快速微生物检测

1. 饲料中主要病原微生物快速检测方法-微生物快速检测系统（MBS） 1.1 中文名称 饲料中主要病原微生物快速检测方法-微生物快速检测系统 1.2 英文名称 Rapid detection method of main pathogenic microorganisms in feed-Micro Biology Survey （MBS） 2.范围 本标准规定了饲料中细菌总数、沙门氏菌、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、 单核增生李斯特菌微生物快速检测系统（MBS）检测方法。 本标准适用于配合饲料（蛋鸡配合饲料、肉鸡配合饲料、猪配合饲料、肉鸭配合饲料）、 动物源性饲料（血粉、肉骨粉、鱼粉、羽毛粉、乳清粉）、植物源性饲料（玉米、麸皮、豆 粕、花生粕、棉籽粕）中细菌总数、沙门氏菌、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、 单核增生李斯特菌含量的快速检测。 3.规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期 的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括 所有的修改单）适用于本文件。 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 4 原理 MBS 方法通过氧化还原指示剂测量微生物主要代谢途径中氧化还原酶的催化活动。氧 化还原指示剂会根据介质的氧化状态改变指示剂颜色。颜色变化耗时与微生物污染程度的 Log 值呈负相关关系，从而可获得观察到的酶活性与检测样本中活细胞的数量之间存在的确 定相关性。 微生物快速检测试剂瓶内的营养物，维持目标细菌的生长；选择性药剂，抑制非目标细菌的 生长；而其中的还原剂，作为递氢体，能在细胞色素 C 后把电子转移到细菌呼吸链，而又不被氧分子氧化。如果目标细菌存在，那么检测瓶中的氧化还原反应色素会根据媒质的 氧化还原状态改变颜色。MBS 主机通过三光波探测颜色变化，最后根据整合颜色变化 的时间确定细菌的含量。5 试剂和材料 除另有规定外，试剂为分析纯或生化试剂。 5.1 20%无菌甘油：水：甘油=5:1。 5.2 微生物快速检测试剂瓶。 6 仪器和设备 6.1 微生物快速检测系统（MBS）：MBS-MR 主机、笔记本电脑、MBS 中文操作软件和微 生物快速检测试剂瓶。 6.2 冰箱：2-5℃或-20℃。 6.3 涡旋振荡器。 6.4 电子分析天平：感量 0.01g。 7 检验 7.1 饲料中细菌总数的检验 7.1.1 将 MBS-MR 主机、笔记本电脑接通电源，并用数据线将两者连接，在电脑上启动 MBS 中文操作软件，点击“参数”录入相关信息（包括：操作员姓名、操作员职务、检测样 本所属客户等信息）；在软件操作界面的样品设置选项中对样品进行基本信息设置，在分析 设置选项中设置细菌总数，并选择定量分析。 7.1.2 将配套 20%无菌甘油加入到细菌总数试剂瓶中，溶解试剂。 7.1.3 带好无菌手套，用消毒后的药匙或无菌镊子取待测饲料样品，并准确称取 1g（精确 到 0.01g），加入到细菌总数试剂瓶中。 7.1.4 摇动试剂瓶（手摇 1-2 分钟或涡旋振荡器振荡 20-30 秒），直到饲料样品溶解完全或 与试剂充分混合。 7.1.5 设置相应的参数后，将处理好的试剂瓶放入 MBS-MR 主机中，进行孵育，MBS-MR 主机会自动控温，然后开始进行分析。 7.1.6 分析完成后，按下试剂瓶顶部，瓶盖内部的消毒灭菌物质会释放至试剂瓶内，5-10 分钟即可充分灭菌，将灭菌后的试剂瓶丢弃到生物垃圾箱中集中处理。 7.1.7 检测结束后，系统可以输出检验报告，报告的内容包括用户设定的全部信息、检测结 果，如变色时间、样本中微生物的浓度和检测中的所有参数。 7.2 饲料中沙门氏菌的检验7.2.1 在 7.1.1 中的分析设置选项中设置沙门氏菌，并选择定量分析，其他步骤同 7.1.1—7.1.7。7.3 饲料中大肠菌群的检验7.3.1 在 7.1.1 中的分析设置选项中设置大肠菌群，并选择定量分析，其他步骤同 7.1.1—7.1.7。7.4 饲料中金黄色葡萄球菌的检验7.4.1 在 7.1.1 中的分析设置选项中设置金黄色葡萄球菌，并选择定量分析，其他步骤同7.1.1—7.1.7。7.5 饲料中大肠埃希菌的检验7.5.1 在 7.1.1 中的分析设置选项中设置大肠埃希菌，并选择定量分析，其他步骤同7.1.1—7.1.7。7.6 饲料中单核增生李斯特菌的检验7.6.1 在 7.1.1 中的分析设置选项中设置单核增生李斯特菌，并选择定量分析，其他步骤同7.1.1—7.1.7。8 结果记录微生物快速检测系统（MBS）自动给出定量分析检测报告，读取数据，记录结果。9 质量控制本方法在 1-108cfu/ml（g）添加浓度水平上的回收率为 87.19%-97.66%(n≥10)，变异系数为 7.18%-10.28%（n≥10）。附录 A 微生物快速检测（MBS）孵育温度/检测时间快查表

2013年4月20日上午八时零二分，四川省雅安市芦山县地区发生7.0级地震，地震造成重大人员伤亡和财产损失。地震发生后，科技部紧急研究部署四川雅安地震抗震救灾科技工作，并在科技部门户网站发布抗震救灾实用技术手册，供地震灾区选用。在抗震救灾实用技术手册中，发布了微生物快速检测技术。具体信息如下：　　地震灾区微生物试纸快速检测技术　　(一)功能与用途　　利用微生物快速测定试纸，对地震发生后受灾区域内的水质、食品等微生物污染进行现场快速检测，可将常规微生物检测时间由24小时缩短至6小时，且无需其他仪器设备或能源。　　(二)技术简介　　大级别地震发生后，受灾区域的生态环境遭到大规模的破坏，人、畜尸体腐烂等会造成卫生环境急剧恶化，有害微生物滋生等会引发疾病传播。因此，在没有其他仪器设备或能源的极端条件下，可以采用微生物快速测定试纸对某些微生物进行快速测定。目前可检测的项目为：菌落总数、大肠杆菌、大肠杆菌快速检测、大肠菌群、高灵敏度大肠菌群、肠道内菌群、霉菌、酵母菌、单增李斯特菌等。该项技术操作简便，将常规的微生物检测时间由24小时缩短至6小时，可在震灾现场无需其他设备即可使用，从而辨别水质、食品是否受到有害微生物严重误染。　　(三)技术来源　　单位名称：北京市理化分析测试中心　　联系地址：北京市海淀区西三环北路27号　　邮编：100089　　联系人：陈舜琮、张小莉　　联系电话：010-68419656 13501211834

MBS微生物快速检测系统品牌：意大利MBS.SRL适合您的可移动的微生物实验室整套系统由MBS-MR主机，笔记电脑，MBS(Fitlylab)中文操作软件，VL微生物检测瓶组成检测项目• 活菌总数• 大肠菌群• 大肠杆菌• 粪大肠菌群• 肠杆菌• 金黄色葡萄球菌• 绿脓杆菌/铜绿假单胞菌• 沙门氏菌• 李斯特菌• 粪肠球菌 • 酵母菌应用范围卫生控制：• -食品（HACCP）• -厨房、工具、表面（HACCP）• -水质• -(CDC)控制、进出口检验检疫• -药品及化妆品与我们的生活息息相关，例如：l咖啡馆、餐厅l分析实验室l农产品及相关加工公司l消费者保护团体、工商管理机构等整套系统主要特点：1：食源性致病菌及菌落总数等定量检测；2: MBS砖利技术集培养皿法（特制培养基）、酶法（β-葡萄糖苷酸酶）、免 疫 法（抗原搜寻）、基因法（基因搜寻）等技术的优点于一身；3：检测速度：是传统检验方法速度的2～10倍；4：可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本 ；5：8个检测位都是独立作业，可满足检测不同样品不同微生物的需求.每个检测位都是独立的，可循环使用，可以自动选择控制检验项目温度；6：三光波同时检测（蓝，绿，红）；7：灵敏度高达可检测到1目标微生物，即1CFU,特异性高达99.999%；8：样本检测操作简单，大部分样品可以直接加1g或者1m样品无需前处理；9：不需要人值守，自动生成检测报告储存在数据库，也可以根据需要选择创建报告另存；10：检测瓶是封闭式的检测，所有检测过程对人体无害，并可以在一般实验室环境下使用；11：可以按客户的要求设置合格值的定性分析，也可以不做限制的原样 样品的定量分析；12：检测瓶自带杀 菌功能，检测后的检测瓶经杀 菌后可按照实验室常规废弃物处理，安全无害；13：操作软件已升级为Fitlylab中文版，购买的客户可以长久免费更新；14：简单三个操作步骤，傻瓜型，无需专业操作人员 ；15：仪器便携式，可随时随地进行检测、100%定量分析；16：通过权威认证 ISO 16140：2003“食品和动物饲料的微生物学” 代替 法的认证, 符合ISO/IEC 17025:2005标准（检测和校准实验室能力的通用要求）的内部认证。 MBS微生物快速检测系统VL微生物快速检测瓶(MBS砖利技术)MBS-MR主机由罗马第二大学物理研究所和意大利核物理量子实验室（INFN）共同研发，VL检测瓶由罗马第三大学生物系研究所研发。MBS砖利检测技术过权威认证 ISO 16140：2003“食品和动物饲料的微生物学” 代替法的认证国家轻工业食品质量监督检测南京站验证报告MBS砖利检测技术集培养皿法（特制培养基）、酶法（β-葡萄糖苷酸酶）、免 疫法（抗原搜寻）、基因法（基因搜寻）等技术的优点于一身。对于需氧菌，以比色的形式测量通过呼吸氧化还原反应链的电子通量率，从而测量耗氧量的速度，而耗氧量的速度与存在于媒介总的菌数量成正比，对于厌氧性微生物测得内生电子的下降率也与媒介中的的菌数量成正比。（VL检测瓶内的营养物，维持目标菌的生长；选择性 药 剂，抑制非目标菌的生长；而其中的还原剂，做为递氢体，能在细胞色素C后把电子转移到菌呼吸链，而又不被氧分子氧化。如果目标菌存在，那么检测瓶中的氧化还原反应色素会根据媒质的氧化还原状态改变颜色。MBS主机通过三光波探测颜色变化，*后根据综合颜色变化的时间确定菌的含量。）MBS-MR主机8个检测位都是独立作业可满足检测不同样品不同微生物的需求.每个检测位都是独立的，可以循环使用，可以自动选择控制检验项目温度，MBS-MR主机三光波同时检测（蓝，绿，红）与简单的色度计不同的是，仪器可同时使用3种波长进行测量，避免由于菌生长或存在固体样本造成的光散射带来的干扰。MBS-MR根据时间记录红绿蓝通道的光强度微分曲线*大拐点代表颜色变化的临界点，利用临界点对应的时间计算菌的含量VL微生物快速检测瓶• 通过ISO 16140：2003认证• 直接利用VL检测瓶可以快速定性检测致病菌• VL检测瓶搭配MBS-MR机可以快速的定量检测致病菌检测步骤可以总结成以下4步：检测报告（PDF报告）食品分析(取样方法)在进行食品分析时，使用食品加工用具或者消 毒后镊子把食品样本放进瓶子里，达到实时检测污染物的目的。对于液体样品，要按要求使用一次性吸液管。表面分析(取样方法) 1，打开装有中和溶液的小瓶中的棉签2，在一个大约10平方厘米的区域擦拭3，将棉签插入检测瓶4，开始分析水分析(取样方法) 对于水分析，本产品配备了能满足各种分析需求的工具包。对所需的水样进行过滤后(如：100毫升)，把过滤器放进大瓶里。不管菌附在过滤器内，还是处于自由悬浮状态，色变所需的时间几乎一样。MBS微生物快速检测系统孵育温度/检测时间快查表创新点：仪器软件及检测瓶重新升级样品不需要前处理，直接加样，系统升级可以按客户设定合格值提前得出报告。微生物快速检测系统