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光致发光测试仪

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光致发光测试仪相关的论坛

  • 拉曼光谱和光致发光谱的区别?

    拉曼光谱和光致发光谱的区别?

    想问一下,拉曼光谱和光致发光谱除了谱线横坐标不同外,还有什么别的区别?类似激光器、接收器、滤波片什么的有差异吗?前两天做了一个块体试样的拉曼和PL谱,把拉曼光谱的横坐标拉曼位移计算转换为波长(拉曼位移=激发光波数-拉曼散射光波数)后,发现两个谱图近似,想问一下,拉曼光谱是不是和光致发光谱除了横坐标不一样外,还有什么别的差异?下图红线是拉曼图,黑线是光致发光图。另外我也咨询过测试老师,老师说两个没有区别,http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1010.gif说的太绝对了,我也没敢信。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309052037_462632_1698940_3.jpg

  • 光致发光应用原理、范围

    一般光致发光指荧光及磷光现象。发光量子产率与激发光波长(或能量)有关,发光强度随激发波长的变化称为激发光谱。激发光谱与发射光谱间符合斯托克斯规则。光致发光可用于研究物质的电子状态,发光物质的痕量分析,发光体的分子取向,发光过程的动力学研究等等。采用发光探针,可以大大扩展光致发光的应用范围,在生物医学、环境科学等领域有广阔的应用前景。

  • 光致发光问题

    [color=#444444]请问,甲胺铅碘的光致发光谱怎么测得?用普通的荧光分光光度计么?还是需要别的设备?[/color]

  • 【求助】为什么会这样:关于ZnO的光致发光谱

    诸位大侠,俺头一次做固体ZnO的光致发光谱,用的仪器是Varian Elipse,激发波长是325 nm,在室温下(16oC)做的,结果是在650nm处得到一个很锐的峰,其他地方基本没有峰。这一结果和文献上报道的ZnO的光致发光谱大相径庭,不知道到底是什么原因导致的?请高手给予指点。拜谢!!!

  • 【求助】光致发光谱的测量

    我要用F-4500作TiO2光致发光光谱,请问数据模式怎么选择啊,1.Fluorescence 2. Luminescence 3. phosphorescence选1.荧光型对吗?还有扫描方式怎么选择1.Excitation 2. synchronous 3. Emission选3.发射波长扫描对吗?

  • 【原创大赛】“正版仪器+盗版方法”打造更强测试方法(发光菌)

    【原创大赛】“正版仪器+盗版方法”打造更强测试方法(发光菌)

    “正版仪器+盗版方法”打造更强测试方法(发光菌)摘要:本文从发光菌急性毒性测试方法的原理出发,分析了现行国标方法的缺陷,并深入比较了国外主流仪器的优缺点。进而总结出一套可靠性更高的急性毒性测试方法。方法涵盖实验分析、干扰分析、数据处理、质量控制等方面。同时,针对现有方法研究中的不足,提出了建立青海弧菌Q67毒性数据库及真和发光菌研发两个方向。为发光菌急性毒性测试方法新国标的修制定提供了参考。☆ 正版仪器:checklight水质毒性分析仪☆“盗版”方法:结合国标、文献及多种国外方法后的集合版 发光菌急性毒性测试在水环境应急中是比较常用的仪器,它不仅能指示被测水体的毒性强弱,还能间接反映某种未知污染物(或已知物质,但暂无检测方法的)的相对浓度。与其他生物急性毒性测试方法相比,以发光菌为受试生物的测试方法的最大优势在于其耗时较短(仅需15min),此外其还兼具操作简便、仪器便携等优点,在国内外环境应急监测中广泛应用。 从分析方法上看,国内外以发光菌为受试生物的急性毒性测试方法很多,中国国内也有发光菌急性毒性测试方法。除GB/T 15441-1995外,其他方法多与需要配套专门的仪器。下面,我们从测试方法的共性与其差异上探讨国标的不足,并初步讨论改进后测试方法的优越性1 共性分析——基本测试原理 几个方法有一个共同点,就是其基本测试原理保持一致。即:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308311519_461343_1653274_3.jpg 细菌生物发光反应是由分子氧作用,胞内荧光酶催化,将还原态的黄素单核苷酸及长链脂肪醛氧化为及长链脂肪酸,同时释放出最大发光强度在波长为490nm处的蓝绿光。 式中,是黄素单核苷酸还原型;FMN是其氧化型;RCHO是长链脂肪醛(C8以上);RCOOH是由醛氧化而成的相应脂肪酸;hv代表光子(最大发射波长490nm) 当发光细菌接触有毒污染物时,细菌新陈代谢则受到影响,发光强度减弱或熄灭,发光细菌发光强度变化可用发光检测仪测定出来。在一定浓度范围内,有毒物浓度大小与发光细菌光强度变化成一定比例关系,因此可通过发光细菌来监测环境中的有毒污染物。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308311520_461344_1653274_3.jpg图1 有毒物质抑制发光机理☆抑制发光机理:①直接抑制参与发光反应的酶类活性;②抑制细胞内与发光反应有关的代谢过程。2 差异性分析——方法深入剖析2.1 国标方法GB/T 15441-1995 中国对于发光菌的研究起步较晚,1995年才颁布以发光菌为受试生物的急性毒性测试国标方法。从理论上说该方法应该集各家所长,充分吸收国外对于此方法研究的优点,但使用过该方法的人都知道,国标方法还是存在着4个不足之处。 其一是仅对每管菌的荧光强度放入计算公式,未对空白样品的荧光强度进行计算分析,而实际分析中受发光菌质量及环境条件的影响,空白往往也有一定偏离,不将空白引入计算公式将产生较大的测试偏差; 其二是许多非毒性因子的影响未被放入干扰分析中。如营养盐、浊度等; 其三是测试的受试生物为明亮发光杆菌,由于国内外对该菌的毒性测试数据较少,没有毒性数据库支持。 其四是对于数据的质量控制,目前在标准上提及的较少。2.2 国外方法及仪器 现行国标存在不足之处,那是否可以直接套用国外的方法呢? 下面对市场上主流的仪器checklight水质毒性分析仪与美国SDI的DeltaTox发光细菌毒性检测仪测试方法及

  • 特殊的化学发光现象之一:微观非均相化学发光

    目前已知的许多氧化还原反应都伴随着微弱的化学发光现象,但是由于其量子产率极低,往往不具有分析应用的价值。为此,必须采取某些办法提高这些氧化还原反应的速率,从而使得发光强度增强到能够用于分析化学测定。近年来,国内外分析科学家模仿生物化学发光的酶反应原理,利用溶液中的表面活性剂等分子自我组合形成胶束、反相胶束、双分子膜等分子聚集体(Organized MolecularAssemblies),或者不形成分子聚集体,但其自身可提供微观非均相反应部位的分子包合化合物、高分子电解质等作为化学发光反应的介质,实现化学发光反应效率的提高。微观非均相体系多指水溶液或其它有机溶液中的小型分子聚集体,如图1-8 所示,包括由表面活性剂和脂质形成的分子聚集体和由无机化合物的重合体形成的反应体系。化学发光常用的微观非均相体系主要包括由表面活性剂等分子聚集体组成的胶束、微乳液、二分子膜和具有独特微观非均相结构的单独分子如环糊精和高分子电解质溶液等。这些溶液外观透明,但是包含可以为化学发光反应提供特异性很高的反应微空间。而无机化合物胶体溶液目前在化学发光研究中应用较少。一般来说,微观非均相体系作为化学发光反应的介质有四种主要的效果:(1)浓缩效应。离子性分子聚集体的表面可以吸附相反电荷的离子,从而使局部反应分子的浓度增大,有利于化学发光反应速度的提高;同时,具有相同电荷的离子被分子聚集体所排斥,使反应具有一定的选择性。(2) 可溶化效应。一些在水中或者有机溶剂中难溶的反应分子、中间体、反应产物等由于其亲水性或疏水性的差异,可以在微观非均相的疏水相、亲水相或者两相的界面上得到溶解。(3) 微观介质的环境效应。介质的极性、粘度、pH 值等受到微观局部环境的作用而产生变化,可能导致化学发光反应的效率和选择性的变化。(4) 激发态分子的稳定作用。由于化学发光的能量弛豫过程往往需要比光致发光更长的时间,因此激发态的稳定性对于化学发光的强度有很大的影响。微观非均相体系的静电相互作用、疏水/亲水作用、氢键结合、电荷移动相互作用等因素的影响,可以促进反应中间体、迁移状态以及激发态分子的稳定性,从而有利于化学发光的产生。林金明等对微观非均相化学发光反应体系作了详细的综述[73]。

  • 化学发光检测原理概述(转贴)

    化学发光检测原理概述化学发光作为一种分析工具的吸引之处就在于检测的简单性。化学发光的实质是自身发光,这意味着化学发光的分析测试仪器只需要提供一种可以检测光信号和纪录结果的方法就可以了。自发光检测仪需要一个闭光的样品室和光检测器。最简单的便是相片纸或x-光片,甚至视觉检测器都可以。化学发光检测方法的简单性使得它的应用很简单并且完全可以自动化。但是它的灵敏度又是怎么样的呢?化学发光有如下两个内在的优势:1.绝大多数的样品没有“背景”信号,如它们自身不发光。2.化学发光的检测不是一个比例测试,这是与荧光和吸收或比色测试不同的。在荧光测试中,具有小的Stokes Shift的荧光基团非常难检测。荧光很难从激发波长中分辨出来。另外一个问题是,特别在样品是浑浊的情况下有一部分杂光会进入到检测器。在吸收光测试上,其灵敏度受到限制的根本因素是需要在两个相对较强的信号之间去区分一个较小的差别。需要注意的是检测器对光谱的敏感性近可能接近化学发光的光谱,以得到最大化的灵敏度。一般在自发光仪中的光电倍增管对蓝光有最佳的反应,对红光的末端光谱不太敏感。固态检测器对红光有较好的反应。X-光片广泛用于记录在尼龙膜、纤维素膜或PVDF膜上的化学发光印迹分析。但是我们需要牢记在心的是x-光片仅能够用于检测紫外到蓝光光谱范围内的光信号,虽然有一些特殊的光片对增强的绿光有敏感性。

  • 虹谱光电生产的LED测试仪质量讨论

    虹谱光电生产的LED测试仪质量讨论

    大家快来讨论一下: HP8000 LED快速 光色电测试系统(光谱仪,光色光测试仪,LED测试仪) 产品描述01 · 针对直插式 LED (两脚、三脚)、大功率功率 LED 、食人鱼、贴片等的光色电测试设备。 · 基于windows操作系统人机交换界面良好; 标准SA905光纤接口,CCD高速光谱、光度头、积分球结构及软件光电一体化检测设备 可直接连接打印机打 印测试报 告,Excle保存数据,利于分析;一台主机配置相关装置,完全满足 光源的光色电各种性能测试与分析,及进行老化、分选等相关试验。适用于实验室、质检部门研发测试,也可使用于生产线快速测试分 选普通 LED 、大功率管、贴片、食人鱼及各种发光源。自动化集成度高.性能参数:· 适用于测量LED相对光谱功率分布Pλ,色品坐标(x,y),(u,v)、相关色温Tc、显色指数Ra、色容差SDCM、峰值波长λp、光谱半宽度△λ、主波长λd、色纯度、光通量lm、发光强度(配测试支架) 、光效、正向电压、反向漏电流等光色电性能参数. · 测试速度: 5ms-2s· 波长范围: 380nm-780nm; 波长准确度:± 0.5nm ; · 主波长范围(λD): 380nm-700nm 精度[font=

  • 【分享】化学发光使用的仪器--IFFM-E型流动注射化学发光分析仪

    仪器介绍                               IFFM-E型流动注射化学发光分析仪是国内最早推出的全自动化学发光检测分析系统。仪器集成有高精度双蠕动泵数控宽调速流动注射进样系统,多功能超微弱化学发光检测器及功能强大的化学发光检测与数据采集及化学分析动力学谱图分析软件,可进行静态注射化学发光分析、流动注射化学发光等分析。根据用户需要,所提供的辅助接口还可与各种分光光度计连接,使其成为流动注射分光光度测试仪,软件功能可由用户直接选择强度/吸光度/透光度测量。 主要特点应用领域:* 静态、流动注射化学发光研究* 化学发光在线测试分析 技术参数1.高精度蠕动泵宽范围数字调速系统* 高精度蠕动泵宽范围数字调速系统:调速范围 0—99 转/分。* 可实现多达12路管道进样(6道/泵)。* 16通道自动/手动阀,换向时间≤0.3S2.多功能化学发光检测器。* 多功能化学发光检测系统可进行流动注射/静态注射/毛细管电泳发光等多种化学发光分析,内置高灵敏度端窗式光电倍增管。* 可程控高精度负高压电源和高精度前置放大器。* 负高压范围:-100~-1100V;稳定度优于0.05%。3.高精度数据采集系统,由主计算机控制可进行:* 自动/手动调零* 增益控制: 1×、2×、4×、8×、16×* 滤波器截止频率调整:10~100 Hz* 采样速率设定: 1~100 次/S* 外部信号输入接口,可接收其它仪器的模拟信号,输入范围内0~5V。4.样品测定:Luminol-H2O2-Cr(Ⅲ)体系* 浓度测定范围:1×10E-11~1×10E-5(g/mL)* 检出限:1.5×10E-12g/mL* RSD3%(痕量分析的要求是RSD5% RSD=S/x的平均值)5.REMEX全汉化数据分析系统 [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=184605]高锰酸钾-甲醛流动注射化学发光法测定左羟丙哌嗪.pdf[/url]

  • 【资料】光谱测试仪

    [B]光谱测试仪美国McPherson 公司在光学光谱仪单色仪测试仪领域有半个多世纪的丰富经验,现在拥有完整成熟的产品线,为分子和原子光谱领域的科研学者的深入研究提供了各种解决方案。我们经过五十多年不断的努力和发展,在光学光谱领域已经形成了完整成熟的光谱仪,单色仪,光谱测试仪产品线,为分子和原子光谱领域的科研学者的深入研究提供了各种精密分析工具。我们的设备涵盖从红外(infrared)到软X光 (soft X-ray)和超紫外谱段(short ultraviolet wavelength)的所有光谱领域,从小型光谱仪单色仪(miniature spectrometers)到20多吨重30多米长的大光谱仪单色仪系统。在使用真空和超真空技术(vacuum and ultra-high vacuum technology)的工业产业中您不难发现我们制造的真空系统(vacuum systems)、穿透焊接配件(penetration welded components)和分级冷却防渗漏部件(cold stages and mechanisms).单色仪和光谱仪根据波长和分辨率可以分为三大类:四、紫外、可见光、红外波段单色仪/光谱仪(从185nm到20um光谱范围)五、真空紫外到可见光波段单色仪/光谱仪六、远紫外和X软射线单色仪/光谱仪(~1 nm到310 nm光谱范围l)

  • MPI-B型多参数化学发光分析测试系统

    技术参数 1.MPI-B型多参数化学发光分析测试系统—多功能化学发光检测仪: * 测量动态范围:大于5个数量级 * 测量精度优于0.05% 2.MPI-A/B型多功能化学发光检测器: * 波长范围:300—650nm * 灵敏度: SP1000A/Lm 上述两项构成了基本化学发光分析系统 3.MPI-B型多参数化学发光分析测试系统—电化学分析仪: * 电位范围:-10V—10V * 电流范围:±250 mA * 参比电极输入阻抗:10E12Ω * 灵敏度:1x10E-12—0.1A 共16个量程 * 输入偏置电流:50pA * 电位增量:1mV * 扫描速率:0.0001—200V/S * 测试方法:循环伏安法(CV),线性扫描伏安法(LSV),计时电流法(CA),计时电量法(CC),控制电位电解库伦法(BE),开路电压—时间曲线(OCPT) 4.MPI-BH/BU型多参数化学发光分析测试系统—毛细管电泳高压电源: * 输出电压:0—20KV * 输出电流:0—300uA 5.MPI-BF/BE型多参数化学发光分析测试系统—微流控芯片多路高压电源: * 输出路数:4路(BF型),8路(BE型) * 输出电压:0—2000V/路 * 输出电流:0—2mA/路 * 高压接出方式:输出、断开、接地 * 输出电流保护控制:0—2mA * 设置程序步:10步 6.MPI-B型多参数化学发光分析测试系统—数控流动注射进样器: * 高精度蠕动泵宽范围数字调速系统:调速范围 0—99 转/分。 * 可实现多达12路管道进样(6道/泵)。 * 两独立16通道自动/手动阀,换向时间≤0.3S 技术文章 此仪器没有任何技术文章 主要特点 1.用于化学发光机理与方法研究。 2.用于化学发光应用研究。 仪器介绍 MPI-B型多参数化学发光测试系统是西安瑞迈分析仪器有限公司最新研制开发的,基于WINDOWS 系统操作平台的高性能分析测试装置。依托于系统所拥有的多通道化学分析数据采集与分析测试部件及多功能化学发光检测器(基本系统)和众多的专用分析控制部件,本仪器可应用于各种化学发光分析,如静态注射化学发光、流动注射化学发光、电化学发光、毛细管电泳化学发光、微流控芯片化学发光及多方法连用化学发光分析等。本系统采用的组合式结构,允许用户采用不同的部件组合构成各种化学发光测试系统。

  • 【讨论】电化学微量发光的光谱测试

    在一个烧杯里放上溶液,放入直径大约是2mm的电极,然后通电在电极的顶端底部有很微弱的发光(肉眼是看不到的)。想测试一下发光的光谱曲线,如何实现?曾经用光纤的光谱仪做过实验,不行。

  • 【分享】光功率测试仪的特征及应用

    光功率测试仪是用于测量绝对光功率或通过一段光纤的光功率相对损耗的仪器,也是一种高智能化、高精度、高灵敏度的光功率测试仪器。光功率测试仪易于使用,只需连接光纤即可读取结果,可进行宽动态范围、高精度的光功率测量、高分辨率的损耗测量和稳定度测试。 光功率测试仪采用最先进的手持式仪表专用集成芯片,实现超低功耗运行,具有滤波测量功能,双端口直通设计,测试期间可保证OLT 到ONT 的全程通讯。光功率测试仪采用高清晰真彩色液晶屏显示测量值,人机界面友好、显示界面美观清晰、显示字体大小适中、便于操作人员读取数据及判断线路信号状态。内部集成带保护装置的高效智能充电电路,有效保证长时间的工作测试能力,同时其便携的设计更方便用户外出携带。光功率测试仪具有功率范围宽、性价比高、可靠性好、操作简单、测试精度高等特点,能够在网络中的任何位置对网络中所有的PON信号进行现场快速同步测量。 光功率测试仪主要用于可线性或非线性显示光功率,既可用于光功率的直接测量,也可用于光纤链路损耗的相对测量。光功率测试仪广泛应用于光纤通信、有线电视系统施工、光光纤CATV工程及维护、光纤传感研究、光通信设备、光纤、光无源器件的测试。

  • MPI-E型电致化学发光检测仪

    技术参数 1.MPI-E型电致化学发光检测仪—多功能化学发光检测仪: * 测量动态范围:大于5个数量级 * 测量精度优于0.05% 2.MPI-A/B型多功能化学发光检测器: * 波长范围:300—650nm * 灵敏度:SP1000A/Lm 3.MPI-E型电致化学发光检测仪—电化学分析仪: * 电位范围:-10V—10V * 电流范围:±250 mA * 参比电极输入阻抗:10E12Ω * 灵敏度:1x10E-12—0.1A 共16个量程 * 输入偏置电流:50pA * 电位增量:1mV * 扫描速率:0.0001—200V/S * 测试方法:循环伏安法(CV),线性扫描伏安法(LSV),计时电流法(CA)计时电量法(CC),控制电位电解库伦法(BE),开路电压—时间曲线(OCPT) 技术文章 此仪器没有任何技术文章 主要特点 应用领域: * 药物、氨基酸、多肽、蛋白质及核酸检测分析 * 蛋白质与药物、核酸相互作用研究。 仪器介绍 电化学发光检测是近几年发展迅速的一种新型检测方法,它将电化学分析与化学发光检测相结合,可用于临床检验分析及医药、病毒、免疫等科学试验。 MPI-E型电致化学发光检测仪系结合电化学分析与化学发光检测于一体的多测试界面、多分析参数、多控制部件系统集成仪器。它可同时对被测样品实现电致化学发光实时检测,并同步显示化学发光信号、电化学分析信号并对其进行详细分析。

  • 测试发光寿命曲线

    请问哪里可以代 测试发光寿命曲线,测试条件:常温,甲苯溶液, 能除氧, 寿命包括几十纳秒和几微秒两部分,我这里寄过去样品

  • 【分享】微孔分布测试仪的主要特性

    微孔分布测试仪主要应用领域:催化剂,广泛用于石化、化工、医药、食品、农业、精细化工等领域;吸附剂,如活性炭、分子筛、活性氧化铝等,广泛用于环保领域;颜填料,无机颜料、碳酸钙、氧化锌、氧化硅、矿物粉等;陶瓷材料原料,氧化铝、氧化锆、氧化钇、氮化硅、碳化硅等;炭黑、白炭黑、纳米碳酸钙等用于橡塑材料的补强剂等;新型电池材料,如钴酸锂、锰酸锂、石墨等电极材料;发光稀土粉末材料;磁性粉末材料,如四氧化三铁、铁氧体等;纳米粉体材料,包括纳米陶瓷材料、纳米金属材料,纳米银粉、铁粉、铜粉、钨粉、镍粉等;其他,如超细纤维、多孔织物、复合材料、沉积物、悬浮物等  微孔分布测试仪的主要特性:  测试时间:多点BET法比表面积平均每个样品15分钟,孔径分布测试、孔隙度测试平均每个样品100分钟  主要功能:可实行BET比表面积(多点及单点)测试,Langmuir比表面积测试,炭黑外比表面积测定,吸附、脱附等温曲线测定,BJH孔径分布、总孔体积和平均孔径测定;  真空系统:极限真空度6×10-2Pa  微孔分布测试仪测量范围:比表面积≥0.01M2/g至无规定上限,孔尺寸0.7~400nm;  样品数量:可同时测定1-4个样品;  测量精度:≤±2%;  微孔分布测试仪的压力控制:高精度压力传感器,数字显示,精度0.2%,独特的充气与抽气速度自动控制系统  运行方式:高度自动化,智能化,长时间运行可以无人看管自行测试  测试气体:高纯氮气(不用氦气),氮气消耗量极小  微孔分布测试仪的吸附过程:样品不需要频繁从液氮杜瓦瓶中进出,液氮消耗极少  软件系统:在Windows平台上,提供过程控制和数据采集、处理、报告系统,多种测试方法可自由方便选择,在计算机屏幕上,同步显示吸、脱附,比表面积及微孔分布测量仪测试过程、可随时查看已完成部分的测试数据;本机软件功能强大、界面友好、兼容性高、使用方便;

  • 【求助】固体粉末发光光谱的样品准备

    最近想用荧光光度计做固体粉末的光致发光谱,但是我们这里都是测溶液的,没有人测过固体粉末的,不知道粉末样品如何制样。恳请有经验的大侠指点一下样品如何准备!还有检测粉末时的注意事项!不胜感激!我们这里的仪器是日立F-7000。

  • 【分享】水中发光细菌的微毒检测

    没人发帖我来活跃气氛:发光细菌的微毒检测生物发光是某些生物的一种生理现象,海洋生物中更为多见。自1672年R.Boyle观察到发光的菌体所发出的光易被化学物质抑制后,许多科学家相继对细菌的发光效应进行了大量的研究。本世纪70年代至80年代初,国外科学家首次从海鱼体表分离和筛选出对人体无害,对环境敏感的发光细菌,用于检测水体生物毒性,现已成为一种简单、快速的生物毒性检测手段。80年代初我国引进了这项技术,并先后分离出海水型和淡水型的发光细菌,用以检测环境污染物的急性生物毒性;近年来还分离出明亮发光杆菌暗变种检测环境污染物致突变性,扩大了检测范围。一、发光细菌检测的原理与操作(一)基本原理发光菌检测法是以一种非致病的明亮发光杆菌作指示生物,以其发光强度的变化为指标,测定环境中有害有毒物质的生物毒性的一种方法。细菌的发光过程是菌体内一种新陈代谢的生理过程,是光呼吸进程,是呼吸链上的一个侧支,即菌体是借助活体细胞内具有ATP、萤光素(FMN)和萤光素酶发光的。综合化学反应过程为: 该光波长在490nm左右。这种发光过程极易受到外界条件的影响。凡是干扰或损害细菌呼吸或生理过程的任何因素都能使细菌发光强度发生变化。当有毒有害物质与发光菌接触时,发光强度立即改变,并随着毒物浓度的增加而发光减弱。这种发光强度的变化,可用一种精密测光仪定量地测定。美国Microbics公司设计制造了一套微毒测定仪器。国内中国科学院南京土壤研究所,华东师范大学生物系也分别成功地研制了DXY-2型和SDJ-1型的生物发光光度计(生物毒性测试仪)。(二)典型操作1.典型操作方法 目前国内外细菌发光的测定常用的有二种方法。(1)新鲜发光细菌培养测定法 即将发光菌接种于液体培养基中,在适当条件下(20℃±0.5℃)振荡培养到对数生长期,配制为含3%NaCl盐度的适当浓度的菌悬液加入测试管中,再加入待测液,使之和菌种接触,作用5min~15min后,读出井记录对照管和样品管发光强度。此法操作较为简便。(2)冷冻干燥发光细菌制剂测定法,把培养到对数生长期的发光细菌,以冷冻干燥法制成冻干粉剂,使用时加入冷的2%NaCl溶液复苏,使其恢复到原来的生理状态和发光水平,然后用于测定。这是国家标准方法,其优点是可实行测定的质量控制。冻干粉可长期保藏方便使用,操作简便,节约时间。2.试剂与材料(1)测试菌种 明亮发光杆菌(Ptotobacterium phosphoreum)T3小种。①新鲜明亮发光杆菌悬浮液。②或明亮发光杆菌冻干粉(800万Cell/g)。(2)培养基①液体培养基 酵母膏5.0g,胰蛋白胨5.0g,NaCl30.0g,Na2HPO45.0g,KH2PO41.0g,甘油3.0g加蒸馏水至1000ml。pH7.0±0.5。②固体培养基 培养液(按上述配方)1000ml,琼脂169g,pH7.0±0.5。(3)稀释液 3%NaCl,2%NaCl。(4)参比毒物 0.02mg/L~0.24mg/L的HgC12系列标准溶液。(5)仪器与器材①DXY-2型生物发光光度计(中国科学院南京土壤研究所研制)及2ml或5ml比色管。②恒温振荡器,培养箱,手提式高压消毒锅。③10ul或20ul微量加液器,1ml注射器,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url],容量瓶,三角瓶。(6)检测样品 视实验目的而定。二、发光细菌法的应用根据发光细菌法的原理和方法,凡能干扰或破坏发光细菌呼吸、生长、新陈代谢等生理过程的环境因子,例如有毒有害的物质等都可以运用发光细菌法检测生物毒性。其主要应用包括:1.发光细菌对水、土、气中化合物的急性毒性评价及快速评价水源水和地面水的质量,渔业水体,农田灌溉水体等的检测。2.工业废水,废气和固体废弃物的急性毒性与评价,及污染源的毒性追踪与判断,河流流经地域的排污分担率的估算,污水合格排放的稀释率的推算与评定。3.土壤重金属急性毒性效应测定和评价,土壤金属毒性的协同或拮抗效应监测。4.化学品的毒性评价与安全性评定,化学危险品的风险评定,以及环境污染物的致突变性的评价。5.环境保护处理设施效果的监控。随着环境学科的发展,发光细菌法的应用范围和前景将愈来愈宽广。三、发光细菌法测定急性毒性的操作程序(一)发光细菌新鲜菌悬液的制备(第1法)1.斜面菌种培养 于测定前48h取保存菌种,于新鲜斜面上接出第一代斜面,20℃±0.5℃培养24h后立即转接第二代斜面,20℃±0.5℃培养24h,再接出第三代斜面20℃±0.5℃培养12h后备用。每次接种量不超过一接种耳。2.摇瓶菌液培养 取第三代斜面菌种近一环,接种于装有50ml培养液的250ml三角瓶内,20℃±0.5℃,184rpm/min下培养12h-14h备用。3.将培养液稀释至每毫升108个细胞~109个细胞,初始发光度不低于800mV,置水浴中备用。(二)菌液复苏(第2法)取冷藏的发光菌冻干粉,置冰浴中,加入0.5ml冷的2%NaCl溶液,充分摇匀,复苏2min,使其具有微微绿光,初始发光度不低于800mV。(三)样品采集与处理1.水样(1)从不同工业废水的各排放口,每4h采样一次,连续采集24h后,均匀混合后备用。(2)纳污水体 取其入口,中心,出口三个断面混合水样备用。(3)以同上方法采集清洁水,作空白对照。浊度大的污水,需静置后取上清液。一般样品不需加任何处理。水样按3%比例投加NaCl置冰箱备用。2.气体样品 以大气采样法取大气样品于气体吸收液中吸收5ml,按3%比例投加NaCl,置冰箱备用,同法收集清洁空气作为对照组。3.固体样品 取固体废弃物,按《工业固体废物有害特性试验与监测分析方法》制备浸出液,以取上清液,按3%比例投加NaCl,置冰箱备用。(四)试验浓度的选择在预备试验的浓度范围内,按等对数间距或百分浓度取3个~5个试验浓度,同时设空白对照和参比毒物系列浓度组。(五)发光细菌法生物毒性测定1.工业废水或有毒物质的生物毒性测定(1)发光菌悬液初始发光度测定取4.9ml3%NaCl溶液于比色管内,加新鲜发光菌悬液或冻干粉复苏菌悬液10ul,若测量发光度在800mv以上,允许置冰浴中备用。(2)取已处理待测废水样品,按等对数间距或百分浓度编号,并注明采集点。(3)按表依次加入稀释液,待测水样及参比毒物系列浓度溶液。(4)打开生物毒性测试仪电源,预热15min调零点,备用。(5)每管加入菌悬液0.01ml,准确作用5min或15min,依次测定其发光强度,记录毫伏数。每个浓度设三管重复。 2.工业废气(或有害气体)的生物毒性测定(1)气体直接通入法 用注射器直接注入气体于菌悬液中,经10min~20min测定发光菌光强度的变化。(2)气体吸收法 方法同工业废水测定法。(3)固体菌落法 挑选固态培养到对数生长期的发光菌单茵落,连同培养基切下,置比色管内,测定初始发光强度,然后用注射器将待测气体注入菌苔表面,经10min~20min后,测定发光度的变化。(六)实验结果处理与评价1.记录工业废水,废气的生物毒性实验数据及其计算。(1)相对发光率或相对抑光率计算公式: (2)EC50值 在半对数座标纸上,以横座标为对数浓度,以纵座标为相对抑或发光率,作图,求得EC50值。2.数据处理与评价(1)建立相对抑光率与参比毒物系列浓度的回归方程,求出样品的生物毒性相当于参比毒性的水平,以评价待测样品的生物毒性。(2)以EC50值评定样品的生物毒性水平 总之发光细菌法是检测环境生物毒性的一种好方法,它具有快速、简便、灵敏

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