罗丹明液相荧光检测

大家有没有，用荧光检测器检测罗丹明B的，能告诉我线性良好的浓度范围吗？各种调浓度，用SN/T 2430做的，感觉太差了

请教各位前辈： 我用安捷伦1200LC配荧光检测器检测 罗丹明B 标样时候，检测不到峰，只有一条直线，是什么原因？？？？？？我用的是SN/T 2430-2010的检测方法，色谱条件为：C18柱，流动相为甲醇+水；梯度洗脱，程序为 时间（min） 0 4 6 9 9.1甲醇/% 40 40 70 70 40水/% 60 60 30 30 60流速：0.8ml/min；柱温：35 C ；激发波长（Ex）550nm，发射波长（Em）580nm标样为标准物质用甲醇稀释到130ng/ml。

SN/T 2430-2010 进出口食品中罗丹明B的检测方法（中英文版）本标准规定了进出口食品中罗丹明Ｂ的液相色谱检测以及液相色谱质谱／质谱检测和确证方法。本标准适用于腊鱼、腊肉、香肠、果汁、果酱、辣椒粉、辣椒油、糖果、话梅、葱头及饼干中罗丹明B的测定和确证。注：全文见资料中心。

辣椒面中的罗丹明B（Rhodamine B）的测定1.适用范围适用于辣椒面中罗丹明 B的测定。2.提取精确称取1g 辣椒面于50 mL聚丙烯离心管中，加入20 mL丙酮：正己烷（20:80）混合溶液，300 rpm振荡10 min，4000 rpm离心5 min，转移上清液于50 mL离心管中，残渣重复提取一次，合并上清液，于40℃氮吹至10 mL左右，待净化。3.净化预处理：向Welchrom® Alumina-N（500mg/6mL）中加入5 mL丙酮：正己烷（20:80）混合溶液，流出液弃去；上样：将上述提取液加入柱中，流出液弃去，此时，含罗丹明B的样品在柱上部会出现鲜亮的粉红色的荧光条带，条带边缘清晰，粉红色随含量的增加而加深和加宽，不含罗丹明B的样品提取液不会出现粉红色条带，只会出现黄红色的界面不清晰的宽带；淋洗：加入含有20%丙酮的正己烷溶液淋洗SPE柱，可见柱体上的黄红色条带下移，直到黄色条带洗出柱体为止；洗脱：5 mL甲醇：水（90:10）洗脱（不同活度的氧化铝选择的洗脱液不一样，Welchrom® Alumina-N为Beckman Ⅰ级，采用纯甲醇洗脱时，需要大量的洗脱液才能将罗丹明B 洗脱下来，故在此加入10%的水以提高洗脱强度）；重新溶解：采用90%甲醇水溶液定容至5 mL，过0.22μm滤膜，装瓶待分析；4.检测色谱条件：色谱柱： TopsilTM C18 液相色谱柱（4.6 mm x 250 mm, 5 μm）流动相： 甲醇：水=75:25流速： 1 mL/min进样量： 20 μL柱温： 40°C检测波长： 554 nm运行时间：11 min 5.结果回收率和重现性实验 将空白辣椒面上述方法处理后，分别添加一定量的标准溶液，添加浓度分别为0.2 mg/kg、0.5 mg/kg、2 mg/ kg、每批次内同一浓度做3次平行实验，共3个批次（样品典型回收率色谱图见附图）。添加水平（mg/kg）分析物0.20.52.0Recovery (%)RSD (%)Recovery (%)RSD (%)Recovery (%)RSD (%)罗丹明B90.66.3293.74.5595.24.786.附图 辣椒面中添加0.5 mg/kg 罗丹明B色谱图Welchrom® Alumina-N上样后图片本方法中使用到得耗材：1．固相萃取小柱 Welchrom® Alumina-N 500mg/6mL (P/N:WSAN010605)2．色谱柱：TopsilTM, 4.6*250 mm，5μm（P/N: Tp5B18425）3．13mm，孔径0.22μm尼龙针孔滤膜（P/N: WEL-SFNY213022）

就湖南罗丹明B事件与大家分享下这个快速的检测方法。

腊肠，俗称香肠，是一个非常古老的食物生产和肉食保存技术，是指以肉类为原料，经切，绞成丁，配以辅料，灌入动物肠衣经发酵、成熟干制成肉制品，是我国肉类制品中品种对多的一大类产品，主要产地有广东、广西、四川、湖南及上海等。腊肠为广东、香港和澳门及南方地区常见食品，通常制作程序已经简化成装置、压缩、脱水及晒干。由于其具有持久鲜艳的颜色特性，于是有商贩在加工腊肠时使用罗丹明B改善腊肠的品相。罗丹明B，俗称花粉红，是一种碱性荧光染料，作为荧光试剂已被广泛用于食品、环保、矿业和钢铁等领域，是荧光分析方法上的常用分析试剂，对于它的光谱机理已有相关研究。而有关研究表明，罗丹明B会引致老鼠皮下组织生肉瘤，半数致死量（大鼠，经口）500mg/kg，美国曾对该物质进行研究，显示其具有致癌性，1993年起欧美等国家和地区就已明令禁止用于食品加工中。目前，对于腊肠中罗丹明B测定的文献报道有液相色谱-荧光检测法和液相谱串联质谱/质谱仪法，下面简要介绍一下如何检测腊肠中的罗丹明B。称取样品2.0g（精确至0.1mg）于50mL离心管中，准确加入25mL乙酸乙酯-环己烷（1：1，V/V），于漩涡混匀器上混合提取2min，再超声提取15min后于4000r/min离心5min，上清液过0.22μm微孔滤膜后作待净化液。取10mL待净化液于GPC样品管中，用GPC进行净化，收集11~21min洗脱液，于40℃条件下旋转蒸发至干，残渣用0.1mL甲醇溶解后，过0.22μm微孔滤膜，用HPLC-MS/MS测定，外标峰面积法定量。从实验操作中得知，每个实验需要进行漩涡混匀提取的时间是2min，如果每个实验都按这个时间进行操作的话，一天实验下来，手臂一定是酸痛的，尚且不计算实验室还需要进行的其他实验。意大利VELP推出了红外感应漩涡混匀器，一旦检测到试管，VELP漩涡混匀器自动开始震动，VELP漩涡混匀器不需要施加任何外力，而且相比于传统的接触模式，红外传感漩涡混匀器能确保在震动减少过程的急剧变化。此款漩涡混匀器能调节并显示转速，可以设置并显示操作时间，VELP漩涡混匀器最大转速可以达到3000rpm，VELP漩涡混匀器可以满足大部分实验室的需求。在实验中解放您的双手，让实验更快捷、准确，VELP漩涡混匀器是您明智的选择！

详细资料见：http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110410/3239975/辣椒面中的罗丹明B（Rhodamine B）的测定1. 适用范围适用于辣椒面中罗丹明 B的测定。2. 提取精确称取1g 辣椒面于50 mL聚丙烯离心管中，加入20 mL丙酮：正己烷（20:80）混合溶液，300 rpm振荡10 min，4000 rpm离心5 min，转移上清液于50 mL离心管中，残渣重复提取一次，合并上清液，于40℃氮吹至10 mL左右，待净化。3. 净化预处理：向Welchrom® Alumina-N（500mg/6mL）中加入5 mL丙酮：正己烷（20:80）混合溶液，流出液弃去；上样：将上述提取液加入柱中，流出液弃去，此时，含罗丹明B的样品在柱上部会出现鲜亮的粉红色的荧光条带，条带边缘清晰，粉红色随含量的增加而加深和加宽，不含罗丹明B的样品提取液不会出现粉红色条带，只会出现黄红色的界面不清晰的宽带；淋洗：加入含有20%丙酮的正己烷溶液淋洗SPE柱，可见柱体上的黄红色条带下移，直到黄色条带洗出柱体为止；洗脱：5 mL甲醇：水（90:10）洗脱（不同活度的氧化铝选择的洗脱液不一样，Welchrom® Alumina-N为Beckman Ⅰ级，采用纯甲醇洗脱时，需要大量的洗脱液才能将罗丹明B 洗脱下来，故在此加入10%的水以提高洗脱强度）；重新溶解：采用90%甲醇水溶液定容至5 mL，过0.22μm滤膜，装瓶待分析；4. 检测色谱条件：色谱柱： TopsilTM C18 液相色谱柱（4.6 mm x 250 mm, 5 μm）流动相： 甲醇：水=75:25流速： 1 mL/min进样量： 20 μL柱温： 40°C检测波长： 554 nm运行时间：11 min 5. 结果回收率和重现性实验 将空白辣椒面上述方法处理后，分别添加一定量的标准溶液，添加浓度分别为0.2 mg/kg、0.5 mg/kg、2 mg/ kg、每批次内同一浓度做3次平行实验，共3个批次（样品典型回收率色谱图见附图）。添加水平（mg/kg）分析物0.20.52.0Recovery (%)

求助罗丹明B的含量检测方法，它的CAS号是：81-88-9；另外针对于罗丹明B的一项检测指标，请大虾能给出指导:吸光度Absorbance(E1%1cm) ≥2,000(H2O, 552.0 - 556.0 nm) ,这里面的E1%是什么意思呢？是要配溶液的浓度吗？那也好像太高了点？另外≥2,000，这个是如何计算得来的呢？多谢大家的支持。

液相色谱做罗丹明B,红2G,苏丹红1-4,碱性橙2,碱性橙21,碱性橙22,酸性橙2用什么检测器啊？看方法里面没有说明，但是每个组分的最大吸收波长又不一样！

先科普一下哈～罗丹明B(Rhodamine B)又称玫瑰红B,或碱性玫瑰精，俗称花粉红，是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。经老鼠试验发现，罗丹明B会引致皮下组织生肉瘤，被怀疑是致癌物质。罗丹明B在溶液中有强烈的荧光, 用作实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。曾经用作食品添加剂，但后来实验证明罗丹明B会致癌，现在已不允许用作食品染色 。检测原理：1.罗丹明B具有脂溶性，被用作调味品（主要是辣椒粉和辣椒油）染色剂。使用了被污染的调味品制作食品时会造成残留。调味品使用罗丹明B染色时含量较高，甚至直接掺入，可进行现场检测。食品中因其含量较低，需送实验室检测。2.现场检测中使用非极性有机溶剂（例正己烷、正己烷+丙酮等）将其溶解并提取出，提取液流过中性氧化铝固相萃取小柱吸附罗丹明B，用非极性有机溶剂（例正己烷）淋洗小柱，洗脱样品油脂和食品内源性干扰物，用肉眼可观测到在小柱上出现鲜亮的粉红色条带，判定为可疑样品，该样品需送实验室作进一步确证检验。3.实验室检测法仍然采用非极性有机溶剂（例正己烷、正己烷+丙酮等）将罗丹明B 从食品中溶解并提取出，提取液流过中性氧化铝固相萃取小柱吸附罗丹明B，用非极性有机溶剂（例正己烷）洗脱样品油脂和食品内源性干扰物，再用极性有机溶剂（例甲醇）将罗丹明B从小柱上洗脱并收集，用反相高效液相色谱仪-紫外/可见光检测器进行定性定量检测。迪马解决方案：实验应用 《饮料中罗丹明B的检测》 - 方法：SPE - 应用编号：103000 2013-01-31 《饮料中罗丹明B的检测》 - 方法：HPLC - 应用编号：102999 2013-01-31 《八角茴香中罗丹明B的测定》 - 方法：SPE - 应用编号：102998 2013-01-31 《八角茴香中罗丹明B的测定》 - 方法：HPLC - 应用编号：102997 2013-01-31 《辣椒油中罗丹明B的测定》 - 方法：HPLC - 应用编号：102996 2013-01-31 《辣椒油中罗丹明B的测定》 - 方法：SPE - 应用编号：102995 2013-01-31 《辣椒粉中罗丹明B的测定》 - 方法：HPLC - 应用编号：102994 2013-01-31 《辣椒粉中罗丹明B的测定》 - 方法：SPE - 应用编号：102993 2013-01-31

请教各位大佬，使用BJS 201905中液相法检测罗丹明B的含量遇到了以下几个问题：（1）采用花椒油和花椒两种基质加标后标准物质出峰时间存在较大差异： 标准溶液保留时间为14.5min左右，花椒油15min左右，花椒则在12min左右，请问是什么原因造成的呢？（2）同一批标准溶液在4月24日和4月28日两天实验中的保留时间不同，分别为14.5min和19min，请问同样的条件同样的溶液，为什么出峰会有这么大的差异？

各位大神，请问罗丹明B有没有国标检测方法，有的话，是哪个标准？

大家好！我想测荧光量子产率，以罗丹明B为标准物，但我在文献中看到激发波长为495nm时，罗丹明B的量子产率为0.89；而还有文献报道为0.97，这是怎么回事？是不是在不同的激发波长条件下？有谁知道？谢谢！

辣椒粉、辣椒面、干辣椒中如何检测工业染料罗丹明B？

最近，各省市有关部门陆续查出多起食品中添加罗丹明B事件，其中，重庆一次查获上万斤含罗丹明B的毒花椒，深圳也在火锅底料中检出罗丹明B。罗丹明B又称玫瑰红B、蕊香红B、玫瑰精B和若丹明B，是一种人工合成碱性荧光染料，常温条件下为绿色结晶或红紫色粉末，几乎无异味，易溶于水、乙醇,微溶于丙酮、氯仿、盐酸和氢氧化钠溶液；水溶液为蓝红色，稀释后有强烈荧光，以其为花椒染色，无外乎在于取得好的卖相。全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治领导小组自2008年以来，陆续发布了五批《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》，其中玫瑰红B禁用于调味品赫然在目。罗丹明B不能用于食品添加，其主要原因不仅仅是它属于人工合成染料，重要的是在大、小鼠的长期喂养实验中，发现多个器官系统肿瘤发病率增加。有关专家指出，消化道肿瘤是人常见的癌症，不仅发病率在快速提升，而且发病年龄趋于降低，仅以大肠癌为例，我国每5分钟就有1名患者死亡。论色彩的绚丽，罗丹明B未必超过苏丹红，造假者为何另辟蹊径选中罗丹明B？可能的原因之一是政府有关部门加大了打击调味品中苏丹红的滥用现象，但罗丹明B（玫瑰红B）在调味品中的检测方法还是空白。针对罗丹明B，大家有何检测方法？或者快速辨别是否添加的简易手段？食品安全是大家的安全，请大家都来畅所欲言吧！

用罗丹明B测铬无法得到工作曲线(条件没问题)，同一溶液扫8次荧光强度差近200，用娃哈哈水262激发，数据如下：581.6（3.468）581.0(3.697) 580.4(3.726) 578.6(3.602) 581.0(3.509)580.6(3.742) 578.2(3.857) 581.0(3.962)括号内为强度 请问各位大侠，荧光仪是否有问题

最近做罗丹明B遇到些问题，求助，谢谢。最近参照国标 SN/T 2430-2010 进出口食品中罗丹明B的检测方法 测定辣椒粉中的罗丹明B方法中用 乙酸乙酯环己烷1:1提取 然后过GPC净化。　ＧＰＣ 参考条件：ａ）　凝胶色谱净化系统Ａｃｃｕｐｒｅｐ （Ｊ２）；ｂ）　凝胶柱规格４００ｍｍ×２５ｍｍ（内径）；ｃ）　色谱柱填料ＢｉｏＢｅａｄｓＳＸ３ （３８μｍ～７５μｍ）；ｄ）　流动相：乙酸乙酯环己烷（１∶１，体积比）；ｅ）　流速：５ｍＬ／ｍｉｎ；ｆ）　收集时间：９ｍｉｎ～１９ｍｉｎ我用的GPC和柱子与他的型号完全一样。 首先用溶剂标准过GPC，发现把罗丹明B加入进样小管中吹干后 粘在壁上，用乙酸乙酯环己烷定容后只能溶解少量 ........... 过GPC 收集9-19分钟 貌似19分钟左右 正是辣椒中油脂流出的时间.... 进完一针标准品后，发现19分钟之后 乃至更长的时间段中的流出液中 还能检测到罗丹明B.... 甚至之后再进一针溶剂空白收集 也能检测到罗丹明B残留....请教~~这东西 在乙酸乙酯环己烷中溶解度到底什么情况？ GPC净化到底靠谱吗？是在柱子中有残留还是在GPC系统中会有残留呢？我看到大家常用的方法是用 氧化铝净化 有没有用GPC净化成功的 麻烦介绍一下经验 谢谢~~~ 。

最近做罗丹明B遇到些问题，求助，谢谢最近参照国标 SN/T 2430-2010 进出口食品中罗丹明B的检测方法 测定辣椒粉中的罗丹明B方法中用 乙酸乙酯环己烷1:1提取 然后过GPC净化。　ＧＰＣ 参考条件：ａ）　凝胶色谱净化系统Ａｃｃｕｐｒｅｐ （Ｊ２）；ｂ）　凝胶柱规格４００ｍｍ×２５ｍｍ（内径）；ｃ）　色谱柱填料ＢｉｏＢｅａｄｓＳＸ３ （３８μｍ～７５μｍ）；ｄ）　流动相：乙酸乙酯环己烷（１∶１，体积比）；ｅ）　流速：５ｍＬ／ｍｉｎ；ｆ）　收集时间：９ｍｉｎ～１９ｍｉｎ我用的GPC和柱子与他的型号完全一样。 首先用溶剂标准过GPC，发现把罗丹明B加入进样小管中吹干后 粘在壁上，用乙酸乙酯环己烷定容后只能溶解少量 ........... 过GPC 收集9-19分钟 貌似19分钟左右 正是辣椒中油脂流出的时间.... 进完一针标准品后，发现19分钟之后 乃至更长的时间段中的流出液中 还能检测到罗丹明B.... 甚至之后再进一针溶剂空白收集 也能检测到罗丹明B残留....请教~~这东西 在乙酸乙酯环己烷中溶解度到底什么情况？ GPC净化到底靠谱吗？是在柱子中有残留还是在GPC系统中会有残留呢？我看到大家常用的方法是用 氧化铝净化 有没有用GPC净化成功的 麻烦介绍一下经验 谢谢~~~ 。

[table=100%][tr][td]在做金属/硅纳米线做基底，测拉曼增强的作用，请问大家用罗丹明做实验时，对罗丹明纯度有要求么？95％可以么？10-8M的罗丹明怎么配置？第一次，希望大家给予指教，谢谢！[/td][/tr][/table]

最近做罗丹明B遇到些问题，求助，谢谢最近参照国标 SN/T 2430-2010 进出口食品中罗丹明B的检测方法 测定辣椒粉中的罗丹明B方法中用 乙酸乙酯环己烷1:1提取 然后过GPC净化。　ＧＰＣ 参考条件：ａ）　凝胶色谱净化系统Ａｃｃｕｐｒｅｐ （Ｊ２）；ｂ）　凝胶柱规格４００ｍｍ×２５ｍｍ（内径）；ｃ）　色谱柱填料ＢｉｏＢｅａｄｓＳＸ３ （３８μｍ～７５μｍ）；ｄ）　流动相：乙酸乙酯环己烷（１∶１，体积比）；ｅ）　流速：５ｍＬ／ｍｉｎ；ｆ）　收集时间：９ｍｉｎ～１９ｍｉｎ我用的GPC和柱子与他的型号完全一样。 首先用溶剂标准过GPC，发现把罗丹明B加入进样小管中吹干后 粘在壁上，用乙酸乙酯环己烷定容后只能溶解少量 ........... 过GPC 收集9-19分钟 貌似19分钟左右 正是辣椒中油脂流出的时间.... 进完一针标准品后，发现19分钟之后 乃至更长的时间段中的流出液中 还能检测到罗丹明B.... 甚至之后再进一针溶剂空白收集 也能检测到罗丹明B残留....请教~~这东西 在乙酸乙酯环己烷中溶解度到底什么情况？ GPC净化到底靠谱吗？是在柱子中有残留还是在GPC系统中会有残留呢？我看到大家常用的方法是用 氧化铝净化 有没有用GPC净化成功的 麻烦介绍一下经验 谢谢~~~

[color=#444444]我在网上查的罗丹明B的最大吸收峰在554nm，但是测量的罗丹明B的紫外吸收光谱在500nm~600nm处是锯齿状的封，就像一条锯的齿一样，而且波动幅度很小，请问这是为什么?[/color][color=#444444]还有就是我想问一下，测量镉（二价）、碘化钾、和罗丹明B的三元缔合物的吸收光谱可以用高效液相色谱测吗？他们形成的缔合物为(RhB)2(CdKI4)[/color][color=#444444]为什么我测得三元缔合物的紫外最大吸收峰也在554nm处？[/color][color=#444444]十分感谢！！！！[/color]

最近要做一些关于拉曼增强的测试，看了很多相关的文章，其中所测的样品大多选择了罗丹明6g这个药品，在网上查到关于罗丹明6g的毒性，罗丹明6g对人体的毒性比较大，为什么大家做实验的时候还是选择这样一个有毒的物品，该样品有什么样的优势使得大家对其比较偏爱呢？购买罗丹明6g的过程中，发现很多厂家都没有罗丹明6g的溶液，都是罗丹明6g的粉末。我购买的是罗丹明6g（bs）这样一个产品，请问大家知道怎么把这个试剂配制成溶液吗？（我们平时所用的罗丹明6g是罗丹明6g（bs）吗？）或者谁知道哪里有罗丹明6g的溶液卖，希望告知一下，谢谢！

我做实验时将样品浸泡在罗丹明溶液中了，怎样将样品表面的罗丹明去除呢。谢谢。

我想知道荧光素钠和罗丹明6G的pKa,这样就可以知道它们在什么pH条件下呈中性。有哪位大虾知道，帮忙告诉一下！谢谢！

各位大虾： 我一直对罗丹明染料系列不太明白，因为它们很混乱，尤其是命名和量子产率。哪位大侠知道的话烦请不吝赐教！或者是给我权威而详细的解释！最好是中文的，如果实在没有英文的也行。 主要包括以下信息：中文名称：英文名称：中英文别名：量子产率：比较感兴趣的包括：罗丹明B、罗丹明101、罗丹明123、罗丹明640、罗丹明6G等。非常感谢！