荧光化学发光检测

今年入夏至今，全国持续多天高温天气，各地频发臭氧污染严重。相比臭名昭著的PM2.5，臭氧污染这个“看不见的隐形健康杀手”对普通民众更具有迷惑性，更容易让人忽视。　　作为强氧化剂，近地面的臭氧会强烈刺激人的呼吸道，造成咽喉肿痛，引发支气管炎和肺气肿等；甚至会导致人的神经中毒，头晕头痛、视力下降、记忆力衰退；破坏人体免疫机能，诱发淋巴细胞染色体病变，加速衰老等。高浓度臭氧还会危害农作物等植物。针对日益增长的的臭氧监测需求以及大气光化学污染复杂的反应机理特性，聚光科技（杭州）股份有限公司（以下简称“聚光科技”）推出大气光化学污染监测解决方案。方案特点　　监测因子全面覆盖　　方案包含了光化学前体物监测系统、光解速率监测系统和特征产物监测系统，能够实现光化学污染因子全面覆盖监测。可满足研究机构和环保局、监测站等对光化学污染物的监测、预警预报、污染形成原因、机理及过程分析的需要，为光化学污染管理手段提供数据支撑和效果评估。　　自主研发，软硬件一体化 　　集成度高，专业性强；与北京大学强强联合，强大的硬件支撑，专业分析平台，实现数据采集-质控，数据应用分析展示等。软件功能　　1． 光化学污染物各组分时序统计； 　　2． O3时空分布 　　3. EMKA曲线绘制，VOCs和NOx控制区分析；根据当地情况测算出最合理经济有效的控制比例；　　4. VOCs活性，OFP/SOA贡献分析；实现精细管控，靶向治理； 　　5. 治理效果评估，闭环监测跟踪，优化治理手段。 核心设备　　强强联合，与北京大学、南开大学等权威机构合作；强大的研发团队，设备性能稳定可靠。　　AQMS-600 氮氧化物分析仪 　　AQMS-600氮氧化物分析仪是基于化学发光技术测量ppb~ppm级NOX的分析仪，为环境空气质量监测系统的分析仪之一，用于检测和评价环境空气质量参数中NOx的浓度水平。　　Synspec GC955-611/811 臭氧前驱体（VOCs）分析仪 　　GC955臭氧前驱体分析系统由低碳（C2-C5）分析仪和高碳（C6-C12C）分析仪两套仪器组成；分析仪采用FID+PID双检测器组合，确保分析的高灵敏度和高选择性。该系列仪器已经取得包括德国、欧盟和中国等国家的自动测量认证。　　PFS-100 光解光谱仪 　　在大气光化学污染问题研究中，部分光化学反应的关键物质及自由基（如O1D、NO2、OH、HONO、HCHO等）的光解速率是分析大气光化学污染状况及程度的重要指标，因此对光解速率的测量是研究光化学污染的必要手段。光解光谱仪（PFS-100）则是聚光科技针对光解速率测量需求，结合多年环境监测仪器的开发经验的一种基于光谱测量来计算大气中不同物质光解速率的仪器，可以实现在线连续测量大气中多种物质的光解速率，应用于大气光化学污染状况分析中。　　AQMS-300 臭氧分析仪 　　AQMS-300臭氧分析仪是聚光科技集多年的环境与安全监测仪表开发经验，采用紫外监测技术，推出的气体臭氧含量检测仪。该仪器可广泛应用于环境和污染源气体质量监测中臭氧浓度的监测，也可应用于气象、消毒、视频安全等其他需要进行臭氧浓度监测的领域。　　PANs-1000 大气PAN在线分析仪 　　过氧乙酰硝酸酯[CH3C(O)OONO2，PAN]是光化学污染的重要二次污染物，由于其不存在天然排放，全部由VOCs与NOx经光化学反应产生，常被当作光化学污染的指示剂。聚光科技与北京大学环境与科学工程学院强强合作，推出了PAN-1000大气PAN在线监测系统。该系统可广泛用于环境监测站、气象观测站、高校科研院所等场所进行大气PAN在线监测研究。

大家好，我是流式荧光崔工，一个旨在链接与流式荧光相关的朋友，一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。——流式荧光崔工前段时间，有很多新关注崔工公众号的朋友问崔工一个问题，什么是流式荧光检测技术？它的原理是什么？传统的化学发光检测技术又有什么？问崔工这个问题的朋友应该是刚进入到这个行业，还不是很了解这个行业。今天就跟大家聊聊，供大家参考。— 1 —什么是流式荧光检测技术？从百度百科了解到，流式荧光，又称悬浮阵列、液相芯片等，是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为核心，集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体，多指标并行分析，最多可一管同时准确定量检测2-500种不同的生物分子。具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点。可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。流式荧光检测技术的原理是什么？将荧光标记后的单细胞（或颗粒）悬液进入吸样管，进而随鞘液进入流动室。进入流动室之前的管道变细，迫使鞘液从四周、样本在中心进入流动室，在外加压力的作用下由下向上（或由上向下）直线流动。鞘液充满流动室将样品裹挟，当二者通过流动室喷嘴流出时，压力迫使鞘液包裹的液滴包含单一细胞或颗粒垂直通过检测区。在检测区与液滴垂直的位置设置激光，在与激光垂直的位置设置探测器（透镜等），液流、激光、探测器互相垂直并聚焦于一点实现流体动力聚焦。荧光标记的细胞或颗粒在激光激发下发出散射光和荧光的发射波，散射光和发射光被检测器获取，再经一系列滤光片、光栅处理去除干扰并将光信号经光电转换和放大后输入计算机，并由软件分析处理。而细胞分选则是对荧光标记的目的分子分别加载正或负电荷，当其在随液滴滴落的过程中受到外加高压电场的作用发生偏转而落入接收容器，从而获得目的细胞群。流式荧光检测技术有什么技术特点？1、高通量：将许多种不同荧光编码的微球放在同一反应体系内，一次可同时检测2-500种生理病理指标，这与传统方法的逐个检测相比是质的飞跃。2、高敏感性：流式荧光技术最高的检测下限可达0.01 pg/ml，常规的酶联免疫吸附试验(ELISA)仅为μg级，比后者检测的灵敏度提高10—100倍。3、线性范围宽：检测的线性范围比常规的ELISA方法高10倍以上，可达3-5个数量级。检测浓度范围为pg-μg级。4、反应快速：因流式荧光技术的杂交或免疫反应在悬浮的液相中进行，反应所需的时间短(从2 h缩短到20—40 min)，杂交后常不用清洗，即可直接读数，所以检测效率高于固相杂交。5、重复性好：杂交发生在准均相液体环境中，其结果稳定，重复性非常好。检测时，抽取其中的100颗微球读数，最终的数据取其均值或中位值，这样可将误差减到最小。6、利于探针和被检测物的充分反应：由于液相环境更有利于保持蛋白质的天然构象，所以也更有利于探针和被检测物的反应。7、操作简便：流式荧光技术平台的整个反应过程只涉及加样和孵育，最后上机读数，操作步骤少，简单易用。— 2 —什么是化学发光检测技术？这里既然是跟流式荧光检测相比较的，那这里的化学发光检测技术指的是化学发光免疫分析技术。化学发光免疫分析：是将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。化学发光检测技术的类型及原理化学发光检测技术的类型分为直接化学发光免疫分析，化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。直接化学发光免疫分析用吖啶酯直接标记抗体(抗原)，与待测标本中相应的抗 原(抗体)发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原吖啶酯标记抗体复合物，这时只需加入氧化剂（H2O2）和 NaOH使成碱性环境，吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、 发光 。由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生 的光子能，这部分光的积分与待测抗原的量成正比，可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。化学发光酶免疫分析酶免疫分析（chemiluminescence enzyme immunoassay，CLEIA）是用参与催化某一化学发光反应的酶 如辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗体，在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成 固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物；经洗涤后，加入底物(发光剂)，酶催化和分解底物发光，由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，再把它们传送至计算机数据处理系统，计算出测定物的浓度。电化学发光免疫分析电化学发光免疫分析 （electrochemiluminescence immunoassay， ECLIA）是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原)，以三丙胺(TPA)为电子供体，在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应，它包括电化学和化学发光两个过程。化学发光免疫分析技术的优势是什么？1、灵敏度高：灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性。化学发光免疫分析能够检出放射性免疫分析和酶联免疫分析等方法无法检出的物质，对疾病的早期诊断具有十分重要的意义。2、宽的线性动力学范围：发光强度在4-6个量级之间，与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色酶联免疫分析吸光度（OD 值）2.0 的范围相比，优势明显。虽然同位素放射免疫也有较宽的线性动力学范围，但是放射性限制其应用。3、光信号持续时间长：化学发光免疫分析的光信号持续时间可达数小时甚至一天，简化了实验操作及测量。4、分析方法简便快速：绝大多数分析测定仅需加入一种试剂（或符合制剂）的一步模式。5、结果稳定、误差小：样本本身发光，不需要额外光源，避免了外来因素的干扰（光源稳定性、光散射、光波选择器），分析结果稳定可靠。6、安全性好及使用期长：到目前为止还未发现化学发光免疫分析试剂的危害性；另外这些试剂稳定，保存期可达一年之久。以上是对什么是流式荧光技术检测与化学发光技术检测基本原理做了一个说明，供大家参考。【行业征稿】若您有生命科学、医药、临床等行业相关研究、技术、应用、管理经验等愿意以约稿形式共享，欢迎自荐或引荐投稿联系人：刘编辑word图文投稿邮箱：liuld @instrument.com.cn微信：JaysonXY（备注来意：投稿）（本文编辑：刘立东 点击查看KOL主页）

WelView光化学衍生器是月旭科技推出的一款高效、便捷、耐用、方便的光化学衍生设备，在黄曲霉检测及磺胺类药物检测方面起了重要的作用。用了那么久的仪器，你知道它的原理吗？今天我们来解密光化学衍生的原理，一起来看看吧。光化学反应类别柱后化学衍生反应主要以荧光分析为主，也有以电化学检测的分析方法。光化学反应的主要类别如下：分子内能量转移、碰撞能量转移、淬灭、光致离子化、异构化、直接反应、分子间分解。光化学反应主要类别见下图：光化学反应类别图A general classifications of photochemical reactions光化学荧光反应原理自然界中大多数有机物分子因为含有N、O、S等杂原子，系间窜越（S1-T1或T1-S0）量子产率大。或者因为分子中原子不共平面而缺乏刚性，从而成为非荧光物质或天然弱荧光物质，难以直接用荧光检测器进行分析。荧光分析法因其灵敏度高、选择性好，比一般的紫外检测的灵敏度高出三个数量级，检测线可达10-6mg/L，甚至10-9mg/L。光化学荧光分析法的建立，大大拓宽荧光分析法的应用范围。它作为一种基于光化学衍生反应的荧光分析法，是利用物质在特殊的光化学反应体系中大量吸收光子，从而诱发一系列如上图所示的光化学反应。在恒定的实验条件下，光化学反应产物的荧光强度与待测反应物的浓度有定量关系，通过测定光化学反应产物的荧光强度可间接测定待测反应物的浓度，从而达到定性定量分析的目的。光化学衍生方法是基于待测物质在特殊的光化学反应体系吸收紫外光辐射从而引起物质的性质或者结构发生变化，形成荧光增强的现象，使得待测物的荧光性质发生改变来提高荧光分析的灵敏度的一种方法。光化学衍生器广泛应用于液相色谱检测分析，使用时置于色谱柱和检测器之间，进行柱后连续光化学衍生反应提高荧光、紫外、电化学检测和化学发光检测器的灵敏度和响应的选择性。光化学衍生器示意图光化学衍生的优点（1）安装简单，灵敏度高光化学衍生器使用时置于色谱柱和检测器之间，进行柱后连续光化学衍生反应。安装方便，无需专用工具。（2）实验操作简单，容易控制光子作为衍生剂的加入是通过紫外灯光源的开关决定的,和化学衍生相比，不需要准备和存储化学试剂，也不需要考虑试剂的降解、使用期限和处置等问题。（3）操作安全，降低成本有些化学试剂具有毒性，而光化学衍生只需要控制光源开关，不需要接触有毒试剂。且不需要额外添加泵、反应器、加热器等，这样也zui大限度地降低可能干扰测定的因素。光化学衍生器除应用于黄曲霉毒素检测外, 还可以应用于大量的巴比妥酸盐、氨基酸、多肽、维生素和磺胺类药物分析。应用举例✓绿茶中黄曲霉检测色谱柱：Ultimate® XB-C18 （4.6×150mm，5μm）；流动相：甲醇:水=45:55；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL；检测波长：Ex=360nm，Em=420nm。参考文献：《光化学衍生技术在离子色谱中的应用》浙江大学