大体系融合系统

分析室专用体系与质量体系如何融合，还是要建立两个体系运作。

各位大神，求一份214和17025融合版的体系文件。。。。

HACCP与ISO9000质量管理体系的融合　　危害分析和关键控制点体系和应用指南(Hazard Analysis and Critical Contral PointSystem and Guidelines For Its Application，缩写HACCP)是国际食品法典委员会在1997年发布的关于食品安全卫生的管理规则。该规则要求食品加工企业对生产加工的全过程通过危害分析，确定关键控制点，并采取相应措施，使这些关键控制点均处于受控状态，从而确保所生产的食品的安全卫生。目前该体系已得到了包括联合国食品法典委员会、欧盟、美国、加拿大、澳大利亚、新西兰和日本等组织和国家的认可，建立HACCP体系对于出口食品加工企业来讲是一个强制性的要求。随着我国人民生活水平的不断提高，对食品安全卫生方面的要求也越来越高，因此国内食品生产企业建立和实施HACCP体系也是势在必行。　　　　ISO9000国际标准是帮助各种类型和规模的组织实施并运行有效的质量管理体系以增强其顾客满意和改进其业绩而制定的通用的质量管理体系标准。许多食品生产企业已经通过了ISO9000国际标准的认证或正在着手按照ISO 9000国际标准的要求建立质量管理体系。企业在这个过程中能否考虑将HACCP体系和ISO9000质量管理体系进行融合呢？　　ISO9001:2008标准要求组织识别质量管理体系所需的过程及其在组织中的应用，确定这些过程的顺序和相互作用，确定有效运行和控制过程所需的准则和方法，获得必要的资源和信息来监视、测量和分析这些过程，通过对过程的管理和持续改进来实现策划的结果和增强顾客满意；HACCP则要求企业通过对食品加工过程中的危害进行分析，确定加工过程的关键控制点(CCP)，为每一个关键控制点确定预防措施并建立关键限值，监测每一关键控制点，当监测显示已建立的关键限值发生偏离时采取已建立的纠偏措施，建立有效的记录－保存程序，用文件证明HACCP体系，并建立验证程序，使HACCP系统正常运行，从而使食品安全卫生的潜在危害得到预防、消除或降低到可接受水平。由此可见，两者都是对过程进行识别和控制，只是HACCP体系要控制的过程涵盖于ISO9001:2008质量管理体系的过程之中，这两个管理体系之间存在着密切的联系。另外，HACCP体系中有关危害分析和预防措施，可以在ISO9001的纠正和预防措施、数据分析和产品实现的策划中看到相同的出发点，不过后者涉及的质量管理范围较广，前者仅对产品实现过程中的危害进行分析，并有针对性地制定预防措施。HACCP体系中有关关键控制点监控与质量管理体系中过程和产品的监视和测量亦有相通之处。可以说，HACCP包含的每个步骤，除执法机构验证外，在现行IS09001标准中都可得到相应的控制。另外两者对过程能力的确定、人员资格的鉴定、记录及记录保持等要求是也一致的。因此，HACCP体系和ISO9000:2008质量管理体系的融合是完全可能的。　　ISO9001:2008标准要求组织通过质量管理体系的有效应用，包括持续改进体系的过程以及保证符合顾客与适用的法律法规要求，来增强顾客满意。因此，按ISO 9001:2008标准建立的体系应该满足HACCP的要求，即适用的法律法规要求。而HACCP也不是一个脱离管理体系而孤立存在的系统，它需要一个合适的管理环境作为运行的基础，IS0 9001:2008质量管理体系便可满足这种要求。如果把HACCP体系融入已有的ISO 9001:2008质量管理体系，将有利于加强产品实现过程安全因素的控制，有利于过程的整体策划、资源的合理配置和简化管理、提高效率。因此，对HACCP与ISO 9000质量管理体系进行融合也是十分必要的。然而，ISO9001:2008标准毕竟是一个管理体系标准，管理体系是建立方针和目标并实现这些目标的体系。该标准的引言中说明："为了使用者的利益，本标准与ISO14001:2004相互趋近，以增强两类标准的相容性。……本标准使组织能够将自身的质量管理体系与相关的管理体系要求结合或整合。"这使得它与同是管理体系标准的ISO14001:2004环境体系标准的整合变得相对简单、合理和可行，这在ISO 9000:2008标准2.11条"质量管理体系与其他管理体系的关注点"中有了充分的论述。但HACCP不是一个管理体系，对于HACCP来说，他关注的不是其他另外的方针目标的制定和实现，因此HACCP与ISO 9000存在的仅仅是将相关的要求有机的结合，是将HACCP融入ISO 9000管理体系。所以我们提出对HACCP与ISO 9000质量管理体系进行融合，而不是进行体系整合（使之一体化）。因此，有必要研究ISO9000与HACCP之间的联系和异同，了解其差异，在建立质量管理体系过程中使两者相互弥补、相互融合、相互包容，使企业在建立其质量管理体系时进行系统的融合是非常必要的。通过分析HACCP与ISO 9000质量管理体系两者的差异主要如下：1. 关注点不同ISO 9001:2008标准是一个管理体系标准，它通过建立方针和目标并实现这些目标来达到对质量的指挥和控制，他关注的是使与质量目标有关的实现结果适当地满足相关方的需求、期望和要求。而HACCP所关注的不是总体方针目标的制定和实现，而是通过进行危害分析、确定关键控制点、制定纠偏措施，以防止食品安全危害。这是两个不同层次的系统，其建立的思路、使用范围和评价要求均不同。2. 对控制的范围要求不同ISO9001:2008与HACCP都要求对过程进行分析和识别和控制，但ISO 9001:2008是要求企业对全部的质量体系过程进行识别，它包括质量管理体系、管理职责、资源管理、产品实现及测量、分析和改进五个大的要素，其中既控制过程质量，又控制产品质量，最终达到顾客满意。而HACCP只要求企业对影响安全卫生的危害进行分析，对确定的关键控制点进行监控，通过７个方面的控制，达到预防、消除或降低危害。3. 对文件化的要求和证实程度不同ISO 9000与HACCP都需要建立程序，ISO 9000是要求企业建立文件化的质量管理体系，其中有6个要素要求企业建立并执行文件化的程序，并对文件的控制有着严格的要求。而HACCP仅要求企业建立记录保存程序和验证程序。ISO 9001:2008要求企业提供符合要求和质量管理体系有效运行的证据，而HACCP仅要求对分析、控制和验证过程加以证实。

我们是企业实验室，实验室申请CNAS,但我们还有GMP体系，有没有大侠知道，现在CNAS换版，GMP文件没有动，这应该如何融合？

IS09000质量管理体系和CCC国家强制性产品认证的融合运行l 绪言随着市场经济的发展，企业之间的竞争日益激烈。提高产品和工作质量在竞争中非常重要，而认证是质量管理和质量保证的一个重要手段。因此企业纷纷进行各种质量方面的认证。IS09000质量管理体系标准问世以来，在全球范围内得到广泛的采用，对推动企业的管理工作发挥了积极的作用。截止2000年底，全球获得IS09000质量管理体系认证的企业已达5O万家。在中国，至2000年底，共有4万多家企业获得IS09000质量管理体系认证证书。基于此，我所在的企业也进行了IS09000质量管理体系认证，经过几年的运行，情况良好，质量管理工作和产品质量明显提高。2002年5月1日我国建立了CCC强制性产品认证制度，对涉及人类健康和安全、动植物生命和健康以及环境保护和公共安全的产品实行强制性产品认证制度。由于IS09OOO质量管理体系认证和CCC国家强制性产品认证各有侧重点，且覆盖范围也不一样，因此，刚开始建立CCC国家强制性产品认证所需的文件体系时，我们采用自成体系的方法，并保证IsOg000所需的体系文件和CCC所需的体系文件互相兼容，这样做的优点是：大大减少了体系文件编写的工作量，具有针对性。CCC体系文件经过一段时间运行，问题暴露出来了，在企业具体实施过程中，有时一项工作要对应两套体系文件，由于这两套体系文件所要求的记录详细程度不一致，具体工作时很难把握尺度。而且一个企业同时运行两套系统文件，员工也很难掌握。所以，我们重新编写两套体系文件，将其合并为一套体系文件。我作为IS09000管理者代表和CCC质量保证负责人负责了该项工作，愿将其中的心得与大家共享。2 体系文件融合的基础我们之所以能够将IS09000标准和CCC认证要求的内容合并成一套文件，是由于CCC认证要求在制订时参考了IS09000标准。让我们看一下CCC认证要求对工厂质量保证能力要求的内容，像职责、资源、文件和记录、供应商的控制、生产过程控制和过程检验、检验试验仪器设备、运行检查、不合格品的控制、内部质量审核、包装、搬运和储存方面的要求均与IS09000标准要求基本一致。两者区别在于：1)CCC认证要求加入了认证产品一致性要求，而IS09000标准无此内容；2)CCC认证要求对元器件和成品的检验区分了例行检验和确认检验，而ISO9000标准未做此区分；3)ISO9000覆盖的范围涉及市场、技术、销售、生产、售后等多方面的内容，范围广，而CCC认证要求仅限于与产品生产有关的环节，范围窄；4)由于ISO9000是国际通用的最基础的标准，因此在共有要素的要求深度上，没有CCC认证要求深。3 体系文件融合的策略1)对于两个标准要求基本一致的内容，以企业原已在运行的ISO9000体系文件为基础进行修改；2)对于认证产品一致性要求，专门增加程序文件；3)对于元器件和成品检验有关的程序文件进行修改，以CCC认证要求为准。这是因为就这一项而言CCC认证要求严格得多；4)鉴于融合后的体系文件要同时满足ISO9000标准和CCC认证要求，文件的要求势必又广又深。这会给企业运行中带来一定压力。对此，我们必须配备相应的人、财、物等资源，加强体系文件运行的控制，建立一套奖罚分明的考核制度。4 融合后的体系文件经过大量的工作，制定出了新的体系文件，现将其目录列出如下：质量管理体系程序文件索引序号 文件名称Q／ZCK001-2003 技术文件控制程序Q／ZCK002-2003 管理文件控制程序Q／ZCK003-2003 质量记录控制程序Q／ZCK004-2003 质量方针目标管理控制程序Q／ZCK005-2003 管理评审控制程序Q／ZCK006-2003 人力资源管理控制程序Q／ZCK007-2003 生产设备控制程序Q／ZCK008-2003 采购控制程序Q／ZCK009-2003 合同评审控制程序Q／ZCK010-2003 设计开发控制程序Q／zcKO11—2OO3 检测设备控制程序Q／zcK012—2003 产品的监视和测量控制程序Q／zcKO13一z003 内审质量审核程序Q／zcKo14—2003 不合格品控制程序Q／ZCK01 5-2003 纠正和预防措施控制程序Q／ZCK0]6-2003 数据分析及持续改进控制程序Q／ZCK017-2003 产品搬运、防护、交付、售后服务控制程序Q／ZCK01 8-2003 顾客满意度控制程序Q／ZCK01 9-2003 产品标识和可追溯性控制程序Q／ZCK020-2003 工作环境管理控制程序Q／ZCK021-2003 生产和服务提供控制程序Q／ZCKg001—2003 产品变更作业指导书Q／ZCK9002-2003 CCC认证标志的使用控制作业指导书Q／ZCK9003-2003 关键元器件检验作业指导书Q／ZCKg004-2003 例行检验作业指导书Q／ZCKg005-2003 确认检验作业指导书5 效果目前，新的体系文件已在我公司成功运行，原来运行中的弊病已不复存在，公司顺利地通过了CCC国家强制性产品认证和ISO9000质量管理体系认证，我深深地体会到，我们不能为认证而认证，应该结合自己企业的实际情况，把握准认证的最终目的，让认证为我们的目的服务。摘自相关杂志

【序号】：6【作者】：【题名】：融合教育背景下中国特殊教育体系发展研究【书籍】：9787565130663【链接】：https://item.jd.com/10060468521956.html

内部实验室各个体系应该如何融合在一起？ISO 17025体系与9001体系是什么关系，是不是按照17025做就可以不用管9001了？怎样实现实验室的低碳环保？体现7S里的节约？本人目前处于企业内部的实验室，算是第一方吧，已通过了CNAS的实验室认可。但是现在出现了一些现象，以致目前以致比较纠结。1.实验室现在成为了公司对外参观的一个点，但是内部高层领导介绍CNAS时，总说可以进行第三方检测（第三方是要求有独立产权或法人什么的吧），这个时候作为实验室负责人如果进行提醒，会不会很落领导的面子和公司形象。如果不说，那么碰到一个懂行的人，岂不是很被动。2.公司的产品进入相关行业或企业需要进行一些认证，对其进行审核的时候能够审核实验室吗？还有就是一些客户在审厂的时候，它们总说实验室应该怎么样，应该怎么样，但是在管理体系里面也没有详细说明，但是客户总是认为你就应该按照他的来，没有任何依据，等等，像碰到这种情况，应该如何进行处理，可以说每个人的“口味”不一样，今天你按照他的进行整改了，明天她有过来说应该这样，他们从来都是这样说：这个应该这样吧，那个应该那样吧。从来不是说：按照体系/标准要求，需要这样做。对于这种情况，领导又要求你进行处理，这些应该怎样进行。3.在一个企业内部，主要是以效益为重，内部测试，可能就实验室的一些学历高的人员知道测试的方法及标准，送样人员等可能都不知道是干什么的，只是领导交代测试什么，他就写什么，甚至字都是写得同音字，对于这样的情况，如果每次让送样人填写测试方法与标准什么的，1000个可能就1个知道的，像这种情况，能实验室自己给他填写上标准吗？4.关于实验室制度上墙的问题，现在很多外部过来参观或是审核的，都是要求制度、规定什么要上墙。这里有两个问题：1）如果实验室的检测室分成了几个房间，是不是每个房间里都要上墙呢？2）什么叫要求、制度：可以说程序文件里面所有的都是要求、规定什么的。5.很多人都要求你将东西放在现场，他好查看：如一台设备，我们正常是放作业指导书和使用记录，但是有些人要求：设备的保养记录，维修记录、校准记录等等都必须放在现场，这样做合理吗？6.可能很多实验室都会碰到这样的现象：实验室在公司内部属于没有效益的部门，那么其待遇相对也是不怎么样的，但是很么实验室的工作确实一般的人做不来的：需要一些有经验的或是学历较高的人来完成，我们室一般都是本科。这样很多时候，本科的工资和高中、中专的人员差别也就100-200，而公司的普工每月算上加班也和他们差不多了，这样导致实验室的人员没有什么激情，每天都好像是在混日子，没有什么高效率，学习标准方法、专研技术等等。每天就是该做什么，按照什么做就行了。现在就是负责人什么事情都精通，待遇相对也高了近一倍，但是其他人员就没有什么起色。现在就是如果不给加工资，那么人员就会流失，又得新招进行培训。如果加工资，又担心维持现状，这样实验室的整体成本提升了，能力却没什么改变。公司的绩效考核什么的，奖罚制度又都是表面的花架子，没有落实到实处，都是主观考虑，没有根据客观数据考核。面对这种情况，每每都是很烦躁，总有种想不干了的想法。现在就是下面人员碰到什么问题，首先就是让我去解决，其实很多很简单的问题都要我去解决，小到什么东西不见了，也要我去一个柜一个柜的去找。这样导致我很多时间都浪费在处理芝麻绿豆的问题上，很多的一些想法，和实验室的相关制度的优化等等都没有时间去做。真心的感觉好累，心好疲惫。想给自己放个大假休息一下，好好思考一下。说这么多希望各位别喷，有些只是希望大家一起讨论一下。呵呵！顺提前祝各位新年愉快,往事如意！

[font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白（[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]融合蛋白）是指在基因水平上将目的基因同免疫球蛋白部分片段基因相连，并在真核或原核表达系统中表达的重组蛋白。抗体融合蛋白具有抗体的特性及融合功能蛋白的活性，可广泛应用于免疫诊断、免疫治疗、抗体纯化及抗体和抗原的定量分析等，特别可用于免疫导向药物的制备。根据结合的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段的不同，可以将抗体融合蛋白分为[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白与单链抗体（[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]）融合蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体融合蛋白结构：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、单链抗体融合蛋白研究表明，抗体可变区的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端空间结构上与互补决定区（[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]）形成的抗原结合部位十分接近，有的抗体可变区[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端残基甚至直接参与抗原结合部位的形成，如果将效应蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端结合，可能对抗体可变区的空间构型造成较大影响，从而降低抗体与抗原的结合能力。因此，通常将蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端进行结合，形成抗体融合蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在结构上是将抗体的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区与功能蛋白进行融合，可将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端或[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端与目的基因进行融合。根据结合蛋白的不同，可以有多种构型。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体融合蛋白作用原理：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]含有抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白与[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]融合蛋白含有抗体的可变区，可以进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应，其作用原理为利用抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原特异性结合的特性，通过这种特性的引导，将具有生物活性的蛋白靶向引导至细胞的特定部位，进而发挥一定的生物效应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]不含抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]该类融合蛋白含有的抗体功能区为[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区，不能进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应，[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段的作用为延长药物在血浆内的半衰期、增加融合蛋白的稳定性等。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白药理作用的发挥依赖于功能蛋白部分，利用受体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]配体之间的相互作用产生一系列的生物学效应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体融合蛋白制备：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]最初抗体融合蛋白制备的方法为化学交联法，但这种方法制备的抗体融合蛋白组成不均一、性能不稳定、免疫源性大，随着基因工程技术的发展，该技术已被淘汰。目前主要利用基因工程技术来进行抗体融合蛋白的制备。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]其制备原理为：将抗体基因与目的蛋白基因通过一段接头序列（[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]）进行链接，然后将链接产物亚克隆至载体中，并用原核或者真核表达系统进行表达。制备抗体融合蛋白过程中，一个关键的问题是两蛋白间的接头序列[/font][font=Calibri](Linker)[/font][font=宋体]的长度，[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]的长短对蛋白质的折叠和稳定性非常重要。如果接头序列太短，可能影响两蛋白高级[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]结构的折叠，从而相互干扰；如果接头序列太长，又涉及免疫原性的问题。抗体融合蛋白与双特异性抗体抗体融合蛋白是将抗体的部分片段与目的蛋白进行融合表达得到的重组蛋白，若将两个具有不同抗原特异性的抗体片段连接至同一蛋白，即可得到双特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单克隆抗体与抗体融合蛋白区别：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]单克隆抗体抗体[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]结构：[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]型[/font][/font][font=宋体][font=宋体]制备方法：杂交瘤技术[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]基因重组[/font][/font][font=宋体][font=宋体]表达系统：真核系统[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]原核系统[/font][/font][font=宋体][font=宋体]真核系统[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]原核系统[/font][/font][font=宋体][font=宋体]作用原理：特异性识别抗原，[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段引起[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ADCP[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]等作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]结构：具有多种结构[/font][font=宋体]制备方法：基因重组[/font][font=宋体][font=宋体]表达系统：真核系统[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]原核系统[/font][/font][font=宋体][font=宋体]作用原理：功能蛋白与靶分子间的受体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]配体的相互作用[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以参考：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=Calibri] [/font]

[font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白是一种将抗体片段与功能蛋白融合表达的重组蛋白，具有抗体的特性和功能蛋白的活性。它可广泛应用于免疫诊断、免疫治疗、抗体纯化、抗体和抗原的定量分析以及免疫导向药物的制备等领域。根据结合的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段的不同，可以将抗体融合蛋白分为[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]与[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体（[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]scFv[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]）[/b][/url]融合蛋白。制备抗体融合蛋白的方法主要有化学交联法和基因工程技术，其中基因工程技术是目前主要的方法。在制备过程中，需要注意两蛋白间的接头序列的长度，以确保蛋白质的折叠和稳定性。抗体融合蛋白在免疫学、生物制药和医学等领域具有广泛的应用前景，为疾病的诊断、治疗和药物研发提供了新的工具和方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体如何与蛋白融合[/font][font=Calibri]?[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]双特异性抗体是一种特殊的抗体，具有两个不同的抗原结合位点。通过技术手段，可以将双特异性抗体与另一种蛋白质融合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①使用基因工程技术，将双特异性抗体的基因与目标蛋白质的基因进行融合，然后通过表达载体在细胞内表达融合蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②使用化学手段，将双特异性抗体与目标蛋白质进行化学偶联。这需要使用特定的化学偶联剂，将双特异性抗体的特定基团与目标蛋白质的特定基团连接起来。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要注意的是，融合蛋白质的功能和性质取决于其组成成分的特性和比例，因此在融合过程中需要谨慎选择和设计组成成分，以确保融合蛋白质具有所需的功能和性质。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体融合蛋白具有广泛的应用，包括但不限于以下方面：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①免疫诊断：抗体融合蛋白可以用于检测抗原，如病毒、细菌、肿瘤标志物等。通过将抗体片段与荧光蛋白、酶等标记物结合，可以实现对抗原的高灵敏度检测。[/font][font=宋体]②免疫治疗：抗体融合蛋白可以用于治疗肿瘤、感染性疾病等。通过将抗体片段与细胞毒素、免疫调节因子等效应分子结合，可以实现对肿瘤细胞的靶向杀伤或调节免疫反应。[/font][font=宋体]③抗体纯化：抗体融合蛋白可以用于分离和纯化抗体。通过将抗体片段与亲和标签结合，可以利用亲和层析等技术实现对抗体的纯化和富集。[/font][font=宋体]抗体和抗原的定量分析：抗体融合蛋白可以用于定量分析抗体和抗原的浓度。通过将抗体片段与荧光染料等标记物结合，可以利用流式细胞术等技术实现对抗体和抗原的定量分析。[/font][font=宋体]④免疫导向药物的制备：抗体融合蛋白可以用于制备免疫导向药物，即将药物与抗体片段结合，利用抗体的特异性结合能力，将药物定向引导至病变部位，提高药物的疗效并降低副作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

如题：用于植物原生质体融合的电融合仪有哪些进口品牌，价位各是多少？另外，电融合仪怎么选型？

植物细胞原生质体制制备与融合2006-11-20 17:14植物细胞原生质体制制备与融合1、原生质体常现的杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示，逐渐将眼光转向细胞融合，试图用这种崭 图3-2新的手段冲破自然界的禁钢。１９３７年michel率先实施植物细胞融合的试验。如何去除坚韧的细胞'接成了牛物学工作者必须解决的首要难题。１９６Ｏ年该领域终于出现了重大突破。由英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶，成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体，开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞原生质体是指那些已去除全部细胞壁的细胞。2、原生质体制备（１）取材与除菌 为了让制得的原生质体一般都生活力较强，再生与分生比例较高。常用的外植体包括：种子根。子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、悬浮培养细胞和嫩叶。对外植体的除菌要因材而异。悬浮培养细胞一般无需除菌。对较脏的外植体往往要先用肥皂水清洗再以清水洗２～３次，然后浸人 ７０％酒精消毒后，再放进 ３％次氯酸钠处理。最后用无菌水漂洗数次，并用无菌滤纸吸干。（２）酶解 现以叶片为例说明如何制备植物原生质体。①配制酶解反应液：反应液应是一种ＰＨ值在５·５～５·８的缓冲液，内合纤维素酶０．３%～３．０%以及渗透压稳定剂、细胞膜保护剂和表面活性剂等，②酶解：除菌后的叶片 撕去下表皮 切块放人反应液 不时轻摇 (条件25℃～30℃,2～4h)反应液转绿。反应液转绿是酶解成功的一项重要指标，说明已有不少原生质体游离在反应液中。经镜检确认后应及时终止反应，避免脆弱的原生质体受到更多的损害。（３） 分离 在反应液中除了大量的原生质体外，尚有一些残留的组织块和破碎的细胞。为了取得高纯度的原生质体就必需进行原生质体的分离。可选取２００～４００目的不锈钢网或尼龙布ｊ叭ｉ过滤除渣，也可采用低速离心法或比重漂浮法直接获取原生质体。（４） 洗涤刚分离得到的原生质体往往还含有酶及其他不利于原生质体培养。再生的试剂，应以新的渗透压稳定剂或原生质体培养液离心洗涤２～４次。 （5） 鉴定 只有经过鉴定确认已获得原生质体后才能进行下阶段的细胞融合工作。由于已去除全部或大部分细胞壁，此时植物细胞呈圆形。如果把它放人低渗溶液中，则很容易胀破。也。'厂月荧光增白剂染色后置紫外显微镜下观察，残留的细胞壁呈现明显荧光。通过以上观测，基本上可判别是否原生质体及其百分中 此外，尚可借助台盼蓝活细胞染色、胞质环流观察以及测定人、作用、呼吸作用等参数定量检测原生质体的活力。4、 原生质体的融合（1）化学法诱导融合 化学法诱导融合无需贵重仪器，试剂易于得到，因此一直是细胞融合的主要方法。尤其是聚乙二醇（ＰＥＧ）纳合成钙高ｐＨ诱导融合法已成为化学法诱导细胞融合的主流。以下简介此方法（在无菌条件下进行）：按比例混合双亲原生质体-----滴加 ＰＥＧ溶液，摇匀，静置----滴加高钙高ｐＨ值溶液，摇匀，静置-----滴加原生质体培养液洗涤数次-----离心获得原生质体细胞团一筛选、再生杂合细胞。（２）物理法诱导融合 １９７９年Ｓｅｎｄａ等发明了微电极法诱导细胞融合。１９８１年Ｚｉ。。ｍａｎｎ等提出了改进的平行电极法，现简介如下：将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后，插入微电极，接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲，则使原生质体质膜被击穿而发生融合。电激融合不使用有毒害作用的试剂，作用条件比较温和，而且基本上是同步发生融合。只要条件摸索适当，亦可获得较高的融合率。上述操作实际上是供体与受体原生质体对等融合的方法。由于双方各具几万对基因，要筛选得到符合需要且能稳定传代的杂合细胞是相当困难的。最近，有人提出以Ｘ射线、伽玛射线。纺锤体毒素或染色体浓缩剂等对供体原生质体进行前处理。轻剂量处理可造成染色体不同程度的丢失、失活、断裂和损伤，融合后实现仅有少数染色体甚至是DNA片段的转移；致死量处理后合ｕ可能产生没再仅体万染色体ｗ划她旋余种。利用这种价值不对称融合方法，大大提高了融合体的生存率和可利用率。经过上述融合处理后再生的细胞株将可能出现以下几种类型．2） 亲本双方的细胞核和细胞质能融洽地合为一体，发育成为完全的杂合植株。这种例子不多。3） 融合细胞由一方细胞核与另一方细胞质构成，可能发育为核质异源的植株。亲缘关系越远的物种，某个亲本的染色体被丢失的现象就越严重。 4） 融合细胞由双方胞质及一方核或再附加少量他方染色体或ＤＮＡ片段构成。④原生质体融合后两个细胞核尚未融合时就过早地被新出现的细胞壁分开。以后它们各自分生长成嵌合植株。5、 杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞，一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养（液体或固体），再生出细胞壁后转移到合适的培养基中。待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。 (1) 杂合细胞的显微镜鉴别 根据以下特征可以在显微镜下直接识别杂合细胞：若一方细胞大，另一方细胞小，则大。小细胞融合的就是杂合细胞；若～方细胞基本无色，另一方为绿色，则自绿色结合的细胞是杂合细胞；如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征，则可作为识别杂合的标志；发现ｈ述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出，移置再牛培养基培养。（2）以互补法筛选杂合细胞 显微鉴别法虽然比较可信，但实验者有时会受到仪器的限制，工作进度慢且未知其能否存活与个长 遗传互补法则可弥补以上不足。 遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系。白化互补：不同基山叨的白化突变株出aBｘAh，可互补为绿色细胞株AaBb。生长互补：甲细胞株缺外源激素Ａ不能生长，乙细胞株需要提供外源激素Ｂ才能生长，则甲株与乙株融合，杂合细胞在不含激素Ａ、Ｂ的选择培养基上可能生长。抗性互补筛选：假如某个细胞株具某种抗性(抗青霉素)另一个细胞株具另一种抗性（如抗卡那霉素），则它们的杂合株将可在含上述两种抗生素的培养基上再生与分裂。这种筛选方式即所谓的抗性互补筛选。代谢互补筛选：根据碘代乙酚胺能抑制细胞代谢的特点，用它处理受体原生质体，只有融合后的供体细胞质才能使细胞活性得到恢复，等等。 （３）采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 经细胞融合后长出的愈伤组织或植株，可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ，见８．２．２．２）和随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析，以确定其是否结合了双亲本的遗传素质。（４）根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别质。

植物细胞原生质体制制备与融合1、原生质体常现的杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示，逐渐将眼光转向细胞融合，试图用这种崭 图3-2新的手段冲破自然界的禁钢。１９３７年michel率先实施植物细胞融合的试验。如何去除坚韧的细胞'接成了牛物学工作者必须解决的首要难题。１９６Ｏ年该领域终于出现了重大突破。由英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶，成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体，开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞原生质体是指那些已去除全部细胞壁的细胞。2、原生质体制备（１）取材与除菌 为了让制得的原生质体一般都生活力较强，再生与分生比例较高。常用的外植体包括：种子根。子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、悬浮培养细胞和嫩叶。对外植体的除菌要因材而异。悬浮培养细胞一般无需除菌。对较脏的外植体往往要先用肥皂水清洗再以清水洗２～３次，然后浸人 ７０％酒精消毒后，再放进 ３％次氯酸钠处理。最后用无菌水漂洗数次，并用无菌滤纸吸干。（２）酶解 现以叶片为例说明如何制备植物原生质体。①配制酶解反应液：反应液应是一种ＰＨ值在５·５～５·８的缓冲液，内合纤维素酶０．３%～３．０%以及渗透压稳定剂、细胞膜保护剂和表面活性剂等，②酶解：除菌后的叶片 撕去下表皮 切块放人反应液 不时轻摇 (条件25℃～30℃,2～4h)反应液转绿。反应液转绿是酶解成功的一项重要指标，说明已有不少原生质体游离在反应液中。经镜检确认后应及时终止反应，避免脆弱的原生质体受到更多的损害。（３） 分离 在反应液中除了大量的原生质体外，尚有一些残留的组织块和破碎的细胞。为了取得高纯度的原生质体就必需进行原生质体的分离。可选取２００～４００目的不锈钢网或尼龙布ｊ叭ｉ过滤除渣，也可采用低速离心法或比重漂浮法直接获取原生质体。（４） 洗涤刚分离得到的原生质体往往还含有酶及其他不利于原生质体培养。再生的试剂，应以新的渗透压稳定剂或原生质体培养液离心洗涤２～４次。 （5） 鉴定 只有经过鉴定确认已获得原生质体后才能进行下阶段的细胞融合工作。由于已去除全部或大部分细胞壁，此时植物细胞呈圆形。如果把它放人低渗溶液中，则很容易胀破。也。'厂月荧光增白剂染色后置紫外显微镜下观察，残留的细胞壁呈现明显荧光。通过以上观测，基本上可判别是否原生质体及其百分中 此外，尚可借助台盼蓝活细胞染色、胞质环流观察以及测定人、作用、呼吸作用等参数定量检测原生质体的活力。4、 原生质体的融合（1）化学法诱导融合 化学法诱导融合无需贵重仪器，试剂易于得到，因此一直是细胞融合的主要方法。尤其是聚乙二醇（ＰＥＧ）纳合成钙高ｐＨ诱导融合法已成为化学法诱导细胞融合的主流。以下简介此方法（在无菌条件下进行）：按比例混合双亲原生质体-----滴加 ＰＥＧ溶液，摇匀，静置----滴加高钙高ｐＨ值溶液，摇匀，静置-----滴加原生质体培养液洗涤数次-----离心获得原生质体细胞团一筛选、再生杂合细胞。（２）物理法诱导融合 １９７９年Ｓｅｎｄａ等发明了微电极法诱导细胞融合。１９８１年Ｚｉ。。ｍａｎｎ等提出了改进的平行电极法，现简介如下：将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后，插入微电极，接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲，则使原生质体质膜被击穿而发生融合。电激融合不使用有毒害作用的试剂，作用条件比较温和，而且基本上是同步发生融合。只要条件摸索适当，亦可获得较高的融合率。上述操作实际上是供体与受体原生质体对等融合的方法。由于双方各具几万对基因，要筛选得到符合需要且能稳定传代的杂合细胞是相当困难的。最近，有人提出以Ｘ射线、伽玛射线。纺锤体毒素或染色体浓缩剂等对供体原生质体进行前处理。轻剂量处理可造成染色体不同程度的丢失、失活、断裂和损伤，融合后实现仅有少数染色体甚至是DNA片段的转移；致死量处理后合ｕ可能产生没再仅体万染色体ｗ划她旋余种。利用这种价值不对称融合方法，大大提高了融合体的生存率和可利用率。经过上述融合处理后再生的细胞株将可能出现以下几种类型．2） 亲本双方的细胞核和细胞质能融洽地合为一体，发育成为完全的杂合植株。这种例子不多。3） 融合细胞由一方细胞核与另一方细胞质构成，可能发育为核质异源的植株。亲缘关系越远的物种，某个亲本的染色体被丢失的现象就越严重。 4） 融合细胞由双方胞质及一方核或再附加少量他方染色体或ＤＮＡ片段构成。④原生质体融合后两个细胞核尚未融合时就过早地被新出现的细胞壁分开。以后它们各自分生长成嵌合植株。5、 杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞，一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养（液体或固体），再生出细胞壁后转移到合适的培养基中。待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。 (1) 杂合细胞的显微镜鉴别 根据以下特征可以在显微镜下直接识别杂合细胞：若一方细胞大，另一方细胞小，则大。小细胞融合的就是杂合细胞；若～方细胞基本无色，另一方为绿色，则自绿色结合的细胞是杂合细胞；如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征，则可作为识别杂合的标志；发现ｈ述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出，移置再牛培养基培养。（2）以互补法筛选杂合细胞 显微鉴别法虽然比较可信，但实验者有时会受到仪器的限制，工作进度慢且未知其能否存活与个长 遗传互补法则可弥补以上不足。 遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系。白化互补：不同基山叨的白化突变株出aBｘAh，可互补为绿色细胞株AaBb。生长互补：甲细胞株缺外源激素Ａ不能生长，乙细胞株需要提供外源激素Ｂ才能生长，则甲株与乙株融合，杂合细胞在不含激素Ａ、Ｂ的选择培养基上可能生长。抗性互补筛选：假如某个细胞株具某种抗性(抗青霉素)另一个细胞株具另一种抗性（如抗卡那霉素），则它们的杂合株将可在含上述两种抗生素的培养基上再生与分裂。这种筛选方式即所谓的抗性互补筛选。代谢互补筛选：根据碘代乙酚胺能抑制细胞代谢的特点，用它处理受体原生质体，只有融合后的供体细胞质才能使细胞活性得到恢复，等等。 （３）采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 经细胞融合后长出的愈伤组织或植株，可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ，见８．２．２．２）和随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析，以确定其是否结合了双亲本的遗传素质。（４）根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别质。

[font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白，亦被称为[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]融合蛋白，是通过在基因层面上巧妙地将目标基因与免疫球蛋白的部分基因片段相互连接，随后在真核或原核表达系统中实现表达而得到的一种重组蛋白。这种独特的蛋白不仅继承了抗体的卓越特性，更融合了功能蛋白的活性，使其在多个领域展现出广泛的应用前景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在免疫诊断领域，抗体融合蛋白能够精准识别并绑定抗原，为疾病的早期发现和诊断提供了有力工具。在免疫治疗领域，它则能够引导药物直达病灶，提高治疗效果并减少副作用。此外，抗体融合蛋白在抗体纯化、抗体和抗原的定量分析等方面也发挥着重要作用，特别是在免疫导向药物的制备中，其重要性更是不言而喻。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据与[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段结合方式的不同，抗体融合蛋白可分为多个类型，包括[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]以及[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体（[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]scFv[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]）[/b][/url]融合蛋白。这些不同类型的抗体融合蛋白各具特色，为科学研究和临床应用提供了丰富的选择。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]结构[/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、单链抗体融合蛋白[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]研究表明，抗体可变区的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端空间结构上与互补决定区（[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]）形成的抗原结合部位十分接近，有的抗体可变区[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端残基甚至直接参与抗原结合部位的形成，如果将效应蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端结合，可能对抗体可变区的空间构型造成较大影响，从而降低抗体与抗原的结合能力。因此，通常将蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端进行结合，形成抗体融合蛋白。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在结构上是将抗体的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区与功能蛋白进行融合，可将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端或[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端与目的基因进行融合。根据结合蛋白的不同，可以有多种构型。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]作用原理[/font][/b][font=宋体]含有抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白与[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]融合蛋白含有抗体的可变区，可以进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应，其作用原理为利用抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原特异性结合的特性，通过这种特性的引导，将具有生物活性的蛋白靶向引导至细胞的特定部位，进而发挥一定的生物效应，也就是所谓的“生物导弹”。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]不含抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体][font=宋体]该类融合蛋白含有的抗体功能区为[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区，不能进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应，[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段的作用为延长药物在血浆内的半衰期、增加融合蛋白的稳定性等。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白药理作用的发挥依赖于功能蛋白部分，利用受体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]配体之间的相互作用产生一系列的生物学效应。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体融合蛋白制备[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]最初抗体融合蛋白制备的方法为化学交联法，但这种方法制备的抗体融合蛋白组成不均一、性能不稳定、免疫源性大，随着基因工程技术的发展，该技术已被淘汰。目前主要利用基因工程技术来进行抗体融合蛋白的制备。其制备原理为：将抗体基因与目的蛋白基因通过一段接头序列（[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]）进行链接，然后将链接产物亚克隆至载体中，并用原核或者真核表达系统进行表达。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]制备抗体[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]过程中，一个关键的问题是两蛋白间的接头序列[/font][font=Calibri]( Linker )[/font][font=宋体]的长度，[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]的长短对蛋白质的折叠和稳定性非常重要。如果接头序列太短，可能影响两蛋白高级[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]结构的折叠，从而相互干扰；如果接头序列太长，又涉及免疫原性的问题。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体融合蛋白与双特异性抗体[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体融合蛋白是将抗体的部分片段与目的蛋白进行融合表达得到的重组蛋白，若将两个具有不同抗原特异性的抗体片段连接至同一蛋白，即可得到[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]单克隆抗体与抗体融合蛋白区别[/font][/b][font=宋体] [/font][img=单克隆抗体与抗体融合蛋白区别,690,155]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403081113369902_7816_5907840_3.png!w690x155.jpg[/img][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

有没有公司这样，就是本身运行着ISO9000的管理体系，然后内部实验室通过了CNAS体系，实验室体系运行发生与其它部门冲突的情况，出现类似情况如何处理与运行的呢？

[font=宋体][b][font=宋体]什么是[/font][font=Calibri]fc[/font][font=宋体]融合蛋白？[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]是一种由免疫球蛋白（如[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等）的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段与目标蛋白序列融合而成的新型重组蛋白。通过将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域与其他蛋白质或肽段融合，可以赋予这些蛋白质或肽段新的特性和功能，同时利用[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域的稳定性和免疫系统的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体相互作用，增强融合蛋白的稳定性和半衰期。例如，普通重组[/font][font=Calibri]IL-2[/font][font=宋体]的体内半衰期较短，只有[/font][font=Calibri]6.9[/font][font=宋体]分钟，这限制了其在体内的持续作用时间。然而，通过与免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合，重组[/font][font=Calibri]IL-2/Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在体内半衰期延长了近[/font][font=Calibri]700[/font][font=宋体]倍，从而使其能够在体内更长时间地发挥作用。此外，延长半衰期还可以降低药物的剂量和频率，减少潜在的副作用和毒性。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白有哪些？[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]是一种由至少两个结构域组成的蛋白，这些结构域由被连接起来的独立基因编码，因此能够作为一个单元被转录和翻译，产生单克隆多肽。现在几乎所有的重组蛋白都是利用融合结构域制备，也被称为[/font][font=宋体]“标签”（参阅重组蛋白标签的完整列表）。因此，融合蛋白又称融合标签蛋白或嵌合蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]大体上有两种类型的融合蛋白：第一种是由两个蛋白或蛋白亚单位端对端融合，通常由一个[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]连接，第二种是来自两个供体的氨基酸穿插在融合蛋白产物中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白应用：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]融合蛋白最重要的三个用途是：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]作为克隆基因纯化的辅助手段[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]作为报告的表达水平[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]作为组织化学标签，使蛋白质在细胞、组织或生物体中的位置可视化[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白在纯化中可以通过亲和层析简单方便地纯化，如葡萄球菌蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]、谷胱甘肽[/font][font=Calibri]-S-[/font][font=宋体]转移酶[/font][font=Calibri](gst)[/font][font=宋体]、麦芽糖结合蛋白[/font][font=Calibri](mbp)[/font][font=宋体]和纤维素结合蛋白。 重组融合蛋白最常用作报告构建体的融合伙伴，包括 β[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]半乳糖苷酶、荧光素酶和绿色荧光蛋白 [/font][font=Calibri](GFP)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在融合蛋白中，最多的一类称为荧光蛋白，如绿色荧光蛋白（[/font][font=Calibri]GFP[/font][font=宋体]）、橙色荧光蛋白（[/font][font=Calibri]OFP[/font][font=宋体]）和黄色荧光蛋白（[/font][font=Calibri]YFP[/font][font=宋体]）。 绿色荧光蛋白 [/font][font=Calibri](GFP) [/font][font=宋体]等荧光蛋白能够直接观察动态细胞内过程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]绿色荧光蛋白（[/font][font=Calibri]GFP[/font][font=宋体]）是一种荧光蛋白，最初是从水母维多利亚发光管中分离出来的。 与荧光素酶不同，[/font][font=Calibri]GFP [/font][font=宋体]具有不需要任何底物、荧光素以及 [/font][font=Calibri]ATP[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]O2 [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]Mg2+ [/font][font=宋体]的优势。 [/font][font=Calibri]GFP [/font][font=宋体]在被蓝光或紫外线激发时会发出绿光，在许多情况下可用于活的、完整的细胞和生物体，从而确保 [/font][font=Calibri]GFP [/font][font=宋体]作为自发荧光蛋白的功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]融合蛋白标签[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在融合标签中，既有短序列（如[/font] [font=Calibri]PolyHis[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PolyArg[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]FLAG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]c-Myc[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Streptag [/font][font=宋体]等），也有大蛋白（[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]MBP [/font][font=宋体]等）。 在许多情况下，短序列不会影响分子的三级结构及其生物学特性，而大融合分子更常用于增强所需蛋白质的溶解度。 与短序列标签不同，需要从重组构建体中去除大的融合标签。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]有许多融合标签，既包含经过充分验证的标签，也包含最近开发的具有各种特性和不同优缺点的标签。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font]

月旭科技秉持分享传承生物制药相关技术，汇集生物制药相关细分技术，以生物技术分享传承和助力发展为初衷，月旭材料是集生物分离纯化介质研发、生产、销售于一体的高新技术企业。公司专注生物分离填料的研制和生物工艺下游技术工艺开发。有琼脂糖微球填料，葡聚糖微球填料，琼脂糖交联葡聚糖微球填料，琼脂糖交联纤维素微球填料，琼脂糖交联纤维素交联葡聚糖微球填料，涵盖离子交换，亲和，排阻和疏水等多款高品质填料。[b]融合蛋白不挂金属螯合亲和层析柱01 [/b][color=#1a237e][b]可能原因：[/b][/color][b]超声的功率不对( 太大，蛋白炭化，太小，蛋白没有释放)[/b][color=#fcb441]解决方法：[/color]改变超声功率或超声前尝试添加溶菌酶增加细胞破碎率。[b]02 [/b][color=#1a237e][b]可能原因：[/b][/color][b]组氨酸标签暴露不完全[/b][color=#fcb441][b]解决方法：[/b][/color]在变性条件下( 用4-8 M 脲，或4-6 M 盐酸胍) 进行纯化，常规Ni-6FF(IDA) ,在变性条件下镍离子容易脱落，此时可选择[b]耐受变性剂的螯合填料（推荐月旭材料的亲和填料Ni Tanrose FF(NTA)。03 [/b][color=#1a237e][b]可能原因：[/b][/color][b]His标签丢失[/b][color=#fcb441][b]解决方法1：[/b][/color]WB 检查His 是否表达，上游构建，改变His-tag 的位置(C- 端或N- 端)，必要时增加His 个数。[color=#fcb441][b]解决方法2：[/b][/color]孵育的时间不够，降低流速和增加孵育的时间。[color=#fcb441][b]解决方法3：[/b][/color]改变螯合的金属离子，寻找到最佳的结合金属离子。[color=#fcb441][b]解决方法4：[/b][/color][b]选择高载量高特异性的螯合填料（月旭材料的亲和填料 Ni Tanrose FF（IDA) )。融合蛋白结合在螯合填料上洗脱不下来01 [/b][color=#1a237e][b]可能原因：[/b][/color][b]洗脱条件太温和(融合蛋白质仍然结合在柱上，结合力较强)[color=#fcb441]解决方法：[/color][/b]增加咪唑的梯度洗脱或降低pH 来找出最佳的洗脱条件。[b]02 [/b][color=#1a237e][b]可能原因：[/b][/color][b]降低pH 的方法洗脱，若pH 低于3.5，会导致镍离子脱落[color=#fcb441]解决方法：[/color][/b]改变洗脱办法，咪唑竞争性洗脱。[b]03 [/b][color=#1a237e][b]可能原因：[/b][/color][b]蛋白已沉淀在柱上[color=#fcb441]解决方法1：[/color][/b]减少上样量，或使用咪唑的线性梯度而不是分步洗脱以降低蛋白的浓度。试用去污剂或改变NaCl 的浓度，或在变性条件( 去折叠) 下洗脱( 用4-8 M 脲，或4-6 M 盐酸胍)。[b][color=#fcb441]解决方法2：[/color][/b]蛋白在柱上变性固化，用0.5M氢氧化钠洗柱。[b]04 [/b][color=#1a237e][b]可能原因：[/b][/color][b]非特异性疏水或其他相互作用[color=#fcb441]解决方法：[/color][/b]加非离子去污剂到洗脱缓冲液(如：2% Triton X-100)或增加NaCl 的浓度。[b]05 [/b][color=#1a237e][b]可能原因：[/b][/color][b]在填料表面形成高密度融合蛋白的聚集[color=#fcb441]解决方法：[/color][/b]选择合适载量的填料，切勿一味追求高载量。[b]镍柱使用中出现棕色是怎么回事01 [/b][color=#1a237e][b]可能原因：[/b][/color][b]缓冲液中DTT的影响， DTT会对镍柱的颜色和纯化效率有很大的影响,在碱性的缓冲液条件下，镍离子会被DTT还原生成棕色的沉淀，所以要尽量避免DTT的参与。[color=#fcb441]解决方法：[/color][/b]若样品中含有DTT，在上样之前, 我们推荐采用不含还原性试剂的空白运行来除去任何较弱结合的镍离子；空白运行方法（使用不含还原剂的平衡液和洗脱液）1）5倍柱体积的双蒸水洗柱 ；2）5倍柱体积的平衡液洗柱；3）5倍柱体积的洗脱液洗柱；4）10倍柱体积的平衡液平衡。当不使用时，勿将Ni Tanrose 6FF（IDA）保存于含还原性试剂的缓冲液中。

[font=宋体][font=宋体]融合标签是已知的蛋白或多肽[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]可融合到目标蛋白上。在重组蛋白中，常常将目的蛋白末端与一些标签进行融合表达，这是为什么呢？常见的融合标签有哪些呢？它们都有什么区别呢？下面是[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag][b]融合标签蛋白纯化[/b][/url]常见问题解析分享：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]：什么是融合标签？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]：融合标签是指利用 [/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]体外重组技术，在目的蛋白 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端或 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端进行融合表达的特定蛋白、多肽或寡肽标签。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]：融合标签有什么作用？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]：重组蛋白通过融合标签与包被在固相基质上的特异配基结合，使重组蛋白定向固定并得以纯化，大大简化了重组蛋白的检测，同时既能保留天然蛋白的大部分结构，又能实现增加溶解度，防降解，促进分泌，便于纯化等功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]：融合标签的分子量和功能有关吗？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]：蛋白融合标签的分子量越大，对蛋白质本身的功能影响越大，所以大分子融合标签一般只用于检测或蛋白纯化等。常见的小分子量的融合标签，因其具有很多商品化的标签抗体，可以节省使用者制备目的蛋白的单克隆抗体的时间与成本。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]：是否所有的融合标签都需要切除？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]：融合标签较小，免疫原性也很弱，一般不需要切除，对蛋白质的后续应用和研究不会产生影响。但是有些大标签是需要切除的，例如：[/font][font=Calibri]Dsb [/font][font=宋体]蛋白、[/font][font=Calibri]FkpA [/font][font=宋体]蛋白、[/font][font=Calibri]GST [/font][font=宋体]蛋白、[/font][font=Calibri]SUMO [/font][font=宋体]标签等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]为了便于将重组蛋白的融合标签去除，在设计构建载体时需要在标签蛋白和目的蛋白之间加上蛋白酶识别位点，常用的蛋白酶位点有：[/font][font=Calibri]HRV 3C [/font][font=宋体]蛋白酶切位点、[/font][font=Calibri]TEV [/font][font=宋体]蛋白酶切位点、肠激酶切位点、[/font][font=Calibri]SUMO [/font][font=宋体]蛋白酶切位点等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]：融合标签加在 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端或 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端，有什么区别？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]：蛋白融合标签对于 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端或 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端的选择性对重组蛋白的结构与特性会造成一定的影响。例如，对于较难表达或较容易降解的蛋白，可将融合标签选择在 [/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’ 端，可以提高重组蛋白的稳定性，也可减小对重组蛋白的免疫原性。但是重组蛋白为分泌蛋白，在其分泌到高尔基体的过程中，处于 [/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’ 端的融合标签会随着 [/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’ 端信号肽的切除而切除，从而失去作用。在目的蛋白结构未知的情况下，可以分别于两端构建标记的表达克隆，以确定哪个更有效。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以参看义翘神州蛋白标签：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag[/font][/font]

[font='calibri'][size=13px]融合蛋白[/size][/font][font='calibri'][size=13px]是什么？[/size][/font][font='calibri'][size=13px]融合蛋白和单抗的区别[/size][/font][font='calibri'][size=13px]及优势？[/size][/font]融合蛋白是指将目标蛋白与免疫球蛋白融合而产生的新型重组蛋白，其中，目标蛋白可以是细胞因子、受体、抗原肽或者其他具有生物学活性等功能蛋白质。融合蛋白具有较强的生物活性，还具有一些抗体性质，可以用于疾病治疗，可以通过延长血浆半衰期，加强其治疗能力，同时，降低肾小球清除率，可以提高药物在体内的药物浓度。单抗即单克隆抗体，是由单一的B细胞克隆产生的抗单一表位的抗体，具有多个优点，包括高度的特异性：能够特定的针对单一的抗原表位，选择性的杀伤靶细胞，具有更强的疗效；安全性：由于单抗只针对靶细胞，对机体的其他细胞影响不大，相比其他药物不良反应少；多样性：不同的单抗结合，不同的抗原表位作用机制各不相同，可以针对不同的疾病选择相应的单抗。融合蛋白和单抗具有各自的优点和作用特点，近年来，对这两种相关药物的研究越来越多，对于一些恶性肿瘤等相关性疾病的治疗得到了较大的提高。因此，融合蛋白和单抗具有上述区别，但用于疾病的治疗各自有优势。单克隆抗体定制服务推荐：义翘神州是一家抗体试剂和定制抗体的领先供应商，目前已成功交付了数以万计的抗体项目，客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他生物技术公司等。针对定制单克隆抗体，义翘神州提供了一套全面的解决方案。我们将与您通力合作，完成从抗原设计、纯化和抗体验证的完整过程。义翘神州拥有包括杂交瘤、噬菌体抗体库和单B细胞在内的抗体发现平台， 我们可根据您感兴趣的靶点、抗体应用和时间表等，来选择最合适的技术平台。 此外，义翘神州还提供ELISA、WB、流式细胞术、IHC、基于细胞的筛选、亲和力检测等多种表征和筛选技术，确保最终鉴定到最佳的抗体，以满足研究、诊断和治疗领域等应用。单克隆抗体定制服务：https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services

[font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白是一种由免疫球蛋白（如[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等）的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段与目标蛋白序列融合而成的新型重组蛋白。通过将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域与其他蛋白质或肽段融合，可以赋予这些蛋白质或肽段新的特性和功能，同时利用[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域的稳定性和免疫系统的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体相互作用，增强融合蛋白的稳定性和半衰期。例如，普通重组[/font][font=Calibri]IL-2[/font][font=宋体]的体内半衰期较短，只有[/font][font=Calibri]6.9[/font][font=宋体]分钟，这限制了其在体内的持续作用时间。然而，通过与免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合，重组[/font][font=Calibri]IL-2/Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在体内半衰期延长了近[/font][font=Calibri]700[/font][font=宋体]倍，从而使其能够在体内更长时间地发挥作用。此外，延长半衰期还可以降低药物的剂量和频率，减少潜在的副作用和毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]结构域[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白的主要特点是含有[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段，这也是影响其理化性质和生物学活性的关键因素。类似于单克隆抗体的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段，融合蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段可以延长功能蛋白在血浆中的半衰期，增加分子的稳定性，并且能够特异性地结合体内的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体，发挥相应的生物学功能。此外，[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段还可以特异性地结合[/font][font=Calibri]protein A[/font][font=宋体]，有利于简化[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白的纯化过程，对相关生物制品的研发制备具有重要意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白功能[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]功能蛋白能特异性地识别某个靶点分子，并决定了融合蛋白的药理活性。功能蛋白的种类很多，可以是能结合内源性受体（或配体）的可溶性配体（或受体），或其他需要延长半衰期的活性物质，如细胞因子、毒素、酶等。功能蛋白的作用各不相同，主要包括抗炎性感染、抗病毒感染、抗瘤免疫、抗移植排斥、治疗痛觉过敏以及自身免疫性疾病的治疗等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri][url=http://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins]Fc[/url][/font][font=宋体][url=http://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins]融合蛋白[/url]的优势[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①延长半衰期：[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在血浆内有较长的半衰期。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与新生[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体（[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体]）的结合并呈[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]依赖性：在[/font][font=Calibri]pH 7.4[/font][font=宋体]的生理条件下，[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]不结合；在细胞内涵体[/font][font=Calibri]pH 6.0~6.5[/font][font=宋体]的酸性条件下，两者结合，从而避免了融合蛋白在细胞内被溶酶体等快速降解。另外，[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段能够增大分子体积，不易被肾小球滤过，也从一定程度上延长了半衰期。这就是[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白长效原理。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②增强稳定性：[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白通过[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]铰链区的二硫键连接形成稳定的二聚体。如果对二硫键进行基因工程改造，还可以使[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白形成更稳定的六聚体复合物。另外，[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域可以独立折叠，确保分子的稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③发挥生物学效应：[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白可以结合不同的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体，包括[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ [/font][font=Calibri](CD64)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ [/font][font=Calibri](CD32)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅲ [/font][font=Calibri](CD16)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ和[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体]，从而介导不同的生物学功能，如炎症反应、抗体依赖性细胞毒性（[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]）和补体依赖性细胞毒性（[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]）、调节细胞因子分泌等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可参看：[/font][font=Calibri]http://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins[/font][/font]

各省、自治区、直辖市生态环境厅（局），新疆生产建设兵团生态环境局：为贯彻落实《中共中央 国务院关于深入打好污染防治攻坚战的意见》《[url=http://law.foodmate.net/show-225808.html]空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量持续改善行动计划[/url]》《[url=http://law.foodmate.net/show-218038.html]减污降碳协同增效实施方案[/url]》等相关要求，完善大气污染物与温室气体融合排放清单核算体系，我部研究制定了《 [img=,16,16,absmiddle]http://law.foodmate.net/member/editor/fckeditor/editor/images/ext/pdf.gif[/img] [url=http://file1.foodmate.net/file/upload/202401/31/100744791514921.pdf]大气污染物与温室气体融合排放清单编制技术指南（试行）[/url]》，现予印发。[align=right]生态环境部办公厅[/align][align=right]2024年1月19日[/align]（此件社会公开）

我们要用玻璃融合枪,来融合安培瓶,就是那种玻璃房用的,有乙炔和氧气导管,燃烧的东西,不知道哪位有这东西

[font=宋体][b]什么是重组蛋白？[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production][b]重组蛋白[/b][/url]的产生是应用了重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]或重组[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统：原核蛋白表达，哺乳动物细胞蛋白表达，酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统，提高表达成功率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白和重组蛋白的区别[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、重组蛋白[/font][/font][font=宋体]重组蛋白是指应用基因重组技术，获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体，之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略，融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点，现已被广泛采用。[/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白是指通过重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]技术将你要表达的目的蛋白基因同表达载体上融合蛋白基因相连，这样表达出的蛋白质就会是同时具有目的基因蛋白和融合基因蛋白两个部分的重组蛋白。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白与重组蛋白不是一个层次上对立的概念，融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略，融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点，现已被广泛采用。融合蛋白又称标签（[/font][font=Calibri]Tag[/font][font=宋体]），常用的[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总结：在生物制药领域，重组蛋白具有较高的活性和纯度，更易吸收，安全性也更高的特点。重组蛋白的利用率也更高。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]为了生产重组蛋白，基因被分离并克隆到表达载体中。重组蛋白的生产需要蛋白表达系统、蛋白纯化系统和蛋白识别系统。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]获取重组蛋白的基本步骤：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]目标基因的扩增。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]插入克隆载体。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]亚克隆到表达载体中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]转化到蛋白表达宿主中[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]细菌[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大肠杆菌[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、酵母细胞、哺乳动物细胞或杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫细胞系统[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]重组蛋白鉴定试验[/font][font=Calibri](Western blot[/font][font=宋体]或荧光[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]大规模生产。[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大规模发酵[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]分离和纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要考虑多种因素：[/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]选择哪个宿主系统？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]如何分离和纯化重组蛋白？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]选择适当的表达宿主或使用正确的纯化方法并不容易，应考虑目标重组蛋白的性质。下面列出了一些重要因素：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]? 膜结合[/font][font=宋体]? 溶解度[/font][font=宋体]? 单或多结构域[/font][font=宋体][font=宋体]? 大小[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]分子量[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体]? 表达位置[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于大多数没有足够经验来表达和分离重组蛋白的人来说，重组蛋白的生产是非常耗时的。许多生物公司为各种不同规模的重组蛋白表达提供良好的服务，例如义翘神州[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]参考重组蛋白生产的详细服务清单）[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]义翘神州提供重组蛋白和[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]等相关信息，详情可以关注[/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白生产：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font]

在实验室管理体系文件中，有些是与CNAS认可相关的内容，有些是验厂内容，实验室不想“两张皮”，向把验厂内容和实验室审核资料进行融合，比如反恐资料， 如何融入CNAS体系中？大家是如何体现的？不妨说说

[font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]：根据是否需要发挥[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段结合[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]来介导抗体依赖细胞介导的细胞毒性（[/font][font=Calibri]antibody-dependentcell-mediated cytotoxicity[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]）或结合补体[/font][font=Calibri]C1q[/font][font=宋体]来介导补体依赖的细胞毒性（[/font][font=Calibri]complement-dependent cytotoxicity[/font][font=宋体]， [/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]）等的生物学活性，可将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白分为溶细胞性（[/font][font=Calibri]cyto-lytic[/font][font=宋体]）和非溶细胞性（[/font][font=Calibri]non-lytic[/font][font=宋体]）[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]溶细胞性融合蛋白[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由功能性蛋白与天然或活性提高的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合而成。不仅具有功能蛋白的生物学活性和长效血浆半衰期，并且保留 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段介导 [/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]效应的能力，可以靶向杀伤功能蛋白受体阳性细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]非溶细胞性融合蛋白[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由功能性蛋白与活性降低的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合，通过对[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段上补体受体结合域或糖基化模式的突变改造，调节[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]与相关受体的结合亲和力，降低或消除[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]效应，只保留功能蛋白的生物学活性和 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段长效体内半衰期，而不产生细胞毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白优势有哪些？[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]延长半衰期：[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在血浆内有较长的半衰期。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与新生[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体（[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体]）的结合并呈[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]依赖性：在[/font][font=Calibri]pH 7.4[/font][font=宋体]的生理条件下，[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]不结合；在细胞内涵体[/font][font=Calibri]pH 6.0~6.5[/font][font=宋体]的酸性条件下，两者结合，从而避免了融合蛋白在细胞内被溶酶体等快速降解。另外，[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段能够增大分子体积，不易被肾小球滤过，也从一定程度上延长了半衰期。这就是[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白长效原理。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]增强稳定性：[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白通过[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]铰链区的二硫键连接形成稳定的二聚体。如果对二硫键进行基因工程改造，还可以使[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白形成更稳定的六聚体复合物。另外，[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域可以独立折叠，确保分子的稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]发挥生物学效应：[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白可以结合不同的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体，包括[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ [/font][font=Calibri](CD64)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ [/font][font=Calibri](CD32)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅲ [/font][font=Calibri](CD16)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ和[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体]，从而介导不同的生物学功能，如炎症反应、抗体依赖性细胞毒性（[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]）和补体依赖性细胞毒性（[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]）、调节细胞因子分泌等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]蛋白的应用[/font][/font][/b][font=宋体]在临床方面[/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]）大部分 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白药物的作用机制为受体与配体之间的相互作用，同时辅以 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]片段的多种生物学功能。截止 [/font][font=Calibri]2014[/font][font=宋体]年 [/font][font=Calibri]9 [/font][font=宋体]月，已有 [/font][font=Calibri]9 [/font][font=宋体]种人 [/font][font=Calibri]IgG-Fc [/font][font=宋体]融合蛋白药物经美国食品及药品监督管理局（[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]）批准临床使用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]）[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白也可以作为一种新型疫苗形式，将病原体的部分抗原肽与 [/font][font=Calibri]IgG-Fc [/font][font=宋体]片段进行融合，诱导机体产生抗原特异性免疫应答。研究表明，[/font][font=Calibri]HIV-1 Gag p24[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]gp120 V3 [/font][font=宋体]以及流感病毒 [/font][font=Calibri]HA [/font][font=宋体]胞外域与小鼠 [/font][font=Calibri]IgG2a-Fc [/font][font=宋体]的融合疫苗，可提高小鼠抗原特异性体液免疫反应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]）[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白较传统蛋白类药物具有多种新特性，在全世界范围内受到广泛关注。随着相关技术与理念的不断进步，[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白在临床治疗、医学生物研究等领域必将发挥更大的作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在疫苗方面[/font][font=宋体][font=Calibri](1) [/font][font=宋体]疫苗设计的关键在于有效活化抗原递呈细胞（[/font][font=Calibri]antigen presenting cell[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]），由于 [/font][font=Calibri]APC [/font][font=宋体]表面能够表达 [/font][font=Calibri]FcR[/font][font=宋体]，所以抗原[/font][font=Calibri]-Fc [/font][font=宋体]融合蛋白能够作为抗原运载工具，借助[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段靶向结合 [/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]，缩短抗原在血浆中的游离时间，减少蛋白酶对抗原的降解，提高抗原半衰期，从而加强抗原的递呈。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri](2) [/font][font=宋体]转染抗原[/font][font=Calibri]-Fc [/font][font=宋体]基因的[/font][font=Calibri]DC [/font][font=宋体]细胞，不仅能够持续表达抗原[/font][font=Calibri]-Fc [/font][font=宋体]融合分子，产生较长效的免疫激活，还可以克服其他体外抗原刺激方法不可避免的问题，如抗原 [/font][font=Calibri]MHC [/font][font=宋体]复合物解离或细胞 [/font][font=Calibri]MHC[/font][font=宋体]分子降解。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](3) [/font][font=宋体]由于细胞内能够结合 [/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]并影响免疫反应的受体蛋白如[/font][font=Calibri]FcRL[/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]TRIM21[/font][font=宋体]等不断被发现，[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白类疫苗能结合的受体不仅仅局限于[/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]表面的[/font][font=Calibri]FcR[/font][font=宋体]，应用前景也将大大扩展。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[/font][font=Calibri]FC[/font][font=宋体]融合蛋白表达服务，更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins[/font][/font]

我公司是法定计量机构，按照JJF 1069-2012建立了体系文件并运行，目前公司打算申请CMA（涉及几何长度类的检测），后续可能还要申请CNAS（检测和校准一起），据了解CNAS包含了检测和校准实验室，请教哈如何在JJF 1069-2012的基础上，增加关于检测的内容，按照最新的CNAS文件，编写体系文件，方便公司管理。求各位大神帮助，万分感谢[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif[/img]

各位前辈好，有谁做过融合蛋白的还原性毛细管电泳分析吗？做单抗的话分离效果很好，但是做单链融合蛋白的就很少，烦请赐教，不胜感激

各位大神，请问电磁监测CMA体系和职业卫生咨询ISO体系能融合成一套运行体系吗？应该采取什么办法，注意什么？

随着信息化时代的商业环境在改变，面对国家食品行业的全面溯源大势，面对制造业信息化升级的大潮，企业建立产品追溯体系成为趋势。基于互联网，运用先进的物联网标识追溯技术，实现互联网和品牌的塑造，助力企业全程溯源和全网营销的追溯体系在食品企业中广泛应用。 食品质量追溯体系的原理: 结合物联网、云计算、大数据、LBS地理信息等技术，通过AUTOID手持终端采集设备、通讯网络和应用平台，利用智慧农业、防伪标签和二维码等设备技术，实现食品全程可记录，来源追溯，去向追踪，产品追回、责任追究的功能。追溯档案包括养殖/土壤、饲料/肥料、屠宰/收割、加工/包装、物流/消费等记录，相当于是食品的身份证。 建设食品质量追溯体系的必要性: 未来，只有符合国家法律法规追溯要求的食品才能上市流通。新修订的《食品安全法》第四十二条明文规定食品生产经营企业要建立信息化的产品质量追溯系统。国务院2015【95】号文件《关于加快推进重要产品追溯体系建设的意见》明确要求2020年前，我国的食品生产经营企业要建成产品质量追溯体系。 建立起追溯系统后，将解决食品企业的三大需求： 食品流通追溯,安心上市流通。 管理便利, 追踪流向防窜货，降低运营风险。 品牌得以保障,建立食品防伪体系,识别召回管理,使防伪更有效. AUTOID手持终端是追溯系统中不可或缺的组成部分，企业通过AUTOID手持终端的采集、录入、数据传输等功能将食品企业的生产、出入库、运输、销售等环节连接起来，实现追溯功能。未来，制造业将与信息化深度融合，基于物联网技术的产品追溯系统，有利于企业加强品牌建设和信息化、智能化升级，从而提升效率、整体实力和市场竞争力。