异戊烯基大豆苷元对照品

大豆异黄酮是一种植物性雌激素，又称为植物动情激素，是一种天然荷尔蒙，被认为有防癌丰胸之效，目前几乎没有明显副作用的报告。这个东西可防治一些和雌激素水平下降有关的疾病，延缓女性衰老、改善更年期症状、骨质疏松、血脂升高、乳腺癌、前列腺癌、心脏病、疏松症、心血管疾病等。对于高雌激素水平者，表现为抗激素活性，可防治乳腺、子宫内膜、结肠、前列腺、肺、皮肤等癌细胞的生长和白血病，及其它心血管疾病。其性状为：浅黄色粉末，气味微苦，略有涩味。来源于大豆类植物的胚芽，主要成分有：大豆甙(Daidzin)，大豆甙元(Daidzein)，染料木甙(Genistin)，染料木素(Genistein)，黄豆黄素(Glycitin)，黄豆黄素甙元(Glycitein)。1 材料与方法1. 1 仪器与试剂1. 1. 1 仪器Waters2695高效液相色谱仪，配有二极管阵列检测器和Empower 色谱工作站; 脱气泵( 美国Millipore 公司) ; 超纯水系统( 美国Millipore公司) ; CW － 2000 超声波萃取仪(上海) 。1. 1. 2 试剂大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素和染料木素对照品由美国Sigma 公司生产; 甲醇为色谱纯( 美国Fisher 公司) ; 乙醇、丙酮均为分析纯( 天津市科密欧化学试剂有限公司) ，磷酸为优级纯( 天津市化学试剂三厂) ; 实验用水为超纯水。1. 2 方法1. 2. 1 色谱条件色谱柱：Ultimate XB-C18 4.60×250mm,5 um .PartNumber 00201-31043Serial Number 211302350.检测器: 二极管阵列。检测波长: 254 nm。流动相: 1% 磷酸水溶液和甲醇采用梯度洗脱，洗脱程序如下: 0 ～ 4 min，70% 磷酸水溶液+30%甲醇; 14 ～ 24 min， 45% 磷酸水溶液+55% 甲醇; 25～ 30 min，70% 磷酸水溶液+ 30% 甲醇。柱流速: 1. 0 ml /min。柱温: 30℃。进样量: 10μl。1. 2. 2 标准曲线制作1. 2. 2. 1 标准溶液配制 单标标准储备液配制: 准确称取大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、染料木素和大豆黄素对照品各0. 0500 g，分别置于小烧杯中，加70%乙醇溶解，如果不好溶解，可以在超声波中超声加速溶解，或者加入少量丙酮也可以加速溶解，待溶解完全后，移入50 ml 容量瓶中，加70% 乙醇定容至刻度，混匀，此溶液作为单标储备液，浓度各为1. 0 mg /ml。混合标准储备液配制: 准确吸取大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、染料木素和大豆黄素单标储备液各5. 0 ml 于50 ml 容量瓶中，加70%乙醇定容至刻度，混匀，此混标溶液6 种成分浓度各为100 μg /ml。1. 2. 2. 2 标准工作曲线制备 准确吸取混合标准储备液2. 0、4. 0、6. 0、8. 0、10. 0、12. 0 ml 分别于100ml 容量瓶中，加70%乙醇定容至刻度，混匀，6种成分的浓度各为2. 0、4. 0、6. 0、8. 0、10. 0、12. 0 μg /ml，按1. 2.1 色谱条件进行测定; 以各组分浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线，得回归方程。1. 2. 3 样品测定1. 2. 3. 1 样品前处理 固体样品: 准确称取2. 0 g样品于100ml 容量瓶中，加入50 ml 70% 乙醇超声波提取30min，加70%乙醇定容至刻度，混匀， 0. 45μm 滤膜过滤后，供高效液相色谱测定用。液体样品: 准确吸取5. 0 ml 样品于100 ml 容量瓶中，加70%乙醇定容至刻度，混匀，0.45 μm滤膜过滤后，供高效液相色谱测定用。1. 2. 3. 2 样品测定 吸取样品处理液及标准溶液各10 μl，按1. 2. 1 色谱条件进行测定，以标准保留时间定性，峰面积外标法与标准系列比较定量。

中国曾是大豆出口大国，但最近10年来，却出现了大豆进口量猛增、国产大豆面积减少、大豆主产区加工企业停工甚至破产等现象。国产大豆面临怎样的困境？国外如何推动大豆出口？我国大豆产业应当如何发展？就这些问题，人民日报“求证”栏目记者进行了调查采访。　　大豆种植现状如何？　　【调查】 价格低、销路差、播种面积逐年缩减，预计今年大豆自给率低于15%　　刘清财是黑龙江省绥化市明水县崇德镇民主村的豆农，今年种了30亩大豆。这个面积较往年少了很多，刘清财告诉记者，主要原因是大豆价格低、销路不好。“玉米每亩可以收1300—1400斤，湿粮的价格是8角至9角钱一斤，投入大约500元。大豆一亩地可以收260—300斤，价格是2元零几分，投入接近300元一亩。”里外里一算账，种玉米比种大豆每亩要多挣约300元。　　据了解，前些年，明水县大豆种植面积最多时超过40万亩，今年才4万亩，不到高峰时的1/10。“老百姓按照市场规律，大豆种的少”，明水县农委副主任王立春说，玉米销路好、价格高，加上不断采用新技术，增产明显。　　黑龙江省大豆协会副秘书长王小语说，近几年黑龙江的大豆播种面积显著缩减，2010年播种面积为6400万亩左右，2011年缩减到5100万亩，2012年估测不到4000万亩。　　中国大豆行业协会常务副会长刘登高介绍，全国的情况也是如此。我国大豆种植面积最近几年一直呈现缩减趋势，预计今年将下降到1亿亩以下，总产量将低于1000万吨，大豆自给率将低于15%。　　大豆进口得多吗？　　【调查】 2011年大豆进口量是国产的3倍多，主要为转基因品种　　近年来，我国进口大豆数量呈持续上升之势，2011年已达到5263.4万吨，约为国产大豆产量的3.63倍，进口大豆主要是转基因品种。刘登高说：“预计2012年大豆进口量将接近6000万吨。”　　为何要进口大豆？中国人民大学农业与农村发展学院教授周立分析，上世纪90年代以来，我国城乡居民肉禽蛋奶鱼等动物源食品摄取量大幅增加，促进了豆粕饲料加工的扩张。与此同时，豆油已成为中国第一大植物油品种，食用消费占总量的85%以上。在这种形势下，中国开始大量进口国外大豆。　　中央民族大学生命与环境科学学院教授薛达元认为，由于饮食习惯，中国对油料的需求很大，如果不进口大豆，中国需要额外增加20%的农田才能满足需求，而这一点基本上办不到。　　农业部有关负责人今年年初在人民网的一次访谈中也举例，近几年，我国每年都进口5000多万吨大豆，这些大豆按现有的品种和技术水平测算，需要4亿多亩土地，接近了目前玉米或者水稻的播种面积。　　农业部科技发展中心主任段武德表示，转基因大豆与国产大豆相比具有以下优势：一、含油率高2到5个百分点，加之可以同时加工有溢价的高蛋白豆粕而产生更大的经济效益；二、转基因大豆因规模化种植，单位生产成本远低于国内；三、转基因大豆表观与整齐度较好，品质易于得到保证。　　加工企业境况如何？　　【调查】 沿海转基因大豆加工企业发展迅速，主产区大量企业停工或破产　　记者在采访中听到一种说法，认为明水县大豆种植面积下滑，与县里没有上规模的大豆精深加工企业有关系。　　但王小语不这么认为。王小语说，大量进口转基因大豆，对自主大豆产业带来了负面影响：一方面种植大豆效益低下；另一方面，加工企业的市场份额被压缩在产区，南方销区没有市场。王小语说，黑龙江省油脂加工企业150家左右，日加工能力200吨以上的油厂有200个。目前粗略估算，开工的油厂也就一成左右，近期略有增加，但也不到二成。　　谈到企业，刘登高说，我国的大豆加工业主要有三种形式：第一种是以进口转基因大豆为原料的沿海大豆加工业，第二种是以国产大豆为原料的主产区大豆加工业，第三种是以国产大豆为原料的大豆蛋白及食品加工业。第一种大豆加工企业处于高速发展状态，据估计到2013年底仅沿海大豆加工企业的产能将超过1.5亿吨，是国内市场大豆拥有量的两倍以上。第二种企业受沿海大豆加工企业的挤压在走下坡路。第三种企业的产品和国内外食品需求相一致，处于快速发展阶段。在北京等大城市，新型豆制品生产年增长20%以上。　　刘登高说，国产大豆在油豆价格上和进口转基因大豆相提并论甚至同等限价，压制了国产豆油加工发展，在大豆主产区，大量加工企业停工待料或停业破产。　　转基因大豆为何能快速推广？　　【调查】 美国等国家掌握专利、加大补贴，通过价格杠杆加速推广　　我国的进口大豆主要来自于美国、巴西、阿根廷等国家。刘登高认为，美国将大豆列入国家发展战略，用补贴支持本国大豆生产，并支持美国粮商到巴西、阿根廷开发土地、种植大豆。“美国对大豆的补贴、倾销，造成了中国大豆与其他农产品价格的扭曲，这是中国大豆产业问题的根源。”　　中国现代国际关系研究院助理研究员魏亮主攻方向是世界粮食问题。他认为，美国将转基因大豆作为其重要出口产品，得到政府、育种企业和粮食生产商的追捧，并利用价格杠杆迅速推广。一方面，在政策上，美国依靠政府补贴和信托资金，压低从特定种子价格到田间护理、收获等各环节成本，抬高合约收购价，提升种植转基因大豆的比较优势。另一方面，在销售和深加工上，美国食品和药品管理局等机构实施宽松的事后监管，同时，不含转基因、激素等成分的有机食品价格显著高于一般食品。如此，通过价格杠杆，转基因食品的市场占有率节节上升。　　魏亮认为，在转基因大豆推广中，因为可收取高额专利费，一些生物技术公司和跨国粮商也扮演着推动的角色。当前转基因大豆商用技术和专利多数掌握在美国及在美国注册的孟山都、杜邦等公司手中。虽然此类公司在专利费收取问题上仍存障碍，但巴西等不少国家已长期按销售额的2%向孟山都公司等缴纳专利费。　　中国农科院农业知识产权研究中心副主任宋敏说，截至2012年7月31日，全球共有转基因大豆专利申请1310件，拥有转基因大豆专利较多的国外企业是孟山都（374件）、杜邦/先锋（201件）、MERTEC（82件）、先正达（41件）、巴斯福（25件）、拜耳（22件）等。　　国产大豆如何应对？　　【调查】 实施播种补贴，发挥本土非转基因、高蛋白食品级大豆优势　　在大豆贸易中，定价权是核心。魏亮表示，巴西、阿根廷、中国等大豆主产区的生产和消费市场渐次被转基因大豆占领，形成了转基因育种、生产、加工、零售、品牌等全程产业控制。我国大豆市场定价权旁落他人，对外依存度极高，会影响我国粮食安全。　　王小语说，近年来，黑龙江大豆播种面积急剧缩减，主要原因就是种植大豆效益太低。为使大豆播种面积保持在相对合理区间，建议对豆农实施播种补贴，使大豆播种面积稳定在6000万亩左右。　　刘登高建议，学习欧洲、日本等国家在国际化进程中保护农业的经验，进口农产品的多少要以不危害自主产业为前提。其次，要发挥中国本土大豆的特色优势。中国非转基因大豆蛋白深受欧洲市场欢迎，在世界食品蛋白市场占有率达50%以上。刘登高说，在国际市场，食品级大豆价格要高于饲料级大豆，一般价格相差30%到50%。在中国，非转基因、高蛋白大豆的优势难以发挥，这是制约中国大豆生产的重要原因。　　近些年，东北大豆主产区盛行出售食品豆，国内市场食品豆的价格开始与油豆拉开距离，高蛋白含量的种子广受农民欢迎，种种迹象表明，中国高蛋白、非转基因大豆仍有顽强的生命力。刘登高说，目前大豆深加工产品国内外市场需求旺盛，中国应该扶持本国大豆的产业龙头，以高质量深加工产品提高市场地位。来源：人民日报