荧光筛选

近日，Quantum Design中国顺利将NanoView全自动外泌体荧光检测分析系统安装于河北师范大学药物筛选与新药创制中心，并为用户进行详细的仪器介绍和操作培训，其优越的外泌体表征性能将为河北师范大学生命科学学院的研发平台添砖加瓦。河北师范大学药物筛选与新药创制中心 全自动外泌体荧光检测分析系统是一款无需纯化的、全自动的可对单个外泌体进行表征分析的全新设备。该设备能够提供全方位的外泌体表征信息，包括外泌体粒径大小、计数、分布、携带蛋白表达、生物标志物（CD9，CD81，CD63等）共定位等。操作简单，结果可靠。短短三年，在世界范围内已有100多家实验室采用该设备，包括了著名的哈佛大学、约翰霍普金斯大学、康奈尔大学、洛杉矶儿童医院、麻省总医院、东京工业大学、首尔大学、新加坡国立大学、大阪大学等，发表SCI已超过240篇，其中不乏顶级期刊如Cell、Nature、Journal of Extracellular Vesicles、Cancer Research、Nanoscale、ACS Nano、BMJ journal、Brain Behavior Immunity、Trends in Cancer等。 全自动外泌体荧光检测分析系统安装完成 NanoView全自动外泌体荧光检测分析系统测试数据 2022年NanoView高水平文章精选列表：☛ Heikki Kyykallio ……& Pia R-M Siljander. (2022) A quick pipeline for the isolation of 3D cell culture-derived extracellular vesicles. Journal of Extracellular Vesicles.☛ Tyler J ……& Atta Behfar. (2022) Exosome biopotentiated hydrogel restores damaged skeletal muscle in a porcine model of stress urinary incontinence. Npj Regenerative Medicine.☛ Min Han ……& Tao Xin. (2022) Three-Dimensional-Cultured MSC-Derived Exosome-Hydrogel Hybrid Microneedle Array Patch for Spinal Cord Repair. Nano Letters.☛ Roberto Frigerio ……& Marina Cretich. (2022) Comparing digital detection platforms in high sensitivity immune-phenotyping of extracellular vesicles. Journal of Extracellular Vesicles.☛ Zijian Yang ……& David A. Issadore. (2022) Ultrasensitive Single Extracellular Vesicle Detection Using High Throughput Droplet Digital Enzyme-Linked Immunosorbent Assay. Nano Letters.☛ Yael Hirschberg ……& Inge Mertens. (2022) Characterizing extracellular vesicles from individual low volume cerebrospinal fluid samples, isolated by SmartSEC. Journal of Extracellular Vesicles.☛ Sukhbir Kaur……& David D. Roberts. (2022) Single vesicle analysis of CD47 association with integrins and tetraspanins on extracellular vesicles released by T lymphoblast and prostate carcinomacells. Journal of Extracellular Vesicles.☛ Simone M. Crivelli……& Erhard Bieberich. (2022) Function of ceramide transfer protein for biogenesis andsphingolipid composition of extracellular vesicles. Journal of Extracellular Vesicles.☛ Kazuki Takahashi……& Manabu Tokeshi. (2022) Non-competitive fluorescence polarization immunosensing for CD9 detection using a peptide as a tracer. Lab on a Chip.☛ Nasibeh Karimi ……& Cecilia Lä sser. (2022) Tetraspanins distinguish separate extracellular vesicle subpopulations in human serum and plasma – Contributions of platelet extracellular vesicles in plasma samples. Journal of Extracellular Vesicles.☛ Lin Zeng ……& Hui Yang. (2022) Extraction of small extracellular vesicles by label-free and biocompatible on-chip magnetic separation. Lab on a Chip.☛ Hongyun Wang ……& Junjie Xiao. (2022) Extracellular vesicles enclosed-miR-421 suppresses air pollution (PM2.5)-induced cardiac dysfunction via ACE2 signalling. Journal of Extracellular Vesicles.☛ Linglei Jiang……& Santosh Dhakal. (2022) A7 bacterial extracellular vesicle-based intranasal vaccine against SARS-CoV-2 protects against disease and elicits neutralizing antibodies to wild-type and Delta variants. Journal of extracellular vesicles.☛ Shaobo Ruan, Nina Erwin, Mei He. (2022) Light-induced high-efficient cellular production of immune functional extracellular vesicles. Journal of extracellular vesicles.全自动外泌体荧光检测分析系统（ExoView R200）简介 Nanoview所开发的全自动外泌体荧光检测分析系统（ExoView R200）采用单粒子干涉反射成像传感器（SP-IRIS）技术，是一款无需纯化的全自动的新型外泌体表征设备。该设备能够提供全方位的外泌体表征信息，包括颗粒大小、计数、表型与生物标志物共定位等，提供多层次和全面的外泌体测量解决方案。 为了更好的服务中国客户；Quantum Design中国子公司在北京建立了专业的客户服务中心，正式推出专业的全方位外泌体表征测试服务，您只需要少量样品即可获得全方位的外泌体表征数据： 欢迎各位老师垂询：010-85120280。前10名订购服务的老师，可享受8折优惠！

在合成生物学的研究发展过程中，微生物的筛选一直是研究的核心环节。以往，研究人员通常依赖于MTP(微孔板）方法来进行筛选。然而，这种方法有着一定的局限性，如较低的流通量、耗时的手动操作和非实时的数据采集等。为了克服这些困难，达普生物一直在探索全新的解决方案，以微液滴筛选技术为基础，设计了一种革新性的高通量微生物筛选系统。高通量微生物筛选系统（Microbes Sorting Platform，简称:MSP)是达普生物历经数年打磨研发的一款应用于酶定向进化筛选的专业性平台系统，其整合了微液滴制备技术、流式荧光检测及介电泳分选技术，帮助用户在一天的时间内完成108量级微液滴（约107文库）的分析和筛选，大大缩短了酶定向进化或功能性微生物筛选的进程。液滴微流控高通量筛选技术，是基于水油不相容原理构建的pL 级独立反应单元，能够快速实现单个微生物细胞与检测试剂微反应封闭体系的制备、反应与功能性单元的筛选。借助荧光检测技术对单元内的生化反应进行检测，利用介电泳技术实现对包含目标菌株／细胞反应单元的筛选和富集。该技术能快速对上千万个 pL(10-12L)级微液滴的生化反应单元进行高通量筛选，突破传统基于脂板筛选及微量滴定板（MTP)测定筛选通量的瓶颈，推动酶定向进化真正进入高通量筛选新时代。酶定向进化筛选通量大幅提升，研究者可在短期内实现多个突变位点的筛选。微量滴定板等传统方法对于4个位点的随机突变筛选，筛选300万以上的突变体的周期大约为80年，且消耗大量的试剂耗材成本。采用MSP高通量微生物筛选系统，单个操作员一周之内即可完成等量筛选工作，在降低试剂耗材成本的同时助力酶定向进化步入光速发展阶段。单个微生物液滴包裹动画微生物液滴筛选动画液滴融合功能吸光度检测筛选微液滴技术酶定向进化文献详解微液滴高通量筛选技术加速工业酶进 化 (点击查看 ) 液滴微流控技术与酶定向进化：高通量筛选策 略 驱动革新 (点击查看 )达普生物科技有限公司达普生物孵化于香港科技大学，于2018年创立，是中国液滴微流控领军企业，致力于提供世界领先的生命科学解决方案。公司在深圳、嘉兴、香港三地设有研发中心，研发团队近百人，聚焦于将液滴微流控技术应用于生物医药与精准医学领域，致力于成为集微流控芯片、仪器、试剂的研发和生产于一体的完整解决方案提供商。已商业化多款基于液滴微流控技术的科学仪器，包括高通量筛选系统（High Throughput Sorting System)、星海单细胞建库系统（Galaxy Single Cell Analysis System)与星云全自动数字PCR系统（Nebula Auto dPCR System),可应用于抗体筛选、酶进化、合成生物学、高通量药物筛选、癌症研究、癌症早期筛查、靶向治疗、无创产前诊断和病毒定量、生物制品质检等领域。目前已服务超过100家国内头部生物医药、科研服务商与IVD企业，在业内获得广泛的认可。

泛素化过程对于细胞稳态调控的重要性不言而喻。除了参与UPS（泛素-蛋白酶体系统，ubiquitin-proteasome system）介导的蛋白降解外，泛素化还是重要的信号通路和亚细胞定位调控手段。随着PROTAC药物的兴起，泛素化系统也受到了进一步的重视，成为了新兴的药物研发方向。在本期的前沿案例中，研究人员关注重要的细胞周期和DNA修复调控蛋白PCNA(增殖细胞核抗原)，及其K164单泛素化修饰。该修饰过程是DNA损伤耐受通路激活的关键步骤，也是潜在的抗肿瘤靶点。利用强大、灵活，并可支持定量的ALPHA蛋白互作技术，研究针对PCNA单泛素化过程中的各个环节均建立了高通量筛选和分析体系。以此为基础，研究进一步开展小分子药物筛选，并成功获得一系列具有靶向活性的氧杂蒽酮化合物。这些药物不仅为研究PCNA单泛素化功能供了新的工具，也为该方向的抗肿瘤药物研发打下基础。作为核心的PPI筛选和分析平台，ALPHA技术主要参与了该研究以下工作:一、建立靶向PCNA单泛素化各个环节的筛选和分析体系与常见的泛素化过程一致，PCNA 单泛素化也需要E1（Uba1，泛素活化酶），E2（Rad6，泛素携带蛋白）和E3（Rad18，泛素蛋白连接酶）发挥作用。利用一系列反应中出现的相互作用，研究基于APLHA技术构建了Uba1-ubiquitin相互作用；Rad6-ubiquitin相互作用；Rad18自泛素化和最终的PCNA泛素化检测和分析平台（见上图）。并在此基础上，研究进一步建立Rad6和Rad18以及Rad6和Ubr1互作分析方法，用于协助评价候选小分子。上述方法全面覆盖了泛素化过程中的各个反应，也展现ALPHA技术用于PPI分析的高度灵活性。二、靶向PCNA单泛素化的小分子抑制剂筛选在之前PCNA单泛素化检测的基础上，研究继续从蛋白浓度、稀释倍数和Beads浓度等多个方面优化ALPHA体系，并开展高通量小分子药物筛选。研究发现一系列的氧杂蒽酮化合物，如NSC 9037能有效抑制PCNA的泛素化，而类似结构的荧光素和阴性化合物则不能。上述发现与经典的Western blot或 Gel-based法的检测结果有较好的一致性，也间接反应了ALPHA技术抗荧光干扰的优势（见上图）。三、候选小分子活性评价针对泛素化的主要环节，研究继续利用ALPHA技术分析一系列候选药物的特异性和可能的工作机制。通过对比Uba1-ubiquitin相互作用(上图左，该检测中NSC 9037为阴性化合物)；Rad6-ubiquitin相互作用(上图中)和Rad18自泛素化(上图右)检测的结果，研究证明NSC 9037能特异抑制Rad6和ubiquitin的相互作用，以及下游的Rad18自泛素化。基于ALPHA平台，研究继续构建和优化Rad6和Rad18（上图左）/Ubr1（上图中）相互作用检测平台，证明NSC 9037能特异阻断Rad6和Rad18的相互作用，是首个报道的Rad6-Rad18互作抑制剂。最后，在肿瘤细胞模型上，NSC 9037和其他筛选获得的PCNA泛素化抑制剂，均表现出不同程度的细胞毒性(上图右)，为肿瘤药物研发提供了新的潜在方向。在PCNA泛素化抑制剂筛选和解析的过程中，ALPHA技术因其强大的灵活性发挥了重要的推动作用。相较于传统技术路线，ALPHA具有高灵敏度、优越的动态范围和能灵活支持不同亲和力范围和距离下的互作检测，是蛋白互作筛选和分析的利器。靶向蛋白互作的抑制剂筛选，除了ALPHA平台外，我们还提供同样均相的HTRF技术和非均相DELFIA技术平台，和相应的涵盖试剂、微孔板、检测平台和自动化的全线解决方案，满足不同的蛋白蛋白/蛋白小分子互作检测需求。