液相色谱仪检定规程

一、前言 液相色谱仪广泛应用于环境保护、食品安全、医疗卫生、科学研究等诸多领域。为了仪器检测的准确可靠，仪器本身首先要测量准确，因此需要对液相色谱仪进行计量检定。上一版本的液相色谱仪计量检定规程距今已有十多年，随着科学的发展，液相色谱仪的检测范围和检测精度也在不断更新，对其进行更准确、更全面、更科学地计量检定，保证其本身的量值准确，是一项非常重要的任务。 新版液相色谱仪计量检定规程JJG 705-2014于今年8月14日起正式实施，实施后取代了原有的JJG 705-2002版本。新版计量检定规程的发布和实施，不仅对计量检定工作者提出新的要求，同时作为仪器的使用者也需要及时更新信息，了解与之相关的新标准、新方法。虽然新版本在“引言”部分对新旧版本计量检定规程中的变化进行了说明，但是仔细阅读和比较两种的内容，在细节方面还是有许多未提及的变化。本文通过简单的对比将两者的区别进行一一列举。二、新旧版本的区别比较版本：JJG 705-2014（简称14版）和JJG 705-2002（简称02版）1、起草单位http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410241541_519803_1669358_3.jpg 注：2005年，中国计量科学研究院与原国家标准物质研究中心合并，成立了新的中国计量科学研究院2、引言http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410241543_519804_1669358_3.jpg14版增加“引言”部分，在“引言”中阐述了新版本编写的基础和依据、与02版相比新规程主要技术内容的变化、以及历次版本发布情况。3、目录http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410241545_519805_1669358_3.jpg注：通过“引言”和“目录”，可以从整体上掌握新旧版本变化4、范围http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410241546_519807_1669358_3.jpg14版在“范围”中将“液相色谱仪样机试验和定型鉴定中有关计量性能试验可参照本规程进行”去掉，这是否也意味着新的检定规程将不适用于液相色谱仪样机试验和定型鉴定中有关计量性能试验。5、 引用文件http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410241548_519808_1669358_3.jpg14版在正文第二条列出引用文件：JJG 537-2006 荧光分光光度计；02版本在荧光检测器的波长示值误差和重复性检定项目中列出了“参照JJG 538-1988 荧光光度计检定规程”6、 概述概述部分变化不大，仅仅是对个别用词的改变，例如进样系统、分离系统、检测系统等分别代替了进样器、色谱柱（柱温箱）和检测器。7、计量性能要求7.1 输液系统输液系统中，对本两个版本，泵流速设定值、流动相收集时间和允许误差都发生了变化，新版本给出了一个宽泛的空间，可以自由选择JJG 705-2014 液相色谱仪检定规程http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410241550_519810_1669358_3.jpgJJG 705-2002 液相色谱仪检定规程http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410241552_519814_1669358_3.jpg14版本给出了温度稳定性的考察周期，较02版本更为严谨7.3、检测器[align=cente

实验室液相色谱仪检定规程.pdfhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011021030_256640_1638724_3.jpg

http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410201529_519165_1669358_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410201531_519166_1669358_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410201532_519167_1669358_3.jpg上面是液相色谱仪检定规程JJG 705-2014中对梯度误差的测定方法，但是在梯度程序中只给出了流动相的变化方法，没有给出时间要求，从示意图中发现其横坐标是时间，也没有给出时间变化区间。问题：梯度误差测试时梯度程序如何设置，主要是时间部分

液相色谱仪检定规程中梯度误差计算公式的探讨 刘 彦 刚（江西省萍乡市计量所，江西萍乡337000）摘 要 本文指出了JJG705—2002《液相色谱仪》中，梯度误差计算公式存在的问题，给出了建议的梯度误差计算公式。关键词 液相色谱仪；检定规程；梯度误差；计算公式0 引言 近期我认真地学习了JJG705—2002《液相色谱仪》，对其中梯度误差计算公式有些疑虑，现将自己的想法提出来，与同行们探讨。1 规程的相关叙述 梯度误差的检定 由梯度控制装置设置阶梯式的梯度洗脱程序，A溶剂为纯水，B溶剂为含0.1%丙酮的水溶液，B经由5个阶梯从0变到100%，如图2（图号系规程中原图号）所示。将输液泵和检测器连接（不接色谱柱），开机以后以A溶剂冲洗系统，基线平稳后开始执行梯度程序，画出梯度变化曲线。求出A，B溶剂不同比例时的输出信号值（或记录仪读数），重复测量2次，计算平均值。从B溶剂的含量及对应的输出信号值（或记录仪读数），按式（1）计算梯度误差GCi，取GCi最大者作为仪器梯度误差。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110020347_320723_1626275_3.jpg2 疑虑的提出 规程给出的第i段梯度误差GCi计算公式（这里我约定i为0至5的整数），是用第i段输出信号值 ，与各段输出信号平均值的平均值 之差，除以各段输出信号平均值的平均值 。假设某液相色谱仪，当B溶剂由5个阶梯从0变到100%时，输出信号也正好对应地从0变到100%，即各阶梯的梯度误差均为0。如果按规程给出的梯度误差公式计算的话，各阶段输出信号平均值的平均值为50%，对于输出值为40%的第2阶梯，岂不是梯度误差为－20%，这显然是错误的。应该说，这是因为规程给出的梯度误差计算公式是不对的所造成的。3 建议的梯度误差计算公式 我觉得该梯度误差计算公式应该如式(2)所示：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110020348_320724_1626275_3.jpg4 结束语 国家计量检定规程是我们的技术法规，当然我们希望尽可能的完美。但是由于各种原因，难免存在点滴这样或那样的小问题。所以不仅需要我们规程的起草老师尽可能地细心，也需要我们规程的执行者共同努力，才能使我们的技术法规——国家计量检定规程不断完善。参考文献 国家质量监督检验检疫总局.JJG705—2002 液相色谱仪.北京:中国计量出版社,2002

本次修订，对近年来新出现并广泛运用的新设备提出了计量检定要求 质检总局近日发布公告，新版的《液相色谱仪》、《离子色谱仪》、《凝胶色谱仪》计量检定规程正式发布。3个新规程将于今年8月14日起实施，实施后将分别替代原有的3个旧规程。 全国物理化学计量技术委员会的何雅娟介绍，色谱仪的应用遍及工矿生产、环境保护、食品安全、医疗卫生、科学研究等诸多领域。为了仪器检测的准确可靠，仪器本身首先要测量准确，这就离不开对其进行计量检定。液相色谱仪的计量检定规程距离上次修订已经十多年；离子色谱仪和凝胶色谱仪的检定规程自实施至今，已经20年没有修订。随着科学的发展，仪器科学不断进步，运用最新检测原理的检测器不断被开发应用，色谱仪的检测范围不断扩大，检测精度不断提高。对这些科学仪器进行更准确、更全面、更科学地计量检定，确保其本身的量值准确，已经成为一项迫在眉睫的任务。 据介绍，本次修订，对近年来新出现并广泛运用的新设备提出了计量检定要求。例如，在液相色谱仪中，蒸发光检测器是近年来广泛运用的新型检测器。尤其是在我国药典将抗生素类药物的检测方法定为蒸发光散射法后，蒸发光检测器在制药和药检行业应用尤为广泛。制定旧版《液相色谱仪》计量检定规程时，还没有成熟的条件将蒸发光散射检测器的检定内容纳入规程中，而新规程的一项重要内容就是增加了蒸发光散射检测器的检定内容；在《离子色谱仪》检定规程的修订中，特意增加了紫外可见检测器和电化学检测器的相关内容。正是有了这些检测器的不断发展，离子色谱仪的检测范围才由最初只能检测部分离子强度高的离子，到现在还能检测I-、CN-、CrO4-、有机酸和糖类等弱离子。 旧版规程实施已近20年，很多技术指标已经与现在仪器发展不相适应。调整有关技术指标，成为本次规程修订的重要内容。例如，随着科技的发展，凝胶色谱仪的示差检测器和紫外检测器的信号稳定性和灵敏度都大大提升，原检定规程中对检测器基线的技术指标已大大落后于实际水平。修订后的检定规程对检测器基线检测结果进行了相关修订，使这些技术指标更加符合新版国际标准的要求。 检定色谱仪的主要标准器是各种标准物质，不同标准物质的选择可能会影响检定工作的效率和准确性，本次修订还对检定用标准物质进行了调整。2002年版的《液相色谱仪》检定规程中，荧光检测器检定用标准物质为硫酸奎宁/高氯酸水溶液。由于各种原因，检定中经常出现信号不理想等情况，导致检定不能顺利进行。本次修订将其改为萘/甲醇溶液，避免了上述问题的出现，同时还提高了检定效率；在1993年版的《凝胶色谱仪》检定规程中，对标准物质只是规定“窄分布聚苯乙烯标准物质”，但这样的规定导致对以水作为流动项的凝胶色谱仪无法进行检定。修订后的规程对标准物质的规定进行了补充，增加了葡聚糖标准物质，使检定规程可用于检定有机流动项和水流动项的凝胶色谱仪.

国产与进口液相色谱仪测试比对报告1.比对目的 选取2010年药典二部及美国药典中典型方法及食品添加剂国标方法对某国产品牌上海伍丰EX1600高效液相色谱仪及其他品牌（以waters仪器为主）液相色谱仪的各项性能进行比较，明确国产仪器优化与改进方向。2.比对依据与原理1. JJG705-2002 液相色谱仪计量检定规程2. EX1600高效液相色谱仪及其他品牌高效液相色谱仪使用说明书3. EX1600高效液相色谱仪系统适用性测试方案及综合改善测试方案4. GB/T 19681—2005食品中苏丹红染料的检测方法--高效液相色谱法5. VensuilAA氨基酸分析方法6. 2010年药典二部及美国药典中双氢青蒿素、可可碱与茶碱、维生素A及阿托伐他汀钙等相关物质的测定方法。7. 需比对的性能指标选取原理：与《JJG705-2002 液相色谱仪计量检定规程》要求直接相关；与仪器关键部件的技术指标直接相关；与仪器测定结果重复性，即仪器稳定性直接相关。8. 样品选取原理：测定结果直接反应仪器的稳定性；属于常用或者经典方法，单标、混标体系均有所涉及；等度和梯度方法均有所涉及（反映梯度误差指标）；与检测器的基本波段（低、中、高波段）均相关的项目（反映全波段检测稳定性）。3.比对内容 高效液相色谱仪对样品的分离与测定结果好坏与仪器的稳定性及色谱柱的柱效相关，现使用同样的色谱柱进行EX1600高效液相色谱仪及其他品牌的色谱仪各项性能比对，就需要了解构成液相色谱的各个系统及整机的稳定性情况。就仪器各个系统的稳定性来讲，按照《液相色谱仪计量检定规程》测试方法，对流量准确度与重复性、噪声与漂移的测定结果能够从仪器方面直接反映输液系统及检测器的运行情况，明确指出这两个核心部件的优化与改进方向。而就整机稳定性来讲，还需要配合标准样品的测试，对其检出限、线性范围和梯度误差及定性定量重复性结果进行比较和评价，作为应用测试指标进一步反映仪器的稳定性好坏。将仪器性能指标与应用测试指标相结合，才能全面、客观地对仪器各项性能的稳定性进行评价与改进。现将主要测试内容列在下表：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311100229_476241_2369266_3.png 根据以上所列比对项目的比对内容，选择苏丹红ⅠⅡⅢⅣ、双氢青蒿素、阿托伐他汀钙、可可碱与茶碱、维生素A、氨基酸作为衡量输液系统、检测器、整机及软件性能综合指标优劣的标准测试样品，其特有的测定条件及测定结果可以综合反映色谱仪的稳定性，现将其优势测定条件与测定结果反映的综合指标列在下表并具体阐述如下：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311100231_476242_2369266_3.png 据食品国家标准、药典二部及美国药典中的典型方法，我们选取了近年来与食品、药品质量可控性、有效性及安全性密切相关的六类标准样品，依据其测试结果来衡量高效液相色谱仪各项性能稳定性。 苏丹红作为化工试剂，被不法商家非法添加入调味品中，是近年来食品安全领域的热点问题。苏丹红ⅠⅡⅢⅣ易致癌，是我国明文禁止的非食品添加剂。在相关食品国家标准中对其含量有具体的限量值，鉴于其实际测定中响应值低，我们对苏丹红的检测结果可直接体现高效液相色谱仪的噪声、漂移、检出限及线性范围（下限）等指标优劣。同时，苏丹红ⅠⅡⅢⅣ作为四元混标体系，国标方法规定苏丹红Ⅰ检测波长为478nm，苏丹红ⅡⅢⅣ检测波长为520nm，在检测过程中须转换波长，测定结果能够直接反映高波段、波长转换时的噪声与检出限；分离条件为梯度洗脱，可反映输液系统的梯度误差及双泵在梯度洗脱的稳定性。 双氢青蒿素作为单标体系，色谱测定条件为检测波长210nm，测定结果可直接反映检测器在低波段的稳定性及单泵运行情况。 阿伐他汀钙液相色谱检测波长为244nm，位于检测器优势波段的相对低波长处，流动相中含有高比例、洗脱能力较强的试剂四氢呋喃，可直接反映检测器优势波段噪声及单泵稳定性。 氨基酸混标体系共包含17种氨基酸组分，为复杂难分离体系，检测波长为254nm，测定时为梯度洗脱，测定结果可直接体现检测器优势波中段噪声及梯度洗脱时双泵运行稳定性。 可可碱与茶碱的二元混标体系，测定时检测波长为272nm，位于检测器优势波段的相对高波长处，可进行等度分离，测定结果直接反映了检测器优势波段稳定性及双泵在等度洗脱时的稳定性。 维生素A的高效液相色谱测定体系为正相色谱，流动相为正己烷：异丙醇[font=Tim