肉质检测

http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/04/201504070812_540857_1611705_3.jpg记者用水质检测笔（即TDS笔）测试购买的A品牌通脊，显示为213毫克/升http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/04/201504070812_540858_1611705_3.jpg近年来不断有媒体报道，一些大型超市的生猪肉被换标签，以延长保质期。有的猪肉已经变质，被工作人员冲洗后接着卖。如今，随着天气转暖，如何买到新鲜的猪肉更加成为大家关注的问题。　　除了用鼻子闻、用手按压等常规办法之外，还有网友在网上发帖称，用测自来水电导率的水质检测笔也可以检测猪肉的肉质，数值越低，表示猪肉越新鲜。　　对此，新京报记者实验发现，在同一个超市购买的不同品牌的猪后腿肉，其电导率数值相差达42%，肉质差距明显。而同一种品牌的肉类，在室温和冷藏的情况下，室温放置的肉类电导率数值上升更快，这也说明肉越新鲜，电导率值越低。　　专家表示，电导率法目前不是国家标准，但是以往的检测发现，电导率法对猪肉的检测结果是可信的。不过，比较准确的测试方式是对猪肉浸液进行测试，而本次实验由于条件所限，直接对猪肉样品本身进行测试。　　与其他科学测试方法相比，电导率法相对简单，通过购买价格低廉的水质检测笔，市民在家中也可以简单尝试。如果条件允许，也可以拿测试笔对猪肉现场测试。　　【实验过程】　　记者在北京某大型超市购买该超市散装肉以及另外两种常见品牌的猪肉(分别用A、B、C代表)，每种品牌分别购买后腿肉、通脊两种肉。每份肉分成两份，一份放在室温下存放，一份放在冰箱冷藏，在买回10分钟、36小时两个时间点进行检测。　　检测时，将被检测的肉类样品切成条插入水质检测笔(即TDS笔)两个探针中，待数值稳定后读数。　　【实验结论】　　室温下猪肉电导率值翻倍　　结果显示，不同品牌肉类在刚买回来时，新鲜程度已有较大不同，A品牌的电导数值最低，B品牌后腿的电导数值最高，是A品牌的1.4倍、C品牌的1.2倍。　　在放置了36小时后，冷藏的猪肉中的后腿(瘦)、通脊，其电导数值都有所提高，三个品牌的后腿(瘦)肉分别提高了约14%、13%、35%。而放置在室温的电导数值上升则更高，三个品牌的后腿(瘦)分别比刚买来时提高了约215%、19%、70%，这也从侧面验证了电导率测猪肉新鲜程度的有效性。　　【专家说法】　　猪肉鲜度下降产生导电性物质用水质检测笔测猪肉新鲜程度是何原理？专家介绍，水质检测笔(即TDS电导率笔)原本是用来测水的电导率，从而间接反映出水中的溶解性总固体，一般来说，水质越差，其电导率值也越大。　　按照国家标准，自来水的TDS值不能高于1000毫克/升。而用水质检测笔测猪肉时，猪肉鲜度下降时其组成成分发生分解，分解产物中有大量具有导电性的物质，从而根据其电导值高低来推断其新鲜度，越不新鲜的猪肉，电导值越高。　　中国农业大学食品科学与营养工程学院副教授朱毅表示，电导率法目前不是国家标准，但是以往的检测发现，电导率法对猪肉的检测结果与国标检测结果呈高度正相关，也就是说，电导率法对猪肉的检测结果是可信的。　　此外，食品安全专家表示，在自然光线下，观察肉的表面色泽、用手按压猪肉表面等感官检测也能对猪肉肉质有所判断，具体方式见下表。======================================================================= 这个经验是否可以移植到其他肉类和植物上呢？

[align=center][b][/b][/align][align=center][b]中药注射剂鞣质检测综述[/b][/align][b]一、前言[/b]鞣质又称单宁或鞣酸,是存在于植物中的一类分子较大的复杂多元酚类化合物, 分子量主要在300-3000之间， 能与组织蛋白结合形成硬结，导致注射局部组织肿瘤、坏死[sup]［[/sup][sup]1[/sup][sup]］[/sup]，因此在中药注射液中必须除去。文献报道[sup][/sup] 鞣质不仅具有收敛、止血、抗菌，而且还有抗氧化、抗诱变、抗炎抗过敏、改善肾功能、抗肿瘤和抗癌变、改善肾功能、调节血糖及防錦等药理作用。约70%以上的中草药中含鞣质类化合物，含鞣质的生药如麻黄、盐肤木、柯子、肉桂、牡丹皮、老鹤草、芍药、石榴、孩儿茶等。它是由没食子酸（或其聚合物）的葡萄糖（及其它多元醇）酯、黄烷醇及其衍生物的聚合物以及两者混合共同组成的植物多元酚。鞣质常作为杂质除去，因为在中药注射剂中，鞣质除了会影响制剂的稳定性和澄明度外，还可能会引起一系列严重的生理反应。鞣质从平均分子量及结构看，进入机体后极有可能作为半抗原与血浆蛋白的氨基结合成更大分子的复合物，引起机体的变态反应。鞣质的化学性质活泼，其水溶液放置后会发生氧化和聚合作用生成沉淀影响制剂的稳定性，并且能与组织蛋白结合导致不良反应的发生。[sup][/sup] 肌注含鞣质的注射液局部组织会有牵引痛和压迫痛，因此鞣质被认定为中药注射剂的过敏因子，充分认识中药注射剂中鞣质成分，保证中药注射剂质量的安全性，成为亟需解决的问题之一。在《中国药典》( 2015 版四部) 制剂通则中，对中药注射剂除通则项下检查项目外,还应控制蛋白质、鞣质、树脂等有关物质,要求采用定性检测法对中药注射液中的鞣质进行检查，其中鞣质检查法有鸡蛋清法(简称I法)和氯化钠明胶法(简称Ⅱ法)。并规定，含有聚乙二醇、聚山梨酯等聚氧乙烯基物质的注射液，虽有鞣质也不产生沉淀，对这类注射液应取未加附加剂前的半成品检查。[b]二、鞣质的结构分类：[/b]根据其化学结构性质主要分为三大类：可水解鞣质、缩合鞣质以及复合鞣质，目前研究较多是前两类。可水解鞣质分子内具有醋键或苷键，在稀酸作用下易水解，产生多元醇和小分子类酴酸，根据其水解所的酸酸及多元醇的不同，将其分为没食子酸鞣质、逆没食子酸鞣质（即鞣花鞣质）、可水解鞣质低聚体、C-苷鞣质和咖啡鞣质等五大类，含这类鞣质的生药有五味子、没食子、地榆、大黄、丁香等。缩合鞣质各单元之间主要是以破碳键或碳氧键缩合而成，不同于可水解鞣质，其不能被水解，只能缩合。缩合鞣质中的原花青素类是由不同数量的儿茶素、表儿茶素或没食子酸缩合而成，根据聚合度的大小，通常将二至四聚体称为低聚体原花青素，将五聚体以上的称为高聚体。[sup][/sup][b]三、鞣质的提取分离[/b]：提取鞣质的方法包括浸渍法、渗漉法、离心提取法、组织破碎法、回流提取法、连续回流法和微波辅助提取法。目前最为常用是超声波提取法，超声波提取法由于提取时间短，提取效率高，可以避免样品受热分解，并且溶剂容易回收，有利于鞣质的分离纯化及更深入的研究等优点。鞣质的粗品提取液，仍然是混合物，可采用溶剂法、沉淀法、柱色谱法和高效液相色谱法等方法进一步分离纯化。溶剂法是通过乙醚或氯仿萃取除去亲脂性杂质及色素，再用乙酸乙醋或正丁醇将鞣质萃取出，除去无机盐和其他水溶性杂质。沉淀法利用鞣质能与蛋白质和生物碱发生沉淀的性质，常选明胶或咖啡因进行分离纯化。柱色谱法是分离纯化操质较成熟的方法[sup][/sup]，根据化合物类型可选用不同的层析系统，或是将多个层析系统相结合。[b]四、鞣质的鉴别方法：（一）、理化鉴别[/b]：主要根据鞣质能与蛋白质、重金属盐、生物碱等产生沉淀的化学性质，通过与三氯化铁、氯化纳明胶、溴水、乙酸铅、香草醛-浓硫酸和石灰水等反应对药材中鞣质进行初步的鉴别[sup][/sup]。实验过程中需控制反应试剂的用量，选用一定的阳性药材作对照；效果会更直观明显。《中国药典》对中药注射液中残留的鞣质检测主要依据该性质，采用蛋清沉淀法和酸性明胶沉淀法，王晓春等[sup][/sup]对这两种方法的进行考察，结果表明：酸性明胶沉淀法灵敏度相对高于蛋清沉淀法，每1ml含0.05mg鞣质即可检出。利用理化性质只能对药材或样品中鞣质进行初步的识别，并且存在一定误差和干扰，进一步鉴别可采用灵敏度高、专属性强的光谱法和色谱法。[b]（二）、光谱法1、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]法（NIRs）[/b]利用近红外光包容的物质信息进行分析的一种技术，主要反映的是样品中、和等含氢基团的倍频与合频振动吸收，光谱特性稳定，信息量大，能够反映样品的结构和组成信息。邢丽红等[sup][/sup]运用技术快速测定丹参注射液醇沉工艺过程中鞣质含量。该法侧重于中药注射剂的在线质量控制，评价醇沉去除鞣质的工艺，为中药生产工艺全程中鞣质浓度快速检测提供了新方法，对实现醇沉过程的控制及优化、保证最终产品安全合格以及进一步提高工艺水平有重要意义。[b]2、红外光谱法（IR）[/b]通过将中药粉末或其不同极性溶剂提取物采用压片法或涂片法在红外光谱区域内进行测定，根据得到的图谱差异进行成分鉴别。魏永燕等[sup][/sup]在中药仙鹤复方总鞣质提取分离工艺研究中运用红外光谱技术间接判定中药仙鹤复方主要含缩合鞋质。(近）红外光谱法的最大优势在于特征性强、操作简单、快速准确、不破坏试样，但其灵敏度低于色谱法。目前，尚未报道用该法检测中药注射液中鞣质，对于中药注射刻中残留的微量鞣质检测，若光谱法灵敏度达不到要求时，可以考虑色谱法。[b]（三）、色谱法1、薄层色谱法（TLC）[/b]该法常釆用上行法、双向展开技术，选择不同极性的溶剂体系，对含鞣质的药材提取物或样品进行薄层展开，利用紫外灯或显色剂显色斑点，根据特征斑点进行鉴别：香草醛-盐酸试剂使缩合鞣质显红色斑点；碘酸钾试剂使没食子鞣质显橙色或黄褐色斑点；亚硝酸纳试剂使鞣花鞣质显黄褐色斑点。文献常选没食子酸或单宁酸为阳性对照，用于中药或注射液中可水解鞣质的鉴别。聂万松[sup][/sup]采用薄层色谱法对香丹注射液进行残留鞣质检测，结果表明：该法优于《中国药典》蛋清沉淀法，避免假阳性的发生，当中药注射刻中有效成分为多羟基酚时，建议采用该法。薄层色谱法具有快速、经济、操作简单、适用范围广的特点，但其属于一种开放系统色谱，色谱层析行为受环境因素影响较为明显，且灵敏度和专属性低于高效液相色谱法。[b]2、高效液相色谱法（HPLC）[/b]随着色谱技术的快速发展，广泛用于鞣质的鉴别，除了采用正相或反相HPLC直接鉴别药材或样品中鞣质外，更多釆用间接方式对鞣质进行鉴别，即通过反相直接测定药材或样品水解前后没食子酸或鞣花酸的变化情况，间接判定可水解鞣质的存在[sup][/sup]，尹胜利等[sup][/sup]用HPLC法对比茵栀黄注射液酸水解前后的产物，检测到酸水解液中没食子酸，表明茵栀黄注射液中含有一定量的可水解鞣质。缩合鞣质的检测一般是先釆用苄硫醇、半胱氨酸盐酸盐等对药材进行硫解，使缩合鞣质单元间连接键发生断裂，再采用反相直接测定药材或样品硫解前后儿茶素、表儿茶素或儿茶素没食子酸酯等变化情况，间接推测缩合鞣质的存在。 该方法为定性鉴别鞣质以及进一步定量检测鞣质奠定基础。[b]3、色谱-质谱联用技术（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]）[/b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]将高效液相色谱优秀的分离能力与质谱高灵敏度和高专属性的检测有机地结合在一起，为中药复杂体系中化学成分的快速识别和鉴定提供了重要的方法。文献有通过用直接鉴别鞣质类成分，王克建等[sup][/sup]利用HPLC-ESI-MSn法对核桃仁中多酚类物质组成进行了分析，检查出种多酚类的同分异构体，该方法在缺少标准品的情况下，能够对粗提物中微量的成分进行有关结抅分析，具有操作简单，专属性强、灵敏度高的优点。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]除了在专属性、检测限、灵敏度方面优于HPLC外，还能根据文献报道的裂解规律，对缺乏对照品的成分进行鉴别，如缩合鞣质硫解产生的苄硫化合物，有利于全面准确鉴别中药或注射液中鞣质。对于痕量成分的分析，具有其他分析方法所不能比拟的优点，有望成为中药注射液中残留鞣质检测的新方法。[b]五、鞣质的含量测定[/b]中药鞣质的含量测定方法已经比较成熟，通常采用以下几种：[b]①磷钼钨酸-干酪素比色法[/b][sup][/sup]：作为2015版药典测定总鞣质的方法，具有操作简便、选择性好和测定结果准确等优点，有利于物质中含较低鞣质的测定。应用该方法需注意几点：磷钼钨酸与多酚类物质的显色反应时间，尽量控制在90～120min内；干酪素适宜量为0.6g；选29%碳酸钠溶液，需注意温度的控制，或者选用低于此浓度的碳酸纳溶液，由于此浓度在室温低25℃容易析出结晶，影响测定结果。[b]②分光光度计法[/b]：国外文献常用此法测定果査、果汁、茶叶、啤酒、高粱及植物药中总鞣质，该方法常选用Folin-Ciocalteu试剂、氯化铁、5%盐酸-丁醇、Folin-Denis试剂、偏钒酸铵等显色制，其检测的波长范围一般在500～700nm之间。此外，根据鞣质在紫外区左右处有较强的紫外吸收，可以用该法对鞣质成分进行定量分析。[b]③络合量法[/b]：根据鞣质与金属离子能生成络合物沉淀的原理，对剩余量滴定。该方法操作较简单，可避免了沉淀转移，洗涤等复杂的程序，无需空白对照实验，且该法精密度和准确度都较高，终点也较清晰，观察较直观。[b]④高效液相色谱法[/b]：无论水解鞣质还是缩合鞣质都可以用该方法测定，由于它系统误差小、样品取量少、灵敏度高、重现性好，样品前处理简单，已成为一种有效和准确的鞣质含量测定方法，由于鞣质类成分较为复杂，常采用HPLC检测可水解鞣质的酸水解产物没食子酸或鞣花酸，间接测定可水解鞣质含量[sup][/sup]。[b]⑤香草醛-硫酸/盐酸法[/b]：基于酚醛缩合反应，主要用于缩合鞣质的含量测定，该方法有着较高的精密度和准确度，不足之处在于测含量较低的提取物时体系透明度较低，存在一定干扰。关于中药总鞣质含量测定方法干扰存在成为较普遍问题，测定的结果与药材实际所含的鞣质有一定偏差，试验过程可优选2015版药典方法，对于鞣质结构类型明确的药材，可优选高效液相色谱法。[b]六、《中国药典》( 2015 版四部)规定《中国药典》( 2015 版四部) 2400 注射剂有关物质检査法：[/b]除另有规定外，取注射液lml,加新配制的含1%鸡蛋清的生理氯化钠溶液5ml，必要时，用微孔滤膜(0.45μm)滤过]，放置10分钟，不得出现浑浊或沉淀。如出现浑浊或沉淀，取注射液lml，加稀醋酸1 滴，再加氯化钠明胶试液4〜 5 滴，不得出现浑浊或沉淀。[b]6.1《中国药典》( 2015 版四部)2202 鞣质含量测定法（[/b]磷钼钨酸-干酪素法[b]）[/b]本法用于[b]中药材和饮片[/b]中总鞣质的含量测定。实验应避光操作。[b]对照品溶液的制备 [/b]精密称取没食子酸对照品50mg，置100ml棕色量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密量取5ml,置50ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得(每lml中含没食子酸0.05mg)。[b]6.2 标准曲线的制备[/b] 精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.Oml, 分别置 25ml 棕色量瓶中，各加人磷钼钨酸试液lml ,再分别加水1.5ml、11ml、10ml、9ml、8ml、7ml ,用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇勾，放置3 0分钟以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(通则0401)，在760nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。[b]6.3供试品溶液的制备 [/b]取药材粉末适量（按品种项下的规定），精密称定，置250ml棕色量瓶中，加水150ml，放置过夜，超声处理10分钟，放冷，用水稀释至刻度，摇勻，静置(使固体物沉淀），滤过，弃去初滤液50ml，精密量取续滤液20ml，置100ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇勾，即得。[b]测定法 总酚 [/b]精密量取供试品溶液2ml，置25ml棕色量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加人磷钼钨酸试液lml”起，加水10ml，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量(mg) ，计算，即得。[b]不被吸附的多酚 [/b]精密量取供试品溶液25ml，加至已盛有干酪素0.6g的100ml具塞锥形瓶中，密塞，置30℃水浴中保温1小时，时时振摇，取出，放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml棕色量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加入磷钼钨酸试液lml”起，加水10ml，依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量(mg)，计算，即得。按下式计算鞣质的含量：[b]鞣质含量= 总酚量一不被吸附的多酚量[/b][img=,423,198]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708031117_01_2204446_3.png[/img]鞣质、缩合鞣质化学鉴定结果[b]引用文献：[/b]马秀璟．王慧森．刘延泽．对中药材中鞣质的新认识［J］．中国中医药信息杂志，1999，6( 11) : 35．花雷，张哓娜，雷帆，等石權叶親质对高血脂小糖代谢影响及其机制［J］.世界科学技术中医药现代化，2009,11(4):545-549.赵今，李艳，孙玉亮，等没食子親质及有效提取物对致龋细菌袖附抑制的作用新疆医科大学学报，2009，32（1）：6-8.江波，侯世祥，孙毅毅含丹参中药注射液樣质检查新方法药物不良反应杂志，2001,3(2):92-93. 曹福源王广增原花青素生物活性的研究进展［J］.中国煤炭工业医学杂志，2009,12(4):678-679.张雪琼，熊富良，刘莹.大孔吸附树脂纯化叶下珠总鞣质的研究［J］.中成药，2010,32(1):151-153.张国华，桑春燕. 鞣质的鉴别方法［J］黑龙江科技信息，2009,7:186. 王哓春，杨建春，徐军辉.中药注射别中鞣质检查法的探讨［J］.中国药品标准,2002,3(2):30-31 邢丽红徐金钟，瞿海斌.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]法快速测定丹参醇沉过程中的鞣质［J］.药物分析，2010,30(10):1813. 魏永燕，刘培勒，洪阁，等。中药仙鹤复方总鞣质提取分离工艺研究［J］.中国现代应用药学杂志，2007,24（6）:469.聂万松.香丹注射液鞣质检查探讨［J］.中国药品标准，2003,4(2):21.程悦，陈嘉升，陈建萍，等地榆提取物中不同类型鞣质的测定［J］.中成药，2011,33(5):852.蔡艰，吴军，贾晓斌.HPLC-PDA识别中药材中的鞣质成分［J］.中成药，2007,29(10):1510.金欣，王锋，姚炭，等. HPLC测定野老鶴草中没食子酸和鞣花酸的总量［J］中成药,2010,32(7):1172.尹胜利,浦益琼，张彤，等. HPLC法测定茵栀黄注射液中水解产物没食子酸［J］.中草药，2011，42（2）：288.李志猛，李向日.干酪素法测定不同产地金樱子中鞣质类成分的研究［J］.中华中医药杂志，2009,24(2):230-231.张燕，张洪斌，胡海强，等.磨盘草不同部位中鞣质含量测定［J］.中国中医药信息杂志2010,17(3)，53-54.金欣，王锋，姚炭，等.测定野老鶴草中没食子酸和餘花酸的总量［J］.中成药，2010,32(7):1172-1176.朱丽君,刘斌,石任兵.槐属植物中黄酮类化合物及其药理活性［J］国医药植物药分册,2006,21（2）：47-52. 赵玉英,张如意.苦参化学成分研究概况［J］.天然产物研究与开发,1991,3(3):93-102.凌敏,李祖强,罗蕾,张宏健.槐属植物化学成分研究［J］.西南林学院学报,2001,21(2):119-128. 程品,胡健莉,吴红革.岩舒注射液对中晚期肿瘤患者免疫功能的影响［J］.中国中医药信息杂志，2004,11（6）：478-479.刘倩,张宏桂,刘永,等.HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url][sup]n[/sup]法分析复方苦参注射液的化学成分［J］.中成药,2006,28(10):1488-1491.