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生化仪的分光原理

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生化仪的分光原理相关的论坛

  • 【资料】自动生化分析仪的原理、构成及使用

    自动生化分析仪的原理、构成及使用一、自动生化分析仪的功能及特点 自动生化分析仪是将生化分析中的取样、加试剂、混合、保温、比色、结果计算、书写报告等步骤的部分或全部由模仿手工操作的仪器来完成。它可进行定时法、连续监测法等各种反应类型的分析测定。除了一般的生化项目测定外,有的还可进行激素、免疫球蛋白、血药浓度等特殊化合物的测定以及酶免疫、荧光免疫等分析方法的应用。它具有快速、简便、灵敏、准确、标准化、微量等特点。 二、自动生化分析仪的分类 自动生化分析仪有多种分类方法,最常用的是按其反应装置的结构进行分类。按此法可将自动生化分析仪分为流动式和分立式两大类。所谓流动式自动生化分析仪是指测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这是第一代自动生化分析仪。过去说得多少通道的生化分析仪指的就是这一类。存在较严重的交叉污染,结果不太准确,现已淘汰。 分立式自动生化分析仪与流动式的主要差别是每个待测样品与试剂混合间的化学反应都是分别在各自的反应皿中完成的,不易出现较差污染,结果可靠。 三、自动生化分析仪的构成 因为自动生化分析仪是模仿手工操作的过程,所以无论哪一类的自动生化分析仪,其结构组成均与手工操作的一些器械设备相似,一般可有以下几个部分组成: 1、样品器:放置待测样本、标准品、质控液、空白液和对照液等。 2、取样装置:包括稀释器、取样探针和输送样品和试剂的管道等。 3、反应池或反应管道:一般起比色皿(管)的作用。 4、保温器:为化学反应提供恒定的温度。 5、检测器:如比色计、分光光度计、荧光分光光度计、火焰光度计、电化学测定仪等。不同仪器配置不同。 6、微处理器:是分析仪的电脑部分,又叫程序控制器。控制仪器所有的动作和功能,使用者可通过键盘与仪器“对话”,同时电脑还能接受从各部件反馈来的信号,并作出相应的反应,对异常情况发出一定的指示信号。分析软件和分析结果一般贮存在磁盘中,可共查询。 7、打印机:可绘制反应动态曲线和打印检验报告单等。 8、功能监测器:显示屏就是其中一部分,可查看反应状态、人机“对话”的情况、当前仪器工作状态、分析结果等。 四、流动式自动生化分析仪 流动式自动生化分析仪又可分为空气分段系统和非分段系统。前者是流动式分析仪中最典型的一种。 (一)空气分段系统 这种分析仪的特点是通过比例定量泵挤压弹性样品管、空气管和试剂管(通称“泵管”),将样品依次连续地吸入并沿样品管输送,另一方面由空气管吸入的气泡将由同样原理吸入并在试剂管道中连续流动的试剂分成均匀的节段,样品流和试剂流在连续向前流动的过程中相遇、混合、透吸(必要时)、保温、反应及被测定。整个分析过程是液流在管道中连续流动的过程中完成的。 (二)非分段系统 非分段系统是靠试剂空白或缓冲液来间隔每个样品的反应液,这样,在管道中连续流动的液体不被分段。非分段系统可再分为流动注入系统和间隙系统。 1、流动注入系统:该系统的组成与空气分段系统相似,但某些结构和工作原理有所不同,空气分段系统是利用气泡分段来防止管道中各反应液在流动过程中的交叉污染,而流动注入系统则是通过将样品依次注入连续流动的试剂流管道中来达到防止交叉污染的目的的。 2、间隙系统:该系统的结构、组成和工作原理与流动注入系统相似,但其特点是每一次进样都必须在前一样品的分析过程结束后(包括管道的清洗)才能开始,而不能连续地依次进样,每次进样间有一时间间隙,故有人称为不连续流动式分析仪。 五、分立式自动生化分析仪 分立式为第二代自动生化分析仪,它与流动式的主要差别是每个待测样品与试剂混合间的化学反应都是分别在各自的反应皿中完成的。 称为第三代自动生化分析仪的离心式自动生化分析仪,也应属于分立式。因为在离心式分析仪中,每个待测样品都是在离心力作用下,在各自的反应槽内与试剂混合,并完成化学反应,继而被测定的。离心式分析仪属于“同步分析”,在离心力的作用下,各待测样品几乎同时与试剂混合、反应并被测定后打出报告;而其它分析仪是“顺序分析”,即各待测样品依次与试剂混合、反应先后被测定。 袋式自动生化分析仪也应属于分立式,它是用试剂袋代替反应管和比色皿,测定时每个待测样品在各自的试剂袋内进行反应并被检测。还有一种称为“干式自动生化分析仪”也属于分立式。它的主要特点是采用固相化学技术,即将试剂固相于胶片或滤纸小片等载体上。测定时使一定量的待测样品分布于一张试纸片上,一定时间后用反射光度计测定。 分立式自动生化分析仪,是目前各实验室普遍使用的自动生化分析仪,一般都可以任意选择测定项目,故称为任选式自动生化分析仪。下面将重点介绍任选式自动生化分析仪。 六、任选式自动生化分析仪的主要部件 (一)加样系统 1、样品转盘:可放置小型样品杯数十只。有的分析仪可直接用盛样本的试管,有的还附有条形码阅读装置,能识别样本试管上的条形码信息,不需给样本编号,也不必输入病人资料即可打印出该病人的化验报告。 2、试剂室(仓):不同的分析仪试剂室可容纳的试剂盒数量不同,一般可容纳20多种试剂。有的试剂室带有冷藏装置,带有条形码识别装置的试剂室试剂可以任意放置试剂盒位置。 3、取样装置:有的分析仪取样本和取试剂公用同一采样针,由内部的分流阀控制取样本和取试剂;有的仪器有两套取样装置,分别取样本和取试剂。采样针前端有液面传感器防止空吸或采样针外壁液体挂淋,采样臂中有预温装置。如果采用多试剂分析方法,将占用试剂室中试剂盒位置,会减少测定项目。 (二)比色系统 1、光源:大多数分析仪使用卤素钨丝灯,工作波长325~800nm。有的分析仪使用氙灯,工作波长285~750nm。 2、比色杯:有分立式比色杯、分立式转盘式比色杯、离心式比色盘、流动池。干式生化仪不需要比色杯,袋式生化仪由试剂袋经挤压自动形成比色杯。比色杯光径6-7mm,少数为10mm。 比色杯中的反应液需要恒温,有37℃、30℃、25℃三档可选择,有的固定为37℃。多数用吹入恒温空气的方式,也有用恒温水浴或半导体温控装置的。为了保证比色杯中反应液有±0.1℃的精确度,分析仪的环境温度必需保持18~30℃,室温波动不宜超过2℃。 3、单色器:(1)干涉滤光片(2)光栅 4、检测器:(1)光电倍增管,已很少用。(2)列阵固态光敏二极管。(三)供排水系统 自动生化分析仪中有很多供水管道与电磁阀。只读存储器中软件参数控制电磁阀与输液泵供给各个部件的冲洗与吸液,最后排出机外。随机存储器内的分析参数控制电磁阀与注射器的步进电机,供应样本、试剂和稀释用水。有的生化仪还能自动冲洗比色杯供反复使用。(四)数据处理系统 每个项目的检测结果暂时储存在随机存储器中,待某个样本所需的项目全部检测完毕,由微机汇总打印出综合报告单。微机的存储器中可以存储相当数量的病人数据与逐日的室内质控数据,随时可以按指令调出,在荧光屏上显示或打印,也可存储在软盘中长期保存,随时调阅。 七、任选式自动生化分析仪的分析顺序 每份样品可以任选试剂室内预置试剂盒的一项或全部项目的检测。微机按输入的指令,安排项目检测次序,一般先做孵育时间长的终点法,后做监测时间短的速率法,以便恒速打印综合报告单。当指定样本进入待测位置时,微机指令试剂盒进入试剂取样位置,按所测项目的参数由加样系统定量取样,同时比色杯按微机的指令到达指定位置加样。生化仪的分析速度与仪器加样周期的时间有关。加样周期的时间越短分析仪的速度越快。双试剂法占用两个加样周期,分析速度减半。 八、任选式自动生化分析仪的主要分析参数 1、试验代号 14、连续监测时间 2、试验名称 15、标准液数量 3、试验方法 16、标准液浓度 4、试验类型 17、重复校标次数 5、温度 18、计算因子(F值)6、波长:可选择主波长和次波长。 19、计量单位 7、反应类型 20、小数点位数8、终点法零点读数 21、底物耗尽 9、样本量与稀释水量 22、线性度 10、试剂量与稀释水量 23、试剂吸光度上限与下限 11、样本空白 24、线性范围 12、孵育时间 25、参考范围 13、延迟时间 26、等等等等

  • 生化分析仪的基本测定方法

    生化分析仪的基本测定方法。生化分析仪属于光学式分析仪器,它基于物质对光的选择性吸收,即分光光度法,单色器将光源发出的复色光分成单色光,特定波长的单色光通过盛有样品溶液的比色池,光电转换器将透射光转换为电信号后送入信号处理系统进行分析。即利用光电比色的原理来分析样本中的生化指标。生化分析仪常用的分析方法有A终点分析法;B连续监测法;C比浊测定法;D离子选择电极法;E电泳法;F均相酶免疫分析法等

  • 【讨论】自动生化分析仪属于分光光度计的范畴么?

    现在自动生化分析仪的使用越来越多了,医院更多,我觉得从本质上来说,自动生化分析仪仍然属于分光光度计的范畴,只是自动生化分析仪把样品的反应这些前期过程也加上了而已。不知道大家平时使用么,我们这儿用的是芬兰产的Konelab,自动生化分析仪的讨论应该在生命科学论坛上,但那儿实在是太冷清,难道用自动生化分析仪的不多么,导致门可罗雀。

  • 有机锡衍生化原理

    请教各位老师:关于有机锡用四已基硼酸钠衍生化的的原理是什么?我们配标液直接衍生一个20ppm浓度的标液,在用这个衍生好的20PPM的标稀释成0.1、0.5、1、2PPM的工作曲线,而不是按标准上配成4个浓度点一起衍生,这么操作是否有问题?

  • 论分光测色仪测量原理

    分光测色仪一般利用棱镜、光栅、干涉过滤器、可调的或不连续的系列单色光源来实现分光,然后根据色散原理分析单一色彩信息,实现色彩数字。分光测色仪可以根据内部设置的色度空间和计算公式最终显示色度信息,并以数字的形式输出。另外,[url=http://www.xrite.cn/categories/portable-spectrophotometers/][color=#000000]分光测色仪[/color][/url]也可以根据色度数据分析潜在的光谱数据信息。其中我们最常用的是Lab或LCH等色度数据分析,但其实它们都是由光谱数据通过仪器内部转换而来的,当下如何能够直接通过光谱数据进行颜色在不同系统中的映射匹配与评价已是未来研究趋势。

  • 生化培养箱电路的工作原理

    顺应世界环保趋势,无氟将是我国制冷设备发展的必然趋势,本实验设备快人一步全新无氟设计,使你始终走在健康生活的前面。国际品牌压缩机和循环风机,高效率、低能耗,不仅促进节能,而且使用寿命长,可将噪声降至更低限度,与传统低温设备相比,降温时间减少40%以上。生化培养箱具有制冷和加热双向调温系统,温度可控的功能,是生物、遗传工程、医学、卫生防疫、环境保护、农林畜牧等行业的科研机构、大专院校、生产单位或部门实验室的重要试验设备,广泛应用于低温恒温试验、培养试验、环境试验等。生化培养箱控制器电路由温度传感器、电压比较器和控制执行电路组成。上海五相仪器现将电路的工作原理作如下说明: 温度传感器电路采用新型温度传感器集成电路ICl。电压比较器电路由电阻器Rl-R7、温度设定电位器RPl、R陀和电压比较器集成电路IC2(Nl、N2)组成。 控制执行电路由晶体管Vl、V2、继电器Kl、K2和二极管VDl、VD2等组成。 生化培养箱可用旧单门或双门电冰箱改制:利用电冰箱本身的功能制冷,在电冰箱内部的下方安装加热器件(如电热丝或150W以上碘钨灯)和排风扇(可使箱内温度均匀)。 电位器RPl用来设定温度的上限,RP2用来设定温度的下限。继电器Kl通过加热中间继电器(电路中本画出)控制加热器件,继电器KZ通过制冷中间继电器(电路中末画出)控制电冰箱的制冷系统。 IC2的5脚和2脚分别接RPl和RP2的中心插头上,IC2的6脚、3脚通过电阻器R3与ICI的输出端相连。在IC2的2脚电压值减去5脚电压值约等于0·OlV时,对应的温度为1℃。 当生化培养箱内的温度在设定的温度范围内时,IC2的2脚电压高于5脚电压,3脚、6脚电压与2脚电压相等(或低于2脚电压而高于5脚电压),1脚和7脚均输出低电平,VI和V2均截止,继电器Kl、K2均不吸合,制冷与制热电路均不工作。 当箱内温度超过设定温度的上限时,IC2的3脚、6脚电压将高于2脚电压和5脚电压,IC2的1脚由低电平变为高电平,使V2导通,继电器K2吸合,其常开触点接通,制冷系统工作。当箱内温度低于设定温度的下限时,IC2的3脚和6脚电压低于2脚电压和5脚电压,IC2的7脚由低电平变为高电平,便Vl导通,继电器Kl吸合,其常开触点接通,加热电路工作。 元器件选择 Rl-R5均选用1/4W金属膜电阻器,其精度应为士1%;R6-R9可选用1/4W的碳膜电阻器。RPl和RP2均选用精度较高的线绕式电位器。 C选用独石电容器。 VDl和VD2均选用1N4148型硅开关二极管。 Vl和V2选用S9013或C8050型硅NPN晶体管。 ICl选用LM35DZ或LM36、TMP36型温度传感器集成电路;IC2选用LM393运算放大集成电路。 Kl和K2均选用l2V的直流继电器。

  • 【分享】自动生化分析仪的原理、构成及使用

    一、自动生化分析仪的功能及特点 自动生化分析仪是将生化分析中的取样、加试剂、混合、保温、比色、结果计算、书写报告等步骤的部分或全部由模仿手工操作的仪器来完成。它可进行定时法、连续监测法等各种反应类型的分析测定。除了一般的生化项目测定外,有的还可进行激素、免疫球蛋白、血药浓度等特殊化合物的测定以及酶免疫、荧光免疫等分析方法的应用。它具有快速、简便、灵敏、准确、标准化、微量等特点。 二、自动生化分析仪的分类 自动生化分析仪有多种分类方法,最常用的是按其反应装置的结构进行分类。按此法可将自动生化分析仪分为流动式和分立式两大类。 所谓流动式自动生化分析仪是指测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这是第一代自动生化分析仪。过去说得多少通道的生化分析仪指的就是这一类。存在较严重的交叉污染,结果不太准确,现已淘汰。 分立式自动生化分析仪与流动式的主要差别是每个待测样品与试剂混合间的化学反应都是分别在各自的反应皿中完成的,不易出现较差污染,结果可靠。

  • 【分享】数显生化培养箱 16s rrna细菌鉴定原理

    一、微生物数码鉴定法 早在七十年代中期,一些国外公司就研究出借助生物信息编码鉴定细菌的新方法。这些技术的应用,为医学微生物检验工作 提供了一个简便、科学的细菌鉴定程序,大大提高了细菌鉴定的准确性。目前,微生物编码鉴定技术已经得到普遍应用,并早已商品化和 形成独特的不同细菌鉴定系统数显生化培养箱。如API、Micro-ID、RapID、Enterotube和Minitek等系统。这种鉴定 系统是自动化鉴定系统的基础。 ( 一)数码鉴定法基本原理数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式,给每种细菌的反应模式赋予一组数码,建立数据库或编成检索 本。通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字(编码),查阅检索本或数据库,得到细菌名称。其基本原理是计算并 比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。随着电脑技术的进步,这一过程已变得非常容易。 1.数显生化培养箱 简要介绍计算步骤:(1)出现频率(概率)的计算:将记录成阳性或阴性结果转换成出现频率:①对阳性特征,则除以100即得。②对阴性特征,除以1 00的商被1减去即可。③说明:对“0”和“100”,因这2个数太超量,为了使结果不出现过小或过大,而用相似值0.01或0 .99值代替。(2)在每一个分类单位中,将所有测定项目的出现频率相乘,得出总出现频率。(3)在每个分类菌群中的所有菌的总出现频率相加,除以一个分类单位的总出现频率,乘100,即得鉴定%(%id)(4)在每个菌群中,再按%id值大小顺序重新排列。将未知菌单次总发生频率除以最典型反应模式单次总发生频率,得到模式频率T 值,代表个体与总体的近似值。T值越接近1,个体与总体越接近,鉴定价值越大。按%id大小排序,将相邻两项的%id之比为R, 代表着首选条目与次选条目的差距,差距越大,价值越大。如果%id≥80,参考T及R值可作出鉴定。 2.在编码检索本中检索数据谱得出的结果有以下几种形式(以API鉴定系统为例)。 (1)有此数码谱:①有一个或几个菌名条目及相应的鉴定值(%id和T值)。②对鉴定结果好坏的评价,最佳……等。 ③用小括号列出关键的生化结果及阳性百分率。④有时,鉴定结果不佳或有多条菌名条目,需进一步补充试验项目才能得出良好的鉴定结 果。⑤指出某些注意要点,需用“推测性鉴定”,并将此菌送至参考实验室;需用“血清学鉴定”,作进一步的证实等。 (2)无此数码谱:可能有以下原因:①此生化谱太不典型。②不能接受,鉴定值低(%id<80.0)。③可疑。需进一步确认是否 纯培养,重新鉴定,可与供应商技术服务部联系。3. 结果解释(1)如果排序第一的细菌%id≥80.0,则可将未知菌鉴定在此条目中,并按%id值的大小对鉴定的可信度作出评价。%id≥ 99.9和T≥0.75为最佳的鉴定;%id 99.0~98.9之间,T≥0.5为很好的鉴定 数显恒温水浴锅 恒温培养摇床 omega试剂盒

  • 【分享】UV分光光度计的应用原理

    UV分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。UV分光光度计是一种是利用物质对光的选择吸收现象,进行物质的定性和定量分析的光电式分析仪器,也是一种光谱仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。那么UV分光光度计的应用原理又是怎样呢,其实UV分光光度计的应用原理非常简单。UV分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

  • 【资料】分光光度计的应用常识(原理与应用)

    分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 分光光度计的简单原理 分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

  • 后分光技术

    后分光技术是日本日立公司独创的,在其生产的自动生化分析仪中大量采用的一种分光光度法技术。分光光度法是基于朗伯比尔定律基础上建立起来的一种常用的分析方法。其原理是:特定波长的单色光通过溶液,其吸收强度与溶质浓度和光通过的距离(即光径)成正比。 但分光光度法最终机理是因为不同的物质有其特定的产色基团,能对特定波长的光产生强的吸收效应,因此无论通过溶液的是单色光还是复色光,溶质也只对其特定波长的光产生强吸收因此只要保证光电接收器感应到的是单色光,通过溶液的是单色光还是复色光并不重要,因此为后分光技术提供了可能。 用复色光通过反应体系后,再通过单色器对吸收后的复色光分成单色光测定,这就是“后分光技术”。

  • 【讨论】替代生化分析仪

    请教一个问题,本人在测某些酶活性的时候,要求使用生化分析仪用速率法测。本实验室有紫外分光光度计UV-1700,在动力学模式下,有速率测定功能。能否用UV-1700替代生化分析仪测定呢?再就是比色池是1cm的,是否可以放光径0.5cm的薄的比色皿测试?如果不行是不是只有换比色池?

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