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有个同学是做生物分子的,想买个液相,主要用于DNA和RNA纯化,我还不知道HPLC可以纯化核酸呢,不知道这个对仪器有没有什么要求,我只是知道会用到PEEK管的,用反向C18把杂链分离,不知道大虾们有没有做这个行业的,给小弟点意见啊。流量,压力这块有没有什么要求的,泵用那种比较好?检测器呢?
[b][font=宋体]解答:[/font][/b][font=宋体]([/font]1[font=宋体])化学合成的肽产品是一个纯度不好的粗产品,其一是因为在合成肽过程中各种副反应、消旋化等造成的副反应肽;二是在脱保护过程中,由于保护基的残留,肽键的断裂、烷基化等造成的杂质。由于杂质与合成的肽在分子结构和化学性质上非常相似,给肽的分离纯化带来了困难,需要根据对目的肽的要求选择适当的方法进行纯化。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])目前用于分离纯化合成多肽的液相色谱模式主要有三种:一是凝胶过滤色谱,按照肽分子的大小进行分离;二是离子交换色谱,按肽分子所具有的带电基团的性质和数目进行分离;三是反相色谱,按照肽分子的疏水性强弱进行分离。[/font][font=宋体]([/font]3[font=宋体])通常采用制备或者半制备色谱对合成多肽化合物进行分离纯化。制备色谱的进样品量很大,因此要求进样系统能满足大体积进样要求,例如计量泵、定量环的体积会不同于普通分析型色谱。进样量的增加导致制备色谱柱子的分离负荷相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度。如[/font]GB/T 20770-2008[font=宋体]《粮谷中[/font]486[font=宋体]种农药及相关化学品残留量的测定[/font][font=宋体]液相色谱[/font][font=宋体]-[/font][font=宋体]串联质谱法》中使用的色谱柱要求柱长[/font]400mm[font=宋体],内径[/font]25mm[font=宋体]。要将待分离组分从如此规格的色谱柱中洗脱下来,就需要使用相对多的流动相,因此制备色谱的管路也比分析色谱粗很大,同时泵的流速也较高,通常需要设置为[/font]5mL/min[font=宋体]。由于制备或者半制备色谱仅用于分离纯化,不用于定量或定性分析,对泵的精密度、检测器的灵敏度等要求较低。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进:[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]
分离纯化:有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(Mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(Pure culture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化.