液湘色谱仪校准规程

L600系列高效液相色谱仪：泵头、单色器等核心部件采用数字化加工技术制造，关注用户检测要求的结构设计，实现了稳定测试所需的光学性能。 稳定的流速，确保了液相色谱仪定性定量等指标的重复性。良好的波长重复性，保证了能量的一致性，确保液相色谱仪定量指标。滤光片组（6片）结构的采用，减小杂散光对分析结果的影响，提高仪器的性能指标。具有可反控的工作站软件功能。高压输液泵指标：项 目指 标可设定的流量范围0.001mL/min～10.000mL/min，增量为0.001mL/min最大操作压力40 MPa，可设定上下限，并能够自动报警压力波动≤1% (1 mL/min，水)流量重复性≤0.075% RSD（基于保留时间）流量准确度±1%二元高压梯度准确度 ≤1%二元高压梯度准确度≤0.2% 紫外检测器的指标： 项 目指 标光 源氘灯、钨灯波长范围190nm～800nm光谱带宽6nm波长准确度±1nm（氘灯）波长重复性≤0.2nm（氘灯）线性范围≤104噪 音±0.75×10-5 AU(空池，254nm,积分时间1s)漂移≤1×10-4AU/h(空池，254nm,积分时间1s)最小检测浓度≤5×10-9g/mL(萘/甲醇溶液）流通池体积10μL

液相色谱法概述液相色谱仪是由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统等部分组成的分析仪器。液相色谱仪是根据样品之中各组分在色谱柱中的固定相和流动相间的分布或吸附特性的差异，流动相将样品带入色谱柱进行分离。由检测器检测，并由数据处理系统记录。色谱图，根据各组分的保留时间和响应值（峰面积或峰高）进行定性和定量分析。测量仪器校准（1）环境条件室温为（15～30）℃，仪器校准过程之中温度变化不超过3℃（对于差示折射率检测器，室温变化不超过2℃），室内相对湿度：（20～85）%。房间内不得存放易燃、易爆、强腐蚀性物品。无机械振动和电磁干扰，通风良好。（2）仪器校准采用标准材料a.萘-甲醇溶液标准物质：定值为1.00×10-4g/mL，扩展不确定度小于4%，K=2b.萘-甲醇溶液标准物质：检定值为1.00×10-7g/mL，扩展不确定度小于4%，K=2c.胆固醇甲醇溶液标准物质：标准值为200μg/mL，扩展不确定度小于2.0%，K=2。d.甲醇之中胆固醇溶液标准品：标准值为5.0μg/mL，扩展不确定度小于5.0%，K=2。e.胆固醇纯度标准品：标准值为99.7%，扩展不确定度小于0.1%，K=2。（3）输液系统a.泵的耐压性：将仪器各部分连接好，以甲醇（或纯水）为流动相，流速为0.2 mL/min。按说明书启动仪器，保持压力稳定10分钟，用滤纸检查各管道接口处是否有湿痕。取下色谱柱，堵塞泵出口端（压力传感器上方），使压力达到允许值的90%，保持5分钟，应无泄漏。b.泵流量设定误差及流量稳定性：按要求设定流速，启动仪器，待压力稳定之后，用事先称量过的清洁容量瓶在流动相出口处收集流动相，用秒表计时。收集规定时间之内流出的流动相，在分析天平之上称重，计算所测流速，重复仪器校准3次。c.梯度误差:用梯度控制装置设置梯度洗脱程序，A溶剂为纯水，B溶剂为含0.1%丙酮的水溶液。将输液连接至检测器（未连接色谱柱），开机后用溶剂A冲洗系统，待基线稳定之后启动梯度程序，分5步绘制溶剂B从0%到*的梯度变化曲线。计算B溶剂变化引起的每一步对应的响应信号值的变化值，重复仪器校准两次，计算结果。(4) 柱箱温度设***误差和稳定性校正a.修复将数字温度计探头置于色谱柱恒温器之中与色谱柱相同的位置，并选择35℃和45（也可根据工作温度设定）进行仪器校准。b.按仪器说明书操作，接通电源，升温。温度稳定之后，记录温度计的读数，并开始计时。后，每10分钟记录一次读数，共7次，计算平均值。c. 平均值与设定值间的差值为柱温设定值的误差，7个读数中的***值与最小值之差是柱温稳定性。（5）探测器标定（以紫外可见光探测器和二极管阵列探测器为例）。（6）定性和定量重复性仪器校准将仪器各部分联接好，选用C18色谱柱，用*甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，根据仪器配置的检测器，选择相应的测量参数如紫外可见光检测器和二极管阵列检测器波长设定为254 nm，灵敏度选择适中，基线稳定之后由进样系统注入一定体积的1.0×10-4 g/mL萘-甲醇溶液标准物质，其他检测器选择相应的参数。连续测定6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，最终计算相对标准差。

气相色谱仪仪器校准方法1. 为每一种待分析物质。制备至少5个浓度水平的仪器校准标准品。向容量瓶之中加入一定体积的一种或多种储存标准品，并用适当的溶剂稀释至恒容。外标中的浓度应接近但高于方法的检出限。其他浓度应与实际样品之中预期的浓度范围相对应，或限制在检测器的工作范围之内。2. 将实际样品之中使用的进样技术引入气相色谱仪。注入每种仪器校准标准品（如2～5μl进样、带、捕集器等。），并列出峰高或峰面积对进样量的响应值。结果可用于生成每种分析物的仪器校准曲线。作为通过注射器将样品引入气相色谱仪的替代方法，响应与进样体积的比值可以设置为校正因子（CF），它允许计算每个标准浓度之下的每个分析物的量。如果校正因子的相对标准差RSD%在工作范围之内小于20%，则可假定为一条通过原点的直线，用校正因子平均值代替校正曲线。对于多重响应农药/（多氯联苯），使用用于定量的所有色谱峰的总面积。3. 每个工作日必须注入一个或几个仪器校准标准品，以检查和确定工作仪器校准曲线或校正系数。检查次数取决于检测器。例如，当ECD检测器工作在Janak范围之内时，由于GC柱和被测样品的影响，检测器的响应值容易发生变化，因此需要对校准曲线进行多次检查。FID检测器的灵敏度要低得多，不需要检查和校正。如果任何分析物的响应与预期响应相差超过15%，则必须为该分析物制备新的校准曲线。