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血培养仪检测

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血培养仪检测相关的论坛

  • 微生物检测记录培养时间

    检测饮用水中的细菌总数,总大肠菌群等项目时,在采样记录的培养时间是48小时时期、24小时,还是这几点到几点?

  • 求助,致病菌检测和真菌培养

    请问。致病菌检测增菌之后划线需要在安全柜内进行吗,能否在安全柜旁边放置一个培养箱?还是划线之后通过传递窗放到培养室?真菌培养技数过程是不是也需要在安全柜进行?我们的培养室没有空调出风口,温度大概30度以上。这个培养箱的记录温湿度应该怎么写,万分感谢。困扰好几天了,以前做过相关实验。说实话一直没有在生物安全柜进行过。????

  • 【原创大赛】检验检测行业人才培养模式

    [align=center]检验检测行业人才培养模式[/align][color=#333333]检测行业是社会发展催生的新兴服务业。随着社会发展进步,基于全社会对使用产品的质量、对生活健康水平、对生产生活的安全性、对社会环境保护等方面要求的不断提高,检验检测行业随着兴起,并呈现巨大商机。[/color][color=#333333][/color][color=#333333] [/color][color=#333333]目前我国的检验检测行业[/color][color=#333333]体量增长迅速、近5年,我国检验检测机构数、营业收入、就业人口、出具报告、仪器设备、实验室面积等综合指标持续提升,年均增幅近10%。但是我国检验检测行业“小、散、弱”的基本面貌没有改变,96.1%的机构为小微机构,年均营业收入中位值仅137万元,人均年产值仅21万元。而作为我们事业单位制检验检测机构,在我国检验检测行业所占比重已不足31%,民营检验检测机构比例增加到46%。结构较10年前发生根本性变化。[/color][color=#333333]所以在当年大环境下,企业对于检验检测人才呈现出几大趋势:[/color][color=#333333]1、[/color][color=#333333]企业对专业人才的需求度和迫切度整体上升;[/color][color=#333333]2、[/color][color=#333333]企业更加重视核心专业人才;[/color][color=#333333]这就需要我们居安思危,通过健全薪酬激励体系,建立现代企业制度,规范人力资源管理,加大人力资本投入,建立人才培训体系等方面培养加强自我内功修炼,建立自己的人才培养模式与人才队伍建设体系。[/color][color=#333333]首先,在培训方面不遗余力,从员工入职培训开始搭建完整的培训体系。除了对不同岗位基层的员工进行专业技能与通用技能培训外,针对新毕业员工了解单位及所在岗位、管理培训,针对初级管理、中层管理人员等,努力为不同特点员工的发展打造量身定制的培训项目。[/color][color=#333333]其次,“双通道”的管理模式和人才选拔、培养体系。通过建设管理、技术双通道的人才选拔、培养体系,打造“专业人才发展通道”和“复合型管理人才发展通道”前者为在专业技能能力水平、知识层级较高、业务能力较强、在学科发展、专业建设等层面有突出贡献的人设置的发展通道,后者为那些在管理岗位上思想素质水平较高、管理能力较强、沟通协作与团队精神较好的复合型管理人才设置的职业通道。[/color][color=#333333]再次,人员轮岗。人员轮岗制度能够有效开发员工潜能,扩大员工知识领域,拓展职业生涯空间,进行全面锻炼提升并做好公司人才培养、储备拟提拔对象。有利于复合型人才的培养。[/color][color=#333333]最后,人才的重要性主要体现在两个方面。一是检验检测认证行业是服务性行业,需要具备新型专业背景的人才去提升服务技能,最终带动整个行业服务质量增长。二是对于企业自身来讲,有了高级的专业人员,才可能涉猎到更多的新兴领域并进行拓展,新兴领域将是行业未来抢占的重点,谁能拥有专业人才,谁将能获得占领市场的先机,获得参与检验检测认证市场快速发展的机会。[/color][color=#333333]可以预见,未来第三方检测检测认证行业的竞争,将是人才的竞争。为此,第三方检验检测机构要做好充足的人才储备。一个合格的检测管理人才至少需要3-5年的时间培养,检验检测机构应该在现金流比较充沛的时候未雨绸缪、储备人才,应该从粗放型的管理转入精细化的管理。在消费品检测领域向制造业学习,推进工厂化管理模式,提倡“管理出利润”;在工业品检测领域中加强垂直的技术贯穿能力,倡导一站式解决方案,只有这样才能应对未来激烈的市场竞争、产品竞争以及人才竞争,最终赢得市场。[/color][color=#333333] [/color]

  • 【讨论】“水中的细菌学测定”中的“阳性和阴性对照培养检查试验”是怎么检查的?

    《水和废水监测分析方法》四版中的“水中的细菌学测定”有提到要对培养基进行“阳性和阴性对照培养检查试验”,举个例子(摘自:表 5-2-4): 对照培养细菌类别 阳性 阴性粪大肠菌类 大肠埃希氏菌 产气肠杆菌是不是说要在培养基中分别加入大肠埃希氏菌和产气肠杆菌,看它们是否分别呈现阳性和阴性反应,如果阳性和阴性反应都符合要求的话培养基就合格?大家讨论一下,谢谢!

  • 【原创】检测机构如何加强人才培养和队伍建设

    一个检测机构要想长期存在和发展,离不开两大要素:设施条件和人员素质,而绝大多数检测机构都会通过政府扶持、项目投资等手段最终改善基础设施和仪器设备条件,所以质检机构发展和壮大的决定因素最终落脚在了人员素质上,如何提高人员素质、加强人才培养和队伍建设显得尤为重要。 当前,质检机构面临的形势非常严峻,主要表现为:1、面临着中国加入WTO后,国外检测机构即将深入内地的潜在威胁;2、面临着检测手段如何和国际接轨的巨大挑战;3、面临着国内庞大的检测机构之间,同高校及科研机构设立的实验室之间的残酷竞争;4、面临着如何加强自身建设,如何定位,如何创新等课题的探索。要想从容应对挑战,提高人员素质,加强人才培养和队伍建设迫在眉睫。我认为主要应着手做以下工作:1、通过“走出去,请进来”和自学等方式,加强人员的培训。主要培训内容为:农产品质量安全有关理论知识、先进的检测技术、标准制修订有关理论知识等。要[font=宋体][size=4][font=仿宋_GB2312][font=仿宋_GB2312]在工作中边学边干[/font][font=仿宋_GB2312],[/font][font=仿宋_GB2312]潜心钻研业务[/font][font=仿宋_GB2312],不断[/font][font=仿宋_GB2312]提升能力,努力使自己成为标准制定方面及主检项目领域内掌握高、精、尖技术的人才。2、给他们压担子,让他们在工作中不断加强锻炼,通过反复锤炼让他们强筋骨,迅速成长。3、建立和完善激励机制,充分调动他们工作的积极性、主动性,让待遇留人,让事业留人。 以上是我的浅薄看法,请大家赐教。[/font][/font][/size][/font]

  • 实验室对血培养污染的评估方案

    近年来,医生和实验室人员充分地认识到血培养的重要性,血培养成为诊断严重系统感染的最重要的实验室方法之一。在全球范围内进行血培养的数量不断增加。但是大家也清楚,近年来的血培养污染问题十分普遍,它浪费了大量的财力和物力,使实验室付出大量的额外工作,进行了许多不必要的试验和药敏测试,也经常误导临床医生的诊断和治疗工作。可能增加了病人的住院时间及医疗费用,并影响了医院病床的周转率。虽然确定血培养分离菌有无致病性较困难,但是如果能准确地区分致病菌和污染菌,将减少实验室和医院的浪费,并为病人节约医疗支出。目前关于菌血症的各种临床研究,已经为区别病原微生物和污染菌提供了一些指导性方案,但是,还没有一个区别病原微生物和污染细菌的金标准。对于血培养的分离菌的致病性的认识,近年来也发生很大的变化,例如凝固酶阴性葡萄球菌在过去几十年时间内,总是认为是血液污染菌,但是目前认为它经常是病原菌。因此对于这些细菌在血液中的临床意义的判断,是一棘手的问题。本文章的焦点是如何判断病原菌和污染菌。我们建立了一个实验室评估血培养污染的方案,并通过病例的回顾性调查,验证方案的可行性和准确性。材料和方法一、材料1. 仪器: 阿克苏全自动血培养系统(BacT/Alert 120)2.菌株:从1999年10月到2003年9月,北京天坛医院共进行血培养和其它无菌部位的体液培养9139次(接种阿克苏需氧瓶和厌氧瓶),分离出的细菌总数为1995株。其中对近一年的凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)89株,革兰阳性棒状杆菌15株,细球菌23株,芽胞杆菌10株,绿色溶血链球菌(VGS)12株,按我室拟定的方案进行致病菌与污染菌的分析,并用临床病历回顾性调查进行临床符合性判断。

  • 【求助】谁知道水中硝化细菌的培养基和检测方法

    请问各位,有做过水中的硝化细菌的培养和检测的么?如何确定水中有硝化细菌的存在,如何确定其数量,如何辨别其菌种?有没有相关资料和标准提供一下,谢谢~如果能快速测定和检出的更好,有仪器可以做的推荐一下也可以....

  • 【资料】微生物检测实验室无菌室可以放培养箱培养细菌及镜检吗

    我们是引用水分析实验室,在实验室的建设规划图上,看到在微生物区域的无菌操作室,也就是放超净工作台的房间,设置了镜检及细菌,大肠菌的培养箱。第一次看到感觉很吃惊,一般说来,培养箱都是放在外面的,我个人认为既然是无菌室,还在里边培养细菌,进行镜检,那还能是无菌室吗?简单的紫外照射可以去除空气中因培养镜检所带入的污染源吗?不知道这种安排出于什么理论,请大家赐教。

  • 悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的比较分析

    作者: 陈文庆 王建超 刘华杰 高飞 张韧 (北京清大天一科技有限公司 102200 ) (《中国兽药杂志》 2010.44 ( 10 ): 37-41 )【摘要】 采用反应器全悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒与微载体悬浮培养Vero细胞生产狂犬病毒分别与相应的转瓶培养工艺生产案例对比分析,比较悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的生产效益。分析显示,与转瓶培养工艺相比,反应器悬浮培养工艺获得的细胞密度、病毒效价、产品的产量和质量明显提高,生产时的能耗和劳动力需求明显降低。结果表明悬浮培养工艺的生产效益明显高于转瓶培养工艺,适宜于国内生物制品工业化生产的升级换代。【关键词 】 细胞培养;生物反应器;悬浮培养;微载体细胞悬浮培养技术是指细胞在生物反应器中自由悬浮于培养液内生长增殖的一种培养方法。根据细胞是否贴壁,又分为全悬浮细胞培养和贴壁细胞微载体培养。国际上该项技术发展较快,已趋向成熟,是疫苗、抗体等生物制品生产的普遍生产工艺模式。与转瓶培养技术相比,该工艺具有操作简单、产率高、容易放大等优点,本文结合口蹄疫病毒和狂犬病毒的生产,分别对细胞悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的经济效益等进行了分析和分析。1. 全悬浮培养口蹄疫病毒与转瓶培养案例对比高效、安全的病毒性疫苗是防止口蹄疫情发生的最有效方法。BHK21细胞是繁殖FMDV的理想宿主,早在1962年Capstick PB等就实现FMDV的悬浮培养。1965年Telling, R.C.等实现在不锈钢发酵罐中悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗。目前国外(Intervet公司、Merial公司)普遍已经采用2000~5000L反应器悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫苗。本文就本公司自主研发的650L生物反应器和无血清培养基进行悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗与转瓶培养工艺进行比较和分析。1.1主要材料细胞株:BHK21贴壁细胞株(中国兽医药品监察所)毒 株:FMDV-O型(某兽用疫苗企业)培养基:低血清MEM培养基(产品代号MD611)、BHK21细胞无血清培养基(北京清大天一科技有限公司)血 清:特级新生牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)仪 器:5 L反应器(德国贝朗),120L和650LCLAVORUS ® 生物反应器(北京清大天一科技有限公司)1.2实验方法1.2.1转瓶培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒将复苏的BHK21细胞在T75培养瓶中使用低血清培养基(含5%牛血清)培养,连续传代扩增接种15L转瓶,37 ℃培养48小时,传代比例为1:8-1:10,按常规方法接种病毒及维持液,细胞病变90%左右收获病毒液。1.2.2反应器全悬浮无血清培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒(1)贴壁细胞悬浮驯化培养:用BHK21细胞无血清培养基在恒温摇床或者方瓶中无血清驯化贴壁BHK21细胞,可采用直接驯化或者逐级降低血清驯化等方法,每代观察细胞数量和细胞活率,直至BHK21细胞在无血清培养基中的生长增殖速率正常,细胞活率达95%以上,并可连续稳定传代,说明细胞已适应无血清悬浮培养。(2)反应器用种子细胞扩增:采用反应器罐倒罐逐级放大技术,细胞从摇瓶→5 L反应器→120 L反应器→650 L反应器进行逐级放大培养。细胞培养方式为批培养,控制反应器各参数在正常范围:温度37.0 ℃、pH7.2~7.4、溶氧(DO)20~70%、搅拌转速50~150 r/min。(3)反应器培养口蹄疫病毒:待650 L反应器中细胞达到一定密度,提高培养pH至7.5左右,按一定比例直接接种口蹄疫病毒进行病毒维持培养,控制温度、pH、DO、搅拌转速等参数在合适范围,在线无菌间隔取样判断细胞病变情况并检测病毒毒价(LD50,TCID50),确定收获的最佳时间。1.3 细胞培养结果对比分别对低血清培养基15 L转瓶培养的贴壁BHK21细胞进行观察和细胞计数,反应器全悬浮培养的BHK21细胞取样进行数量和活率检测。培养条件和结果对比见表1。表1 转瓶培养和反应器全悬浮培养BHK21细胞对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442105_small.jpg http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442106_small.jpg http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442107_small.jpg 图1 转瓶BHK21细胞低血清培养48 hr,100X 图2 反应器全悬浮无血清培养48 hr,100X 结果显示,转瓶培养的BHK21细胞,培养48小时显微镜观察成致密单层,见图1,96小时细胞开始出现脱落死亡;反应器无血清全悬浮培养BHK21细胞48小时的细胞显微镜观察状态如图2,生长至96小时细胞密度可达5.4x106 cells/ml,活率维持在94%左右。从细胞数量比较,650L反应器培养一批的细胞数量相当于500~700个15 L转瓶培养的细胞总量。1.4 病毒培养效果对比两种不同培养工艺,细胞在满足活力要求的基础上,以同等条件分别接种FMDV病毒,取样测定病毒毒价,结果见表2。 表2 转瓶和反应器全悬浮培养BHK21细胞病毒毒价对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442112_small.jpg结果表明,无血清悬浮培养的口蹄疫病毒毒价(TCID50和LD50)检测不低于转瓶培养工艺。根据反应器低血清悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫完整病毒粒子(146S)检测较转瓶高10倍左右的情况,应用无血清悬浮培养工艺,杂蛋白含量更少,口蹄疫完整病毒粒子和口蹄疫疫苗质量均提高。1.5 反应器和转瓶经济效益估算对比依据培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒工艺过程要求,从细胞密度、病毒毒价、产品效力、资源环境、劳动力等方面进行简单对比,借以一窥二者的经济效益差别(见表3)。 表3 反应器无血清悬浮培养与转瓶培养BHK21细胞经济效益对比http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/10/A1380442114_small.jpg*按照反应器无血清悬浮培养一条生产线(5L-120L-650L)、转瓶体积15 L进行对比按照目前培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒质量要求,对悬浮无血清培养工艺的产能进行预估,一条5L-120L-650L的反应器生产线年生产病毒量约为2.1亿毫升,生产疫苗量约为4.2亿毫升。2. 人狂犬病毒微载体培养与转瓶培养的对比我国是受狂犬病危害最为严重的国家之一,近年报告狂犬病死亡人数均在2400人/年以上,一直位居我国各类传染病报告死亡数的前三位,根据有关国家成功控制狂犬病的经验,世界卫生组织提出倡议,到2020年消除人狂犬病。我国距此倡议目标还有大量工作要做,国内也对人用和兽用狂犬病疫苗的生产做了大量研究工作。下面就120L反应器微载体培养Vero细胞生产狂犬病毒效果与转瓶培养工艺和培养效果比较分析。2.1主要材料细胞株:Vero细胞株毒 株:aG株(细胞株和毒株均来自某人用疫苗企业)培养基:低血清199培养基(产品代号MD504)、 Vero细胞反应器培养用培养基(产品代号MD505), 均来自北京清大天一科技有限公司仪 器:5 L反应器(德国贝朗)、120LCLAVORUS ® 生物反应器(北京清大天一科技有限公司)血 清:特级新生牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)微载体:Cytodex 1 (美国GE

  • 【分享】微生物实验室常见培养基的用途

    1、 1、血琼脂平板:适用于各类细菌的生长,一般细菌检验标本的分离都应接种到血平板上。其中肉浸液琼脂中加兔血(对嗜血杆菌生长更好)或羊血均可。用血量为5%--7%.在血平板上除可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血环,菌落周围呈绿色为α-溶血。2、巧克力平板:该平板是用马血、羊血或兔血制备,因其含有X和V因子,嗜血杆菌、奈瑟菌等生长良好,血液标本培养增菌后有细菌生长,若移种该平板上有利于分离出更多的细菌。3、中国蓝平板或伊红美兰平板:可抑制革兰氏阳性细菌,是较好的弱选择性培养基,有选择性促进革兰氏阴性菌生长。发酵型革兰氏阴性杆菌因分解乳糖能力不同,在此种平板上的菌落颜色不同,便于鉴别菌种。该培养基不含胆盐,与SS平板配对用于大便中志贺氏菌和沙门氏菌的分离培养最为理想。4、麦康凯平板:该培养基中含有胆盐,为中等程度选择性,抑菌力略强,有少数阴性菌不生长。在麦康凯平板能否生长是非发酵菌鉴定的一个依据,如果用麦康凯平板作为原始标本分离的培养基时,应注意观察该标本在血平板上的细菌分离情况,以免遗漏部分被抑制生长细菌。5、SS平板:因含胆盐较高,有较强的抑菌力,用于志贺氏菌和沙门氏菌的分离培养。在目前商品培养基中,不同厂家的产品抑菌力不同,使用时应注意,选择性过强可影响检出率,所以最好是加上一种弱选择性平板同时培养。6、碱性琼脂或TCBS或庆大霉素琼脂或4号琼脂:用于分离培养霍乱弧菌及其他弧菌。选择其中1-2种作为常规检验用就行了,这几种培养基对肠道非致病菌的抑制力各不相同,使用时应有所了解。7、M-H琼脂平板(水解酪蛋白琼脂):专用于抗菌药物敏感试验。8、营养琼脂平板:用于纯化菌种和保存菌种,以及卫生细菌学方面的细菌总数测定培养基。9、营养肉汤:用于标本及各类细菌的增菌。10、TTC沙氏培养基:(氯化三苯四氮唑培养基)用于检测酵母菌和酵母样真菌分离。11、Cary-Blair运送培养基:用于空肠弯曲杆菌、霍乱弧菌、沙门氏菌和志贺氏菌的保存运送培养基,但在该采样管中的标本只能保存72小时。12、S.F培菌液(亚硒酸盐培菌液):用于肠道致病菌的增菌培养。注意该培养基灭菌后PH为7.1,有棕黄色沉淀物出现,不宜高压蒸汽灭菌,增菌培养时标本约占培养液体积的10%,培养时间不超过24小时,此培养基储存时不超过两个星期。

  • 食品中霉菌酵母菌检测用什么培养基好

    食品中霉菌酵母菌的检测依据国标4789.15有两种培养基,用孟加拉红好还是马铃薯-葡萄糖培养基好?有什么区别?[img]http://img.foodmate.net/bbs/static/image/smiley/default/sweat.gif[/img]

  • 不同恒温培养设备对利普斯E50 牛奶抗生素残留检测试剂检测结果的影响试验

    利普斯E50牛奶抗生素残留检测试剂对牛奶抗生素检测具有广谱性.此试剂不仅适合乳制品生产工厂对原料及成品半成品中抗生素的检测,更适合牧场和奶站对抗生素的源头控制,从而更有效地保证了乳品安全,使乳品真正达到"无抗"要求,符合消费者需求。而在检测过程中由于各个奶站配备的恒温培养设备不同,造成有时检测结果出现有差异。本试验就是将利普斯E50牛奶抗生素残留检测试剂运用三种不同的恒温培养设备进行检测,并读取结果,以验证其在是否存在检测结果的误差,并根据试验结果来总结经验体会,同时对该试剂的情况、使用方法及注意事项进行介绍。

  • 【资料】培养基手册(2005)

    一、培养基的历史体外培养(in vitro culture)包括:组织培养(tissue culture)、细胞培养(cell culture)、器官培养(organ culture)。顾名思义,就是将活体结构成分(如活体组织、活体细胞或者活体器官等)从体内或其寄生体内取出,放在类似于体内生存环境的体外环境中,让其生长发育的方法。广义组织培养与体外培养同义。体外培养已经历了约一百年的发展历史,但发展初期进程比较缓慢,没有引起很多学者的重视。直到上世纪50年代后期,体外培养技术才广泛应用于生物学研究的各个领域,使这项技术得到飞速发展。现在体外培养已成为细胞工程、基因工程、抗体工程的重要组成部分。细胞培养指从生物机体取出部分组织分散成单个细胞或直接从机体取出单个细胞,也可把体外培养细胞分散成单个细胞在体外条件下培养,细胞能继续存活与增殖。培养过程中细胞不再形成组织。发展与完善细胞培养技术围绕防止污染、改进培养方法、设计新型培养容器、设计不同的培养液等几个方面进行。1885年Roux温生理盐水培育鸡胚组织;1903年Jolly,1906年Beebe等发明了盖片悬滴培养;1907年Harrison培养蛙胚神经成功,开始创建盖片凹玻璃悬滴培养法;   1910、1912年Carrel采用无菌操作、更新培养基、传代,完善了悬滴培养法;   1924年Maximow采用双盖片悬滴培养法;  1923年Carral设计创立了卡氏瓶培养法,用此法可根据需要随时更换培养液,既有利于组织不断生长,又可以运用不同种类的营养液培养不同的细胞,极大地推动了当时组织培养研究。Earle等加以改进,使大量细胞能直接生长于玻璃瓶壁上,培养了正常细胞与肿瘤细胞的细胞株。至此大多数研究人员都采用培养瓶培养细胞。组织培养从二十世纪40年代起迅速发展,在培养容器、培养基和培养技术等方面出现了很多革新。在培养容器方面, 由简单的用试管、旋转管培养,发展到多种培养瓶培养,近年来,塑料瓶、皿、多孔培养板的使用已日趋普遍。在培养基方面,从50年代初,Parke、Eagle等设计出合成培养基后,从纯天然培养基到合成培养基、从鸡胚浸出液发展到动物血清(促细胞生长物),直至60年代设计出无血清培养基。首先反映在设计不同种类的缓冲盐溶液,以用来培养不同的细胞和洗涤细胞。Earle在1948年设计了含有碳酸氢钠等盐类的Earle氏盐溶液,Hank’s在1949年设计了Hank’s氏盐溶液。在培养技术方法方面,革新进展更为迅猛,Earle、Dulbecco等于1943年创建单层细胞培养法,首建长期传代的L-细胞系。   1948年Sanford创建单细胞分离培养法,获L-细胞纯系。   1951年Gey首建人肿瘤细胞——Hela细胞系。 1961年Hayflick首建人二倍体细胞系25种,开辟了应用新方向。  从50年代末开始,组织培养技术应用进入了一个繁盛的阶段,广泛应用于生物学和医学研究各个领域。   诱变建立遗传缺陷细胞株、杂交瘤技术制备单抗、发展细胞大量培养技术、利用重组技术构建工程细胞株,已成为生物工程的重要生产手段。 在连续灌注培养工艺方面,美国Ohashi,Ryo等人2001年报道采用2L一次性生物反应器灌注培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体,以Becton Dickenson Cell Mab+10%胎牛血清+1%聚醚F-68为培养基,最高活细胞密度超过1×107cells/ml;2001年瑞士Heine, Holger等人用带超声细胞分离器(UCS)的连续灌注搅拌罐生物反应器培养鼠杂交瘤细胞生产单克隆抗体,稳态培养时活细胞密度超过2×107cells/ml;2004年德国Thomas等人在1L搅拌罐生物反应器中培养rCHO细胞生产人MUC-1糖蛋白,采取葡萄糖浓度限制的高产率灌注工艺减少有害代谢物,代谢转向TCA循环增加,活细胞密度保持在(1~2)×107cells/ml。在流加悬浮培养工艺方面,美国麻省理工Xie Liangzhi等人2000年报道在2L生物反应器中流加培养杂交瘤细胞,通过营养控制降低氨和乳酸的比生成速率,补充培养基包括营养成分、胎牛血清和痕量金属,最大活细胞密度达到1.7×107cells/mL。

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