反苯环丙胺半硫酸盐标准品

大家好 请教个问题 我做液相色谱分析标准曲线，用邻氯苯胺盐酸盐做标准曲线，但是样品是邻氯苯胺硫酸盐，怎么计算邻氯苯胺的含量？谢谢

在样品中可能含有间苯二胺和间苯二胺硫酸盐，在相同的流动相下请问间苯二胺硫酸盐与间苯二胺在同一个位置出峰吗？

盐酸副玫瑰苯胺比色法测定亚硫酸盐方法的要点及改进　　盐酸副玫瑰苯胺比色法测定食品中的亚硫酸盐残留量是食品卫生理化国标检验方法中的第一法( GB/ T5009. 34 -1996) ,它灵敏、准确,但是它对于水不溶性样品检测时间太长,同时方法未给出关键试剂盐酸副玫瑰苯胺溶液中盐酸浓度范围等,给实际操作带来很大的不便。相据笔者的摸索及实践经验,进行了改进。现报告如下:1 　水不溶性固体样品的前处理前处理时间按标准规定水不溶性的固体样品粉碎研磨浸泡至少4h 后才能过滤测定(以使二氧化硫完全被吸收) ,整个实验过程最短也要5h 以上,如果能将水不溶性的固体样品的前处理方法加以改进,实验时间将会大大缩短。笔者用振荡法或超声波法对几种水不溶性固体样品进行不同时间的处理,同时与浸泡法进行了对比,结果见表1。表1 　不同前处理方法测定亚硫酸盐残留量(以SO2 计,g/ kg) 结果对比样品名称浸泡5h 超声40min 振荡50min话梅1. 27 1. 28 1. 29情人梅1. 71 1. 75 1. 72话梅肉0. 67 0. 65 0. 69山楂糕0. 12 0. 13 0. 11冬瓜蜜饯0. 77 0. 79 0. 75银耳6. 02 6. 00 5. 95竹笋4. 23 4. 18 4. 20竹荪9. 29 9. 34 9. 32干辣椒0. 080 0. 078 0. 069　　对表1 中数字进行统计学处理,浸泡5h 与超声40min 两方法之间经t 检验, P 0. 05 ,两法测定的结果无显著性差异 同时浸泡5h 与振荡50min 两方法之间经t 检验, P 0. 05 ,两法结果也无显著性差异。所以,对于水不溶性的固体样品,可以用超声法(40min) 、或振荡法(50min) 来代替浸泡法进行样品前处理。2 　实验关键试剂盐酸副玫瑰苯胺比色法涉及的试剂有多种,其中盐酸副玫瑰苯胺和二氧化硫标准是两个最关键的试剂。2. 1 　二氧化硫标准液　二氧化硫标准液容易氧化变质,经实验,新标定的1. 142mg/ ml 二氧化硫标准溶液避光存放冰箱的条件下,可稳定一个月,一个月后必须重新标定。实验结果见表2。表2 　二氧化硫标准贮备液存放时间对吸光度值的影响时间1μgSO2标准吸光度2μgSO2标准吸光度4μgSO2标准吸光度一个月前配制0. 002 0. 030 0. 076新配制0. 034 0. 067 0. 1412. 2 　盐酸副玫瑰苯胺溶液　盐酸副玫瑰苯胺溶液中的盐酸浓度对实验结果影响非常大,酸度大,比色颜色浅,灵敏度低 酸度低,比色颜色深,灵敏度高,同时空白值也高。但标准方法中未给出调节盐酸副玫瑰苯胺溶液颜色的盐酸用量范围,仅仅指出用肉眼观察颜色变化(由红变黄) ,在实际操作中笔者曾几次因显色剂酸度问题导致实验失败。所以有必要找到一个合适的盐酸副玫瑰苯胺溶液盐酸酸度范围,使实验空白值低、灵敏度又满足要求,为此笔者进行了不同盐酸浓度下标准和空白吸光度值的对比实验,结果见表3 和图1。表3 　盐酸副玫瑰苯胺溶液中盐酸的浓度与吸光度的关系盐酸浓度(mol/ L)显色剂颜色空白吸光度4.μgSO2标准吸光度减空白后吸光度0. 20 浅黄色0. 298 0. 459 0. 1610. 30 黄色0. 338 0. 372 0. 0340. 40 黄色0. 251 0. 303 0. 0520. 50 黄色0. 089 0. 254 0. 1650. 60 黄色0. 076 0. 230 0. 1540. 70 黄色0. 062 0. 202 0. 1400. 80 黄色0. 054 0. 186 0. 1320. 90 黄色0. 046 0. 168 0. 1221. 00 黄色0. 043 0. 158 0. 115　　注:表2 中盐酸的浓度是指加到盐酸副玫瑰苯胺溶液中盐酸的用量换算之后的浓度。图1 中标准吸光度为减去空白吸光度后的值。图1 　不同酸度的盐酸副玫瑰苯胺溶液对空白和标准吸光度值测定的影响0 6 7 　　　　　　　　　　　　　　中国卫生检验杂志2003 年12 月第13 卷第6 期　Chinese Journal of Health Laboratory Technology 20031December1131No16© 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.2. 2. 1 　从图表中可以看出盐酸副玫瑰苯胺溶液中盐酸介质的浓度在0. 50mol/ L、0. 60mol/ L 时灵敏度高,但空白值也高(0.089、0. 076) ,盐酸副玫瑰苯胺溶液中盐酸介质的浓度在0.70mol/L - 1. 0mol/ L 之间空白吸光度较低(0. 062 - 0. 043) 并且灵敏度较高,所以配制0. 02 %的盐酸副玫瑰苯胺使用溶液时,可吸取0. 1 %盐酸副玫瑰苯胺溶液20ml 后直接加入一定量的(1/ 1) 盐酸使盐酸的浓度为0. 70mol/ L - 1. 0mol/ L 之间即可使用。实践证明使用同一个合适酸度的盐酸副玫瑰苯胺溶液,用新标定的标准溶液做标准曲线,环境条件、仪器条件相对稳定的前提下,可以使用相对较长一段时间(更换盐酸副玫瑰苯胺溶液时,再重新标定标准溶液,绘制新的标准曲线) 。2. 2. 2 　0. 20mol/ L 空白及标准吸光度较0. 30mol/ L 的空白及标准吸光度高,是因为在反应体系中由于酸度的降低,盐酸副玫瑰苯胺本身结构改变颜色发生变化所致。3 　标准曲线线性范围国标方法中规定标准曲线的线性范围是从0 - 4μg 二氧化硫,经过实验线性范围可延伸到10μg 二氧化硫,结果见表3。表3 　盐酸副玫瑰苯胺比色法测定二氧化硫残留量标准曲线标准含量(μg) 0. 00 0. 40 0. 80 1. 20 1. 60 2. 00 3. 00 4. 00 6. 00 8. 00 10. 00吸光度值0. 000 0. 012 0. 027 0. 040 0. 061 0. 067 0. 107 0. 141 0. 222 0. 292 0. 368　　线性范围的扩大对于高含量样品可减少稀释带来的误差。本文根据笔者的实际经验和摸索,对盐酸副玫瑰苯胺比色法测定食品中的亚硫酸盐残留量提出了改进意见,会给实际操作者带来一定的益处。参考文献[1 ] 中华人民共和国国家标准,食品卫生检验方法,理化部分,食品中亚硫酸盐残留量的测定方法GB/ T5009. 32 - 1996.(收稿日期:2003206230)