凝胶色谱柱说明书

老师您好，请问新买的液相色谱柱，需要经过怎样的冲洗后，使用起来效果最佳？比如C18的柱子、凝胶色谱柱。我看了柱子的说明书，只是说使用后的保存，并没说使用前的。谢谢。

美国J2 Scientific Inc GPC全自动凝胶色谱净化系统 型号AccuprepTM MPS那位同志有中文使用税明书呢，能给我发一份吗？wuji_du@163.com 。谢谢

有谁使用过WATER公司的凝胶渗透色谱啊？求助该仪器的中文说明书及仪器的维护事项。若有使用经验告知就太谢谢啦。

使用凝胶色谱仪的一些注意事项：　　溶剂准备：使用HPLC纯溶剂，如有必要，进行过滤。保证溶剂的相溶性，避免使用对不锈钢有腐蚀性的溶剂。　　溶剂脱气：超声脱气。　　样品准备：过滤样品，确保样品中不含固体颗粒，用流动相溶解样品。　　色谱柱的保护：　　(1) 防止气体进入色谱柱。凝胶柱是不允许气泡进入的，否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。因此，为了防止气泡进入色谱柱，一定要使用经过脱气的流动相，并且要严格按照下列步骤来安装色谱柱。a.拆卸下色谱柱入口处的密封螺丝，观察是否有溶剂渗出；b.如有溶剂渗出，即可将色谱柱接到管路上，以避免气泡的进入；c.如无溶剂渗出时，表明色谱柱的此端已经进去空气了，此时，可将色谱柱的出口端接到进样阀上，以流动相来反方向冲洗色谱柱，以便将柱内的空气排除。最好以0.2ml/min的小流量来冲色谱柱，如果溶剂的流速太快或者是压力突然的上升都将会导致柱性能的降低；d.如果流出的溶剂里不含有气泡，说明柱内的气体已经被排出了，再将色谱柱以正确的方向接好，这样气泡就进不到色谱柱里面了。　　(2) 色谱柱的清洗。为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中，在每次的样品分析工作完成之后，都应及时地清洗色谱柱。首先要用对被测样品洗脱能力强的溶剂来洗脱色谱柱，以分析工作中常用的反相色谱分析法为例，因其先流出的物质是极性大的物质，此时应用100%的甲醇或使用异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗脱下来，洗脱液的用量一般为柱体积的20倍即可。如果流动相是缓冲溶液，则应先用蒸馏水来冲洗色谱柱，以冲掉柱内的盐，然后再用合适的溶剂来冲洗。　　凝胶滤过色谱法(Gel Filtration Chromatography)中所使用的凝胶柱常用缓冲溶液做流动相，用完之后当然要用蒸馏水来冲洗。如果是连续操作，可以将缓冲溶液置于柱内过夜，但最好是维持小流速(＜0.5ml/min)以防止缓冲盐的析出，如果流动相中含有卤化物，即使是停一夜，也必须要用蒸馏水将色谱柱冲洗干净，以防止它们对柱体的腐蚀。　　(3) 色谱柱的存放。如果色谱柱暂时不用，存放时要注意以下几点：a.几天之内的短期放置，凝胶柱则用蒸馏水来冲洗，再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。b.如果色谱柱长期不用，仅用上述方法来处理就不行了，这时应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱，凝胶柱则不能用水了，因柱内如果有微生物的生长则会使柱效降低，此时应用0.05%的NaNs水溶液(防腐剂)来冲洗色谱柱，再将色谱柱封严。色谱柱长期放置时，一定要将色谱柱的两端封严，以防止由于溶剂挥发而造成的柱填料干缩现象，因这可导致柱效的严重降低。c.色谱柱应贮存在室温下，如果放置于0℃以下的环境里，柱内就会结冰，这也将导致柱效的降低。　　(4)不要高温使用。　　(5)不要高压冲洗柱子　　对仪器的维护和保养进行记录。

[color=#444444]Shodex 凝胶色谱柱提供的线性测试范围是指高分子聚合物的数均分子量还是重均分子量？[/color][color=#444444][color=#444444]一般凝胶色谱柱说明里会提到这种型号色谱柱的建议的线性使用范围和排阻极限，但是并未标注是重均分子量还是数均分子量，具体指代的是哪种分子量呢？[/color][/color]

[font=宋体]链接：[/font]https://bbs.instrument.com.cn/topic/7685771问题描述：[font=宋体]凝胶色谱使用注意事项有哪些？[/font]解答：[font=宋体]使用凝胶色谱仪的一些注意事项：[/font]a)[font=宋体]溶剂准备：使用[/font]HPLC[font=宋体]纯溶剂，如有必要，进行过滤。保证溶剂的相溶性，避免使用对不锈钢有腐蚀性的溶剂。[/font]b)[font=宋体]溶剂脱气：超声脱气。[/font]c)[font=宋体]样品准备：过滤样品，确保样品中不含固体颗粒，用流动相溶解样品。[/font]d)[font=宋体]色谱柱的保护：[/font]（1）[font=宋体]防止气体进入色谱柱。凝胶柱是不允许气泡进入的，否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）色谱柱的清洗。为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中，在每次的样品分析工作完成之后，都应及时地清洗色谱柱。[/font][font=宋体]（[/font]3[font=宋体]）色谱柱的存放。如果色谱柱暂时不用，存放时要注意以下几点：短期放置，凝胶柱则用蒸馏水来冲洗，再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可；长期不用时，应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱。[/font][font=宋体]（[/font]4[font=宋体]）不要高温使用。[/font][font=宋体]（[/font]5[font=宋体]）不要高压冲洗柱子。[/font]以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》

[align=center]脆弱的凝胶色谱柱[/align]单位上最近要做个聚合物，需要用到凝胶色谱柱。该柱子相比常规的C18柱子更为脆弱，这里就按我查询到的信息结合安捷伦培训老师给的建议，说说如何维护用好该柱子。1. 拿到柱子，先找到它的说明书，这款柱子是Shodex OHpak SB-806M HQ，随柱子并没有提供纸质说明书，需要到网上下载。还好，它有中文网站，说明书也是中文的。一款新柱子，我们需要知道它耐受的体系，耐受压力，耐受pH，流速，压力，温度，保存溶剂等等。这些在说明书里都有体现，如图[img=,554,59]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011649242793_8600_5455297_3.png!w554x59.jpg[/img]图1 保存溶剂为0.02%叠氮化钠水溶液[img=,542,134]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011650002850_6383_5455297_3.png!w542x134.jpg[/img]图2 流速范围，耐受压力，pH和适用温度范围[img=,539,203]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011651080502_9836_5455297_3.png!w539x203.jpg[/img]图3 适用的流动相2. 确认了基本信息，就可以上机了。过滤超声脱气流动相后，排空。然后取下原有柱子，关闭排空阀，用流动相冲洗管线。这样保证进入柱子的成分都是流动相。对于自动进样器，还需要切换到旁路以冲洗定量环和计量泵。如图[img=,355,445]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011651537201_7108_5455297_3.png!w355x445.jpg[/img]图43. 仪器系统冲洗完后，就接上保护柱和柱子，然后开始冲柱子。因为出厂溶剂是水溶液，而我要用的也是水溶液，都是自己人那就直接用流动相冲洗。用一个较小的流速冲洗柱子，按要求需要有3-5倍柱体积的流动相来置换。计算得所需体积为45-75mL。按建议用0.3mL的流速，那就至少需要150min，时间有点长啊。这时候要升柱温，低流速下升柱温。[img=,554,83]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011653261493_7071_5455297_3.png!w554x83.jpg[/img]图6[align=left]4. 溶剂切换完成，就可以直接上流速了。因为凝胶色谱柱比较脆弱，不能有大的压力变化，所以需要在泵里设置一个较小的压力梯度，如图。这样在提高流速时，不会哐当一声压力就上去了，而是按设定的速度慢慢上去。图中设置最大流量梯度为1mL/min^2，意思是设置流量增量为1mL时，需要1min才能达到1mL的增量。[/align][img=,554,166]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011653592883_8783_5455297_3.png!w554x166.jpg[/img]图7 流量梯度介绍[img=,554,211]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011654266150_6418_5455297_3.png!w554x211.jpg[/img]图8 设置最大流量梯度5. 柱子平衡好后，就可以开始进样了，按文献做好设定，就开始干活。然后很快就顺利出峰了，然后就开始设置序列。6. 不对，还需要一个关机方法，不然在序列跑完后，直接关流速，是不好的。那就需要一个降流速的方法，如图，流速从0.8mL用5min降低到0.3mL，再冲洗20min，用于将柱温。最后再用1min降低到0。这样压力就降得慢，没问题。把这个方法添加到序列表最后，再设置standby，很稳妥。如图[img=,554,235]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011654526501_132_5455297_3.png!w554x235.jpg[/img]图97. 用完后，需要保存柱子。说明书是用出厂溶剂，但是出厂溶剂是剧毒的叠氮化钠的水溶液。这东西不好买，不好管控。柱子官网上想提交问题，但一直提交不成功。随即咨询了安捷伦的培训老师和应用工程师，他们建议是可以纯水保存，然后放冰箱，再每个月拿出来冲洗一次。后来在官网找到了厂家的邮箱，发了邮件咨询，也是可以纯水保存，然后每月冲洗一次。那就这样吧，纯水保存使用也方便，不用过渡。如有不合适的地方，请各位指正，谢谢。

使用凝胶色谱仪的一些注意事项：溶剂准备：使用HPLC纯溶剂，如有必要，进行过滤。保证溶剂的相溶性，避免使用对不锈钢有腐蚀性的溶剂。溶剂脱气：超声脱气。样品准备：过滤样品，确保样品中不含固体颗粒，用流动相溶解样品。色谱柱的保护：(1)防止气体进入色谱柱。凝胶柱是不允许气泡进入的，否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。因此，为了防止气泡进入色谱柱，一定要使用经过脱气的流动相，并且要严格按照下列步骤来安装色谱柱：a.拆卸下色谱柱入口处的密封螺丝，观察是否有溶剂渗出；b.如有溶剂渗出，即可将色谱柱接到管路上，以避免气泡的进入；c.如无溶剂渗出时，表明色谱柱的此端已经进去空气了，此时，可将色谱柱的出口端接到进样阀上，以流动相来反方向冲洗色谱柱，以便将柱内的空气排除。最好以0.2ml/min的小流量来冲色谱柱，如果溶剂的流速太快或者是压力突然的上升都将会导致柱性能的降低；d.如果流出的溶剂里不含有气泡，说明柱内的气体已经被排出了，再将色谱柱以正确的方向接好，这样气泡就进不到色谱柱里面了。(2)色谱柱的清洗。为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中，在每次的样品分析工作完成之后，都应及时地清洗色谱柱。首先要用对被测样品洗脱能力强的溶剂来洗脱色谱柱，以分析工作中常用的反相色谱分析法为例，因其先流出的物质是极性大的物质，此时应用100%的甲醇或使用异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗脱下来，洗脱液的用量一般为柱体积的20倍即可。如果流动相是缓冲溶液，则应先用蒸馏水来冲洗色谱柱，以冲掉柱内的盐，然后再用合适的溶剂来冲洗。凝胶滤过色谱法(Gel Filtration Chromatography)中所使用的凝胶柱常用缓冲溶液做流动相，用完之后当然要用蒸馏水来冲洗。如果是连续操作，可以将缓冲溶液置于柱内过夜，但最好是维持小流速(＜0.5ml/min)以防止缓冲盐的析出，如果流动相中含有卤化物，即使是停一夜，也必须要用蒸馏水将色谱柱冲洗干净，以防止它们对柱体的腐蚀。(3)色谱柱的存放。如果色谱柱暂时不用，存放时要注意以下几点：a.几天之内的短期放置，凝胶柱则用蒸馏水来冲洗，再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。b.如果色谱柱长期不用，仅用上述方法来处理就不行了，这时应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱，凝胶柱则不能用水了，因柱内如果有微生物的生长则会使柱效降低，此时应用0.05%的NaNs水溶液(防腐剂)来冲洗色谱柱，再将色谱柱封严。色谱柱长期放置时，一定要将色谱柱的两端封严，以防止由于溶剂挥发而造成的柱填料干缩现象，因这可导致柱效的严重降低。c.色谱柱应贮存在室温下，如果放置于0℃以下的环境里，柱内就会结冰，这也将导致柱效的降低。(4)不要高温使用。(5)不要高压冲洗柱子对仪器的维护和保养进行记录。来源：互联网

耗材配件栏目，想在液相色谱柱的分类里，添加凝胶色谱柱，现做以下调查，请大家多多支持，多多关注。耗材配件：http://www.instrument.com.cn/Consumables/ 液相色谱柱：http://www.instrument.com.cn/Consumables/P1903.htm1、是否希望增加凝胶色谱柱的分类，是否方便查找？2 、对液相色谱柱的分类，有何建议？3、市面的凝胶色谱柱，现在都有哪些厂家？4、各家都有什么主推的特点？5、。。。。。。

1、 溶胀商品凝胶是干燥的颗粒，通常以40~63um的使用最多。凝胶使用前需要在洗脱液中充分溶涨一至数天，如在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温到近沸，则溶涨时间可以缩短到1~2小时。凝胶的溶涨一定要完全，否则会导致色谱柱的不均匀。热溶涨法还可以杀死凝胶中产生的细菌、脱掉凝胶中的气泡。2、 装柱由于凝胶的分离是靠筛分作用，所以凝胶的填充要求很高，必须要使整个填充柱非常均匀，否则必须重填。凝胶在装柱前，可用水浮选法去除凝胶中的单体、粉末及杂质，并可用真空泵抽气排出凝胶中的气泡。最好购买商品中的玻璃或有机玻璃的凝胶空柱，在柱的两端皆有平整的筛网或筛板。将柱垂直固定，加入少量流动相以排除柱中底端的气泡，在加入一些流动相于柱中约1/4的高度。柱顶部连接一个漏斗，颈直径约为柱颈的一半，然后在搅拌下、缓慢的、均匀地、连续地加入已经脱气的凝胶悬浮液，同时打开色谱柱的毛细管出口，维持适当的流速，凝胶颗粒将逐层水平式上升，在柱中均匀地沉积，直到所需高度位置。最后拆除漏斗，用较小的滤纸片轻轻盖住凝胶床的表面，再用大量洗脱剂将凝胶床洗涤一段时间。3、 柱均匀性检查凝胶色谱的分离效果主要决定于色谱柱装填得是否均匀，在对样品进行分离之前，对色谱柱必须进行是否均匀的检查。由于凝胶在色谱柱中是半透明的，检查方法可在柱旁放一至于柱平行的日光灯，用肉眼观察柱内是否有“纹路”或气泡。也可向色谱柱内加入有色大分子等，加入物质的分子量应在凝胶柱的分离范围，如果观察到柱内谱带窄、均匀、平整，即说明色谱柱性能良好；如果色带出现不规则、杂乱、很宽时必须重新装填凝胶柱。4、 上样凝胶柱装好后，一定要对柱用流动相进行很好的平衡处理，才能上样。凝胶柱的上样也是一个非常重要的因素，总的原则是要使样品柱塞尽量的窄和平整。为了防止样品中的一些沉淀物污染色谱柱，一般在上柱前将样品过滤或离心。样品溶液的浓度应该尽可能的大一些，但如果样品的溶解度与温度有关时，必须将样品适当稀释，并使样品温度与色谱柱的温度一致。当一切都准备好后，这时可打开色谱柱的活塞，让流动相与凝胶床刚好平行，关闭出口。用滴管吸取样品溶液沿柱壁轻轻地加入到色谱柱中，打开流出口，使样品液渗入凝胶床内。当样品液面恰与凝胶床表面平时，再次加入少量的洗脱剂冲洗管壁。重复上述操作及此，每一次的关键是既要使样品恰好全部渗入凝胶床，又不致使凝胶床面干燥而发生裂缝。随后可慢慢地逐步加大洗脱剂的量进行洗脱。整个过程一定要仔细，避免破坏凝胶柱的床层。

新买的pss的凝胶色谱柱，需要测试理论塔板数。厂家测试条件上是用BTH，是2，6-二叔丁基-4甲基苯酚吗？具体是怎么操作的？样品直接进样测试，还是需要用流动性稀释之后再测？求各位老师帮助，谢谢！

本单位有一台GPC，目前在做农残的净化方法研究吗，但是我们买的美国J2的凝胶色谱净化系统，净化效果比较差，询问工程师说，我们的凝胶柱配备的是快速柱，净化效果比较差，因此想询问各位高手，推荐几款凝胶色谱柱给我们，我们是用来净化辣椒酱，酱油之类的复杂基体。谢谢

[color=#444444]我们现在在分析水溶性样品的凝胶色谱柱（分析聚乙二醇类样品），用得是shodex的为型号OHpak SB-802.5和OHpak SB-803 HQ的凝胶色谱在，我们想自制相当的液相柱，请问可以自制吗？填料和空柱哪能买到呐？[/color]

哪位高手能告诉我装凝胶色谱柱的匀浆液用什么好吗？

5009.19第一法做有机氯净化是用凝胶色谱净化，我们没有全自动凝胶渗透色谱系统，选择手动的话问题就来了，Bio-Beads S-X3聚苯乙烯凝胶100g大概三千块钱，按标准要求装一个要多少克凝胶？装的凝胶色谱柱过完一个样还可以继续过另外的样品吗？自己装的凝胶色谱柱可以用多久？麻烦做过的前辈给点指导····

做液相色谱时使用GPC凝胶色谱柱是不是既可以起到分离的作用又可以看出个洗脱峰的分子量？我要分离的是多肽，想咨询一下具体的操作流程，包括流动相、检测器等一些相关参数的设置？

如题，对于柱效降低的凝胶色谱柱，是否可以像C18反相柱一样，把前端不好的挖出，使用新的凝胶进行填补？若可行，如何进行操作，求助大神给予指点，万分感谢[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em61.gif[/img][img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em61.gif[/img]

请问各位老师能否提供些关于凝胶色谱柱埃值（凝胶孔径）与分子测定体积之间关系的资料呢。或者说如何通过色谱柱埃值来知道要分离物质分子量多少？或者通过分子量来确定所需色谱柱埃值。谢谢。

凝胶色谱作业指导书

凝胶色谱的分离效果与什么因素有关？凝胶色谱柱的高度？直径？如何影响？

[color=#444444]目前正在实验室做课题需要用到凝胶色谱，请教大家，测酪蛋白溶液(里面还含有一些乳化剂)溶剂是纯水，凝胶色谱要用得流动相和柱子分别是什么？[/color]

我想要凝胶色谱技术一书！

各位朋友们，我的课题是分离检测陈酿红酒中的聚合色素。在色素检测的领域，常规的是HPLC（MS），采用C18反相色谱。但只是对单体花色苷和寡聚花色苷有好的效果。聚合度提升（花色苷，黄酮类物质的互相聚合物）导致色谱分离效果下降，显示出的是一大块不能分开的大峰（hump）。这是现在问题的瓶颈所在。因为聚合色素的分子量一般都在1000以上，所以想试一试凝胶色谱的分子筛效应筛选，但是我之前没有做过分子筛，对之很不熟悉。所以想请各路朋友探讨一下方法的可行性。下面是我针对凝胶色谱的几个疑问，希望有经验的朋友帮我解答：、1，凝胶色谱是一个配备有特殊检测器和别的装置的大型仪器吗？还是只是色谱柱是凝胶色谱柱？如果将HPLC（MS）的色谱柱更换为凝胶色谱柱，是不是就达到了凝胶分离的效果，操作上可不可行？2，因为聚合色素的结构复杂，同分异构体也会很多，我自认将其每个分离纯化出来都是不可能的工作。而且，因为凝胶色谱的分离只能达到将不同水力半径的物质分离的目的所以，其最终的分离效果如何仍然未知，望有经验的朋友指点一二，不胜感激！3，我认为，聚合色素分离的关键在于色谱柱，只有符合聚合色素物理化学特性的色谱柱才能解决分析检测的能力。希望有详细介绍和讲解色谱柱技术的朋友不吝分享一下资源，小弟QQ邮箱为543351984@qq.com，万分感激！

这个使用指南给大家普及了一些非常重要，非常简单的凝胶色谱柱的使用指南，凝胶色谱柱非常昂贵，而且也很娇气，稍不注意几万块就没了。[~151195~]

凝胶色谱的资料又积攒了不少，接力前辈，汇总一下，方便查找。要注意帖子的回复，里面也有宝藏哦~~【原创】凝胶色谱的应用 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20061228/685978/【资料】GPC分析的聚合物可以选择的良溶剂方案 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101214/2999859/【资料】最近凝胶色谱相关的文献资料http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100401/2476606/ 【资料】GPC高级课程培训－柱选择 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110519/3315288/【资料】《凝胶渗透色谱操作手册》北京大学化学院 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101228/3045365/【分享】凝胶色谱的讲义 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101106/2908677/【资料】凝胶色谱柱操作 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101105/2907744/【分享】凝胶色谱仪标准操作规程(SOP) http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101012/2855479/【原创】多功能凝胶色谱仪（GPC）测聚合物分子量分布 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100510/2546330/【资料】凝胶色谱法的基本理论 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100406/2483413/下面是前辈整理的资料：2010.4【资料】凝胶色谱 和 超临界流体色谱 资料汇总http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100411/2493256/2006年【公告】凝胶色谱版的知识点汇总！ http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20061215/669019/

凝胶色谱测分子量可以用糖柱吗？DMF相凝胶色谱可不可以测水相？

请教各位老师，我现在想找一根凝胶色谱柱，主要是用于脱盐的，最好是G25或者可以平替的色谱柱或预柱，适用于流动相为10mmol/L组氨酸-7mol/L尿素水溶液的凝胶色谱柱，哪些品牌或者厂家有这类型的色谱柱？

小伙伴儿们，你的凝胶色谱柱是自己装填还是买现成的呢？ 如果是自己装填，哪些步骤出现过小插曲呢？欢迎大家来分享你的装填过程哦！ 如果是买现成的，您是用什么类型的凝胶色谱柱呢，也欢迎大家来分享哦！

我想请教下,凝胶色谱柱是怎么分类的,具体都是分析什么样品.填料一般都是什么样的,我分析生物样品用什么的比较好.求高手指点.