液相进标准

进液相，没有标准，制备供试品时该取多少量呢？

做质量标准时，为何要考虑液相的进样量？有啥要求？

一直是使用安捷伦的液相，做校正表的时候，选择包含原点或者强制的时候，结果变化不大。例如 浓度面积1.00731.67810.07327.8450.351611.9100.73235.1201.46482.8用excel做了2种曲线，一个过原点，一个不过。y=32.183x-1.9986 y=32.169x取我做的一个样品的数值，峰面积为86.7. 浓度为2.69（过原点），浓度2.75（不过原点）用岛津做同样东西。来自同一个容量瓶。 浓度面积1.0073452810.0730948650.351632014100.73308782201.46688222用excel作曲线：y=33260x-23596 y=33099x取和安捷伦同一个样品的数值，峰面积为88018，浓度为2.65（过原点），浓度3.35（不过原点）初次使用岛津的液相，对岛津校正曲线不了解，过或不过原点，差的很大。我是做药品检验的，由于一直用安捷伦的，没有在意标准曲线这个问题。现在用岛津的就发现差很大。那么按药典做中成药，用的外标法，该选过原点还是不过原点，谢谢？

请问：用液相做标准曲线，一种方法是进样体积相同，系列浓度和对应的峰面积得到；另一种是配制一个浓度的标准品溶液，用一系列进样体积（1、2、3、4、5、6），和对应的峰面积得到标准曲线。二者有区别吗？是不是在分析工作中都可以用？谢谢！

[align=center]岛津液相色谱标准操作流程及使用细则[/align] 在使用液相色谱仪时，分析者经常会遇见类似问题：由于更换了仪器厂家，色谱仪的正确使用流程存在差异，导致无法正常操作仪器。在以前的多篇文章中包含安捷伦液相色谱仪的操作流程及保养过程，今天我们为大家展示岛津液相色谱标准操作流程及使用细则。 岛津液相色谱仪作为国外做常规HPLC比较有名的公司，日本人做东西在外观上确实说的过去，并且仪器内部构造确实也是很有艺术感，就是质量可能有点问题。但是价格也很低也能说得过去。岛津价格算中等，整机耐拆耐折腾，几乎不用怎么采购备件的。下面为大家展示的是岛津液相色谱仪的使用步骤。1.首先打开机器的色谱泵、脱气机、检测器和柱温箱的开关，待仪器完成自检，自检完成后在检测器显示屏幕上出现波长后打开应用程序。2.拿一瓶新的三蒸水，将A滤头放入水中，打开A的阀门，purge后拧紧阀门。3.将B滤头放入乙腈或甲醇中，purge后关掉阀门。4.打开A、B泵，仪器参数设置中设置流速为0.5mL/min，B 80%，冲洗5-6分钟，冲洗结束后，设置流速为0，接液相色谱柱。5.拧开转接头，按照柱子方向接柱，接好后注意检查是否拧紧。6.平衡方法，点击单次分析开始而后保存在指定的文件夹。7.将B滤头从乙腈中拿出用水冲洗干净，放入水中，关B泵。8.打开B阀门后purge，关掉阀门。9.打开A、B泵，从0.1 mL/min的流速开始慢慢稳定升流速至0.5 mL/min，B 100%，稳定后冲10min水。10.慢慢降低流速至0mL/min，将B滤头放入含盐的流动相中，关B泵开阀门，purge后关闭阀门。11.打开A、B泵，慢慢升流速至0.5 mL/min，B 100%冲5min含盐流动相。12.修改B从100%为0%，冲洗10min水相。13.打开进样的方法文件，单次分析开始，命名确定。14.扳上盖取下，进样，扳下，洗针头，冲水。15.慢慢降低流速至0mL/min，将B滤头从含盐流动相中取出洗干净放入水中，打开阀门purge，慢慢升高流速B 100%冲洗10min水。16.打开A、B泵，打开收柱方法，单次分析开始，结束后拆柱子并连接好转接头。17.设置B 80%乙腈，1mL/min冲洗10min。18.关程序，关泵，关电脑。 在岛津色谱仪的使用过程中需要注意的细则：1.在不接柱子的情况下，以0.5mL/min的流速走水相，压力在1.5Mpa以内。2.液相色谱瓶中必须使用过滤头。3.流动相必须超声后再使用，注意观察乙腈长毛。 今天的岛津液相色谱标准操作流程及使用细则就分享到这，更多精彩内容下期分享。感谢仪器信息网提供原创大赛平台。

液相用外标法为什么要搞一个线性过原点的标准曲线？原子吸收我就懂，但是那是5个不同浓度的。为什么液相2个平行浓度的对照，分别进2针，要弄成2个级别的标准曲线？还要强制过原点？问过同事，说什么验证RSD什么的，听不明白说什么。

请教： 检测头孢中间体含量我们使用的是岛津LC15C高效液相色谱（流动为乙腈：水），标准曲线R值能达到4个9，在做样品定量分析过程中，同一样品进样两个浓度，平行测定，结果很平行（根据样品称样量与对应的峰面积计算结果绝对差值在0.3-0.5%），在连续分析的过程中发现，有时候所测含量连续偏高或者连续偏低的情况，是不是系统的问题呢？应该怎么解决？（我们现在就是更换流动相，重复再做标准曲线，有时候两台液相同时对比）谢谢大家！

各位大神，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]样品进样体积（20微升）和做标准曲线时进样体积（5微升）不一样，那样品跑出来的峰面积需要除4吗？

我想请教各位大侠:1.大家在做液相色谱实验时标准溶液是怎么使用的?一次性用完呢,还是一个标准用三个月(化学试剂的标准)或更长?2.如果长期使用的话,你们怎么保存?是分成小样,还是装在试剂瓶中(我们是放在定容的容量瓶中)?3.在配制下个标准溶液时,有没有用上一个标准标定(6次),建立记录做为本次标准的实际含量.4.在外国购进的标准中,大多说明直接使用,不必干燥.如果使用一次固然没有问题,但第二次怎么办,干燥吧怕对其结果有影响,不干燥吧有怕标准吸湿或别的情况对检测结果有影响?我们只好按3项做,不知道可行吗?有没有资料支持啊?谢谢!!!!

想问问大家，用液相测人参皂苷时需要衍生化吗？还是直接配了标准品就可以进样呀？还有流动相是用的是什么呢？

据悉液相的行业标准正在紧锣密鼓地制订和讨论中，国产液相不久就会有自己的标准。建议论坛通过协会把标准的讨论稿贴出来让液相版块的板油们学习讨论一下，也算是集思广益，群策群力吧。[em0703]

制作标准曲线疑问？！使用岛津的液相的工作站，标准点的数据文件都做出来了，待测样品的数据文件也做出来了接下来，要做标准曲线，在做标准曲线的时候，是不是不能把待测样品的数据文件一起放到批处理中？只使用标准点的数据文件！怎么利用做出来的曲线数据，来计算待测样品的浓度？

使用液相色谱定量分析时候采用外标法分析,请问按国家标准的话，配制标准溶液和试样溶液各几份？目前我都是配一个标准溶液 和2份 试样溶液(标识：试样A+试样B)分析的，请问这可行吗？进样顺序如下：进数针标样平行后+ 2针试样A + 2针试样B + 1针标样 请问下同行了兄弟姐妹，这样做法可行否？还有算结果时我是取最后1针标样和数针标样中的一针加和平均来算

药典方法示例：[b]黄曲霉毒素测定法[/b]混合对照品溶液的制备:精密量取黄曲霉毒素混合标准品(黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2标示浓度分别为1.0μg／ml、0.3μg／ml、1.0μg／ml、0.3μg／m1)0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。精密量取储备液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。分别精密吸取上述混合对照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线。[b]硫酸依替米星[/b]第二法 照高效液相色谱法（通则 0512）测定测定法:取依替米星对照品适量，精密称定，分别加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含依替米星1.0mg、0.5mg和0.25mg的溶液作为对照品溶液（1）、（2）、（3）。精密量取上述三种溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，以对照品溶液浓度的对数值对相应的峰面积的对数值计算线性回归方程，相关系数（r）应不小于0.99；[b]蜂蜜[/b]标准曲线的制备:分别精密称取果糖对照品1.0g，葡萄糖对照品0.8g，置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，摇匀，作为果糖、葡萄糖对照品储备液。另精密称取蔗糖对照品0.2g，麦芽糖对照品0.2g，置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈10ml，溶解，摇匀，作为蔗糖、麦芽糖对照品储备液。分别精密量取果糖、葡萄糖对照品储备液和蔗糖、麦芽糖对照品储备液，加40%乙腈配成不同浓度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖混合对照品溶液。精密吸取混合对照品溶液各15μl，注入液相色谱仪，分别测定。以对照品浓度为横坐标，以峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。[b]制作方法总结如下：[/b]1.称一份对照品制备作为对照品储备液；2.稀释成系列梯度浓度，取相同的进样量上机检测或配制一份对照品溶液取不同的进样量。 有一个系统风险在里面，就是对照品如果称量不准确，整个标准曲线就不准确。一般外标法都要求配制两份标准溶液，标准曲线法也应该配制两份标准溶液，一份用于制作标准曲线，另一份标准溶液用于标准曲线的校验，以减少系统风险。最准确的方法应该是每一个标准浓度点都应从称量开始，但也是成本最高的方法。

[color=#333333]我现在在做四环素类抗生素的试验，对于液相色谱的标准品不是很了解，请问一下大神们做液相色谱标准品的条件是什么？[/color]

最近做液相，我们是用外标法来做。但是每天都要重新称量标准品，不然用头天配制的标准品来标今天样品的含量，不是偏高就是偏低，有人能帮忙解决这个问题吗？头天的标准品第二天来跑峰面积一致

高效液相法测定血浆中药物浓度，在绘制标准曲线时，样品峰正常，但内标峰逐渐变大 没有规律是怎么回事？同一个样品连续进样，样品和内标均不发生变化。开始以为是内标不合适，连续换了几个内标还是一样的情况。以为是流动相的原因，换了流动相也是这种情况。

昨天和前天使用安捷伦1200进样，跑出来的峰型都没有问题，今天用同样的液相，同样的方法，跑标准品就出现了很多的杂峰，不知道为什么，求助！(p.s 在这期间，柱子出现了漏液情况，但是及时给修正了，这个和出现杂峰有关系么？)

测农残，液相标准曲线除了对R2的要求，对斜率有要求吗？文献标曲斜率为2点几，我用其他方法斜率为0.9几，斜率太低会影响检测结果吗？测试结果也用不到标曲，有固定的公式。

我们新购进一台岛津LC-20A液相，刚装的时候没发现问题，后来用时却发现数据报告中标准曲线怎么也导不出，用机子里存的原公司的样品图，却能很好的导出标准曲线，问过工程师，他说这可能是机子的设置问题，具体在哪，又说不出。对于这种问题，不知大家有没有碰过？我该如何解决？谢谢指教！

请教大家： 我们公司要做液相色谱LC-20A 期间核查，请问大家 噪音标准是多少，记噪音超过多少就是不合格的。 另外 岛津LC-20A 如何设置才能看到 峰宽 ？ 谢谢大家~！

想找一些用液相色谱用于环境检测的标准，最好是比较常用的标准。谢谢！

今天通过仪器论坛找到了如何在液相色谱中调出标准曲线，想要请教大佬，如何将自己测定的样品应用到标准曲线？？？？？急急急??????????

[color=#333333]我现在在做四环素类抗生素的试验，对于液相色谱的标准品不是很了解，请问一下大神们做液相色谱标准品的条件是什么[/color][color=#333333]请问有没有用[/color][color=#333333]HPLC[/color][color=#333333]做过红景天素和草质素苷这两种成分含量的，我试了几个柱子了都没弄出来，心好累啊[/color]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=17216]岛津高效液相色谱系统标准操作规程[/url]

液相专用标准试剂在哪里可以买到 主要是乳酸、乙酸、丙酸、丁酸

谁有“固相(微)萃取--高效液相色谱法测定水中阿特拉津”的标准方法！急急急！！！谢了！