数显白度仪操作规程

百欧博伟生物 Capan-1 人胰腺癌细胞 一、细胞简介平台编号：bio-106177拉丁属名：Capan-1（人胰腺癌细胞）规格：1ml/T25细胞名称：人胰腺癌细胞种属：人源细胞系/甲状腺、胰腺、垂体、肾上腺、扁桃体、胸腺到货周期：10-15个工作日细胞用途：仅供科研使用。注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。 二、细胞介绍该细胞来源于一位40岁白人男性患者的肝转移。细胞表达粘液素，Rh+， HLA A2,，A9，B13，B17。含有刺激素受体和乙二醇激素受体。 三、细胞特性1）来源：胰腺癌，肝转移2）形态：上皮细胞样，贴壁生长3）含量：1x106 个/mL4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装 四、细胞接受后的处理：1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。3）弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。4）如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 五、本公司的细胞培养操作规程，供参考1、培养基及培养冻存条件准备：1）准备IMDM培养基（IMDM，GIBCO，货号C12440500BT)，80%；优质胎牛血清，20%。 。2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。2、细胞处理：1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2、加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。3、轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。4、移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行，最后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。 六、运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80 度冰箱冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。收到细胞后请拍照，3 天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。 七、注意事项：1、收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。2、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 中国微生物菌种查询网自设细胞系板块，是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

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