免疫色谱读取仪

戴安离子色谱仪无法读取通道信息咋办

随着生命科学研究的深入发展，生物组织或体液中一些微量的物质越来越引起科学家们的浓厚兴趣。对于这些物质的分离分析常采用柱色谱、薄层色谱、液相色谱和质谱技术。但是对于那些具有重要生物功能而含量甚低(低于十万分之一)的物质，即使经过反复富集的浓缩，仍然得不到供研究所需要的纯品量。高效薄层色谱(HPTLC)除了与其它色谱技术一样具有分离能力之外，它独有的优点是能够在HPTLC板上进行原位反应和原位检测。即从生物组织中提取的混合物经HPTLC分离后，利用免疫反应具有的高度特异性，在HPTLC板上直接与给体(抗体或毒素)进行原位免疫反应，再与酶标记或同位素标记的第二抗体进行原位反应，最后与酶的底物反应使之生成有色物质以其定性。使用TLC扫描仪测定光密度进行定量。这是一种综合利用HPTLC的高分离效率，免疫反应的高度特异性，以及酶联显色的高灵敏性的原位分析方法。把传统的HPTLC和酶联免疫反应测定技术发展到一个崭新的水平。省去了纯化纯品的复杂步骤。为微量生化物质的研究提供了一种有用的检测方法。1 实验方法1.1 HPTLC分离 用于HPTLC-原位免疫分析的硅胶板除了具有好的分离性能之外，硅胶涂的必须牢固，以防止在实验中经多次洗涤硅胶脱落。Nagel(德国)公司的以塑料片或铝片为支持体的硅胶板具备这些性能。硅胶板的尺寸一般用10×0cm, 硅胶涂层厚度为0.5mm。对于展开剂的要求除了对要鉴定的物质有分离能力之外，要呈中性(pH6.8-7.2), 并且挥发性要好，在温和的条件下易于除去。目的是使HPTLC板上的物质保持免疫活性。1.2 HPTLC板的处理　　 在每一步原位免疫反应之前，都要对HPTLC板进行处理。目的是避免非特异性反应。将完成样品分离的HPTLC板经干燥后，放入一个塑料盒子中，用滴管缓慢加入0.1ml/cm2的含1%鸡清蛋白和1%的聚乙烯吡咯啉酮的磷酸盐缓冲溶液(pH 7.2)。在室温下浸泡2h后移出浸泡液，用滴管沿塑料盒子壁缓慢加入磷酸盐缓冲溶液，轻轻摇动盒子2min后，用滴管吸出洗涤液。重复洗HPTLC板3-5次。1.3 原位免疫反应 将处理好的HPTLC板放入盛有反应介质和反应物的塑料盒子中，反应条件要根据实验内容而确定。例如检测糖脂抗原时，盒子中加入0.1ml/cm2含特异性糖脂抗体的缓冲溶液，HPTLC板上的糖脂与抗体在4°C下反应2h。又如检测病毒与受体结合能力时，盒子中加入含有病毒的缓冲溶液，HPTLC板上的受体物质与病毒在4°C下至少反应9h。移出反应液，HPTLC板经洗涤后，再与抗病毒抗体反应2h。1.4 免疫反应的鉴定 酶联抗体市场上有售。酶是作为免疫反应的示踪物，最常用的是辣根过氧化酶。最后将已形成抗原抗体复合物的HPTLC板，置于含有酶联抗体的塑料盒子中，在4°C下反应2h

在万通883的色谱工作站MagIC Net 2.3中的方法的time program中加了基线噪音跟基线漂移的测定的命令，测完了，最后的数据在哪里可以看到啊？也就是说基线噪音跟基线漂移的数据怎么读取?

现有一个产品检测项目，按照药典要求，各杂质计算需要采用杂质溶液自我稀释的方法来计算，由于按照药典全套检测，需要大量人力物力。 想请教一下：从GMP角度讲，是否可以直接采集杂质溶液，通过读取色谱图上各杂质的结果来判定盖批次样品是否可以用于小批次混合

请问哪位知道用HPLC-DAD进行中药制剂分析，积分后，色谱峰纯度曲线图怎么看的啊？是不是只要曲线在零点以上，就表明积分的这个峰所代表的成分纯度为100.00%呢？如果该色谱峰纯度曲线中间一部分是在零点线上，这又说明什么呢？谢谢啦！！！！！

请教大家一个问题，斯派克M8光谱仪，如果导出每次的分析结果。是读取数据文件还是，串口？是否有清楚的？我只能在他们的软件里看到分析结果，我们想把分析结果发到另外一台电脑上或通过局域网从另外一台电脑上读取分析结果。谢谢大家，请给与指导。

SN/T 1772-2006 进出口粮谷中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲和柱-液相色谱法2006-04-25发布，2006-11-15实施。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=98912]SN/T 1772-2006 进出口粮谷中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲和柱-液相色谱法[/url]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=87046]谷物 谷物 制品 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 薄层色谱法 免疫法 [/url]

SN/T 1771-2006 进出口粮谷中T-2毒素的测定 免疫亲和柱-液相色谱法2006-04-25发布，2006-11-15实施。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=98911]SN/T 1771-2006 进出口粮谷中T-2毒素的测定 免疫亲和柱-液相色谱法[/url]

安捷伦液相色谱怎样更改梯度曲线

大家在用免疫亲和柱-高效液相色谱法测定黄曲霉毒素和呕吐毒素等真菌毒素时，有没有一些技术要点可以一起分析下，比如前处理过程、净化过程等。新人刚接触这块，希望大家能多指导，十分感谢！

我们都知道免疫亲和柱是一种采用先进的单克隆抗体技术开发的一系列免疫亲和柱产品。 拥有高特异性和高亲和力;符合国内外霉菌毒素限量标准；用于ELISA法，高效液相色谱法，应光光度法等；并且可以用于复杂样品的检测，包括食品、饲料、调味品等复杂基质； 我们也知道，使用一般的免疫亲和柱时，需要再使用一个转换头，令实验的操作非常复杂。 不用担心，这里就有一款不再需要转换头的免疫亲和柱，可直接与泵流操作架联接，使用起来非常的简便，解放了操作人员的双手，减轻了实验的负担！

[b][font=宋体]问题描述：[/font][font=宋体]在用免疫亲和柱[/font]-[font=宋体]高效液相色谱法测定黄曲霉毒素和呕吐毒素等真菌毒素时，有哪些技术要点？特别是前处理过程、净化过程等方面。[/font][font=宋体]解答：[/font][/b][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）测定食品中黄曲霉毒素的技术要点：[/font][font=宋体]a.[/font][font=宋体]前处理过程：样品提取溶剂一般用甲醇或乙腈的水溶液。[/font]GB5009.22-2016[font=宋体]《食品安全国家标准[/font] [font=宋体]食品中黄曲霉毒素[/font]B[font=宋体]族和[/font]G[font=宋体]族的测定》提取液用的是乙腈：水（[/font][i]V/V[/i][font=宋体]）[/font]=84[font=宋体]：[/font]16[font=宋体]，提取时要让提取液和样品充分混合，通常超声[/font]20min[font=宋体]。净化首选相应的免疫亲和柱，操作步骤按照柱子使用说明即可。需要注意的是有机相洗脱时需要注意控制流速（控制[/font]2~3[font=宋体]秒[/font]/[font=宋体]滴），氮吹时气流要缓慢，不要把液体全部吹干，近干就可以，否则会严重影响回收率，最后用初始流动相定容。[/font][font=宋体]b.[/font][font=宋体]上机检测过程：黄曲霉毒素[/font]B[sub]2[/sub][font=宋体]、[/font]G[sub]2[/sub][font=宋体]本身就可以产生很强的荧光，不需要衍生。而[/font]B[sub]1[/sub][font=宋体]、[/font]G[sub]1[/sub][font=宋体]分子的二呋喃结构中碳碳双键的吸电子诱导效应，致使其分子荧光强度减弱，不衍生的话达不到标准限量要求。通过对双键衍生变成饱和碳碳单键可增强[/font]B[sub]1[/sub][font=宋体]、[/font]G[sub]1[/sub][font=宋体]的荧光强度，通常采用的衍生方法有柱前三氟乙酸衍生、柱后碘衍生和光化学衍生等，[/font]GB 5009.22-2016[font=宋体]对前两种衍生步骤做了详细说明。柱前三氟乙酸衍生优点是不需要增加额外衍生设备，但操作较为繁琐，影响因素较多，增加了前处理时间以及结果不确定度。柱后碘衍生的稳定性、重现性更好，但需要增加柱后衍生设备（泵和衍生管），同时由于衍生需要在衍生管中进行，增加了柱后死体积，易造成色谱峰变宽，且碘本身容易被氧化，每次试验都要重新配置。光化学衍生是将反应线圈绕在紫外灯外，当流动相进入反应圈时，[/font]B[sub]1[/sub][font=宋体]、[/font]G[sub]1[/sub][font=宋体]被衍生成荧光较强的物质，类似与三氟乙酸的反应，但同样需要单独购买光化学衍生设备。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）测定食品中呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇[/font] DON[font=宋体]）的技术要点：[/font][font=宋体]a.[/font][font=宋体]前处理过程：呕吐毒素极性较强，易溶于水等极性溶剂，因此[/font]GB5009.111-2016 [font=宋体]《食品安全国家标准[/font] [font=宋体]食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定》使用的提取试剂是水，不用甲醇或乙腈的原因是该标准[/font]DON[font=宋体]是使用紫外检测器在[/font]218nm[font=宋体]处测定，加入有机试剂的话会将样品中如色素等大量杂质提取出，干扰目标物检测。前处理过程也是用免疫亲和柱法，注意事项与黄曲霉毒素类似。[/font][font=宋体]b.[/font][font=宋体]上机检测过程：由于[/font]DON[font=宋体]紫外最大吸收波长在[/font]220nm[font=宋体]附近（[/font]GB 5009.111-2016[font=宋体]标准使用[/font]218nm[font=宋体]），流动相甲醇和水比例对[/font]DON[font=宋体]与样品杂质的分离度影响很大，[/font]218nm[font=宋体]波长处色谱图上会有一个很大的杂质峰（可能是与[/font]DON[font=宋体]结构性质相近的能被免疫亲和柱保留洗脱的物质）。标准上给出的甲醇：水（[/font][i]V/V[/i][font=宋体]）[/font]=20/80[font=宋体]比例是针对标准推荐的色谱柱，实验时要根据自己使用的色谱柱对流动相比例进行调节，否则很可能造成杂质峰与[/font]DON[font=宋体]分离度不好，影响定性定量。有研究表明，选择[/font]DON[font=宋体]次吸收波长（[/font]240nm[font=宋体]），虽然[/font]DON[font=宋体]响应值有所下降（能满足标准检出限要求），但该干扰杂质下降更多，也可以考虑作为备选波长。紫外相对荧光更容易受到杂质干扰，可能出现“假阳性”判定，有条件的话选用二极管阵列检测器（[/font]DAD[font=宋体]）可以进行全波长扫描，得到三维谱图，有助于排除“假阳性”样品。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进：[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font][align=left][color=red] [/color][/align]

现将本人呕心沥血收集的关于检测抗生素之国内外资料奉献（检测抗生素之国内外资料之一：微生物法、之二：色谱法、之三：免疫法、之四：其他方法）[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=49149]现将本人呕心沥血收集的关于微生物法检测抗生素之国内外资料奉献[/url]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]追加样品后启动批处理，显示无法读取程序标准系列，这是什么意思，怎么解决？

[font=&]免疫亲和柱其原理是将特异性抗体结合的凝胶填充到柱体中，选择性吸附样液中的待检物，从而对毒素样品起到非常针对性的纯化作用，过柱净化后的样品液可直接用于色谱或ELISA等方法对待检物的含量进行检测。[/font]免疫亲和柱的有效期是针对其中的特异性抗体设置的吗？超过有效期后免疫亲和柱还能使用吗？[font=&][size=16px][/size][/font]

[color=blue][size=4][font=楷体_GB2312][B]酶联免疫法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）是目前较为常用的除色谱/质谱法以外的农药残留检测方法之一。如果大家使用过该方法做农药残留检测[color=#DC143C][i]或者有相关酶联免疫法测定农药残留的资料[/i][/color]，请在此跟帖，[U]如实验的具体步骤、农药的种类、还有自己对实验的看法[/U]等。另外，请各位使用过该方法的版友能不吝赐教，将自己的实验方法与大家共享一下！谢谢![/B][/font][/size][/color][color=#DC143C][U][I]下面是几篇中文的相关摘要。[/I][/U][/color]

DIN EN ISO 14501-2008 乳和乳粉 黄曲霉素M1含量的测量 免疫亲和层析净化高效液相色谱法

问题: 老师们，有谁知道如何测定免疫亲和柱的柱效？ 是测回收率吗回复1: spe小柱是净化的，不需要测柱效，没什么意义回复2: 免疫亲和柱用测回复3: 标准里面有写， 免疫亲和柱第一次买回来测一下柱容量和柱回收率，比如黄曲霉5009.22-2016里面有写的很清楚。

医院质谱能和生化免疫分析仪器组合成流水线自动化吗？

普京：俄罗斯将于今年夏季结束之前形成群体免疫。专家：需七成接种才能实现群体免疫

[font=宋体][font=宋体]人体免疫系统是一个复杂而精细的网络，它时刻保护着我们免受外界病原体的侵害。其中，免疫自稳、免疫监视和免疫防御是免疫系统的三大核心功能，它们各自承担着不同的任务，共同维护着我们的健康。免疫自稳负责调节和维持免疫系统的内部稳定，防止免疫反应过度或不足；免疫监视则时刻监控体内细胞的异常变化，及时识别和清除可能的癌变或感染细胞；而免疫防御则是免疫系统对外界病原体的直接抵抗，通过产生特异性抗体和细胞免疫反应来清除入侵者。本文将深入探讨这三大功能的区别与联系，帮助读者更好地理解人体免疫系统的运作机制。[/font] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]一、免疫监视[/font][font=宋体]——区别敌我[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫监视是身体长期进化过程中形成的自然防御功能。这个功能似乎打开了第三个视角来监控身体的每一个动作。没有侵略者，没有异己[/font][font=Calibri]......[/font][font=宋体]免疫监测最重要的是区分敌人和我。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]监视功能有两个方面[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①自我识别[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]自我识别是指免疫系统如何识别身体内的正常细胞和组织，以避免对它们产生攻击。这是非常重要的，因为免疫系统必须能够区分自身组织和外来物质之间的差异。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②异常细胞监测[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]异常细胞监测是免疫系统如何检测和识别异常细胞的过程。这些异常细胞包括被感染的细胞、突变细胞、癌细胞等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]二、免疫防御[/font][font=宋体]——重要保障[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫防御是指通过识别和消除外来病原体来保护身体免受疾病入侵的过程。免疫防御由免疫系统中的各种细胞免疫和分子共同发挥作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]如何发挥免疫防御的作用？[/font][font=宋体]当免疫系统检测到外来病原体时，他将启动免疫防御机制，将免疫细胞引导到感染位置，并以各种方式消除病原体。免疫细胞包括不同类型的白细胞和淋巴细胞，其功能和特征不同。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫防御除了直接消除病原体外，还有另一个重要的作用，即刺激免疫细胞产生抗体，从而促进身体产生免疫记忆。当身体再次遇到同一病原体时，免疫系统可以快速、更有效地抵抗它，然后再次预防疾病。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]但免疫防御可不是绝对的！有时病菌会以各种方式避免免疫系统的攻击，使感染难以有效控制。例如，一些病菌可以通过改变其表面抗原的结构来防止被免疫细胞识别，然后避免攻击。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]此外，一些病原体还能通过影响免疫系统的功能来抑制免疫反应，从而获得更长的生存时间。因此，有必要不断研究和实践免疫系统的机制，以及病原体的避免策略，然后开发更有效的辅助治疗策略。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]三、免疫自稳[/font][font=宋体]——维持平衡[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫自稳是指机体免疫系统在正常状态下维持一种平衡状态，以保持免疫系统的正常功能和机体的健康。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫自稳是一个复杂而精确的调节过程，涉及多种细胞类型、分子信号和调节机制。它的目的是确保免疫系统对病原体和异常细胞的敏感性和应答能力，同时避免对自身组织的过度反应和自身免疫疾病的发生。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫自稳是怎么发挥作用的？[/font][font=宋体]免疫自稳的关键是保持免疫系统的平衡。免疫系统需要在处理外部侵入的病原体时快速启动免疫反应，但也需要在免疫反应结束后及时关闭反应，以免损害自己的组织。通过调节免疫细胞之间的相互影响，保持免疫系统的平衡，避免过度激活或自身免疫疾病的发生。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]总之，免疫细胞的三大作用机制即：免疫监视[/font][font=宋体]——区别敌我、免疫防御——重要保障、免疫自稳——维持平衡[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫细胞在人体内起着至关重要的作用，它们是维护人体健康不可或缺的卫士。然而，随着年龄的增长，人体的免疫细胞数量会逐渐减少，这也是人体衰老的一个重要标志。为了保持免疫力的强盛，我们需要及时补充免疫细胞，让它们继续发挥守护身体的作用。只有这样，我们才能保持健康的体魄，远离疾病的侵扰。因此，重视免疫细胞的补充与养护，对于维持人体免疫力的稳定和健康至关重要。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供多重染色服务，包含[url=https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services][b]免疫荧光和免疫组化服务[/b][/url]，更多详情可以查看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

哪位大侠知道如下几个标准的详细内容？SN/T 3868-2014 出口植物油中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测-免疫亲和柱净化高效液相色谱法（2014-8-1实施）NY/T 2549-2014 饲料中黄曲霉毒素B1的测定免疫亲和荧光光度法（2014-6-1实施）LS/T 6108-2014 粮油检验 谷物中黄曲霉毒素B1的快速测定 免疫层析法（2014-6-1实施）

本产品的测定的基础是抗原抗体反应，黄曲霉毒素单克隆抗体连接在柱内凝胶上，样品中的黄曲霉毒素经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢的通过黄曲霉毒素免疫亲和层析柱，在免疫亲和柱内，毒素与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素，然后注入到分析仪器中用于检测。操作程序：符合GB/T 18979-2003 国标方法----将免疫亲和柱连接于泵流操作架的10mL 注射器下。准确移取10mL 样品提取液注入注射器；1.富集:将空气压力泵与注射器连接，调节压力使提取液以约2-3mL/min(1 滴/3 秒)流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2-3mL 空气通过柱体；2.洗涤: 用10mL PH7.0 PBS 清洗，再以10mL 水淋洗柱子2 次，弃去全部流出液，并使2-3mL 空气通过柱子3.洗脱可采取以下方式之一进行: 优选2 A.洗脱1: 准确加入1.0mL 色谱级甲醇洗脱,孵育30秒以上(孵育即甲醇在柱子中浸泡),然后以流速为1-2mL/min 过柱，收集全部洗脱液供检测用。 B.洗脱2: 为保证洗脱充分,建议以1.5mL 色谱甲醇分两步进行洗脱，流速为1-2mL/min(1 滴/秒,重力即可) 。首先，加入0.5ml 甲醇洗脱，重力过柱，当溶剂通过柱子后，等待30 秒后再加入1ml 甲醇进行洗脱，过柱前孵育30 秒以上(孵育即甲醇在柱子中浸泡)。收集全部甲醇洗脱液供检测用。注：1.如样品处理后仍然很粘稠，请加大离心力及离心时间，或选择减少加入亲和柱中的样品量，避免出现亲和柱堵塞。2.如样品本底复杂，洗涤步骤可全部采用PBST 清洗。3.亲和柱可短期内于常温保存，长期保存建议2-8℃储存(5-6℃最佳)，不可冻存;4.使用前，免疫亲和层析柱需回至室温（22-25℃）。

大气采样时需要标体进行计算，可以直接读取仪器上的标体吗，还是只能读取累计体积，然后手工测量温度和大气压进行计算？手工计算的话小时值的大气压和温度应该如何测量，目前有仪器能连续测量一小时然后计算出平均温度和大气压吗？日均值的话又如何进行手工测量？如果温度和大气压要进行手工测量的话，无组织和环境空气是每个点位都要进行单独测量吗，还是只需要测量一个点位就可以了？

化学发光放大技术同样利用抗原一抗体反应原理,将酶或其他非放射性标记物标记于抗原或抗体,然后与已知抗原或抗体反应,标记的酶使反应底物进行发光,经光电倍增管测量后可得到被测样本的每秒钟发光计数CPS,再根据内置的标准曲线将CPS转换为样本的浓度值"由于这项技术的应用,使抗原一抗体的反应时间缩短,特异性程度和灵敏度得到提高,同时辅以单克隆技术的应用,使整个反应的全自动化实现成为可能,并一改过去依赖于手工加样,再交由仪器测量的半自动化技术的局面,也是近十年来免疫检验技术的一个飞跃。 化学发光免疫分析系统由以下子系统构成:反应杯传送系统,测试包被珠装载系统,样本装载系统,条码读取系统,试剂装载系统,加样系统,温育系统,离心清洗系统,发光计数测量系统,计算机控制系统组成。1.微粒子捕捉酶免疫分析技术(MEIA) 下面以双抗体夹心法为例介绍微粒子捕捉酶免疫分析技术:已包被了抗体的塑料微珠试剂中,加入待测标本后,经温育,再加入碱性磷酸酶标记的抗体!形成抗体一抗原一酶标记抗体复合物"然后将其转移到玻璃纤维柱上,用缓冲液洗涤,没有结合的抗原!酶标抗体被洗掉,结合抗原抗体的塑料微珠则被保留在纤维柱滤膜的上方"这时再加入底物,4一甲基伞型酣磷酸盐，酶标抗体上的碱性磷酸酶将4一甲基型酣磷酸盐分解,脱磷酸后形成甲基伞型酣,在365nm激发光的照射下,发出448nm的荧光,经过荧光读数仪的记录、放大,计算出所测物质的含量"。2.荧光偏振免疫分析技术(FPIA) 这是一种均相荧光免疫分析法,主要用于测定小分子量物质,如药物浓度测定"原理是:标记在小分子抗原上的荧光素经485nm的激发偏振光照射后,吸收光能,越入激发状态,激发状态的荧光素不稳定,很快以发出光子的形式释放能量而还原"发射出的光子经过偏振仪形成525～55Onm的偏振光,这一偏振光的强度与荧光素受激发时分子转动的速度呈反比,游离的荧光素标记抗原,分子小,转动速度快,激发后发射的光子散向四面八方,因此通向偏振仪的光信号很弱,而与抗体大分子结合的荧光素标记抗原,因分子大,分子的转动慢,激发后产生的荧光比较集中,因此偏振光信号比未结合时强得多"，在测定过程中待测抗原小分子!荧光标记抗原小分子和特异性抗体大分子同时加入到一反应杯中,经过温育,待测抗原和荧光标记抗原竞争性地与抗体结合,待测抗原越少,与抗体竞争结合的量越少,而荧光标记抗原与抗体结合量就越多,当激发光照射时,荧光偏振的程度与荧光标记物分子转动的速度成反比,而荧光标记的小分子抗原与大分子抗体结合后,其分子的转动速度减慢,因此荧光偏振信号强"结果是待测抗原的浓度低,可以通过计算获得其含量。3.利用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合此方法以叮咤酶为发光的标记物,固相载体为极细小的磁性颗粒"其测定原理与放射免疫和酶联免疫中的双抗体夹心法和竞争结合法相似。4.采用酶联免疫技术!生物素亲和素技术和增强化学发光技术此方法是用辣根过氧化物酶(日RP)标记抗原或抗体!以子弹头型塑料小孔管为固相载体,鲁米诺为化学发光剂,并加入化学发光增强剂,可使化学发光强度增强,时间延长而且稳定。 在链霉亲和素包被的子弹头型塑料小孔管中,加入生物素标记的特异性抗体和待测标本,经过37e温育,链霉亲和素与生物素结合,特异性抗体与标本中的抗原结合,形成链霉亲和素一生物素一抗体一抗原复合物,经过洗涤,将多余的标本和生物素标记抗体除去，加入辣根过氧化物酶标记抗体,经37e温育,形成链霉亲和素一生物素一抗体一抗原一酶标抗体复合物,并固定在小孔管壁上，加入氧化剂日202,增强化学发光剂和鲁米诺,这时结合在固相载体上的辣根过氧化物酶在强氧化剂的作用下将增强化学发光剂亚铁原吟琳激活,接着它催化并激活鲁米诺发光,这种化学发光强渡比单独鲁米诺发光强,持续时间长,而且稳定,易于测定。鲁米诺发光强度经光量子记录系统记录,经计算从标准曲线上得出待测抗原含量。

现在用免疫亲和小柱柱后衍生法测定板栗中的黄曲霉毒素，以前是G2、G1、B2、B1效果都挺不错，不过最近发现板栗在G2的时间一直都有峰，一开始怀疑是污染了，我就从头做到尾的做了试剂的空白，并且做了一个花生油的空白样品，结果发现两者都是阴性，基本上应该不是前处理过程的污染，同时还有个奇怪的现象是，用板栗做加标回收实验，加标中G2竟然每次都比样品要低，其余三种加标正常.......，不知道是什么原因，请各位高手指点一二....,是不是板栗的基质问题，但前段时间做板栗也没有出现这种现象，我对黄曲霉G2的性质也不太了解，是不是又什么物质与G2的荧光有相似，但G2一起时，又能相互抵消呢，还是本来就是最近的板栗原料就有问题啊.....请各位不吝赐教·····谢谢........