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超微量核酸蛋白检测

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  • 【原创】微量核酸蛋白定量的最新技术结晶 – NanoVue

    随着常规分子生物学研究的深入,越来越多的生物实验室日常需要测量的核酸、蛋白样品量也在不断地加大。传统的分光光度计虽然已经非常普及,但由于需要在测量后清洗比色杯,实际上消耗了不少宝贵的研究时间。同时,由于核酸样品的体积较小,即使使用昂贵的微量石英比色杯(容积数十ul左右),也往往需要对原始样品进行稀释,从而带来可能的操作偏差。对于一些稀有的样品来说,稀释即意味着测量后无法回收,同样也会对后续研究带来更高成本。因此,无需比色杯,仅需数ul即可测定样品浓度的超微量分光光度计现在受到很多实验室的关注和欢迎。NanoVue是GE Healthcare公司于2008年最新推出超微量分光光度计。GE Healthcare公司的分光光度计品牌Ultrospec和GeneQuant在市场上已经有了十多年的历史,在用户中有着很好的信誉和口碑。NanoVue在该系列仪器的基础上延续了出众的检测性能,同时大大改进了检测的光路设计,通过专利的检测技术使检测样品的体积最小仅需0.5ul, 190-1100nm的宽范围连续波长设计较市场上同类仪器宽了一倍左右,使得能够轻松检测核酸、蛋白样品和Cydye荧光染料标记物的浓度。仪器内置了RNA、DNA 和寡核苷酸浓度和纯度测定方法;寡核苷酸转换因子,分子量,理论Tm计算功能;包括一般紫外、Bradford、 Biuret、BCA、Lowry的蛋白定量法;以及波长扫描,动力学,标准曲线,多波长测定等扩展功能。除了强大的检测性能外,NanoVue还在许多操作性能上进行了精心的设计,能够给用户带来众多全新的体验,主要包括以下方面:1 唯一不需电脑就能在仪器面板上直接检测的超微量分光光度计。仪器配置了一块大面积高分辨率的背光液晶屏和操作面板。相对于点样后转去电脑控制,再回去仪器清洁的过程,NanoVue不仅节省了购买电脑的支出,同时点样,按键测量,擦拭一气呵成。可以通过整合的打印机直接打印分析数据。当然,如果需要在电脑上保存分析数据,NanoVue同样支持USB或蓝牙连接电脑,将珍贵的实验数据永久记录下来。2 通过特别设计的疏水点样表面,能够很容易回收稀有的样品,并且有效避免多个测量间的样品交叉污染,提高测量的准确性。NanoVue的点样表面具有专利设计,表面坚固而且光滑。不管是样品回收还是测量完直接擦去都非常简易,不会有任何样品粘附残留在点样面上。而且点样面耐用性也非常出众,保守估计可以至少测量20000个样品以上。3 最快的检测速度。NanoVue通过独特的光路设计,使得所有样品的检测都能够在5秒钟之内完成,把微量分光光度计的测量时间提升到了一个新的高度。而且NanoVue具备即开即用功能,避免了许多分光光度计开机需要预热的麻烦,真正做到省时省力。由此可见,NanoVue不仅性能出众,其易用性和灵活性也是目前超微量分光光度计中出类拔萃的。通过试用NanoVue的体验,使用者可以完全感受到,原来,核酸蛋白的测定可以这么简单,这么快速!目前,NanoVue已经正式在中国推出,欲了解更多的信息,请直接联系GE公司。

  • 核酸蛋白检测仪应用和原理

    核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸收的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。在生化分析、环保科学、食品研究、毒理研究、新药开发等领域中对核酸、蛋白检测、纯化和提取提供了一种独特的分析手段。

  • 尿微量蛋白(尿微量白蛋白/蛋白尿)试验

    尿微量蛋白(尿微量白蛋白/蛋白尿)试验(也称“白蛋白试验”,“尿微量白蛋白”和“蛋白尿”试验)何为尿微量白蛋白(白蛋白)试验?尿微量白蛋白试验是对尿液中的蛋白质进行测定的筛选试验。人体血液中有一种蛋白质称为白蛋白。在正常情况下,几乎无法在尿液中检测到。只有在肾脏受损,尤其是损伤早期,它可以优先于其他肾损伤标志物在尿液中被检测出,因此,尿微量白蛋白在诊断肾脏疾病、早期肾损伤等方面具有重要意义。此项试验有何目的?蛋白质是人体的基本构成“材料”,具备一些重要的功能和作用,可结合营养物质将其运输至各个组织,,并将人体中循环的体液量维持在适当水平。肾脏功能正常时,蛋白质几乎无法通过肾脏进入尿液(仅会排出血液循环产生的废料)。然而,如果人的肾功能受损或衰竭,该肾脏对蛋白质的过滤能力将有所下降,因而一些蛋白质将会透过肾脏而出现在尿液中,称为尿微量蛋白。尿微量白蛋白与蛋白尿有何不同?白蛋白是一种大量存在于血液中的典型蛋白质。因其分子个头小,当肾脏功能出现问题时,白蛋白是能够率先通过肾脏进入尿液的几种蛋白质之一。尿液中出现少量白蛋白的情况称为尿微量白蛋白。若肾脏功能受损严重,尿液中的白蛋白数量呈现出增长趋势,这种症状被改称为蛋白尿。尿微量白蛋白/蛋白尿有何症状?病症早期,并无明显症状或征兆显现。随着肾功能衰竭的加重,大量蛋白质出现在尿液中,手脚、腹部和面部可能出现肿胀。如果蛋白尿的情况加重,可能会造成永久性肾功能损伤,有些病人可能需要做透析或肾移植。不论上述症状是否存在,尿蛋白测定是确定有多少蛋白质进入尿液的唯一办法。蛋白尿还可能引发心血管疾病。血管受损除了会引发肾脏疾病外,还可能会造成窒息和心力衰竭。患蛋白尿(症)的高危人群有哪些?患有糖尿病、高血压、心血管疾病和其他类型肾脏疾病等慢性病的病人易出现蛋白尿。老年人、肥胖人群以及有肾脏疾病家族史的人群。其

  • 【求助】核酸蛋白检测仪

    我们实验室用的是上海嘉鹏科技有限公司生产的的核算蛋白检测仪,型号为HD-2000,现在急需该仪器的说明书

  • 【分享】ZHD型紫外蛋白核酸检测仪使用说明

    ZHD型紫外蛋白核酸检测仪使用说明 一、系统简介 蛋白核酸检测仪是层析分析的主要装置,配上层析柱、恒流泵、部分收集器(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的液相色谱分离系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸收的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。然而,目前国内生产的蛋白检测仪虽然种类繁多,但均采用记录仪描谱且预热时间较长。 ZHD型紫外蛋白核酸检测仪的研制成功,为科研和实验人员利用电脑系统实现核酸蛋白检测和分析提供了一种先进的手段,其特点是系统稳定、操作简便、电脑显示谱图、数据分析和打印谱图。 二、系统特点 本系列检测仪有别于其他检测仪,主要有以下特点: 1、预热时间短,一般做实验只要预热10分钟左右。 2、稳定性高,预热后每小时漂移一般小于0.001。 3、操作简洁,开机后仪器自动调整透光率(T)到100%,吸光度(A)调整到0.000。 4、透光率(T)和吸光度(A)对应准确,点两者误差小于1%。 5、双数据显示,仪器适时显示吸光度(A)和透光率(T)。 6、仪器带有电脑接口和记录仪接口(吸光度0—200mv)。 7、工作软件提供谱图采集、分析计算、保存、打印等功能,可将谱图插入文档(word)文件中。 8、一台电脑可配多台检测仪(由电脑有效端口数决定)。 三、 技术性能 1、通过测量选择菜单,在电脑屏幕上可描出吸光度(A)谱图,透过率(T%)谱图以及A-T%谱图。 2、通过图形平移、复读伸缩和压缩选择等菜单,可对谱图并进行幅度、宽度调整和谱图参数计算,预览满意后打印输出。 3、在描谱过程中,电脑会自动将图形左移(也可人工调整),电脑描谱最长时间为20小时。 4、采集数据自动保存。 四、主要参数: 1、波长:254nm,280nm(可根据用户需要调配)。 2、样品池100ul,光程3mm。 3、量程:吸光度(A):0--2.000 透光率(T):1%—100%。 4、分辩率:吸光度(A):0.001 透光率(T):0.1%。 5、电脑分析参数:峰高、峰宽、峰面积、峰面积比、保留时间、面积含量(归一化)、层析柱分辩率等。 6、电源220V±10%,50HZ。 7、主机重量:约3.5Kg。 五、系统安装与操作步骤 1、将仪器背板上的输出端通过一根串行口连接电缆与电脑主机的COM1或COM2串行口相连。 2、打开紫外蛋白核酸检测仪电源,仪器预热10分钟左右。 3、打开电脑后,将应用软件(ZHD.exe)复制到硬盘上。钦一下仪器面板上的复位按钮,待仪器显示0.000A和100%T后,双击ZHD.exe启动应用软件,系统进入采集(分析)状态。 4、在“测量选择”菜单下,用鼠标选择检测项目。 5、在“检测操作”菜单下点击“测量开始”,电脑开始采集。 6、要停止采集,点击“检测操作”下的“测量结束”菜单,然后关闭紫外蛋白酸检检测仪。 六、层析普工作站软件使用 1、 对硬件的基本要求: a、电脑在简体中文Windowsxp操作系统上运行; b、显示器分辩率为1024*768,小字体,256色配置; c、图形打印机; d、电脑系统必须正常工作,并保证串行口(COM2或COM1)有效; 2、系统连接无误后先让检测仪工作,再执行应用软件ZHD.exe; 3、 点击文件操作菜单下的“打开谱图”,出现文件操作对话框,打开随机盘上的数据文件(.ran),图形被打开,熟悉菜单操作。菜单介绍如下: a、“文件操作”菜单下有打开谱图、保存谱图、打印谱图、打印预览等; b、“检测操作”菜单下有测量开始、测量结束(测量结束后,系统在应用程序目录下生成“文件名.TXT”文件,此格式文件可在Excel软件中打开,并可转贴到Word文档中使用); c、“灵敏度选择”菜单下有A、T%、A-T%选项; d、“谱图平移”菜单后有向左慢移动 []和向右快移动[]; e、“谱图重绘”菜单:从起始点描谱;清理屏幕;释放压缩; f、“谱图全貌”菜单:在屏幕上观察全部谱图。 g、“参数选择”菜单:可对谱图进行参数分析计算。方法如下:在吸光度状态下,点击鼠标左键选取基线及时间范围(第一次点击选取第一点,第二次点击选取第二点),点击“选择参数”下拉菜单的峰高、标准差、半峰宽、峰底宽、峰面积、峰面积比、面积含量及保留时间等参数进行计算,还可间接计算出层析柱分辨率;双击鼠标左键,即可取消本次计算。 h、在吸光度(A)或透光率(T%)状态下,单击鼠标右键,屏幕显示该鼠标点的数值;双击鼠标右健,擦除屏幕显示数值。 七、注意事项: a、 更改波长方法:打开样品池挡板后,可见到滤光片的燕尾型支架和印字(245或280代表当前所使用的波长),用手将其轻轻抽出,换向后插入原位,再将样品池挡板装上,拧紧固定螺钉即可。 b、 在检测仪和电脑正常工作后才能运行应用软件; c、 应用软件执行后,十秒钟后不出现采集分析界面,说明电脑未收到数据,需检查系统连接是否正常; d、 在A—T%描谱过程中,开始1小时内,T%谱以实蓝线表示;1小时后(或点击“图形重绘” ),已描过的T%谱会以虚蓝线表示; e、 测量开始后(特别是出峰以后)不要按复位按钮。 f、 要停止采集,请点击“测量结束”后,先点击“EXIT”,再关闭检测仪。 g、 开始测量时,屏幕会弹出保存文件对话框,要求输入数据文件名及存放路径;之后,电脑自动保存数据。 I、基线选取要保证基线与所选峰必须要有两个焦点,并与其他峰无焦点。

  • 【讨论】大家来讨论下这几台仪器--超微量分光光度计

    【讨论】大家来讨论下这几台仪器--超微量分光光度计

    超微量分光光度计的新选择 检测核酸或者蛋白样品浓度是最常用的实验操作之一,传统比色皿体积大,需要稀释较多样品,造成珍贵的核酸蛋白样品浪费,而且还要反复清洗比色皿,甚烦。好在有超微量分光光度计的出现。早在2004年生物通就已经大力推荐过基因有限公司引进的NanoDrop微量分光光度计,这种技术利用微量液体张力牵引形成光通路,从而替代比色皿,极具创新性和实用性,并得到2004年年度产品仪器类的创新大奖。(点此链接:Nanodrop:只要1微升就可以检测核酸/蛋白浓度 )这种首创无需比色皿稀释,只要1ul样品溶液即可直接检测核酸/蛋白/或者细胞浓度的新型分光光度计很快在国内科研用户中得到非常热烈的认同。 并非仅仅是个概念。Nanodrop ND-1000的高吸收光检测能力相当50倍于传统分光光度计,使得多数样本不需要稀释即可进行全光谱(220nm-750nm)检测,无需消耗品,即插即用无需预热,操作极为方便。可以进行核酸定量和纯度检测,蛋白A280检测,Bradford检测,蛋白BCA检测,细胞浊度检测等多种紫外/可见光检测。Nanodrop ND-1000令NanoDrop公司声名大振而迅速确立来其在超微量分光光度计市场的领导地位。 但是对于高通量实验,不说384孔,就是96孔,这么一个一个的加样-检测-清洁下来,不累死也要头晕眼花的。因此,顺应这种需求,NanoDrop公司又推出了NanoDrop ND-8000,可一次同时检测1-8个样本,使得检测速度立刻提升8倍----用8道排枪,只要6分钟可以检测96个样品,而且体积非常紧凑----差不多A4纸大小(32x24cm)。设想看检测96孔样品的浓度----可以节省多少样品,节省多少时间和清洗比色皿的精力阿!新技术真是令人喝彩! Nanodrop延续这个设计理念到荧光信号检测,推出了ND-3300荧光分光光度计。这个体积只有一本字典大小(20x14x12cm)的仪器却拥有强大的功能----3组LED(UV365,蓝光470和白光500-650)覆盖400-750nm全光谱荧光分析,不需更换滤光片,不论是自行研发或市售荧光染剂都可使用,如 PicoGreen、RiboGreen、Hoechst、FITC、Cy3-Alexa555、Cy5-Alexa647, quantum dots等等。只要1.5-2ul样本量,不需比色皿或者毛细管,无需稀释样品,检测发射光峰值波长的荧光强度和±20nm相对荧光输出,通过标准曲线定量。荧光范围可达10的5次方(0.1nmM-1000nM),采用2048像素CCD检测,内置滤光片去除395nm以下光波干扰,由于使用三组LED冷光源代替传统高能耗光源,NanoDrop ND-3300能耗超低----只需要电脑的USB接口供电,根本无需外置电源! NanoDrop ND-3300并不能完全替代传统扫描荧光分光光度计,也不适合检测浓度特别低的样品,其检测浓度下限是1pg/ul,不如酶标仪和传统荧光分光光度计。但是NanoDrop ND-3300能检测样品物质量却实在比酶标仪和传统荧光分光光度计小的多----以PicoGreen为例,ND-3300可以检测少至2pg的DNA样品(2ul,1ug/ul),酶标仪/读板机检测下限50pgDNA样品(浓度读数下限以0.25pg/ul为例);传统分光光度计下限则是25pgDNA样品(浓度读数下限0.025pg/ul为例)。所以生物通特别提示你注意“检测浓度”和“检测物质量”是不同的概念哦。 NanoDrop在快速超微量样品吸收光/荧光检测领域带来的令人耳目一新的变革,新技术可令每个研究人员直接感受到技术进步的愉悦,好用是很好用,这3台仪器价格不菲。2007年10月赛默飞世尔(Thermofisher)宣布收购Nanodrop公司,并将其产品收归Thermofisher旗下。 现在我们又多了一个新选择----GE Healthcare公司最新推出都NanoVue超微量分光光度计!这是一款非常容易操作的微量分光光度计,可以用来精确检测核酸、蛋白和细菌培养液的浓度。只要0.5-5l的样品加在一种全新设计的样品板上检测即可直接得到结果。由于全新的疏水点样表面使得样品检测完之后还可以用Tips直接回收样品,如果不需要当然也可以简单擦拭彻底清洁样品板,减少样品间交叉污染。检测时间5秒之内即可完成读数、出峰识别和检测峰确认。检测波长范围200nm-1100nm。核酸扫描的可视化功能使得可以检测样品中杂质的存在,对于RNA样品测定非常有用。Press-to-Read功能使得按下检测键后才打开光源检测,减少光源工作时间延长光源使用寿命。整体光学结构为固定化设计,避免搬动造成光路偏移。 NanoVue的设计上内置了很多功能,方便使用者的工作----既然要简化操作,当然是越方便越好!比如,仪器内置寡核苷酸引物的分析方法,只要键入66碱基以下的寡核苷酸序列即可计算获得转换因子(ug/ml),分子量理论吸光度(AU/umol)和理论Tm值。内置多种蛋白定量检测方法,包括Bradford, BCA, Lowry, Biuret和直接紫外法,最多可支持27个标准样品制作标准曲线并可以保存。此外,仪器可以自动测定所需光径也可手动调教以满足特殊要求。可以单点校正或者多点校正、自选波长测定目标样品浓度。大面积高分辨率液晶屏上可显示所有结果,包括标准曲线波长扫描图像,处处体现方便用户的宗旨。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903121121_138121_1631196_3.jpg[/img]

  • 【求助】微量定氮仪测蛋白数据不平行

    请各位高手发表一下看法:我用凯式微量定氮仪测蛋白,同一瓶消化液,容量瓶内的消化液已经应该均匀了,我都摇晃6次的,但在同一个时间段里测两个数据,结果不平行,请问是为什么啊?这种现象已经出现了100多次了,以前没这种情况的。最近一直为这个问题烦恼啊

  • 德国Implen超微量紫外-可见分光光度计

    德国Implen超微量紫外-可见分光光度计

    NanoPhotometerTM——超微量分光光度计最佳选择摘要:由于传统的紫外-可见分光光度计对样品量的需求较大,而且对所测样品的浓度有一定范围的限制,对于分子生物学实验者来说,对少量又珍贵的核酸蛋白质样品的稀释,无疑是一种糟蹋。为了满足和方便广大生物学科研者的实验需求,德国Implen 公司研发出一款通过改变光程从而达到扩大样品浓度检测范围的目的的超微量紫外—可见分光光度计,它所需上样量只有0.3-2ul,能够检测核酸浓度和纯度,蛋白质A280等,内置BCA,Bradford等多种实用检测方法。同时可使用常规比色皿,用于细胞(细菌)OD600的测量。关键词:超微量,分光光度计,光程,核酸蛋白质浓度,OD600。前言核酸纯度和蛋白质浓度的测定,是分子生物学实验的常规操作之一,传统的紫外—可见分光光度计对样品量的要求较高,一般在500ul(特殊比色皿)以上,而500ul的蛋白质或核酸,对科研人员来说可能是半年来所提取核酸(蛋白质)的总量,因此,常规分光光度计在进行核酸(蛋白质)浓度的测定具有很大的局限性。Implen (德国,慕尼黑) 公司研发的超微量紫外—可见分光光度计通过使用特制的超微量比色皿,使得只需0.3-5ul的上样量就能准确的检测出样品浓度。通过对光程的调节,不但能够检测低浓度的样品(0.2ng/ul),也能够检测高浓度的样品(18750ng/ul)。NanophotometerTM性能特点具有专利权的样品压缩技术:NanophotometerTM 利用两个光学平面镜将样品固定于上样孔(石英检测窗口和光学平面镜稀释盖)。这种改变光程的技术不依赖样品的表面张力,同时,在很大程度上减少了样品的蒸发,保证了很好的重复性,尤其是溶于易挥发溶剂中的样品。NanophotometerTM有6个不同稀释倍数的样品稀释盖,同时也可使用常规比色皿进行检测。 http://www.wblab.cn/uploadfile/image/20110927164135373.jpg http://www.wblab.cn/uploadfile/image/20110927164141959.jpg http://www.wblab.cn/uploadfile/image/20110927164145737.jpg 由于具有多个稀释倍数的能力,所以NanophotometerTM的检测浓度范围测非常广阔:dsDNA:2-19750ng/ul; ssDNA:2-13875ng/ul; RNA:2-15000ug/ul; Oligo:2-12375ng/ul。蛋白质浓度检测范围在0.04mg/ml至660mg/ml之间。因此,几乎所有样品都不需要稀释而直接可进行浓度测定(适合全波长扫描)。NanophotometerTM 的全波长扫描只需3.5s,每个样品所需要的时间不到5秒钟,快速的检测速度为大量的样品检测节省了宝贵时间。0.3ul的上样量: NanophotometerTM 特制的样品压缩技术,使得所需上样量非常少,仅需0.3ul的样品就可准确检测所测物质的浓度。 2ng/ul到1875ng/ul的检测范围(dsDNA):NanophotometerTM 特有的样品压缩技术能够将样品自动稀释为1:5,1:10,1:50,1:100和1:250五种倍数,无稀释误差,并减少手动稀释所浪费的时间,保证了样品的稳定性。由于缩短了光程,所以增大了浓度检测的范围。NanophotometerTM 的最小光程为0.04mm,是常规比色皿光程的二百五十分之一,因此比常规紫外—可见分光光度计所测浓度范围大250倍。下表为稀释倍数所对应光程:5→d=2 mm; 10→d=1 mm; 50→d=0.2 mm; 100→d=0.1 mm; 250→d=0.04mm全谱扫描仅需3.5s:NanophotometerTM 的波长范围190—1100nm,系统启动时间小于5s,且无需预热,全波长扫描时间(200—950nm)只需3.5s,宽的波长范围满足常规物质的测定,NanophotometerTM 内置多种波长扫描方法,有单波长扫描、比色测定、波长扫描(自定义范围)、动力学测定、标准曲线测定、多波长扫描(5个波长点)和吸光度比值(两个吸光度比值)。灵活的数据输出方式:NanophotometerTM 的数据输出方式有内置打印机、SD-RAM卡、USB或者蓝牙可供选择。内置打印机可以方便的将实验结果马上打印,方便重要数据的保存和分析;USB接口连接电脑,一些需要长久保留的数据可方便的储存到个人电脑中。卓越的设计:独特的人体工程学理念,超大的背光蓝色液晶显示器,自定义用户界面,易于清洗的可移动样品室,用户友好型操作界面和防滑的控制面板,即使带有内置打印机,也易于携带,可用于户外操作。终身无需校正:密封的光路系统且无拆换部件,采用独特的光程改变技术,使得该NanophotometerTM 超微量紫外—可见分光光度计具有很高的精度,且终身无需校正,免去了昂贵的校正费用,节省宝贵的时间。总结NanophotometerTM 的样品压缩技术使得其具有卓越的检测和稳定性能,在同类产品中,由于它改变光程的技术不依赖于被测溶液的表面张力,从而扩大检测范围,而且这种改变光程的方法不涉及机械磨损或机械疲劳,故光程的改变是非常精确的,终身无需校正。总的来说,Na

  • 超微量紫外分光光度及吸光度不准确如何处理?

    各位好!有个问题想请教大家:具体情况如下:配制60mg/L 重铬酸钾溶液,用岛津UV2450(普通紫外分光光度计)测量235nm、257nm、313nm、350nm出的吸光值,然后计算吸光系数,结果符合药典要求。现在有一台超微量紫外分光光度计,加样量2ul左右,测试的吸光度比岛津偏低,计算出来的吸光系数自然就比药典要求低!现在有问题:1、超微量紫外分光光度计是否能够用重铬酸钾溶液衡量吸光准确度?2、是所有的紫外分光光度计(无论普通还是微量),只要在量程范围内,测试同一物质吸光度是否都要一致?个人理解是需要保持一致!3、超微量紫外分光光度计通常用于核酸和蛋白浓度测量,如果重铬酸钾吸光系数不准确,是否影响核酸和蛋白的测量结果?4、如何评价超微量紫外分光光度计的性能?5、测量蛋白溶液的浓度CV很好,但是测量重铬酸钾的吸光值总在变化(不同时间测试变化较大,偏差可大于5%),又是什么原因?虽然对于上面的问题,我认为只要是紫外分光光度计,原理一致,那么在量程内就应该保证结果一致!现在想听听大家的意见和看法!

  • 如何选择一台性价比超高的超微量分光光度计

    传统分光光度计:样品体积要求大,绝大部分要50μL以上需使用比色皿每次换样品时,比色杯需要清洗,工作繁重光程一般为10mm,样品需要稀释,测量浓度范围小灯源一般由氘灯(紫外)和钨灯(可见)组成,寿命短需要预热半个小时以上显示吸光度值,不显示浓度值仪器体积大,质量重超微量分光光度计所需样品体积小,仅需1~2μL不需要比色皿,用移液枪直接将样品滴加到检测平台上,测量时样品自动形成液柱,检测完成后只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可具有1mm和0.2mm两个光程(电机控制自动选择光程),样品无需稀释,测量范围可达到常规分光光度计的50倍氙气闪光灯为灯源,寿命长,性能稳定不需要预热,可随时检测显示吸光度值的同时,程序直接给出浓度值(核酸、蛋白和荧光染料)体积小:相当于一本字典大小,仅占16.5厘米实验室空间市场常见的欧美品牌市场上比较畅销的超微量分光光度计有:美国ThermoScientific的Nanodrop系列产品,英国Picodrop公司的CUBE和P200系列产品,美国QUAWELL的Q3000 5000 6000+系列以及其它一些品牌。(选自网络)

  • 请教一个关于用毛细管电泳看蛋白和核酸的结合的问题

    我现在在做蛋白和核酸的结合.我的蛋白和核酸可以结合. 蛋白是400多KDa的 核酸很小, 是30bp的dsDNA. 我现在的检测条件下只跑蛋白是可以跑出来的, 当我蛋白和核酸一起跑的时候, 也会在跟只跑蛋白在差不多的位置出峰. (我用的双波长检测,蛋白和核酸分别标记,所以都能看到.)问题就是,一起跑的时候, 出的所有峰, 都是既有蛋白又有核酸, 不管我加的比例是多少.我就很困惑. 如果我加的核酸量很小的话,不是应该有很多游离的蛋白吗,就是说应该有的蛋白峰对应的地方是没有核酸出峰才对的啊, 为什么没有这样的峰呢, 我什么地方理解错了吗?~ 请大家帮忙.谢谢~~~~!BTW, 我用的是bare fused silica capillary, 是CZE, 不是凝胶的 谢谢~~~

  • 可溶性蛋白的定量检测方法

    如题,,现在已经试验过茚三酮、考马斯亮蓝, 两种方法都有缺点,,,有没有简便点的方法进行检测,,谢谢补充,,可能我说的不是很清楚,,是我们的一种产品里面含有可溶性蛋白,,在我们产品里,,蛋白质属于杂质,,必须除去的那种,,很微量的,用于离交前进料质量的控制,,,所以方法必须简便,,毕竟生产车间使用的

  • 关于用半微量蒸馏装置做蛋白空白的问题

    请教各位,我们在用半微量蒸馏装置做蛋白空白时需要半个多小时硼酸才变绿,这样对蛋白的结果有影响吗?而且我们做的结果要比别的公司做的结果偏低,也不知道是什么原因,请各位赐教一下,在此先谢了

  • 饲料检测_饲料水分检测_饲料粗蛋白检测

    [font=&][size=16px][color=#333333][url=https://www.woyaoce.cn/service/info-39790.html]点击打开链接:https://www.woyaoce.cn/service/info-39790.html[/url][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#333333]服务背景[/color][/size][/font]饲料是一种以大豆、豆粕、玉米、鱼粉、氨基酸、杂粕、添加剂、乳清粉、油脂、肉骨粉、谷物、甜高粱等十多种不同的饲料原料制成的饲料。饲料安全在动物产品中占有举足轻重的地位。通常情况下,只有植物的饲料才是饲料,包括草、各种谷物、块茎、根等。[font=&][size=16px][color=#333333]检测内容[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]物理指标:感观(外观及气味)、粒度、水分、灰分、pH、混合均匀度营养成分:钙、粗脂肪、粗纤维、盐分、蛋白质、粗蛋白、维生素、微量元素含量、牛磺酸等微生物:细菌总数、霉菌数、沙门氏菌、乳酸菌、大肠菌群、酵母菌数等有毒有害物质:黄曲霉毒素B1、水溶性氯化物、挥发性盐基氮、氰化物、亚硝酸盐、三聚氰胺、重金属残留、农药残留[font=&][size=16px][color=#333333]检测标准[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][table][tr][td]产品名称[/td][td]检测项目[/td][td]检测标准[/td][/tr][tr][td]饲料[/td][td]钙、粗脂肪、粗纤维、盐分、蛋白质、粗蛋白、维生素、微量元素含量、牛磺酸[/td][td]实验室方法[/td][/tr][/table][font=&][size=16px][color=#333333]我们的优势[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]菲优特检测服务形式委托检测:环境检测、食品/医药/保健品检测、化工检测、水产养殖检测、微生物检测等。科研服务:高校科研服务(氨基酸类、维生素类、脂肪类、糖代谢类、有机酸类、动/植物激素类、核苷酸类、生物胺类、花青素类、黄酮酚酸类、皂苷类、氮代谢类、植物提取物类、神经递质类等。生物项目研发(毒理测试、动物饲养、动物模型构建、保健食品功能性评价服务、动物实验技术服务等)。仪器共享:HPLC检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]检测平台、动物实验服务平台。方法开发及咨询:实验室检测方法开发和应用、实验室管理咨询和培训、质量控制咨询与培训、实验仪器配置和选型等

  • 下面这个是大豆与羊毛动物纤维,蚕丝二组分混合物分析方法,溶解大豆蛋白,利用蛋白含量来确定大豆蛋白复合纤维含量,有点不可理解?

    下面这个是大豆与羊毛动物纤维,蚕丝二组分混合物分析方法,溶解大豆蛋白,利用蛋白含量来确定大豆蛋白复合纤维含量,有点不可理解?

    下面这个是大豆与羊毛动物纤维,蚕丝二组分混合物分析方法,溶解大豆蛋白,利用蛋白含量占大豆蛋白复合纤维的比例来确定大豆蛋白复合纤维含量,有点不可理解?大豆蛋白复合纤维,目前是大豆蛋白和聚乙烯醇复合,仅仅用蛋白溶解后,剩余的聚乙烯醇的含量来‘推算’出来大豆蛋白复合纤维的含量,是有点欠妥,虽然规定了大豆蛋白复合纤维的蛋白含量,但是实际的大豆蛋白复合纤维中,大豆蛋白和聚乙烯醇含量的比例不一定的,也就是说比例不是那么固定的,这样的检测方法对检测公司来说是没有任何问题的,也是标准的一个进步,但对生产企业来说,确实是致命的,没有规定大豆蛋白复合纤维的配比必须是多少,这个检测很可能每批次大豆与羊毛动物纤维,蚕丝产品的标示和实际检测结果是不合格的。而实际生产添加的各成分是标准的?比如填充,大豆与羊毛动物纤维,蚕丝混合,生产企业是烘干后,按照回潮率计算,按重量比添加混合的,这样企业就根据这样的比例进行标示,这个是最准确的,也是最合理的?大家认为呢?[img=,690,172]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201710250916_01_2154459_3.png!w690x172.jpg[/img][img=,690,138]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201710250913_01_2154459_3.png!w690x138.jpg[/img]

  • 使用AFS检测单分子水平的蛋白去折叠过程

    使用AFS检测单分子水平的蛋白去折叠过程

    [b]使用声力研究蛋白去折叠[/b]单分子力谱(SMFS)技术是研究蛋白结构与蛋白去折叠中的生物力学性质的有力工具。SMFS能够为研究和药物开发提供有价值的信息。SMFS有助于揭示人类疾病病理的分子机制,而机制往往被认为与错误折叠的蛋白的形成和积聚有关,如阿茲海默症和帕金森氏症。然而现有的SMFS仪器缺少同时并行研究多个蛋白去折叠的功能,使得研究过程耗时很长。使用声波来对数以百计的生物分子施力并操控是非常理想的高通量研究方法。此案例中,声力谱学(AFS)是最新的用于研究蛋白去折叠的单分子操控方法。[img=,500,145]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808021031435408_23_981_3.png!w690x201.jpg[/img]1 AFS检测蛋白去折叠的图解。蛋白一端栓住玻璃表面,另一端拴住聚苯乙烯微球。[img=,400,238]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808021032257008_8827_981_3.png!w421x251.jpg[/img]2 对视野范围内被蛋白分子拴在玻璃表面的4.5 μm聚苯乙烯微球同时成像。物镜放大倍数为20x。AFS设备使用压电元件共振激发平面声阱穿过微流控芯片。共振波对与周围介质密度不同的微球施力,每个生物分子被单独地由微球拉伸(图1)。仪器可以实时并行操控视野范围内数以百计的微球,获得大量的数据以研究每个生物分子的随机与异质行为(图2)。在Yan Jie(NUS)的实验室的这项试点研究中,我们首次展示了AFS如何对蛋白施力并操控。实验对踝蛋白施力引发(去)折叠同时以高精确度记录蛋白的拉伸。踝蛋白属于机械敏感性大分子,在调控蛋白粘附于胞外基质中起作用。踝蛋白是细胞代谢过程和信号通路中的关键,并能够在力的作用下改变构象,在单分子生物物理学中备受关注。[img=,500,156]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808021033524578_3892_981_3.png!w679x212.jpg[/img]3 使用AFS得到的单个踝蛋白分子的去折叠曲线,力变化速率为1 pN/s。轨迹在500 Hz下获得(彩色点),并平衡至50 Hz(黑色线)。3a 单个踝蛋白多次拉伸的力-距离曲线。3b 单个拉伸循环的力-距离曲线。3c 图3b中分子的时间-距离曲线。在这项研究中,连接了DNA的踝蛋白拴在聚苯乙烯微球和玻璃表面。启动声波后形成平面声阱,连接了踝蛋白的微球受到朝向声阱的力。实验中通过调节声波的振幅来改变力的大小。逐渐增加力的大小使得蛋白的结构域按顺序去折叠。实验循环进行拉伸与收缩的过程(力变化速率为1 pN/s)并同时以nm级的分辨率检测每个蛋白的拉伸长度(图3)。通过力-距离曲线(图3a)可以观察到单个踝蛋白的去折叠循环。将单个蛋白的去折叠轨迹叠加即可检测到单个结构域去折叠的发生,研究人员可以得到蛋白结构和蛋白去折叠自由能图谱信息。AFS仪器产生的超声并不会损害生物分子的结构完整性,因此蛋白可以连续去折叠和再折叠长达数小时,并能够得到单个蛋白多次去折叠和再折叠的曲线。相比于其他SMFS方法经过多次拉伸和收缩之后对蛋白造成光学损伤或力学损伤使得实验被迫终止,AFS能够获得更多的信息。图3b: 单个力-距离曲线中截取一小段,表示一个拉伸过程。将力从15 pN增加至19 pN,可以观察到4个去折叠过程,与蛋白的4个结构域相符合,拉伸长度为30 nm至100 nm。AFS的高分辨率检测功能可以很清晰地区分去折叠过程。AFS在x,y方向精度为2 nm,在z方向精度为4 nm(频率为25 Hz),可以大幅提高(去)折叠研究的精密程度。图3c: 图3b中分子的18秒范围内的时间-距离曲线。AFS可以检测短至毫秒级至长达10小时以上的事件,用于研究蛋白的热力学和动力学。通过检测踝蛋白的去折叠步骤并记录连续的高分辨率的去折叠轨迹,可以得出AFS如何用于研究蛋白去折叠。研究蛋白(去)折叠的详细机制能够在生物物理和生物医药领域产生突破性发现。今后的蛋白折叠以及蛋白相互作用的研究中,AFS的多分子并行操控功能将发挥重要作用,用户可以同时并行检测大量的蛋白分子。用户可以获得大量的实验数据,在不影响分辨率的同时对蛋白的机械性质数据作出分析。

  • 牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品嘛

    牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品。以下是详细解释和相关信息:  功能与应用:牛奶蛋白质分析仪是一种专门用于分析牛奶及其制品中蛋白质含量的仪器。它基于先进的生化分析技术,如比色法、光谱法或电化学法等,能够准确、快速地检测样品中的蛋白质含量。  乳蛋白制品的检测:乳蛋白制品,如奶粉、酸奶、奶酪等,其蛋白质含量是产品质量和营养价值的重要指标。牛奶蛋白质分析仪可以有效地检测这些乳蛋白制品中的蛋白质含量,为生产厂家提供准确的质量控制手段。  优点与特点:  准确性高:牛奶蛋白质分析仪具有高灵敏度和高准确性,能够确保测量结果的可靠性。  快速便捷:该仪器操作简单,使用方便,可以快速得出测量结果,提高检测效率。  适用范围广:除了牛奶及其制品外,还可以用于其他含蛋白质样品的检测,如豆类制品、肉制品等。  在乳品工业中的重要性:随着乳品市场的不断扩大和消费者对乳制品质量要求的提高,牛奶蛋白质分析仪在乳品工业中的重要性日益凸显。它可以帮助乳品企业提高产品质量、降低生产成本,同时为消费者提供更加安全、健康的乳制品。  综上所述,牛奶蛋白质分析仪是一种功能强大、应用广泛的检测仪器,完全可以用于检测乳蛋白制品中的蛋白质含量。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405271615421543_8284_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 核酸、蛋白技术参数资料、分子量标准

    核酸及蛋白质常用数据1.核苷三磷酸的物理常数化合物分子量λmax(pH7.0)1摩尔溶液(pH7.0)中λmax时的最大吸收值OD280/OD260ATP507259154000.15CTP48327190000.97GTP523253137000.66UTP484262100000.38dATP494259152000.15dCTP46727193000.98dGTP507253137000.66dTTP48226796000.712.常用核酸的长度与分子量核酸核苷酸数分子量λDNA48502(双链环状)3.0×107pBR3224363(双链)2.8×10628SrRNA48001.6×10623SrRNA37001.2×10618SrRNA19006.1×10519SrRNA[/td

  • 几种常用的蛋白鉴定方法

    传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。1 图象分析技术(Image analysis)“满天星”式的2-DE图谱分析不能依靠本能的直觉,每一个图象上斑点的上调、下调及出现、消失,都可能在生理和病理状态下产生,必须依靠计算机为基础的数据处理,进行定量分析。 在一系列高质量的2-DE凝胶产生(低背景染色,高度的重复性)的前提下,图象分析包括斑点检测、背景消减、斑点配比和数据库构建。 首先,采集图象通常所用的系统是电荷耦合CCD(charge coupled device)照相机;激光密度仪(laser densitometers)和Phospho或Fluoroimagers,对图象进行数字化。 并成为以象素(pixels)为基础的空间和网格。 其次,在图象灰度水平上过滤和变形,进行图象加工,以进行斑点检测。 利用Laplacian,Gaussian,DOG(difference of Gaussians) opreator使有意义的区域与背景分离,精确限定斑点的强度、面积、周长和方向。图象分析检测的斑点须与肉眼观测的斑点一致。 在这一原则下,多数系统以控制斑点的重心或最高峰来分析,边缘检测的软件可精确描述斑点外观,并进行边缘检测和邻近分析,以增加精确度。 通过阈值分析、边缘检测、销蚀和扩大斑点检测的基本工具还可恢复共迁移的斑点边界。 以PC机为基础的软件Phoretix-2D正挑战古老的Unix为基础的2-D分析软件包。 第三,一旦2-DE图象上的斑点被检测,许多图象需要分析比较、增加、消减或均值化。 由于在2-DE中出现100%的重复性是很困难的,由此凝胶间的蛋白质的配比对于图象分析系统是一个挑战。 IPG技术的出现已使斑点配比变得容易。 因此,较大程度的相似性可通过斑点配比向量算法在长度和平行度观测。 用来配比的著名软件系统包括Quest,Lips,Hermes,Gemini等,计算机方法如相似性、聚类分析、等级分类和主要因素分析已被采用,而神经网络、子波变换和实用分析在未来可被采用。 配比通常由一个人操作,其手工设定大约50个突出的斑点作为“路标”,进行交叉配比。 之后,扩展至整个胶。例如:精确的PI和MW(分子量)的估计通过参考图上20个或更多的已知蛋白所组成的标准曲线来计算未知蛋白的PI和MW。 在凝胶图象分析系统依据已知蛋白质的pI值产生PI网络,使得凝胶上其它蛋白的PI按此分配。 所估计的精确度大大依赖于所建网格的结构及标本的类型。 已知的未被修饰的大蛋白应该作为标志,变性的修饰的蛋白的PI估计约在±0。25个单位。 同理,已知蛋白的理论分子量可以从数据库中计算,利用产生的表观分子量的网格来估计蛋白的分子量。 未被修饰的小蛋白的错误率大约30%,而翻译后蛋白的出入更大。 故需联合其他的技术完成鉴定。2 微量测序(microsequencing)蛋白质的微量测序已成为蛋白质分析和鉴定的基石,可以提供足够的信息。 尽管氨基酸组分分析和肽质指纹谱(PMF)可鉴定由2-DE分离的蛋白,但最普通的N-末端Edman降解仍然是进行鉴定的主要技术。 目前已实现蛋白质微量测序的自动化。 首先使经凝胶分离的蛋白质直接印迹在PVDF膜或玻璃纤维膜上,染色、切割,然后直接置于测序仪中,可用于subpicomole水平的蛋白质的鉴定。 但有几点需注意:Edman降解很缓慢,序列以每40 min 1个氨基酸的速率产生;与质谱相比,Edman降解消耗大;试剂昂贵,每个氨基酸花费

  • 【分享】大肠杆菌表达重组蛋白的超声破碎及纯化

    8.0,加入后需静置20min),进行超声破碎,超声条件:400W,工作5秒,间隔5秒,重复一定次数,(根据我们的仪器找出一个比较好的工作条件)。直至菌体溶液变清澈为止,大约花费时间 。2.2.2 取少量经超声破碎后的菌液,10000rpm离心10分钟,分别对上清和沉淀进行检测,并用全菌作为阳性对照,检测菌体破碎程度及目标条带占总蛋白的含量。注意事项:(1) 超声破碎具体条件可根据实验情况而定,要掌握好功率和每次超声时间,降低蛋白被降解的可能。(2) 功率大时,每次超声时间可缩短,不能让温度升高,应保持在4度左右,超声时保持冰浴。(3)菌体破碎后总蛋白浓度的测定可用Bradford 法或者紫外吸收法。(4)可通过SDS-PAGE 电泳观察菌体破碎程度及目标条带占总蛋白的含量。

  • ICPMS检测蛋白溶液中的Fe的含量

    如何用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]ICPMS[/color][/url]检测蛋白中离子含量。还需要加HNO3消解定容吗?还是说过滤直接上机测?我的标液和内标都是2%HNO3介质的

  • 求助-检测血红蛋白

    我想检测兔子全血的血红蛋白,不知道那个公司有这方面的试剂盒?如果我用血红蛋白计测量,xk-2血红蛋白计怎么样啊?还有就是全血的血红蛋白和血浆的血红蛋白的差别到底在哪啊?请各位老师指教!!

  • 【求助】求皮革水解蛋白检测方法

    浙江金华晨园乳业生产的牛奶中被查出使用皮革水解蛋白,以增加产品中蛋白质的含量。想问问这方面的高手,目前国内外有没有皮革水解蛋白的检测方法,可否给个标准号?谢谢了

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