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为什么大多数酶联免疫试剂盒中的底物缓冲液和底物液不直接放在一起?一般是先加底物缓冲液再加底物液,再震荡混匀后孵育。可是原因是什么呢?缓冲液中含有过氧化物,用于底物液中显色剂的氧化,如果提前放在一起会导致变色反应,很多企业还没研制出可以阻断缓慢氧化的稳定剂,所以只好分开盛放。一些医院检验科为了图方便,提前将两种液体混合,造成的数据错误,在投诉中占有很大比例。一般敞口盛放的底物液放置8个小时后就应该开新瓶了,因为空气中的氧气以及实验室中的消毒水气味也会造成底物液(注意这里说的仅仅是底物液,而非两种的混合液)变色。
酶底物法中用到的科立得试剂,方便携带外出,我想知道科立得一旦加入可以保存多久呢?如果说路程较远,当天来不及回来,我可以放在车载培养箱中,但是回来后还要倒入97孔定量板中,想知道科立得粉末保存时间有没有限制。
小编为你解忧,采用酶底物法对地表水水样进行不同倍数的稀释后进行培养检测,观察地表水结果变化。结果表明:地表水水样稀释倍数越小,结果越准确。采用酶底物法测定地表水中的粪大肠菌群具有快速、简便的特点,准确掌握水样稀释倍数对测定结果就越准确。【工作原理】加入含有总大肠菌群细菌的水样,放入程控定量封口机中,目标细菌在Minimal Medium ONPG-MUG培养基中36℃培养,总大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解MinimalMedium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现黄色;同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG,产生特征性荧光。同样原理,耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养基呈现黄色。程控定量封口机9900Z SEALER PLUS:智能程控定量封口机配合51孔定量盘或97孔定量盘提供简单、快速、准确的定量检测总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪(耐热)大肠菌群、肠球菌和绿脓假单胞菌的实验方案。捷骋牌51孔定量盘和97孔定量盘是基于传统方法最大可能数 (MPN) 统计模型而设计的半自动定量方法。· 通过9900Z sealer PLUS程控定量封口机自动将样品/试剂混合液分配到独立孔中。· 培养结束后,阳性孔数可以转化为 MPN 值。· 51孔定量盘可检测每 100 mL 水样中 1-200MPN 值。· 97孔定量盘可检测每 100 mL 水样中1-2,419 MPN 值。· 整个检测过程手工操作时间小于 1 分钟。【使用方法】定性测试:第一步、在100ml水样中加入试剂,溶解,36℃培养24h;第二步、结果判读 无色=阴性 黄色=总大肠菌群阳性 黄色+荧光=大肠埃希氏菌群阳性注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色为阳性定量检测第一步、在100ml水样中加入试剂,溶解;第二步、倒入51孔定量检测盘(定量孔板)或97孔定量检测盘(定量孔板)中;第三步、用程控定量封口机对定量检测盘(定量孔板)进行封装,36 ℃培养24h;第四步、51孔定量检测盘(定量孔板)结果判读: 无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色格子为阳性结果,查对照MPN表计数。97孔定量检测盘(定量孔板)结果判读无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色格子为阳性结果,查对照MPN表计数