、保健品等领域。[/color][b][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333]提取方法比较:[/color][/b] [table][tr][td][b]提取方法[/b][/td][td] [align=center][b]优点[/b][/align] [/td][td] [align=center][b]缺点[/b][/align] [/td][/tr][tr][td]煎煮法[/td][td]经济、安全、易行[/td][td]选择性差、成分易破坏、后期处理困难[/td][/tr][tr][td]回流法[/td][td]选择性好、收率高[/td][td]受热长、效率低、成分易破坏[/td][/tr][tr][td]浸泡法[/td][td]简单、投资小、安全[/td][td]效率低、耗时长、易变质[/td][/tr][tr][td]蒸馏法[/td][td]选择性强、处理方便[/td][td]适用范围窄、需要专用设备[/td][/tr][tr][td]渗漉法[/td][td]室温、简单、节能[/td][td]费时、有污染[/td][/tr][tr][td]连续回流法[/td][td]省溶剂、效率高[/td][td]受热长、规模小、成分易破坏[/td][/tr][tr][td]超临界萃取[/td][td]近室温、安全、收率高[/td][td]设备复杂、投资大、规模小[/td][/tr][tr][td]超声提取法[/td][td]近室温、安全、收率高[/td][td]投资大、规模小、较耗时[/td][/tr][tr][td]微波萃取法[/td][td]快速、易行[/td][td]规模小、成分易变化[/td][/tr][tr][td]组织破碎提取法[/td][td]室温、快速、安全、节能,不破坏成分、规模可调、宜各种溶剂[/td][/tr][/table][b][color=#333333]研究论文、综述等检索:[/color][/b][color=#333333]一、中国专利、CNKI(2016年6月前)[/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、闪式提取 1072篇 [/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、组织破碎提取 82篇[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]相关论文:[/color][/b][color=#333333]1[/color][color=#333333]、《中国天然药物》2007-11 [/color][color=#333333]植物组织破碎提取法及闪式提取器的创制与实践 [/color][color=#333333]被引用:163 次,下载:855次[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、《中草药》2010-02[/color][color=#333333]用于中药提取的新技术进展 [/color][color=#333333]被引用:57 次,下载:4100次[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、《中国医院药学杂志》2015-01[/color][color=#333333]闪式提取技术在中药成分提取中的研究进展[/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]、《中药材》2015-07[/color][color=#333333]闪式提取在中药中的应用进展[/color][color=#333333] [/color]

  • 快速溶剂萃取的原理是什么

    今天我需要做一个方法,标准上是采用快速溶剂萃取做的,但是实验室不能为一个一次性试验就去购买一台,所以准备用其他方法来进行,按照传统的超声提取,离心来做,结果发现基质没办法与萃取液分离,浓缩完后的样品根本没有办法进行SPE,所以想问一下快速溶剂萃取 是怎么工作的,其工作原理是什么。

  • 未名环境分子诊断(常熟)有限公司刚刚发布了核酸提取试剂盒研发员-苏州市职位,坐标苏州市,速来围观!

    [size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88822.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称:[/b]核酸提取试剂盒研发员-苏州市[b]职位描述/要求:[/b]岗位职责:负责针对各种临床样本的核酸提取试剂的开发和优化;配合磁珠进行核酸提取试剂盒的开发和优化;如游离DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]纯化试剂盒、DNA片段筛选试剂盒等。岗位要求:拥有相关学科的大专/硕士或博士学位,如生物技术、分子生物学等。至少1年以上核酸提取的开发经验,熟悉相关实验操作和技术原理。[b]公司介绍:[/b] 未名环诊是国内成立最早的环境分子诊断企业,以北京大学研究成果和团队基础,研发基于污水流行病学的大数据监测评估技术,开创了污水毒情监测业务,为各级政府提供毒情监测和溯源服务。为全国行业龙头,细分领域市场占有率超60%。与公安部、18个省级公安厅、200多个地市级公安局合作,为我国公安禁毒事业做出了巨大贡献和技术突破。 企业的发展目标为以城市生活污水为载体,不断挖掘污水中蕴含的城市大...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88822.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码,关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

  • 绿色快速提取技术

    [b]绿色快速提取技术运用在中草药领域,称为--中[b]草药快速组织破碎提取法[/b] 中草药组织破碎提取方法:即利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在室温液体状态下数秒内把植物组织破碎、研磨至细微颗粒状,通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与包容,使组织内有效成分分子迅速解离并进入到溶剂体系中,并迅速实现药材组织内外有效成分分子浓度的平衡,达到快速提取的效果。[/b] 组织破碎提取法与其它常用提取方法相比,在提取物收率相当或略高、略低的情况下,提取时间是其他方法的1% 以下,收率提高,速度变快,没有污染,提高时效百倍以上,如大黄、连翘、鸡血藤等,且不需加热,成分不会因长时间受热而破坏的风险。对于一个企业来讲,提取时间的缩短,提取效率的提高,就代表了成本的降低和利润的显著提高。 中药行业近些年发展进一步加快,在植物的根、茎、叶、花、果、皮、种子、真菌及动物类组织器官等软硬材料破碎提取方面均显示出强劲能量,组织破碎提取法运用到设备仪器中也能够完全实现程控化、自动化、和一键完成,且低噪音、易清洗。随着应用领域不断拓宽和设备性能的提高,该领域发表论文和申报提取工艺发明专利的数量逐年增加,正在得到越来越多的有关领域科学家的认同与接受。

  • 煮沸法小量提取质粒的原理、步骤和注意事项

    试验原理:煮沸法是根据Holmex和Quigley(1985)的方法改进而成的。在基因工程中, DNA 分子的切割是由限制性内切酶 来完成的。限制性内切酶 能识别特定的 DNA 序列,在一定的条件下切断双链 DNA 。限制性内切酶的作用效率是受多方面因素影响的,如反应温度,缓冲体系,离子种类与浓度, DNA 的纯度和甲基化程度等。对 DNA 进行酶切时,首先要选择适合的缓冲液。对于单酶切,应选用该酶的最适缓冲液;对于双酶切或三酶切,应选用一种能使所有酶都充分作用的缓冲液。 DNA 的纯度对于酶切的效果的影响也很大,因为蛋白质、酚、氯仿、 SDS 等杂质都会抑制限制性内切酶的活性。琼脂 糖凝胶电泳是分离,鉴定和纯化 DNA 的常规方法。利用低浓度的荧光嵌入染料 - 溴化乙锭进行染色,可确定 DNA 在凝胶中的位置。如有必要,还可以从凝胶中 回收 DNA 条带,用于各种克隆操作。琼脂 糖凝胶的分辨能力要比聚丙烯酰胺凝胶低,但其分离范围较广。用各种浓度的琼脂糖凝胶可以分离长度为 200bp 至近 50kbp 的 DNA 。长度 100kb 或更大的 DNA ,可以通过电场方向呈周期性变化的脉冲电场凝胶电泳进行分离。在基因工程的常规操作中,琼脂糖凝胶电泳应用最为广泛。它通常采用水平电泳装置,在强度和方向恒定的电场下进行电泳。 DNA 分子在凝胶缓冲液(一般为碱性)中带负电荷,在电场中由负极向正极迁移。 DNA 分子迁移的速率受分子大小,构象。电场强度和方向,碱基组成,温度和嵌入染料等因素的影响。实验准备:1、70% 乙醇( -20 ℃)及无水乙醇( -20 ℃)2、STET 缓冲液(pH8.0 )( 8% 蔗糖, 0.5%Triton, 50mmol/L EDTA ,,10mmol/L Tris )3、1.2M 氯化钠4、TE 缓冲液(10mmol/L Tris -HCl, 1mmol/L EDTA )5、STET:0.1mol/L NaCl,10mmol/L TrisCl(pH8.0),1mmol/L EDTA(pH8.0),5%Triton X-10(其他同碱裂解法)试验步骤:1、无菌操作台上取1.5ml培养菌体置于离心管 (Eppendorf管)中,微量离心机 上10000rpm离心1min,或者以4000rpm离心5-10min,弃上清液,倒扣于干净的吸水纸上吸干。2、将菌体沉淀悬浮于350μl STET缓冲溶液中, 涡旋使其混匀。3、加入25μl新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml,用10mmol/L Tris.Cl(pH8.0)配制), 涡旋振荡大概3秒钟。4、将eppendorf管放入沸水浴 中,40秒后立即取出。5、微量离心机 上以4℃,12000rmp离心10min。6、用无菌牙签从eppendorf管中挑去细菌碎片。7、在上清中加入40μl 5mol/L乙酸钠(pH5.2)和420μl异丙醇,振荡混匀,于室温放置5min。8、微量离心机上以4℃,12 000rmp离心5min,回收核酸沉淀。小心吸去上清液,将离心管 倒置于一张纸巾上,以使所有液体流出。再将附于管壁的液滴除尽。(可参考裂解法中的做法)。9、加入1ml70%乙醇,以4℃,12 000rmp离心2min。轻轻地吸去上清,这一步操作要格外小心,有时沉淀块贴壁不紧,去除管壁上形成的所有乙醇液滴,室温下放置,直至乙醇挥发完全,管内无可见的液体为止(大概需要2-5min)。10、用50μl无DNA酶的胰RNA酶(20μg/ml)的TE(pH8.0)溶解核酸,稍加振荡即可,贮存于-20℃。注意事项:1、大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。2、添加溶菌酶一定要有限度,浓度过高细菌裂解效果反而不好,有时不同溶菌酶也能溶菌。3、提取的质粒DNA中会含有RNA,但RNA并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。4、试验步骤中的细菌沉淀和核酸沉淀中去除上清液时,一定要除尽。5、用 70% 的乙醇溶液洗涤核酸沉淀时一定要十分谨慎,防止将核酸同洗液一起倒掉。6、实验过程中所用的器皿和吸头 都要进行高压灭菌。7、当从表达内切核酸酶 A的大肠杆菌株(endA+株,如HB101 )中小量制粒DNA时,建议不用煮沸法。因为煮沸步骤不能完全灭活内切核酸酶 A,在Mg2+存在下温育(V中用限制酶时)质粒DNA可被降解。若要避免这一问题可以在用70%乙醇洗涤一步前增加一步用酚/氯仿进行抽提。8、如果要通过限酶切割反应来分析DNA,可取1μlDNA溶液加到另一个含8μl水的微量离心管内,加1μl 10x限制酶缓冲液和1单位所需限制酶,在适宜温度温育1-2h。将剩余的DNA贮存于-20℃。通过凝胶电泳分析经限制酸消化的DNA段。如果小量制备的DNA不被限制酶切开,很有可能在收获细菌的步骤中未能很好地去除所有上清液体。这种情况下,可用酚:氯仿抽提DNA终产物,然后用乙醇重新沉淀 DNA,通常,用5-10倍过量的酶(特别是并不昂贵的酶)在100-200μl 体积中进行消化,可以克服限制酶切割反应遇到切割反应遇到的困难。消化后, 加0. 1 体积3mol/L乙酸钠(pH5.2)和2倍体积乙醇沉淀DNA。

  • 绿色快速提取技术--组织破碎提取法的相关文献

    绿色快速提取技术--组织破碎提取法的相关文献

    [b][color=#ff0000] 绿色快速提取技术--组织破碎提取法[/color][/b] 推荐“绿色快速提取技术”--《中草药组织破碎提取法》(闪提)。该技术的核心就是:在室温和液体状态下,利用高速破碎、精准研磨、和超分子渗透等技术,对药材进行瞬间组织破碎、研磨至细微颗粒,使药材组织细胞内的目标生物活性成分以最快的速度(60秒完成)、最低的能耗、和最大的收率迅速从细胞中解离出来进入溶剂体系中,且不会破坏热敏成分,实现药材组织细胞内外有效成分分子浓度平衡,从而达到快速提取之目的。 中草药组织破碎提取器,运用上述技术,从容器底部进行精准研磨,快速完成提取,该技术已申请到了专利。 《医药工业发展规划指南》:提到“提高制药设备的集成化、连续化、自动化、信息化、智能化水平。”中药装备有其特殊性,中药的原料为中药材或中药饮片,存在“品种规格多,物料不规则、加工技术繁杂”等特点,尤其在前处理与提取环节,问题较为突出。建议在这两个环节增加关于中药生产关键技术的支持。[color=#ff0000]提取[/color]是制造各种中药片剂、丸剂、胶囊、冲剂、颗粒剂及注射剂等各种制剂的首要及核心关键工艺。传统提取技术中的煎煮法、回流法、浸泡法及晚近的超声波法等均存在有时间长、效率低、能耗高、浪费大、污染重等缺点,且对一些热不稳定性成分破坏严重。这些缺点的存在,直接对种植、运输、储存、加工、成本、环境、及可持续发展影响极大。工业和农业现代化、人类大健康产业的发展、实现绿色、生态、和谐的可持续发展社会呼唤创新性技术去克服这些制约因素。近年来出现的“闪式提取-《组织破碎提取法》”等中药超快速提取技术,将大大的提升中药生产效率,更好的满足绿色、生态的要求。 [img=,690,859]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907241406163853_6309_3382228_3.png!w690x859.jpg[/img]

  • 【讨论】微波提取和快速溶剂提取的差别

    【讨论】微波提取和快速溶剂提取的差别

    加速溶剂提取的工作流程如图所示,先将固体或半固体的样品放入不锈钢萃取池中,若未加满则填入适量的硅藻土,然后萃取池被转入加热炉内,溶剂被输液泵(或依靠氮气的压力)输送到萃取池内。此时,加热炉开始加热升温,在达到设定的温度和压力后进行静态萃取。萃取结束后,萃取池中的溶剂经由滤膜进入到收集瓶中,并用溶剂清洗管路,再用氮气将其一并吹入收集瓶中。加速溶剂提取主要利用了有机溶剂在高温、高压下,其粘度降低,能更好的浸润样品基体从而能提高溶剂提取的效果。加速溶剂提取很容易实现自动化,因此其应用非常广泛。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/04/200604081423_16448_1613333_3.jpg[/img]微波辅助提取是利用溶剂的极性分子(如甲醇、丙酮等)在微波电磁场中快速旋转和离子在微波场中的快速迁移,相互摩擦而发热,从而加热与固态样品接触的极性溶剂,使所需要的化合物从样品中分配到溶剂里。微波辅助提取一般是在密闭或敞开的微波-透明容器中进行,萃取时将提取溶剂和样品混合在提取器中。目前国内外使用最多的是密闭的萃取罐,在较高的温度和较高的压力下进行提取的,而敞开式的微波萃取系统应用的却很少。用微波萃取时,将样品和溶剂都放入特制的密闭的聚四氟乙烯萃取罐中,在设定的条件下进行微波萃取。

  • 中草药绿色快速提取方法

    “绿色快速提取技术”—《中草药组织破碎提取法》(闪提)。该技术的核心就是:在室温和液体状态下,利用高速破碎、精准研磨、和超分子渗透等技术,对药材进行瞬间组织破碎、研磨至细微颗粒,使药材组织细胞内的目标生物活性成分以最快的速度(60秒完成)、最低的能耗、和最大的收率迅速从细胞中解离出来进入溶剂体系中,且不会破坏热敏成分,实现药材组织细胞内外有效成分分子浓度平衡,从而达到快速提取之目的。经过20余年的实践证明,该方法不仅适用于几乎所有类别中药有效成分的提取,其独特的快速、节能、零污染、零排放、可持续利用等优势是当今任何方法都无可比拟的,完全具有当今人类发展的关键元素--“绿色科技、可持续利用、和谐自然”。利用该技术所取得的科研成果(技术工艺)均可申报发明专利,更可以发表创新学术论文。希望能为您的课题研究和科研项目带来新的突破和创新。2019年“[b]中国中药协会[/b]”关于国家发改委《[b]产业结构调整指导目录[/b]》的意见中,鼓励中药创新药物的研发和应用;推崇“中药高效提取设备”的开发。其中中药生产装备成为关键内容,并指出传统提取技术中均存在有时间长、效率低、能耗高、浪费大、污染重等缺点,并对一些热不稳定性成分破坏严重,意见中强调“闪式提取-《组织破碎提取法》”等中药超快速提取技术将大大的提升中药生产效率,且符合绿色、生态、和谐、可持续性发展的要求,从而使中药制药的生产工艺技术和装备水平实现质的飞跃。技术特点:1、室温提取、保护热不稳定成分;2、快速提取、60秒左右完成,节能;3、零污染、零排放、可持续利用、绿色环保。

  • 探讨快速常温提取的特点和优势

    [b] 中草药组织破碎提取器利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在室温液体状态下数秒内把植物组织破碎、研磨至细微颗粒状,通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与包容,使组织内有效成分分子迅速解离并进入到溶剂体系中,并迅速实现药材组织内外有效成分分子浓度的平衡,达到快速提取的效果。产品特点及用途:[/b]● 室温提取、保护成分: 把溶解提取成分的溶剂装入提取容器内,再将适量中草药饮片也装入提取容器,物料和溶剂混合后在室温状态下进行组织破碎提取,有效的保护了热敏成分;● 剪切研磨、瞬间完成: 提取器利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术,在30秒左右完成组织破碎提取过程;● 速度可调,对不同材料方便个性化处理;● 全不锈钢结构,耐各种有机溶剂;● 刀具与容器一体化设计,清洗更为容易,一冲即可;● 该仪器为集成了高速液体组织破碎、高速研磨、高速匀浆、高速搅拌功能与优势为一体的设备,广泛用于中草药提取、生物工程、农林化工、烟草化工、制药、保健食品、天然美容品、洗浴疗养品及轻工等领域。

  • 核酸微小提过程

    核酸纯化柱(微/小提)http://www.biocomma.cn/images/2mlxiaoti.jpg核酸纯化小提柱产品组成外管医疗级PP,2ml,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,收集离心试剂。内管医疗级PP,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,底部鲁尔接口设计,方便试剂流出。筛板特殊纤维材料,在高速离心过程中,支撑硅胶膜,保证硅胶膜的完整性,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,厚度仅为0.3mm,孔径50um,致孔,孔隙率只有不到百分之二十,相比市场上同类产品,比面积小,静电小,DNA吸附极大降低。硅胶膜孔径1um,高盐低pH值选择性吸附DNA、RNA,低盐高pH值释放DNA、RNA压圈医疗级PP,固定筛板与硅胶膜。核酸纯化微提柱http://www.biocomma.cn/images/2mlweiti.jpg产品组成外管医疗级PP,2ml,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,用来收集离心液。内管医疗级PP,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,底部鲁尔接口设计,方便离心液收集。装配位(这里指装配硅胶膜、筛板和压圈处)1直径为7.4mm,与市场上核酸小量提取同等规格。装配位2,直径为5.4mm,此处为微量核酸提取装配位,面积为小量提取装配位的一半。筛板特殊纤维材料,在高速离心过程中,支撑硅胶膜,保证硅胶膜的完整性,耐受酸碱和大部分的有机溶剂,厚度仅为0.3-0.5mm,孔径50um,孔隙率只有不到百分之二十,相比市场上同类产品,比面积小,静电小,DNA吸附极低。硅胶膜孔径1um,高盐低pH值选择性吸附DNA、RNA,低盐高pH值释放DNA、RNA压圈医疗级PP,固定筛板与硅胶膜。CommaPrep™核酸微提/小提柱可用在核酸提取过程(见图1)中过柱结合、洗涤、洗脱步骤中http://www.biocomma.cn/images/nucleic-2.jpg 图1 核酸提取过程核酸吸附量:核酸纯化小提柱:0-20ug核酸纯化微提柱:0-10ug规格:2ml离心管+吸附柱 适用范围:核酸提取原理是在特定溶液环境下(高盐、低pH)使核酸吸附在固相介质(硅胶膜)上,洗涤去除杂质后,再改 变溶液环境使DN A溶解到纯水或TE中。DNA提取:核酸提取柱用于基因组DNA抽提,不需要使用平衡液。抽提缓冲液,或者结合液中需要胍盐(如硫氰酸胍等) 辅助DNA吸附到膜上。RNA提取:裂解液建议使用含有硫氰酸胍(异硫氰酸胍)可以抑制RNA酶活性,保证RNA酶完整性;可以配合Trizol使用,样品经Trizo裂解后,氯仿分相去除蛋白等杂质,取上层过柱,然后70%乙醇洗涤,即可得到纯净的RNA。【注意事项】 1.上柱前溶液的PH值应小于7;2.洗涤液中的乙醇浓度不得低于50%,一般55%--80%之间。3.最后洗脱,可以用去离子水或者TE(10 mmol/LTris-Cl,1 mmol/L EDTA (pH8.0))。如果长期保存DNA,建议使用TE。定购信息Cat#品名离心柱规格提取量包装DNAK1001CommaPrep™质粒小提纯化柱2ml0-20μg100套/包DNAK1004CommaPrep™琼脂糖凝胶回收纯化柱2ml0-10μg100套/包DNAK1007CommaPrep™ 核酸纯化柱(微小提)2ml0-10μg100套/包DNAK1008CommaPrep™基因组小提纯化柱2ml0-20μg100套/包DNAK1009CommaPrep™RNA小提纯化柱2ml0-20μg100套/包DNAK1002CommaPrep™质粒中提纯化柱15ml0-100μg20套/包DNAK1003CommaPrep™质粒大提纯化柱50ml0-500μg10套/包定制

  • 【分享】索氏提取器的原理

    索氏提取器的原理 从固体物质中萃取化合物的一种方法是,用溶剂将固体长期浸润而将所需要的物质浸出来,即长期浸出法。此法花费时间长.溶剂用量大、效率不高。在实验室多采用脂肪提取器(索氏提取器)来提取、脂肪提取器就是利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取,既节约溶利萃取效率又高。萃取前先将固体物质研碎,以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套1内,置于提取器2中,提取器的下端勺盛有溶剂的圆底烧瓶相连,上面接回流冷凝管。加热园底烧瓶,使溶剂沸腾,蒸气通过提取器的支管3上升,被冷凝后滴入提取器中,溶剂和固体接触进行萃取,当溶剂面超过虹吸管4的最高处时,含有萃取物的溶剂虹吸回烧瓶,因而萃取出一部分物质,如此重复,使固体物质不断为纯的溶剂所苹取、将萃取出的物质富集在烧瓶中。

  • 2019-nCOV核酸快速检测试剂盒(一)

    2019-nCOV核酸快速检测试剂盒(一)

    [b][color=#cc0000]2019-nCOV核酸快速检测试剂盒(一)[/color][color=#cc0000][img=,436,332]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005151637589341_7010_1841897_3.jpg!w436x332.jpg[/img][/color][color=#cc0000][img=,521,382]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005151638285153_7838_1841897_3.jpg!w521x382.jpg[/img][/color][/b]

  • 绿色、环保、节能减排、可持续性利用的快速提取技术

    “绿色快速提取技术”—《中草药组织破碎提取法》(闪提)。该技术的核心就是:在室温和液体状态下,利用高速破碎、精准研磨、和超分子渗透等技术,对药材进行瞬间组织破碎、研磨至细微颗粒,使药材组织细胞内的目标生物活性成分以最快的速度(60秒完成)、最低的能耗、和最大的收率迅速从细胞中解离出来进入溶剂体系中,且不会破坏热敏成分,实现药材组织细胞内外有效成分分子浓度平衡,从而达到快速提取之目的。经过20余年的实践证明,该方法不仅适用于几乎所有类别中药有效成分的提取,其独特的快速、节能、零污染、零排放、可持续利用等优势是当今任何方法都无可比拟的,完全具有当今人类发展的关键元素--“绿色科技、可持续利用、和谐自然”。利用该技术所取得的科研成果(技术工艺)均可申报发明专利,更可以发表创新学术论文。希望能为您的课题研究和科研项目带来新的突破和创新。2019年“[b]中国中药协会[/b]”关于国家发改委《[b]产业结构调整指导目录[/b]》的意见中,鼓励中药创新药物的研发和应用;推崇“中药高效提取设备”的开发。其中中药生产装备成为关键内容,并指出传统提取技术中均存在有时间长、效率低、能耗高、浪费大、污染重等缺点,并对一些热不稳定性成分破坏严重,意见中强调“闪式提取-《组织破碎提取法》”等中药超快速提取技术将大大的提升中药生产效率,且符合绿色、生态、和谐、可持续性发展的要求,从而使中药制药的生产工艺技术和装备水平实现质的飞跃。技术特点:1、室温提取、保护热不稳定成分;2、快速提取、60秒左右完成,节能;3、零污染、零排放、可持续利用、绿色环保。

  • 利用微波无溶剂萃取快速提取精油

    利用微波无溶剂萃取快速提取精油

    利用微波无溶剂萃取快速提取精油精油  精油是通过各种方法从植物的根、茎、叶、花、果皮等中提取的一种具有挥发性的油状烃类物质,主要有萜烯烃类、芳香烃类、醇类、醛类、酮类、醚类、酯类和酚类等组成。精油又称香精油、挥发油和芳香油。精油的挥发性较强,一般需要密封保存。精油可分为三大类:单方精油、复方精油以及基础油,通常复方精油是由单方精油和基础油按一定的配比和工艺精确调和而成。  植物精油是一类天然植物次生代谢物,由于其具有增香、杀菌、抗病毒和抗氧化等生物活性,在香料、化妆品、食品工业、制药、医疗及农业害虫等方面得到了广泛应用。目前最流行的水疗法(SPA),其精髓就是天然植物香精油,也是受欢迎之处。精油提取方法1 传统方法  1.1 溶剂浸提:是用挥发性有机溶剂将植物原料中某些成分浸提出来,主要特点是有机溶剂残留、有毒、萃取时间长效率低并且不能自动操作。  1.2 水 萃 取:常温常压下利用睡进行提取植物精油,主要特点就是过于慢,不能自动操作并且不能定量。  1.3 压 榨 法:将原料粉碎压榨,从植物组织中将挥发油挤压出来,然后静置分层或离心出油分,即得粗品。此方法所得产物不纯,可能含有水分、叶绿素、粘液质以及细 胞组分等杂质呈浑浊状态,同时很难将挥发油完全压榨出来。  1.4 水蒸气蒸馏:目前为止应用最广泛的一种方法,适用于挥发性的、水中溶解度不大的成分提取。设备简单,容易操作,成本低,一套加热装置,一套蒸馏装置即可。此 方法提纯率高,但传统加热时间长,效率低。 1.5 同时蒸馏萃取:同时蒸馏萃取(SDE)的工作原理是样品蒸气和萃取溶剂的蒸气在密闭的装置中充分混合,反复萃取。操作简单,只需要几十克样品,适用于色谱分 析 ,但不适合提取工艺的放大,另外此方法萃取率低,并不能成比例的萃取,不适合定量分析。2 新技术  2.1 微波辅助萃取:微博辅助萃取(MAE)是近几年发展的从天然物中提取香料的一种方法,利用微波辅助加热有机溶剂提取,该法最大的特点是萃取时间短,产物收率高,节省时间和所用溶剂,广泛用于有机化学和分析化学制备样品。但利用了有机溶剂,毒性较大。  2.2 超临界二氧化碳萃取(SC-CO2):超临界流体萃取(SFE)是利用流体在临界点以上某区域(超临界区)所具有的高渗透性、高扩散性和高溶解能力选择萃取目标组分。由于SFE所提取的植物精油往往还需要进一步分离提纯,所以不少研究者尝试将SFE技术与其他分离技术相耦合,来提高分离效率,另外,SFE需要高压,设备投资和维护费用较大。  2.3 微波无溶剂萃取:利用微波加热原理和水蒸气蒸馏原理相结合的一种最新技术,无需有毒溶剂微波直接作用于待提取物,数十分钟内可提取结束,操作简单,整个过程自动完成,精油得率高,时间快,无需其他成本,费用低。微波无溶剂萃取应用实例  微波无溶剂萃取装置: http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015072208584909_01_3024284_3.png http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507220858_556571_3024284_3.png  微波无溶剂萃取系统 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507220858_556572_3024284_3.png http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507220859_556573_3024284_3.png 精油提取中精油提取中 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507220859_556574_3024284_3.png 收集器中精油和水明显分层 1 薰衣草精油的提取   取器: 200ml萃取器装入样品之最大刻度线(大约150g)    蒸馏水: 300g,与样品搅拌均匀   收集器: 将收集器中装好蒸馏水至刻度线下方   水循环冷却器: -15℃采用以下功率程序微波萃取样品:  消解程序:  Step TIME E (max)    Step1 20min 400W  Step2 20min 250W   提取精油量:1.5ml2 薄荷精油的提取  取器: 200ml萃取器装入样品之最大刻度线(大约200g)  蒸馏水: 无需添加   收集器: 将收集器中装好蒸馏水至刻度线下方   水循环冷却器: -15℃采用以下功率程序微波萃取样品:  消解程序:  Step TIME E (max)    Step1 20min 400W  Step2 20min 250W  提取精油量:2.5ml 3 橙皮精油的提取  取器: 200ml萃取器装入样品之最大刻度线(大约600g)  蒸馏水: 无需添加  收集器: 将收集器中装好蒸馏水至刻度线下方  水循环冷却器: -15℃  采用以下功率程序微波萃取样品:  消解程序:  Step TIME E (max)   Step1 20min 400W  Step2 40min 250W  提取精油量:2.0ml 4 烟草花(半开、全开、花蕾)精油的提取  样品处理:将样品用1mol/l的氢氧化钠溶液浸泡30min   萃取器: 200ml萃取器装入样品之最大刻度线  蒸馏水:浸泡后无需蒸馏水  收集器: 将收集器中装好蒸馏水至刻度线下方  水循环冷却器: -15℃采用以下功率程序微波萃取样品:  消解程序:  Step TIME E (max)   Step1 20min 400W  Step2 40min 250W  提取精油量:0.01ml以上方法均比传统方法精油得率高10%以上,但时间仅是传统方法的几分之一甚至几十分之一。微波无溶剂萃取特点:  w无需有机溶剂,精油直接提取  w利用微波加热,提取效率高  w采用水蒸气冷凝原理,提取纯度高  w一键式操作,解放人力微波无溶剂萃取应用领域: http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507220859_556576_3024284_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507220859_556577_3024284_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507220859_556578_3024284_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507220859_556579_3024284_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507220859_556580_3024284_3.png[img=,106,85

  • 索氏提取法的原理、方法、注意事项

    在索氏提取器中,经典的莫过于根据索氏抽提原理、用重量法来测定脂肪含量。   抽提法是测定粗脂肪含量*普遍的方法,抽提法利用重量法的原理,即先将样品溶于脂肪溶剂中,然后利用索氏提取器将脂肪循环抽提,*后再测出抽提前后仪器的重量差,即脂肪的重量。抽提法需要严格的实验过程,如果过程没有掌握好,很可能严重影响到脂肪的*后含量。下面,我们主要来看看用索氏抽提法测定脂肪时应该注意的事项。  (1)样品应干燥后研细,装样品的滤纸筒一定要紧密,不能往外漏样品,否则重做。  (2)放入滤纸筒的高度不能超过回流弯管,否则乙醚不易穿透样品,脂肪不能全部提出,造成误差。  (3)碰到含多量糖及糊精的样品,要先以冷水处理,等其干燥后联通滤纸一起放入提取器内。  (4)提取时水浴温度不能过高,一般使乙醚刚开始沸腾即可(约45℃左右)。回流速度以每8-12次/时为宜。  (5)所用乙醚必须是无水乙醚,如含有水分则可能将样品中的糖以及无机物抽出,造成误差。  (6)用于样品测定脂肪,可按下式计算原来样品脂肪的含量.  脂肪(﹪)=( W1-W0)/W*(100-A)   脂肪(%)= 物的耐盐性得到不同程度提高。其中Zhang和Blumwald(2001)、Zhang等(2001)报告的转AtNHX1基因番茄可耐200mmol/L的氯化钠,并把吸收的钠盐积累在叶片中,而果实的品质不受影响。这些研究预示着在提高植物耐盐性方面,离子的选择吸收和跨膜运输的基因工程是植物耐盐性种质改良的有效途径。   A-100克样品水分的含量(克).   (7)冷凝管上端*好连接一个氯化钙干燥管,这样不仅可以防止空气中水分进入,而且还可以避免乙醚挥发在空气中,这样可防止实验室微小环境空气的污染。如无此装置,塞一团干脱脂棉球亦可。   (8)如果没有无水乙醚可以自己制备,制备方法如下:在1000毫升乙醚中,加入无水石膏50克,振摇数次,静置1 0小时以上蒸馏,收集35℃以下的馏液,即可应用。   (9)将提取瓶放在烘箱内干燥时,瓶口向一侧倾斜45℃放置使挥发物乙醚易与空气形成对流,这样干燥迅速。   (10)样品及醚提出物在烘箱内烘干时间不要过长,因为一些很不饱和的脂肪酸,容易在加热过程中被氧化成不溶于乙醚的物质;中等不饱和脂肪酸,受热容易被氧化而增加重量.在没有真空干燥箱的条件下,可以在100-105℃干燥1.5-3小时。   (11)如果没有乙醚或无水乙醚时,可以用石油醚提取,石油醚沸点30-60℃为好。  (12)使用挥发乙醚或石油醚时,切忌用直接火加热。应用电热套电水浴,电灯泡等.

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